Name: preparation and application of a new bacterial biosensor for the presumptive detection of gunshot residue
Uploaded: 2019-05-09T14:45:00
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Los autores desean reconocer a los estudiantes de la Universidad de Longwood en BIOL 324 (genética) y los estudiantes en CHEM 403 (solución avanzada de problemas de laboratorio químico) que estuvieron involucrados en la preparación inicial y pruebas de los biosensores de antimonio y plomo. La idea para MicRoboCop fue concebida en el taller GCAT SynBIO (verano 2014), financiado por NSF y el Howard Hughes Medical Institute y organizado por la Universidad de Maryland, Condado de Baltimore. Los autores también reconocen la financiación recibida de la escuela de Artes y Ciencias Cook-Cole de la Universidad de Longwood y la beca GCAT SynBio Alumni.

Nota: se presenta la síntesis de E. coli expresando RFP.
1. preparación del ADN plásmido de E. coli
<ol><li>Descongelar e. coli conteniendo un plásmido con un gen RFP y un gen de resistencia a la ampicilina y cultivar las placas de agar e. coli en el caldo Luria (LB) que contienen 100 μg/ml de ampicilina a 37 ° c durante 24 h. Por ejemplo, utilice el plásmido J10060 del registro de las piezas biológicas estándar utilizadas para la biología sinté...

<ol>
	<li>Eschner, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=&#34;The+Story+of+the+Real+Canary+in+the+Coal+Mine.&#34;.">&#34;The Story of the Real Canary in the Coal Mine.&#34;.</a> The Smithsonian Magazine. , (2016).</li><li>Roda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+chemical+luminescence-based+biosensors:+A+critical+review.">Progress in chemical luminescence-based biosensors: A critical review.</a> Biosensors &#38; Bioelectronics. 76, 164-179 (2016).</li><li>He, W., Yuan, S., Zhong, W. H., Siddikee, M. A., Dai, C. 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Las modificaciones y la solución de problemas
El experimento descrito en el cuadro 4 se puede modificar de cualquier manera adecuado a los sensores que se han diseñado. El aspecto más importante de un sensor químico es evaluar su sensibilidad y especificidad. Es beneficioso asegurarse de que se analice una amplia gama de concentraciones del analito para determinar el rango analítico útil del sensor. También vale la pena determinar un nivel máximo de an...

Un biosensor es cualquier dispositivo analítico que utiliza componentes biológicos (como proteínas, ácidos nucleicos o organismos enteros) que producen una respuesta que se puede utilizar para la detección de una sustancia química o un analito. Como ejemplo, la industria minera de carbón utilizó un biosensor durante gran parte del siglo 20 para detectar la presencia de gases tóxicos de la mina: el canario en la mina de carbón1. Los mineros observaron la respuesta del organismo biológico (muerte o angustia) a un analito químico (monóxido de carbono) con el fin de proteger a los trabajadores. En un ejemplo más moderno y sofisticado, las bacterias se pueden alterar utilizando técnicas de biología sintética para responder a la presencia de un determinado analito químico mediante la exposición de una respuesta específica, como la expresión de una proteína fluorescente.
La biología sintética es un término amplio que se refiere a la construcción de dispositivos biológicos y sistemas que no existen de forma natural, o el re-diseño de los sistemas biológicos existentes para un propósito específico2. La biología sintética se distingue de la ingeniería genética por una metodología estándar y la existencia de piezas estandarizadas (elementos genéticos de biología sintética estándar) que se pueden utilizar para sintetizar dispositivos y sistemas. Una parte se introduce en el genoma de un dispositivo, un organismo como una bacteria, para expresar un cierto rasgo que servirá como una indicación de la función. Por ejemplo, en muchos dispositivos sintéticos, la expresión de una proteína fluorescente se introduce en un organismo unicelado como una proteína reportera. Se pueden combinar varios dispositivos en un sistema. Los genomas de microorganismos como las bacterias son fáciles de manipular de esta manera. Se han notificado numerosos ejemplos de biosensores específicos de una amplia gama de analitos químicos en la bibliografía de la última década3,4.
En este trabajo, el sistema MicRoboCop se presenta como un ejemplo de un biosensor diseñado utilizando técnicas de biología sintética con nuevas aplicaciones en la química forense y ambiental. MicRoboCop es un sistema de tres dispositivos separados que, cuando se combinan, permitirán a Escherichia coli expresar proteína fluorescente roja (RFP) en presencia de residuos de disparos (GSR) que se han recogido de las manos o de la superficie de una persona. Cada uno de los tres dispositivos responde a un analito químico específico que se sabe que es un componente de GSR5. Los tres analitos a los que responde el sistema son I. 2, 4, 6-trinitrotolueno (TNT) y compuestos relacionados, II. plomo (en forma de iones de plomo), y III. Antimonio (también en forma de iones).
GSR consiste en muchas sustancias químicas diferentes, pero los tres generalmente utilizados para identificar un residuo como GSR son bario, plomo, y antimonio5. La prueba probatoria estándar para la identificación de GSR es utilizar microscopía electrónica de barrido (SEM) con fluorescencia de rayos X de dispersión de energía (EDX)5. SEM-EDX permite a los analistas identificar la morfología única y los componentes elementales de GSR. En la actualidad, hay pocas pruebas presuntivas binarias ampliamente utilizadas disponibles. Una prueba presuntiva recientemente publicada utiliza espectroscopía de movilidad iónica (IMS), que es un equipo especializado que podría no estar disponible en muchos laboratorios6. También hay algunas pruebas de color "spot" que se pueden utilizar, aunque se utilizan típicamente para la determinación de la distancia o para la identificación GSR en los agujeros de la bala y las heridas5. Adicionalmente, ha habido cierta atención limitada en la literatura a las pruebas electroquímicas para GSR que emplean el análisis voltamométrico, que tiene la ventaja de ser potencialmente portable en el campo, o voltametría de desmonte anódico, que es un extremadamente método sensible para los elementos metálicos7. Hay muy poca mención en la literatura de biosensores diseñados específicamente con el propósito de detectar GSR, aunque algunos biosensores para otras aplicaciones forenses han sido publicados8.
Los elementos biológicos para cada dispositivo en el sistema MicRoboCop, y la construcción del plásmido, se ilustran en la figura 1. La flecha curvada en la figura 1B representa la región promotora que se activa en presencia del analito, el óvalo es el sitio de Unión ribosomal que permite la traducción de la proteína reportera, la caja gris ETIQUETADA como RFP es el gen que expresa el rojo proteína fluorescente, y el octágono rojo es el sitio de terminación de la transcripción. Los tres dispositivos se utilizarán juntos como un sistema para detectar GSR. Cada dispositivo con un promotor específico (SbRFP, PbRFP y TNT-RFP) será incubado con la muestra que se está probando y se medirá la fluorescencia de RFP. La RFP solo se expresará si el analito químico adecuado está presente y activa la región promotora. Tres dispositivos que responden a algunas de las sustancias químicas presentes en GSR han sido diseñados y se presentan en este trabajo.
Los promotores utilizados en los tres dispositivos de microbocop son un promotor sensible al arsénico y antimonio, sbrfp9,10, un promotor sensible al plomo, pbrfp11,12 y un promotor sensible de TNT, TNT-RFP 13. debido a que una búsqueda en la literatura no reveló ningún promotor diseñado para responder a Barium, el promotor de TNT fue seleccionado en su lugar ya que este promotor es sensible a una serie de compuestos estructuralmente relacionados (en particular, 2, 4-dinitrotolueno y dinitrobenceno) que son conocidos por ser una parte de los compuestos orgánicos dejados atrás en GSR. Este promotor se ha utilizado con éxito para detectar específicamente cantidades minutas de TNT y 2, 4-dinitrotolueno (2, 4-DNT) en las minas terrestres enterradas13. Utilizando los tres dispositivos juntos como un sistema, una prueba positiva para GSR producirá fluorescencia en los tres dispositivos. Una señal de fluorescencia en sólo uno o dos dispositivos indicará otra fuente ambiental del analito (s) o en el caso del promotor de TNT, activación por un compuesto que no es un compuesto orgánico dejado atrás en GSR. Mediante el uso de los tres dispositivos juntos, se minimiza la posibilidad de resultados falsos positivos debido a las fuentes ambientales. La munición sin plomo, que está ganando popularidad, todavía representa sólo el 5% de las ventas de municiones en los Estados Unidos; por lo tanto, los resultados falsos negativos debido a la ausencia de plomo pueden ser una posibilidad, pero todavía hay utilidad en un sensor que utiliza plomo como marcador para GSR14. Además de esta aplicación forense específica, cada dispositivo se puede utilizar por separado con el fin de detectar contaminantes ambientales.
Los protocolos presentados incluyen las técnicas de biología sintética utilizadas para crear los dispositivos (bacterias del sensor) y las técnicas analíticas para comprobar la función de los dispositivos y analizar las señales de fluorescencia obtenidas. El protocolo también incluye la recolección de evidencia forense en forma de limpieza de manos para recoger GSR de las agujas de un sospechoso o hisopado para recoger GSR de una superficie. Los resultados del dispositivo del sensor de plomo se presentan como resultados de ejemplo, junto con una demostración de una prueba positiva para GSR utilizando una carcasa de cartucho gastado.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>1,3-dinitrobenzene, 97%</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>D194255-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2,4-dinitrotoluene, 97%</td>
			<td>Aldrich</td>
			<td>101397-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agar</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1423-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ampicillin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1760-5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Antimony, Reference Standard Solution (1000ppm &#177;1%/Certified)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SA450-100</td>
			<td>Standard in dilute HNO3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cut Smart Buffer</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>B7204S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Duplex Buffer</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td>11-01-03-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EcoRI-HF Restriction Enzyme</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>R3101S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol, HPLC grade, denatured</td>
			<td>Acros Organics</td>
			<td>AC611050040</td>
			<td>Solvents do not need to be HPLC grade, ACS or reagent grade will work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Eurofins Genomics SimpleSeq DNA Sequencing Kits</td>
			<td>Eurofins Genomics</td>
			<td>SimpleSeq Kit Standard</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forward primer for colony PCR</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>5&#8217;- GCCGCTTGAATTCGTCATATAT-3&#8217;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forward primer for DNA sequencing</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>5&#8217;- GTAAAACGACGGCCAGTG-3&#8217;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IBI Science High Speed Plasmid Mini-kit</td>
			<td>IBI Scientific</td>
			<td>IB47101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LB Broth, Miller</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1426-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lead, Reference Standard Solution (1000ppm &#177;1%/Certified)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>SL21-100</td>
			<td>Standard in dilute HNO3</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>LeadOff Disposable Cleaning and Decon Wipes</td>
			<td>Hygenall</td>
			<td>45NRCN</td>
			<td>Sold in canisters or individually wrapped, any alcohol based wipe will work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methanol, HPLC grade</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>A452-4</td>
			<td>Solvents do not need to be HPLC grade, ACS or reagent grade will work.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NEB 5-alpha Competent E. coli cells</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>C2987I</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NheI-HF Restriction Enzyme</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>R3131S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nuclease free water</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>B1500S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OneTaq 2X Master Mix with Standard Buffer</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>M0482S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Plasmids from the registry of standard biological parts used for synthetic biology</td>
			<td>Registry of Standard Biological Parts</td>
			<td></td>
			<td>http://parts.igem.org/Main_Page</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Promoter Sequences</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>Sb promoter: 5&#8217;-GCATGAATTCAGTCAT 
			ATATGTTTTTGACTTATCCGCTTCGAAGAGAG 
			AGACACTACCTGCAACAATCGCTAGCGCAT-3&#8217; 3&#8217;-CGTACTTAAGCTCACTATATACAAAAACT 
			GAATAGGCGAAGCTTCTCTCTCTGTGATGGAC 
			GTTGTTAGCGATCGCGTA-5&#8217; 
			Pb promoter: 5&#8217;-GCATGAATTCGTCTTG 
			ACTCTATAGTAACTAAGGGTGTATAATCGGCA 
			ACGCGAGCTAGCGCAT-3&#8217; 3&#8217;-CGTACTTAAGCAGAACTGAGATATCATTG 
			ATCTCCCACATCTTAGCCGTTGCGCTGCGATCGCGTA-5&#8217; 
			TNT promoter: 5&#8217;GCATTCTAGATCAATT 
			TATTTGAACAAGGCGGTCAATTCTCTTCGATT 
			TTATCTCTCGTAAAAAAACGTGATACTCATCA 
			CATCGACGAAACAACGTCACTTATACAAAAAT 
			CACCTGCGAGAGATTAATTGAATTCGCAT3&#8217; 3&#8217;CGTAAGATCTAGTTAAATAAACTTGTTCCG 
			CCAGTTAAGAGAAGCTAAAATAGAGAGCATTT 
			TTTTGCACTATGAGTAGTGTAGCTGCTTTGTT 
			GCAGTGAATATGTTTTTAGTGGACGCTCTCTA 
			ATTAACTTAAGCGTA5&#8217;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reverse primer for colony PCR</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>5&#8217;- GCCGCTTGAATTCGTCTAGACT- 3&#8217;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Reverse primer for DNA sequencing</td>
			<td>Integrated DNA Technologies</td>
			<td></td>
			<td>5&#8217;- GGAAACAGCTATGACCATG-3&#8217;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>T4 DNA Ligase</td>
			<td>New England BioLabs</td>
			<td>M0202S</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

preparation and application of a new bacterial biosensor for the presumptive detection of gunshot residue

MicRoboCop es un biosensor que ha sido diseñado para una aplicación única en la química forense. MicRoboCop es un sistema formado por tres dispositivos que, cuando se usan juntos, pueden indicar la presencia de residuos de disparos (GSR) produciendo una señal de fluorescencia en presencia de tres analitos clave (antimonio, plomo y componentes orgánicos de GSR). El protocolo describe la síntesis de los biosensores utilizando Escherichia coli (e. coli), y los métodos de química analítica utilizados para evaluar la selectividad y sensibilidad de los sensores. El funcionamiento del sistema se demuestra mediante el uso de GSR recogido desde el interior de una carcasa de cartucho gastado. Una vez preparados, los biosensores se pueden almacenar hasta que se necesiten y se pueden utilizar como prueba para estos analitos clave. Una respuesta positiva de los tres analitos proporciona una prueba positiva presuntiva para la GSR, mientras que cada dispositivo individual tiene aplicaciones para detectar los analitos en otras muestras (p. ej., un detector de contaminación por plomo en el agua potable). La principal limitación del sistema es el tiempo necesario para una señal positiva; trabajo futuro puede implicar el estudio de diferentes organismos para optimizar el tiempo de respuesta.

Los espectros de fluorescencia para la variante RFP utilizada en este trabajo se muestran en la figura 2. Estos datos provienen del dispositivo PbRFP, ya que responde al plomo y al dispositivo TNT-RFP, ya que responde a dos analitos, 2, 4-DNT y 1, 3-DNB. Esta figura muestra el espectro de un control negativo (sin analito añadido) y los espectros en dos niveles diferentes de analito añadidos. La señal de fluorescencia máxima para la variante de RFP utilizada se observ?...

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Preparation and Application of a New Bacterial Biosensor for the Presumptive Detection of Gunshot Residue

Un protocolo se presenta utilizando técnicas de biología sintética para sintetizar un conjunto de biosensores bacterianos para el análisis de residuos de disparos, y para probar el funcionamiento de los dispositivos para su uso previsto utilizando espectroscopía de fluorescencia.

Preparación y aplicación de un nuevo biosensor bacteriano para la detección presuntiva de residuos de Disparos

MicRoboCop is a biosensor that has been designed for a unique application in forensic chemistry. MicRoboCop is a system made up of three devices that, ...

Este protocolo describe la preparación y el análisis de un biosensor único que ha sido diseñado para detectar los componentes químicos de los residuos de disparos. El uso de biosensores para aplicaciones forenses es único. Representa una alternativa de bajo costo y fácil de usar a la instrumentación altamente especializada que se utiliza normalmente en laboratorios forenses.Los métodos de biología sintética descritos se pueden utilizar para cualquier sistema que utilice piezas de biología sintética estándar. El análisis químico descrito es aplicable a cualquier biosensor que exprese proteína fluorescente roja. Demostrando el procedimiento serán Andrea Soles y Elle Richardson, estudiantes de pregrado en la Universidad de Longwood.Para comenzar este procedimiento, añada diez microlitros del ADN plásmido J10060 previamente aislado a un tubo de microcentrífuga. Agregue ocho microlitros de agua y un microlitro de cada una de las enzimas EcoRI y NHEL premezcladas con un microlitro de tampón. Para el ADN promotor, agregue diez microlitros de secuencias de ADN promotor recocido a un tubo de microcentrífuga fresco.Agregue ocho microlitros de agua y un microlitro de cada una de las enzimas EcoRI y NHEL premezcladas con un microlitro de tampón. Con una pipeta ajustada a diez microlitros, pipetee suavemente las muestras hacia arriba y hacia abajo para mezclar. Incubar las muestras a 37 grados centígrados durante 30 minutos.Luego, calienta y activa las enzimas a 80 grados Celsius durante cinco minutos. Almacene el ADN digerido en un congelador hasta que esté listo para proceder. En primer lugar, utilice el plasmamido y el ADN promotor que se digierieron previamente para establecer la reacción en un tubo de microcetrifuje sobre hielo, como se describe en la tabla uno del protocolo de texto.Asegurándose de añadir el T4 DNA Ligase último. Pipetear hacia arriba y hacia abajo suavemente para mezclar la reacción, y centrifugar brevemente. Incubar a temperatura ambiente durante diez minutos.Luego, calienta y activa a 65 grados centígrados durante diez minutos. Realice la transformación tal como se describe en el protocolo de texto. En primer lugar, configure las mezclas de reacción para PCR como se describe en la tabla dos del protocolo de texto.Pipetee suavemente hacia arriba y hacia abajo para mezclar las reacciones. Usando una punta de pipeta amarilla, raspa una colonia de la E.coli transformada. Transfiera un golpe de este E.coli a una nueva placa de agar de lb-ampicilina que haya sido seccionada, y luego inserte la punta de la pipeta en el tubo PCR.Agitar la punta de la pipeta para mezclar el E. coli con la mezcla de PCR. Repita este proceso tres veces más para colonias adicionales. A continuación, cargue los tubos de PCR en una máquina PCR y comience a termociclismo como se describe en la tabla tres del protocolo de texto.Para comenzar, etiquete el número adecuado de tubos de cultivo estériles como se describe en la tabla cuatro del protocolo de texto. Añadir dos mililitros del caldo de cultivo preparado a cada tubo. Agregue la solución de material de anilito a los tubos como se describe en la tabla cuatro.A continuación, coloque las tapas de presión en los tubos de cultivo para que estén sueltas para permitir el flujo de aire en el tubo. Vórtice cada tubo de cultivo. Después de esto, coloque los tubos en una incubadora de temblores a 37 grados centígrados y a 220 RPM durante al menos 24 horas.En primer lugar, utilice una toallita a base de etanol diseñada para eliminar el plomo para limpiar todas las superficies de las manos, incluso entre los dedos. Guarde las toallitas en una bolsa sellable debidamente etiquetada hasta su análisis. Use una toallita a base de alcohol para limpiar las superficies grandes que se van a probar.Use un intercambio de algodón humedecido con etanol para limpiar las superficies pequeñas que se van a probar. Usando guantes limpios y usando tijeras que hayan sido limpiadas con alcohol, corte una sección que esté aproximadamente a un centímetro cuadrado del centro de la toallita. A continuación, coloque la pieza cortada de toallitas, o hisopo de algodón, directamente en un tubo de cultivo que contenga dos mililitros de las bacterias del sensor, y asegúrese de que esté completamente sumergido en el caldo.Prepare el espectrómetro para recoger la presentación de fluorescentes en la longitud de onda adecuada para la variante RFP, con una longitud de onda de excitación de 500 nanómetros. A continuación, utilice un mezclador de vórtice para agitar los tubos. Transfiera cuidadosamente cada sobrenadante a una cubeta de bajo volumen y recoja la intensidad de emisión.Con un mezclador de vórtices, agite los tubos. Transfiera 200 microlitros del caldo a un pozo en el plato del pozo. Registre qué muestras entraron en cada pozo de este plato.Configure el harineilómetro para recoger la intensidad de emisión en la longitud de onda adecuada para la variante RFP. Los espectros de fluorescencia para una variante RFP representativa muestran tanto el control negativo como los espectros en dos niveles diferentes de anilito añadido. La señal fluorescente máxima para la variante RFP utilizada en este trabajo se observa en 575 nanómetros.Se recopilan datos representativos para el mismo conjunto de soluciones, tanto del espectrómetro portátil como del fluorómetro. Hay una tendencia general de la fluorescencia aumentando a medida que aumenta la concentración de anilito. Vale la pena señalar que a altas concentraciones, más de 800 partes por mil millones para el sensor de plomo, la respuesta cae debido a la toxicidad del plomo a una concentración tan alta.El análisis de muestras de hisopo de etanol desde el interior de una carcasa de cartucho de calibre 40 gastado proporciona pruebas de los resultados principales. Los resultados positivos de cada una de las tres bacterias del sensor, indican una prueba positiva de residuos de disparos. Los biosensores preparados en este protocolo también se pueden utilizar individualmente para detectar contaminación en alimentos, agua o muestras ambientales.Esta técnica allana el camino para que los investigadores desarrollen biosensores utilizando técnicas de biología sintética estándar para una variedad de diferentes anilitos químicos. Se debe usar equipo de protección personal, y los analistas deben lavarse las manos y desinfectar las superficies después de manipular E.coli. Los desechos deben ser autoclavados, y cualquier residuo que contenga metales pesados debe tratarse en consecuencia.

Research

JoVE Journal

Chemistry

Preparation and Use of Samarium Diiodide (SmI2) in Organic Synthesis: The Mechanistic Role of HMPA and Ni(II) Salts in the Samarium Barbier Reaction

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Preparación y uso de samario diyoduro (SMI<sub&gt; 2</sub&gt;) En Síntesis Orgánica: La función mecánica de HMPA y sales de Ni (II) en la reacción de samario Barbier

Although initially considered an esoteric reagent, SmI2 has become a common tool for synthetic organic chemists. SmI2 is generated through the addition of ...

Investigación

Química

Synthesis of Hypervalent Iodonium Alkynyl Triflates for the Application of Generating Cyanocarbenes

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The procedures described in this article involve the synthesis and isolation of hypervalent iodonium alkynyl triflates (HIATs) and their subsequent ...

Isolation and Preparation of Bacterial Cell Walls for Compositional Analysis by Ultra Performance Liquid Chromatography

Aislamiento Y Preparación De Paredes Celulares Bacterianas Para El Análisis Compositiva Por Cromatografía Líquida De Ultra Rendimiento

The bacterial cell wall is critical for the determination of cell shape during growth and division, and maintains the mechanical integrity of cells in the ...

Preparation of Mica and Silicon Substrates for DNA Origami Analysis and Experimentation

Preparación de Mica y Silicon Sustratos para el Análisis de Origami ADN y Experimentación

The designed nature and controlled, one-pot synthesis of DNA origami provides exciting opportunities in many fields, particularly nanoelectronics. Many of ...

Protocol for the Synthesis of Ortho-trifluoromethoxylated Aniline Derivatives

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Protocolo para la Síntesis de<em&gt; Ortho</em&gt; derivados de anilina -trifluoromethoxylated

Molecules bearing trifluoromethoxy (OCF3) group often show desired pharmacological and biological properties. However, facile synthesis of ...

Synthesis of Protein Bioconjugates via Cysteine-maleimide Chemistry

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Síntesis de Proteínas bioconjugados<em&gt; vía</em&gt; Química cisteína-maleimida

The chemical linking or bioconjugation of proteins to fluorescent dyes, drugs, polymers and other proteins has a broad range of applications, such as the ...

Facile Synthesis of Worm-like Micelles by Visible Light Mediated Dispersion Polymerization Using Photoredox Catalyst

Síntesis Facile de micelas similares a gusanos de luz visible mediada por dispersión Polimerización con catalizador Photoredox

Presented herein is a protocol for the facile synthesis of worm-like micelles by visible light mediated dispersion polymerization. This approach begins ...

Preparation and Evaluation of 99mTc-labeled Tridentate Chelates for Pre-targeting Using Bioorthogonal Chemistry

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Preparación y Evaluación de<sup&gt; 99m</sup&gt; Tc-etiquetados tridentado Los quelatos de orientación previa Usando Bioorthogonal Química

Pre-targeting combined with bioorthogonal chemistry is emerging as an effective way to create new radiopharmaceuticals. Of the methods available, the ...