Name: chromogenic in situ hybridization as a tool for hpv-related head and neck cancer diagnosis
Uploaded: 2019-06-14T13:00:00
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Los autores agradecen el departamento de Patología de Hopital Européen Georges Pompidou y Necker (Laurianne Chambolle, Elodie Michel y Giséle Legall); la plataforma histológica de PARCC, Hopital Européen Georges Pompidou (Corinne Lesaffre); Virginia Clark para la edición de idiomas; Alexandra Elbakyan por su contribución.

El protocolo sigue las directrices éticas y fue aprobado por el Comité ético (Comité-de-Protection-des-Personnes Ile-de-France-II, #2015-09-04).
1. Preparación de los materiales
<ol><li>
Preparación de 1x tampón de lavado
	<ol>
<li>Preparar 3 L de 1x tampón de lavado añadiendo 2.94 L de agua destilada y una botella (60 ml) de tampón de lavado (50x) (ver la Tabla de Materiales)a un carboy grande. Mezcla bien. NOTA: El tampón de lavado 1x puede p...

<ol>
	<li>Lowy, D. R., Schiller, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reducing+HPV-associated+cancer+globally.">Reducing HPV-associated cancer globally.</a> Cancer Prevention Research.(Philadelphia, PA). 5 (1), 18-23 (2012).</li><li>Laban, S., Hoffmann, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+Papillomavirus+Immunity+in+Oropharyngeal+Cancer:+Time+to+Change+the+Game?.">Human Papillomavirus Immunity in Oropharyngeal Cancer: Time to Change the Game?.</a> Clinical Cancer Research. 24 (3), 505-507 (2018).</li><li>Wiest, T., Schwarz, E., Enders, C., Flechtenmacher, C., Bosch, F. 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C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+and+clinical+relevance+of+transcriptionally+active+human+papillomavirus+(HPV)+infection+in+oropharynx+squamous+cell+carcinoma.">Biological and clinical relevance of transcriptionally active human papillomavirus (HPV) infection in oropharynx squamous cell carcinoma.</a> International Journal of Cancer. 126 (8), 1882-1894 (2009).</li><li>Augustin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPV+RNA+CISH+score+identifies+two+prognostic+groups+in+a+p16+positive+oropharyngeal+squamous+cell+carcinoma+population.">HPV RNA CISH score identifies two prognostic groups in a p16 positive oropharyngeal squamous cell carcinoma population.</a> Modern Pathology. , (2018).</li><li>Evans, M. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPV+E6/E7+RNA+In+Situ+Hybridization+Signal+Patterns+as+Biomarkers+of+Three-Tier+Cervical+Intraepithelial+Neoplasia+Grade.">HPV E6/E7 RNA In Situ Hybridization Signal Patterns as Biomarkers of Three-Tier Cervical Intraepithelial Neoplasia Grade.</a> PLOS ONE. 9 (3), e91142 (2014).</li><li>Dreyer, J. H., Hauck, F., Oliveira-Silva, M., Barros, M. H. M., Niedobitek, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detection+of+HPV+infection+in+head+and+neck+squamous+cell+carcinoma:+a+practical+proposal.">Detection of HPV infection in head and neck squamous cell carcinoma: a practical proposal.</a> Virchows Archiv. 462 (4), 381-389 (2013).</li><li>Bingham, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RNAscope+in+situ+hybridization+confirms+mRNA+integrity+in+formalin-fixed,+paraffin-embedded+cancer+tissue+samples.">RNAscope in situ hybridization confirms mRNA integrity in formalin-fixed, paraffin-embedded cancer tissue samples.</a> Oncotarget. , (2017).</li></ol>

El ARN CISH del VPH realizado con un kit adquirido es una poderosa herramienta para la detección de transcripciones virales e indica una infección activa por VPH. Realizado manualmente, los pasos del protocolo son en general fáciles de seguir, y el kit comprado es conveniente. Esta técnica permite la tinción de 19 muestras histológicas más una diapositiva de control a la vez, y el ensayo dura alrededor de 8 h. Es fundamental no dejar que las muestras se sequen entre pasos a menos que se mencione lo contrario. La c...

El ARN CISH del VPH es una poderosa herramienta para la detección de la infección activa por VPH, que puede resultar crucial en lesiones benignas o malignas en diversos lugares, como la orofaringe o el cuello uterino. La detección de una infección activa por VPH puede apoyar el diagnóstico de una lesión inducida por el VPH y, por lo tanto, influir en su tratamiento y pronóstico.
El VPH es la infección de transmisión sexual más frecuente, y se han descrito más de 100 genotipos virales1. Esquemáticamente, genotipos de bajo riesgo como los genotipos 6 y 11 son conocidos por inducir verrugas genitales, papilomatosis respiratoria recurrente y otras lesiones benignas, mientras que los genotipos de alto riesgo como los genotipos 16 y también 18 son responsables de la mayoría de los cánceres cervicales y los cánceres anales y desempeñan un papel en la oncogénesis delHNSCC en proporciones variables, como se explica en los datos epidemiológicos regionales 2.
Hay varias herramientas disponibles para la detección de la infección por el VPH. Como una infección por VPH de alto riesgo conduce a la expresión de proteínas oncogénicas virales E6 y E73, la detección de transcripciones E6 y E7 es ampliamente vista como el estándar de oro para la identificación activa de la infección por VPH4. El ARN CISH del VPH se puede realizar en muestras de FFPE que se obtienen con bastante facilidad de pacientes que sufren de diversas enfermedades relacionadas con el VPH. Su rendimiento ha sido evaluado en neoplasia intraepitelial escamosa en el cuello uterino, el ano y la vagina, y en elcarcinoma de células escamosas invasivas en el cuello uterino, el ano y el tracto aerodigestivo superior 5: logra una sensibilidad de más del 98% entre los casos de reacción en cadena de la polimerasa del ADN del VPH (PCR) positivos. Esto es ligeramente mejor que la inmunomancha p16 (93%) y hibridación in situ del ADN del VPH (ADN ISH: 97%), que se utilizan más comúnmente. En otra cohorte de 57 pacientes con carcinoma de células escamosas (CCS) derivados de la región de la cabeza y el cuello, la región genital, la piel y las vías urinarias, en comparación con el ADN del VPH, el ARN CISH del VPH logró una mejor sensibilidad (100% frente a 88%) y especificidad (87% frente a 74%)6.
La inmunomancha P16 es un marcador indirecto que refleja la interrupción del ciclo celular que puede ser causada (pero no exclusivamente) por la infección por VPH4,7. Esta prueba rentable posee una buena sensibilidad y un valor predictivo negativo y se recomienda como un marcador suplente de la infección por VPH de alto riesgo en el cáncer de orofaringe (OPC) por el Colegio de Patólogos Americanos (CAP) y por la Unión para la Internacional Control del Cáncer (UICC)8.
Aunque este artículo se centra únicamente en la detección del VPH en HNSCC, el ARN CISH del VPH es clínicamente relevante en otras condiciones que implican la infección por el VPH. Por ejemplo, esta técnica puede mejorar la precisión del diagnóstico de lesiones intraepiteliales escamosas de bajo grado del cuello uterino (LSIL, anteriormente conocida como neoplasia intraepitelial cervical, grado 1 [CIN1]) para casos morfológicamente ambiguos9. En cuanto a las CEC orofaríngeas, el ARN CISH del VPH permite la identificación de sCC relacionados con el VPH, etiquetados como distintos de las CCCc orofaríngeas no relacionadas con el VPH en la reciente octava edición de la Clasificación TNM de Cáncer de Cabeza y Cuello (de la Unión para el Cáncer Internacional Control [UICC])10. Dado que el SCC relacionado con el VPH presenta un mejor pronóstico con mayor supervivencia y mayor sensibilidad a la radioterapia y quimioterapia que el SCC11,12,13,sin vPH, la detección de la infección por VPH puede afectar gestión del paciente14,15. Además, el ARN CISH del VPH se puede utilizar para el diagnóstico de carcinoma sinonasal multifenotípico relacionado con el VPH con una señal más alta que el ADN del VPH CISH16. Varios análisis multivariados sugieren que la detección de transcripciones E6 y E7 está correlacionada con un mejor pronóstico en sCC orofaríngeo en general7,15,17,18 y en el subgrupo de p16-positivo orofaríngeo SCC19,20.
Aquí presentamos el protocolo para el ARN HPV manual CISH realizado en diapositivas FFPE con un kit obtenido del fabricante.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Hematoxylin solution, Gill No. 1</td>
			<td>Merck</td>
			<td>GHS132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HybEZ Oven (110v)</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>321710</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HybEZ slide rack</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>300104</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ImmEdge Hydrophobic Barrier Pen</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>310018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope 2.5 HD Detection Reagents-BROWN</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>322310</td>
			<td>This kit includes amplification reagents AMP1, AMP2, AMP3, AMP4, AMP5 and AMP6, and detection reagents DAB-A and DAB-B</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope 3-Plex Negative Control Probe</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>320871</td>
			<td>DAPB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope 3-Plex Positive Control Probe</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>320861</td>
			<td>PPIB</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope H202 &#38; Protease Plus Reagent</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>322330</td>
			<td>Hydrogen Peroxyde x2 and Protease Plus x 1</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Probe- HPV16/18</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>311121</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Target Retrieval Reagents</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>322000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RNAscope Wash Buffer Reagents</td>
			<td>Advanced Cell Diagnostics Inc.</td>
			<td>310091</td>
			<td>Wash Buffer 50X x4</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

chromogenic in situ hybridization as a tool for hpv-related head and neck cancer diagnosis

La infección por el virus del papiloma humano (VPH) es un factor de riesgo importante para un subtipo de carcinoma de células escamosas orofaríngeas (OPSCC), que tiende a estar asociado con un mejor resultado que el OPSCC relacionado con el alcohol y el tabaco. La hibridación in situ (CISH) cromogénica del ARN viral del VPH podría permitir la evaluación semicuantitativa de las transcripciones virales de las proteínas oncogénicas E6 y E7 y una visualización in situ con una buena resolución espacial. Esta técnica permite el diagnóstico de una infección activa con la visualización de la transcripción del VPH en las células infectadas por el VPH tumoral. Una ventaja de esta técnica es la evitación de la contaminación de las células no neoplásicas infectadas por el VPH adyacentes al tumor. En general, sus buenos rendimientos de diagnóstico han considerado que es el estándar de oro para la identificación activa de la infección por VPH. Dado que la interacción de proteínas virales E6 y E7 con las proteínas celulares pRb y p53 es obligatoria para la transformación celular, el ARN CISH del VPH es funcionalmente relevante y refleja agudamente la infección activa por VPH oncogénico. Esta técnica también es clínicamente relevante, ya que los niveles de transcripción "bajos" o "altos" del VPH ayudaron a identificar dos grupos de pronóstico entre los pacientes con cáncer de cabeza y cuello p16 relacionados con el VPH. Aquí presentamos el protocolo para el ARN HPV cISH manual realizado en diapositivas de parafina incorporada sin forcina fija (FFPE) con un kit obtenido del fabricante. En lugar de la revelación cromogénica, la hibridación in situ del ARN también se puede realizar con revelación fluorescente (RNA FISH). También se puede combinar con inmunomanchas convencionales.

Como se describe aquí, en el cáncer de células escamosas de cabeza y cuello, un caso puede considerarse positivo en presencia de tinción punctiforme marrón en el citoplasma o en los núcleos de las células tumorales. En la mayoría de los estudios, la señal se considera como "positiva" o "no detectada"14. Se han notificado métodos de semicuantificación de la señal, pero carecen de estandarización entre los equipos. Por ejemplo, en algunos estudios, las señales se puntuaron como 1+ con ...

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Chromogenic In Situ Hybridization as a Tool for HPV-Related Head and Neck Cancer Diagnosis

La hibridación in situ del ARN cromogénico del virus del papiloma humano (VPH) se considera una de las normas de oro para la detección activa de la infección por el virus del papiloma humano dentro de los tumores. Permite la visualización de la expresión de ARNm del VPH E6-E7 con localización y evaluación semicuantitativa de su señal.

Cromogénico In Situ Hybridization ss una herramienta para el diagnóstico de cáncer de cabeza y cuello relacionado con el VPH

Human papillomavirus (HPV) infection is a major risk factor for a subtype of oropharyngeal squamous cell carcinoma (OPSCC), which tends to be associated ...

El ARN del VPH CISH permite la detección de una infección activa por el virus del papiloma humano. Dado que la hibridación in situ se dirige al ARN del VPH, esta técnica permite la visualización de una transcripción activa del virus. Tiene una resolución espacial precisa y un buen diagnóstico.La detección del VPH puede apoyar el diagnóstico de varias lesiones relacionadas con el VPH, como el carcinoma de células escamosas orofaríngeas o la neoplasia cervical. También puede tener una influencia en el pronóstico. Después de preparar tampones y reactivos contramanchas, prepare un reactivo de recuperación de destino x en un vaso grande añadiendo 70 mililitros de reactivo de recuperación de objetivo 10x a 630 mililitros de agua destilada.Coloque el vaso de precipitados en una placa calefactora con agitador magnético y cúbralo con papel de aluminio. Hierve su contenido a 100 grados centígrados durante 10 a 15 minutos asegurándose de no hervirlo durante más de 30 minutos. Para bloquear la actividad de la peroxidasa en diapositivas con secciones de tejido previamente desparafinadas y colocadas en el portaobjetos, agregue de cuatro a seis gotas, lo suficiente para cubrir la muestra, de peróxido de hidrógeno a cada diapositiva, e incubarlas durante 10 minutos a temperatura ambiente.Lave los portaobjetos dos veces durante dos minutos en agua destilada a temperatura ambiente. Para romper los límites del tejido de ARN en las secciones del tejido de ARN, primero retire la lámina de aluminio de la ebullición de una x TRR usando una garra, y deje de agitar. Sumerja el portaobjetos lentamente y con mucho cuidado.Cubra el vaso de precipitados de nuevo con la lámina de aluminio e incubar durante 15 minutos. Utilice la garra para transferir inmediatamente el portaobjetos caliente a un baño de agua destilada y lavarlo durante dos minutos. Lave los portaobjetos y luego en etanol fresco 100% durante dos minutos, y déjelos secar a temperatura ambiente durante dos minutos.A continuación, utilice una pluma de barrera hidrófoba para dibujar una barrera alrededor de cada muestra, y déjela secar durante al menos cinco minutos. Para la digestión de la proteasa, coloque los portaobjetos en la bandeja controlada por humedad y agregue aproximadamente cuatro gotas de Protease Plus por muestra. Cubra la bandeja con una tapa e insértela en el horno de hibridación durante 30 minutos a 40 grados centígrados.Retire la bandeja del horno y retire el portaobjetos. Trabajar una diapositiva a la vez, eliminar rápidamente cualquier exceso de líquido, y colocar el portaobjetos en el portaobjetos sumergido en un plato de tinción lleno de agua destilada. Lave los portaobjetos dos veces durante dos minutos en agua destilada a temperatura ambiente con agitación constante.Para iniciar la hibridación, toque y deslice las diapositivas para eliminar el exceso de líquido y vuelva a colocarlas en el portaobjetos. Retire la sonda de VPH precalentada del horno y agregue aproximadamente cuatro gotas para cubrir completamente cada sección. Cubra la bandeja con la tapa e insértela en el horno durante dos horas a 40 grados centígrados.Después de completar la incubación, retire la bandeja del horno y retire el portaobjetos. Una diapositiva a la vez, retire rápidamente el exceso de líquido y coloque el portaobjetos sumergido en un plato de tinción lleno de un tampón de lavado x, lave los portaobjetos durante dos minutos a temperatura ambiente con agitación constante y repita con un tampón de lavado de una x. Toque y deslice para eliminar cualquier exceso de líquido de las diapositivas y vuelva a colocarlos en el portaobjetos.Agregue aproximadamente cuatro gotas de temperatura ambiente AMP1 por sección para cubrir por completo cada sección. Cubra la bandeja con la tapa e insértela en el horno durante 30 minutos a 40 grados centígrados. Después de retirar la bandeja del horno, retire el portaobjetos.Trabajar una diapositiva a la vez, eliminar rápidamente cualquier exceso de líquido, y colocar el portaobjetos en el portaobjetos sumergido en un plato de tinción lleno de un tampón de lavado x, lavar durante dos minutos a temperatura ambiente con agitación constante, y repetir con un tampón de lavado fresco x. Dispensar el mismo número de gotas de cada solución DAB-A y DAB-B en un tubo de tamaño adecuado para hacer aproximadamente 120 microlitros de sustrato DAB por sección y vórtice. Tome cada diapositiva, una a la vez, desde el portaobjetos, y toque y deslice para eliminar el exceso de líquido y vuelva a colocarla en el portaobjetos.Pipeta aproximadamente 120 microlitros de mezcla DAB en cada sección del tejido, asegurándose de que las secciones estén cubiertas. Incubar durante 10 minutos a temperatura ambiente, y proceder con la contramancha. Coloque una gota de medio de montaje por listón de vidrio, y luego coloque los listones en los portaobjetos y déjelos secar al aire.Después de unas horas, proceda con la evaluación utilizando un microscopio óptico como se describe en el manuscrito. Como se describe aquí en el carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, la presencia de tinción punctiforma marrón en el citoplasma o en los núcleos de las células tumorales definió un caso positivo. Los resultados se dividieron en dos puntuaciones, RNA CISH alta y baja puntuación como se observó con un objetivo 20x.La tinción de la puntuación de ARN CISH se considera baja cuando se observa en menos del 50% de las células tumorales y cubre menos del 80% de la superficie celular. Por otro lado, la puntuación de ARN CISH es alta cuando se observa en más del 50% de las células cancerosas manchadas, o con la superficie de tinción superior al 80% en más del 30% de las células tumorales. Uno nunca debe dejar que las diapositivas se sequen para la hibridación.No olvide precalentar la sonda. Para cada muestra, realice un control positivo y negativo para evaluar la calidad del ARN.

Research

JoVE Journal

Genetics

Detection of Copy Number Alterations Using Single Cell Sequencing

Detección del número de copias alteraciones Uso de Secuenciación de los organismos unicelulares

Detection of genomic changes at single cell resolution is important for characterizing genetic heterogeneity and evolution in normal tissues, cancers, and ...

Investigación

Genética

Detection of Inter-chromosomal Stable Aberrations by Multiple Fluorescence In Situ Hybridization (mFISH) and Spectral Karyotyping (SKY) in Irradiated Mice

Detection of Inter-chromosomal Stable Aberrations by Multiple Fluorescence In Situ Hybridization mFISH and Spectral Karyotyping SKY in Irradiated Mice

La detección de Inter-Aberraciones cromosómicas estables por fluorescencia múltiple<em&gt; In Situ</em&gt; La hibridación (mFISH) y cariotipo espectral (SKY) en ratones irradiados

Ionizing radiation (IR) induces numerous stable and unstable chromosomal aberrations. Unstable aberrations, where chromosome morphology is substantially ...

A Standard Methodology to Examine On-site Mutagenicity As a Function of Point Mutation Repair Catalyzed by CRISPR/Cas9 and SsODN in Human Cells

Una metodología estándar para examinar in situ mutagenicidad en función de la mutación de punto reparación catalizada por CRISPR/Cas9 y SsODN en células humanas

Combinatorial gene editing using CRISPR/Cas9 and single-stranded oligonucleotides is an effective strategy for the correction of single-base point ...

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

High Resolution Fluorescent In Situ Hybridization in Drosophila Embryos and Tissues Using Tyramide Signal Amplification

Alta resolución fluorescente In Situ hibridación en embriones de Drosophila y tejidos utilizando amplificación de la señal de Tyramide

In our efforts to determine the patterns of expression and subcellular localization of Drosophila RNAs on a genome-wide basis, and in a variety of ...

Profiling DNA Replication Timing Using Zebrafish as an In Vivo Model System

Profiling DNA Replication Timing Using Zebrafish as an In Vivo Model System

Perfiles de sincronización de replicación de ADN utilizando el pez cebra como un sistema de modelo en Vivo

DNA replication timing is an important cellular characteristic, exhibiting significant relationships with chromatin structure, transcription, and DNA ...

Canalostomy As a Surgical Approach to Local Drug Delivery into the Inner Ears of Adult and Neonatal Mice

Canalostomy como un abordaje quirúrgico a la entrega del Local de la droga en los oídos interiores de ratones adultos y Neonatal

Local delivery of therapeutic drugs into the inner ear is a promising therapy for inner ear diseases. Injection through semicircular canals (canalostomy) ...

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualization of Microbiota in Tick Guts by Whole-mount In Situ Hybridization

Visualización de la Microbiota en agallas de garrapata por Whole-mount In Situ hibridación

Infectious diseases transmitted by arthropod vectors continue to pose a significant threat to human health worldwide. The pathogens causing these ...

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization (smFISH) Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

Single Molecule Fluorescence In Situ Hybridization smFISH Analysis in Budding Yeast Vegetative Growth and Meiosis

Sola molécula fluorescencia In Situ hibridación (smFISH) análisis de florecimiento levadura crecimiento vegetativo y la Meiosis

Single molecule fluorescence in situ hybridization (smFISH) is a powerful technique to study gene expression in single cells due to its ability to detect ...

Quantitative Analysis of Alternative Pre-mRNA Splicing in Mouse Brain Sections Using RNA In Situ Hybridization Assay

Quantitative Analysis of Alternative Pre-mRNA Splicing in Mouse Brain Sections Using RNA In Situ Hybridization Assay

Análisis cuantitativo de empalmes alternativos del Pre-mRNA en secciones de cerebro de ratón usando análisis de ARN In Situ hibridación

Alternative splicing (AS) occurs in more than 90% of human genes. The expression pattern of an alternatively spliced exon is often regulated in a cell ...

Tissue-specific miRNA Expression Profiling in Mouse Heart Sections Using In Situ Hybridization

Tissue-specific miRNA Expression Profiling in Mouse Heart Sections Using In Situ Hybridization

MiRNA de tejidos específicos perfiles de expresión en ratón corazón secciones usando el hibridación In Situ

micro-RNAs (miRNAs) are single-stranded RNA transcripts that bind to messenger RNAs (mRNAs) and inhibit their translation or promote their degradation. To ...