Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

מחקר זה היה נתמך על ידי MDC הסכם שיתופי (#416), ארה ב השירות היער שיתופי הסכם (16-JV-11242311-118), האקדמיה האמריקנית לתזונה וטרינרית וולת/רויאל Canin, ארה ב גרנט (גרנט מספר: 00049049), NIH הדרכה מענק (גרנט מספר: T32OS011126), והאוניברסיטה של מיזורי המחברים מודים לשנון על הסקירה המוקדמת של כתב היד. אנו מודים ד ר רוברט Backus על מתן סטנדרטים D2O ולאפשר שימוש במעבדה שלו.

כל הניסויים המתוארים כאן אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים של אוניברסיטת מיזורי ובניצוחו של משרד החוץ במיזורי (MDC) היתר האוסף המדעי (היתרים #16409 ו#17649).
1. הכנת התמיסה סטרילית, איזוטוניק, מניות2O של הפתרון
<ol><li>להפוך פתרון מניות 50 mL של 9.0 g/L salinated D2O.<ol>
<li>שוקלים 450 מ ?...

<ol>
	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants.">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li><li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight,+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase&#8211;Deficient+Male+Cats.">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase&#8211;Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li><li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

השימוש תחמוצת דאומיום כדי לקבוע tbw כבר בשימוש מאז 1940 s17 והוא משמש בבני אדם מגוון של מינים מקומיים וחיות בר4,6,7. טכניקות אחרות שאינן הרסניות פותחו כולל ניתוח עכבה ביולוגית (BIA), DXA, ותהודה מגנטית כמותית (QMR). לכל שיטה יש יתרונות וחסר...

מצב הגוף מערכות הניקוד ומדדי מצב הגוף הם טכניקות נפוצות המשמשות להערכת מצב הבריאות או הכושר של מין1,2. מינים רבים ביתיים וזואולוגיים יש מערכות ייחודיות הגוף הבקיע (BCS) מערכת המשמשים להערכת השריר של בעל החיים רקמת שומן שטחית3. עם זאת, הערכת BCS מסתמך על המאבחן — כלומר BCS היא מדידה אובייקטיבית או חצי כמותית כאשר מוערך על ידי מעריך מיומן. במינים של חיות הבר, מדדי מצב הגוף משמשים בדרך כלל ולא BCS ומבוססים על היחס של מסת הגוף לגודל הגוף או מסת הגוף לזרוע2. מצב הגוף הצביע מבולבל לעתים קרובות על ידי ההשפעות של האוכל והוא יכול להיות מבולבל על ידי גודל הגוף, כמו גם בעיות סטטיסטיות ומסקנות4.
חלופה למצב הגוף מערכות הבקיע ומדדי המצב הגוף משתמש איזוטופ יציב כדי לקבוע את הרכב הגוף. איזוטופ יציב בשימוש נפוץ הוא תחמוצת דאוטיום (D2O), צורה לא רדיואקטיבית של מים שבו אטומי המימן הם איזוטופים מימן. השיטה לדילול תחמוצת דאונטיום המתואר במחקר זה יכול להיות שאינה סובייקטיבית, כמותית, ו לשחזור טכניקה המשמש להערכת הרכב הגוף בבני אדם5 מגוון רחב של זנים4,6,7. טכניקה זו יכולה להיות יתרון עבור לימוד הרכב הגוף בחיות בר. לדוגמה, ניתן להשתמש בה להערכת שינויי האורך בקומפוזיציה הגוף, כגון לפני ואחרי פעולת ניהול. עם זאת, בכמה מינים של חיות בר דאומיום תחמוצת יכול להיות מפריז באופן מיותר את תוכן המים בפועל8. לכן, בהתאמת הטכניקה למין, חשוב לאמת את השיטה באמצעות השוואת שיטת התחמוצת הדאוטריום לניתוח של מינים שאינם בסכנת הכחדה. עבור מינים מאוימים ובסכנת הכחדה, יש להתייחס לשיטה לא הרסנית כגון בדיקת רנטגן כפולה (DXA) כשיטת השוואה חלופית לשיטה ההרסנית בתקן הזהב לניתוח מוחלט של הגווייה.
בנוסף לקומפוזיציה הגוף, ניתן להשתמש בטכניקת הדילול D2O כדי לקבוע את צריכת המים של בעל חיים בודד9. יישום ייחודי זה של D2O יכול לשמש כדי לענות לא רק שאלות מחקר, אבל יכול להיות שימושי להערכת צריכת המים של בעלי חיים בודדים שוכנו הגדרות חברתיות גדולות.
כאן, אנו מתארים את עיבוד של טכניקת D2O דילול להערכת הרכב הגוף ב אוכלי בשר, עטלפים חומים גדולים (eptesicus גומא), ולהערכת צריכת המים בטורף, חתולים (felis catis).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

מצב הגוף מערכות הניקוד ומדדי מצב הגוף הם טכניקות נפוצות המשמשות להערכת מצב הבריאות או הכושר של מינים. מצב הגוף מערכות הניקוד הם תלויי מעריך ויש להם את הפוטנציאל להיות סובייקטיבי מאוד. מדדי מצב הגוף יכול להיות מבולבל על ידי מזון, ההשפעות של משקל הגוף, כמו גם בעיות סטטיסטיות ומסקנות. חלופה למצב הגוף מערכות הניקוד מדדי מצב הגוף משתמש איזוטופ יציב כגון תחמוצת דאונטיום כדי לקבוע הרכב הגוף. השיטה לדילול תחמוצת דאונטיום היא שיטה כמותית, המשמשת להערכת הרכב הגוף בבני אדם, חיות בר, ומינים ביתיים. בנוסף, ניתן להשתמש בטכניקת הדילול תחמוצת הדאויום כדי לקבוע את צריכת המים של בעל חיים יחיד. כאן, אנו מתארים את עיבוד של טכניקת הדילול תחמוצת דאומיום להערכת הרכב הגוף בעטלפים חומים גדולים (eptesicus גומא) ולהערכת צריכת המים אצל חתולים (felis catis).

ניתן להשתמש בטכניקת הדילול תחמוצת הדאויום כדי להעריך את הרכב הגוף של מגוון מינים. כדי להדגים את הסתגלות, אנו מדווחים על השימוש הראשון של הטכניקה לדילול תחמוצת דאומיום במינים insectivorous bat בצפון אמריקה, eptesicus גומא, העטלף החום הגדול עבור תוצאות המייצג. מישור העיתוי הושלם ע...

Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

מאמר זה מתאר את הטכניקה לדילול תחמוצת הדאויום בשני יונקים, אוכלי בשר וטורף, כדי לקבוע מי הגוף המלא, מסת הגוף רזה, מסת שומן הגוף, ואת צריכת המים.

שימוש תחמוצת דאונטיום ככלי לא פולשני, לא קטלני להערכת הרכב הגוף צריכת המים ביונקים

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

באמצעות פרוטוקול זה, תחמוצת דיטריום, או D2O, איזוטופ לא רדיואקטיבי ויציב של מים, ניתן להשתמש כדי להעריך את הרכב הגוף ואת צריכת המים. טכניקה זו אינה פולשנית ולכן ניתן להשתמש בה כדי להעריך את הרכב הגוף במינים בסכנת הכחדה, כמו גם בבני אדם ומינים מקומיים. יישום ייחודי של טכניקת דילול תחמוצת deuterium היא היכולת למדוד את צריכת המים של חיות בר חופשיות עם שיעורי כיבוש גבוהים או של בעלי חיים שוכנים חברתית.בעוד הרדמה אינה נדרשת, זה עשוי להיות קל יותר עבור אלה שאינם מכירים עם מתן זריקות תת עורית כדי להרגיע את בעלי החיים לפני אספקת תחמוצת דיטריום. הדגמת ההליך עם שרה הופר ואני תהיה אמנדה אשלמן ואשלי קוואן, סטודנטים וטרינריים, ואלישיה רויסטצ'ר, סטודנטית לתואר שני מהמעבדה שלי. כדי להפוך את פתרון מלאי 50 מיליליטר של תשעה גרם לליטר תחמוצת דיטריום מליחות, הראשון לשקול 450 מיליגרם של נתרן כלוריד כיתה התרופות, ולתרשם את הסכום המדויק לארבעה מקומות עשרוניים.מעבירים את כל המלח לתוך מקור מעוקר 100 מיליליטר, ולמדוד 50 גרם של גדול או שווה ל 99.8% תחמוצת deuterium בצילינדר סטרילי, מדורג. רשום את הכמות המדויקת של תחמוצת דיטריום לארבעה מקומות עשרוניים, והעבר את תחמוצת הדאוטריום לסק הסטרילי של נתרן כלורי. לאחר מכן, חבר מחט של 20 מד למסנן דיסק סטרילי לא פירוגני עם נקבוביות תת-מיקרון המצוידות בחבית מזרק של 10 מיליליטר, והכנס את המחט למחיצה של בקבוקון סטרילי, ריק, 100 מיליליטר.חבר שפופרת ואקום למחט 22-מד, ולהכניס את המחט למחיצה של בקבוקון 100 מיליליטר. לאחר מכן לטעון 10 מיליליטר של נתרן כלורי חוזק איזוסמוטי לתוך חבית המזרק, ולאט לאט להפעיל את הוואקום עד פתרון תחמוצת deuterium מתחיל לאט לסנן לתוך הבקבוקון. המשך לשפוך את פתרון מלאי תחמוצת דיטריום לתוך חבית המזרק עד נפח 50 מיליליטר כולו כבר מסונן.לאחר אישור חוסר תגובה לצביטת בוהן במחבט הרדמה, השתמש כרית הכנה לאלכוהול כדי לנקות את uropatagium על וריד interfemoral, ולאפשר קרום הזנב חיטוי להתייבש. החל שכבה דקה של ג'לי נפט על וריד interfemoral, ולהשתמש מחט 29-מד כדי לנקב את החלק הגבי של וריד בין ירך. לאחר מכן השתמש צינורות נימי נתרן הפרין פלסטיק כדי לאסוף 100 microliters של דם.כדי להבטיח ערבוב נאות של כל הדם עם הפרין נתרן, בעדינות לגלגל כל צינור לאחר איסוף הדם לפני תיוג. לאחר קביעת המסה של תחמוצת דיטריום בגרמים להזרקה, לטעון מזרק אינסולין מצויד מחט 29-מד עם הנפח המתאים של תחמוצת דיטריום. לשקול את מזרק האינסולין טעון deuterium ומחט, הקלטת המשקל לארבעה מקומות עשרוניים, ולהזריק את כל נפח תחמוצת דיטריום תת עורית מעל אזור הירך הגבית של העטלף הרדמה.אנו ממליצים להשתמש בסולם דיוק עם מגן טיוטה אנטי סטטי כדי לוודא למשוך בחזרה על הבוכנה כדי להבטיח לחץ שלילי לפני ההזרקה. מיד לאחר ההזרקה, שוקלים את מזרק האינסולין והמחט הריקים כעת, ותרשום את המשקל לארבעה מקומות עשרוניים. בתוך 30 דקות לאחר איסוף הדם, השתמש צנטריפוגה המטוקריט להסתובב למטה כל צינור נימי ב 10, 000 פעמים g במשך חמש דקות.בעזרת מספריים חדים, חותכים את צינור נימי הפלסטיק בין כל הדם לפלזמה, ולהשתמש בפיפיטה של 200 מיקרוליטר כדי לגרש את הפלזמה ישירות לצינור אחסון מתויג של 500 מיקרוליטר. לאחר תקופת שיווי המשקל, לאסוף ולאחסן עוד 100 microliters של דם מן הוריד הבין-מוסרי כפי שהוכח רק. לניתוח ספקטרופוטומטריה של FTIR, קבעו את הטמפרטורה של אמבט חול ל-60 מעלות צלזיוס כדי להקל על הזיקוק, והוסיפו 50 מיקרוליטרים של כל דגימת פלזמה וסטנדרט למכסות מיקרוצנטריפוגה קוניות בודדות של 1.5 מיליליטר.שמירה על כובע microcentrifuge במהופך, בורג צינור מיקרוצנטריפוגה חרוט 1.5 מיליליטר על הכובע, ולה מניחים את הצינור ההפוך במגע עם החול באמבט החול במשך מינימום של 12 שעות. למחרת בבוקר, מניחים כובע חדש ונקי על כל צינור, ודופקים את צינורות המיקרוצנטריפוגה למשך 10 שניות במיקרוצנטריפוגה. התקן תא שידור נוזלי לתוך ספקטרומטר FTIR, ולמלא את התא עם מתנול.חבר את יציאת ההזרקה, ומלא לאט את התא במים ברקע תוך הסרה זהירה של מזרק המתנול כדי להפחית את הסיכון לבועות אוויר. צרף צינורות ליציאת הפלט כדי לאפשר הסרה של הדגימות לאחר הניתוח, ולפתוח את תוכנת ספקטרומטר FTIR. הגדר את הפרמטרים לפי הטבלה, ולאסוף מדגם רקע באמצעות diluent, 0.22 מיקרומטר מסונן, מים מזוקקים.להזריק 40 microliters של אפס חלקים למיליון תחמוצת דיטריום סטנדרטי, ולהקליט ולשמור את הספקטרום כקובץ ערכים מופרדים פסיק. לאחר הזרקת ושמירה של הספקטרום של כל התקנים כדי ליצור עקומה סטנדרטית, להזריק 40 microliters של כל מדגם מזוקק לתוך תא השידור הנוזלי, ולשמור את הספקטרום. עם זמן שיווי משקל ידוע, ניתן לקבוע את מי הגוף הכוללים, מסת הגוף הרזה ואת מסת השומן בגוף עבור עטלפים חומים גדולים שנתפסו בטבע ועטלפים חומים גדולים שבויים.מסת שומן גוף שלילית ניתן לחשב בשל אחת או יותר מהסיבות הבאות:לא מקבל את כל המינון של תחמוצת דיטריום, הופך טורפיד במהלך שלב שיווי המשקל, שיש מסות שומן גדולות באופן חריג מסות רזה מינימלי, או שיש תחת שלוש עד 5% שומן הגוף כפי שנקבע על ידי אבזרות רנטגן כפול. כאן, אחוז מייצג של שומן הגוף נקבע על ידי טכניקת דילול תחמוצת deuterium לעומת אבסולינומטריה רנטגן כפול מוצג. שתי הטכניקות מתואמות היטב, כאשר מסת השומן בגוף מראה מתאמים חזקים בין שומן הגוף ומשקל הגוף ועם טכניקת דילול תחמוצת דיטריום לא באופן עקבי מעל או להמעיט במסת השומן בגוף.שיטת דילול תחמוצת הדטריום אומתה בעבר בחתולים, והטכניקה הותאמה כדי לאפשר מדידה של צריכת המים היומית של חתולים שוכנים חברתית במהלך כל בלוק תזונתי של הניסוי. זכור כי טכניקה זו צריכה להתבצע רק על בעלי חיים בריאים, כי אתה צריך לשקול במדויק, להקליט, ולספק את המינון המלא של תחמוצת דיטריום לכל בעל חיים. שיטה משנית לקביעת הרכב הגוף, כגון ניתוח פגר מלא או DEXA, ניתן להשלים כדי לאמת את טכניקת תחמוצת דיטריום.טכניקה זו אפשרה לנו לזהות חתול בעל בית חברתי שצרך כמויות גבוהות באופן חריג של מים מבלי להפריד כל חתול כדי למדוד את צריכת המים שלו.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

נקבע מעבדה זרחן שטף מאגם המשקעים כמדד לטעינה הפנימית זרחן

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

שימוש בChironomidae (כפולי כנף) גלמי Exuviae כמהיר Bioassessment פרוטוקול לגופי מים צפים-שטח

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA שיטת המדידה של 1615. Enterovirus ומופע norovirus במים על ידי תרבות וRT-qPCR. חלק שלישי. איתור וירוסים על ידי RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

הסרת יסודות קורט ידי Cupric תחמוצת חלקיקים מאורניום<em&gt; באתר</em&gt; שחזור Bleed מים והשפעתה על כדאיויות תא

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

חפירה באדמה Lysimeter עבור ההידרולוגי מצמידים, גיאוכימיות, וחקירות מיקרוביולוגיות

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

סיקור הפעילות האנדוקרינית במים באמצעות מסחרי-זמין<em&gt; במבחנה</em&gt; Transactivation bioassays

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

פרוטוקול להערכת ההשפעות היחסי של גנטיקה וסביבה על הצבי וצמיחה הגוף עבור Cervid חיים ארוכים

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas

ההרכב והמאפיינים של Aquafaba: מים התאוששה מסחרית שימורי חומוס

Chickpea and other pulses are commonly sold as canned products packed in a thick solution or a brine. This solution has recently been shown to produce ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

פשוט לשתול טכניקה מחדש הקמת עצי שבו מתרחשת בתדירות מושאן

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

אופטימיזציה הליך לקביעת ספיחה של Phosphonates על גבי הידרוקסיד Ferric פרטנית באמצעות שיטה נחישות זרחן מיניאטורי

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...