Name: analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence
Uploaded: 2019-04-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Dit werk werd gesteund door de NIH R03 HL140264 (Y.-J. N) en Gilead Sciences Research Scholar Program (Y.-J. N).

Alle dierlijke procedures werden uitgevoerd met de goedkeuring van de Vanderbilt University Medical Center institutionele Animal Care en gebruik Comité.
1. de embryo's worden verzameld en dissectie muis
<ol><li>8-10 week oude vrouwelijke MLC-2v-tdTomato+/- muizen met 8-10 week oude mannelijke MLC-2v-tdTomato+/- muizen te verkrijgen van MLC-2v-tdTomato mate+/ +, MLC-2v-tdTomato+/- en MLC-2v-tdTomato- / - embryo's.</li>
	<li>Controleer de...

<ol>
	<li>Evans, S. M., Yelon, D., Conlon, F. L., Kirby, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+lineage+development.">Myocardial lineage development.</a> Circulation Research. 107 (12), 1428-1444 (2010).</li><li>Paige, S. L., Plonowska, K., Xu, A., Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+cardiomyocyte+differentiation.">Molecular regulation of cardiomyocyte differentiation.</a> Circulation Research. 116 (2), 341-353 (2015).</li><li>Lee, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+light+chain-2+luciferase+transgenic+mice+reveal+distinct+regulatory+programs+for+cardiac+and+skeletal+muscle-specific+expression+of+a+single+contractile+protein+gene.">Myosin light chain-2 luciferase transgenic mice reveal distinct regulatory programs for cardiac and skeletal muscle-specific expression of a single contractile protein gene.</a> Journal of Biological Chemistry. 267 (22), 15875-15885 (1992).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+requirement+of+myosin+light+chain+2v+in+embryonic+heart+function.">Selective requirement of myosin light chain 2v in embryonic heart function.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (2), 1252-1256 (1998).</li><li>Ross, R. S., Navankasattusas, S., Harvey, R. P., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HF-1a/HF-1b/MEF-2+combinatorial+element+confers+cardiac+ventricular+specificity+and+established+an+anterior-posterior+gradient+of+expression.">An HF-1a/HF-1b/MEF-2 combinatorial element confers cardiac ventricular specificity and established an anterior-posterior gradient of expression.</a> Development. 122 (6), 1799-1809 (1996).</li><li>Christoffels, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+formation+and+morphogenesis+in+the+developing+mammalian+heart.">Chamber formation and morphogenesis in the developing mammalian heart.</a> Dev Biol. 223 (2), 266-278 (2000).</li><li>Wu, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+identity+is+determined+by+a+COUP-TFII+regulatory+network.">Atrial identity is determined by a COUP-TFII regulatory network.</a> Developmental Cell. 25 (4), 417-426 (2013).</li><li>Nelson, D. O., Jin, D. X., Downs, K. M., Kamp, T. J., Lyons, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irx4+identifies+a+chamber-specific+cell+population+that+contributes+to+ventricular+myocardium+development.">Irx4 identifies a chamber-specific cell population that contributes to ventricular myocardium development.</a> Developmental Dynamics. 243 (3), 381-392 (2014).</li><li>Bao, Z. Z., Bruneau, B. G., Seidman, J. G., Seidman, C. E., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chamber-specific+gene+expression+in+the+developing+heart+by+Irx4.">Regulation of chamber-specific gene expression in the developing heart by Irx4.</a> Science. 283 (5405), 1161-1164 (1999).</li><li>Kubalak, S. W., Miller-Hance, W. C., O'Brien, T. X., Dyson, E., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+specification+of+atrial+myosin+light+chain-2+expression+precedes+septation+during+murine+cardiogenesis.">Chamber specification of atrial myosin light chain-2 expression precedes septation during murine cardiogenesis.</a> Journal of Biological Chemistry. 269 (24), 16961-16970 (1994).</li><li>Bardot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TAF10-containing+TFIID+and+SAGA+transcriptional+complexes+are+dispensable+for+early+somitogenesis+in+the+mouse+embryo.">The TAF10-containing TFIID and SAGA transcriptional complexes are dispensable for early somitogenesis in the mouse embryo.</a> Development. 144 (20), 3808-3818 (2017).</li><li>Zhang, Z., Nam, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+MLC-2v-tdTomato+knock-in+reporter+mouse+line.">Generation of MLC-2v-tdTomato knock-in reporter mouse line.</a> Genesis. , (2018).</li><li>Ieda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+functional+cardiomyocytes+by+defined+factors.">Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.</a> Cell. 142 (3), 375-386 (2010).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN4+dynamically+marks+the+first+heart+field+and+conduction+system+precursors.">HCN4 dynamically marks the first heart field and conduction system precursors.</a> Circulation Research. 113 (4), 399-407 (2013).</li><li>Nam, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+diverse+cardiac+cell+types+by+reprogramming+fibroblasts+with+cardiac+transcription+factors.">Induction of diverse cardiac cell types by reprogramming fibroblasts with cardiac transcription factors.</a> Development. 141 (22), 4267-4278 (2014).</li><li>Spater, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HCN4++cardiomyogenic+progenitor+derived+from+the+first+heart+field+and+human+pluripotent+stem+cells.">A HCN4+ cardiomyogenic progenitor derived from the first heart field and human pluripotent stem cells.</a> Nature Cell Biology. 15 (9), 1098-1106 (2013).</li><li>O'Brien, T. X., Lee, K. J., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+specification+of+ventricular+myosin+light+chain+2+expression+in+the+primitive+murine+heart+tube.">Positional specification of ventricular myosin light chain 2 expression in the primitive murine heart tube.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (11), 5157-5161 (1993).</li></ol>

De hier beschreven methode is relatief eenvoudig te onderzoeken ventriculaire kamer ontwikkeling, zonder arbeidsintensieve experimenten om label ventriculaire of cardiale-specifieke structurele genen of eiwitten uit te voeren. Dus, deze methode minimaliseert technische variabiliteiten die vaak in immunostained hart secties gevonden werden.
Er zijn twee belangrijke stappen voor het succesvol uitvoeren van deze methode, met inbegrip van precieze schatting van de embryonale leeftijd van muizen en...

De formatie van de kamer tijdens de ontwikkeling van het hart is een complex proces dat overstappen via verschillende morfologisch verschillende embryonale fasen1,2. De halve maan vorm van cardiale voorlopercellen bevolking vormt een lineaire hart buis en vervolgens ondergaat rek en looping vormen de spiraalvorm van de ontwikkelingslanden hart. Na haar septation proces, het derde hart omgevormd tot het 4-chambered hart. Onderbreking van om het even welk van deze processen resulteert in developmental hartafwijkingen. Het is dus belangrijk om te begrijpen van de moleculaire mechanismen die ten grondslag liggen aan de vorming van de kamer tijdens de ontwikkeling van het hart. Ondanks talrijke eerdere studies over hart ontwikkeling blijft ons begrip van dit complexe proces beperkt.
Kruising in situ, immunohistochemistry, en beta-galactosidase kleuring met behulp van LacZ verslaggever muizen zijn wijd gebruikt om te bestuderen van de vorming van de kamer tijdens de ontwikkeling van de hart van de muis door labeling cardiale specifieke of kamer specifieke structurele genen of eiwitten (bijvoorbeeld Nppa, Coup-TFII, Irx4, MLC-2a en MLC-2v)3,4,5,6,7,8,9,10. Echter, deze experimenten met behulp van de muis embryo's vereist heel wat tijd en deskundigheid, omdat meerdere verschillende experimentele stappen moeten worden uitgevoerd achtereenvolgens11. Hier beschrijven we een eenvoudige hele mount epifluorescerende microscopie methode om te visualiseren de ontwikkelende ventrikels gebruik van embryo's van MLC-2v-tdTomato verslaggever knock-in muizen12ontleed. Het voordeel van deze methode ten opzichte van eerder gebruikte methoden is om te voorkomen dat complexe experimentele stappen die vaak experimentele varianten kunnen maken. Het hoofddoel van dit protocol is te beschrijven hoe te muis embryo's en ontwikkelende harten ontleden en te onderzoeken elke ontwikkelingsfase muis cardiale kamer zonder vervelende histochemische experimenten. Deze methode kan gemakkelijk worden toegepast om te beoordelen hart ontwikkelen met behulp van verschillende andere transgene muis lijnen labeling van vroege cardiale markeringen (bijvoorbeeld, Mesp1Cre: Rosa26EYFP13, Isl1Cre: Rosa26EYFP13, Hcn4H2BGFP14, Hcn4Cre: Rosa mT /mG14, Nkx2-5Cre: Rosa mT/mG14, Hcn4-eGFP15, Isl1Cre: Rosa mT/mG14, Nkx2.5Cre: Rosa26tdTomato15, en TgMef2c-AHF-GFP16 muizen).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:647px;" width="647">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">MZ125</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">DNA ladder (100 bp)</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">epifluorescence dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M165 FC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">GoTaq Green master Mix</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">M712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PCR machine (master cycler)</td>
			<td style="width:83px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">6336000023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence

Het doel van dit protocol is voor het beschrijven van een methode voor de dissectie van muis embryo's en visualisatie van muis embryonale ventriculaire kamers tijdens hart ontwikkelen met behulp van ventriculaire specifieke fluorescerende verslaggever knock-in muizen (MLC-2v-tdTomato muizen). Hart ontwikkeling betekent een lineaire hart buis formatie, hart buis looping, en vier kamer septation. Deze complexe processen zijn zeer bewaard in alle gewervelden. De muis embryonale hart is wijd verbeid gebruikt voor hart developmental studies. Vanwege hun extreem kleine grootte is ontrafeling van muis embryonale harten echter technisch uitdagende. Bovendien moet de visualisatie van cardiale kamer vorming vaak in situ hybridisatie, beta-galactosidase kleuring met LacZ verslaggever muizen of immunokleuring van verdeelde embryonale harten. Hier beschrijven we hoe om te ontleden van muis embryonale harten en direct visualiseren ventriculaire kamer vorming van MLC-2v-tdTomato muizen met behulp van microscopie van de hele berg epifluorescerende. Met deze methode is het mogelijk direct onderzoeken hart buis vorming en in een lus, en vier kamer vorming zonder verdere experimentele manipulatie van muis embryo's. Hoewel de MLC-2v-tdTomato verslaggever knock-in muis lijn als een voorbeeld in dit protocol wordt gebruikt, kan dit protocol worden toegepast op andere hart-specifieke fluorescerende verslaggever transgene muis lijnen.

Tijdens de ontwikkeling van het hart, MLC-2v wordt beschouwd als de vroegste markering voor ventriculaire zaal specificatie17. Zoals afgebeeld in Figuur 1, we ontleed muis hele embryo's en embryonale harten van MLC-2v-tdTomato verslaggever knock-in muizen en onderzocht MLC-2v-tdTomato verslaggever expressie tijdens de ontwikkeling van het hart. MLC-2v-tdTomato verslaggever knock-in muizen, constitutief tdTomato expressie in de ontwikke...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

We presenteren de protocollen te onderzoeken muis hart ontwikkelen met behulp van microscopie van de hele berg epifluorescerende op muis embryo's ontleed van ventriculaire specifieke MLC-2v-tdTomato verslaggever knock-in muizen. Deze methode laat ons direct visualiseren van elke fase van de ventriculaire formatie tijdens de ontwikkeling van de hart van de muis zonder arbeidsintensieve histochemische methoden.

Analyse van de ontwikkeling van de cardiale kamer tijdens muis embryogenese met hele Mount Epifluorescence

The goal of this protocol is to describe a method for the dissection of mouse embryos and visualization of embryonic mouse ventricular chambers during ...

Met behulp van deze methode kunnen we direct onderzoek hartbuis vorming, looping, en volledige kamervorming zonder verdere experimentele manipulaties van de muis embryo. Hoewel we MLC-2v-tdTomato muizen als voorbeeld gebruiken, kan deze eenvoudige methode op grote schaal worden gebruikt met andere tl-verslaggeversmuislijnen. Het belangrijkste voordeel van dit protocol is dat het zeer eenvoudig is en geen complexe technieken of apparatuur vereist.Het kan worden uitgevoerd op regelmatige lab instelling. Na de paring vrouwtje met mannelijke muizen, zowel MLC-2v-tdTomato 8 tot 10 weken oud, controleer de dammen voor vaginale pluggen elke ochtend. Leg de zwangere dammen, geëuthanaseerd op verschillende dagen na coitum, in supine positie en spray de buik met 70%ethanol.Gebruik scherpe chirurgische schaar en tangen om de buikholte te openen door incisie van zowel de huid en buikwand. Na het lokaliseren van bilaterale baarmoederhoorns in het dorsale deel van de buikholte, scheid de hele baarmoeder met behulp van scherpe chirurgische schaar en tangen om zorgvuldig te snijden boven de oviducts aan beide zijden. Plaats de hele ontleed baarmoeder in een petrischaaltje van 10 centimeter met ijskoude PBS.Met behulp van scherpe chirurgische schaar en tang, zorgvuldig scheiden elke vruchtzak langs de baarmoeder hoorn. Gebruik een pincet om elk embryo over te brengen naar een 35 millimeter kweekplaat gevuld met ijskoude PBS. Met behulp van scherpe chirurgische schaar en tangen, open een vruchtzak en bloot elk embryo door het afsnijden van de navelstreng en vervolgens trim extra embryonale weefsels zoveel mogelijk zonder beschadiging van de embryo's.Onder een ontleden microscoop met een glasvezelmicroscoop verlichting, afgesneden van het hoofd van het embryo en breng het naar een 1,5 milliliter buis met 100 microliter buffer A voor later genotyping te correleren met de resultaten van epifluorescente beeldvorming. Open met fijne tangen de borst van het embryo. Verwijder met een scherpe chirurgische schaar en tang het hart weg van de longen en vasculatuur.Gebruik een pincet om het ontleed embryonale hart over te brengen naar een 35 millimeter kweekplaat met PBS. Plaats de plaat met muis embryonale harten onder een epifluorescent ontleden microscoop. Gebruik fijne tangen om de embryonale harten zodanig te positioneren dat de ontwikkeling van ventrikels worden geconfronteerd met de examinator.Pas de focus aan met een doelstelling van 0,63x in de modus Helderveld. Neem belichtingen op fel veld en leg meerdere beelden vast. Om tdTomato expressie te visualiseren, zet een glasvezel microscoop verlichting en stel het filter voor rode fluorescentie.Pas de scherpstelling van het beeld indien nodig aan, pas de helderheid en het contrast aan, maak rood fluorescerende belichtingen en leg meerdere beelden vast. Voor embryogenobunt kook u eerder geïsoleerde hoofdmonsters in buffer A bij 100 graden Celsius gedurende 30 minuten. Centrifuge gedurende twee minuten op 11, 360 keer G.Transfer 20 microliter supernatant in een nieuwe 1,5 milliliter buis met 20 microliter buffer B en meng.Gebruik 4,5 microliter van de gemengde supernatant als DNA-sjabloon en combineer het met 0,5 microliter van elk van de 10 micromolar-specifieke voorwaartse en omgekeerde primers, 10 microliter van 2x-voorgemengde polymerase en reactiebuffer en voeg vervolgens water toe aan een totaal volume van 20 microliter. Voer een PCR uit zoals beschreven in het manuscript. Laad de voltooide reactie in 100 base pair DNA ladder op een 1%agarose gel en loop op 140 volt in 1x TAE buffer gedurende 25 minuten.Plaats de voltooide gel op een UV-transilluminator en zet het UV-licht aan om de DNA-banden te identificeren. MLC-2v wordt beschouwd als de vroegste marker voor ventriculaire kamer specificatie tijdens de ontwikkeling van het hart. In MLC-2v-tdTomato reporter knock-in muizen, relatief zwakke expressie van tdTomato in de lineaire hartbuis op E8.0 wordt sterker op E8.5 zoals aangetoond met behulp van hele-mount epiflourescent beeldvorming van de embryo's.Met behulp van hele-mount epiflourescent beeldvorming van het ontleed hart, ventriculaire kamervorming tijdens de ontwikkeling van het muishart kan gemakkelijk worden bepaald. In het ontleed hart van een heel muizenembryo op E10.5, werd MLC-2v-tdTomato reporter expressie getoond in het ventriculaire gedeelte van het hart en niet in de instroom, het uitstroomkanaal of de toekomstige atria. Op E12.5 tot E13.5, tdTomato verslaggever wordt uitsluitend uitgedrukt in de ventrikels van de vier-chambered hart.Het vergelijkbare ventriculaire-specifieke expressiepatroon werd getoond in het ontleedmuisembryo op E16.5. Na hele beeldvorming werd het genotype van de embryo's bepaald met behulp van twee sets primers voor PCR-genotyping, die homozygoot embryo's met het tdTomato-knock-in-allel, heterozygoot en de wild-type embryo's bevestigden. Deze methode is vrij eenvoudig en eenvoudig uit te voeren.De kritieke stap is het ontleden van embryonale harten. Inzicht in cardiale anatomie tijdens de hartontwikkeling is noodzakelijk om het hart met succes te isoleren van het hele embryo.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Geoptimaliseerd<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Het kweken van kippenembryo&#39;s tot geavanceerde stadia van ontwikkeling

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

Analyse van Cardiomyocyte Development behulp Immuunfluorescentie in Embryonale Muis Hart

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Gebruik<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Upright Droplet Culturen van Whole Foetale organen Developmental processen te bestuderen tijdens Mouse Organogenese

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Organ Culture and Whole Mount Immunofluorescence Staining of Mouse Wolffian Ducts

Orgelcultuur en Whole Mount immunofluorescentiekleuring van Muis gangen van Wolff

Tubal morphogenesis is a fundamental requirement for the development of most mammalian organs, including the male reproductive system. The epididymis, an ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

Kwantitatieve geheel-mount immunofluorescentie analyse van cardiale Progenitor populaties in muis embryo 's

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

Hele Mount immunofluorescentie en follikel kwantificering van gekweekte muis eierstokken

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

Organotypic cultuur methode om te studeren van de ontwikkeling van embryonale kip weefsels

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualiseren van het knooppunt en de Notochordal plaat In Gastrulating muis embryo's met behulp van Scanning elektronen microscopie en hele Mount immunofluorescentie

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualisatie van de Superior oogbeschadigingen en/of Sulcus (hersenanatomie) tijdens Danio rerio embryogenese

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

Laser Capture Microdissectie van de muis embryonale kraakbeen en bot voor genexpressie analyse

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...