Name: orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach
Uploaded: 2019-05-07T14:00:00
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この作品は、Bombeck ・ファミリー・エステートからの寛大な贈り物によって賄われました。

1. ドナー・プロシージャ
<ol><li>この手順で使用するすべての手術器具を滅菌の手段として調製し、オートクレーブし、感染性合併症を予防するために使い捨て滅菌手袋を使用する。</li>
	<li>イソフルラン吸入によるドナーラットの麻酔 (誘導 3% – 4% および 1% – 2% の維持)手順の残りの部分。鎮痛のために 0.1 mg/kg 体重で皮下のすべてのドナーおよびレシピエント動物に?...

<ol>
	<li>Billingham, R. E., Brent, L., Medawar, P. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Actively+acquired+tolerance+of+foreign+cells.">Actively acquired tolerance of foreign cells.</a> Nature. 172 (4379), 603-606 (1953).</li><li>Murray, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+transplantation+(skin,+kidney,+heart)+and+the+plastic+surgeon.">Organ transplantation (skin, kidney, heart) and the plastic surgeon.</a> Plastic and Reconstructive Surgery. 47 (5), 425-431 (1971).</li><li>Liu, F., Kang, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+mice.">Heterotopic heart transplantation in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (6), e238 (2007).</li><li>Ruzza, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+heart+transplantation+in+rats:+improved+anesthetic+and+surgical+technique.">Heterotopic heart transplantation in rats: improved anesthetic and surgical technique.</a> Transplant Proceedings. 42 (9), 3828-3832 (2010).</li><li>Oldani, G., Lacotte, S., Morel, P., Mentha, G., Toso, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Orthotopic liver transplantation in rats.</a> Journal of Visualized Experiments. (65), e4143 (2012).</li><li>Lang, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunoprivileged+status+of+the+liver+is+controlled+by+Toll-like+receptor+3+signaling.">Immunoprivileged status of the liver is controlled by Toll-like receptor 3 signaling.</a> Journal of Clinical Investigation. 116 (9), 2456-2463 (2006).</li><li>Sun, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recruitment+of+host+progenitor+cells+in+rat+liver+transplants.">Recruitment of host progenitor cells in rat liver transplants.</a> Hepatology. 49 (2), 587-597 (2009).</li><li>Orlando, G., Soker, S., Wood, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Operational+tolerance+after+liver+transplantation.">Operational tolerance after liver transplantation.</a> Journal of Hepatolgy. 50 (6), 1247-1257 (2009).</li><li>Lodhi, S. A., Lamb, K. E., Meier-Kriesche, H. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Solid+organ+allograft+survival+improvement+in+the+United+States:+the+long-term+does+not+mirror+the+dramatic+short-term+success.">Solid organ allograft survival improvement in the United States: the long-term does not mirror the dramatic short-term success.</a> American Journal of Transplantation. 11 (6), 1226-1235 (2011).</li><li>Engels, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spectrum+of+cancer+risk+among+US+solid+organ+transplant+recipients.">Spectrum of cancer risk among US solid organ transplant recipients.</a> Journal of the American Medical Association. 306 (17), 1891-1901 (2011).</li><li>Kasiske, B. L., Snyder, J. J., Gilbertson, D., Matas, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diabetes+mellitus+after+kidney+transplantation+in+the+United+States.">Diabetes mellitus after kidney transplantation in the United States.</a> American Journal of Transplantation. 3 (2), 178-185 (2003).</li><li>de Mattos, A. M., Olyaei, A. J., Bennett, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephrotoxicity+of+immunosuppressive+drugs:+long-term+consequences+and+challenges+for+the+future.">Nephrotoxicity of immunosuppressive drugs: long-term consequences and challenges for the future.</a> American Journal of Kidney Diseases. 35 (2), 333-346 (2000).</li><li>Hu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell-Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+A+Study+in+Rats.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell-Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: A Study in Rats.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2055-2065 (2016).</li><li>Shrestha, B., Haylor, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+rat+models+of+chronic+allograft+nephropathy:+a+review.">Experimental rat models of chronic allograft nephropathy: a review.</a> International Journal of Nephrology and Renovascular Disease. 7, 315-322 (2014).</li><li>Fu, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+transplantation+of+kidney+allografts+in+sensitized+rats+after+syngeneic+hematopoietic+stem+cell+transplantation+and+fludarabine.">Successful transplantation of kidney allografts in sensitized rats after syngeneic hematopoietic stem cell transplantation and fludarabine.</a> American Journal of Transplantation. 14 (10), 2375-2383 (2014).</li><li>Grau, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immune+Complex-Type+Deposits+in+the+Fischer-344+to+Lewis+Rat+Model+of+Renal+Transplantation+and+a+Subset+of+Human+Transplant+Glomerulopathy.">Immune Complex-Type Deposits in the Fischer-344 to Lewis Rat Model of Renal Transplantation and a Subset of Human Transplant Glomerulopathy.</a> Transplantation. 100 (5), 1004-1014 (2016).</li><li>Vogelbacher, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bortezomib+and+sirolimus+inhibit+the+chronic+active+antibody-mediated+rejection+in+experimental+renal+transplantation+in+the+rat.">Bortezomib and sirolimus inhibit the chronic active antibody-mediated rejection in experimental renal transplantation in the rat.</a> Nephrology Dialysis Transplantation. 25 (11), 3764-3773 (2010).</li><li>Fisher, B., Lee, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microvascular+surgical+techniques+in+research,+with+special+reference+to+renal+transplantation+in+the+rat.">Microvascular surgical techniques in research, with special reference to renal transplantation in the rat.</a> Surgery. 58 (5), 904-914 (1965).</li><li>Mahabir, R. N., Guttmann, R. D., Lindquist, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+inbred+rat.+X.+A+model+of+"weak+histoincompatibility"+by+major+locus+matching.">Renal transplantation in the inbred rat. X. A model of "weak histoincompatibility" by major locus matching.</a> Transplantation. 8 (4), 369-378 (1969).</li><li>Wang, J. J., Hockenheimer, S., Bickerstaff, A. A., Hadley, G. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+transplantation+procedure.">Murine renal transplantation procedure.</a> Journal of Visualized Experiments. (29), e1150 (2009).</li><li>Bickerstaff, A. A., Wang, J. J., Pelletier, R. P., Orosz, C. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+renal+allografts:+spontaneous+acceptance+is+associated+with+regulated+T+cell-mediated+immunity.">Murine renal allografts: spontaneous acceptance is associated with regulated T cell-mediated immunity.</a> Journal of Immunology. 167 (9), 4821-4827 (2001).</li><li>Silber, S. J., Crudop, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+in+inbred+rats.">Kidney transplantation in inbred rats.</a> American Journal of Surgery. 125 (5), 551-553 (1973).</li><li>D'Silva, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rat+kidney+transplantation+update+with+special+reference+to+vesical+calculi.">Rat kidney transplantation update with special reference to vesical calculi.</a> Microsurgery. 11 (2), 169-176 (1990).</li><li>Yin, M., Booster, M. H., Bogaard, A. E. J. M., Kootstra, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+technique+to+harvest+two+kidneys+from+one+donor+rat+for+transplantation.">A simple technique to harvest two kidneys from one donor rat for transplantation.</a> Lab Animal. 28 (4), 387-390 (1994).</li><li>Lopez-Neblina, F., Toledo-Pereyra, L. H., Suzuki, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultrarapid+orthotopic+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">Ultrarapid orthotopic technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 15 (4), 274-278 (1994).</li><li>Blom, D., Orloff, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+more+versatile+and+reliable+method+for+renal+transplantation+in+the+rat.">A more versatile and reliable method for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 18 (4), 267-269 (1998).</li><li>Engelbrecht, G., Kahn, D., Duminy, F., Hickman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+rapid+technique+for+renal+transplantation+in+the+rat.">New rapid technique for renal transplantation in the rat.</a> Microsurgery. 13 (6), 340-344 (1992).</li><li>Kline, R., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A., Schwartz, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+osmolality-low+pH+flush+solutions+improve+renal+transplant+function+in+rats.">High osmolality-low pH flush solutions improve renal transplant function in rats.</a> Urology Research. 19 (2), 81-86 (1991).</li><li>Fray, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanism+by+which+renin+secretion+from+perfused+rat+kidneys+is+stimulated+by+isoprenaline+and+inhibited+by+high+perfusion+pressure.">Mechanism by which renin secretion from perfused rat kidneys is stimulated by isoprenaline and inhibited by high perfusion pressure.</a> The Journal of Physiology. 308, 1-13 (1980).</li><li>Fry, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+vascular+endothelial+changes+associated+with+increased+blood+velocity+gradients.">Acute vascular endothelial changes associated with increased blood velocity gradients.</a> Circulation Research. 22 (2), 165-197 (1968).</li><li>Pahlavan, P. S., Smallegange, C., Adams, M. A., Schumacher, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney+transplantation+procedures+in+rats:+assessments,+complications,+and+management.">Kidney transplantation procedures in rats: assessments, complications, and management.</a> Microsurgery. 26 (5), 404-411 (2006).</li><li>Savas, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat--a+new+simple,+non-suture+technique.">Renal transplantation in the rat--a new simple, non-suture technique.</a> Urology Research. 13 (2), 91-93 (1985).</li><li>Fabre, J., Lim, S. H., Morris, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+transplantation+in+the+rat:+details+of+a+technique.">Renal transplantation in the rat: details of a technique.</a> The Austalian and New Zealand Journal of Surgery. 41 (1), 69-75 (1971).</li><li>Cameron, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chimeric+Allografts+Induced+by+Short-Term+Treatment+With+Stem+Cell+Mobilizing+Agents+Result+in+Long-Term+Kidney+Transplant+Survival+Without+Immunosuppression:+II,+Study+in+Miniature+Swine.">Chimeric Allografts Induced by Short-Term Treatment With Stem Cell Mobilizing Agents Result in Long-Term Kidney Transplant Survival Without Immunosuppression: II, Study in Miniature Swine.</a> American Journal of Transplantation. 16 (7), 2066-2076 (2016).</li></ol>

本稿では、この手順を実行するために必要なすべての装置を含め、ラットに orthotopic KT の外科的方法について詳述する (図 5)。1965年、フィッシャーとリーはラットの KT に関する最初の報告書を発表したが、これは刺激的な調査分野18の始まりとなった。それ以来、このモデルの再現性を向上させるために多くの修正が導入されています。それは、虚血?...

歴史的に、最初の移植拒絶研究は、げっ歯類1の皮膚移植を用いてブレントと Medawar によって行われた。皮膚が異なる免疫学的特徴を有していることがすぐに明らかになり、他の血管化固形臓器2からの拒絶反応とは異なる非常に免疫原性の器官となった。固形臓器移植拒絶反応のラット研究は、心臓、肝臓、腎臓移植に習慣的に制限されています。これらの器官のそれぞれは拒絶反応を研究するのに適していますが、それぞれに長所と短所があります。心臓移植はしばしば腹部に移植され、大動脈および下大静脈に anastomosed、レシピエントの生来の心臓は3である。これは、人間の臨床的、解剖学的および生理的状態を再作成しません。さらに、心臓は寒冷性虚血に対して非常に敏感であり、その機能4を回復できるようにするために1時間以内に優先的に reperfused されなければならない。肝臓移植は、一般に、外科的により困難で、時間に敏感であると考えられている。ネイティブ肝臓を除去した後、ドナーの肝臓は、レシピエントが機能している肝臓5を伴わなくては長くは続かないので30分以内に移植され、reperfused する必要がある。肝動脈、門脈、特に胆管再建には洗練された外科的技術が必要である。外科的課題に加えて、肝臓は tolerogenic 特性を有することが知られており、げっ歯類およびヒトは、運用的に寛容な6、7、8になることができる。腎臓は、前述の器官とは異なり、orthotopic の方法で移植することができ、一貫性のある再現性のある拒絶エピソード (免疫抑制でない場合) を有する免疫原性器官であることが知られており、そしていくつかの長期の低温虚血時間を可能にする時間。これは、ラット腎臓移植は、同種移植片拒絶および耐性を研究するための理想的なモデルになります。
腎移植 (KT) は、末期腎疾患患者に対する治療の好ましい選択である。過去数十年の間に、KT の後の短期的な生存率は劇的に改善しましたが、長期生存の結果は停滞しています9.従来の免疫抑制レジメンは、標準的な抗拒絶療法のままである。しかし、免疫抑制療法の慢性的な使用は、腎毒性、糖尿病、二次悪性腫瘍などの重大な罹患率および死亡率を引き起こす10、11、12。長期的には、慢性抗体および細胞媒介性拒絶は移植片の生存を脅かし、限られた治療選択肢が利用可能である。
移植における主要な目標は、慢性免疫抑制の必要性を未然ための移植性耐性の誘導である。ラット KT モデルは免疫学的拒絶過程を調査し、免疫調節および移植の許容のための新しいアプローチを評価するために強い用具である。ラットはまた、急性および慢性の細胞および抗体媒介性拒絶反応13、14、15、16、17を研究するのに適したモデルとして機能する。この外科モデルは同種移植片の拒絶および許容のさまざまな側面を研究する信頼でき、再生可能な、費用効果が高い用具であると証明した。高価で面倒な大型動物研究を行う前に、新しい公差誘導プロトコールをテストするためによく使用されます。ラットで KT を行うには、広範な外科的訓練と > 90% の生存率に達するための専門知識が必要です。本稿と付随する説明ビデオでは、私たちの機関で長年にわたって成功したように、ラットに orthotopic KT の概要を段階的に提供しています。
任意の手順を開始する前に, ドナーとレシピエントの選択が重要であり、実験の性質に依存します.理想的には、ドナーとレシピエントは 220 ~ 260 g の間で体重が 8 ~ 12 週の間でなければならない。220 g の下の動物は、小径の動脈、静脈、および尿管を有し、レシピエントの吻合を特に困難にする。軽度の失血は血液量減少を引き起こし、小動物では死に至ることがある。260 g より重い動物は、血管の周囲により多くの脂肪を表示し、容器の分離はより多くの手術時間を必要とし、冷たい虚血時間を増加させる。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1012px;" width="1011">
	<colgroup>
		<col />
		<col span="2" />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Buprenorphine HCL</td>
			<td style="width:167px;">Reckitt Benckiser Healthcare UK</td>
			<td style="width:167px;">NDC12496-0757-5</td>
			<td style="width:463px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Dissecting forceps, curved</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">11cm Flat handle&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Heparin sodium injection USP</td>
			<td style="width:167px;">Sagent Pharmaceuticals&#160;</td>
			<td style="width:167px;">NDC25021-400-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro-forceps, straight, smooth</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA3010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro needle holder</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA2010</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro vessel clamps</td>
			<td style="width:167px;">Jingzhong, China</td>
			<td style="width:167px;">WA40120</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 1</td>
			<td style="width:167px;">ROBOZ</td>
			<td style="width:167px;">RS-5620</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 2</td>
			<td style="width:167px;">F.S.T.</td>
			<td style="width:167px;">91501-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Micro spring sciccor 3</td>
			<td style="width:167px;">Zhenbang, China</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td style="width:463px;">8.5cm Vannas,curved</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Prograf (Tacrolimus/FK506)</td>
			<td style="width:167px;">Astellas</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Rats</td>
			<td style="width:167px;">Charles River &#38; Taconic Biosciences&#160;</td>
			<td style="width:167px;">LEW/Crl &#38; DA-M&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Shaver</td>
			<td style="width:167px;">Wahl</td>
			<td>79600-2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture 4-0</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">J304H</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 4-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">683G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Suture, 10-0&#160;</td>
			<td style="width:167px;">Ethicon</td>
			<td style="width:167px;">2820G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Syringes &#38; Needles</td>
			<td style="width:167px;">BD</td>
			<td style="width:167px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Thread, 8-0</td>
			<td style="width:167px;">Ashaway</td>
			<td style="width:167px;">75290</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ureteral cuff</td>
			<td style="width:167px;">Microlumen</td>
			<td style="width:167px;">160-1</td>
			<td>Polymide Tubing, Diameter 0.41 mm&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Venous cuff</td>
			<td style="width:167px;">Intramedic BD</td>
			<td style="width:167px;">7441</td>
			<td>PE-200 Non-radiopaque polyethylene tubing ID: 1.4 mm, OD: 1.9 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

orthotopic rat kidney transplantation: a novel and simplified surgical approach

腎臓移植は、あらゆる種類の腎補充療法と比較して、末期腎疾患患者の生存率の向上および生活の質の改善を提供する。過去数十年の間に、ラット腎臓移植モデルは、拒絶および寛容の免疫学的現象を研究するために使用されてきた。このモデルは、高価な前臨床大規模動物研究を進める前に新しい免疫調節医薬品およびレジメンをテストするために欠くことのできないツールとなっている。
このプロトコルは、ラットに orthotopic 腎移植を確実に行う方法の詳細な概要を提供する。このプロトコルには、成功の確率を高める3つの特徴的なステップが含まれています: 門脈へのフラッシングによるドナー腎臓の灌流および腎静脈および尿管を anastomose するためのカフ系の使用によって、それによって寒さと暖かさを減少させる虚血時間。この技術を用いて、同系または寛容な腎移植を有する動物において通常の血清クレアチニンを有する6ヶ月を超える生存率を達成した。研究の目的に応じて、このモデルは、急性、慢性、細胞性、または抗体媒介拒絶反応を研究するために、事前または奏治療によって修飾することができる。それは腎臓の移植の異なった側面を研究するために再生可能な、信頼できる、費用効果が高い動物モデルである。

同系 (n = 5) と同種腎移植 (n = 5) を行った。同系移植片を有する動物は、免疫抑制治療を行わずに長期生存を達成した。免疫抑制なしで同種移植を受けた動物は、その移植片を拒絶し、8日間の中央値生存で腎不全に屈した (図 4a)。平均血清クレアチニンは同系群では控えめに増加したが同種異系群では14倍増加した (0.5 mg/dL 対 7.0 mg/dL, p < 0...

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Orthotopic Rat Kidney Transplantation: A Novel and Simplified Surgical Approach

この原稿とプロトコールの目的は、ラットの orthotopic 腎移植の外科的処置を詳細に説明し、実証することである。この方法は、ドナー腎臓の正しい灌流を達成し、静脈および尿管カフ吻合技術を使用して再灌流時間を短縮するために単純化される。

Orthotopic ラット腎移植: 新規かつ簡便な外科的アプローチ

Kidney transplantation offers increased survival rates and improved quality of life for patients with end-stage renal disease, as compared to any type of ...

ジョンズ・ホプキンスの研究室では、20年以上の経験を持つ小さな動物の腎臓と肝臓移植を行ってきました。この特定のプロトコルは、ラットにおける直交性腎臓移植を正常に行う上で必要な重要なステップを概説する。成功の確率と再現性を高めるために、私たちのプロトコルには、門脈を介したドナー腎臓の灌流と、腎静脈および尿管を吻合するためのカフシステムの使用の3つの特徴的なステップが含まれています。この手順を実証するのが、当研究室の大学院生であるLe Qi博士です。この手順を開始するには、テキストプロトコルに記載されているようにドナーラットを麻酔します。ラットをスピービンの位置に置き、無菌マスキングテープで手足を固定化します。目の潤滑剤を塗布し、テキストプロトコルに記載されているように外科分野を殺菌する。最初の切開の前に、ラットがつま先ピンチ離脱反射の欠如をチェックすることによって適切に麻酔されていることを確認してください。はさみを使用して、シンフィシス恥骨からxiphoidに大きな縦方向の正中線皮膚と筋肉切開を行い、腹腔に入ることから始めます。湿った滅菌ガーゼで腸を覆い、大腸、静脈、および左腎臓を露出する腹部の右側にシフトします。腸と腹部の器官を湿らせ、常温に保つために、1 ccシリンジで予熱した生理食塩水を1ミリリットル塗布する。2番目の湿ったガーゼを適用して、胃と脾臓の頭蓋を腎臓に覆い、動員します。その後、露出した腎臓をカバーするために小さな湿ったガーゼを追加します。微小外科的解剖鉗子を使用して、結合組織および互いから左腎動脈と静脈を分離し、動員する。今、左腺静脈を焼灼することによって左腎静脈を分離し、副腎動脈を焼灼することによって左腎動脈を分離する。その後、大動脈と大静脈を優れた左腎部に動員し、鉗子を解剖して結合組織を解剖する。解剖鉗子を使用して結合組織から尿管を分割し、動員し、マイクロハサミを使用して、腎盂から測定された約2センチメートルの長さで対角線切開を行います。ポリアミドカフを尿管の途中に挿入し、8-0で結び目を配置してカフを固定します。シルク縫合糸。左腎臓を、解剖鉗子またはマイクロハサミを用いて、ペリネフリック脂肪から分離して動員する。腎臓の脂肪カプセルを取り付けたままにし、腎臓を扱うためのその部位を使用する。今陰茎静脈を通して27ゲージ針と注射器を使用してヘパリンの200単位を管理します。綿棒で注射部位に少なくとも1分間圧力をかけ、出血を防ぎます。門脈と下の静脈を識別します。下の大静脈を露出する。16ゲージ針を使用して、500単位のヘパリンを混合した冷たい生理食塩水を50ミリリットルをポータル静脈に注入して腎臓を洗い流す準備をします。フラッシングする前に、下の静脈を赤外線レベルで切断し、血液が循環を終了できるように針の挿入部位でポータルの静脈を切断する。生理液を徐々に注入して腎臓を洗い流し始める。腎臓の色変化を濃い赤から均一な灰色または淡い色に観察する。紅潮後、腎動脈と静脈近位を大動脈と静脈にリゲートします。洗い流された腎臓を氷の上に冷たい生理食肉を含むペトリ皿に入れ、外科分野からドナーの体を取り除きます。腎臓が冷たい生理食音になったら、静脈の袖口のハンドルを固定して固定し、袖口を通して腎臓静脈をそっと引っ張ります。その後、8-0を使用して3つの結び目を配置することによって、カフの上に腎静脈を固定しますシルク縫合糸。レシピエント処置を開始するには、ドナー処置からヘパリン投与までの手順を繰り返す。その後、左腎動脈に2つの外傷性マイクロ容器クランプを置き、静脈は大動脈と大静脈に近い。腎臓の入口に近位のレシピエント腎静脈をリゲートします。腎臓静脈をヘパリン化生理食前で洗い流し、残りのすべての血液を血管から取り除く。既にドナー腎臓に配置されたカフ腎静脈の上に結紮腎静脈をスライドさせます.その後、8-0で静脈を確保シルク縫合糸。袖口の上に腎静脈を固定するとき同じ位置のオリエンテーションを維持する。腎動脈近位をレシピエント腎臓の入口にリゲートする。ヘパリン化した生理満水で洗い流し、血管内の余分な血液を除去します。今度は、左腎臓の下極のレベルで尿管をリゲートします。腹分脂肪から腎臓を動員し、ネイティブ腎臓を除去する。10-0ナイロン縫合糸を使用して、8-10中断縫合糸で腎動脈のエンドツーエンド吻合を行います。この臨時層を用いて動脈を操縦する。容器クランプを取り外して腎臓の再灌流を再開する。まず、静脈のクランプを取り外し、その後に動脈のクランプを取り外します。無菌綿棒を使用して、吻合領域の周りににじみ出る領域に光圧を加えます。特許吻合を達成するには数分で十分である必要があります。腎臓を簡単に観察して、十分な灌流を評価する。再灌流の直後に、腎臓は色を変え、数分後に徐々に自然な濃い赤色を取り戻す必要があります。尿管の目に見える蠕動およびオンサイト尿の産生が観察されることがある。受け手の尿管に尿管の袖口の露出した先端を挿入することによって終わり、8-0で受け取り側の尿管を固定するシルクネクタイ。ドナーとレシピエントの尿管を位置に保つために、各尿管側の端を互いに結び付ける。必要に応じて、腎ペディクルを3-0シルク縫合糸で結ぶことで右腎臓を腎症化させる。腹腔からすべてのガーゼを取り除き、すべての臓器を自然な位置に戻します。その後、それらを湿らせた保つために腸の上に生理食塩水の1ミリリットルを噴出します。直筋に4-0の吸収性縫合糸と4-0シルク縫合糸を使用して腹部を閉じ、中断された方法で皮膚層を閉じます。動物を、アドリビタムの水と食品にアクセスできるクリーンケージに入れ、摂氏37度の加熱パッドで回復を可能にします。動物を動物施設に戻す前に、1〜2時間の回復を観察してください。同種腎移植を有する動物は、免疫抑制治療を受けることなく、長期生存を達成した。逆に、免疫抑制なしに同種の腎臓移植を受けた動物は移植片を拒絶し、8日間の生存期間の中央値で腎不全に屈した。平均血清クレアチニンは同種群で緩やかに増加し、同種群では14倍に増加した。排泄の際、同種腎臓同種の同種の巨視的な見解は異常を示さなかった。腎臓の色と内部構造はそのまま残った。対照的に、拒絶された動物の腎臓同種図は、内部構造の破壊を伴う赤い出血性パッチを提示した。同種移植片のヘマトキシリンおよびエオシン染色は、内皮細胞およびメサンジカル細胞の正常数を有する薄い糸球体毛細血管ループを示した。拒絶された同種図は、炎症および尿細管炎の徴候を伴う破壊された糸球体構造を表示した。CD8陽性染色を行い、T細胞媒介性拒絶反応を確認した。同種同種同種の同種はCD8陽性T細胞を非常に少なく示したが、拒絶された同種は糸球体と管状の前後に有意に多くのCD8陽性細胞を示し、T細胞媒介性拒絶反応を確認した。このモデルは、拒絶反応、寛容、ドナーと宿主の相互作用の免疫学的現象に関する重要な洞察を提供し、固体臓器移植における治療的臨床介入の開発に道を開く。

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Medicine

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肝動脈再建を用いた部分同所性肝移植のラットモデルのための外科的処置

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

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マウス モデルにおける心肺バイパス: 新しいアプローチ

As prolonged cardiopulmonary bypass becomes more essential during cardiac interventions, an increasing clinical demand arises for procedure optimization ...

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同所性同種のモデルラット Suprahepatic 上大静脈再建のため新規磁気吻合法を用いた肝移植

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

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Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

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Orthotopic Kidney Auto-Transplantation in a Porcine Model Using 24 Hours Organ Preservation And Continuous Telemetry

24時間臓器保存と連続テレメトリを用いた豚モデルにおける異形性腎臓自動移植

In the present era of organ transplantation with critical organ shortage, various strategies are employed to expand the pool of available allografts for ...

Robot-Assisted Kidney Transplantation

ロボット支援腎移植

This paper describes robot-assisted kidney transplantation (RAKT) from a living donor. The robot is docked between the parted legs of the patient, placed ...