Name: using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals
Uploaded: 2020-02-20T12:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Denne forskningen ble støttet av MDC Cooperative Agreement (#416), US Forest Service Cooperative Agreement (16-JV-11242311-118), American Academy of Veterinary Nutrition og Waltham/Royal Canin, USA Grant (stipendnummer: 00049049), NIH opplæringsstipend (stipendnummer: T32OS011126), og University of Missouri Veterinary Research Scholars Program. Forfatterne takker Shannon Ehlers for å ha forhåndsanmeldt dette manuskriptet. Vi takker Dr. Robert Backus for å gi D2O standarder og tillate bruk av laboratoriet hans.

Alle eksperimenter som er beskrevet her ble godkjent av University of Missouri Animal Care and Use Committee og utført under Missouri Department of Conservation (MDC) Wildlife Scientific Collection tillatelse (Tillatelse #16409 og #17649).
1. Fremstilling av steril, isotonisk, salinert D2O lagerløsning
<ol><li>Lag en 50 ml lagerløsning på 9,0 g/l salinert D2O.<ol>
<li>Vei opp 450 mg farmasøytisk karakter NaCl og overfør alle NaCl til et 100 ml, sterilisert beger. ...

<ol>
	<li>Schiffmann, C., Clauss, M., Hoby, S., Hatt, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Visual+body+condition+scoring+in+zoo+animals+&#8211;+composite,+algorithm+and+overview+approaches.">Visual body condition scoring in zoo animals &#8211; composite, algorithm and overview approaches.</a> Journal of Zoo Aquarium Research. 5 (1), (2017).</li><li>Peig, J., Green, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+perspectives+for+estimating+body+condition+from+mass/length+data:+the+scaled+mass+index+as+an+alternative+method.">New perspectives for estimating body condition from mass/length data: the scaled mass index as an alternative method.</a> Oikos. 118 (12), 1883-1891 (2009).</li><li>Bissell, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Condition Scoring Resource Center. , (2017).</li><li>McWilliams, S. R., Whitman, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-destructive+techniques+to+assess+body+composition+of+birds:+a+review+and+validation+study.">Non-destructive techniques to assess body composition of birds: a review and validation study.</a> Journal of Ornithology. 154 (3), 597-618 (2013).</li><li>Lukaski, H. C., Johnson, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+inexpensive+method+of+determining+total+body+water+using+a+tracer+dose+of+D2O+and+infrared+absorption+of+biological+fluids.">A simple, inexpensive method of determining total body water using a tracer dose of D2O and infrared absorption of biological fluids.</a> American Journal of Clinical Nutrition. 41 (2), 363-370 (1985).</li><li>Chusyd, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adiposity+and+Reproductive+Cycling+Status+in+Zoo+African+Elephants.">Adiposity and Reproductive Cycling Status in Zoo African Elephants.</a> Obesity (Silver Spring). 26 (1), 103-110 (2018).</li><li>Kanchuk, M. L., Backus, R. C., Calvert, C. C., Morris, J. G., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neutering+Induces+Changes+in+Food+Intake+Body+Weight,+Plasma+Insulin+and+Leptin+Concentrations+in+Normal+and+Lipoprotein+Lipase&#8211;Deficient+Male+Cats.">Neutering Induces Changes in Food Intake Body Weight, Plasma Insulin and Leptin Concentrations in Normal and Lipoprotein Lipase&#8211;Deficient Male Cats.</a> The Journal of Nutrition. 132 (6), 1730S-1732S (2002).</li><li>Eichhorn, G., Visser, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Technical+Comment:+Evaluation+of+the+Deuterium+Dilution+Method+to+Estimate+Body+Composition+in+the+Barnacle+Goose:+Accuracy+and+Minimum+Equilibration+Time.">Technical Comment: Evaluation of the Deuterium Dilution Method to Estimate Body Composition in the Barnacle Goose: Accuracy and Minimum Equilibration Time.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (4), 508-518 (2008).</li><li>Hooper, S. E., Backus, R., Amelon, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+dietary+selenium+and+moisture+on+the+physical+activity+and+thyroid+axis+of+cats.">Effects of dietary selenium and moisture on the physical activity and thyroid axis of cats.</a> Journal of Animal Physiolgy and Animal Nutrition (Berl). 102 (2), 495-504 (2018).</li><li>Stevenson, K. T., van Tets, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dual-Energy+X-Ray+Absorptiometry+(DXA)+Can+Accurately+and+Nondestructively+Measure+the+Body+Composition+of+Small,+Free-Living+Rodents.">Dual-Energy X-Ray Absorptiometry (DXA) Can Accurately and Nondestructively Measure the Body Composition of Small, Free-Living Rodents.</a> Physiological and Biochemical Zoology. 81 (3), 373-382 (2008).</li><li>Jennings, G., Bluck, L., Wright, A., Elia, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+use+of+infrared+spectrophotometry+for+measuring+body+water+spaces.">The use of infrared spectrophotometry for measuring body water spaces.</a> Clinical Chemistry. 45 (7), 1077-1081 (1999).</li><li>Beuth, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Body Composition, movemement phenology and habitat use of common eider along the southern new england coast. Master of Science in Biological and Environmental Sciences (MSBES) thesis. , (2013).</li><li>Coplen, T. B., Hopple, J., Peiser, H., Rieder, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compilation+of+minimum+and+maximum+isotope+ratios+of+selected+elements+in+naturally+occurring+terrestrial+materials+and+reagents.">Compilation of minimum and maximum isotope ratios of selected elements in naturally occurring terrestrial materials and reagents.</a> U.S. Geological Survey Water-Resources Investigations Report 01-4222. , (2002).</li><li>Karasov, W. H., Pinshow, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lean+mass+and+in+organs+of+nutrient+assimilation+in+a+long-distance+passerine+migrant+at+a+springtime+stopover+site.">Changes in lean mass and in organs of nutrient assimilation in a long-distance passerine migrant at a springtime stopover site.</a> Physiological Zoology. 71 (4), 435-448 (1998).</li><li>Hood, W. R., Oftedal, O. T., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variation+in+body+composition+of+female+big+brown+bats+(Eptesicus+fuscus.)+during+lactation.">Variation in body composition of female big brown bats (Eptesicus fuscus.) during lactation.</a> Journal of Comparative Physiology B. 176 (8), 807-819 (2006).</li><li>Backus, R. C., Havel, P. J., Gingerich, R. L., Rogers, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+serum+leptin+immunoreactivity+and+body+fat+mass+as+estimated+by+use+of+a+novel+gas-phase+Fourier+transform+infrared+spectroscopy+deuterium+dilution+method+in+cats.">Relationship between serum leptin immunoreactivity and body fat mass as estimated by use of a novel gas-phase Fourier transform infrared spectroscopy deuterium dilution method in cats.</a> American Journal of Veterinary Research. 61 (7), 796-801 (2000).</li><li>Moore, F. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+Total+Body+Water+and+Solids+with+Isotopes.">Determination of Total Body Water and Solids with Isotopes.</a> Science. 104 (2694), 157-160 (1946).</li><li>Voigt, C., Cruz-Neto, A., Parsons, S., Kunz, T. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Ecological and Behavioral Methods in the Study of Bats. , 621-645 (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Assessment of Body Composition and Total Energy Expenditure in Humans Using Stable Isotope Techniques. , (2009).</li><li>International Atomic Energy Agency. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Introduction to Body Composition Assessment Using the Deuterium Dilution Technique with Analysis of Saliva Samples by Fourier Transform Infrared Spectrometry. , (2011).</li><li>Shimamoto, H., Komiya, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Turnover+of+Body+Water+as+an+Indicator+of+Health.">The Turnover of Body Water as an Indicator of Health.</a> Journal of Physiological Anthropology and Applied Human Science. 19 (5), 207-212 (2000).</li></ol>

Bruken av deuteriumoksid for å bestemme TBW har blitt brukt siden 1940-tallet17 og brukes hos mennesker og en rekke innenlandske og dyreliv arter4,6,7. Andre ikke-destruktive teknikker er utviklet, inkludert bioelektrisk impedansanalyse (BIA), DXA og kvantitativ magnetisk resonans (QMR). Hver metode har fordeler og ulemper som bør vurderes før du velger en bestemt metodikk for å vurdere kroppssammense...

Kroppstilstand skåre systemer og kroppen tilstand indekser er vanlige teknikker som brukes for å vurdere helsestatus eller fitness av en art1,2. Mange innenlandske og zoologiske arter har unike kroppstilstand scoring (BCS) systemer som brukes til å vurdere et dyrs muskel og overfladisk fettvev3. BCS-vurderingen er imidlertid avhengig av evaluatoren – noe som betyr at BCS er en objektiv eller semikvantitativ måling når den vurderes av en opplært evaluator. I dyrearter brukes kroppstilstandsindekser ofte i stedet for BCS og er basert på et forhold mellom kroppsmasse og kroppsmasse til underarm2. Kroppstilstand indikiditt er ofte forvirret av effekten av foraging og kan forvirres av kroppsstørrelse samt statistiske og inferential problemer4.
Et alternativ til kroppstilstand scoring systemer og kroppstilstand indekser bruker en stabil isotop for å bestemme kroppssammensetning. En vanlig brukt stabil isotop er deuteriumoksid (D2O), en ikke-radioaktiv form for vann der hydrogenatomer er deuterium isotoper. Deuteriumoksidfortynningsmetoden beskrevet i denne studien kan være en ikke-subjektiv, kvantitativ og repeterbar teknikk som brukes til å estimere kroppssammensetning hos mennesker5 og et bredt spekter av arter4,6,7. Denne teknikken kan være en fordel for å studere kroppssammensetningen i dyrelivet. For eksempel kan den brukes til å vurdere langsgående endringer i kroppssammensetning, for eksempel før og etter en ledelseshandling. Men i noen dyreliv arter deuterium oksid kan overvurdere selve vanninnholdet8. Derfor, når du tilpasser teknikken for en art, er det viktig å validere metoden ved å sammenligne deuteriumoksidmetoden med kadaveranalyse for ikke-truede arter. For truede og truede arter bør en ikke-destruktiv metode som dobbel røntgenabsorptiometry (DXA) betraktes som en alternativ sammenligningsmetode til gullstandarddestruktiv metode for fullstendig kadaveranalyse.
I tillegg til kroppssammensetning kan D2O-fortynningsteknikken brukes til å bestemme vannforbruket til et individuelt dyr9. Denne unike anvendelsen av D2O kan brukes til å svare på ikke bare forskningsspørsmål, men kan være nyttig for å vurdere vannforbruket til individuelle dyr(e) plassert i store sosiale miljøer.
Her beskriver vi tilpasningen av D2O-fortynningsteknikken for å vurdere kroppssammensetning i et insekt, store brune (Eptesicus fuscus), og for å vurdere vannforbruket i en kjøtteter, katter (Felis catis).

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2 micron non-pyrogenic disk filter</td>
			<td>Argos Technologies</td>
			<td>FN32S</td>
			<td>nylon, 30mm diameter, 0.22um, sterile</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 mL conical microcentrifuge tubes</td>
			<td>USA Scientific</td>
			<td>1415-9701</td>
			<td>1.5 ml self-standing microcentrifuge tube, natural with blue cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>MS-SEV10</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 mL syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305219</td>
			<td>sterile 10 mL syringe individually wrapped</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mL sterile glass vial for injection</td>
			<td>Mountainside Medical Equipment</td>
			<td>AL-SV10020</td>
			<td>clear, sterile glass injection unit</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>20 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26417</td>
			<td>needles hypodermic 20g x 1&#34; plastic hub (yellow) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>22 gauge needle</td>
			<td>Exel</td>
			<td>26411</td>
			<td>needles hypodermic 22g x 1&#34; plastic hub (black) / regular bevel</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>deuterium oxide</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>151882-25G</td>
			<td>99.9 atom % D</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>isofluorane</td>
			<td>Vetone</td>
			<td>3060</td>
			<td>fluriso isoflurane, USP</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OMNIC Spectra Software</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>833-036200</td>
			<td>FT-IR standard software</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>petroleum jelly</td>
			<td>Vaseline</td>
			<td>305212311006</td>
			<td>Vaseline, 100% pure petroleum jelly, original, skin protectant</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic capillary tubes</td>
			<td>Innovative Med Tech</td>
			<td>100050</td>
			<td>sodium heparin anticoagulant, 50 &#956;L capacity, 30 mm length</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sealed liquid spectrophotometer SL-3 FTIR CAF2 Cell</td>
			<td>International Crystal Laboratory</td>
			<td>0005D-875</td>
			<td>0.05 mm Pathlength</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sodium chloride</td>
			<td>EMD Millipore</td>
			<td>1.37017</td>
			<td>suitable for biopharmaceutical production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermo Electron Nicolet 380 FT-IR Spectrometer</td>
			<td>ThermoFisher Scientific</td>
			<td>269-169400</td>
			<td>discontinued model, newer models available</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

using deuterium oxide as a non-invasive, non-lethal tool for assessing body composition and water consumption in mammals

Kroppstilstand skåre systemer og kroppen tilstand indekser er vanlige teknikker som brukes for å vurdere helsestatus eller egnethet av en art. Kroppstilstandspoengsystemer er evaluatoravhengige og har potensial til å være svært subjektive. Kroppstilstandindekser kan forvirres ved foraging, effekten av kroppsvekt, samt statistiske og inferential problemer. Et alternativ til kroppstilstand scoring systemer og kroppstilstand indekser bruker en stabil isotop som deuterium oksid for å bestemme kroppssammensetning. Deuteriumoksidfortynningsmetoden er en repeterbar, kvantitativ teknikk som brukes til å estimere kroppssammensetning hos mennesker, dyreliv og innenlandske arter. I tillegg kan deuteriumoksidfortynningsteknikken brukes til å bestemme vannforbruket til et enkelt dyr. Her beskriver vi tilpasningen av deuteriumoksidfortynningsteknikken for å vurdere kroppssammensetning i store brune (Eptesicus fuscus) og for å vurdere vannforbruket hos katter (Felis catis).

Deuteriumoksidfortynningsteknikken kan brukes til å vurdere kroppssammensetningen av en rekke arter. For å demonstrere tilpasningsevnen rapporterer vi den første bruken av deuteriumoksidfortynningsteknikken i en nordamerikansk insektivorende flaggermusart, Eptesicus fuscus, den store brune for representative resultater. Et timingplatå ble fullført ved å ta pre- og post-D2O injeksjon blodprøver som bør gjøres med noen arter der likevektsperioden er ukjent. Det ...

Watch this Scientific Journal Video about Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals at JoVE.com

Using Deuterium Oxide as a Non-Invasive, Non-Lethal Tool for Assessing Body Composition and Water Consumption in Mammals

Denne artikkelen beskriver deuteriumoksidfortynningsteknikken hos to pattedyr, et insektiboer og kjøtteter, for å bestemme totalt kroppsvann, mager kroppsmasse, kroppsfettmasse og vannforbruk.

Bruke deuteriumoksid som et ikke-invasivt, ikke-dødelig verktøy for å vurdere kroppssammensetning og vannforbruk hos pattedyr

Body condition scoring systems and body condition indices are common techniques used for assessing the health status or fitness of a species. Body ...

Ved hjelp av denne protokollen kan deuteriumoksid, eller D2O, en ikke-radioaktiv, stabil isotop av vann, brukes til å estimere kroppssammensetning og vannforbruk. Denne teknikken er ikke-invasiv og kan derfor brukes til å vurdere kroppssammensetning i truede arter, så vel som hos mennesker og innenlandske arter. En unik anvendelse av deuteriumoksid fortynningsteknikken er evnen til å måle vannforbruket av frittgående dyreliv med høye gjenerobringsrater eller sosialt husde dyr.Mens anestesi ikke er nødvendig, det kan være lettere for de som ikke er kjent med å gi subkutane injeksjoner å bedøve dyrene før levere deuteriumoksid. Demonstrere prosedyren med Sarah Hooper og meg vil være Amanda Eshelman og Ashley Cowan, veterinærstudenter, og Alicia Roistacher, en utdannet student fra laboratoriet mitt. For å lage en 50-milliliter lagerløsning på ni gram per liter salinert deuteriumoksid, veier du først 450 milligram natriumklorid av farmasøytisk kvalitet, og registrerer nøyaktig beløpet til fire desimaler.Overfør alt saltet til et sterilisert 100-milliliter beger, og mål ut 50 gram større enn eller lik 99,8% deuteriumoksid i en steril, gradert sylinder. Registrer den nøyaktige mengden deuteriumoksid til fire desimaler, og overfør deuteriumoksidet til det sterile begeret av natriumklorid. Deretter fester du en 20-gauge nål til et ikke-pionrogenic, sterilt diskfilter med submicron porer utstyrt med en 10-milliliter sprøyte fat, og sett nålen inn i septum av en steril, tom, 100-milliliter hetteglass.Fest et vakuumrør til en 22-gauge nål, og sett nålen inn i septum av 100-milliliter hetteglass. Deretter laster du 10 milliliter isosmotisk styrke natriumklorid inn i sprøytesylinderen, og slår sakte på vakuumet til deuteriumoksidoppløsningen begynner å filtrere sakte inn i hetteglasset. Fortsett å helle deuteriumoksidlageroppløsningen i sprøytesylinderen til hele 50-millilitervolumet er filtrert.Etter å ha bekreftet mangel på respons på tåklemmen i en bedøvet, bruk en alkoholprepppute til å rengjøre uropatagium over den interfemorale venen, og la den desinfiserte halemembranen tørke. Påfør et tynt lag petroleumjell over den interfemorale venen, og bruk en 29-gauge nål for å punktere den dorsale delen av den interfemorale venen. Bruk deretter plastnatrium heparin kapillær rør for å samle 100 mikroliter blod.For å sikre en tilstrekkelig blanding av hele blodet med natrium heparin, rull forsiktig hvert rør etter blodsamlingen før merking. Etter å ha bestemt massen av deuteriumoksid i gram for å injisere, last en insulinsprøyte utstyrt med en 29-gauge nål med riktig volum av deuteriumoksid. Vei den deuteriumbelastede insulinsprøyten og nålen, registrere vekten til fire desimaler, og injiser hele volumet av deuteriumoksid subkutant over dorsal hofteområdet til den bedøvede.Vi anbefaler at du bruker en presisjonsskala med et antistatisk trekkskjold og for å sikre at stempelet trekkes tilbake for å sikre negativt trykk før injeksjon. Umiddelbart etter injeksjonen, veie den nå tomme insulinsprøyten og nålen, og registrer vekten til fire desimaler. Innen 30 minutter etter blodinnsamling, bruk en hematokrit sentrifuge for å spinne ned hvert kapillærrør ved 10 000 ganger g i fem minutter.Bruk skarp saks, kutt plastkapillærrøret mellom hele blodet og plasmaet, og bruk en 200 mikroliter pipette for å utvise plasmaet direkte inn i et merket, 500 mikroliter oppbevaringsrør. Etter likevektsperioden samler og oppbevarer ytterligere 100 mikroliter blod fra den interfemorale venen som nettopp demonstrert. For FTIR spektrofotometrianalyse, sett temperaturen på et sandbad til 60 grader Celsius for å lette destillasjon, og legg til 50 mikroliter av hver plasmaprøve og standard i individuelle 1,5-milliliter koniske mikrocentrifuge caps.Hold mikrocentrifugehetten opp ned, skru det koniske mikrocentrifugerøret på hetten, og plasser det inverterte røret i kontakt med sanden i sandbadet i minst 12 timer. Neste morgen, plasser en ny, ren hette på hvert rør, og puls mikrocentrifuge rørene i 10 sekunder i en mikrocentrifuge. Installer en væskeoverføringscelle i FTIR-spektrometeret, og fyll cellen med metanol.Koble injeksjonsporten, og fyll sakte cellen med bakgrunnsvann mens du forsiktig fjerner metanolsprøyten for å redusere risikoen for luftbobler. Fest slangen til utgangsporten for å tillate fjerning av prøvene etter analyse, og åpne FTIR spektrometerprogramvaren. Angi parameterne i henhold til tabellen, og samle inn en bakgrunnsprøve ved hjelp av fortynningsmiddelet, 0,22-mikrometerfiltrert, destillert vann.Injiser 40 mikroliter av en null deler per million deuteriumoksid standard, og registrere og lagre spektra som en kommadelt verdier fil. Etter å ha injisert og lagret spektra av alle standardene for å skape en standard kurve, injisere 40 mikroliter av hver destillert prøve i væskeoverføringscellen, og lagre spektra. Med en kjent likevektstid kan det totale kroppsvannet, lean body mass og kroppsfettmasse for villfangede store brune og fangede store brune bestemmes.En negativ kroppsfettmasse kan beregnes på grunn av en eller flere av følgende grunner: ikke å motta hele dosen av deuteriumoksid, bli torpid under likevektsfasen, har unormalt store fettmasser og minimale magre masser, eller har under tre til 5% kroppsfett som bestemmes av dobbel røntgen absorptiometry. Her vises en representativ prosentandel av kroppsfett bestemt av deuteriumoksidfortynningsteknikken sammenlignet med dobbel røntgenabsorptiometri. De to teknikkene er godt korrelert, med kroppsfettmassen som viser sterke sammenhenger mellom kroppsfett og kroppsvekt og med deuteriumoksidfortynningsteknikken som ikke konsekvent over eller undervurderer kroppsfettmassen.Deuteriumoksidfortynkingsmetoden er tidligere validert hos katter, og teknikken ble tilpasset for å tillate måling av det daglige vannforbruket av sosialt huset katter under hver diettblokk av eksperimentet. Husk at denne teknikken bare skal utføres på friske dyr, og at du bør nøyaktig veie, registrere og levere hele dosen av deuteriumoksid til hvert dyr. En sekundær metode for å bestemme kroppssammensetning, for eksempel komplett kadaveranalyse eller DEXA, kan fullføres for å validere deuteriumoksidteknikken.Denne teknikken tillot oss å identifisere en sosialt plassert katt som brukte unormalt høye mengder vann uten å skille hver katt for å måle vannforbruket.

Research

JoVE Journal

Environment

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

Laboratory bestemt Fosfor Flux fra innsjøsedimentene som et mål på intern Fosfor Loading

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

Use of Chironomidae (Diptera) Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Use of Chironomidae Diptera Surface-Floating Pupal Exuviae as a Rapid Bioassessment Protocol for Water Bodies

Bruk av Chironomidae (Diptera) Surface-Floa pupal Exuviae som Rapid Bioassessment protokoll for vannforekomster

Rapid bioassessment protocols using benthic macroinvertebrate assemblages have been successfully used to assess human impacts on water quality. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615. Måling av Enterovirus og Norovirus Forekomst i Water av Kultur- og RT-qPCR. Del III. Virus Detection ved RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Fjerning av Trace Elements av Cupric Oxide Nanopartikler fra Uran<em&gt; In Situ</em&gt; Recovery Bleed Vann og dens effekt på Cell Livskraftig

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

Soil Lysimeter Excavation for Coupled Hydrological, Geochemical, and Microbiological Investigations

Jord Lysimeter Graving for Coupled Hydrologiske, Geokjemiske, og mikrobiologiske undersøkelser

Studying co-evolution of hydrological and biogeochemical processes in the subsurface of natural landscapes can enhance the understanding of coupled ...

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for Endocrine Activity in Water Using Commercially-available In Vitro Transactivation Bioassays

Screening for endokrin aktivitet i vann ved hjelp av kommersielt tilgjengelig<em&gt; In Vitro</em&gt; Trans bioassay

In vitro transactivation bioassays have shown promise as water quality monitoring tools, however their adoption and widespread application has been ...

Protocol for Assessing the Relative Effects of Environment and Genetics on Antler and Body Growth for a Long-lived Cervid

Protokollen for å vurdere relativ effekten av miljø og genetikk på gevir og kroppens vekst for en lang levetid Cervid

Cervid phenotype can be placed into one of two categories: efficiency, which promotes survival over extravagant morphometric growth, and luxury, which ...

Composition and Properties of Aquafaba: Water Recovered from Commercially Canned Chickpeas

Sammensetning og egenskapene til Aquafaba: vann utvinnes fra kommersielt boks kikerter

Chickpea and other pulses are commonly sold as canned products packed in a thick solution or a brine. This solution has recently been shown to produce ...

A Simple Planting Technique for Re-establishing Trees Where Frequent Inundation Occurs

En enkel plante teknikk for å etablere trær hvor hyppig oversvømmelse oppstår

Many of the Everglades tree islands have lost elevation over the past century and most of their trees have died such that they are now covered with ...

Optimized Procedure for Determining the Adsorption of Phosphonates onto Granular Ferric Hydroxide using a Miniaturized Phosphorus Determination Method

Optimalisert prosedyre for å bestemme adsorpsjon av Phosphonates på detaljert Ferric hydroksid bruker miniatyriserte fosfor vilje metode

This paper introduces a procedure to investigate the adsorption of phosphonates onto iron-containing filter materials, particularly granular ferric ...