Name: modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research
Uploaded: 2019-04-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research at JoVE.com

Diese Arbeit wurde vom Büro des stellvertretenden Verteidigungsministers für Gesundheitsfragen durch das Congressionally Directed Medical Research Program unter dem Preis Nr. 1 unterstützt. W81XWH-13-2-0057. Meinungen, Interpretationen, Schlussfolgerungen und Empfehlungen sind die der Autoren und werden nicht unbedingt vom Verteidigungsministerium unterstützt.

Alle Tieroperationen wurden in Übereinstimmung mit Protokollen durchgeführt, die vom Institutional Animal Care and Use Committee der University of Louisville (IACUC-zugelassenes Protokoll 18198) und dem National Institutes of Health (NIH) Leitfaden für die Pflege und Nutzung von Labortiere 10. Viermonatiges Männchen Brown-Norwegen (RT1. An) und 4 Monate alter Rüde Lewis (RT1. A l) Ratten wurden als VCA-Spender bzw. Empfänger verwendet.
<p class="jove_title"...

<ol>
	<li>Gilbert Fernandez, J. J., Febres-Cordero, R. G., Simpson, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Untold+Story+of+the+First+Hand+Transplant:+Dedicated+to+the+Memory+of+one+of+the+Great+Minds+of+the+Ecuadorian+Medical+Community+and+the+World.">The Untold Story of the First Hand Transplant: Dedicated to the Memory of one of the Great Minds of the Ecuadorian Medical Community and the World.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. , (2018).</li><li>Dubernard, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+hand+allograft:+report+on+first+6+months.">Human hand allograft: report on first 6 months.</a> Lancet. 353 (9161), 1315-1320 (1999).</li><li>Jones, J. W., Gruber, S. A., Barker, J. H., Breidenbach, W. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Successful+hand+transplantation.+One-year+follow-up.+Louisville+Hand+Transplant+Team.">Successful hand transplantation. One-year follow-up. Louisville Hand Transplant Team.</a> The New England Journal of Medicine. 343 (7), 468-473 (2000).</li><li>Devauchelle, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=First+human+face+allograft:+early+report.">First human face allograft: early report.</a> Lancet. 368 (9531), 203-209 (2006).</li><li>Broyles, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+abdominal+wall+reconstruction+using+an+innervated+abdominal+wall+vascularized+composite+tissue+allograft:+a+cadaveric+study+and+review+of+the+literature.">Functional abdominal wall reconstruction using an innervated abdominal wall vascularized composite tissue allograft: a cadaveric study and review of the literature.</a> Journal of Reconstructive Microsurgery. 31 (1), 39-44 (2015).</li><li>Kollar, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Innovations+in+reconstructive+microsurgery:+Reconstructive+transplantation.">Innovations in reconstructive microsurgery: Reconstructive transplantation.</a> Journal of Surgical Oncology. 118 (5), 800-806 (2018).</li><li>Kaufman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graft+vasculopathy+in+clinical+hand+transplantation.">Graft vasculopathy in clinical hand transplantation.</a> American Journal of Transplantation. 12 (4), 1004-1016 (2012).</li><li>Brandacher, G., Grahammer, J., Sucher, R., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+basic+and+translational+research+in+reconstructive+transplantation.">Animal models for basic and translational research in reconstructive transplantation.</a> Birth Defects Research Part C: Embryo Today. 96 (1), 39-50 (2012).</li><li>Kaufman, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunobiology+in+VCA.">Immunobiology in VCA.</a> Transplantation International. 29 (6), 644-654 (2016).</li><li>Committee for the Update of the Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, Institute for Laboratory Animal Research, Division on Earth and Life Studies, National Research Council of the National Academies. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guide for the Care and Use of Laboratory Animals, 8th edition. , (2011).</li><li>Nazzal, J. A., Johnson, T. S., Gordon, C. R., Randolph, M. A., Lee, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+limb+allotransplantation+model+to+study+skin+rejection+in+the+rat.">Heterotopic limb allotransplantation model to study skin rejection in the rat.</a> Microsurgery. 24 (6), 448-453 (2004).</li><li>Ulusal, A. E., Ulusal, B. G., Hung, L. M., Wei, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heterotopic+hindlimb+allotransplantation+in+rats:+an+alternative+model+for+immunological+research+in+composite-tissue+allotransplantation.">Heterotopic hindlimb allotransplantation in rats: an alternative model for immunological research in composite-tissue allotransplantation.</a> Microsurgery. 25 (5), 410-414 (2005).</li></ol>

Bei der Entwicklung dieses VCA-Modells wurden mehrere Schlüsselfragen berücksichtigt. Zunächst war es wichtig, intakte Knochen (Tibia und Fibel), Knochenmark und Haut in den Transplantation einzubinden. Während klinische Handtransplantationen von erwachsenen Spendern keine signifikanten Mengen von aktiv hämatopoetischen Knochenmark übertragen, werden Studien über die Rolle der Knochenmarknische besser gespiegelt mit einem intakten, vaskularisierten Knochen statt eines abgeschnittenen langen Knochens, was zu einem ...

Die rekonstruktive Chirurgie für den katastrophalen Gewebeverlust durch Amputation, Strahlverletzungen, bösartige Erkrankungen und angeborene Defekte wird durch die Verfügbarkeit von Gewebe des Patienten und die zusätzliche Morbidität am Spenderstandort begrenzt. In einigen Fällen, wie zum Beispiel Verbrennungsopfer oder viereckige Amputierten, ist lebensfähiges Gewebe für die Rekonstruktion vom Patienten nicht vorhanden. 1964 wurde in Ecuador die erste moderne Handtransplantation durchgeführt. Obwohl dies ein technischer Erfolg war, reichte die damals verfügbare Immunsuppression nicht aus, um eine Abstoßung zu verhindern, und die Bestechungging in weniger als 3 Wochen 1 verloren. In den Jahren 1998 und 1999 wurden die ersten Transplantationen in der modernen Ära der Immunsuppression in Lyon, Frankreich2 und Louisville, Kentucky, USA 3durchgeführt. Zum ersten Mal könnten rekonstruktive Chirurgen wie mit Gleichem ersetzen. Die Gesichtstransplantation wurde 2005 zumersten Maldurchgeführt 4, und eine Reihe anderer VCA-Transplantationen werden nun routinemäßig durchgeführt, wie die Bauchwand5, die Gebärmutter und dieUrogenital-Transplantationen 6.
Im Gegensatz zu einer soliden Organtransplantation sind die meisten VCA-Techniken mit dem Vorhandensein der hochantigenen Spenderhaut verbunden. Die klinische Erfahrung hat ergeben, dass die akute Abstoßung der Haut relativ leicht zu kontrollieren ist, aber zur chronischen Abstoßung der zugrunde liegenden Gewebe und Gefäße beitragen kann, die nicht gut auf die Behandlung7reagieren. Die Gefäßfunktionsstörungen, die mit einer alloimmunischen Reaktion verbunden sind, sind ein unheilvolleres Hindernis für das Feld der VCA7. Makrovasculopathien führen zu Perfusionsdefiziten, verzögerter Heilung und entzündungshemmenden Zuständen. Sowohl die konfluent aggressive Großgefäßvaskulopathie als auch die fokale Intimhyperplasie tretenin Handtransplantationsempfängern 7 auf. Darüber hinaus können Mikrovaskulopathien wahrscheinlich auch zu VCA-Komplikationen beitragen und sogar zu Abstoßungsveranstaltungen führen. Während sowohl Immun-als auch nicht-immugefarbene Faktoren wahrscheinlich eine Rolle in der Vaskulopathie von Handtransplantationsempfängern spielen, sind die spezifischen Mechanismen zur Förderung der distalen Gefäßfunktionsstörungen in VCA nicht bekannt, insbesondere im Zusammenhang mit einer minderwertigen, chronischen Abstoßung. Diese unbeantworteten Fragen erfordern die Entwicklung eines tierischen VCA-Modells, das die serielle Beurteilung der Transplantation während des klinischen Kurses der VCA ablehnungspection/Pflege und Vaskulopathie ermöglicht. Ein solches Modell wird Einblicke in die Abstoßung und Vaskulopathieangesichtsvon Immunsuppression, infektiöser Herausforderung, and/oder anderen postoperativen traumatischen Verletzungen 8,9bieten.
Präsentiert wird hier ein allogeneisches Ratten-VCA heterotopisches Hindlim-Osteomyoskan-Klappen-Modell. Auf der Grundlage bereits veröffentlichter VCA-Modelle ist dieses Verfahren technisch einfach durchzuführen, in großer Zahl reproduzierbar und weist dem Empfängertier minimale Morbidität und Unbehagen auf. Dieses Modell wurde entwickelt, um klinische und histopathologische Einschätzungen der VCA-Akzeptanz vs. Abstoßung zu ermöglichen und bietet die Möglichkeit, die zugrunde liegenden Immun-und Nichtimmunmechanismen zu bewerten, die an der Abstoßung beteiligt sind.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:697px;" width="698">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:269px;">Acepromazine</td>
			<td style="width:143px;">Henry Schein</td>
			<td style="width:119px;">5700850</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Adventitia Scissors</td>
			<td>ASSI&#160;</td>
			<td>SAS15R8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Approximator Clamp (Double)</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>ABB2V, ABB22V</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Approximator Clamp (single)</td>
			<td>FST</td>
			<td>00398-02</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Clamp Applying Forceps</td>
			<td>ASSI&#160;</td>
			<td>CAF4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dissecting Scissors</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>SDS18R8</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Flushing blunt needle 27G</td>
			<td>SAI</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Heparin Sodium</td>
			<td>Sagent</td>
			<td>25021-400-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary</td>
			<td>14043-704-06</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Jewelers Bipolar</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>103000BPS03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Jewelers forceps #3</td>
			<td>FST</td>
			<td>11231-30</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ketamine HCl 100 mg/ml</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>043-304</td>
			<td>DEA License required</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lactated Ringer Solution</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-7953-03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Lactated Ringer Solution + 5% Dextrose</td>
			<td>Hospira</td>
			<td>0409-7953-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Meloxicam</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>11695-6925-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro forceps</td>
			<td>ASSI&#160;</td>
			<td>JFAL3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Micro needle holder</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>B138</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Prograf (Tacrolimus) 5 mg/ml</td>
			<td>Astellas</td>
			<td>0469-3016-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture, 10-0 Prolene</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>W2790</td>
			<td>or 10-0 Ethilon (2830)</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Suture, 4-0 Coated Vicryl</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J714D</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Vessel Dilator Forceps</td>
			<td>ASSI</td>
			<td>D5AZ</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylazine</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>13985-612-50</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modified heterotopic hindlimb osteomyocutaneous flap model in the rat for translational vascularized composite allotransplantation research

Vaskularisierte Composite-Legierung (VCA) ist ein relativ neues Feld in der rekonstruktiven Chirurgie. Zu den klinischen Leistungen im menschlichen VCA gehören Hand-und Gesichtstransplantationen und in jüngerer Zeit auch Bauchwand-, Gebärmutter-und Urogenitaltransplantationen. Funktionale Ergebnisse haben die ursprünglichen Erwartungen übertroffen, und die meisten Empfänger genießen eine verbesserte Lebensqualität. Mit der häufenden klinischen Erfahrung müssen jedoch chronische Abstoßungen und Komplikationen durch die Immunsuppression angegangen werden. In vielen Fällen, in denen die Transplantationen fehlgeschlagen sind, ist die ursächliche Pathologie ischämische Vaskulopathie. <span style="font-size: 11pt; line-height: 115%; font-family: Arial, sans-serif; color: rgb(41, 43, 49); background-image: initial; background-position: initial; background-size: initial; background-repeat: initial; background-attachment: initial; background-origin: initial; background-clip: initial;">Wichtige Forschungsfelder sind die biologischen Mechanismen der akuten und chronischen Abstoßung, die mit VCA verbunden sind, insbesondere die ischämische Vaskulopathie. Aufgrund der sehr geringen Zahl von VCA-Patienten wird die Bewertung der vorgeschlagenen Mechanismen jedoch in einem experimentellen Modell besser behandelt. Mehrere Gruppen haben Tiermodelle benutzt, um einige der relevanten ungelösten Fragen in der VCA-Ablehnung und Vaskulopathie zu behandeln. In der Literatur werden verschiedene Modellentwürfe mit verschiedenen Arten beschrieben. Hier stellen wir ein reproduzierbares Modell der VCA-heterotopischen Hinterbeine Osteomyohaue-Klappe in der Ratte vor, die für die translationale VCA-Forschung genutzt werden kann. Dieses Modell ermöglicht die serielle Auswertung des Transplantats, einschließlich Biopsien und verschiedener bildgebender Modalitäten, wobei ein geringes Maß an Morbidität beibehalten wird.

Das Ratten-VCA-Heterotopic hindlimb osteomyoskan Klappenmodell ermöglicht ein langfristiges allograft-Überleben unter Immunsuppression. Das Modell ist zuverlässig, reproduzierbar und einfach auszuführen. Die Klappe ist gut versteckt in der Leistengegend und stellt minimale Morbidität und Beschwerden für das Tier dar. Die Hautpräsentation ist eine klinische Manifestation des Überlebens und der Ablehnung der Allograft(Abbildung1). Das Klappendesign ermöglicht eine grobe klinische Übe...

Watch this Scientific Journal Video about Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research at JoVE.com

Modified Heterotopic Hindlimb Osteomyocutaneous Flap Model in the Rat for Translational Vascularized Composite Allotransplantation Research

Modifiziertes Heterotopisches Hindlimb Osteomyoskan Flap Model im Rat für translational Vasculariisierte Composite Allotransplantation Research

Vaskularisierte Verbundlegierung bietet den Transplantationsempfängern lebensverändernde Vorteile, aber die biologischen Ursachen für die Abstoßung von Transplantationen und die Vaskulopathie bleiben schlecht verstanden. Das hier vorgestellte Nagetier bietet ein reproduzierbares, klinisch relevantes Transplantationsmodell, das es Forschern ermöglicht, Abstoßungsereignisse und mögliche therapeutische Strategien zu bewerten, um deren Auftreten zu verhindern.

Vascularized composite allotransplantation (VCA) is a relatively new field in the reconstructive surgery. Clinical achievements in human VCA include hand ...

Die geringe Anzahl von vaskularisierten Komposit-Allotransplantaten, die klinisch durchgeführt wurden, erfordern ein zuverlässiges, reproduzierbares Tiermodell, um die zugrunde liegenden Ursachen der Transplantatabstoßung zu untersuchen. Klinisch relevante Gewebe wie Haut, Muskel und Knochen sind alle im Modell vorhanden. Darüber hinaus ermöglicht die nicht-funktionelle Natur unseres Modells eine schnellere Operation, weniger ischämische Zeit für die Klappe und eine geringere Morbidität im Vergleich zu orthotopischen Modellen von VCA.Bei Handtransplantationsempfängern kann die Vaskulopathie von Spendergefäßen zu einem vollständigen Verschluss der Gefäße und ischämischen Schäden an der transplantierten Hand führen. Dieses Modell ist ein Werkzeug, um die Entwicklung dieser vaskulopathischen Ereignisse zu untersuchen. Vor dem Versuch dieses chirurgischen Modells sollte der Primärchirurg mit makrovaskulären chirurgischen Techniken vertraut und kompetent sein.Dies ist ein kompliziertes und langwieriges Verfahren. Die visuelle Demonstration wird anderen Labors helfen, sich entsprechend vorzubereiten und die Schritte der Operation zu verstehen. Zuerst ernten Sie zuerst das hintere Glied einer Spenderratte, indem Sie einen Hautschnitt in der Leistenkonkavität machen und die Oberschenkelgefäße entblößen.Machen Sie einen ventralen Hautschnitt, der bei der Zerlegung des Pedikels hilft. Nach der Deartikulation des Knies und des Knöchels, machen Dorsale Hautschnitte, transect die Pedikle, um das Transplantat zu befreien, und transportieren Sie das Transplantat sofort zum Empfänger-OP-Tisch, wo die chirurgische Stelle des Empfängertiers im Voraus vorbereitet wird, um die ischämische Zeit des Transplantats zu minimieren. Auf dem Empfängertier die Femoralgefäße wie bisher aussetzen und sezieren und dann das Transplantat, die Vene Ende-zu-Ende, arteriend, anastomose.Setzen Sie das Transplantat in die Leistentasche ein und richten Sie es auf den Kopf. Schließlich, Naht die Haut. Um das Verfahren zu beginnen, rasieren Sie eine anästhesierte Spenderratte, und verwenden Sie dann Enthaarungscreme.Injizieren Sie 30 Einheiten Heparin subkutan in den Scruff-Bereich. Legen Sie die Tiersuppe auf ein Heizkissen und produzieren Sie ein steriles Operationsfeld, indem Sie den Operationsbereich, einschließlich des dorsalen Aspekts des Beins, vorzuschneiden, zu schrubben und drapieren. Verwenden Sie Skalpellklinge Nummer 15, um einen 3-Zentimeter-Hautschnitt in der Leistenkonkavität der Spenderratte zu machen.Verwenden Sie IrisSchere, um seitlich das Leistenfettpad zu reflektieren. Mit stumpfer Sesection mit einem Wattestäbchen, setzen Sie die gemeinsamen Femoralgefäße, und legen Sie dann einen Drahthaken mit einem elastischen Band, um die Bauchmuskeln zurückzuziehen. Verwenden Sie unter einem Sezierendes Mikroskop mit bis zu 40-facher Vergrößerung Mikroscheren, Nummer drei gerade Juwelierzangen und Nummer fünf 45-Grad-Winkelzangen, um den Pedikulus proximal von der Entstehung der gemeinsamen Femoralgefäße unter dem Leistenband und distally bis zum Zusammenfluss von Poplitealgefäßen in das Transplantat zu sezieren.Mit Mikroclips und bipolaren Juwelieren zangen, ligaten und teilen Sie die großen arteriellen und venösen Zweige, um die wichtigsten Femoralgefäße zu mobilisieren. Verwenden Sie feine bipolare Zangen, um kleine Zweige zu kauterisieren. Verwenden Sie IrisSchere, um einen Hautschnitt von der Mitte der vorherigen Haut entlang der ventralen Seite des Hinterglieds zum Knöchelbereich geschnitten zu machen.Schneiden Sie den Gracilis-Muskel und die anderen Adduktorenmuskeln darunter vertikal, um die medialen proximalen Genikulärgefäße, tief verzweigte kleine Gefäße und den Ischiasnerv zu belichten und zu ligieren. An dieser Stelle, auf einem separaten Operationstisch, sollte der andere Chirurg das Empfängertier intubieren und anästhesieren, um den Empfänger chirurgischen Platz rechtzeitig für die Transplantation vorzubereiten, und die ischämische Zeit des Transplantats zu minimieren. Machen Sie umlaufende Hauteinschnitte auf der Ebene des Knies und Knöchels, disartikulieren Sie das Knie und den Knöchel und entfernen Sie fremde Muskeln und Gewebe.Machen Sie einen vertikalen Hautschnitt auf der Rückenseite des Hinterbeins, um das Transplantat zu befreien, bestehend aus Fibel und Tibia, und jetzt nur durch den Pedikulus verbunden. Kleine Klammern so proximal wie möglich auf die Oberschenkelarterie und Vene legen und den Pediküre so nah wie möglich am Leistenband schneiden. Verwenden Sie eine 27-Gauge Spülung stumpf kanüle heparinisierte Saline in die Oberschenkelarterie zu injizieren, um das Transplantat des Blutes zu spülen.Das isolierte Transplantat in warme, mit Herzsamen getränkte Gaze wickeln und sofort mit dem Empfängertier auf den Tisch transportieren, wobei die operationschirurgische Stelle bereits für gefäßvaskuläre Anastomose vorbereitet ist. Intubieren Sie die Empfängerratte und beanten Sie mit 2,5 bis 3% verdampftem Isofluran, das mit einem Liter pro Minute Sauerstoff ausgeglichen wird. Legen Sie das Tier supine auf einem Heizkissen, und schrubben und drapieren sie die chirurgische Stelle.Während der erste Chirurg an der Befreiung des Transplantats vom Spendertier arbeitet, verwenden Sie die Skalpellklinge Nummer 15, um einen drei Zentimeter großen Hautschnitt in der Leistenzerrung der anästhesierten Empfängerratte zu machen. Verwenden Sie IrisSchere, um seitlich das Leistenfettpad zu reflektieren. Nachdem Sie die üblichen Femoralgefäße auf die gleiche Weise wie beim Spendertier freigelegt haben, legen Sie einen Drahthaken mit einem elastischen Band, um die Bauchmuskeln zurückzuziehen.Dann ligate und teilen Murphy Zweige. Mit 10-0 Nylon unterbrochennähte Nähnähte, Anastomose Spendergefäße. Zu Empfängergefäßen über venöse End-to-Side-Technik.Führen Sie dann arterielle Anastomose durch End-to-End-Technik durch. Nach dem schrittweisen Lösen der Klemmen, überwachen Sie die anastomotischen Stellen auf Blutungen und fügen Sie zusätzliche Nähte bei Bedarf hinzu. Um eine effektive Transplantatreperfusion zu gewährleisten, bewerten Sie die vaskuläre Anastomose visuell.Dann setzen Sie das Transplantat in die Leistentasche ein und orientieren Sie es auf den Kopf, mit dem Sprunggelenk überlegen und das Kniegelenk minderwertig. Verwenden Sie Tucking Nähte, um das Transplantat an benachbarten Muskeln zu sichern. Schließlich schließen Sie die Haut über unterbrochene horizontale Matratze hautreisierbare 4-0 Nähte, und fahren Sie mit postoperativer Pflege fort, wie im Manuskript beschrieben.Das heterotopische Osteomyokutane-Flap-Modell der Ratte VCA VCA ermöglicht ein langfristiges Allograft-Überleben unter Immunsuppression. Die Klappe ist im Leistenbereich gut versteckt und stellt minimale Morbidität und Beschwerden für das Tier dar. Als die Immunsuppressionsbehandlung abgebrochen wurde, wurde das Transplantat abgelehnt.Dopplerbilder des Allografts zeigen eine Verschiebung von minimaler Blutprofusion unmittelbar nach VCA hin zu einer vollständigen Revaskularisation der Klappe am 64. Tag. Die Hautbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie der Hautbestandteile, während es atrophieren und mononukleäre Zellinfiltration in einem allogenen Allograft in der Abstoßung am Tag 75 gibt, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivums behandelt wird. Die Muskelbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie, während Muskelatrophie und mononukleäre Zellinfiltration in einem allogenen Allograft bei der Abstoßung am Tag 98, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivs behandelt wird, sichtbar sind.Die Femoralarterienbiopsie eines syngenischen Allografts am 45. Tag zeigt eine normale Morphologie der Arterie, im Gegensatz zur femoralen Arterie eines allogenen Allografts in der Abstoßung am Tag 98, der täglich mit einer niedrigeren Dosis eines Immunsuppressivums behandelt wird. Dieses Modell bietet ein Werkzeug, um die Auswirkungen von akuter Abstoßung, chronischer Abstoßung und Umweltfaktoren wie Infektionen und chirurgische Beleidigungen auf die Entwicklung der Vaskulopathie zu testen. Immunsuppressive Medikamente sind für das langfristige Überleben des Transplantats erforderlich.Diese Medikamente sind chemisch gefährlich und sollten mit Vorsicht und ordnungsgemäßer Schutzausrüstung des Personals behandelt werden.

Research

JoVE Journal

Medicine

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) Research

A Modified Heterotopic Swine Hind Limb Transplant Model for Translational Vascularized Composite Allotransplantation VCA Research

Eine modifizierte Heterotope Schweine Hind Gliedmaßen-Transplantation Modell für Translationale Vaskularisierte Composite-Allotransplantation (VCA) Forschung

Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) such as hand and face transplants represent a viable treatment option for complex musculoskeletal trauma ...

Forschung

Medizin

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

A Novel Mikromodell für Heterotope, En Bloc Brustwand, Thymus und Herz-Transplantation bei Mäusen

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

Orthotopische Hind Gliedmaßen Transplantation in der Maus

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Maus-Modell für die Bauchspeicheldrüse Transplantation mit einer modifizierten Manschette-Technik

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Surgical Angiogenesis in Porcine Tibial Allotransplantation: A New Large Animal Bone Vascularized Composite Allotransplantation Model

Chirurgische Angiogenese in porcinen tibiale Allotransplantation: eine neue große Tierknochen durchblutet zusammengesetzte Allotransplantation Modell

Segmental bone loss resulting from trauma, infection malignancy and congenital anomaly remains a major reconstructive challenge. Current therapeutic ...

A Model of Free Tissue Transfer: The Rat Epigastric Free Flap

Ein Modell der freien Gewebetransfer: Die Ratte Epigastrische Freie Flap

Free tissue transfer has been increasingly used in clinical practice since the 1970s, allowing reconstruction of complex and otherwise untreatable defects ...

Development of a Novel Task-oriented Rehabilitation Program using a Bimanual Exoskeleton Robotic Hand

Entwicklung eines neuartigen aufgabenorientierten Rehabilitationsprogramms mit einer bimanualen Exoskelett-Roboterhand

A robot-assisted hand is used for the rehabilitation of patients with impaired upper limb function, particularly for stroke patients with a loss of motor ...

Retinal Pathophysiological Evaluation in a Rat Model

Retinale pathophysiologische Bewertung in einem Rattenmodell

A posterior segment eye disease like diabetic retinopathy alters the physiology of the retina. Diabetic retinopathy is characterized by a retinal ...

A Modified Cuff Technique for Mouse Cervical Heterotopic Heart Transplantation Model

Eine modifizierte Manschettentechnik für das zervikale heterotope Herztransplantationsmodell der Maus

Cardiac allograft rejection limits the long-term survival of patients after heart transplantation. A mouse heart transplantation model is ideal for ...

Hickman Catheter for Long-Term Vascular Access in Swine

Hickman Catheter Use for Long-Term Vascular Access in a Preclinical Swine Model

Hickman Catheter Use for Long-Term Vascular Access in a Preclinical Swine Model (Video) | JoVE 

Verwendung des Hickman-Katheters für den langfristigen Gefäßzugang in einem präklinischen Schweinemodell

Central venous catheters (CVCs) are invaluable devices in large animal research as they facilitate a wide range of medical applications, including blood ...