Name: orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach
Uploaded: 2019-05-07T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach at JoVE.com

עבודה זו ממומנת על ידי מתנה נדיבה מאחוזת בומבק.

לואיס (RT11) והעכברושים הכהים (RT1Aa) נרכשו מיצרנים מסחריים (ראו את שולחן החומרים). אלה מלאה MHC הזנים לא תואמים משמשים לעתים קרובות כדי ללמוד דחייה הכליות הכליה חריפה. כל החיות היו שוכנו ומתוחזקים על פי הנחיות המכון הלאומי לבריאות (NIH) במתקן מסוים האנטי-פתוגן באוניברסיטת ג'ונ?...

<ol>
	<li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actively+acquired+tolerance+of+foreign+cells.">Actively acquired tolerance of foreign cells.</a> Nature. 172 (4379), 603-606 (1953).</li><li>Murray, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+transplantation+(skin,+kidney,+heart)+and+the+plastic+surgeon.">Organ transplantation (skin, kidney, heart) and the plastic surgeon.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 47 (5), 425-431 (1971).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (6), e238 (2007).</li><li>Ruzza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+rats:+improved+anesthetic+and+surgical+technique.">Heterotopic heart transplantation in rats: improved anesthetic and surgical technique.</a> Transplant Proceedings. 42 (9), 3828-3832 (2010).</li><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e4143 (2012).</li><li>Lang, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoprivileged+status+of+the+liver+is+controlled+by+Toll-like+receptor+3+signaling.">Immunoprivileged status of the liver is controlled by Toll-like receptor 3 signaling.</a> Journal of Clinical Investigation. 116 (9), 2456-2463 (2006).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+of+host+progenitor+cells+in+rat+liver+transplants.">Recruitment of host progenitor cells in rat liver transplants.</a> Hepatology. 49 (2), 587-597 (2009).</li><li>Orlando, G., Soker, S., Wood, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Operational+tolerance+after+liver+transplantation.">Operational tolerance after liver transplantation.</a> Journal of Hepatolgy. 50 (6), 1247-1257 (2009).</li><li>Lodhi, S. A., Lamb, K. E., Meier-Kriesche, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+organ+allograft+survival+improvement+in+the+United+States:+the+long-term+does+not+mirror+the+dramatic+short-term+success.">Solid organ allograft survival improvement in the United States: the long-term does not mirror the dramatic short-term success.</a> American Journal of Transplantation. 11 (6), 1226-1235 (2011).</li><li>Engels, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrum+of+cancer+risk+among+US+solid+organ+transplant+recipients.">Spectrum of cancer risk among US solid organ transplant recipients.</a> Journal of the American Medical Association. 306 (17), 1891-1901 (2011).</li><li>Kasiske, B. L., Snyder, J. J., Gilbertson, D., Matas, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+mellitus+after+kidney+transplantation+in+the+United+States.">Diabetes mellitus after kidney transplantation in the United States.</a> American Journal of Transplantation. 3 (2), 178-185 (2003).</li><li>de Mattos, A. M., Olyaei, A. J., Bennett, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephrotoxicity+of+immunosuppressive+drugs:+long-term+consequences+and+challenges+for+the+future.">Nephrotoxicity of immunosuppressive drugs: long-term consequences and challenges for the future.</a> American Journal of Kidney Diseases. 35 (2), 333-346 (2000).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell-Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+A+Study+in+Rats.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell-Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: A Study in Rats.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2055-2065 (2016).</li><li>Shrestha, B., Haylor, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+rat+models+of+chronic+allograft+nephropathy:+a+review.">Experimental rat models of chronic allograft nephropathy: a review.</a> International Journal of Nephrology and Renovascular Disease. 7, 315-322 (2014).</li><li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+transplantation+of+kidney+allografts+in+sensitized+rats+after+syngeneic+hematopoietic+stem+cell+transplantation+and+fludarabine.">Successful transplantation of kidney allografts in sensitized rats after syngeneic hematopoietic stem cell transplantation and fludarabine.</a> American Journal of Transplantation. 14 (10), 2375-2383 (2014).</li><li>Grau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Complex-Type+Deposits+in+the+Fischer-344+to+Lewis+Rat+Model+of+Renal+Transplantation+and+a+Subset+of+Human+Transplant+Glomerulopathy.">Immune Complex-Type Deposits in the Fischer-344 to Lewis Rat Model of Renal Transplantation and a Subset of Human Transplant Glomerulopathy.</a> Transplantation. 100 (5), 1004-1014 (2016).</li><li>Vogelbacher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bortezomib+and+sirolimus+inhibit+the+chronic+active+antibody-mediated+rejection+in+experimental+renal+transplantation+in+the+rat.">Bortezomib and sirolimus inhibit the chronic active antibody-mediated rejection in experimental renal transplantation in the rat.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 25 (11), 3764-3773 (2010).</li><li>Fisher, B., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvascular+surgical+techniques+in+research,+with+special+reference+to+renal+transplantation+in+the+rat.">Microvascular surgical techniques in research, with special reference to renal transplantation in the rat.</a> Surgery. 58 (5), 904-914 (1965).</li><li>Mahabir, R. N., Guttmann, R. D., Lindquist, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+inbred+rat.+X.+A+model+of+"weak+histoincompatibility"+by+major+locus+matching.">Renal transplantation in the inbred rat. X. A model of "weak histoincompatibility" by major locus matching.</a> Transplantation. 8 (4), 369-378 (1969).</li><li>Wang, J. J., Hockenheimer, S., Bickerstaff, A. A., Hadley, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+transplantation+procedure.">Murine renal transplantation procedure.</a> Journal of Visualized Experiments. (29), e1150 (2009).</li><li>Bickerstaff, A. A., Wang, J. J., Pelletier, R. P., Orosz, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+allografts:+spontaneous+acceptance+is+associated+with+regulated+T+cell-mediated+immunity.">Murine renal allografts: spontaneous acceptance is associated with regulated T cell-mediated immunity.</a> Journal of Immunology. 167 (9), 4821-4827 (2001).</li><li>Silber, S. J., Crudop, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+in+inbred+rats.">Kidney transplantation in inbred rats.</a> American Journal of Surgery. 125 (5), 551-553 (1973).</li><li>D'Silva, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+kidney+transplantation+update+with+special+reference+to+vesical+calculi.">Rat kidney transplantation update with special reference to vesical calculi.</a> Microsurgery. 11 (2), 169-176 (1990).</li><li>Yin, M., Booster, M. H., Bogaard, A. E. J. M., Kootstra, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+technique+to+harvest+two+kidneys+from+one+donor+rat+for+transplantation.">A simple technique to harvest two kidneys from one donor rat for transplantation.</a> Lab Animal. 28 (4), 387-390 (1994).</li><li>Lopez-Neblina, F., Toledo-Pereyra, L. H., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrarapid+orthotopic+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">Ultrarapid orthotopic technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 15 (4), 274-278 (1994).</li><li>Blom, D., Orloff, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+more+versatile+and+reliable+method+for+renal+transplantation+in+the+rat.">A more versatile and reliable method for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 18 (4), 267-269 (1998).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Kline, R., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A., Schwartz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+osmolality-low+pH+flush+solutions+improve+renal+transplant+function+in+rats.">High osmolality-low pH flush solutions improve renal transplant function in rats.</a> Urology Research. 19 (2), 81-86 (1991).</li><li>Fray, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+by+which+renin+secretion+from+perfused+rat+kidneys+is+stimulated+by+isoprenaline+and+inhibited+by+high+perfusion+pressure.">Mechanism by which renin secretion from perfused rat kidneys is stimulated by isoprenaline and inhibited by high perfusion pressure.</a> The Journal of Physiology. 308, 1-13 (1980).</li><li>Fry, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+vascular+endothelial+changes+associated+with+increased+blood+velocity+gradients.">Acute vascular endothelial changes associated with increased blood velocity gradients.</a> Circulation Research. 22 (2), 165-197 (1968).</li><li>Pahlavan, P. S., Smallegange, C., Adams, M. A., Schumacher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+procedures+in+rats:+assessments,+complications,+and+management.">Kidney transplantation procedures in rats: assessments, complications, and management.</a> Microsurgery. 26 (5), 404-411 (2006).</li><li>Savas, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat--a+new+simple,+non-suture+technique.">Renal transplantation in the rat--a new simple, non-suture technique.</a> Urology Research. 13 (2), 91-93 (1985).</li><li>Fabre, J., Lim, S. H., Morris, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat:+details+of+a+technique.">Renal transplantation in the rat: details of a technique.</a> The Austalian and New Zealand Journal of Surgery. 41 (1), 69-75 (1971).</li><li>Cameron, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell+Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+II,+Study+in+Miniature+Swine.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: II, Study in Miniature Swine.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2066-2076 (2016).</li></ol>

בכתב יד זה, אנו מתארים את השיטה כירורגית עבור מט KT בחולדות בפירוט, כולל את כל הציוד הדרוש כדי לבצע את ההליך הזה (איור 5). ב 1965, פישר ולי פרסמה את הדו ח הראשון על KT בחולדות, אשר הפך לתחילתו של שדה חקירה מרגש18. מאז, שינויים רבים הוכנסו כדי לשפר את השגות של המודל הזה. הוא...

מבחינה היסטורית, המחקרים הראשונים של דחיית ההשתלה בוצעו על ידי ברנט ו Medawar באמצעות השתלות עור במכרסמים1. במהרה התברר כי העור יש תכונות אימונולוגיים ברורים, מה שהופך אותו לאיבר חיסוני מאוד כי הוא שונה בדחייה של איברים אחרים מוצק vascularized2. לימודי חולדה של דחייה השתלת איברים מוצק מוגבלים לטיפול ללב, לכבד, ולהשתלת כליה. למרות שכל אחד מאברים אלה מתאים ללימוד דחייה, יש יתרונות וחסרונות לכל אחד מהם. השתלות לב מושתלים לעתים קרובות לתוך הבטן ומנומת אל העורקים והבנה קאווה, עם הלב הטבעי של המטופל במקום3. זה אינו משחזר את התנאים הקליניים, האנטומיים האנושיים והפיזיולוגיים. בנוסף, לבבות רגישים מאוד איסכמיה קר צריך להיות מוכן מחדש בתוך 1 h כדי להיות מסוגל לשחזר את תפקידם4. השתלות כבד נחשבות בדרך כלל להיות בניתוח מאתגר יותר זמן רגיש לבצע. לאחר הסרת הכבד הטבעי, יש להשתיל את כבד התורם ולהתחמש בתוך 30 דקות משום שהנמענים אינם יכולים להימשך זמן רב יותר ללא הכבד הפועל5. עורק הכבד, וריד השער, ובמיוחד השחזור צינור המרה דורש כישורי ניתוח מעודן. מלבד האתגרים כירורגי, הכבד ידוע בעלי מאפיינים tolerogenic ומכרסמים ובני אדם יכולים להיות עמידים מבחינה מבצעית6,7,8. הכליה, בניגוד האיברים הנ ל, יכול להיות מושתלים בצורה אורתודפית, ידוע להיות איבר חיסוני עם עקביות, הדחייה פרקים מנוגדות (אם לא החיסונית), ומאפשר תקופות של איסכמיה קר ממושכת של מספר שעות. זה הופך את כליה העכברוש להשתלות מודל אידיאלי ללמוד דחייה אלושתל וסובלנות.
השתלת כליה (KT) היא הבחירה המועדפת של טיפול בחולים עם מחלת כליות בשלב הסופי. במהלך העשורים האחרונים, תוצאות ההישרדות לטווח קצר לאחר KT השתפרו באופן דרמטי, אבל התוצאות לטווח ארוך הישרדות הם הקפואה9. המדכא הקונבנציונלי משטרי להישאר טיפול סטנדרטי נגד דחייה. עם זאת, השימוש הכרוני בטיפולים אימונומדכאים גורם לתחלואה ותמותה משמעותיים, כגון נפרורעילות, סוכרת, ממאירות משנית10,11,12. ב-לטווח ארוך, נוגדן כרונית, מתווך הסלולר דחייה מאיימים הישרדות השתל, עם אפשרויות טיפוליות מוגבלות זמין.
מטרה עיקרית בהשתלה היא אינדוקציה של סובלנות השתלה כדי לסדר את הצורך בדיכוי חיסוני כרונית. מודל KT החולדה הוא כלי חזק כדי לחקור את תהליך הדחייה החיסונית ולהעריך גישות חדשות החיסונית וסובלנות השתלה. עכברוש משמש גם מודל מתאים כדי ללמוד מתווכת תא ונוגדן בתיווך כרונית,13,14,15,16,17. מודל זה כירורגי הוכיחה להיות אמין, הניתנים לשימוש, וחסכוני בכלי כדי ללמוד היבטים שונים של דחייה השתלת וסובלנות. הוא משמש לעתים קרובות כדי לבדוק את הפרוטוקולים הרומן לגרימת סובלנות לפני התחייבות יקר ומסורבל בעלי חיים גדולים מחקרים. ביצוע KT ב חולדות דורש הכשרה כירורגית נרחבת מומחיות כדי להגיע לשיעורי הישרדות של > 90%. בכתב יד זה ובסרטון ההדרכה הנלווה, אנו מספקים מיתאר צעד-אחר-צעד לנושא אורתוקט KT בחולדה, כפי שבוצעה בהצלחה במשך שנים רבות במוסד שלנו.
לפני הפעלת כל הליך, בחירת התורם והנמען היא קריטית ותלויה באופי הניסוי. באופן אידיאלי, תורמים ומטופלים צריכים לשקול בין 220 ל-260 גר' ולהיות בין הגילאים 8 עד 12 שבועות. בעלי חיים מתחת 220 g כוללים עורקים בקוטר קטן, ורידים וורידים, העושים את ההשקה בתוך המטופל באופן מאתגר במיוחד. איבוד דם קטן יכול לגרום להיפובולמיה. ולגרום למוות בחיות קטנות יותר בעלי חיים כבדים יותר 260 g להציג שומן יותר סביב הכלים שלהם, ואת בידוד כלי ידרוש יותר זמן פעיל ולהגדיל את הזמן הקר איסכמיה.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1012px;" width="1011">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Buprenorphine HCL</td>
			<td style="width:167px;">Reckitt Benckiser Healthcare UK</td>
			<td style="width:167px;">NDC12496-0757-5</td>
			<td style="width:463px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dissecting forceps, curved</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">11cm Flat handle&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Heparin sodium injection USP</td>
			<td style="width:167px;">Sagent Pharmaceuticals&#160;</td>
			<td style="width:167px;">NDC25021-400-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro-forceps, straight, smooth</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA3010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA2010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro vessel clamps</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA40120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 1</td>
			<td style="width:167px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:167px;">RS-5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 2</td>
			<td style="width:167px;">F.S.T.</td>
			<td style="width:167px;">91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 3</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">8.5cm Vannas,curved</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Prograf (Tacrolimus/FK506)</td>
			<td style="width:167px;">Astellas</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rats</td>
			<td style="width:167px;">Charles River &#38; Taconic Biosciences&#160;</td>
			<td style="width:167px;">LEW/Crl &#38; DA-M&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Shaver</td>
			<td style="width:167px;">Wahl</td>
			<td>79600-2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture 4-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">J304H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 4-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">683G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 10-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">2820G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Syringes &#38; Needles</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thread, 8-0</td>
			<td style="width:167px;">Ashaway</td>
			<td style="width:167px;">75290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ureteral cuff</td>
			<td style="width:167px;">Microlumen</td>
			<td style="width:167px;">160-1</td>
			<td>Polymide Tubing, Diameter 0.41 mm&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Venous cuff</td>
			<td style="width:167px;">Intramedic BD</td>
			<td style="width:167px;">7441</td>
			<td>PE-200 Non-radiopaque polyethylene tubing ID: 1.4 mm, OD: 1.9 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach

השתלת כליות מציעה שיעורי הישרדות מוגברת ואיכות חיים משופרת עבור חולים עם מחלת כליות בשלב הסופי, לעומת כל סוג של טיפול החלפת כליות. במהלך העשורים האחרונים, מודל השתלת כליות חולדה שימש לחקר התופעות האימונולוגיים של דחייה וסובלנות. מודל זה הפך להיות כלי הכרחי כדי לבדוק תרופות אימונומודולטוריים החדש משטרי לפני ההליך עם מחקרים יקרים בעלי חיים מראש גדול פרה.
פרוטוקול זה מספק סקירה מפורטת של כיצד לבצע באופן אמין השתלת כליה אורתוגרפית בחולדות. פרוטוקול זה כולל שלושה צעדים מיוחדים המגבירים את ההסתברות להצלחה: הפרזיה של כליה התורם על ידי שטיפה דרך וריד השער ושימוש במערכת חפתים כדי להפעיל את ורידים הכליות והשופכה, ובכך להקטין קר וחמים פעמים של איסכמיה באמצעות טכניקה זו, השגנו שיעורי הישרדות מעבר ל 6 חודשים עם קריאטינין סרום רגיל בבעלי חיים עם השתלת כליה תחבירית או סובלנית. בהתאם למטרה של המחקר, מודל זה יכול להיות שונה על ידי טיפול טרום או פוסט השתלת ללמוד את אקוטי, כרונית, הסלולר, או נוגדנים בתיווך דחייה. זהו מודל בעלי חיים, אמין וחסכוני לחקר היבטים שונים של השתלת כליה.

ביצעת סינגנמית (n = 5) והשתלות כליות אלוגנאית (n = 5). בעלי חיים עם השתלת סינגנאית השיגו הישרדות ארוכת טווח ללא כל טיפול חיסוני מדכא. בעלי חיים שקיבלו השתלת אלוגנמית ללא דיכוי חיסוני דחו את ההשתלה שלהם ונכנעו לכישלון כליות עם הישרדות חציון של 8 ימים (איור 4א). מר...

Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach at JoVE.com

Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

מטרת כתב היד והפרוטוקול היא להסביר ולהדגים בפרוטרוט את ההליך הכירורגי של השתלת כליות אורתוגרפית בחולדות. שיטה זו היא פשוטה כדי להשיג את הפרזיה הנכונה של כליה התורם ולקצר את הזמן הreperfusion באמצעות שימוש בטכניקת ורידי השרוול וההשקה.

אורתובנושא חולדה השתלת כליה: מגישת רומן וכירורגית פשוטה

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

המעבדה שלנו בג'ונס הופקינס ביצעה השתלת כליות וכבד של בעלי חיים קטנים עם ניסיון של למעלה משני עשורים. פרוטוקול ספציפי זה מתאר צעדים קריטיים הנחוצים לביצוע מוצלח של השתלת כליה אורתוטופית בחולדות. כדי להגדיל את ההסתברות ואת הרבייה של הצלחה, הפרוטוקול שלנו כולל שלושה שלבים ייחודיים, זיוף של הכליה התורם דרך וריד הפורטל ושימוש במערכת חפתים כדי anastomose ורידים כליות ושופכים.הדגמת הליך זה תהיה ד"ר לה צ'י, סטודנטית לתואר שני במעבדה שלנו. כדי להתחיל בהליך זה, הרדמה החולדה התורם כמתואר בפרוטוקול הטקסט. מניחים את החולדה בתמונת על-חושית ומשתקים את הגפיים עם סרט מיסוך סטרילי.יש למרוח חומר סיכה לעיניים ולעקר את השדה הכירורגי כמתואר בפרוטוקול הטקסט. לפני החתך הראשון, ודא כי החולדה הוא הרדמה נאותה על ידי בדיקת היעדר רפלקס נסיגה צביטת בוהן. באמצעות מספריים, להתחיל על ידי ביצוע עור קו אמצע אורך גדול חתך שרירים מן הערווה symphysis כדי xiphoid ולהיכנס לחלל צפי.מכסים את המעי עם גזה סטרילית לחה ומזיזים אותו לצד הצדדי הימני של הבטן וחושפים את בית ההיתוך, vena cava והכליה השמאלית. החל מיליליטר אחד של מלוחים שחומם מראש עם מזרק אחד סמ"ק כדי לשמור על המעיים ואיברי הבטן לחים בטמפרטורה נורמלית. החל גזה לחה שנייה כדי לכסות ולגייס את הקיבה טחול גולגולתי על הכליה.לאחר מכן מוסיפים גזה לחה קטנה כדי לכסות את הכליה החשופה. השתמש מטס ניתוח מיקרוכירורגי לבודד ולגייס את עורק הכליה השמאלית ואת וריד מן רקמת החיבור אחד את השני. עכשיו לבודד את וריד הכליה השמאלי על ידי צרוב וריד האונדאל השמאלי ולבודד את עורק הכליה השמאלי על ידי צרוב עורק יותרת הכליה.לאחר מכן, לגייס את האב העורקים ו vena קאווה מעולה ונון לפדיקל הכליה השמאלי על ידי ניתוח רקמת החיבור עם מטס ניתוח. מחלקים ומגייסים את השופך מרמת החיבור באמצעות מטסות ניתוח, ואז משתמשים במספריים זעירים כדי לבצע חתך אלכסוני באורך של כשני סנטימטרים הנמדדים באגן הכליות. הכנס שרוול פוליאמיד באמצע הדרך לתוך השופך ולאבטח את השרוול על ידי הצבת קשר עם 8-0 תפר משי.לגייס את הכליה השמאלית על ידי הפרדתו מן השומן perinephric באמצעות מטסות ניתוח או מספריים מיקרו. השאירו את כמוסת הפתגם של הכליה מחוברת ולהשתמש באתר זה לטיפול בכליה. עכשיו לנהל 200 יחידות של הפרין באמצעות מזרק עם מחט מד 27 דרך וריד הפין.לחץ על אתר ההזרקה עם ספוגית כותנה לפחות דקה אחת כדי למנוע דימום. זהה את וריד הפורטל ואת וריד הווריד הנחות. חשוף את הוונה קאווה הנחותה.היכונו לשטוף את הכליה על ידי הזרקת 50 מיליליטר של מלוחים קרים מעורבב עם 500 יחידות של הפרין לתוך וריד הפורטל באמצעות מחט 16 מד. לפני שטיפה, לחתוך את וינה קאווה נחות ברמה infrahepatic לחתוך את caudal וריד הפורטל באתר החדרת מחט כדי לאפשר לדם לצאת מהמחזור. התחל לשטוף את הכליה על ידי חליטה הדרגתית של תמיסת מלח.שימו לב לשינוי צבע של הכליה מ אדום כהה לצבע אפור או חיוור אחיד. לאחר שטיפה, ליגטה עורק הכליה וורידים proximal כדי aorta ו vena קאווה. מניחים את הכליה הסמיקה בצלחת פטרי המכילה מלוחים קרים על קרח לפני הוצאת גופת התורם מהשדה הכירורגי.לאחר הכליה היא מלוחים קר, לתקן ולשתק את הידית של שרוול וריד בעדינות למשוך את וריד הכליה דרך השרוול. ואז לתקן את וריד הכליה על השרוול על ידי הצבת שלושה קשרים באמצעות 8-0 תפר משי. כדי להתחיל את הליך הנמען, חזור על השלבים מהליך התורם עד לניהול הפרין.לאחר מכן מניחים שני מלחצי מיקרובוסל אטראומטיים על עורק הכליה השמאלי וורידים קרובים לאורטה ולוונה קאווה. Ligate וריד הכליה המטופל proximal להיכנס של הכליה. לשטוף את וריד הכליה עם מלוחים heparinized כדי להסיר את כל הדם הנותר מחוץ לכלי.החלק את וריד הכליה המקוטף מעל וריד הכליה האזיקים שהיה ממוקם בעבר בכליה התורמת. ואז לאבטח את וריד עם 8-0 תפר משי. שמור על אותו כיוון מיקום בעת אבטחת וריד הכליה מעל השרוול.Ligate עורק הכליה proximal להיכנס של הכליה המטופל. לשטוף אותו עם מלוחים heparinized כדי להסיר כל דם עודף בכלי. עכשיו ליגטה השופך ברמה של הקוטב התחתון של הכליה השמאלית.לגייס את הכליה מן השומן perinephric ולהסיר את הכליה המקומית. בצע anastomosis מקצה לקצה של עורק הכליה עם 8-10 תפרים מופרעים באמצעות תפר ניילון 10-0. לתמרן את העורק באמצעות שכבת הרפתקנות.הסר את מהדקי כלי כדי ליזום מחדש את התדלוק מחדש של הכליה. התחל על ידי הסרת המהדק על וריד ואחריו מהדק על העורק. השתמש ספוגית כותנה סטרילית כדי להוסיף לחץ אור לכל האזורים נוטף סביב אזור anastomosis.כמה דקות צריך להיות מספיק כדי להשיג אנסטומוזיס פטנט. בקצרה לבחון את הכליה כדי להעריך עבור תקציר נאותה. מיד לאחר חליטה מחדש, הכליה צריכה לשנות צבע בהדרגה להחזיר את הצבע האדום הכהה הטבעי שלה לאחר כמה דקות.פריסטואלזה גלויה של השופך וייצור שתן באתר נצפו לפעמים. סיים על-ידי הכנסת הקצה החשוף של שרוול השופכה לשופך הנמען ואבטח את השופך הנמען עם 8-0 עניבת משי. על מנת לשמור על השופכים התורם והמקבל בעמדה, לקשור את הקצוות של כל צד השופכה זה לזה.באופן אופציונלי, nephrectomize הכליה הימנית על ידי קשירת פדיקל הכליה עם תפר משי 3-0. מוציאים את כל הגזות חלל הבטן ומחזירים את כל האיברים למיקום הטבעי שלהם. ואז להשפריץ מיליליטר אחד של מלוחים מעל המעיים כדי לשמור אותם לחים.סגור את הבטן באמצעות תפר נספג 4-0 על שריר rectus ותפר משי 4-0 כדי לסגור את שכבת העור בצורה מופרעת. מניחים את החיה בכלוב נקי עם גישה למים ומזון אד ליביום ולאפשר התאוששות על כרית חימום 37 מעלות צלזיוס. שימו לב להחלמה במשך 1-2 שעות לפני החזרת החיה חזרה למתקן החיות.בעלי חיים עם השתלת כליה סינגנית השיגו הישרדות ארוכת טווח ללא כל טיפול בדיכוי המערכת החיסון. לעומת זאת, בעלי חיים שקיבלו השתלת כליה אלוגנית ללא דיכוי חיסוני דחו את השתל שלהם ונכנעו לאי ספיקת כליות עם הישרדות חציונית של שמונה ימים. קריאטינין סרום ממוצע גדל בצניעות בקבוצה הסינגנית בעוד הוא גדל פי 14 בקבוצה allogeneic.עם ההקצבה, התצוגה המקרוסקופית של אלוגרף הכליות הסינגני לא הראה שום חריגות. צבע הכליות והמבנים הפנימיים נותרו שלמים. לעומת זאת, אלוגרפיות כליות של בעלי חיים שנדחו הציגו כתמי דימום אדומים עם הרס המבנים הפנימיים.כתמי המטוקסילין ואאוסין של שתלים סינגניים הראו לולאות נימי גלומרולריות דקות עם מספרים נורמליים של תאים אנדותל ו mesangial. אלוגרפים שנדחו הציגו מבנים גלומרולריים הרוסים עם סימנים של דלקת ו tubulitis. כתם חיובי CD8 בוצע כדי לאשר דחייה מתווכת T-cell.בעוד אלוגרפים סינגניים הראו מעט מאוד CD8 חיובי T-תאים, allographs נדחה הראה מספר גבוה משמעותית של CD8 תאים חיוביים סביב glomeruli ו tubuli המאשר דחייה מתווכים T-cell. מודל זה מספק תובנה משמעותית על התופעות האימונולוגיות של דחייה, סובלנות ואינטראקציות בין תורמים למארחת, וסולל את הדרך לפיתוח התערבויות קליניות טיפוליות בהשתלת איברים מוצקים.

Research

JoVE Journal

Medicine

Orthotopic Aortic Transplantation: A Rat Model to Study the Development of Chronic Vasculopathy

Orthotopic אבי העורקים להשתלות: מודל עכברוש לחקר התפתחות vasculopathy כרונית

Research models of chronic rejection are essential to investigate pathobiological and pathophysiological processes during the development of transplant ...

A Novel Surgical Approach for Intratracheal Administration of Bioactive Agents in a Fetal Mouse Model

גישה ניתוחית חדשנית למנהל Intratracheal של סוכני יו במודל של עכברים עוברי

Prenatal pulmonary delivery of cells, genes or pharmacologic agents could provide the basis for new therapeutic strategies for a variety of genetic and ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

ניתוחים למודל חולדה של השתלה כבדה orthotopic חלקית עם שחזור עורקית כבדיה

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Cardiopulmonary Bypass in a Mouse Model: A Novel Approach

לב-ריאה במודל של עכברים: גישה מוזרה

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

מודל עכברוש של Orthotopic השתלת כבד בטכניקה השקה מגנטיים חדשניים עבור שחזור הנבוב Suprahepatic

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

מודל הפרה-קליני של השתלת לב אורתוטופית

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

סיבוכים מופחתים לאחר חיבור מחדש עורקי במודל חולדה של השתלת כבד אורתוטופית

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

השתלת כליה אורתוטופית במודל פורצין באמצעות 24 שעות שימור איברים וטלמטריה רציפה

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

השתלת כליה בסיוע רובוט

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...