Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

تم دعم هذا البحث من قبل اتفاقية التعاون MDC (#416) ، اتفاقية تعاونية خدمات الغابات الأمريكية (16-JV-11242311-118) ، الأكاديمية الأمريكية للتغذية البيطرية ووالثام / رويال كانين ، منحة الولايات المتحدة الأمريكية (رقم المنحة: 00049049) ، منحة تدريب المعاهد القومية للصحة (رقم المنحة: T32OS011126) ، وبرنامج علماء البحوث البيطرية في جامعة ميسوري. يشكر المؤلفون شانون إهلرز على مراجعتها المسبقة لهذه المخطوطة. نشكر الدكتور روبرت باكيوس على توفير معايير D2O والسماح باستخدام مختبره.

تمت الموافقة على جميع التجارب الموصوفة هنا من قبل لجنة رعاية الحيوانات واستخدامها في جامعة ميسوري وأجريت بموجب تصريح التحصيل العلمي للحياة البرية (تصريح #16409 #17649).
1. إعداد حل العقيمة، متساوي التوتر، ممحلول D2O حل الأسهم
<ol><li>جعل حل الأسهم 50 مل من 9.0 ز / لتر مالات D2O.<...

<ol>
	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants.">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li><li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight,+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase&#8211;Deficient+Male+Cats.">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase&#8211;Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li><li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

وقد استخدم استخدام أكسيد الديوتريوم لتحديد TBW منذ 1940s17 ويستخدم في البشر ومجموعة متنوعة من الأنواع المنزلية والحياة البرية4،6،7. وقد تم تطوير تقنيات أخرى غير مدمرة بما في ذلك تحليل المعاوقة الكهربائية الحيوية (BIA)، DXA، والرنين ا...

نظم تسجيل حالة الجسم ومؤشرات حالة الجسم هي التقنيات الشائعة المستخدمة لتقييم الحالة الصحية أو اللياقة البدنية للأنواع1،2. العديد من الأنواع المنزلية والحيوانية لديها فريدة من نوعها حالة الجسم التهديف (BCS) النظم التي تستخدم لتقييم العضلات الحيوانية والأنسجة الدهنية السطحية3. ومع ذلك، يعتمد تقييم BCS على المقيّم - بمعنى أن BCS هو قياس موضوعي أو شبه كمي عند تقييمه من قبل مقيّم مدرب. في أنواع الحياة البرية ، تستخدم مؤشرات حالة الجسم بشكل شائع بدلاً من BCS وتستند إلى نسبة كتلة الجسم إلى حجم الجسم أو كتلة الجسم إلى الساعد2. وغالبا ما تكون مشوشة indicis حالة الجسم من آثار الأعلاف ويمكن الخلط بين حجم الجسم وكذلك المشاكل الإحصائية والاستدلال4.
بديل لأنظمة تسجيل حالة الجسم ومؤشرات حالة الجسم هو استخدام نظائر مستقرة لتحديد تكوين الجسم. أحد النظائر المستقرة الشائعة الاستخدام هو أكسيد الديوتريوم (D2O)، وهو شكل غير مشع من الماء تكون فيه ذرات الهيدروجين نظائر الديوتريوم. يمكن أن تكون طريقة تخفيف أكسيد الديوتريوم الموصوفة في هذه الدراسة تقنية غير ذاتية وكمية وقابلة للتكرار تستخدم لتقدير تكوين الجسم في البشر5 ومجموعة واسعة من الأنواع4،6،7. هذه التقنية يمكن أن تكون مفيدة لدراسة تكوين الجسم في الحياة البرية. على سبيل المثال، يمكن استخدامه لتقييم التغيرات الطولية في تكوين الجسم، كما هو الحال قبل وبعد إجراء الإدارة. ومع ذلك ، في بعض أنواع الحياة البرية يمكن أن يكون أكسيد الديوتريوم مبالغة في محتوى المياه الفعلي8. لذلك ، عند تكييف هذه التقنية لنوع ما ، من المهم التحقق من صحة الطريقة من خلال مقارنة طريقة أكسيد الديوتريوم بتحليل الذبيحة للأنواع غير المهددة بالانقراض. بالنسبة للأنواع المهددة والمهددة بالانقراض، ينبغي اعتبار طريقة غير مدمرة مثل قياس امتصاص الأشعة السينية المزدوج (DXA) طريقة مقارنة بديلة للطريقة المدمرة القياسية الذهبية للتحليل الكامل للجثث.
بالإضافة إلى تكوين الجسم ، يمكن استخدام تقنية التخفيف D2O لتحديد استهلاك المياه لفرد من الحيوانات9. يمكن استخدام هذا التطبيق الفريد من D2O للإجابة ليس فقط على أسئلة البحث ، ولكن يمكن أن يكون مفيدًا لتقييم استهلاك المياه لالحيوانات الفردية الموجودة في بيئات اجتماعية كبيرة.
هنا ، نصف تكييف تقنية التخفيف D2O لتقييم تكوين الجسم في الحشرات ، الخفافيش البنية الكبيرة(Eptesicus fuscus)، ولتقييم استهلاك المياه في آكل اللحوم ، والقطط(Felis catis).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

نظم تسجيل حالة الجسم ومؤشرات حالة الجسم هي التقنيات الشائعة المستخدمة لتقييم الحالة الصحية أو اللياقة البدنية للأنواع. نظم تسجيل حالة الجسم تعتمد على المقيّم ولديها القدرة على أن تكون ذاتية للغاية. يمكن الخلط بين مؤشرات حالة الجسم عن طريق الأعلاف ، وآثار وزن الجسم ، وكذلك المشاكل الإحصائية والاستدلالية. بديل لأنظمة تسجيل حالة الجسم ومؤشرات حالة الجسم هو استخدام نظائر مستقرة مثل أكسيد الديوتريوم لتحديد تكوين الجسم. طريقة تخفيف أكسيد الديوتريوم هي تقنية كمية قابلة للتكرار تستخدم لتقدير تكوين الجسم في البشر والحياة البرية والأنواع المحلية. بالإضافة إلى ذلك ، يمكن استخدام تقنية تخفيف أكسيد الديوتريوم لتحديد استهلاك المياه لفرد من الحيوانات. هنا ، نصف التكيف من تقنية تخفيف أكسيد الديوتريوم لتقييم تكوين الجسم في الخفافيش البنية الكبيرة(Eptesicus fuscus)وتقييم استهلاك المياه في القطط(Felis catis).

يمكن استخدام تقنية تخفيف أكسيد الديوتريوم لتقييم تكوين الجسم لمجموعة متنوعة من الأنواع. لإثبات القدرة على التكيف، ونحن الإبلاغ عن أول استخدام لتقنية تخفيف أكسيد الديوتريوم في الأنواع الخفافيش الحشرية في أمريكا الشمالية، Eptesicus fuscus، الخفافيش البني الكبير للحصول عل?...

Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

تصف هذه المقالة تقنية تخفيف أكسيد الديوتريوم في ثدييين ، وهو حشرة وآكلة لحوم ، لتحديد إجمالي مياه الجسم ، وكتلة الجسم الهزيلة ، وكتلة الدهون في الجسم ، واستهلاك المياه.

استخدام أكسيد الديوتريوم كأداة غير غازية وغير قاتلة لتقييم تكوين الجسم واستهلاك المياه في الثدييات

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

وباستخدام هذا البروتوكول، يمكن استخدام أكسيد الديوتيريوم، أو D2O، وهو نظير غير نشط ومستقر للمياه، لتقدير تكوين الجسم واستهلاك المياه. وهذه التقنية غير عضوية، وبالتالي يمكن استخدامها لتقييم تكوين الجسم في الأنواع المهددة بالانقراض، وكذلك في البشر والأنواع المحلية. ومن التطبيقات الفريدة لتقنية تخفيف أكسيد الديوتيريوم القدرة على قياس استهلاك المياه من الحياة البرية الحرة ذات معدلات الاستعادة العالية أو الحيوانات التي يسكنها المجتمع.في حين أن التخدير غير مطلوب ، فقد يكون من الأسهل على أولئك غير المعتادين إعطاء الحقن تحت الجلد لتخدير الحيوانات قبل تسليم أكسيد الديوتريوم. إظهار الإجراء مع سارة هوبر وأنا سيكون أماندا إشلمان وآشلي كوان، الطلاب البيطريين، وأليسيا روستاخر، طالبة الدراسات العليا من مختبري. لجعل حل مخزون 50 ملليلتر من تسعة غرامات لكل لتر أكسيد ديوتريوم ملوحة، أول وزن 450 ملليغرام من كلوريد الصوديوم الصيدلانية الصف، وتسجيل المبلغ الدقيق إلى أربعة منازل عشرية.نقل كل من الملح في منقار 100 ملليلتر معقمة، وقياس 50 غراما من أكبر من أو يساوي 99.8٪ أكسيد الديوتيريوم في العقيمة، واسطوانة تخرج. تسجيل الكمية الدقيقة من أكسيد الديوتيريوم إلى أربعة منازل عشرية، ونقل أكسيد الديوتيريوم إلى منقار معقمة كلوريد الصوديوم. بعد ذلك، قم بإرفاق إبرة من عيار 20 إلى فلتر قرص عقيم غير معقم مع مسام فرعية مزودة ببرميل حقنة من 10 ملليلتر، وأدخل الإبرة في الحاجز من قارورة عقيمة فارغة و100 ملليلتر.إرفاق أنبوب فراغ لإبرة قياس 22، وأدخل الإبرة في الحاجز من قارورة 100 ملليلتر. ثم تحميل 10 ملليلتر من قوة الصوديوم كلوريد الصوديوم في حقنة برميل، وتتحول ببطء على الفراغ حتى يبدأ حل أكسيد الديوتريوم في التصفية ببطء في القارورة. مواصلة صب محلول مخزون أكسيد الديوتيريوم في برميل الحقنة حتى تم تصفية كامل حجم 50 ملليلتر.بعد التأكد من عدم وجود استجابة لقرصة إصبع القدم في الخفافيش المُجَنَّدة ، استخدم وسادة إعدادية للكحول لتنظيف الـ uropatagium فوق الوريد الوريدي ، والسماح لغشاء الذيل المطهر بالجفاف. تطبيق طبقة رقيقة من هلام البترول على الوريد بين الفير، واستخدام إبرة قياس 29 لثقب الجزء الظهري من الوريد بين. ثم استخدام البلاستيك الصوديوم الهيبارين أنابيب الشعيرات الدموية لجمع 100 ميكرولترات من الدم.لضمان خلط كاف من الدم كله مع الهيبارين الصوديوم، لفة بلطف كل أنبوب بعد جمع الدم قبل وضع العلامات. بعد تحديد كتلة أكسيد الديوتريوم في غرام لحقن، تحميل حقنة الأنسولين مجهزة بإبرة قياس 29 مع الحجم المناسب من أكسيد الديوتريوم. وزن حقنة الأنسولين والإبرة المحملة بالديوتيريوم، وتسجيل الوزن إلى أربعة منازل عشرية، وحقن كامل حجم أكسيد الديوتيريوم تحت الجلد على منطقة الورك الظهرية من الخفافيش المخدّرة.نوصي باستخدام مقياس دقيق مع درع مشروع مضاد الساكنة والتأكد من الانسحاب على المكبس لضمان الضغط السلبي قبل الحقن. مباشرة بعد الحقن، وزن حقنة الأنسولين الفارغة الآن وإبرة، وتسجيل الوزن إلى أربعة منازل عشرية. في غضون 30 دقيقة بعد جمع الدم، واستخدام جهاز طرد مركزي دموي لتدور أسفل كل أنبوب الشعيرات الدموية في 10،000 مرات ز لمدة خمس دقائق.باستخدام مقص حاد، وقطع أنبوب الشعيرات الدموية البلاستيكية بين الدم كله والبلازما، واستخدام ماصة 200 ميكرولتر لطرد البلازما مباشرة إلى أنبوب تخزين المسمى، 500 ميكرولتر. بعد فترة التوازن، وجمع وتخزين آخر 100 ميكرولترات من الدم من الوريد بين الوريد كما أظهرت للتو. لتحليل الطيف FTIR، تعيين درجة حرارة حمام الرمل إلى 60 درجة مئوية لتسهيل التقطير، وإضافة 50 ميكرولترات من كل عينة البلازما والمعيار في الفردية 1.5 ملليلتر قبعات microcentuge مخروطية مخروطية.الحفاظ على غطاء microcentrifuge رأسا على عقب، المسمار أنبوب microcentuge مخرون 1.5 ملليلتر مخروطية على الغطاء، ووضع أنبوب مقلوب في اتصال مع الرمال في حمام الرمل لمدة لا تقل عن 12 ساعة. في صباح اليوم التالي، ضع غطاءً جديدًا ونظيفًا على كل أنبوب، ونبض أنابيب الطرد الدقيق لمدة 10 ثوانٍ في ميكروسنتريف. تثبيت خلية انتقال السائل في مطياف FTIR، وملء الخلية بالميثانول.توصيل منفذ الحقن، وملء ببطء الخلية مع المياه الخلفية مع إزالة بعناية حقنة الميثانول للحد من خطر فقاعات الهواء. إرفاق أنابيب إلى منفذ الإخراج للسماح بإزالة عينات بعد التحليل، وفتح برنامج الطيف FTIR. تعيين المعلمات وفقا للجدول، وجمع عينة خلفية باستخدام المياه المفلورة، 0.22 ميكرومتر مصفى، والمياه المقطر.حقن 40 ميكرولترات من أجزاء صفر في مليون من معيار أكسيد الديوتيريوم، وتسجيل وحفظ الأطياف كملف قيم مفصولة بفواصل. بعد حقن وحفظ أطياف جميع المعايير لإنشاء منحنى قياسي ، حقن 40 ميكرولترات من كل عينة مقطرة في خلية انتقال السائل ، وحفظ الأطياف. مع وقت توازن معروف ، يمكن تحديد إجمالي مياه الجسم ، وكتلة الجسم الهزيل ، وكتلة الدهون في الجسم للخفافيش البنية الكبيرة الكبيرة الأسيرة والخفافيش البنية الكبيرة.يمكن حساب كتلة الدهون في الجسم السلبية بسبب واحد أو أكثر من الأسباب التالية: عدم تلقي الجرعة الكاملة من أكسيد الديوتريوم، تصبح torpid خلال مرحلة التوازن، وجود الجماهير الدهون كبيرة بشكل غير طبيعي والجماهير العجاف الحد الأدنى، أو وجود أقل من ثلاثة إلى 5٪ الدهون في الجسم كما يحددها قياس البطن الأشعة السينية المزدوجة. هنا، يتم عرض نسبة مئوية تمثيلية من الدهون في الجسم التي تحددها تقنية تخفيف أكسيد الديوتيريوم مقارنة مع قياس أوبسوربتيو ثنائي الأشعة السينية. ويرتبط بشكل جيد بين التقنيات اثنين، مع كتلة الدهون في الجسم تظهر الارتباطات القوية بين الدهون في الجسم ووزن الجسم ومع تقنية تخفيف أكسيد الديوتيريوم لا باستمرار أكثر أو التقليل من كتلة الدهون في الجسم.وقد تم التحقق من صحة طريقة تخفيف أكسيد الديوتيريوم في السابق في القطط ، وتم تكييف هذه التقنية للسماح بقياس الاستهلاك اليومي للمياه للقطط التي يتم إيوها اجتماعيًا خلال كل كتلة غذائية من التجربة. تذكر أن هذه التقنية يجب أن يتم تنفيذها فقط على الحيوانات السليمة وأنه يجب عليك وزن، تسجيل، وتقديم الجرعة الكاملة من أكسيد الديوتيريوم إلى كل. ويمكن استكمال طريقة ثانوية لتحديد تكوين الجسم، مثل تحليل الذبيحة الكاملة أو DEXA، للتحقق من صحة تقنية أكسيد الديوتيريوم.سمحت لنا هذه التقنية بتحديد قطة ذات اٍجتماعية تستهلك كميات عالية بشكل غير طبيعي من المياه دون فصل كل قطة لقياس استهلاكها للمياه.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

التي تحددها المختبر الفوسفور الجريان من بحيرة الرواسب كمقياس للتحميل الفوسفور الداخلية

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

استخدام الوامئات (ذوات الجناحين) العذراء سلخ بمثابة بروتوكول Bioassessment السريع لالمسطحات المائية العائمة السطحية

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA الطريقة 1615. قياس الفيروسة المعوية ونوروفيروس التواجد في المياه عن طريق الثقافة وRT-QPCR. الجزء الثالث. كشف الفيروس عن طريق RT-QPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

إزالة العناصر النزرة التي كتبها نحاسي أكسيد النانوية من اليورانيوم<em&gt; في الموقع</em&gt; استرداد التسييل المياه وتأثيره على بقاء الخلية

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

التربة مقياس الذوبان الحفر في جانب الهيدرولوجي، الجيوكيميائية، والتحقيقات الميكروبيولوجية

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

الكشف عن آخر الغدد الصماء في المياه عن طريق المتاحة تجاريا<em&gt; في المختبر</em&gt; Transactivation اختبارات بيولوجية

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

البروتوكول المتعلق بتقييم الآثار النسبية للبيئة وعلم الوراثة في قرن الوعل ونمو الجسم سيرفيد المعمرة

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas

تكوين وخصائص أقوافابا: المياه المستردة من الحمص المعلبة تجارياً

Chickpea and other pulses are commonly sold as canned products packed in a thick solution or a brine. This solution has recently been shown to produce ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

بسيطة زراعة تقنية لإعادة إنشاء الأشجار التي يحدث فيها غمر متكررة

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

الإجراء الأمثل لتحديد "الامتزاز فوسفوناتيس" على "هيدروكسيد الحديديك الحبيبية" باستخدام "أسلوب تحديد الفوسفور المنمنمة"

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...