Name: analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence
Uploaded: 2019-04-17T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Bu eser NIH R03 HL140264 tarafından desteklenmiştir (Y.-J. N) ve Gilead Sciences araştırma bilim adamı programı (Y.-J. N).

Tüm hayvan yordamları Vanderbilt Üniversitesi Tıp Merkezi Kurumsal hayvan bakım ve kullanım kurulu onayı ile gerçekleştirilmiştir.
1. fare embriyo koleksiyonu ve diseksiyonu
<ol><li>8-10 hafta yaşlı kadın MLC-2v-tdTomato+/- ile fareler MLC-2v-tdTomato elde etmek için 8-10 hafta eski erkek MLC-2v-tdTomato+ /- fareler dostum+/ +, MLC-2v-tdTomato+/- ve MLC-2v-tdTomato- / - embriyo.</li>
	<li>Vajinal fişler için baraj her sab...

<ol>
	<li>Evans, S. M., Yelon, D., Conlon, F. L., Kirby, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+lineage+development.">Myocardial lineage development.</a> Circulation Research. 107 (12), 1428-1444 (2010).</li><li>Paige, S. L., Plonowska, K., Xu, A., Wu, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+regulation+of+cardiomyocyte+differentiation.">Molecular regulation of cardiomyocyte differentiation.</a> Circulation Research. 116 (2), 341-353 (2015).</li><li>Lee, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myosin+light+chain-2+luciferase+transgenic+mice+reveal+distinct+regulatory+programs+for+cardiac+and+skeletal+muscle-specific+expression+of+a+single+contractile+protein+gene.">Myosin light chain-2 luciferase transgenic mice reveal distinct regulatory programs for cardiac and skeletal muscle-specific expression of a single contractile protein gene.</a> Journal of Biological Chemistry. 267 (22), 15875-15885 (1992).</li><li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+requirement+of+myosin+light+chain+2v+in+embryonic+heart+function.">Selective requirement of myosin light chain 2v in embryonic heart function.</a> Journal of Biological Chemistry. 273 (2), 1252-1256 (1998).</li><li>Ross, R. S., Navankasattusas, S., Harvey, R. P., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+HF-1a/HF-1b/MEF-2+combinatorial+element+confers+cardiac+ventricular+specificity+and+established+an+anterior-posterior+gradient+of+expression.">An HF-1a/HF-1b/MEF-2 combinatorial element confers cardiac ventricular specificity and established an anterior-posterior gradient of expression.</a> Development. 122 (6), 1799-1809 (1996).</li><li>Christoffels, V. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+formation+and+morphogenesis+in+the+developing+mammalian+heart.">Chamber formation and morphogenesis in the developing mammalian heart.</a> Dev Biol. 223 (2), 266-278 (2000).</li><li>Wu, S. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atrial+identity+is+determined+by+a+COUP-TFII+regulatory+network.">Atrial identity is determined by a COUP-TFII regulatory network.</a> Developmental Cell. 25 (4), 417-426 (2013).</li><li>Nelson, D. O., Jin, D. X., Downs, K. M., Kamp, T. J., Lyons, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Irx4+identifies+a+chamber-specific+cell+population+that+contributes+to+ventricular+myocardium+development.">Irx4 identifies a chamber-specific cell population that contributes to ventricular myocardium development.</a> Developmental Dynamics. 243 (3), 381-392 (2014).</li><li>Bao, Z. Z., Bruneau, B. G., Seidman, J. G., Seidman, C. E., Cepko, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regulation+of+chamber-specific+gene+expression+in+the+developing+heart+by+Irx4.">Regulation of chamber-specific gene expression in the developing heart by Irx4.</a> Science. 283 (5405), 1161-1164 (1999).</li><li>Kubalak, S. W., Miller-Hance, W. C., O'Brien, T. X., Dyson, E., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chamber+specification+of+atrial+myosin+light+chain-2+expression+precedes+septation+during+murine+cardiogenesis.">Chamber specification of atrial myosin light chain-2 expression precedes septation during murine cardiogenesis.</a> Journal of Biological Chemistry. 269 (24), 16961-16970 (1994).</li><li>Bardot, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+TAF10-containing+TFIID+and+SAGA+transcriptional+complexes+are+dispensable+for+early+somitogenesis+in+the+mouse+embryo.">The TAF10-containing TFIID and SAGA transcriptional complexes are dispensable for early somitogenesis in the mouse embryo.</a> Development. 144 (20), 3808-3818 (2017).</li><li>Zhang, Z., Nam, Y. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+MLC-2v-tdTomato+knock-in+reporter+mouse+line.">Generation of MLC-2v-tdTomato knock-in reporter mouse line.</a> Genesis. , (2018).</li><li>Ieda, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+reprogramming+of+fibroblasts+into+functional+cardiomyocytes+by+defined+factors.">Direct reprogramming of fibroblasts into functional cardiomyocytes by defined factors.</a> Cell. 142 (3), 375-386 (2010).</li><li>Liang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN4+dynamically+marks+the+first+heart+field+and+conduction+system+precursors.">HCN4 dynamically marks the first heart field and conduction system precursors.</a> Circulation Research. 113 (4), 399-407 (2013).</li><li>Nam, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+diverse+cardiac+cell+types+by+reprogramming+fibroblasts+with+cardiac+transcription+factors.">Induction of diverse cardiac cell types by reprogramming fibroblasts with cardiac transcription factors.</a> Development. 141 (22), 4267-4278 (2014).</li><li>Spater, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+HCN4++cardiomyogenic+progenitor+derived+from+the+first+heart+field+and+human+pluripotent+stem+cells.">A HCN4+ cardiomyogenic progenitor derived from the first heart field and human pluripotent stem cells.</a> Nature Cell Biology. 15 (9), 1098-1106 (2013).</li><li>O'Brien, T. X., Lee, K. J., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Positional+specification+of+ventricular+myosin+light+chain+2+expression+in+the+primitive+murine+heart+tube.">Positional specification of ventricular myosin light chain 2 expression in the primitive murine heart tube.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 90 (11), 5157-5161 (1993).</li></ol>

Burada açıklanan ventrikül veya kalp özgü yapısal genler veya proteinler etiketlemek için emek yoğun deneyler uygulamadan ventrikül odası geliştirme, incelemek nispeten basit yöntemdir. Bu nedenle, bu yöntemi sık sık immunostained kalp bölümlerde bulunan teknik variabilities en aza indirir.
Farelerin embriyonik yaş ve diseksiyon embriyonik kalplerin kesin tahmin dahil olmak üzere bu yöntemi başarıyla gerçekleştirmek için iki önemli adım vardır. Pratik olarak vajinal...

Odası oluşumu kalp geliştirme sırasında birkaç morfolojik ayrı embriyonik aşamaları1,2ile geçiş karmaşık bir süreçtir. Kardiyak progenitör nüfus hücreleri hilal şeklinde bir doğrusal kalbini tüp oluşturur ve uzama ve gelişmekte olan kalp sarmal şekli oluşturmak için döngü sonra uğrar. Onun septation işleminden sonra gelişen kalp dört odacıklı kalp içine aktarılır. Bu işlemlerden herhangi bir kesinti gelişimsel kalp kusurları kaynaklanır. Böylece, odası oluşumu kalp geliştirme sırasında temel moleküler mekanizmaları anlamak önemlidir. Kalp geliştirme konusunda çok sayıda önceki çalışmalarda rağmen anlayışımız bu karmaşık sürecin sınırlı kalır.
İn situ hibridizasyon, immünhistokimya ve beta galaktozidaz LacZ muhabir fare kullanarak boyama yaygın olarak kullanılan kalp belirli veya odası belirli yapısal genler etiketleme odası oluşumu sırasında fare kalp geliştirme çalışma ya da proteinler (örneğin, Nppa, darbe-TFII, Irx4, MLC-2a ve MLC-2v)3,4,5,6,7,8,9,10. Ancak, birkaç farklı deneysel adımlar olmak zorunda çünkü fare embriyo kullanarak bu deneyler önemli zaman ve uzmanlık gerektiren sırayla gerçekleştirilen11. Burada, gelişen ventrikül MLC-2v-tdTomato muhabir çakma fareler12den disseke embriyo kullanarak görselleştirmek için basit bütün Dağı epifluorescent mikroskopi yöntemi açıklanmaktadır. Daha önce kullanılan yöntemlerine göre bu yöntemin avantajı kez deneysel varyasyonları oluşturabilirsiniz karmaşık deneysel adımlar kaçınmaktır. Bu iletişim kuralını temel amacı fare embriyo ve gelişmekte olan kalpleri teşrih ve sıkıcı histochemical deneyler olmadan fare kardiyak odası gelişiminin her aşamasında incelemek için nasıl tarif etmektir. Bu yöntem kalp geliştirme erken kardiyak işaretleri etiketleme çeşitli transgenik fare hatlarını kullanarak değerlendirmek için kolayca uygulanabilir (örneğin, Mesp1Cre: Rosa26EYFP13, Isl1Cre: Rosa26EYFP13, Hcn4H2BGFP14, Hcn4Cre: Rosa mT /MG14, Nkx2-5Cre: Rosa mT/mG14, Hcn4-eGFP15, Isl1Cre: Rosa mT/mG14, Nkx2.5Cre: Rosa26tdTomato15ve TgMef2c-AHF-GFP16 fareler).

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:647px;" width="647">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">MZ125</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">DNA ladder (100 bp)</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">G2101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">epifluorescence dissecting microscope</td>
			<td style="width:83px;">Leica</td>
			<td style="width:119px;">M165 FC</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">GoTaq Green master Mix</td>
			<td style="width:83px;">Promega</td>
			<td style="width:119px;">M712</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:279px;">PCR machine (master cycler)</td>
			<td style="width:83px;">Eppendorf</td>
			<td style="width:119px;">6336000023</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

analysis of cardiac chamber development during mouse embryogenesis using whole mount epifluorescence

Bu iletişim kuralının amacı fare embriyo diseksiyon ve ventrikül belirli floresan muhabir çakma fareler (MLC-2v-tdTomato fareler) kullanarak kalp geliştirme sırasında embriyonik fare ventrikül odalarının görselleştirme için bir yöntem tarif etmektir. Kalp Geliştirme doğrusal kalbini tüp oluşumu, döngü kalbini tüp ve dört odası septation içerir. Bu karmaşık işlemler son derece tüm omurgalıların korunmuş. Fare embriyonik kalp kalp gelişim çalışmaları için yaygın olarak kullanmıştır. Ancak, kendi son derece küçük boyutu nedeniyle, fare embriyonik kalp anatomi teknik olarak zordur. Buna ek olarak, In situ hibridizasyon, beta galaktozidaz LacZ muhabir fareler veya immunostaining kesitli embriyonik kalplerin kullanarak boyama görselleştirme kez kardiyak odası oluşumu ihtiyacı var. Burada, fare embriyonik kalp incelemek ve doğrudan ventrikül odası oluşumu MLC-2v-tdTomato farelerin bütün Dağı epifluorescent mikroskobu kullanarak görselleştirmek nasıl açıklar. Bu yöntemle, doğrudan kalp tüp oluşumu ve döngü ve dört odası oluşumu fare embriyolar daha deneysel manipülasyon olmadan incelemek mümkündür. Ne kadar MLC-2v-tdTomato muhabir çakma fare çizgi bu protokol için bir örnek olarak kullanılır, bu iletişim kuralı diğer kalp özgü floresan muhabir transgenik fare satırlarına uygulanır.

Kalp Geliştirme sırasında MLC-2v ventrikül odası belirtimi17için en erken marker olarak kabul edilir. Şekil 1' de gösterildiği gibi biz disseke fare tüm embriyo ve çakma MLC-2v-tdTomato muhabir fareler gelen embriyonik kalp ve kalp geliştirme sırasında MLC-2v-tdTomato muhabir ifade inceledi. MLC-2v-tdTomato muhabir çakma farelerde, epifluorescence bütün Dağı görüntüleme ile gelişen kalp bünye tdTomato ifade gör...

Watch this Scientific Journal Video about Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence at JoVE.com

Analysis of Cardiac Chamber Development During Mouse Embryogenesis Using Whole Mount Epifluorescence

Biz bütün Dağı epifluorescent mikroskobu ventrikül belirli MLC-2v-tdTomato muhabir çakma fareler disseke fare embriyosu üzerinde kullanarak fare kalp geliştirme incelemek için protokolleri mevcut. Bu yöntem her aşamasında emek yoğun histochemical yöntemleri olmadan fare kalp geliştirme sırasında ventrikül oluşumu doğrudan görselleştirmek için bize izin verir.

Bütün Mount Epifluorescence kullanarak fare embriyogenez sırasında kalp odası gelişimin analizi

The goal of this protocol is to describe a method for the dissection of mouse embryos and visualization of embryonic mouse ventricular chambers during ...

Bu yöntemi kullanarak doğrudan farz embriyodaha deneysel manipülasyonlar olmadan kalp tüpü oluşumu, döngü ve tam oda oluşumu nu muayene edebilirsiniz. Her ne kadar, biz bir örnek olarak MLC-2v-tdTomato fareler kullanmak, bu basit yöntem yaygın diğer floresan muhabir fare hatları ile kullanılabilir. Bu protokolün en büyük avantajı çok basit olması ve herhangi bir karmaşık teknik veya ekipman gerektirmemesidir.Normal laboratuar ortamında yapılabilir. Erkek fareler ile kadın çifte sonra, hem MLC-2v-tdTomato 8 ila 10 hafta eski, vajinal fişler için barajlar kontrol edin her sabah. Gebe barajlar lay, farklı günlerde post coitum ötanazi, supine pozisyonda ve sprey karın% 70 etanol ile.Hem deri hem de karın duvarı nın kesisi ile karın boşluğunu açmak için keskin cerrahi makas ve forseps kullanın. Karın boşluğunun dorsal kısmında ikili rahim boynuzları yerini aldıktan sonra, dikkatle her iki tarafta oviducts üzerinde kesmek için keskin cerrahi makas ve forseps kullanarak tüm rahim ayırın. Buz soğuk PBS ile 10 santimetre petri çanak tüm parçalanmış rahim yerleştirin.Keskin cerrahi makas ve forceps kullanarak, dikkatle rahim boynuzu boyunca her amniyotik kese ayırın. Her embriyobuz soğuk PBS ile dolu bir 35 milimetrelik kültür plakası içine aktarmak için cımbız kullanın. Keskin cerrahi makas ve forceps kullanarak, amniyotik bir kese açın ve göbek kordonu keserek her embriyo ortaya çıkarmak ve daha sonra embriyolara zarar vermeden mümkün olduğunca ekstra embriyonik dokuları kesmek.Fiber optik mikroskop aydınlatıcı ile bir diseksiyon mikroskobu altında, embriyonun başını kesip 1.5 mililitrelik bir tüpe aktarın 100 mikrolitre tampon A daha sonra epifloresan görüntüleme sonuçları ile ilişkili genotipleme için. İnce profeler kullanarak embriyonun göğsünü açın. Keskin cerrahi makas ve forceps ile, uzak akciğerler ve vaskülatür kalp kaldırın.Parçalanmış embriyonik kalbi PBS ile 35 milimetrelik bir kültür plakasına aktarmak için cımbız kullanın. Bir epifloresan diseksiyon mikroskop altında fare embriyonik kalpleri ile plaka yerleştirin. Gelişmekte olan ventriküller sınav karşı karşıya olduğu gibi embriyonik kalpleri konumlandırmak için ince forseps kullanın.Parlak alan modunda 0,63x hedefi kullanarak odak noktasını ayarlayın. Parlak alan pozlamaları alın ve birden çok görüntü yakalayın. tdTomato ifadesini görselleştirmek için fiber optik mikroskop aydınlatıcısını kapatın ve filtreyi kırmızı floresan için ayarlayın.Gerekirse görüntünün yeniden netleşmesini ayarlayın, parlaklığı ve kontrastı ayarlayın, kırmızı floresan pozlamalar yapın ve birden çok görüntü yakalayın. Embriyo genotipleme için, tampon A'da daha önce izole edilmiş kafa örneklerini 100 santigrat derecede 30 dakika kaynatın. Santrifüj 11 iki dakika, 360 kez G.Transfer 20 mikrolitre supernatant yeni bir 1.5 mililitretüp içine tampon B ve mix 20 mikrolitre ile.Bir DNA şablonu olarak karışık supernatant 4,5 mikrolitre kullanın ve 10 mikromolar özgü ileri ve ters astarlar, 2x-premix polimeraz ve reaksiyon tampon 10 mikrolitre her 0,5 mikrolitre ile birleştirmek ve daha sonra 20 mikrolitre toplam hacmine su ekleyin. El yazmasında açıklandığı gibi bir PCR çalıştırın. 100 baz çifti DNA merdiveninde tamamlanan reaksiyonu %1 agarose jelüzerine yükleyin ve 1x TAE tamponunda 140 voltta 25 dakika çalıştırın.Tamamlanmış jeli uv transilluminator'a yerleştirin ve DNA bantlarını tanımlamak için UV ışığını açın. MLC-2v kalp gelişimi sırasında ventriküler oda belirtimi için erken belirteç olarak kabul edilir. MLC-2v-tdTomato muhabiri knock-in farelerde, E8.0 de lineer kalp tüpü tdTomato nispeten zayıf ifade e8.5 de embriyoların tam monte epiflourescent görüntüleme kullanılarak gösterildiği gibi daha güçlü hale gelir.Diseksiyonlu kalbin tam montaj epiflourescent görüntüleme seksiyonu kullanılarak fare kalp gelişimi sırasında ventriküler oda oluşumu kolayca belirlenebilir. E10.5'teki fare embriyosu olan bütün bir fare embriyonun kesiştiği kalpte MLC-2v-tdTomato muhabiri nin ifadesi, giriş yolu, çıkış yolu veya gelecekteki atria'da değil, kalbin ventriküler kısmında gösterilmiştir. E12.5'ten E13.5'e kadar, tdTomato muhabiri sadece dört odalı kalbin karıncıklarında ifade edilir.Benzer ventriküler spesifik ekspresyon deseni E16.5'teki kesitli fare embriyosuna gösterilmiştir. Tüm görüntülemeden sonra, embriyoların genotipliği PCR genotipleme için iki set astar kullanılarak belirlendi ve tdTomato knock-in alel, heterozigot ve yabani tip embriyoları taşıyan homozigot embriyolar doğrulandı. Bu yöntem oldukça basit ve gerçekleştirmek kolaydır.Kritik adım embriyonik kalpleri incelemektir. Kalp gelişimi sırasında kardiyak anatomi anlamak başarıyla tüm embriyo kalp izole etmek için gereklidir.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimized Ex-ovo Culturing of Chick Embryos to Advanced Stages of Development

Optimize<em&gt; Ex-ovo</em&gt; Kalkınma Gelişmiş Aşamaları Chick Embriyolar ekimi

Research in anatomy, embryology, and developmental biology has largely relied on the use of model organisms. In order to study development in live embryos ...

Analysis of Cardiomyocyte Development using Immunofluorescence in Embryonic Mouse Heart

Embriyonik Fare Heart Immunofluorescence kullanarak kardiyomiyosit Geliştirme Analizi

During heart development, the generation of myocardial-specific structural and functional units including sarcomeres, contractile myofibrils, intercalated ...

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Using Ex Vivo Upright Droplet Cultures of Whole Fetal Organs to Study Developmental Processes during Mouse Organogenesis

Kullanımı<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Tüm Fetal Organları Dik Damlacık Kültürleri Fare Organogenesis sırasında Gelişim Süreçleri Eğitim için

Investigating organogenesis in utero is a technically challenging process in placental mammals due to inaccessibility of reagents to embryos that develop ...

Organ Culture and Whole Mount Immunofluorescence Staining of Mouse Wolffian Ducts

Organ Kültür ve Fare Wolffian Kanallarının Tüm Dağı Immunoflorasan Boyama

Tubal morphogenesis is a fundamental requirement for the development of most mammalian organs, including the male reproductive system. The epididymis, an ...

Quantitative Whole-mount Immunofluorescence Analysis of Cardiac Progenitor Populations in Mouse Embryos

Nicel bütün Dağı ayirt analiz fare embriyo kardiyak progenitör nüfusun

The use of ever-advancing imaging techniques has contributed broadly to our increased understanding of embryonic development. Pre-implantation development ...

Whole Mount Immunofluorescence and Follicle Quantification of Cultured Mouse Ovaries

Bütün Dağı ayirt ve kültürlü fare yumurtalıklarda folikül miktar

Research in the field of mammalian reproductive biology often involves evaluating the overall health of ovaries and testes. Specifically, in females, ...

Organotypic Culture Method to Study the Development Of Embryonic Chicken Tissues

Embriyonik tavuk doku gelişimi çalışmaya Organotypic kültür yöntemi

The embryonic chicken is commonly used as a reliable model organism for vertebrate development. Its accessibility and short incubation period makes it ...

Visualizing the Node and Notochordal Plate In Gastrulating Mouse Embryos Using Scanning Electron Microscopy and Whole Mount Immunofluorescence

Düğüm ve Notochordal plaka Gastrulating fare embriyo Tarama elektron mikroskobu ve bütün Dağı ayirt kullanarak görselleştirme

The post-implantation mouse embryo undergoes major shape changes after the initiation of gastrulation and morphogenesis. A hallmark of morphogenesis is ...

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Visualization of the Superior Ocular Sulcus during Danio rerio Embryogenesis

Çift oküler sulkus görselleştirme Danio rerio embriyogenez sırasında

Congenital ocular coloboma is a genetic disorder that is typically observed as a cleft in the inferior aspect of the eye resulting from incomplete choroid ...

Laser Capture Microdissection of Mouse Embryonic Cartilage and Bone for Gene Expression Analysis

Gen Ekspresyonu Analizi için Fare Embriyonik Kıkırdağı ve Kemiğinin Lazer Yakalama Mikrodizmesi

Laser capture microdissection (LCM) is a powerful tool to isolate specific cell types or regions of interest from heterogeneous tissues. The cellular and ...