Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Dit onderzoek werd ondersteund door MDC Cooperative Agreement (#416), US Forest Service Cooperative Agreement (16-JV-11242311-118), American Academy of Veterinary Nutrition en Waltham/Royal Canin, USA Grant (subsidienummer: 00049049), NIH-opleidingsbeurs (subsidienummer: T32OS011126) en het University of Missouri Veterinary Research Scholars Program. De auteurs bedanken Shannon Ehlers voor het vooraf beoordelen van dit manuscript. Wij danken Dr. Robert Backus voor het verstrekken van de D2O normen en het toestaan van het gebruik van zijn laboratorium.

Alle experimenten hier beschreven werden goedgekeurd door de Universiteit van Missouri Animal Care and Use Committee en uitgevoerd onder de Missouri Department of Conservation (MDC) Wildlife Scientific Collection vergunning (Vergunning #16409 en #17649).
1. Bereiding van steriele, isotone, verzilte D2O-voorraadoplossing
<ol><li>Maak een 50 mL voorraad oplossing van 9,0 g/L salinated D2O.<ol>
<li>Weeg 450 mg nacl van farmaceutische kwaliteit en breng alle NaCl over in ee...

<ol>
	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants.">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li><li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight,+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase&#8211;Deficient+Male+Cats.">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase&#8211;Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li><li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

Het gebruik van deuteriumoxide om TBW te bepalen wordt sinds de jaren 194017 gebruikt en wordt gebruikt bij mensen en een verscheidenheid aan huisdieren- en wilde diersoorten4,6,7. Andere niet-destructieve technieken zijn ontwikkeld, waaronder bio-elektrische impedantie analyse (BIA), DXA, en kwantitatieve magnetische resonantie (QMR). Elke methode heeft voor- en nadelen die in overweging moeten worden ge...

Body condition scoring systemen en body condition indexen zijn veel voorkomende technieken die worden gebruikt voor de beoordeling van de gezondheidstoestand of geschiktheid van een soort1,2. Veel binnenlandse en zoölogische soorten hebben unieke body condition scoring (BCS) systemen die worden gebruikt om de spier van een dier en oppervlakkig vetweefsel te beoordelen3. BCS-beoordeling is echter afhankelijk van de evaluator, wat betekent dat BCS een objectieve of semikwantitatieve meting is wanneer deze wordt beoordeeld door een getrainde beoordelaar. Bij wilde diersoorten worden lichaamsconditieindexen vaak gebruikt in plaats van BCS en zijn gebaseerd op een verhouding van lichaamsmassa tot lichaamsgrootte of lichaamsmassa tot onderarm2. Lichaamsconditie indicis zijn vaak verward door de effecten van foerageren en kan worden verward door de lichaamsgrootte, alsmede statistische en inferentieve problemen4.
Een alternatief voor lichaamsconditie scoringsystemen en lichaamsconditieindexen is het gebruik van een stabiele isotoop om de lichaamssamenstelling te bepalen. Een veelgebruikte stabiele isotoop is deuteriumoxide (D2O), een niet-radioactieve vorm van water waarin de waterstofatomen deuteriumisotopen zijn. De deuteriumoxideverdunningsmethode die in deze studie wordt beschreven, kan een niet-subjectieve, kwantitatieve en herhaalbare techniek zijn die wordt gebruikt om de lichaamssamenstelling bij mensen te schatten5 en een breed scala aan soorten4,6,7. Deze techniek kan voordelig zijn voor het bestuderen van de lichaamssamenstelling in het wild. Het kan bijvoorbeeld worden gebruikt om longitudinale veranderingen in lichaamssamenstelling te beoordelen, zoals voor en na een beheersactie. Bij sommige wilde diersoorten kan deuteriumoxide echter het werkelijke watergehalte overschatten8. Daarom is het bij de aanpassing van de techniek voor een soort belangrijk om de methode te valideren door de deuteriumoxidemethode te vergelijken met karkasanalyse voor niet-bedreigde soorten. Voor bedreigde en bedreigde soorten moet een niet-destructieve methode, zoals dubbele röntgenonthouding (DXA), worden beschouwd als een alternatieve vergelijkingsmethode voor de goudstandaarddestructieve methode voor volledige karkasanalyse.
Naast de lichaamssamenstelling kan de D2O verdunningstechniek worden gebruikt om het waterverbruik van een individueel dier te bepalen9. Deze unieke toepassing van D2O kan worden gebruikt om niet alleen onderzoeksvragen te beantwoorden, maar kan ook nuttig zijn voor het beoordelen van het waterverbruik van individuele dieren(en) die in grote sociale omgevingen zijn gehuisvest.
Hier beschrijven we de aanpassing van de D2O verdunningstechniek voor het beoordelen van lichaamssamenstelling in een insectivore, grote bruine vleermuizen(Eptesicus fuscus), en voor het beoordelen van het waterverbruik bij een carnivoor, katten (Felis catis).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

Body condition scoring systemen en body condition indexen zijn veel voorkomende technieken die worden gebruikt voor de beoordeling van de gezondheidstoestand of fitness van een soort. Body condition scoring systemen zijn evaluator afhankelijk en hebben het potentieel om zeer subjectief. Body condition indices kunnen worden verward door foerageren, de effecten van lichaamsgewicht, evenals statistische en inferential problemen. Een alternatief voor lichaamsconditie scoringsystemen en lichaamsconditieindexen is het gebruik van een stabiele isotoop zoals deuteriumoxide om de lichaamssamenstelling te bepalen. De deuteriumoxideverdunningsmethode is een herhaalbare, kwantitatieve techniek die wordt gebruikt om de lichaamssamenstelling bij mensen, dieren in het wild en in het wild te schatten. Bovendien kan de deuteriumoxideverdunningstechniek worden gebruikt om het waterverbruik van een individueel dier te bepalen. Hier beschrijven we de aanpassing van de deuteriumoxide verdunningstechniek voor het beoordelen van de lichaamssamenstelling bij grote bruine vleermuizen(Eptesicus fuscus)en voor het beoordelen van het waterverbruik bij katten(Felis catis).

De deuteriumoxideverdunningstechniek kan worden gebruikt om de lichaamssamenstelling van een verscheidenheid aan soorten te beoordelen. Om het aanpassingsvermogen aan te tonen, rapporteren we het eerste gebruik van de deuteriumoxideverdunningstechniek in een Noord-Amerikaanse insectenetende vleermuissoort, Eptesicus fuscus, de grote bruine vleermuis voor representatieve resultaten. Een timing plateau werd voltooid door het nemen van pre- en post-D2O injectie bloedmonst...

Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

Dit artikel beschrijft de deuteriumoxide verdunningstechniek bij twee zoogdieren, een insectivore en carnivoor, om het totale lichaamswater, de spiermassa, de massa van lichaamsvet en het waterverbruik te bepalen.

Het gebruik van Deuteriumoxide als niet-invasief, niet-dodelijk hulpmiddel voor de beoordeling van lichaamssamenstelling en waterverbruik bij zoogdieren

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

Met behulp van dit protocol kan deuteriumoxide of D2O, een niet-radioactieve, stabiele isotoop van water, worden gebruikt om de lichaamssamenstelling en het waterverbruik te schatten. Deze techniek is niet invasief en kan daarom worden gebruikt om de lichaamssamenstelling bij bedreigde soorten te beoordelen, evenals bij mensen en huisdieren. Een unieke toepassing van de deuteriumoxide verdunningstechniek is de mogelijkheid om het waterverbruik van vrijuitlopende dieren te meten met hoge heroveringspercentages of van sociaal gehuisveste dieren.Hoewel anesthesie niet nodig is, kan het voor degenen die niet bekend zijn met het geven van onderhuidse injecties gemakkelijker zijn om de dieren te verdoven voordat het deuteriumoxide wordt geleverd. Demonstreren van de procedure met Sarah Hooper en ik zal Amanda Eshelman en Ashley Cowan, veterinaire studenten, en Alicia Roistacher, een afgestudeerde student uit mijn laboratorium. Om een 50-milliliter voorraad oplossing van negen gram per liter verzilt deuteriumoxide te maken, eerst wegen 450 milligram van farmaceutische kwaliteit natriumchloride, en registreren van de exacte hoeveelheid vier decimalen.Breng al het zout in een gesteriliseerde 100-milliliter bekerglas, en meet 50 gram groter dan of gelijk aan 99,8% deuteriumoxide in een steriele, afgestudeerde cilinder. Schrijf de exacte hoeveelheid deuteriumoxide op vier decimalen en breng het deuteriumoxide over op het steriele bekerglas natriumchloride. Bevestig vervolgens een naald van 20 meter aan een niet-steriliserend, steriel schijffilter met submicronporiën die zijn uitgerust met een spuitvat van 10 milliliter en steek de naald in het septum van een steriele, lege flacon van 100 milliliter.Bevestig een vacuümbuis aan een naald van 22 meter en steek de naald in het septum van de 100-milliliter flacon. Laad vervolgens 10 milliliter isosmotische sterkte natriumchloride in het spuitvat en zet het vacuüm langzaam aan totdat de deuteriumoxideoplossing langzaam in de flacon begint te filteren. Blijf de deuteriumoxidevoorraadoplossing in het spuitvat gieten totdat het volledige volume van 50 milliliter is gefilterd.Na bevestiging van een gebrek aan respons op teen knijpen in een verdoofde vleermuis, gebruik maken van een alcohol prep pad om het uropatagium schoon over de interfemorale ader, en laat de ontsmette staart membraan te drogen. Breng een dunne laag vaseline aan over de interfemorale ader en gebruik een naald van 29 meter om het dorsale gedeelte van de interfemorale ader te doorboren. Gebruik dan plastic natriumheparine capillaire buizen om 100 microliter bloed te verzamelen.Om een adequate vermenging van het hele bloed met de natriumheparine te garanderen, rolt u voorzichtig elke buis na de bloedafname voordat u het labelt. Na het bepalen van de massa van deuteriumoxide in gram te injecteren, laad een insulinespuit uitgerust met een 29-gauge naald met de juiste hoeveelheid deuteriumoxide. Weeg de deuterium-geladen insulinespuit en naald, het registreren van het gewicht tot vier decimalen, en injecteren het gehele volume van deuteriumoxide onderhuids over de dorsale heup regio van de verdoofde vleermuis.We raden u aan een precisieschaal met een antistatisch ontwerpschild te gebruiken en ervoor te zorgen dat u zich terugtrekt op de zuiger om negatieve druk te garanderen voordat u gaat injecteren. Direct na de injectie, weeg de nu lege insulinespuit en naald, en registreert het gewicht tot vier decimalen. Gebruik binnen 30 minuten na de bloedafname een hematocrietcentrifuge om gedurende vijf minuten op elke capillaire buis op 10.000 keer g te draaien.Met behulp van een scherpe schaar, snijd de plastic capillaire buis tussen het hele bloed en het plasma, en gebruik een 200-microliter pipet om het plasma direct te verdrijven in een gelabelde, 500-microliter opbergbuis. Verzamel en bewaar na de evenwichtsperiode nog eens 100 microliter bloed uit de interfemorale ader, zoals zojuist is aangetoond. Voor FTIR spectrofotometrie analyse, stel de temperatuur van een zandbad op 60 graden Celsius om distillatie te vergemakkelijken, en voeg 50 microliter van elk plasma monster en standaard in individuele 1,5-milliliter conische microcentrifuge doppen.Houd de microcentrifuged ondersteboven, schroef de 1,5 milliliter conische microcentrifugebuis op de dop en plaats de omgekeerde buis minimaal 12 uur in contact met het zand in het zandbad. De volgende ochtend, plaats een nieuwe, schone dop op elke buis, en puls de microcentrifuge buizen voor 10 seconden in een microcentrifuge. Installeer een vloeibare transmissiecel in de FTIR-spectrometer en vul de cel met methanol.Sluit de injectiepoort aan en vul de cel langzaam met achtergrondwater terwijl u de methanolspuit zorgvuldig verwijdert om het risico op luchtbellen te verminderen. Bevestig buizen aan de uitvoerpoort om de monsters na analyse te verwijderen en open de FTIR-spectrometersoftware. Stel de parameters in op basis van de tabel en verzamel een achtergrondmonster met behulp van het verdunningslichaam, 0,22 micrometer gefilterd, gedestilleerd water.Injecteer 40 microliter van een nul delen per miljoen deuteriumoxide standaard, en registreren en opslaan van de spectra als een komma-gescheiden waarden bestand. Na het injecteren en opslaan van de spectra van alle normen om een standaardcurve te creëren, injecteer 40 microliter van elk gedestilleerd monster in de vloeibare transmissiecel en sla de spectra op. Met een bekende evenwichtstijd kunnen het totale lichaamswater, de vetvrije massa en de massa van het lichaamsvet voor wild gevangen grote bruine vleermuizen en gevangen grote bruine vleermuizen worden bepaald.Een negatieve lichaamsvetmassa kan worden berekend als gevolg van een of meer van de volgende redenen: het niet ontvangen van de volledige dosis deuteriumoxide, torpid worden tijdens de evenwichtsfase, abnormaal grote vetmassa's en minimale magere massa's hebben, of minder dan drie tot 5% lichaamsvet hebben zoals bepaald door dubbele x-ray absorptiometrie. Hier wordt een representatief percentage lichaamsvet weergegeven dat wordt bepaald door de verdunningstechniek van de baarmoederoxide in vergelijking met dubbele röntgenaborptiometrie. De twee technieken zijn goed gecorreleerd, met de lichaamsvetmassa die sterke correlaties tussen het lichaamsvet en lichaamsgewicht en met de deuteriumoxide verdunningstechniek niet constant over of onderschatting van de lichaamsvetmassa toont.De deuteriumoxideverdunningsmethode is eerder gevalideerd bij katten, en de techniek werd aangepast om het dagelijkse waterverbruik van sociaal gehuisveste katten tijdens elk voedingsblok van het experiment te kunnen meten. Vergeet niet dat deze techniek alleen moet worden uitgevoerd op gezonde dieren en dat u nauwkeurig moet wegen, registreren, en leveren van de volledige dosis deuteriumoxide aan elk dier. Een secundaire methode voor het bepalen van de lichaamssamenstelling, zoals volledige karkasanalyse of DEXA, kan worden voltooid om de deuteriumoxidetechniek te valideren.Deze techniek stelde ons in staat om een sociaal gehuisveste kat te identificeren die abnormaal grote hoeveelheden water consumeerde zonder elke kat te scheiden om hun waterverbruik te meten.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

-Laboratorium bepaald Fosfor Flux van het meer van sedimenten als een interne maatregel Fosfor Laden

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Gebruik van Chironomidae (Diptera)-Surface Drijvende Pupal Exuviae als Rapid Protocol Bioassessment voor Water Bodies

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615. Meting van Enterovirus en Norovirus Voorkomen in water per cultuur en RT-qPCR. Deel III. Virus Detectie door RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Verwijdering van Trace Elements van Cupric Oxide Nanodeeltjes van Uranium<em&gt; In Situ</em&gt; Herstel Bleed Water en het effect op levensvatbaarheid van de cellen

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

Soil Lysimeteronderzoek Opgraving voor Gekoppeld Hydrologisch, geochemische en microbiologische Onderzoeken

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening op hormonale activiteit in water met behulp van de handel verkrijgbare<em&gt; In Vitro</em&gt; Transactivering Bioassays

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

Protocol voor het beoordelen van de relatieve effecten van milieu en genetica op gewei en lichaam groei voor een langlevende Cervid

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas

Samenstelling en eigenschappen van Aquafaba: Water verhaald commercieel blik kikkererwten

Chickpea and other pulses are commonly sold as canned products packed in a thick solution or a brine. This solution has recently been shown to produce ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

Een eenvoudige aanplant techniek voor het opnieuw vaststellen van bomen waar frequente inundatie treedt op

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

Geoptimaliseerde Procedure voor de bepaling van de adsorptie van fosfonaten op granulaire Ferric Hydroxide met behulp van een methode fosfor sleutelbepaling verkleind

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...