Name: analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence
Uploaded: 2019-04-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

أيد هذا العمل HL140264 R03 المعاهد الوطنية للصحة (ي. ج. N) وجيليد العلوم بحوث علماء البرنامج (ي. ج. N).

جميع الإجراءات الحيوان أجريت مع موافقة فاندربيلت جامعة مركز المؤسسية الحيوان الرعاية الطبية واستخدام اللجنة.
1-الماوس جمع الأجنة والتشريح
<ol><li>زميله القديم في الأسبوع 8-10 الإناث حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو+/-- الفئران مع حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو الفئران الأسبو...

<ol>
	<li>Evans, S. M., Yelon, D., Conlon, F. L., Kirby, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+lineage+development.">Myocardial lineage development.</a> Circulation Research. 107 (12), 1428-1444 (2010).</li><li>Paige, S. L., Plonowska, K., Xu, A., Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+cardiomyocyte+differentiation.">Molecular regulation of cardiomyocyte differentiation.</a> Circulation Research. 116 (2), 341-353 (2015).</li><li>Lee, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+light+chain-2+luciferase+transgenic+mice+reveal+distinct+regulatory+programs+for+cardiac+and+skeletal+muscle-specific+expression+of+a+single+contractile+protein+gene.">Myosin light chain-2 luciferase transgenic mice reveal distinct regulatory programs for cardiac and skeletal muscle-specific expression of a single contractile protein gene.</a> Journal of Biological Chemistry. 267 (22), 15875-15885 (1992).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+requirement+of+myosin+light+chain+2v+in+embryonic+heart+function.">Selective requirement of myosin light chain 2v in embryonic heart function.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (2), 1252-1256 (1998).</li><li>Ross, R. S., Navankasattusas, S., Harvey, R. P., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HF-1a/HF-1b/MEF-2+combinatorial+element+confers+cardiac+ventricular+specificity+and+established+an+anterior-posterior+gradient+of+expression.">An HF-1a/HF-1b/MEF-2 combinatorial element confers cardiac ventricular specificity and established an anterior-posterior gradient of expression.</a> Development. 122 (6), 1799-1809 (1996).</li><li>Christoffels, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+formation+and+morphogenesis+in+the+developing+mammalian+heart.">Chamber formation and morphogenesis in the developing mammalian heart.</a> Dev Biol. 223 (2), 266-278 (2000).</li><li>Wu, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+identity+is+determined+by+a+COUP-TFII+regulatory+network.">Atrial identity is determined by a COUP-TFII regulatory network.</a> Developmental Cell. 25 (4), 417-426 (2013).</li><li>Nelson, D. O., Jin, D. X., Downs, K. M., Kamp, T. J., Lyons, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irx4+identifies+a+chamber-specific+cell+population+that+contributes+to+ventricular+myocardium+development.">Irx4 identifies a chamber-specific cell population that contributes to ventricular myocardium development.</a> Developmental Dynamics. 243 (3), 381-392 (2014).</li><li>Bao, Z. Z., Bruneau, B. G., Seidman, J. G., Seidman, C. E., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chamber-specific+gene+expression+in+the+developing+heart+by+Irx4.">Regulation of chamber-specific gene expression in the developing heart by Irx4.</a> Science. 283 (5405), 1161-1164 (1999).</li><li>Kubalak, S. W., Miller-Hance, W. C., O'Brien, T. X., Dyson, E., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+specification+of+atrial+myosin+light+chain-2+expression+precedes+septation+during+murine+cardiogenesis.">Chamber specification of atrial myosin light chain-2 expression precedes septation during murine cardiogenesis.</a> Journal of Biological Chemistry. 269 (24), 16961-16970 (1994).</li><li>Bardot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TAF10-containing+TFIID+and+SAGA+transcriptional+complexes+are+dispensable+for+early+somitogenesis+in+the+mouse+embryo.">The TAF10-containing TFIID and SAGA transcriptional complexes are dispensable for early somitogenesis in the mouse embryo.</a> Development. 144 (20), 3808-3818 (2017).</li><li>Zhang, Z., Nam, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+MLC-2v-tdTomato+knock-in+reporter+mouse+line.">Generation of MLC-2v-tdTomato knock-in reporter mouse line.</a> Genesis. , (2018).</li><li>Ieda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+functional+cardiomyocytes+by+defined+factors.">Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.</a> Cell. 142 (3), 375-386 (2010).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN4+dynamically+marks+the+first+heart+field+and+conduction+system+precursors.">HCN4 dynamically marks the first heart field and conduction system precursors.</a> Circulation Research. 113 (4), 399-407 (2013).</li><li>Nam, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+diverse+cardiac+cell+types+by+reprogramming+fibroblasts+with+cardiac+transcription+factors.">Induction of diverse cardiac cell types by reprogramming fibroblasts with cardiac transcription factors.</a> Development. 141 (22), 4267-4278 (2014).</li><li>Spater, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HCN4++cardiomyogenic+progenitor+derived+from+the+first+heart+field+and+human+pluripotent+stem+cells.">A HCN4+ cardiomyogenic progenitor derived from the first heart field and human pluripotent stem cells.</a> Nature Cell Biology. 15 (9), 1098-1106 (2013).</li><li>O'Brien, T. X., Lee, K. J., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+specification+of+ventricular+myosin+light+chain+2+expression+in+the+primitive+murine+heart+tube.">Positional specification of ventricular myosin light chain 2 expression in the primitive murine heart tube.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (11), 5157-5161 (1993).</li></ol>

الأسلوب الموصوفة هنا بسيط نسبيا لدراسة تطوير الدائرة البطين، دون إجراء تجارب ذات العمالة الكثيفة لتسمية الجينات الهيكلية البطين أو الخاصة بالقلب أو البروتينات. ومن ثم، يقلل هذا الأسلوب التقلبات التقنية التي تم العثور عليها غالباً في أقسام القلب إيمونوستينيد.
هناك اثنين م...

تشكيل الدائرة أثناء تطوير القلب عملية معقدة والانتقال عبر عدة مراحل الجنينية شكلياً مميزة1،2. شكل هلال من خلايا القلب السلف السكان يشكل أنبوب قلب خطي وثم يخضع لاستطالة وحلقات لتشكيل شكل دوامة قلب النامي. بعد عملية سيبتيشن، تتحول قلب النامية القلب أربع غرف. توقف أي من هذه العمليات ينتج عن تشوهات القلب التنموية. وبالتالي، من المهم فهم الآليات الجزيئية الكامنة وراء تشكيل الدائرة أثناء تطوير القلب. وعلى الرغم من العديد من الدراسات السابقة في قلب التنمية، فهمنا لهذه العملية المعقدة لا يزال محدودا.
التهجين في الموقع، وإيمونوهيستوتشيميستري، وبيتا-جالاكتوسيداسي تلطيخ لاكز مراسل الفئران باستخدام قد استخدمت على نطاق واسع لدراسة تشكيل الدائرة خلال الماوس قلب التنمية بوصفها القلب محددة أو الدائرة جينات هيكلية محددة أو البروتينات (مثل Nppa، تفيي الانقلاب، Irx4، 2a حركة تحرير الكونغو وحركة تحرير الكونغو-2v)3،4،5،6،،من78،9،10. ومع ذلك، تتطلب هذه التجارب باستخدام أجنة الفأر قدرا كبيرا من الوقت والخبرة، نظراً لأن العديد من الخطوات التجريبية المختلفة يجب أن تكون إجراء التسلسل11. هنا، يمكننا وصف أسلوب الفحص المجهري ابيفلوريسسينت جبل كله بسيطة لتصور البطينين النامية استخدام الأجنة تشريح من حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو مراسل تدق في الفئران12. وميزة هذا الأسلوب مقارنة بالأساليب المستخدمة سابقا هو تجنب الخطوات التجريبية المعقدة التي غالباً ما قد تخلق اختلافات التجريبية. والغرض الرئيسي من هذا البروتوكول لوصف كيفية تشريح الأجنة الماوس وقلوب النامية ودراسة كل مرحلة من مراحل التنمية الدائرة القلب الماوس دون تجارب histochemical مملة. يمكن تطبيق هذا الأسلوب بسهولة لتقييم التنمية القلب باستخدام مختلف خطوط الماوس المعدلة وراثيا الأخرى العلامات المبكرة علامات القلب (مثلاً، Mesp1Cre: Rosa26EYFP13، Isl1Cre: Rosa26EYFP13،14من Hcn4H2BGFP، Hcn4Cre: روزا طن متري /mG14، Nkx2-5Cre: روزا mT/ملغ14، Hcn4-اجفب15، Isl1Cre: روزا mT/ملغ14، Nkx2.5Cre: Rosa26tdTomato15، والفئران16 TgMef2c-أف-التجارة والنقل).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:647px;" width="647">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">MZ125</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">DNA ladder (100 bp)</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">epifluorescence dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M165 FC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">GoTaq Green master Mix</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">M712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PCR machine (master cycler)</td>
			<td style="width:83px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">6336000023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence

والهدف من هذا البروتوكول وصف طريقة لتشريح الأجنة الماوس والتصور للدوائر البطين الجنينية الماوس أثناء تطوير قلب بطيني مراسل الفلورسنت محددة تدق في الفئران (الفئران حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو) باستخدام. قلب التنمية ينطوي على تشكيل أنبوب قلب خطي وأنبوب القلب حلقات أربعة الدائرة سيبتيشن. الغاية هي حفظت هذه العمليات المعقدة في جميع الفقاريات. قلب الجنينية الماوس تستخدم على نطاق واسع للدراسات الإنمائية القلب. نظراً لحجمها صغير للغاية، تشريح قلوب الجنينية الماوس غير تحديا من الناحية التقنية. وباﻹضافة إلى ذلك، التصور لتشكيل دائرة القلب وكثيراً ما يحتاج في الموقع التهجين، بيتا-جالاكتوسيداسي التلوين باستخدام لاكز مراسل الفئران، أو إيمونوستينينج من قلوب الجنينية مقطعة. هنا، نحن تصف كيفية تشريح قلوب الجنينية الماوس ومباشرة وضع تصور لتشكيل الدائرة البطين من حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو الفئران باستخدام الفحص المجهري كله جبل ابيفلوريسسينت. بهذه الطريقة، من الممكن مباشرة دراسة تشكيل أنبوب القلب وحلقات، وتشكيل الدائرة الأربع دون مزيد من التلاعب التجريبية للأجنة الماوس. على الرغم من أن يستخدم السطر الماوس في ضرب مراسل حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو في هذا البروتوكول كمثال، يمكن تطبيق هذا البروتوكول على خطوط الماوس المعدلة وراثيا مراسل الفلورسنت الخاصة بالقلب الأخرى.

أثناء تطوير القلب، تعتبر حركة تحرير الكونغو-2v علامة أقرب للدائرة البطين مواصفات17. كما هو مبين في الشكل 1، نحن تشريح الأجنة كله الماوس وقلوب الجنينية من حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو مراسل تدق في الفئران ودراسة حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو ا?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

نقدم البروتوكولات لدراسة التنمية قلب الماوس باستخدام الفحص المجهري كله جبل ابيفلوريسسينت على الأجنة الماوس تشريح من البطين محددة حركة تحرير الكونغو-2v-تدتوماتو مراسل تدق في الفئران. هذا الأسلوب يسمح لنا بتصور كل مرحلة تشكيل البطين خلال الماوس قلب التنمية دون أساليب histochemical كثيفة العمالة مباشرة.

تحليل لتطوير دائرة القلب أثناء Embryogenesis الماوس باستخدام كامل جبل ابيفلوريسسينسي

The goal of this protocol is to describe a method for the dissection of mouse embryos and visualization of embryonic mouse ventricular chambers during ...

باستخدام هذه الطريقة يمكننا اختبار تكوين أنبوب القلب مباشرة ، وال حلقات ، وتشكيل غرفة كاملة دون مزيد من التلاعب التجريبية من جنين الماوس. على الرغم من أننا نستخدم MLC-2v-tdTomato الفئران كمثال على ذلك، يمكن استخدام هذه الطريقة البسيطة على نطاق واسع مع خطوط الماوس مراسل الفلورسنت الأخرى. الميزة الرئيسية لهذا البروتوكول هو أنه بسيط جدا ولا يتطلب أي تقنيات معقدة أو معدات.ويمكن أن يؤديها في إعداد مختبر العادية. بعد التزاوج الإناث مع الفئران الذكور، سواء MLC-2v-tdTomato 8 إلى 10 أسابيع من العمر، والتحقق من السدود لمقابس المهبل كل صباح. وضع السدود الحوامل, القتل الرحيم في أيام مختلفة بعد coitum, في موقف supine ورش البطن مع 70٪ الإيثانول.استخدام مقص الجراحية الحادة والملقط لفتح تجويف البطن عن طريق شق من كل من الجلد وجدار البطن. بعد تحديد مواقع قرون الرحم الثنائية في الجزء الظهري من تجويف البطن ، قم بفصل الرحم بأكمله باستخدام مقص جراحي حاد وملقط لقطع بعناية فوق oviducts على كلا الجانبين. ضع الرحم الكامل المُشَرَّح في طبق بتري طوله 10 سنتيمترات مع PBS بارد.باستخدام مقص جراحية حادة والملقط، وفصل بعناية كل كيس السلوي على طول قرن الرحم. استخدم ملاقط لنقل كل جنين إلى لوحة ثقافة 35 ملليمتر مليئة بـ PBS البارد. باستخدام مقص وجراحي حاد، وفتح كيس السلوي وفضح كل جنين عن طريق قطع الحبل السري ومن ثم تقليم الأنسجة الجنينية اضافية قدر الإمكان دون الإضرار الأجنة.تحت مجهر تشريح مع الألياف البصرية المجهر الإضاءة، وقطع رأس الجنين ونقله إلى أنبوب 1.5 ملليلتر مع 100 ميكرولترات من العازلة A لgenotyping في وقت لاحق لربط مع نتائج التصوير epifluorescent. باستخدام ملقط غرامة، وفتح صدر الجنين. مع مقص جراحي حاد وملقط، وإزالة القلب بعيدا عن الرئتين والأوعية الدموية.استخدام ملاقط لنقل القلب الجنينية تشريح في لوحة ثقافة 35 ملليمتر مع برنامج تلفزيوني. ضع الطبق مع قلوب جنينية الماوس تحت مجهر تشريح الفرجورات. استخدام ملقط غرامة لوضع قلوب الجنينية بحيث البطينين النامية تواجه الفاحص.اضبط التركيز باستخدام هدف 0.63x في وضع الحقل الساطع. التقط التعرض في المجال الساطع والتقاط صور متعددة. لتصور التعبير tdTomato، إيقاف الإضاءة المجهر الألياف البصرية وتعيين مرشح لفلوريسنس الأحمر.إعادة التركيز على الصورة إذا لزم الأمر، وضبط السطوع والتباين، واتخاذ التعرض الفلورسنت الحمراء، والتقاط صور متعددة. بالنسبة للجنينات، قم بغلي عينات الرأس المعزولة سابقًا في المخزن المؤقت A عند 100 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة. جهاز طرد مركزي لمدة دقيقتين في 11، 360 مرات G.Transfer 20 ميكرولترات من عظمى إلى أنبوب جديد 1.5 ملليلتر مع 20 ميكرولترات من العازلة B ومزيج.استخدام 4.5 ميكرولترات من supernatant مختلطة كقالب الحمض النووي والجمع بين ذلك مع 0.5 ميكرولترات من كل من 10 micromolar محددة إلى الأمام وايبائة عكسها، 10 ميكرولترات من 2x premixed البوليمرات والعازل التفاعل ومن ثم إضافة الماء إلى حجم إجمالي قدره 20 ميكرولتر. تشغيل PCR كما هو موضح في المخطوطة. تحميل التفاعل الانتهاء في 100 سلم الحمض النووي زوج قاعدة على هلام agarose 1٪وتشغيلها في 140 فولت في 1x TAE العازلة لمدة 25 دقيقة.ضع الجل المكتمل على ترانيلوميناتوريناتور الأشعة فوق البنفسجية واشعل ضوء الأشعة فوق البنفسجية لتحديد نطاقات الحمض النووي. ويعتبر MLC-2V ليكون أقرب علامة لمواصفات غرفة البطين أثناء تطور القلب. في MLC-2v-tdTomato مراسل طرق في الفئران، والتعبير ضعيفة نسبيا من tdTomato في أنبوب القلب الخطي في E8.0 يصبح أقوى في E8.5 كما هو مبين باستخدام كامل جبل التصوير الظهارية من الأجنة.باستخدام كامل جبل تصوير التحلل من القلب تشريح، يمكن بسهولة تحديد تشكيل غرفة البطين أثناء تطوير القلب الماوس. في القلب تشريح من جنين الماوس كله في E10.5، تم عرض التعبير مراسل MLC-2v-tdTomato في الجزء البطيني من القلب وليس في المسالك الداخلية، المسالك الخارجة، أو الأذين المستقبل. في E12.5 إلى E13.5، يتم التعبير عن مراسل tdTomato حصريا في البطينين من القلب أربع غرف.وقد ظهر نمط التعبير الخاص بالبطين المماثل في جنين الفأرة المُشرَّح في E16.5. بعد التصوير كله، تم تحديد النمط الجيني للأجنة باستخدام مجموعتين من التمهيديات لـ PCR genotyping، مما يؤكد الأجنة المتجانسة التي تحمل الأليلية، غير المتروزيغو، والأجنة البرية. هذا الأسلوب هو جميلة بسيطة وبسيطة لتنفيذ.الخطوة الحاسمة هي تشريح القلوب الجنينية. فهم تشريح القلب أثناء تطور القلب ضروري لعزل القلب بنجاح عن الجنين بأكمله.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

الأمثل<em&gt; السابقين البيضة</em&gt; التثقيف من الفرخ الأجنة إلى مراحل متقدمة من التطوير

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

تحليل التنمية Cardiomyocyte باستخدام المناعي في القلب الجنينية الماوس

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

باستخدام<em&gt; السابقين فيفو</em&gt; الثقافات تستقيم القطرة من الجامعة الجنين هيئات لدراسة العمليات التنموية خلال الماوس توالد

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Organ Culture and Whole Mount Immunofluorescence Staining of Mouse Wolffian Ducts

هيئة الثقافة والجامع جبل المناعي تلون ماوس وولف القنوات

Tubal morphogenesis is a fundamental requirement for the development of most mammalian organs, including the male reproductive system. The epididymis, an ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

تحليل كمي الجامع-جبل الفلورة السكان السلف القلب في الأجنة الماوس

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

كله جبل الفلورة وتقدير جريب المبايض الماوس مثقف

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

أسلوب الثقافة أورجانوتيبيك لدراسة تطوير الأنسجة الجنينية الدجاج

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

تصور بالعقدة ولوحة نوتوتشوردال في جاسترولاتينج الأجنة الماوس باستخدام الميكروسكوب الإلكتروني المسح وكله جبل الفلورة

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

التصور "ناصف العين العليا" خلال Embryogenesis ريريو دانيو

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

الليزر التقاط ميكروتشريح الغضروف الجنيني الماوس والعظام لتحليل التعبير الجيني

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...