Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
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इस शोध को एमडीसी सहकारी समझौते (#416), अमेरिकी वन सेवा सहकारी समझौते (16-जेवी-11242311-118), अमेरिकन एकेडमी ऑफ वेटरनरी न्यूट्रिशन एंड वाल्थम/रॉयल कैनिन, यूएसए ग्रांट (ग्रांट नंबर: 00049049), एनआईएच प्रशिक्षण अनुदान (अनुदान संख्या: T32OS011126), और मिसौरी पशु चिकित्सा अनुसंधान विद्वान कार्यक्रम विश्वविद्यालय द्वारा समर्थित किया गया था । लेखक इस पांडुलिपि की पूर्व समीक्षा के लिए शैनन एहलर्स का शुक्रिया अदा करते हैं । हम डी2ओ मानकों को प्रदान करने और उनकी प्रयोगशाला के उपयोग की अनुमति देने के लिए डॉ रॉबर्ट बैकस का शुक्रिया अदा करते हैं ।

यहां वर्णित सभी प्रयोगों को मिसौरी विश्वविद्यालय पशु देखभाल और उपयोग समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था और मिसौरी संरक्षण विभाग (एमडीसी) वन्यजीव वैज्ञानिक संग्रह परमिट (परमिट #16409 और #17649) के तहत आयोजित कि...

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	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. 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H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

टीबीडब्ल्यू का निर्धारण करने के लिए ड्यूटेरियम ऑक्साइड का उपयोग 1940 के दशक17 से किया जाता रहा है और इसका उपयोग मनुष्यों और विभिन्न प्रकार की घरेलू और वन्यजीव प्रजातियों4,6<su...

शरीर की स्थिति स्कोरिंग सिस्टम और शरीर की स्थिति सूचकांक सामान्य तकनीकहैं जिनका उपयोग किसी प्रजाति की स्वास्थ्य स्थिति या फिटनेस का आकलन करने के लिए किया जाता है1,2. कई घरेलू और प्राणि प्रजातियों में अद्वितीय शरीर की स्थिति स्कोरिंग (बीसीएस) प्रणालियां होती हैं जिनका उपयोग जानवर की मांसपेशियों और सतही फैटी ऊतक3का आकलन करने के लिए किया जाता है। हालांकि, बीसीएस मूल्यांकन मूल्यांकनकर्ता पर निर्भर करता है- जिसका अर्थ है कि एक प्रशिक्षित मूल्यांकनकर्ता द्वारा मूल्यांकन किए जाने पर बीसीएस एक उद्देश्य या अर्धमात्रात्मक माप है। वन्यजीव प्रजातियों में, शरीर की स्थिति सूचकांकआमतौर पर बीसीएस के बजाय उपयोग किए जाते हैं और शरीर के आकार या शरीर द्रव्यमान के लिए शरीर द्रव्यमान के अनुपात पर आधारित होतेहैं। शरीर की स्थिति इंडिस अक्सर फोर्जिंग के प्रभाव से चकित होती है और शरीर के आकार के साथ -साथ सांख्यिकीय और अनुमानित समस्याओं से चकित किया जा सकता है4।
शरीर की स्थिति स्कोरिंग सिस्टम और शरीर की स्थिति सूचकांकों के लिए एक विकल्प शरीर संरचना निर्धारित करने के लिए एक स्थिर आइसोटोप का उपयोग कर रहा है । आमतौर पर उपयोग किया जाने वाला स्थिर आइसोटोप ड्यूटेरियम ऑक्साइड (डी2ओ) है, जो पानी का एक गैर-रेडियोधर्मी रूप है जिसमें हाइड्रोजन परमाणु ड्यूटेरियम आइसोटोप हैं। इस अध्ययन में वर्णित ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की विधि एक गैर-व्यक्तिपरक, मात्रात्मक और दोहराने योग्य तकनीक हो सकती है जिसका उपयोगमनुष्यों 5 में शरीर की संरचना का अनुमान लगाने के लिए किया जाता है और प्रजातियों की एक विस्तृत श्रृंखला4,6,7। वन्यजीवों में शरीर की संरचना का अध्ययन करने के लिए यह तकनीक लाभप्रद हो सकती है। उदाहरण के लिए, इसका उपयोग शरीर की संरचना में देशीय परिवर्तनों का आकलन करने के लिए किया जा सकता है, जैसे कि प्रबंधन कार्रवाई से पहले और बाद में। हालांकि, कुछ वन्यजीव प्रजातियों में ड्यूटेरियम ऑक्साइड वास्तविक जल सामग्री8को अधिक अनुमान लगा सकता है। इसलिए, किसी प्रजाति के लिए तकनीक को अनुकूल बनाते समय, गैर-लुप्तप्राय प्रजातियों के लिए शव विश्लेषण के लिए ड्यूटेरियम ऑक्साइड विधि की तुलना करके विधि को मान्य करना महत्वपूर्ण है। धमकी दी और लुप्तप्राय प्रजातियों के लिए, दोहरी एक्स-रे अवशोषण (DXA) जैसे एक गैर विनाशकारी विधि को पूर्ण शव विश्लेषण की सोने के मानक विनाशकारी विधि के लिए एक वैकल्पिक तुलना विधि के रूप में माना जाना चाहिए।
शरीर की संरचना के अलावा, डी2ओ कमजोर पड़ने की तकनीक का उपयोग एक व्यक्तिगत जानवर9के पानी की खपत को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है। डी2ओ के इस अनूठे आवेदन का उपयोग न केवल शोध प्रश्नों का उत्तर देने के लिए किया जा सकता है, बल्कि बड़े सामाजिक सेटिंग्स में रखे गए व्यक्तिगत जानवर (एस) के पानी की खपत का आकलन करने के लिए उपयोगी हो सकता है।
यहां, हम एक कीट, बड़े भूरे रंग के चमगादड़(Eptesicus fuscus)में शरीर की संरचना का आकलन करने के लिए डी2ओ कमजोर पड़ने की तकनीक के अनुकूलन का वर्णन करते हैं, और एक मांसाहारी, बिल्लियों(फेलिस कैटिस)में पानी की खपत का आकलन करने के लिए।

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	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

शरीर की स्थिति स्कोरिंग सिस्टम और शरीर की स्थिति सूचकांक आम एक प्रजाति की स्वास्थ्य स्थिति या फिटनेस का आकलन करने के लिए इस्तेमाल तकनीक ों रहे हैं । शरीर की स्थिति स्कोरिंग सिस्टम मूल्यांकनकर्ता निर्भर हैं और अत्यधिक व्यक्तिपरक होने की क्षमता रखते हैं। शरीर की स्थिति सूचकांक foraging, शरीर के वजन के प्रभाव, साथ ही सांख्यिकीय और अनुमानात्मक समस्याओं से चकित किया जा सकता है । शरीर की स्थिति स्कोरिंग सिस्टम और शरीर की स्थिति सूचकांकों के लिए एक विकल्प शरीर संरचना निर्धारित करने के लिए ड्यूटेरियम ऑक्साइड जैसे एक स्थिर आइसोटोप का उपयोग कर रहा है। ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की विधि एक दोहराने योग्य, मात्रात्मक तकनीक है जिसका उपयोग मनुष्यों, वन्यजीवों और घरेलू प्रजातियों में शरीर की संरचना का अनुमान लगाने के लिए किया जाता है। इसके अतिरिक्त, ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक का उपयोग एक व्यक्तिगत जानवर के पानी की खपत को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है। यहां, हम बड़े भूरे रंग के चमगादड़(एप्टेसिकस फ्यूस्कस)में शरीर की संरचना का आकलन करने और बिल्लियों(फेलिस कैटिस)में पानी की खपत का आकलन करने के लिए ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक के अनुकूलन का वर्णन करते हैं।

ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक का उपयोग विभिन्न प्रजातियों के शरीर की संरचना का आकलन करने के लिए किया जा सकता है। अनुकूलनशीलता प्रदर्शित करने के लिए, हम एक उत्तर अमेरिकी कीटाणुन?...

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Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

यह लेख दो स्तनधारियों में ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक का वर्णन करता है, एक कीट अयस्क और मांसाहारी, कुल शरीर के पानी, दुबला शरीर द्रव्यमान, शरीर वसा द्रव्यमान, और पानी की खपत का निर्धारण करने के लिए।

स्तनधारियों में शरीर की संरचना और पानी की खपत का आकलन करने के लिए एक गैर-आक्रामक, गैर-घातक उपकरण के रूप में ड्यूटेरियम ऑक्साइड का उपयोग करना

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

इस प्रोटोकॉल का उपयोग करके, ड्यूटेरियम ऑक्साइड, या D2O, पानी के एक गैर-रेड्रियक, स्थिर आइसोटोप का उपयोग शरीर की संरचना और पानी की खपत का अनुमान लगाने के लिए किया जा सकता है। यह तकनीक noninvasive है और इसलिए लुप्तप्राय प्रजातियों में शरीर की संरचना का आकलन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है, साथ ही मनुष्यों और घरेलू प्रजातियों में । ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक का एक अनूठा अनुप्रयोग उच्च पुनर्ग्रहण दरों या सामाजिक रूप से रखे गए जानवरों के साथ मुक्त-लेकर वन्यजीवों के पानी की खपत को मापने की क्षमता है।जबकि संज्ञाहरण की आवश्यकता नहीं है, यह ड्यूटेरियम ऑक्साइड देने से पहले जानवरों को बेहोश करने के लिए चमड़े के नीचे इंजेक्शन देने के साथ अपरिचित लोगों के लिए आसान हो सकता है । सारा हूपर और मुझे अमांडा Eshelman और एशले काउअन, पशु चिकित्सा छात्रों, और एलिसिया Roistacher, मेरी प्रयोगशाला से एक स्नातक छात्र के साथ प्रक्रिया का प्रदर्शन होगा । नौ ग्राम प्रति लीटर सैलिनेटेड ड्यूटेरियम ऑक्साइड का 50 मिलीलीटर स्टॉक समाधान बनाने के लिए, पहले 450 मिलीग्राम फार्मास्यूटिकल-ग्रेड सोडियम क्लोराइड का वजन करें, और सटीक मात्रा को चार दशमलव स्थानों पर रिकॉर्ड करें।नमक के सभी को एक निष्फल 100-मिलीलीटर बीकर में स्थानांतरित करें, और एक बाँझ, स्नातक सिलेंडर में 99.8% ड्यूटेरियम ऑक्साइड से अधिक या बराबर 50 ग्राम को मापें। ड्यूटेरियम ऑक्साइड की सही मात्रा को चार दशमलव स्थानों पर रिकॉर्ड करें, और ड्यूटेरियम ऑक्साइड को सोडियम क्लोराइड के बाँझ बीकर में स्थानांतरित करें। इसके बाद, एक गैर-पाइरोजेनिक, बाँझ डिस्क फिल्टर के लिए एक 20 गेज सुई संलग्न करें जिसमें 10 मिलीलीटर सिरिंज बैरल के साथ लगे सबमिक्रॉन छिद्रों के साथ, और सुई को बाँझ, खाली, 100-मिलीलीटर शीशी के पट में डालें।एक 22 गेज सुई के लिए एक वैक्यूम ट्यूब संलग्न है, और १०० मिलीलीटर शीशी के पट में सुई डालें । फिर सिरिंज बैरल में आइसोस्मोटिक स्ट्रेंथ सोडियम क्लोराइड के 10 मिलीलीटर लोड करें, और धीरे-धीरे वैक्यूम चालू करें जब तक कि ड्यूटेरियम ऑक्साइड समाधान धीरे-धीरे शीशी में फ़िल्टर करना शुरू न हो जाए। सिरिंज बैरल में ड्यूटेरियम ऑक्साइड स्टॉक समाधान डालने का कार्य जारी रखें जब तक कि पूरे 50-मिलीलीटर की मात्रा फ़िल्टर नहीं की गई हो।एक एनेस्थेटाइज्ड बैट में पैर की अंगुली चुटकी के लिए प्रतिक्रिया की कमी की पुष्टि करने के बाद, इंटरफेमोरल नस पर उरोपागियम को साफ करने के लिए अल्कोहल प्रेप पैड का उपयोग करें, और कीटाणुरहित पूंछ झिल्ली को सूखने दें। इंटरफेमोरल नस पर पेट्रोलियम जेली की एक पतली परत लागू करें, और इंटरफेमोरल नस के पृष्ठीय हिस्से को पंचर करने के लिए 29 गेज सुई का उपयोग करें। इसके बाद 100 माइक्रोलीटर रक्त इकट्ठा करने के लिए प्लास्टिक सोडियम हेपरिन केशिका ट्यूब का उपयोग करें।सोडियम हेपरिन के साथ पूरे रक्त का पर्याप्त मिश्रण सुनिश्चित करने के लिए, लेबलिंग से पहले रक्त संग्रह के बाद प्रत्येक ट्यूब को धीरे से रोल करें। इंजेक्शन लगाने के लिए ग्राम में ड्यूटेरियम ऑक्साइड के द्रव्यमान का निर्धारण करने के बाद, ड्यूटेरियम ऑक्साइड की उचित मात्रा के साथ 29 गेज सुई से लैस इंसुलिन सिरिंज लोड करें। ड्यूटेरियम-लोडेड इंसुलिन सिरिंज और सुई का वजन करें, वजन को चार दशमलव स्थानों पर रिकॉर्ड करें, और एनेस्थेटाइज्ड बैट के पृष्ठीय कूल्हे क्षेत्र पर ड्यूटेरियम ऑक्साइड की पूरी मात्रा को संक्षेप में इंजेक्ट करें।हम एक एंटीस्टैटिक ड्राफ्ट शील्ड के साथ एक सटीक पैमाने का उपयोग करने और इंजेक्शन लगाने से पहले नकारात्मक दबाव सुनिश्चित करने के लिए प्लंजर पर वापस खींचने के लिए सुनिश्चित करने की सलाह देते हैं। इंजेक्शन के तुरंत बाद, अब खाली इंसुलिन सिरिंज और सुई का वजन करें, और वजन को चार दशमलव स्थानों पर रिकॉर्ड करें। रक्त संग्रह के बाद 30 मिनट के भीतर, पांच मिनट के लिए 10, 000 बार जी पर प्रत्येक केशिका ट्यूब को स्पिन करने के लिए एक हेमेटोक्रिट सेंट्रलाइज का उपयोग करें।तेज कैंची का उपयोग करना, पूरे रक्त और प्लाज्मा के बीच प्लास्टिक केशिका ट्यूब में कटौती, और एक २००-माइक्रोलीटर पिपेट का उपयोग करने के लिए सीधे एक लेबल, ५००-माइक्रोलीटर भंडारण ट्यूब में प्लाज्मा निष्कासित । समतुल्यता अवधि के बाद, इंटरफेमोरल नस से रक्त के एक और 100 माइक्रोलीटर इकट्ठा और स्टोर करें जैसा कि सिर्फ प्रदर्शन किया गया था। FTIR स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री विश्लेषण के लिए, आसवन की सुविधा के लिए 60 डिग्री सेल्सियस के लिए एक रेत स्नान के तापमान सेट, और व्यक्तिगत 1.5 मिलीलीटर शंकु माइक्रोसेंट्रफ्यूज टोपियां में प्रत्येक प्लाज्मा नमूना और मानक के 50 माइक्रोलीटर जोड़ें।माइक्रोसेंट्रफ्यूज कैप को उल्टा रखते हुए, कैप पर 1.5 मिलीलीटर शंकु माइक्रोसेंट्रफ्यूज ट्यूब को स्क्रू करें, और उल्टे ट्यूब को कम से कम 12 घंटे के लिए रेत स्नान में रेत के संपर्क में रखें। अगली सुबह, प्रत्येक ट्यूब पर एक नया, साफ टोपी रखें, और माइक्रोसेंट्रफ्यूज ट्यूबों को माइक्रोसेंट्रफ्यूज में 10 सेकंड के लिए पल्स करें। FTIR स्पेक्ट्रोमीटर में एक तरल ट्रांसमिशन सेल स्थापित करें, और मेथनॉल के साथ सेल भरें।इंजेक्शन पोर्ट कनेक्ट करें, और हवा के बुलबुले के जोखिम को कम करने के लिए मेथनॉल सिरिंज को ध्यान से हटाते हुए धीरे-धीरे कोशिका को पृष्ठभूमि के पानी से भरें। विश्लेषण के बाद नमूनों को हटाने की अनुमति देने के लिए आउटपुट पोर्ट को टयूबिंग संलग्न करें, और एफटीआर स्पेक्ट्रोमीटर सॉफ्टवेयर खोलें। तालिका के अनुसार मापदंडों को सेट करें, और मंद, 0.22-माइक्रोमीटर-फ़िल्टर, आसुत पानी का उपयोग करके पृष्ठभूमि नमूना एकत्र करें।प्रति मिलियन ड्यूटेरियम ऑक्साइड मानक शून्य भागों के 40 माइक्रोलीटर इंजेक्ट करें, और कॉमा-अलग मूल्यों फ़ाइल के रूप में स्पेक्ट्रा को रिकॉर्ड और सहेजें। एक मानक वक्र बनाने के लिए सभी मानकों के स्पेक्ट्रा को इंजेक्ट करने और बचाने के बाद, प्रत्येक आसुत नमूने के 40 माइक्रोलीटर को तरल ट्रांसमिशन सेल में इंजेक्ट करें, और स्पेक्ट्रा को बचाएं। एक ज्ञात संतुलन समय के साथ, कुल शरीर के पानी, दुबला शरीर द्रव्यमान, और जंगली पकड़े गए बड़े भूरे रंग के चमगादड़ और कैप्टिव बड़े भूरे रंग के चमगादड़ के लिए शरीर में वसा द्रव्यमान निर्धारित किया जा सकता है ।एक नकारात्मक शरीर वसा द्रव्यमान की गणना निम्नलिखित कारणों में से एक या अधिक के कारण की जा सकती है: ड्यूटेरियम ऑक्साइड की पूरी खुराक प्राप्त नहीं करना, संतुलन चरण के दौरान टॉरपिड बनना, असामान्य रूप से बड़ी वसा वाली जनता और न्यूनतम दुबला द्रव्यमान होना, या दोहरे एक्स-रे अवशोषण द्वारा निर्धारित तीन से 5% से कम शरीर की वसा होना। यहां, ड्यूल एक्स-रे अवशोषण की तुलना में ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक द्वारा निर्धारित शरीर की वसा का एक प्रतिनिधि प्रतिशत दिखाया गया है। दो तकनीकों को अच्छी तरह से सहसंबद्ध कर रहे हैं, शरीर में वसा द्रव्यमान शरीर में वसा और शरीर के वजन के बीच मजबूत सहसंबंध दिखा रहा है और ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने की तकनीक के साथ लगातार खत्म नहीं या शरीर में वसा द्रव्यमान को कम आंकने ।ड्यूटेरियम ऑक्साइड कमजोर पड़ने विधि पहले बिल्लियों में मान्य किया गया है, और तकनीक प्रयोग के प्रत्येक आहार ब्लॉक के दौरान सामाजिक रूप से रखे बिल्लियों के दैनिक पानी की खपत के माप की अनुमति के लिए अनुकूलित किया गया था । याद रखें कि इस तकनीक को केवल स्वस्थ जानवरों पर किया जाना चाहिए और आपको प्रत्येक जानवर को ड्यूटेरियम ऑक्साइड की पूरी खुराक का सही वजन, रिकॉर्ड और वितरित करना चाहिए। शरीर की संरचना का निर्धारण करने के लिए एक माध्यमिक विधि, जैसे पूर्ण शव विश्लेषण या डेक्सा, ड्यूटेरियम ऑक्साइड तकनीक को मान्य करने के लिए पूरा किया जा सकता है।इस तकनीक ने हमें एक सामाजिक रूप से रखे गए बिल्ली की पहचान करने की अनुमति दी जो प्रत्येक बिल्ली को अलग किए बिना असामान्य रूप से उच्च मात्रा में पानी का उपभोग कर रही थी ताकि उनके पानी की खपत को माप सके।

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

झील अवसादों से प्रयोगशाला निर्धारित फास्फोरस फ्लक्स आंतरिक फास्फोरस लोड का एक उपाय के रूप में

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

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Chironomidae (Diptera) का प्रयोग भूतल अस्थायी जल निकायों के लिए एक तेजी Bioassessment प्रोटोकॉल के रूप में पोटा संबंधी Exuviae

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