Name: live imaging and analysis of muscle contractions in drosophila embryo
Uploaded: 2019-07-09T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo at JoVE.com

このプロジェクトは、国立衛生補助金RO1 NS099409、NS075534、CONACYT 2012-037(S)のVPによって一部支援されました。

1. 準備
<ol><li>ホット25G針を使用して、100 mL容量のトライコーナープラスチックビーカーに約50個の穴を作ってフライケージを準備します(材料の表を参照)。</li>
	<li>リンゴジュース寒天(3%寒天と30%リンゴジュース)で60ミリメートルx15ミリメートルペトリ皿を準備します。</li>
	<li>乾燥酵母顆粒と水を混合することにより、新鮮な酵母ペーストを準備します。リンゴ寒天プレートに?...

<ol>
	<li>Pereanu, W., Spindler, S., Im, E., Buu, N., Hartenstein, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+emergence+of+patterned+movement+during+late+embryogenesis+of+Drosophila.">The emergence of patterned movement during late embryogenesis of Drosophila.</a> Developmental Neurobiology. 67, 1669-1685 (2007).</li><li>Suster, M. L., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Embryonic+assembly+of+a+central+pattern+generator+without+sensory+input.">Embryonic assembly of a central pattern generator without sensory input.</a> Nature. 416, 174-178 (2002).</li><li>Crisp, S., Evers, J. F., Fiala, A., Bate, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+development+of+motor+coordination+in+Drosophila+embryos.">The development of motor coordination in Drosophila embryos.</a> Development. 135, 3707-3717 (2008).</li><li>Song, W., Onishi, M., Jan, L. Y., Jan, Y. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+multidendritic+sensory+neurons+are+necessary+for+rhythmic+locomotion+behavior+in+Drosophila+larvae.">Peripheral multidendritic sensory neurons are necessary for rhythmic locomotion behavior in Drosophila larvae.</a> Proceedings of National Academy of Science of the United States of America. 104, 5199-5204 (2007).</li><li>Hughes, C. L., Thomas, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensory+feedback+circuit+coordinates+muscle+activity+in+Drosophila.">A sensory feedback circuit coordinates muscle activity in Drosophila.</a> Molecular and Cellular Neuroscience. 35, 383-396 (2007).</li><li>Gorczyca, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Ppk26,+a+DEG/ENaC+channel+functioning+with+Ppk1+in+a+mutually+dependent+manner+to+guide+locomotion+behavior+in+Drosophila.">Identification of Ppk26, a DEG/ENaC channel functioning with Ppk1 in a mutually dependent manner to guide locomotion behavior in Drosophila.</a> Cell Reports. 9, 1446-1458 (2014).</li><li>Baker, R., Nakamura, N., Chandel, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+O-Mannosyltransferases+affect+sensory+axon+wiring+and+dynamic+chirality+of+body+posture+in+the+Drosophila+embryo.">Protein O-Mannosyltransferases affect sensory axon wiring and dynamic chirality of body posture in the Drosophila embryo.</a> Journal of Neuroscience. 38 (7), 1850-1865 (2018).</li><li>Nakamura, N., Lyalin, D., Panin, V. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+O-mannosylation+in+animal+development+and+physiology:+From+human+Disorders+to+Drosophila+phenotypes.">Protein O-mannosylation in animal development and physiology: From human Disorders to Drosophila phenotypes.</a> Seminars in Cell &amp; Developmental Biology. 21, 622-630 (2010).</li><li>Lyalin, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+twisted+gene+encodes+Drosophila+protein+O-mannosyltransferase+2+and+genetically+interacts+with+the+rotated+abdomen+gene+encoding+Drosophila+protein+O-mannosyltransferase+1.">The twisted gene encodes Drosophila protein O-mannosyltransferase 2 and genetically interacts with the rotated abdomen gene encoding Drosophila protein O-mannosyltransferase 1.</a> Genetics. 172, 343-353 (2006).</li><li>Beltr&#225;n-Valero de Bernabe, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutations+in+the+O-Mannosyltransferase+gene+POMT1+give+rise+to+the+severe+neuronal+migration+disorder+Walker-Warburg+Syndrome.">Mutations in the O-Mannosyltransferase gene POMT1 give rise to the severe neuronal migration disorder Walker-Warburg Syndrome.</a> American Journal of Human Genetics. 71, 1033-1043 (2002).</li><li>Reeuwijk, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=POMT2+mutations+cause+alpha-dystroglycan+hypoglycosylation+and+Walker-Warburg+syndrome.">POMT2 mutations cause alpha-dystroglycan hypoglycosylation and Walker-Warburg syndrome.</a> Journal of Medical Genetics. 42, 907-912 (2005).</li><li>Jaeken, J., Matthijs, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Congenital+disorders+of+glycosylation:+A+rapidly+expanding+disease+family.">Congenital disorders of glycosylation: A rapidly expanding disease family.</a> Annual Reviews of Genomics and Human Genetics. 8, 261-278 (2007).</li><li>Leyten, Q. H., Gabreels, F. J., Renier, W. O., ter Laak, H. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Congenital+muscular+dystrophy:+a+review+of+the+literature.">Congenital muscular dystrophy: a review of the literature.</a> Clinical and Neurological Neurosurgery. 98 (4), 267-280 (1996).</li><li>Roberts, D. B., Hames, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila:+A+Practical+Approach.+2nd+ed.">Drosophila: A Practical Approach. 2nd ed.</a> The Practical Approach Series. , 389 (1998).</li><li>Heckscher, E. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Even-Skipped++interneurons+are+core+components+of+a+sensorimotor+circuit+that+maintains+left-right+symmetric+muscle+contraction+amplitude.">Even-Skipped+ interneurons are core components of a sensorimotor circuit that maintains left-right symmetric muscle contraction amplitude.</a> Neuron. 88, 314-329 (2015).</li><li>Penjweini, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Long-term+monitoring+of+live+cell+proliferation+in+presence+of+PVP-Hypericin:+a+new+strategy+using+ms+pulses+of+LED+and+the+fluorescent+dye+CFSE.">Long-term monitoring of live cell proliferation in presence of PVP-Hypericin: a new strategy using ms pulses of LED and the fluorescent dye CFSE.</a> J. Microscopy. 245, 100-108 (2011).</li></ol>

この方法は、波周期、振幅、パターン、胚の転がりや姿勢に対する波の影響など、発達中の重要な胚の行動を定量的に解析する方法です。これは、胚発生時にこれらおよび他の行動を調節する際の特定の遺伝子の役割を研究するために、異なる変異体の分析に有用でありうる。我々は、筋肉特異的GFPマーカー強度の変化を使用して、胚における筋肉収縮振幅、周波数および収縮波伝播の方向?...

蠕動筋収縮は、人間1、2、3の歩行および水泳に似たリズミカルな運動行動である。ショウジョウバエ後期胚に見られる胚筋収縮は、そのような行動の一例を表す。ショウジョウバエは、ショウジョウバエの胚発生が特徴的で、比較的短く、監視しやすいため、様々な発達過程を研究する優れたモデル生物です。私たちの方法の全体的な目標は、胚筋の収縮と弛緩の波のようなパターンを慎重に記録し、分析することです。私たちは、筋肉の収縮の詳細な視覚化、記録と分析を提供するシンプルで非侵襲的なアプローチを使用しました。この方法は、孵化直前の後期胚に見られる胚転がりなど、生体内の他のプロセスを研究するためにも使用できる可能性がある。以前の研究では、胚性筋収縮は主に頻度と方向1、2の観点から分析された。前方向または後方向に体軸に沿って進行する収縮の相対的な程度を推定するために、我々は筋肉に特にGFPを発現する胚を使用した。この分析は、筋肉の収縮を分析し、筋肉収縮の一連の蠕タルな波の間に胚の体の姿勢がどのように維持されるかを明らかにするより定量的な方法を提供します。
蠕動筋収縮は、中枢パターン発生器(CPG)回路および末梢神経系(PNS)、中枢神経系(CNS)、および筋肉4、5のニューロン間の通信によって制御される。正常な蠕動性筋収縮を生じさせることができないと、孵化2および異常な幼虫移動6の障害などの欠陥を引き起こし、神経学的異常を示す可能性がある。筋肉収縮の周座波のライブイメージングと収縮型の詳細な分析は、移動に関与する筋肉や神経回路に影響を与える遺伝的欠陥に関連する病原性メカニズムを明らかにするのに役立ちます。我々は最近、そのアプローチを用い、pロテインO-mアノシルtランスフェラーゼ(POMT)変異体7の体姿勢ねじり表現型をもたらすメカニズムを調査した。
タンパク質Oマンノシル化(POM)は、分泌経路タンパク質のセリンまたはスレオニン残基にマンノース糖を添加する特別なタイプの翻訳後修飾である8,9である。POMの遺伝的欠陥は、ヒト10、11、12における先天性筋ジストロフィー(CMD)を引き起こす。ショウジョウバエをモデルシステムとして用いて、これらの疾患の原因メカニズムを調べました。ショウジョウバエタンパク質O-mannosyltransferase遺伝子POMT1およびPOMT2(別名、回転腹部(rt)およびねじれ(tw)の変異を有する胚は、 体のセグメントの変位(「回転」)は、異常な体の姿勢7をもたらす。興味深いことに、この欠陥は、蠕因性筋収縮が顕著になると発達段階と一致した7.
筋肉と表皮が既に形成され、協調筋収縮の蠕動波が始まったときにPOM変異胚の異常な体姿勢が生じるので、異常な体の姿勢は異常な筋肉の結果である可能性があると仮定した。筋肉や表皮の形態の欠陥よりもむしろ収縮7.CMDは、異常な筋肉収縮および姿勢欠陥13に関連することができ、したがって、ショウジョウバエPOMT変異体における姿勢表現型の分析は、筋ジストロフィーに関連する病理学的メカニズムを解明しうる.ショウジョウバエPOMT変異体の体姿勢表現型と筋収縮の蠕動脈波の異常との関係を調べるため、生を用いて筋肉収縮を詳細に解析することにした。イメージングアプローチ。
ショウジョウバエ胚の蠕因性収縮波の分析により、タイプ1とタイプ2の波に指定された2つの異なる収縮モードが明らかになった。タイプ1波は、前から後部に伝播する単純な波、またはその逆です。タイプ2波は、前端で開始し、後方の途中で伝播し、一時的に停止し、時間的静的収縮を形成し、第2段階の間に、伝播する蠕動収縮によって掃引される二相波である。後端から前方に進む。野生型胚は通常、約75%タイプ1と25%タイプ2波から成る一連の収縮を生成する。対照的に、POMT変異型胚は、ほぼ等しい相対周波数でタイプ1とタイプ2波を生成します。
我々のアプローチは、筋肉収縮および胚転がり7の定量分析のための詳細な情報を提供することができる。このアプローチは、ハッチングやクロールなどの筋肉の収縮を伴う他の行動の分析にも適しています。

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:771px;" width="771">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Digital camera</td>
			<td style="width:155px;">Hamamatsu CMOS ORCA-Flash 4.0</td>
			<td style="width:119px;">C13440-20CU</td>
			<td style="width:283px;">With different emission filters</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Forceps</td>
			<td style="width:155px;">FST Dumont</td>
			<td style="width:119px;">11254-20</td>
			<td>Tip Dimensions 0.05 mm x 0.01 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">LED</td>
			<td style="width:155px;">X-cite BDX (Excelitas)</td>
			<td style="width:119px;">XLED1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Microscope</td>
			<td style="width:155px;">Carl Ziess Examiner D1</td>
			<td style="width:119px;">491405-0005-000</td>
			<td>Epiflourescence with time lapse</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Needle</td>
			<td style="width:155px;">BD&#160;</td>
			<td align="right" style="width:119px;">305767</td>
			<td>25 G x 1-1/2 in</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Paintbrush</td>
			<td style="width:155px;">Contemporary crafts</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any paintbrush will work</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Petri dishes</td>
			<td style="width:155px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">25384-164</td>
			<td>60 mm x 15 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:215px;">Software</td>
			<td style="width:155px;">HCImage Live</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:215px;">Thread Zap Wax pen</td>
			<td style="width:155px;">Thread Zap II (by BeadSmith)(Amazon)</td>
			<td style="width:119px;">TZ1300</td>
			<td>Burner Tool</td>
		</tr>
		<tr height="23">
			<td height="23" style="height:23px;width:215px;">Tricorner plastic beaker</td>
			<td style="width:155px;">VWR</td>
			<td>25384-152</td>
			<td>100 mL</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

live imaging and analysis of muscle contractions in drosophila embryo

協調筋収縮は、ショウジョウバエ胚の発達の初期に見られるリズミカルな行動の一形態である。この動作を制御するには、ニューロン感覚フィードバック回路が必要です。収縮のリズミカルなパターンを生成する失敗は、神経学的異常を示すことができます。我々は以前、タンパク質O-mannosylation(翻訳後タンパク質修飾)の欠陥が感覚ニューロンの軸質形態に影響を及ぼし、胚の異常な協調筋収縮をもたらすことを発見した。ここでは、タンパク質の筋肉収縮表現型を特徴付けるために使用した後期胚の生画像を用いて、蠕動脈性筋収縮のパターンを記録・解析する比較的簡単な方法を提示する。O-マンノシルトランスフェラーゼ変異体。これらの記録から得られたデータは、周波数、伝播の方向および異なる身体セグメントにおける筋肉収縮の相対振幅を含む筋肉収縮波を分析するために使用することができる。また、体の姿勢を調べ、筋肉に特異的に発現した蛍光マーカーを利用して、胚の中線の位置を正確に決定しました。同様のアプローチは、胚の転がりや孵化など、発達中の様々な他の行動を研究するためにも利用できます。

正常な蠕動筋収縮は、映画1のWT(野生型、広東-S)胚に示されている。 我々の分析における筋肉収縮の周周波の平均頻度は1時間あたり47収縮であり、平均振幅はWT胚のベースラインを60%上回った。胚の転がりは、ムービー2のWT胚について示され、白い矢印は気管の初期位置を示し、黒い矢印は後部付属品の位置を示す。後部付属器(外側)は動かないが、気管(内部)...

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Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

ショウジョウバエ胚における筋収縮のライブイメージングと解析

ここでは、ショウジョウバエ胚における胚筋収縮を非侵襲的かつ詳細指向的に記録する方法を提示する。

Coordinated muscle contractions are a form of rhythmic behavior seen early during development in Drosophila embryos. Neuronal sensory feedback circuits ...

この方法は、ショウジョウバエ胚で起こる筋肉収縮や転動などの発達過程を分析する方法を取り上げる。この技術のいくつかの利点は、それが非侵襲的で非常に詳細であるが、それは比較的簡単に実行できるということです。我々の方法は、胚性筋肉収縮および他の発達過程に影響を与える新しい突然変異を単離し、分析するための高内容分析ベースのスクリーニングのためにさらに開発することができる。筋肉の収縮を視覚化する場合、収縮は特定の発達段階でのみ始まるため、胚の採取を適切に時間を取ることが重要です。段階的な視覚実証は、発達過程の定量的分析に大いに役立ちます。取り付けられたショウジョウバエ胚のライブイメージングでは、胚を適度な排出フィルタを備えた蛍光顕微鏡とデジタルカメラのステージに置き、10倍の水浸し対物レンズを選択します。次に、ライブビデオは、毎秒4フレームの取得率で約1〜2時間、適切な顕微鏡記録ソフトウェアを使用して胚を記録します。実験の最後に、録画したビデオを直接 ImageJ にエクスポートします。画像と作物を選択して、個々の胚の周りにボックスを描き、各胚の大きさにビデオ録画をトリミングします。画像、変形、回転をクリックして、トリミングされた画像を回転させて、画面に対する胚の正中線の垂直位置を達成します。距離の計測値をマイクロメートルに設定するには、[分析とスケールの設定]をクリックし、顕微鏡の設定に対して既知のピクセル対ミクロン比変換係数を入力します。その後のすべての測定値はマイクロメートルで報告されます。胚の転がりを解析するには、まず、後部と前端の間のビデオの最初のフレームで胚の一方または両方の気管の位置をマークし、[分析、ツール、および関心のある地域マネージャ]をクリックします。気管の周囲に約7マイクロメートル×7マイクロメートルのボックスを描き、キーボードのTキーをクリックしてこの位置をXY座標として記録します。目的の蠕動収縮後の気管の同じ領域の位置をマークし、キーボードのMをクリックして各ボックスの中心を結ぶ線を引き、収縮前位置から収縮後の位置までの距離を測定します。蛍光筋マーカーを発現する胚を用いて胚筋収縮を解析するには、蛍光読み出しの記録を用いて、対象となる特定の身体セグメントの蛍光筋を中心とした対象領域を描く。対象地域マネージャーの「T を追加」タブを選択して、対象地域の位置を記録します。[対象地域マネージャーと測定] をクリックして、ビデオの各フレームに選択した対象領域ごとの平均蛍光強度を記録します。ボックスを対象の他のボディ セグメントの中心に移動し、[T を追加]をクリックして、分析対象のすべてのボディ セグメントで同じサイズの関心のある領域を取得します。[対象地域マネージャー] で、コントロール キーを押しながら、XY 座標として記録されたすべての対象領域を選択します。[詳細とマルチメジャー] をクリックして、ビデオのすべてのフレームの対象領域ごとの平均蛍光強度を測定します。これにより、テーブル内の各計測値が、対象領域ごとにテーブルの列として、各フレームが行として報告されます。その後、テーブルをスプレッドシートプログラムに転送して、さらに分析します。X軸上にフレーム番号、Y軸上の平均蛍光強度を持つグラフをプロットし、4フレーム/秒のフレームレートを使用してフレーム数を時間に変換します。筋肉の収縮は、これらの収縮の間により多くの筋肉が引き込まれるにつれて、より多くのGFPを焦点領域の近くに持ち込むにつれて、GFPの強度を増加させる。筋収縮振幅を決定するために、ベースラインGFP強度をピーク間の領域の平均強度として推定する。次に、このベースラインに対するGFP蛍光強度の増加を評価する。次に、対象の強度値のすべての領域をベースライン強度で割り、GFP の強度をベースラインに正規化します。筋肉収縮波の間の後部、内側および前部のセグメントで正規化されたGFP強度を比較して、波が伝播するにつれて筋肉収縮の程度の変化を調べ、波の方向を決定する。胚の左右の筋肉収縮を比較するには、胚の両側の同じセグメントのピーク強度を分析する。収縮振幅とピークのタイミングを使用して、相違点がある場合、および蠕動筋収縮波の程度とタイミングを明らかにします。ここでは、野生型ショウジョウバエ胚における正常な蠕動筋収縮が示されている。野生型胚で転がるこのビデオでは、気管が胚がその殻の中で転がしたことを示している間、後部付属物は動かないことに注意してください。この代表的な分析では、165〜178秒の期間の間に筋肉収縮ピークが単一の前方波を表す。この胚については、振幅と筋肉収縮時間の差を胚の左右で測定しなかった。蠕動収縮は、そのプロファイルが後部領域で最初に発生するピークを有する場合、前方タイプ1波として指定され、その後、中央および前領域でピークが続く。後方タイプの 1 つの波は、最初に前方セグメントで発生し、次に後方領域に向かって伝播するピークです。2つの波は胚の一方の端から始まり、中間領域に向かって進み、反対側の端で再開始された掃引波として原点に戻ります。体態勢変異胚は、身体の胴体または回転表現型として指定された体の姿勢異常をもたらす2つの波の発生をタイプするタイプ1の異常な相対周波数を示す。筋肉収縮パラメータの読み出しとして蛍光を使用するには、筋組織にレポーターと共に胚を使用することが不可欠です。この方法は、多くの胚の筋肉収縮の同時記録と、様々な刺激、薬物または環境変化に対する応答の評価に使用することができる。

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live Imaging and Analysis of Muscle Contractions in Drosophila Embryo

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

Live-imaging of the Drosophila Pupal Eye

のライブイメージング<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;蛹アイ

Inherent processes of Drosophila pupal development can shift and distort the eye epithelium in ways that make individual cell behavior difficult to track ...

Analysis of Zebrafish Larvae Skeletal Muscle Integrity with Evans Blue Dye

エバンスブルー色素でゼブラフィッシュ幼生骨格筋の整合性の分析

The zebrafish model is an emerging system for the study of neuromuscular disorders.  In the study of neuromuscular diseases, the integrity of the muscle ...

Observing Mitotic Division and Dynamics in a Live Zebrafish Embryo

ライブゼブラフィッシュ胚における有糸分裂とダイナミクスを観察します

Mitosis is critical for organismal growth and differentiation. The process is highly dynamic and requires ordered events to accomplish proper chromatin ...

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

Long-term Live Imaging of Drosophila Eye Disc

長期のライブイメージング<em&gt;ショウジョウバエ</em&gt;アイディスク

Live imaging provides the ability to continuously track dynamic cellular and developmental processes in real time. Drosophila larval imaginal discs have ...

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

In Vitro Ovule Cultivation for Live-cell Imaging of Zygote Polarization and Embryo Patterning in Arabidopsis thaliana

体外受精卵の Live 細胞イメージング偏光とシロイヌナズナの胚パターン形成の胚珠培養

In most flowering plants, the zygote and embryo are hidden deep in the mother tissue, and thus it has long been a mystery of how they develop dynamically; ...

Live Imaging of Mouse Secondary Palate Fusion

マウス二次口蓋融合のライブイメージング

The fusion of the secondary palatal shelves to form the intact secondary palate is a key process in mammalian development and its disruption can lead to ...

In Vivo Imaging of Muscle-tendon Morphogenesis in Drosophila Pupae

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生体内でショウジョウバエの蛹の筋腱の形態形成の観察

Muscles together with tendons and the skeleton enable animals including humans to move their body parts. Muscle morphogenesis is highly conserved from ...

Preparation of Drosophila Larval and Pupal Testes for Analysis of Cell Division in Live, Intact Tissue

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生きた無傷組織における細胞分裂解析のためのショウジョウバエ・ラーバルとプパル精巣の調製

Experimental analysis of cells dividing in living, intact tissues and organs is essential to our understanding of how cell division integrates with ...

Imaging Intranuclear Actin Rods in Live Heat Stressed Drosophila Embryos

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ライブ熱ストレスショ ウジョウバエ 胚における核内アクチンロッドのイメージング

The purpose of this protocol is to visualize intranuclear actin rods that assemble in live Drosophila melanogaster embryos following heat stress. Actin ...

Drosophila Embryo Preparation and Microinjection for Live Cell Microscopy Performed using an Automated High Content Analyzer

ショウジョウバエ胚の調製と、自動高コンテンツアナライザを用いた生細胞顕微鏡のための微小注入

Modern approaches in quantitative live cell imaging have become an essential tool for exploring cell biology, by enabling the use of statistics and ...