Name: analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence
Uploaded: 2019-04-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Detta arbete stöds av NIH R03 HL140264 (Y.-J. (N) och Gilead Sciences Research Scholar Program (Y.-J. (N).

Alla djur förfaranden utfördes med godkännande från Vanderbilt University Medical Center institutionella Animal Care och användning kommittén.
1. mus embryosamlingsgrupper och dissektion
<ol><li>Matte 8-10 vecka gammal MLC-2v-tdTomato+/- honmöss med 8-10 vecka gammal MLC-2v-tdTomato+/- hanmöss att erhålla MLC-2v-tdTomato+/ +, MLC-2v-tdTomato+/- och MLC-2v-tdTomato- / - embryon.</li>
	<li>Kontrollera dammarna för vaginal pluggar...

<ol>
	<li>Evans, S. M., Yelon, D., Conlon, F. L., Kirby, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+lineage+development.">Myocardial lineage development.</a> Circulation Research. 107 (12), 1428-1444 (2010).</li><li>Paige, S. L., Plonowska, K., Xu, A., Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+cardiomyocyte+differentiation.">Molecular regulation of cardiomyocyte differentiation.</a> Circulation Research. 116 (2), 341-353 (2015).</li><li>Lee, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+light+chain-2+luciferase+transgenic+mice+reveal+distinct+regulatory+programs+for+cardiac+and+skeletal+muscle-specific+expression+of+a+single+contractile+protein+gene.">Myosin light chain-2 luciferase transgenic mice reveal distinct regulatory programs for cardiac and skeletal muscle-specific expression of a single contractile protein gene.</a> Journal of Biological Chemistry. 267 (22), 15875-15885 (1992).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+requirement+of+myosin+light+chain+2v+in+embryonic+heart+function.">Selective requirement of myosin light chain 2v in embryonic heart function.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (2), 1252-1256 (1998).</li><li>Ross, R. S., Navankasattusas, S., Harvey, R. P., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HF-1a/HF-1b/MEF-2+combinatorial+element+confers+cardiac+ventricular+specificity+and+established+an+anterior-posterior+gradient+of+expression.">An HF-1a/HF-1b/MEF-2 combinatorial element confers cardiac ventricular specificity and established an anterior-posterior gradient of expression.</a> Development. 122 (6), 1799-1809 (1996).</li><li>Christoffels, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+formation+and+morphogenesis+in+the+developing+mammalian+heart.">Chamber formation and morphogenesis in the developing mammalian heart.</a> Dev Biol. 223 (2), 266-278 (2000).</li><li>Wu, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+identity+is+determined+by+a+COUP-TFII+regulatory+network.">Atrial identity is determined by a COUP-TFII regulatory network.</a> Developmental Cell. 25 (4), 417-426 (2013).</li><li>Nelson, D. O., Jin, D. X., Downs, K. M., Kamp, T. J., Lyons, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irx4+identifies+a+chamber-specific+cell+population+that+contributes+to+ventricular+myocardium+development.">Irx4 identifies a chamber-specific cell population that contributes to ventricular myocardium development.</a> Developmental Dynamics. 243 (3), 381-392 (2014).</li><li>Bao, Z. Z., Bruneau, B. G., Seidman, J. G., Seidman, C. E., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chamber-specific+gene+expression+in+the+developing+heart+by+Irx4.">Regulation of chamber-specific gene expression in the developing heart by Irx4.</a> Science. 283 (5405), 1161-1164 (1999).</li><li>Kubalak, S. W., Miller-Hance, W. C., O'Brien, T. X., Dyson, E., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+specification+of+atrial+myosin+light+chain-2+expression+precedes+septation+during+murine+cardiogenesis.">Chamber specification of atrial myosin light chain-2 expression precedes septation during murine cardiogenesis.</a> Journal of Biological Chemistry. 269 (24), 16961-16970 (1994).</li><li>Bardot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TAF10-containing+TFIID+and+SAGA+transcriptional+complexes+are+dispensable+for+early+somitogenesis+in+the+mouse+embryo.">The TAF10-containing TFIID and SAGA transcriptional complexes are dispensable for early somitogenesis in the mouse embryo.</a> Development. 144 (20), 3808-3818 (2017).</li><li>Zhang, Z., Nam, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+MLC-2v-tdTomato+knock-in+reporter+mouse+line.">Generation of MLC-2v-tdTomato knock-in reporter mouse line.</a> Genesis. , (2018).</li><li>Ieda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+functional+cardiomyocytes+by+defined+factors.">Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.</a> Cell. 142 (3), 375-386 (2010).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN4+dynamically+marks+the+first+heart+field+and+conduction+system+precursors.">HCN4 dynamically marks the first heart field and conduction system precursors.</a> Circulation Research. 113 (4), 399-407 (2013).</li><li>Nam, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+diverse+cardiac+cell+types+by+reprogramming+fibroblasts+with+cardiac+transcription+factors.">Induction of diverse cardiac cell types by reprogramming fibroblasts with cardiac transcription factors.</a> Development. 141 (22), 4267-4278 (2014).</li><li>Spater, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HCN4++cardiomyogenic+progenitor+derived+from+the+first+heart+field+and+human+pluripotent+stem+cells.">A HCN4+ cardiomyogenic progenitor derived from the first heart field and human pluripotent stem cells.</a> Nature Cell Biology. 15 (9), 1098-1106 (2013).</li><li>O'Brien, T. X., Lee, K. J., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+specification+of+ventricular+myosin+light+chain+2+expression+in+the+primitive+murine+heart+tube.">Positional specification of ventricular myosin light chain 2 expression in the primitive murine heart tube.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (11), 5157-5161 (1993).</li></ol>

Den metod som beskrivs här är relativt enkelt att undersöka ventrikulära kammare utveckling, utan att utföra arbetsintensiva experiment för att märka ventrikulära eller hjärt-specifika strukturella gener eller proteiner. Således, denna metod minimerar tekniska variabilitet som ofta finns i immunostained hjärta sektioner.
Det finns två kritiska steg för att framgångsrikt utföra denna metod inklusive exakt uppskattning av de embryonala åldern av möss och dissektion i embryonala ...

Kammaren bildandet under hjärtat utveckling är en komplex process som övergår genom flera morfologiskt skilda embryonala stadier1,2. Halvmåne formen av hjärt stamceller befolkningen bildar en linjär hjärtat rör och genomgår därefter töjning och repetition för att bilda formen spiral av utveckla hjärtat. Efter dess septation process förvandlas utveckla hjärtat till det fyrkamrat hjärtat. Avbrott i någon av dessa processer resulterar i utvecklingsmässiga hjärtfel. Det är således viktigt att förstå de molekylära mekanismerna bakom kammare bildandet under hjärtat utveckling. Trots många tidigare studier på hjärtat utveckling fortfarande vår förståelse av denna komplexa process begränsade.
In situ hybridisering, immunohistokemi och beta-galaktosidas färgning med Lindholm reporter möss har använts att studera kammare bildandet under musen hjärtat utveckling genom märkning hjärt specifika eller kammare specifika strukturella gener eller proteiner (t.ex. Nppa, kupp-TFII, Irx4, MLC-2a och MLC-2v)3,4,5,6,7,8,9,10. Men dessa experiment med musembryon kräver betydande tid och expertis, eftersom flera olika experimentella steg måste utföras sekventiellt11. Här, beskriver vi en enkel hela mount epifluorescerande mikroskopi metod för att visualisera utveckla ventriklarna embryon dissekeras från MLC-2v-tdTomato reporter inpressning möss12. Fördelen med denna metod jämfört med tidigare använda metoder är att undvika komplexa experimentella steg som ofta kan skapa experimentella varianter. Det huvudsakliga syftet med detta protokoll är att beskriva hur dissekera musembryon och utveckla hjärtan och undersöka varje utvecklingsstadium mus hjärtats kammare utan tråkiga histochemical experiment. Denna metod som lätt kan tillämpas för att bedöma hjärtat utveckling med hjälp av olika andra transgena möss linjer märkning tidiga kardiella markörer (t.ex. Mesp1Cre: Rosa26EYFP13, Isl1Cre: Rosa26EYFP13, Hcn4H2BGFP14, Hcn4Cre: Rosa mT /mG14, Nkx2-5Cre: Rosa mT/mG14, Hcn4-andra15, Isl1Cre: Rosa mT/mG14, Nkx2.5Cre: Rosa26tdTomato15, och TgMef2c-AHF-GFP16 möss).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:647px;" width="647">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">MZ125</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">DNA ladder (100 bp)</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">epifluorescence dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M165 FC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">GoTaq Green master Mix</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">M712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PCR machine (master cycler)</td>
			<td style="width:83px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">6336000023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence

Målet med detta protokoll är att beskriva en metod för dissektion av musembryon och visualisering av embryonala mus ventrikulära kammare under hjärtat utveckling med hjälp av ventrikulära specifika fluorescerande reporter inpressning möss (MLC-2v-tdTomato möss). Hjärta utveckling innebär en linjär hjärtat tube formation, hjärtat röret looping och fyra kammare septation. Dessa komplexa processer är mycket bevarad i alla ryggradsdjur. Mus embryonala hjärtat har använts för hjärtat utvecklande studier. Det är dock allt tekniskt utmanande på grund av extremt små att dissekera mus embryonala hjärtan. Dessutom måste visualisering av hjärtats kammare bildas ofta in situ hybridisering, beta-galaktosidas färgning med Lindholm reporter möss eller immunfärgning av sektionerad embryonala hjärtan. Här beskriver vi hur dissekera mus embryonala hjärtan och direkt visualisera ventrikulära kammare bildandet av MLC-2v-tdTomato möss använder hela mount epifluorescerande mikroskopi. Med den här metoden är det möjligt att direkt undersöka hjärtat tube bildandet och looping och fyra kammare bildandet utan ytterligare experimentella manipulation av musembryon. Även om raden MLC-2v-tdTomato reporter inpressning musen används i detta protokoll som ett exempel, kan detta protokoll tillämpas på andra hjärta-specifika fluorescerande reporter transgena möss linjer.

Under hjärtat utveckling anses MLC-2v vara den tidigaste markören för ventrikulär kammare specifikation17. Som avbildas i figur 1, vi dissekerade ut hela musembryon och embryonala hjärtan från MLC-2v-tdTomato reporter inpressning möss och undersökte MLC-2v-tdTomato reporter uttryck under hjärtat utveckling. I MLC-2v-tdTomato reporter inpressning möss, konstituerande tdTomato uttryck i utvecklingsländer hjärtat visualiseras ...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

Vi presenterar de protokoll för att undersöka mus hjärtat utveckling med hela mount epifluorescerande mikroskopi på musembryon dissekeras från ventrikulära specifika MLC-2v-tdTomato reporter inpressning möss. Denna metod tillåter oss att direkt visualisera varje skede av ventrikulära bildandet under musen hjärtat utveckling utan arbetsintensiva histochemical metoder.

Analys av hjärtats kammare utveckling under musen embryogenes använder hela Mount Epifluorescence

The goal of this protocol is to describe a method for the dissection of mouse embryos and visualization of embryonic mouse ventricular chambers during ...

Med denna metod kan vi direkt examen hjärtrörsbildning, looping, och full kammare bildning utan ytterligare experimentella manipulationer av musen embryot. Även om, vi använder MLC-2v-tdTomato möss som ett exempel, kan denna enkla metod används i stor utsträckning med andra fluorescerande reporter muslinjer. Den största fördelen med detta protokoll är att det är mycket enkelt och inte kräver några komplexa tekniker eller utrustning.Den kan utföras vid vanlig labbinställning. Efter parning av hona med hanmöss, både MLC-2v-tdTomato 8 till 10 veckor gamla, kontrollera dammarna för vaginal pluggar varje morgon. Lägg de gravida dammarna, avlivas vid olika dagar efter coitum, i ryggläge och spraya buken med 70%etanol.Använd skarpa kirurgiska saxar och tärningar för att öppna bukhålan genom snitt av både huden och bukväggen. Efter att ha lokaliserat bilaterala livmoderhorn i den dorsala delen av bukhålan, separera hela livmodern med hjälp av vassa kirurgiska saxar och tång för att noggrant skära ovanför ovidukterna på båda sidor. Placera hela dissekerade livmodern i en 10 centimeter petriskål med iskall PBS.Med hjälp av skarpa kirurgiska saxar och tång, noggrant separera varje fostersäck längs livmoderhornet. Använd pincett för att överföra varje embryo till en 35 millimeters odlingsplatta fylld med iskall PBS. Med hjälp av vassa kirurgiska saxar och tnöp, öppna en fostersäck och exponera varje embryo genom att skära av navelsträngen och sedan trimma ut extra embryonala vävnader så mycket som möjligt utan att skada embryon.Under ett dissekerande mikroskop med en fiberoptisk mikroskop illuminator, skär av embryots huvud och överföra den till en 1,5 milliliter rör med 100 mikroliter buffert A för senare genotypning att korrelera med resultaten av epifluorescerande bildbehandling. Med hjälp av fina tärna, öppna kistan av embryot. Med vassa kirurgiska saxar och tång, ta bort hjärtat bort från lungorna och vasculature.Använd pincett för att överföra det dissekerade embryonala hjärtat till en 35 millimeters odlingsplatta med PBS. Placera plattan med mus embryonala hjärtan under en epifluorescent dissekera mikroskop. Använd fina tlyk för att placera embryonala hjärtan så att utveckla ventriklarna står inför examinator.Justera fokus med hjälp av ett 0,63x-mål i ljusfältsläge. Ta bright-field exponeringar och ta flera bilder. För att visualisera tdTomat-uttryck, stäng av en fiberoptisk mikroskop-illuminator och ställ in filtret för röd fluorescens.Justera fokusering av bilden om det behövs, justera ljusstyrka och kontrast, ta röd-fluorescerande exponeringar och fånga flera bilder. För embryogenartypning, koka tidigare isolerade huvudprover i buffert A vid 100 grader Celsius i 30 minuter. Centrifugera i två minuter vid 11, 360 gånger G.Transfer 20 mikroliter av supernatant till ett nytt 1,5 milliliter rör med 20 mikroliter av buffert B och blanda.Använd 4,5 mikroliter av den blandade supernatanten som en DNA-mall och kombinera den med 0,5 mikroliter av var och en av de 10 mikromolarspecifika framåt- och reverserade primersna, 10 mikroliter av 2x-färdigblandat polymeras och reaktionsbuffert och tillsätt sedan vatten till en total volym på 20 mikroliter. Kör en PCR enligt beskrivningen i manuskriptet. Ladda den slutförda reaktionen i 100 baspar DNA stege på en 1%agarosgel och kör på 140 volt i 1x TAE buffert i 25 minuter.Placera den färdiga gelen på en UV-transilluminator och sätt på UV-ljuset för att identifiera DNA-banden. MLC-2v anses vara den tidigaste markören för Ventrikulärt kammaren specifikation under hjärtat utveckling. I MLC-2v-tdTomato reporter knock-in möss, relativt svaga uttryck för tdTomato i det linjära hjärtat röret vid E8.0 blir starkare vid E8.5 som visas med hjälp av hela-mount epiflourescent avbildning av embryona.Med hjälp av hela-montera epiflourescent imaging av det dissekerade hjärtat, ventrikulära kammarbildning under mus hjärta utveckling kan lätt bestämmas. I det dissekerade hjärtat från ett helt musembryo vid E10.5 visades MLC-2v-tdTomato-reporteruttryck i ventrikeldelen av hjärtat och inte i inflödestrakten, utflödestrakten eller den framtida atria. Vid E12.5 till E13.5 uttrycks TDTomato-reportern uteslutande i ventriklarna i det fyrkammarhjärta.Det liknande ventrikulära-specifika uttrycksmönstret visades i det dissekerade musembryot vid E16.5. Efter hela bildtagning, genotyp av embryon bestämdes med hjälp av två uppsättningar av primers för PCR genotypning, bekräftar homozygous embryon som bär på tdTomato knock-in allel, heterozygous och de vilda-typ embryon. Denna metod är ganska okomplicerad och enkel att utföra.Det kritiska steget är att dissekera embryonala hjärtan. Förstå hjärt anatomi under hjärtutveckling är nödvändigt att framgångsrikt isolera hjärtat från hela embryot.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimerad<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Odling av kycklingembryon till avancerade stadier av utveckling

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

Analys av cardiomyocyte Development använder Immunfluorescens i embryonal Mouse Heart

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Använda<em&gt; Ex vivo</em&gt; Upright Dropp Kulturer av hela organ hos fostren att studera utvecklingsprocesser under Mouse Organogenesis

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Organ Culture and Whole Mount Immunofluorescence Staining of Mouse Wolffian Ducts

Organ kultur och Hela Mount immunofluorescensfärgning av Mus Wolffian kanaler

Tubal morphogenesis is a fundamental requirement for the development of most mammalian organs, including the male reproductive system. The epididymis, an ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

Kvantitativa hela-mount immunofluorescens analys av hjärt stamceller populationer i musembryon

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

Hela berget immunofluorescens och follikeln kvantifiering av odlade mus äggstockarna

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

Organotypic kultur metod att studera utvecklingen av embryonala kyckling vävnader

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Visualisera den noden och Notochordal plattan i Gastrulating musembryon som använder Scanning Electron Microscopy och hela Mount immunofluorescens

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualisering av Superior okulär Sulcus under Danio rerio embryogenes

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

Laserinfångning mikrodissektion av mus embryonala brosk och ben för gen uttrycks analys

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...