Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
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이 연구는 MDC 협력 협정 (#416), 미국 산림 청 협동 협정 (16-JV-11242311-118), 미국 수의학 영양 및 월섬 / 로얄 캐닌, 미국 그랜트 (교부금 번호 : 00049049), NIH 교육 보조금 (보조금 번호 : T32OS011126), 및 수의학 연구에 의해 지원되었습니다. 저자는 이 원고를 미리 검토해 준 섀넌 엘러스에게 감사를 표한다. 우리는D2 O 표준을 제공하고 그의 실험실의 사용을 허용한 박사 로버트 Backus에게 감사드립니다.

여기에 설명된 모든 실험은 미주리 대학교 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았으며 미주리 주 보호부(MDC) 야생 동물 과학 수집 허가(허가 #16409 및 #17649)에 따라 수행되었습니다.
1. 멸균, 동위 원소, 살균 D2O 스톡 솔루션의 준비
<ol><li>9.0 g/L의 50 mL 스톡 솔루션을 SalinatedD2O로 만듭니다.<ol>
<li>450 mg의 제약 등급 NaCl을 측정하고 모든 NaCl을 100 mL, 멸균 된 비커?...

<ol>
	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants.">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li><li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight,+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase&#8211;Deficient+Male+Cats.">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase&#8211;Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li><li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

TBW를 결정하기 위해 중수소 산화물의 사용은 1940년대부터 사용되어 왔으며 인간 및 다양한 국내 및 야생 동물 종4,6,7에사용되어 왔다. 생체 전기 임피던스 분석 (BIA), DXA 및 정량 자기 공명 (QMR)을 포함한 다른 비파괴 기술이 개발되었습니다. 각 방법에는 신체 구성을 평가하기위한 특정 방법론을 선택하기 전?...

신체 상태 점수 매기기 시스템 및 신체 상태 지수는 종1,2의건강 상태 또는 체력을 평가하는 데 사용되는 일반적인 기술입니다. 많은 국내 및 동물학 종은 동물의 근육과 표면 지방 조직을 평가하는 데 사용되는 독특한 신체 상태 점수 (BCS) 시스템을 가지고3. 그러나 BCS 평가는 평가자(BCS가 숙련된 평가자가 평가할 때 객관적 또는 반정량적 측정임을 의미)에 의존합니다. 야생 동물 종에서, 바디 상태 지수는 BCS 보다는 오히려 일반적으로 이용되고 바디 질량에 바디 질량 또는 팔뚝에 바디 질량의 비율에 근거를 두는2. 신체 상태 인디시스는 종종 위조의 효과에 의해 혼동하고 통계 및 추론 문제뿐만 아니라 신체 크기에 의해 혼동 될 수있다4.
신체 상태 점수 매기기 시스템 및 신체 상태 지수에 대한 대안은 안정된 동위원소를 사용하여 신체 구성을 결정하는 것입니다. 일반적으로 사용되는 안정동위원소 중 하나는 수소원자가 중수소 동위원소인 비방사성 형태의 물인 중수소 산화물(D2 O)입니다. 본 연구에서 기술된 중수소 산화물 희석 방법은 인간5 및 다양한 종4,6,7에서체성분을 추정하는 데 사용되는 비주관적, 정량적 및 반복가능한 기술일 수 있다. 이 기술은 야생 동물의 신체 구성을 연구하는 데 유리할 수 있습니다. 예를 들어, 관리 작업 전후와 같은 신체 구성의 세로 변화를 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 그러나, 일부 야생 동물 종 중수소 산화물은 실제 수분 함량을 과대 평가할 수 있다8. 따라서, 종에 대한 기술을 적응할 때, 중수소 산화물 방법을 비멸종종에 대한 시체 분석과 비교하여 그 방법을 검증하는 것이 중요하다. 멸종 위기에 처한 종의 경우 이중 X선 흡수법(DXA)과 같은 비파괴 적 방법을 완전한 시체 분석의 금 표준 파괴 방법에 대한 대체 비교 방법으로 간주해야 합니다.
체 조성 이외에,D2O 희석 기술은 개별 동물의 물 소비를 결정하는 데 사용될 수있다 9. D2 O의이 독특한 응용 프로그램은 연구 질문에 답하는 데 사용할 수 있지만, 큰 사회적 환경에서 보관된 개별 동물의 물 소비를 평가하는 데 유용할 수 있습니다.
여기서, 곤충, 큰 갈색박쥐(Eptesicus fuscus)에서체성분을 평가하고, 육식동물,고양이(Felis catis)에서물 소비를 평가하기 위한D2O 희석 기술의 적응을 설명한다.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

신체 상태 점수 매기기 시스템 및 신체 상태 지수는 종의 건강 상태 또는 적합성을 평가하는 데 사용되는 일반적인 기술입니다. 신체 상태 채점 시스템은 평가자 에 의존하며 주관적 일 가능성이 있습니다. 신체 상태 지수는 통계 및 추론 문제뿐만 아니라 체중의 효과, 위조에 의해 혼동 될 수 있습니다. 신체 상태 점수 매기기 시스템 및 신체 상태 지수에 대한 대안은 중수소 산화물과 같은 안정적인 동위원소를 사용하여 체성분을 결정하는 것입니다. 중수소 산화물 희석 방법은 인간, 야생 동물 및 국내 종의 체성분을 추정하는 데 사용되는 반복적이고 정량적인 기술입니다. 부가적으로, 중수소 산화물 희석 기술은 개별 동물의 물 소비를 결정하는데 사용될 수 있다. 여기서, 우리는 큰 갈색 박쥐(Eptesicus fuscus)에서체성분을 평가하고 고양이의 물 소비를 평가하기위한 중수소 산화물 희석 기술의 적응을 설명합니다(펠리스 카티스).

중수소 산화물 희석 기술은 다양한 종의 체성분을 평가하는데 사용될 수 있다. 적응성을 입증하기 위해, 우리는 북미 곤충 박쥐 종, Eptesicus fuscus,대표적인 결과를위한 큰 갈색 박쥐에서 중수소 산화물 희석 기술의 첫 번째 사용을보고하고 있습니다. 타이밍 고원은 평형 기간이 알려지지 않은 모든 종으로 수행해야하는 바와 같이 사전 및 사후 D2O 주입 혈액 ?...

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Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

이 기사에서는 두 포유류의 중수소 산화물 희석 기술, 곤충 및 육식 동물에 대해 설명하여 총 체수, 순수 체질량, 체지방 질량 및 물 소비를 결정합니다.

포유류의 체성분과 물 소비를 평가하기 위한 비침습적이고 비치명적인 도구로 중수소 산화물을 사용

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

이 프로토콜을 사용하여 방사성되지 않는 안정적인 물 동위원소인 D2O를 사용하여 신체 구성 및 물 소비를 추정하는 데 사용할 수 있습니다. 이 기술은 비침습적이며 따라서 멸종 위기에 처한 종뿐만 아니라 인간과 국내 종에서 신체 구성을 평가하는 데 사용할 수 있습니다. 중수소 산화 희석 기법을 독특하게 적용한 것은 높은 탈환률또는 사회적으로 수용된 동물의 자유 구역 야생 동물의 물 소비를 측정하는 능력입니다.마취가 필요하지 는 않지만, 산화 신황을 전달하기 전에 동물을 진정시키기 위해 피하 주사를 주는 데 익숙하지 않은 사람들에게는 더 쉬울 수 있습니다. 사라 후퍼와 저와 함께 절차를 시연하는 것은 아만다 에셸만과 애슐리 코완, 수의학 학생, 그리고 내 실험실에서 대학원생 인 알리시아 로이스타처가 될 것입니다. 리터 염화물 산화당 9그램의 50밀리리터 스톡 솔루션을 만들기 위해 먼저 450밀리그램의 제약등급 염화나트륨을 계량하고 정확한 양을 4개의 소수점으로 기록합니다.모든 소금을 멸균 된 100 밀리리터 비커로 옮기고, 멸균, 졸업 실린더에서 산화 99.8 %의 중수소보다 크거나 동일한 50 그램을 측정합니다. 정확한 양의 중수소산화물을 4개의 소수점으로 기록하고, 산화중류를 염화나트륨의 멸균 비커로 옮기다. 다음으로, 10밀리리터 주사기 배럴이 장착된 서브미크론 모공을 장착한 비피로게닉, 멸균 디스크 필터에 20게이지 바늘을 부착하고 바늘을 멸균, 비어 있는 100밀리리터 바이알의 중격에 삽입한다.진공 튜브를 22 게이지 바늘에 부착하고 바늘을 100 밀리리터 바이알의 중격에 삽입합니다. 그런 다음 이소산 강도의 염화 나트륨 10 밀리리터를 주사기 배럴에 적재하고 중수소 산화물 용액이 바이알로 천천히 걸러지기 시작할 때까지 진공을 천천히 켭니다. 50밀리리터 부피가 여과될 때까지 중수소 산화물 스톡 솔루션을 주사기 배럴에 계속 붓습니다.마취 된 박쥐에서 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 알코올 준비 패드를 사용하여 간부도 정맥을 통해 비로 파듐을 청소하고 소독 된 꼬리 멤브레인이 건조할 수 있도록하십시오. 간질로 된 석유 젤리를 간질 정맥 위에 바르고 29게이지 바늘을 사용하여 간부도 정맥의 등쪽 부분을 뚫는다. 그런 다음 플라스틱 나트륨 헤파린 모세관 튜브를 사용하여 100 마이크로 리터의 혈액을 수집합니다.전체 혈액과 헤파린 나트륨의 적절한 혼합을 보장하기 위해 라벨링 하기 전에 혈액 수집 후 각 튜브를 부드럽게 굴리십시오. 주입하는 그램에 있는 중수소 산화물의 질량을 결정한 후에, 산화황의 적당한 양으로 29 게이지 바늘을 갖춘 인슐린 주사기를 적재합니다. 중수소로 적재된 인슐린 주사기와 바늘을 무게로 4개의 소수점으로 체중을 기록하고, 마취박쥐의 등산고 부위에 피하로 중수소산화물의 전체 부피를 주입한다.정전기 방지 드래프트 쉴드가 있는 정밀 스케일을 사용하고 주입 전에 음압을 보장하기 위해 플런저를 다시 당기는 것이 좋습니다. 주사 직후, 지금 빈 인슐린 주사기와 바늘을 무게, 네 소수점 장소에 무게를 기록. 혈액 후 수집 후 30분 이내에 각 모세관 튜브를 5분 동안 10, 000배씩 회전하는 헤마토크트 원심분리기를 사용하십시오.날카로운 가위를 사용하여 전체 혈액과 플라즈마 사이에 플라스틱 모세관 튜브를 자르고 200 마이크로 리터 파이펫을 사용하여 플라즈마를 라벨이 부착 된 500 마이크로 리터 저장 튜브로 직접 배출합니다. 평형 기간 후, 수집 하 고 그냥 입증 된 대로 상호 도덕적 맥락에서 혈액의 또 다른 100 마이크로 리터를 저장. FTIR 분광측분석 분석을 위해 모래 목욕의 온도를 섭씨 60도로 설정하여 증류를 용이하게 하고 각 플라즈마 샘플의 50마이크로리터를 개별 1.5밀리리터 원전 미세센티리후지 캡에 추가합니다.마이크로센티페리지 캡을 거꾸로 유지하고, 1.5밀리리터 원추형 미세심분리기 튜브를 캡에 나사로 놓고, 역관을 모래 욕조의 모래와 접촉하여 최소 12시간 동안 배치한다. 다음 날 아침, 각 튜브에 새롭고 깨끗한 뚜껑을 놓고 마이크로 센심 분리기에서 10 초 동안 마이크로 센심 분리기를 펄스합니다. FTIR 분광계에 액체 전송 셀을 설치하고 세포를 메탄올로 채웁니다.사출 포트를 연결하고, 기포의 위험을 줄이기 위해 메탄올 주사기를 조심스럽게 제거하면서 서서히 백그라운드물로 셀을 채웁니다. 분석 후 샘플을 제거하고 FTIR 분광계 소프트웨어를 열 수 있도록 출력 포트에 튜브를 부착합니다. 표에 따라 매개 변수를 설정하고 희석제, 0.22 마이크로미터 여과, 증류수를 사용하여 배경 샘플을 수집합니다.백만 중수소 산화물 표준당 0 부품 40마이크로리터를 주입하고, 규마 분리값 파일로 스펙트럼을 기록하고 저장한다. 표준 곡선을 만들기 위해 모든 표준의 스펙트럼을 주입하고 저장한 후, 각 증류된 샘플의 40마이크로리터를 액체 전송 셀에 주입하고 스펙트럼을 저장합니다. 알려진 평형 시간으로, 야생 잡은 큰 갈색 박쥐와 포로 큰 갈색 박쥐에 대한 총 체수, 마른 체질량, 체지방 질량을 결정할 수 있습니다.부정적인 체지방 질량은 다음 이유 중 하나 이상으로 인해 계산될 수 있습니다: 중수소산화물의 전체 복용량을 받지 못하고, 평형 단계에서 토피드가 되고, 비정상적으로 큰 지방 질량과 최소한의 마른 질량을 가지거나, 듀얼 엑스레이 흡수에 의해 결정된 바와 같이 체지방3~5% 미만이 있는 경우. 여기서, 이중 엑스레이 흡수법에 비해 중수소 산화물 희석 기술에 의해 결정된 체지방의 대표적인 백분율이 나타난다. 두 기술은 잘 상관, 체 지방 질량 체 지방과 체중 사이의 강한 상관 관계를 보여주는 그리고 중수소 산화 질소 희석 기술과 일관되게 과열 또는 체 지방 질량을 과소 평가 하지.중수소 산화 희석 방법은 이전에 고양이에서 검증되었으며, 실험의 각 식이 블록 동안 사회적으로 수용 된 고양이의 일일 물 소비를 측정 할 수 있도록 기술이 적용되었습니다. 이 기술은 건강한 동물에서만 수행해야하며 각 동물에게 산화 중증화물의 전체 복용량을 정확하게 계량, 기록 및 전달해야한다는 것을 기억하십시오. 완전한 시체 분석 또는 DEXA와 같은 신체 조성을 결정하는 보조 방법은 중수소 산화물 기술을 검증하기 위해 완료될 수 있다.이 기술을 통해 각 고양이가 물 소비량을 측정하기 위해 분리하지 않고 비정상적으로 많은 양의 물을 소비하는 사회적으로 수용된 고양이를 식별할 수 있었습니다.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

호수 퇴적물에서 실험실 결정 인 플럭스 내부 인 로딩의 측정으로

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

연구

환경과학

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Chironomidae (파리목)의 사용 표면 부동 물 기관에 대한 신속한 생물학적 평가 프로토콜로 번데기 Exuviae을

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

엔테로 바이러스 및 문화와 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 파트 III. RT-qPCR에 의한 바이러스 검출

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

우라늄에서 구리 산화물 나노 입자에 의한 미량 원소의 제거<em&gt; 현장에서</em&gt; 복구 블리드 물과 세포 생존에 미치는 영향

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

결합 문학, 지구 화학 및 미생물 조사를위한 토양 모형 매립 발굴

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

물 사용에 내분비 활동에 대한 선별 시판<em&gt; 체외</em&gt; 전이 활성화 생물학적 정량

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

뿔과 긴 Cervid에 대 한 신체 성장에 환경 및 유전학의 상대적 효과 평가 하기 위한 프로토콜

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas

구성 및 Aquafaba의 속성: 상업적으로 통조림된 Chickpeas에서 물 발견

Chickpea and other pulses are commonly sold as canned products packed in a thick solution or a brine. This solution has recently been shown to produce ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

간단한 다시 설정 나무에 대 한 기술을 설치 하 여 자주 침수 발생

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

소형 인 결정 방법을 사용 하 여 세분화 된 제 2 철 수산화에 Phosphonates의 흡착을 결정 하기 위한 최적화 된 절차

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...