Name: analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence
Uploaded: 2019-04-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

עבודה זו נתמכה על ידי NIH R03 HL140264 (י'-ג'יי N) ותוכנית גלעד מדעי מחקר מלומד (י'-ג'יי N).

כל ההליכים בבעלי חיים בוצעו בהסכמת ראש הוועדה ואנדרבילט אוניברסיטת מרכז מוסדי חיה טיפול רפואי לשימוש.
1. עכבר ואוסף העובר לנתיחה
<ol><li>חבר MLC-2v-tdTomato נקבה שבוע 8-10+ /- עכברים עם MLC-2v-tdTomato זכר שבוע 8-10+ /- עכברים להשיג MLC-2v-tdTomato+ +, MLC-2v-tdTomato+ /- ועוברי- / - MLC-2v-t...

<ol>
	<li>Evans, S. M., Yelon, D., Conlon, F. L., Kirby, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+lineage+development.">Myocardial lineage development.</a> Circulation Research. 107 (12), 1428-1444 (2010).</li><li>Paige, S. L., Plonowska, K., Xu, A., Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+cardiomyocyte+differentiation.">Molecular regulation of cardiomyocyte differentiation.</a> Circulation Research. 116 (2), 341-353 (2015).</li><li>Lee, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+light+chain-2+luciferase+transgenic+mice+reveal+distinct+regulatory+programs+for+cardiac+and+skeletal+muscle-specific+expression+of+a+single+contractile+protein+gene.">Myosin light chain-2 luciferase transgenic mice reveal distinct regulatory programs for cardiac and skeletal muscle-specific expression of a single contractile protein gene.</a> Journal of Biological Chemistry. 267 (22), 15875-15885 (1992).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+requirement+of+myosin+light+chain+2v+in+embryonic+heart+function.">Selective requirement of myosin light chain 2v in embryonic heart function.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (2), 1252-1256 (1998).</li><li>Ross, R. S., Navankasattusas, S., Harvey, R. P., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HF-1a/HF-1b/MEF-2+combinatorial+element+confers+cardiac+ventricular+specificity+and+established+an+anterior-posterior+gradient+of+expression.">An HF-1a/HF-1b/MEF-2 combinatorial element confers cardiac ventricular specificity and established an anterior-posterior gradient of expression.</a> Development. 122 (6), 1799-1809 (1996).</li><li>Christoffels, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+formation+and+morphogenesis+in+the+developing+mammalian+heart.">Chamber formation and morphogenesis in the developing mammalian heart.</a> Dev Biol. 223 (2), 266-278 (2000).</li><li>Wu, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+identity+is+determined+by+a+COUP-TFII+regulatory+network.">Atrial identity is determined by a COUP-TFII regulatory network.</a> Developmental Cell. 25 (4), 417-426 (2013).</li><li>Nelson, D. O., Jin, D. X., Downs, K. M., Kamp, T. J., Lyons, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irx4+identifies+a+chamber-specific+cell+population+that+contributes+to+ventricular+myocardium+development.">Irx4 identifies a chamber-specific cell population that contributes to ventricular myocardium development.</a> Developmental Dynamics. 243 (3), 381-392 (2014).</li><li>Bao, Z. Z., Bruneau, B. G., Seidman, J. G., Seidman, C. E., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chamber-specific+gene+expression+in+the+developing+heart+by+Irx4.">Regulation of chamber-specific gene expression in the developing heart by Irx4.</a> Science. 283 (5405), 1161-1164 (1999).</li><li>Kubalak, S. W., Miller-Hance, W. C., O'Brien, T. X., Dyson, E., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+specification+of+atrial+myosin+light+chain-2+expression+precedes+septation+during+murine+cardiogenesis.">Chamber specification of atrial myosin light chain-2 expression precedes septation during murine cardiogenesis.</a> Journal of Biological Chemistry. 269 (24), 16961-16970 (1994).</li><li>Bardot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TAF10-containing+TFIID+and+SAGA+transcriptional+complexes+are+dispensable+for+early+somitogenesis+in+the+mouse+embryo.">The TAF10-containing TFIID and SAGA transcriptional complexes are dispensable for early somitogenesis in the mouse embryo.</a> Development. 144 (20), 3808-3818 (2017).</li><li>Zhang, Z., Nam, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+MLC-2v-tdTomato+knock-in+reporter+mouse+line.">Generation of MLC-2v-tdTomato knock-in reporter mouse line.</a> Genesis. , (2018).</li><li>Ieda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+functional+cardiomyocytes+by+defined+factors.">Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.</a> Cell. 142 (3), 375-386 (2010).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN4+dynamically+marks+the+first+heart+field+and+conduction+system+precursors.">HCN4 dynamically marks the first heart field and conduction system precursors.</a> Circulation Research. 113 (4), 399-407 (2013).</li><li>Nam, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+diverse+cardiac+cell+types+by+reprogramming+fibroblasts+with+cardiac+transcription+factors.">Induction of diverse cardiac cell types by reprogramming fibroblasts with cardiac transcription factors.</a> Development. 141 (22), 4267-4278 (2014).</li><li>Spater, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HCN4++cardiomyogenic+progenitor+derived+from+the+first+heart+field+and+human+pluripotent+stem+cells.">A HCN4+ cardiomyogenic progenitor derived from the first heart field and human pluripotent stem cells.</a> Nature Cell Biology. 15 (9), 1098-1106 (2013).</li><li>O'Brien, T. X., Lee, K. J., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+specification+of+ventricular+myosin+light+chain+2+expression+in+the+primitive+murine+heart+tube.">Positional specification of ventricular myosin light chain 2 expression in the primitive murine heart tube.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (11), 5157-5161 (1993).</li></ol>

השיטה המתוארת כאן הוא פשוט יחסית לבחון פיתוח קאמרית חדרית, מבלי לבצע ניסויים מהגידולים לתייג גנים מבני חדרית או מסוימים דום לב או חלבונים. לכן, בשיטה זו ממזערת את variabilities טכני נמצאו לעיתים קרובות בסעיפים הלב immunostained.
ישנם שני שלבים קריטיים לביצוע בהצלחה בשיטה זו כולל הערכה מ?...

תא צורה במהלך התפתחות הלב היא תהליך מורכב מעבר מיגדרי העובריים מורפולוגית ברורים מספר1,2. צורת חרמש האוכלוסייה ובתאים לב צורות צינור הלב ליניארי, ואז עובר התארכות של לולאה כדי ליצור צורת הספירלה של הלב המתפתח. לאחר תהליך septation שלה, הופכת את הלב המתפתח בלב תאיים ארבע. הפרעה של כל התהליכים האלה תוצאות התפתחותיות לב מולדים. לכן, חשוב להבין את המנגנונים המולקולריים שבבסיס היווצרות קאמרית במהלך התפתחות הלב. למרות אינספור מחקרים קודמים על פיתוח של הלב, ההבנה שלנו של תהליך מורכב זה נותר מוגבל.
היברידיזציה באתר אימונוהיסטוכימיה, ביתא-galactosidase מכתים שימוש בעכברים כתב LacZ היה בשימוש נרחב ללמוד קאמרית היווצרות במהלך התפתחות הלב עכבר על-ידי תיוג הלב ספציפי או חדר גנים ספציפיים מבנית או חלבונים (למשל, Nppa, הפיכה-TFII, Irx4, MLC-2a ו- MLC-2v)3,4,5,6,7,8,9,10. עם זאת, ניסויים אלה באמצעות העכבר עוברי דורשים זמן רב ומומחיות, כי מספר שלבים ניסיוני שונים צריך להיות המבוצעת באופן רציף11. כאן, אנו מתארים שיטה מיקרוסקופ פלורסנטי הר שלמה פשוט לדמיין החדרים המתפתח באמצעות עוברי גזור MLC-2v-tdTomato כתב טוק-אין עכברים12. היתרון של שיטה זו לעומת שיטות השתמשו בעבר היא להימנע צעדים מורכבים ניסיוני, אשר עשויים לעיתים קרובות ליצור וריאציות ניסיוני. המטרה העיקרית של פרוטוקול זה היא לתאר כיצד לנתח עוברי העכבר ולבבות המתפתח ולבחון כל שלב ההתפתחות קאמרית לב העכבר ללא ניסויים פתולוגיה מייגע. בשיטה זו ניתן להחיל בקלות כדי להעריך את התפתחות הלב באמצעות קווים העכבר הטרנסגניים שונים אחרים תיוג סמני לב מוקדם (למשל, Mesp1Cre: Rosa26EYFP13, Isl1Cre: Rosa26EYFP13, Hcn4H2BGFP14, Hcn4Cre: רוזה mT /mG14, Nkx2-5Cre: רוזה mT/mG14, Hcn4-eGFP15, Isl1Cre: mT/mG רוזה14, Nkx2.5Cre: Rosa26tdTomato15ועכברים16 TgMef2c-AHF-GFP).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:647px;" width="647">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">MZ125</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">DNA ladder (100 bp)</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">epifluorescence dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M165 FC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">GoTaq Green master Mix</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">M712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PCR machine (master cycler)</td>
			<td style="width:83px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">6336000023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence

המטרה של פרוטוקול זה היא לתאר את שיטת ניתוח העכבר עוברי והדמיה של צ'יימברס חדרית עובריים בעכבר במהלך התפתחות הלב באמצעות חדרית כתב פלורסנט ספציפי טוק-אין עכברים (עכברים MLC-2v-tdTomato). פיתוח לב כרוך צורה צינור הלב ליניארי, הצינור הלב לולאה, ארבעה septation קאמרית. אלה תהליכים מורכבים מאוד נשמרים כל גולגולת. בלב עובריים בעכבר כבר בשימוש נרחב עבור מחקרים התפתחותיים הלב. עם זאת, עקב גודלם קטן מאוד, לנתח לבבות עובריים בעכבר הוא טכנית מאתגר. בנוסף, ויזואליזציה של הלב קאמרית היווצרות לעיתים קרובות צריך היברידיזציה, ביתא-galactosidase מכתים באמצעות LacZ כתב עכברים או immunostaining הלבבות עובריים המחולקת למקטעים. כאן, אנו נתאר כיצד לנתח לבבות עובריים בעכבר והמחש ישירות קאמרית חדרית היווצרות MLC-2v-tdTomato עכברים באמצעות מיקרוסקופ פלורסנטי הר שלמה. בשיטה זו, אפשרי לבחון באופן ישיר את הלב צינור היווצרות לולאה ואת היווצרות קאמרית ארבע ללא נוסף ניסיוני מניפולציה של העכבר עוברי. למרות הקו MLC-2v-tdTomato כתב בטוק העכבר נמצא בשימוש פרוטוקול זה כדוגמה, פרוטוקול זה ניתן להחיל קווים העכבר הטרנסגניים אחרים כתב פלורסנט הלב ספציפיים.

במהלך התפתחות הלב, MLC-2v נחשב להיות הסמן המוקדם ביותר של הקאמרית חדרית מפרט17. כמתואר באיור1, אנחנו גזור את העוברים כל של העכבר ולבבות עובריים מן הכתב MLC-2v-tdTomato טוק-אין עכברים ובחן MLC-2v-tdTomato ביטוי כתב במהלך התפתחות הלב. בעכברים MLC-2v-tdTomato כתב בטוק, בי?...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

אנו מציגים את הפרוטוקולים לבחון התפתחות הלב העכבר באמצעות מיקרוסקופ פלורסנטי הר שלם על העכבר עוברי גזור מן חדרית ספציפי MLC-2v-tdTomato כתב טוק-אין עכברים. שיטה זו מאפשרת לנו לבצע בכל שלב של היווצרות חדרית במהלך התפתחות הלב העכבר מבלי מהגידולים שיטות מעבדה הומנית.

ניתוח התפתחות קאמרית הלב במהלך מופרה העכבר באמצעות כל הר Epifluorescence

The goal of this protocol is to describe a method for the dissection of mouse embryos and visualization of embryonic mouse ventricular chambers during ...

באמצעות שיטה זו אנו יכולים ישירות בדיקה היווצרות צינור הלב, לולאה, היווצרות תא מלא ללא מניפולציות ניסיוניות נוספות של עובר העכבר. אמנם, אנו משתמשים MLC-2v-tdTomato עכברים כדוגמה, שיטה פשוטה זו יכולה להיות בשימוש נרחב עם קווי עכבר כתב פלואורסצנטי אחרים. היתרון העיקרי של פרוטוקול זה הוא שזה פשוט מאוד ואינו דורש שום טכניקות מורכבות או ציוד.זה יכול להתבצע בהגדרת מעבדה רגילה. לאחר הזדווגות נקבה עם עכברים זכרים, שניהם MLC-2v-tdTomato 8 עד 10 שבועות, לבדוק את הסכרים עבור תקעים בנרתיק בכל בוקר. הניחו את הסכרים ההריונים, המתת דם בימים שונים לאחר הקוטום, בתמרורי סופין וריסוס הבטן עם 70% אתנול.השתמש מספריים כירורגיים חדים מדפים כדי לפתוח את חלל הבטן על ידי חתך של העור והן את דופן הבטן. לאחר איתור קרני רחם דו-צדדיות בחלק הגבי של חלל הבטן, הפרד את הרחם כולו באמצעות מספריים כירורגיים חדים ומדפים לחתוך בזהירות מעל oviducts משני הצדדים. מניחים את הרחם כולו נותח בצלחת פטרי 10 ס"מ עם PBS קר כקרח.באמצעות מספריים כירורגיים חדים ומלקחיים, בזהירות להפריד כל שאק מי המיצוק לאורך קרן הרחם. השתמש פינצטה כדי להעביר כל עובר לתוך צלחת תרבות 35 מילימטר מלא PBS קר כקרח. באמצעות מספריים ומלקחיים כירורגיים חדים, פתח את שיכר מי המיצוק וחשוף כל עובר על ידי ניתוק חבל הטבור ולאחר מכן לקצץ רקמות עובריות נוספות ככל האפשר מבלי לפגוע בעוברים.תחת מיקרוסקופ ניתוח עם מאיר מיקרוסקופ סיבים אופטיים, לחתוך את ראשו של העובר ולהעביר אותו צינור 1.5 מיליליטר עם 100 microliters של חיץ A עבור genotyping מאוחר יותר כדי לתאם עם התוצאות של הדמיה epifluorescent. באמצעות מדפים עדין, לפתוח את החזה של העובר. עם מספריים כירורגיים חדים ומדפים, להסיר את הלב מן הריאות ואת כלי הדם.השתמש פינצטה כדי להעביר את הלב העוברי נותק לתוך צלחת תרבות 35 מילימטר עם PBS. מניחים את הצלחת עם לבבות עובריים עכבר תחת מיקרוסקופ ניתוח epifluorescent. השתמש במטלות עדין כדי למקם את הלבבות העובריים כך פיתוח החדרים פונים הבוחן.התאם את המוקד באמצעות מטרה של 0.63x במצב שדה בהיר. צלף חשיפות של שדות בהירים וללכוד תמונות מרובות. כדי לדמיין ביטוי tdTomato, כבה מאיר מיקרוסקופ סיבים אופטיים והגדר את המסנן עבור פלואורסצנטיות אדומה.התאימו מחדש את התמקדות התמונה במידת הצורך, התאימו את הבהירות והניגודיות, צלמו חשיפות פלואורסצנטיות אדומות ולכדו תמונות מרובות. עבור genotyping עובר, להרתיח דגימות ראש מבודדות בעבר במאגר A ב 100 מעלות צלזיוס במשך 30 דקות. צנטריפוגה במשך שתי דקות ב 11, 360 פעמים G.Transfer 20 microliters של על טבעי לתוך צינור חדש 1.5 מיליליטר עם 20 microliters של חיץ B ומערבבים.השתמש 4.5 microliters של supernatant מעורב כתבנית DNA ולשלב אותו עם 0.5 microliters של כל אחד 10 מיקרומולרים ספציפיים קדימה והפכו פריימרים, 10 microliters של פולימראז 2x-premixed ומאגר תגובה ולאחר מכן להוסיף מים לנפח כולל של 20 microliters. הפעל PCR כמתואר בכתב היד. לטעון את התגובה הושלמה 100 סולם DNA זוג בסיס על 1% ג'ל agarose ולהפעיל ב 140 וולט ב 1x TAE חיץ במשך 25 דקות.מניחים את הג'ל שהושלם על טרנסילומינטור UV ולהדליק את אור UV כדי לזהות את להקות DNA. MLC-2v נחשב הסמן המוקדם ביותר עבור מפרט התא חדרי במהלך התפתחות הלב. ב MLC-2v-tdTomato כתב לדפוק בעכברים, ביטוי חלש יחסית של tdTomato בצינור הלב ליניארי ב E8.0 מתחזק ב E8.5 כפי שמוצג באמצעות הדמיה אפיפלורסנטית כל הר של העוברים.באמצעות הדמיה אפיפלורסנטית כולה של הלב המנותק, ניתן לקבוע בקלות היווצרות תא חדרית במהלך התפתחות לב העכבר. בלב המנותח של עובר עכבר שלם ב- E10.5, ביטוי הכתב MLC-2v-tdTomato הוצג בחלק החדרי של הלב ולא בדרכי הזרימה, בדרכי הזרימה או באטריה העתידית. ב E12.5 כדי E13.5, כתב tdTomato בא לידי ביטוי באופן בלעדי בחדרי הלב ארבעה תאים.תבנית הביטוי הדומה ספציפית חדרית הוצגה בעובר העכבר המנותק ב- E16.5. לאחר הדמיה שלמה, גנוטיפ של העוברים נקבע באמצעות שני סטים של פריימרים עבור PCR genotyping, המאשר עוברים הומוזיגים הנושאים את אלל דפיקות tdTomato, הטרוזיגים, ואת העוברים מסוג פראי. שיטה זו היא די פשוטה ופשוטה לביצוע.הצעד הקריטי הוא לנתח לבבות עובריים. הבנת אנטומיה לבבית במהלך התפתחות הלב יש צורך לבודד בהצלחה את הלב מן העובר כולו.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

מותאם באופן מיטבי<em&gt; Ex-אובו</em&gt; Culturing של Chick עוברים לשלבים מתקדמים של פיתוח

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

ניתוח של Cardiomyocyte פיתוח באמצעות Immunofluorescence בלב העכבר עוברי

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

שימוש<em&gt; Ex Vivo</em&gt; תרבויות הזקופה טיפה של איברים העובר שלמים לחקר תהליכים התפתחותיים בעכבר organogenesis

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Organ Culture and Whole Mount Immunofluorescence Staining of Mouse Wolffian Ducts

תרבות איברים שלמים הר Immunofluorescence מכתים של עכבר Wolffian צינוריות

Tubal morphogenesis is a fundamental requirement for the development of most mammalian organs, including the male reproductive system. The epididymis, an ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

ניתוח כמותי Immunofluorescence כולה-הר של אוכלוסיות לב ב העכבר עוברי

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

Immunofluorescence הר שלמה, זקיק כימות של השחלות תרבותי. העכבר

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

שיטת Organotypic תרבות ללמוד על התפתחות עובריים עוף רקמות

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

להמחיש את צומת ואת צלחת Notochordal Gastrulating עוברי העכבר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סריקה כל הר Immunofluorescence

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

ויזואליזציה של Sulcus עינית הממונה במהלך מופרה רזבורה rerio

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

לכידת לייזר מיקרו חיתוך של העכבר סחוס ועצם עבור ניתוח ביטוי גנים

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...