Name: performing spectroscopy on plasmonic nanoparticles with transmission-based nomarski-type differential interference contrast microscopy
Uploaded: 2019-06-05T13:30:00
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डॉ एंथोनी एस Stender ओहियो विश्वविद्यालय में Nanoscale और क्वांटम घटनाएं संस्थान (NQPI) के माध्यम से तकनीकी सहायता स्वीकार करना चाहता है । इस अनुच्छेद के माध्यम से संभव किया गया था शुरू करने के लिए प्रदान की फंडिंग डॉ ।

1. मानक ग्लास माइक्रोस्कोपी स्लाइड के साथ नमूना तैयारी
<ol><li>नमूना बयान के लिए ग्लास माइक्रोस्कोप स्लाइड तैयार करें । नोट: कुछ परिस्थितियों में, यह अधिक उपयुक्त हो सकता है के लिए इथेनॉल के बजाय ultrapure पानी ?...

<ol>
	<li>Pluta, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch+7:+Differential+Interference+Contrast+in.">Ch 7: Differential Interference Contrast in.</a> Advanced Light Microscopy. 2, 146-197 (1989).</li><li>Stender, A. S., Wang, G., Sun, W., Fang, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+Gold+Nanorod+Geometry+on+Optical+Response.">Influence of Gold Nanorod Geometry on Optical Response.</a> ACS Nano. 4 (12), 7667-7675 (2010).</li><li>Stender, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+Cell+Optical+Imaging+and+Spectroscopy.">Single Cell Optical Imaging and Spectroscopy.</a> Chemical Reviews. 113 (4), 2469-2527 (2013).</li><li>Mehta, S. B., Sheppard, C. J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partially+coherent+image+formation+in+differential+interference+contrast+(DIC)+microscope.">Partially coherent image formation in differential interference contrast (DIC) microscope.</a> Optics Express. 16 (24), 19462-19479 (2008).</li><li>Murphy, D. B., Davidson, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch+1:+Fundamentals+of+Light+Microscopy.">Ch 1: Fundamentals of Light Microscopy.</a> Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging, Second edition. , 1-20 (2012).</li><li>Stender, A. S., Augspurger, A. E., Wang, G., Fang, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Influence+of+Polarization+Setting+on+Gold+Nanorod+Signal+at+Nonplasmonic+Wavelengths+Under+Differential+Interference+Contrast+Microscopy.">Influence of Polarization Setting on Gold Nanorod Signal at Nonplasmonic Wavelengths Under Differential Interference Contrast Microscopy.</a> Analytical Chemistry. 84 (12), 5210-5215 (2012).</li><li>Wang, G., Sun, W., Luo, Y., Fang, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolving+Rotational+Motions+of+Nano-objects+in+Engineered+Environments+and+Live+Cells+with+Gold+Nanorods+and+Differential+Interference+Contrast+Microscopy.">Resolving Rotational Motions of Nano-objects in Engineered Environments and Live Cells with Gold Nanorods and Differential Interference Contrast Microscopy.</a> Journal of the American Chemical Society. 132 (46), 16417-16422 (2010).</li><li>Kelly, K. L., Coronado, E., Zhao, L. L., Schatz, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Optical+Properties+of+Metal+Nanoparticles:+The+Influence+of+Size,+Shape,+and+Dielectric+Environment.">The Optical Properties of Metal Nanoparticles: The Influence of Size, Shape, and Dielectric Environment.</a> The Journal of Physical Chemistry B. 107 (3), 668-677 (2003).</li><li>Mulvaney, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Not+All+That's+Gold+Does+Glitter.">Not All That's Gold Does Glitter.</a> MRS Bulletin. 26 (12), 1009-1014 (2012).</li><li>Maier, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Plasmonics: Fundamentals and Applications. , (2007).</li><li>Sun, W., Wang, G., Fang, N., Yeung, E. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wavelength-Dependent+Differential+Interference+Contrast+Microscopy:+Selectively+Imaging+Nanoparticle+Probes+in+Live+Cells.">Wavelength-Dependent Differential Interference Contrast Microscopy: Selectively Imaging Nanoparticle Probes in Live Cells.</a> Analytical Chemistry. 81 (22), 9203-9208 (2009).</li><li>Cras, J. J., Rowe-Taitt, C. A., Nivens, D. A., Ligler, F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+chemical+cleaning+methods+of+glass+in+preparation+for+silanization.">Comparison of chemical cleaning methods of glass in preparation for silanization.</a> Biosensors and Bioelectronics. 14 (8), 683-688 (1999).</li><li>Augspurger, A. E., Sun, X., Trewyn, B. G., Fang, N., Stender, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+the+Stimulated+Uncapping+Process+of+Gold-Capped+Mesoporous+Silica+Nanoparticles.">Monitoring the Stimulated Uncapping Process of Gold-Capped Mesoporous Silica Nanoparticles.</a> Analytical Chemistry. 90 (5), 3183-3188 (2018).</li><li>Murphy, D. B., Davidson, M. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch+2:+Light+and+Color.">Ch 2: Light and Color.</a> Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging, Second Edition. , 21-33 (2012).</li><li>Wayne, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch+3:+The+Dependence+of+Image+Formation+on+the+Nature+of+Light.">Ch 3: The Dependence of Image Formation on the Nature of Light.</a> Light and Video Microscopy (Second Edition). , 43-78 (2014).</li><li>Stender, A. S., Wei, X., Augspurger, A. E., Fang, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmonic+Behavior+of+Single+Gold+Dumbbells+and+Simple+Dumbbell+Geometries.">Plasmonic Behavior of Single Gold Dumbbells and Simple Dumbbell Geometries.</a> The Journal of Physical Chemistry C. 117 (31), 16195-16202 (2013).</li><li>Hu, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dark-field+microscopy+studies+of+single+metal+nanoparticles:+understanding+the+factors+that+influence+the+linewidth+of+the+localized+surface+plasmon+resonance.">Dark-field microscopy studies of single metal nanoparticles: understanding the factors that influence the linewidth of the localized surface plasmon resonance.</a> Journal of Materials Chemistry. 18 (17), 1949-1960 (2008).</li><li>Choo, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Wavelength-Dependent+Differential+Interference+Contrast+Inversion+of+Anisotropic+Gold+Nanoparticles.">Wavelength-Dependent Differential Interference Contrast Inversion of Anisotropic Gold Nanoparticles.</a> The Journal of Physical Chemistry C. 122 (47), 27024-27031 (2018).</li><li>Funston, A. M., Novo, C., Davis, T. J., Mulvaney, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasmon+Coupling+of+Gold+Nanorods+at+Short+Distances+and+in+Different+Geometries.">Plasmon Coupling of Gold Nanorods at Short Distances and in Different Geometries.</a> Nano Letters. 9 (4), 1651-1658 (2009).</li></ol>

जब डीआईसी माइक्रोस्कोपी के साथ इमेजिंग, यह डेटा एकत्र करने से पहले ऑप्टिकल घटकों का अनुकूलन करने के लिए महत्वपूर्ण है । यहां तक कि एक प्रयोग के बीच में polarizer करने के लिए मामूली समायोजन अंतिम डेटा6</su...

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:1117px;" width="1117">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Contrad 70</td>
			<td style="width:228px;">Decon Labs, Inc.</td>
			<td style="width:157px;">1002</td>
			<td style="width:439px;">For cleaning microscope glass, Available through many chemical suppliers</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Ethanol</td>
			<td style="width:228px;">Fisher Scientific</td>
			<td style="width:157px;">A962-4</td>
			<td>For cleaning and storing microscope glass</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Glass microscope cover slips</td>
			<td style="width:228px;">Ted Pella</td>
			<td style="width:157px;">260148</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Glass microscope slides</td>
			<td style="width:228px;">Ted Pella</td>
			<td style="width:157px;">26007</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Gold nanorods</td>
			<td style="width:228px;">Nanopartz</td>
			<td style="width:157px;">DIAM-SPR-25-650</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Gold nanospheres (80 nm)</td>
			<td style="width:228px;">Sigma Aldrich</td>
			<td style="width:157px;">742023-25ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">ImageJ</td>
			<td style="width:228px;">NIH</td>
			<td style="width:157px;">N/A</td>
			<td>Free Software availabe for data analysis from NIJ</td>
		</tr>
		<tr height="27">
			<td height="27" style="height:27px;width:293px;">Nail polish</td>
			<td style="width:228px;">Electron Microscopy Sciences</td>
			<td style="width:157px;">72180</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Nikon Ti-E microscope</td>
			<td style="width:228px;">Nikon</td>
			<td style="width:157px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Nitrogen gas</td>
			<td style="width:228px;">Airgas</td>
			<td style="width:157px;">N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">ORCA Flash 4.0 V2+ digital sCMOS camera</td>
			<td style="width:228px;">Hamamatsu</td>
			<td style="width:157px;">77054098</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Scribing pen</td>
			<td style="width:228px;">Amazon</td>
			<td style="width:157px;">N/A</td>
			<td>Many options available online for under $10. Not necessary to buy an expensive version.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:293px;">Ultrapure water</td>
			<td style="width:228px;"></td>
			<td style="width:157px;"></td>
			<td>18 megaohm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

performing spectroscopy on plasmonic nanoparticles with transmission-based nomarski-type differential interference contrast microscopy

विभेदक व्यतिकरण कंट्रास्ट (डीआईसी) माइक्रोस्कोपी एक शक्तिशाली इमेजिंग उपकरण है जो सबसे अधिक इमेजिंग माइक्रोस्केल वस्तुओं के लिए दृश्यमान-रेंज प्रकाश का उपयोग करते हुए नियोजित है । इस प्रोटोकॉल का उद्देश्य plasmonic नैनोकणों नमूनों की तैयारी और डीआईसी microscopy के साथ उन पर एकल कण स्पेक्ट्रोस्कोपी प्रदर्शन के लिए एक सिद्ध विधि विस्तार करने के लिए है. Repeatable स्पेक्ट्रोस्कोपी प्रयोगों प्रदर्शन करने के क्रम में कई महत्वपूर्ण कदम सावधानी से पीछा किया जाना चाहिए. सबसे पहले, स्थलों नमूना सब्सट्रेट, जो नमूना सतह का पता लगाने में और प्रयोगों के दौरान ब्याज के क्षेत्र पर नज़र रखने में एड्स में etched किया जा सकता है । अगले, सब्सट्रेट ठीक से मलबे और अंयथा बाधा या नमूने की जांच अस्पष्ट कर सकते है कि contaminants की साफ किया जाना चाहिए । एक बार एक नमूना ठीक से तैयार है, सूक्ष्मदर्शी के ऑप्टिकल पथ गठबंधन होना चाहिए, Kohler रोशनी का उपयोग । एक मानक Nomarski शैली डीआईसी माइक्रोस्कोप के साथ, नमूने के रोटेशन के लिए आवश्यक हो सकता है, विशेष रूप से जब plasmonic नैनोकणों अभिविन्यास-निर्भर ऑप्टिकल गुण प्रदर्शित. क्योंकि dic माइक्रोस्कोपी दो अंतर्निहित लांबिक ध्रुवीकरण क्षेत्रों है, तरंग दैर्ध्य-निर्भर डीआईसी कंट्रास्ट पैटर्न रॉड के आकार का plasmonic नैनोकणों के उंमुखीकरण से पता चलता है । अंत में, डेटा अधिग्रहण और डेटा विश्लेषण सावधानी से किया जाना चाहिए । यह एक विपरीत मूल्य के रूप में डीआईसी आधारित स्पेक्ट्रोस्कोपी डेटा का प्रतिनिधित्व करने के लिए आम है, लेकिन यह भी तीव्रता डेटा के रूप में पेश करने के लिए संभव है. एकल कण स्पेक्ट्रोस्कोपी के लिए डीआईसी के इस प्रदर्शन में, ध्यान गोलाकार और रॉड के आकार का सोने नैनोकणों पर है ।

जब नमूनों के साथ काम कर रहे है कि काफी बड़ी नग्न आंखों से देखा जा सकता है, गिलास सब्सट्रेट पर स्थलों रखने के सामांय रूप से आवश्यक नहीं है । हालांकि, जब nanomaterials के साथ काम या जब नमूने के रोटेशन की आ...

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Performing Spectroscopy on Plasmonic Nanoparticles with Transmission-Based Nomarski-Type Differential Interference Contrast Microscopy

इस प्रोटोकॉल का लक्ष्य plasmonic नैनोकणों के नमूनों की तैयारी के लिए और विभेदक हस्तक्षेप कंट्रास्ट (डीआईसी) माइक्रोस्कोपी के साथ उन पर एकल कण स्पेक्ट्रोस्कोपी प्रदर्शन के लिए विस्तार करने के लिए एक सिद्ध दृष्टिकोण है ।

संचरण आधारित Nomarski-प्रकार विभेदक हस्तक्षेप कन्ट्रास्ट Microscopy के साथ Plasmonic नैनोकणों पर प्रदर्शन स्पेक्ट्रोस्कोपी

Differential interference contrast (DIC) microscopy is a powerful imaging tool that is most commonly employed for imaging microscale objects using ...

डीआईसी माइक्रोस्कोपी जटिल वातावरण में इमेजिंग प्लाज्मोनिक नैनोकणों में अंधेरे क्षेत्र से बेहतर है। हालांकि, डीआईसी को प्रजनन योग्य परिणाम प्राप्त करने के लिए अधिक ज्ञान और कौशल की भी आवश्यकता होती है। डीआईसी माइक्रोस्कोपी उच्च पार्श्व संकल्प और क्षेत्र की उथली गहराई दोनों प्रदान करता है।कोशिकाओं के भीतर या जटिल वातावरण में नैनोकणों की निगरानी करते समय ये दोनों लक्षण अत्यंत महत्वपूर्ण हैं। शुरू करने के लिए, प्रत्येक ग्लास कवरलिप के केंद्र पर एक उथले और छोटे खरोंच निशान रखने के लिए एक स्क्रिनिंग पेन का उपयोग करें, और फिर साथ वाले टेक्स्ट प्रोटोकॉल में वर्णित ग्लास को साफ करें। इसके बाद, अपने मूल भंडारण कंटेनर से 05 मिलीग्राम-प्रति-मिलीलीटर सोने के नैनोपार्टिकल समाधान के 100 माइक्रोलीटर को हटाने के लिए एक माइक्रोपिपेट का उपयोग करें, और समाधान को 1.5 मिलीलीटर सेंट्रलाइज ट्यूब में बाहर निकालें।6, 000 बार गुरुत्वाकर्षण पर 10 मिनट के लिए नमूना अपकेंद्रित्र। समाप्त होने पर, नैनोपार्टिकल समाधान से अतिरिक्त सर्फेक्टेंट से छुटकारा पाने के लिए माइक्रोपिपेट के साथ सुपरनैंट को हटा दें। इसके बाद, सेंट्रलाइज ट्यूब में अल्ट्रा-प्योर पानी के 100 माइक्रोलीटर जोड़ें।संक्षेप में गोली को तोड़ने के लिए नमूना भंवर, और फिर इसे 20 मिनट के लिए तुरंत बाद में पूरी तरह से नैनोपार्टिकल समुच्चय को फिर से खर्च करने के लिए sonicate । एक माइक्रोपिपेट का उपयोग करना, साफ और खरोंच ग्लास कवरलिप पर नैनोपार्टिकल समाधान के छह माइक्रोलीटर ड्रॉपकास्ट करें। फिर ध्यान से कवरस्लिप को फ्लिप करें और इसे माइक्रोस्कोप ग्लास के दूसरे बड़े टुकड़े के शीर्ष पर रखें।बूंद जल्दी से कांच के दो टुकड़ों के बीच समान रूप से फैल जाना चाहिए। कांच के दो टुकड़ों के बीच फंसे हवा के बुलबुले होने से बचने के लिए ध्यान रखें। तरल के वाष्पीकरण को रोकने के लिए कवरस्लिप के किनारों को सील करने के लिए नेल पॉलिश की एक संकीर्ण रेखा का उपयोग करें।नमूना माइक्रोस्कोप चरण पर रखें, और माइक्रोस्कोप के उद्देश्य और कंडेनसर को संरेखित करें। उस पर नमूने के साथ फोकल विमान खोजने के लिए ध्यान समायोजित करें और पहले बनाए गए स्क्रैच मार्क का पता लगाएं। इस पर ध्यान दें और नैनोकणों को देखने में आने तक ध्यान को ठीक करें।कंडेनसर के सटीक प्लेसमेंट का निर्धारण करने के लिए, 20x उद्देश्य के साथ शुरू करके कोहलर रोशनी विधि का उपयोग करें, और फिर 80 या 100x जैसे उच्च आवर्धन में आगे बढ़ें। इसके बाद, इमेजिंग के लिए नमूने के भीतर ब्याज के एक क्षेत्र का चयन करें। देखने के कैमरे के क्षेत्र में क्षेत्र केंद्र, और आवश्यक के रूप में ध्यान समायोजित करें ।यदि माइक्रोस्कोप में डी सेरमोंट डिजाइन है, तो अधिकतम पृष्ठभूमि विलुप्त होने के पास सेट ध्रुवीकरण के साथ शुरू करें और धीरे-धीरे पृष्ठभूमि विलुप्त होने को कम करने की दिशा में ध्रुवीकरण को घुमाएं। पृष्ठभूमि की तीव्रता धीरे-धीरे बढ़ेगी। आदर्श सेटिंग तब हासिल की जाती है जब नैनोकण स्थानीय पृष्ठभूमि औसत की तुलना में अपनी सबसे बड़ी तीव्रता के अंतर तक पहुंचते हैं।प्लाज्मोनिक नैनोकणों के लिए, सबसे बड़ा विपरीत आम तौर पर अधिकतम पृष्ठभूमि विलुप्त होने पर या उसके पास अपेक्षाकृत अंधेरे पृष्ठभूमि के साथ हासिल किया जाता है। प्रक्रिया के साथ बातचीत से आवारा रोशनी को रोकने के लिए कमरे की रोशनी बंद करें। ब्याज के क्षेत्र को देखने के लिए मुख्य स्थानीयकृत सतह प्लाज्मन अनुनाद तरंगदैर्ध्य के साथ स्थित अपने केंद्रीय तरंगदैर्ध्य सह-स्थित के साथ आधा अधिकतम बैंड-पास फिल्टर पर 10-नैनोमीटर पूर्ण चौड़ाई जगह में रखें।इसके बाद, लैंप तीव्रता या एक्सपोजर समय को तब तक समायोजित करें जब तक कि पृष्ठभूमि का स्तर कैमरे की अधिकतम क्षमता स्तर के 5% से 40% पर न हो जाए। ब्याज के क्षेत्र के भीतर कोई भी वस्तुओं को सिग्नल तीव्रता प्रदर्शित नहीं करनी चाहिए जो कैमरे के अधिकतम तीव्रता स्तर के 90% से अधिक है। बैंड-पास फिल्टर की एक श्रृंखला के साथ नमूना छवि है कि प्रत्येक 10 नैनोमीटर की आधी अधिकतम पर एक पूर्ण चौड़ाई है, और है कि एक पूरे के रूप में ब्याज की पूरी तरंगदैर्ध्य रेंज भर में इमेजिंग सक्षम ।सुनिश्चित करें कि छवियों में पृष्ठभूमि की तीव्रता एक्सपोजर समय को समायोजित करके एक दूसरे के 5% के भीतर बनी हुई है न कि लैंप पावर को समायोजित करके। फ़िल्टर स्विच करने के बाद, छवियों को कैप्चर करने से पहले नमूने को फिर से केंद्रित करें। सभी प्रासंगिक जानकारी को संरक्षित करने के लिए बिना निगमित झगड़ा फ़ाइलों के रूप में छवियों को सहेजें और/या सॉफ्टवेयर के देशी फ़ाइल प्रारूप में ।विश्लेषण शुरू करने के लिए, इमेजजे के साथ छवि खोलें। ब्याज के मुख्य क्षेत्र के चारों ओर एक आयत आकर्षित करने के लिए आयत उपकरण का उपयोग करें। फिर टूलबार पर, छवि का चयन करें, ज़ूम करने के लिए जाएं, और चयन करने के लिए चुनें।इमेजिंग विंडो चयनित क्षेत्र पर ज़ूम होगा। इसके बाद, छवि का चयन करें, समायोजित करने के लिए जाओ, और चमक का चयन करें/ नमूना क्षेत्र के दृश्य में सुधार करने के लिए, छवि के न्यूनतम, अधिकतम, चमक और विपरीत को समायोजित करें।ये समायोजन वैज्ञानिक आंकड़ों को नहीं बदलते हैं, वे केवल नमूना क्षेत्र की बेहतर दृश्यता को सक्षम करते हैं । अब, आयत उपकरण का फिर से उपयोग करें और मापा जा करने के लिए पहले नैनोपार्टिकल के चारों ओर एक बॉक्स आकर्षित करें। बॉक्स नैनोपार्टिकल की हवादार डिस्क से केवल थोड़ा बड़ा होना चाहिए।एक बार चयनित होने के बाद, विश्लेषण करने के लिए जाएं, और उपाय का चयन करें। एक नई विंडो दिखाई देती है जो चयनित बॉक्स के अंदर स्थित पिक्सेल के लिए न्यूनतम, अधिकतम और औसत तीव्रता की रिपोर्ट करती है। बॉक्स के मूल आकार को बनाए रखते हुए, बॉक्स को तुरंत कण के निकट एक क्षेत्र में खींचें जहां पृष्ठभूमि के विपरीत अपेक्षाकृत भी है, और कोई कण या संदूषक मौजूद नहीं हैं।पृष्ठभूमि क्षेत्र के लिए औसत तीव्रता निर्धारित करने के लिए फिर से उपाय उपकरण का उपयोग करें। श्रृंखला में छवियों के सभी में प्रत्येक कण के लिए इस प्रक्रिया को दोहराएं। फिर सभी तरंगदैर्ध्य और कोणों में प्रत्येक कण के विपरीत या तीव्रता की गणना करने के लिए डेटा को स्प्रेडशीट में निर्यात करें।प्रत्येक कण के विपरीत की गणना करने के लिए निम्नलिखित समीकरण में दर्ज करें। अंत में, एक्स-एक्सिस के साथ तरंगदैर्ध्य और वाई-एक्सिस के साथ विपरीत या तीव्रता के साथ डेटा की साजिश रचकर किसी दिए गए नैनोपार्टिकल स्थिति में स्पेक्ट्रल प्रोफाइल को ग्राफ करें। इष्टतम इमेजिंग सेटिंग निर्धारित करने के लिए, इन सोने के नैनोस्फीयर को कई ध्रुवीकरण सेटिंग्स पर चित्रित किया गया था।शून्य डिग्री पर, कण ज्यादातर सफेद दिखाई देते हैं, जिसमें उनके मिडसेक्शन में एक अंधेरी धारी चल रही है। यह नैनोस्फीयर नमूनों के लिए क्रॉस-ध्रुवीकरण का संकेत है। जब ध्रुवीकरण को विभिन्न कोणों पर घुमाया जाता है, तो कण एक कोने की ओर अंधेरे छाया डालते हैं।हालांकि, कण विपरीत मूल्यों नाटकीय रूप से बदल जाते हैं । इस नमूने के लिए, इष्टतम इमेजिंग सेटिंग 10 डिग्री के ध्रुवीकरण बदलाव के साथ है। यहां तरंगदैर्ध्य सोने के नैनोस्फीयर के विपरीत साजिश रची जाती है।प्रत्येक डेटा बिंदु प्रत्येक कण व्यास के लिए औसतन 20 नैनोस्फीयर का प्रतिनिधित्व करता है। प्रत्येक कण के लिए चोटी के विपरीत इसके आकार के आधार पर थोड़ा बदलाव । तीव्रता और रोटेशन इस सोने के नैनोरॉड जैसे एनिसोट्रोपिक आकारों के साथ और भी महत्वपूर्ण है।यहां तरंगदैर्ध्य दो अलग-अलग ध्रुवीकरण सेटिंग्स में तीव्रता के खिलाफ साजिश रची जाती है। प्रत्येक मामले में, उज्ज्वल पक्ष की तीव्रता अंधेरे पक्ष की तुलना में बहुत मजबूत है। मंच के रोटेशन के दौरान अपनी स्थानीयकृत सतह प्लाज्मन अनुनाद तरंगदैर्ध्य पर एक सोने के नैनोरॉड की तीव्रता प्रोफ़ाइल अंधेरे और उज्ज्वल पक्षों के बीच एक बड़ी तीव्रता अंतर दिखाती है क्योंकि नमूना 180 डिग्री के माध्यम से घुमाया जाता है।नमूना इमेजिंग अत्यंत महत्वपूर्ण है। इसके लिए माइक्रोस्कोपिस्ट की ओर से परिश्रम और धैर्य दोनों की जरूरत होती है। यदि आप एक ऐसा प्रयोग कर रहे हैं जिसके लिए कई दिनों में नमूने को फिर से रीइमेज करने की आवश्यकता होती है, तो आपके हित के क्षेत्र को स्थानांतरित करने में खरोंच के निशान जैसे स्थल महत्वपूर्ण हैं।डीआईसी माइक्रोस्कोपी शोधकर्ताओं द्वारा रुचि में बढ़ रहा है जो नैनोकणों का अध्ययन करते हैं, विशेष रूप से गतिशील और सेलुलर वातावरण में । क्योंकि डीआईसी इष्टतम स्थानिक संकल्प प्रदान करता है, विशेष रूप से जटिल नमूना वातावरण में।

Research

JoVE Journal

Chemistry

Template Directed Synthesis of Plasmonic Gold Nanotubes with Tunable IR Absorbance

टेम्पलेट Tunable IR Absorbance साथ निर्देशित Plasmonic गोल्ड नैनोट्यूब संश्लेषण

A nearly parallel array of pores can be produced by anodizing aluminum foils in acidic environments1, 2. Applications of anodic aluminum oxide (AAO) ...

Synthesis of Immunotargeted Magneto-plasmonic Nanoclusters

Immunotargeted का संश्लेषण चुंबक plasmonic nanoclusters

Magnetic and plasmonic properties combined in a single nanoparticle provide a synergy that is advantageous in a number of biomedical applications ...

Photochemical Oxidative Growth of Iridium Oxide Nanoparticles on CdSe@CdS Nanorods

पर सीडीएसई @ सीडीएस Nanorods इरिडियम आक्साइड नैनोकणों के प्रकाश रासायनिक ऑक्सीडेटिव विकास

We demonstrate a procedure for the photochemical oxidative growth of iridium oxide catalysts on the surface of seeded cadmium selenide-cadmium sulfide ...

Liquid-cell Transmission Electron Microscopy for Tracking Self-assembly of Nanoparticles

नैनोकणों की आत्म-विधानसभा पर नज़र रखने के लिए तरल-कोशिका संचरण इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी

Drying a nanoparticle dispersion is a versatile way to create self-assembled structures of nanoparticles, but the mechanism of this process is not fully ...

Probing the Structure and Dynamics of Interfacial Water with Scanning Tunneling Microscopy and Spectroscopy

संरचना और स्कैनिंग सुरंग माइक्रोस्कोपी और स्पेक्ट्रोस्कोपी के साथ चेहरे का पानी की गतिशीलता की जांच

Water/solid interfaces are ubiquitous and play a key role in many environmental, biophysical, and technological processes. Resolving the internal ...

Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril

Quantitative SERS Detection of Uric Acid via Formation of Precise Plasmonic Nanojunctions within Aggregates of Gold Nanoparticles and Cucurbit[n]uril

सोने के नैनोकणों और Cucurbit[n] uril के समुच्चय के भीतर सटीक प्लास्मोनिक नैनोजंक्शन के गठन के माध्यम से यूरिक एसिड का मात्रात्मक SERS पता लगाना[n] uril

This work describes a rapid and highly sensitive method for the quantitative detection of an important biomarker, uric acid (UA), via surface-enhanced ...

Preparation of Silver-Palladium Alloyed Nanoparticles for Plasmonic Catalysis under Visible-Light Illumination

दृश्य-प्रकाश रोशनी के तहत प्लाज्मोनिक उत्प्रेरक के लिए सिल्वर-पैलेडियम एलोयेड नैनोकणों की तैयारी

Localized surface plasmon resonance (LSPR) in plasmonic nanoparticles (NPs) can accelerate and control the selectivity of a variety of molecular ...

Atomic Force Microscopy Combined with Infrared Spectroscopy as a Tool to Probe Single Bacterium Chemistry

परमाणु बल माइक्रोस्कोपी एक जीवाणु रसायन विज्ञान की जांच करने के लिए एक उपकरण के रूप में अवरक्त स्पेक्ट्रोस्कोपी के साथ संयुक्त

Atomic Force Microscopy-Infrared Spectroscopy (AFM-IR) is a novel combinatory technique, enabling simultaneous characterization of physical properties and ...

Studying the Effects of Temperature on the Nucleation and Growth of Nanoparticles by Liquid-Cell Transmission Electron Microscopy

लिक्विड-सेल ट्रांसमिशन इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी द्वारा नैनोकणों के नाभिक और विकास पर तापमान के प्रभाव का अध्ययन

Temperature control is a recent development that provides an additional degree of freedom to study nanochemistry by liquid cell transmission electron ...

Synthesis of Metal Nanoparticles Supported on Carbon Nanotube with Doped Co and N Atoms and its Catalytic Applications in Hydrogen Production

डोप्ड सह और एन परमाणुओं और हाइड्रोजन उत्पादन में इसके उत्प्रेरक अनुप्रयोगों के साथ कार्बन नैनोट्यूब पर समर्थित धातु नैनोकणों का संश्लेषण

A method for facile synthesis of nanostructured catalysts supported on carbon nanotubes with atomically dispersed cobalt and nitrogen dopant is presented ...