Name: high-resolution imaging of nuclear dynamics in live cells under uniaxial tensile strain
Uploaded: 2019-06-02T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about High-resolution Imaging of Nuclear Dynamics in Live Cells under Uniaxial Tensile Strain at JoVE.com

Все авторы благодарно признают финансовую поддержку от национального исследовательского фонда Сингапура через Сингапур-MIT Альянс научно-исследовательских и технологических (SMART) биосистем и Micromechanics (биосистема) междисциплинарной исследовательской группы. Авторы д-р Ягелска и д-р ван Влиет также с благодарностью признают финансирование и поддержку со стороны Фонда Сакс-Кавано. Авторы благодарят Уильяма Онг и д-ра Синг Йяна Чу из Наньянского технологического университета, Сингапур, за то, что они обеспечивают клетки-предшественники олигодендроцитов для некоторых экспериментов, описанных в этой работе, и Авторы благодарят доктора г. в. Шивашанкара от Институт механобиологии, Национальный университет Сингапура, Сингапур, для дискуссий о колебаниях ядерной зоны.

1. Проектирование однохорошо-полидиметилсилизовидной плесени для визуализации с высоким разрешением
Примечание: Прессформа для изготавливания плит полидиметилсилоксиана конструированы с следующими характеристиками для того чтобы включить воображение с объе...

<ol>
	<li>Bray, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+tension+produced+by+nerve+cells+in+tissue+culture.">Mechanical tension produced by nerve cells in tissue culture.</a> Journal of Cell Science. 410, 391-410 (1979).</li><li>Bray, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axonal+growth+in+response+to+experimentally+applied+mechanical+tension.">Axonal growth in response to experimentally applied mechanical tension.</a> Developmental Biology. 389, (1983).</li><li>Van Essen, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+tension-based+theory+of+morphogenesis+and+compact+wiring+in+the+central+nervous+system.">A tension-based theory of morphogenesis and compact wiring in the central nervous system.</a> Nature. , (1997).</li><li>Smith, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stretch+growth+of+integrated+axon+tracts:+Extremes+and+exploitations.">Stretch growth of integrated axon tracts: Extremes and exploitations.</a> Progress in Neurobiology. 89, 231-239 (2011).</li><li>Cullen, D. K., Simon, C. M., LaPlaca, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strain+rate-dependent+induction+of+reactive+astrogliosis+and+cell+death+in+three-dimensional+neuronal-astrocytic+co-cultures.">Strain rate-dependent induction of reactive astrogliosis and cell death in three-dimensional neuronal-astrocytic co-cultures.</a> Brain Research. , 103-115 (2011).</li><li>Fisher, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+correlates+of+axonal+swelling+in+chronic+multiple+sclerosis+brains.">Imaging correlates of axonal swelling in chronic multiple sclerosis brains.</a> Annals of Neurology. 2, 219-228 (2007).</li><li>Niki&#263;, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reversible+form+of+axon+damage+in+experimental+autoimmune+encephalomyelitis+and+multiple+sclerosis.">A reversible form of axon damage in experimental autoimmune encephalomyelitis and multiple sclerosis.</a> Nature Medicine. 17, 495-500 (2011).</li><li>Payne, S. C., Bartlett, C. A., Harvey, A. R., Dunlop, S. A., Fitzgerald, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+loss+during+chronic+secondary+degeneration+in+rat+optic+nerve.">Functional loss during chronic secondary degeneration in rat optic nerve.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 53, (2018).</li><li>Zeiger, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Static+mechanical+strain+induces+capillary+endothelial+cell+cycle+re-entry+and+sprouting.">Static mechanical strain induces capillary endothelial cell cycle re-entry and sprouting.</a> Physical Biology. 13, 1-16 (2017).</li><li>Jagielska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+promotes+oligodendrocyte+differentiation+by+global+changes+of+gene+expression.">Mechanical strain promotes oligodendrocyte differentiation by global changes of gene expression.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 11, 93 (2017).</li><li>Pajerowski, J. D., Dahl, K. N., Zhong, F. L., Sammak, P. J., Discher, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Physical+plasticity+of+the+nucleus+in+stem+cell+differentiation.">Physical plasticity of the nucleus in stem cell differentiation.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 1, 0 (2007).</li><li>Talwar, S., Kumar, A., Rao, M., Menon, G. I., Shivashankar, G. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlated+spatio-temporal+fluctuations+in+chromatin+compaction+states+characterize+stem+cells.">Correlated spatio-temporal fluctuations in chromatin compaction states characterize stem cells.</a> Biophysical Journal. 104, 553-564 (2013).</li><li>Makhija, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanical+strain+alters+cellular+and+nuclear+dynamics+at+early+stages+of+oligodendrocyte+differentiation.">Mechanical strain alters cellular and nuclear dynamics at early stages of oligodendrocyte differentiation.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 12, 59 (2018).</li></ol>

Устройство имеет ранее1 был разработан для нанесения внеклеточного напряжения растяжения на адепт клеток. Конструкция субслоя полидиметилсилксиана в этой работе была достаточна для биохимических анализов, а также с низкоразрешающей визуализацию растянутых клеток. В это...

Клетки и ткани в организме подвергаются воздействию различных механических сигналов, включая растяжение. Однако влияние этих сигналов на биологию нервных клеток еще не изучено экстенсивно и полностью понято. В центральной нервной системе, источники механического штамма включают рост развития1,2,3,4, физиологические процессы, такие как изгиб спинного мозга, крови и спинномозговой жидкости пульсация, и патологических состояний, таких как травма, аксон отек, глиальных рубцов, или рост опухоли5,6,7,8. Стоит исследовать, как растяжение растяжение влияет на дифференциацию олигодендроцитов и последующего миелелинизации аксонов, который является критическим процессом в центральной нервной системе позвоночных. Использование специально разработанных штамм устройства и эластомерные пластины MultiWell, предыдущие работы9,10 показали, что статический uniаксиальный штамм может увеличить олигодендроцитов дифференциации с помощью глобальных изменений в экспрессии генов 10. для получения дальнейшего понимания механизмов деформации механикообработки в этих клетках, предыдущий экспериментальный аппарат должен быть изменен, как описано здесь, чтобы обеспечить высокое разрешение флуоресцентной визуализации ядерной динамики в жизни клетки под напряжением. В частности, один-хорошо полидиметилсилоксиан плита разработана, и конфигурация изображений переработан, чтобы позволить покадровой визуализации живых клеток под напряжением с использованием 100X масло погружения объектива. Чтобы устранить негативные оптические эффекты полидиметилсилисансана в световой путь, клетки, отображаемого не через полидиметилсилопксана пластины, но в перевернутом положении, через крышку стекла покрытие клеточного отсека. С помощью этого нового дизайна изображений, сотни с высоким разрешением покадровой фильмы записываются, отдельных клеточных ядер в нетронутыми адепт клеток, где хроматина маркируются путем пометки гистон H2B для зеленого флуоресцентного белка. Эти фильмы демонстрируют, что растяжение деформации индуцирует изменения в структуре хроматина и динамики, которые согласуются с прогрессированием олигодендроцитов дифференциации.
Живая клеточная визуализация под применной нагрузкой является технически сложной задачей и требует разработки устройства, совместимого с системой микроскопа. Пользовательский дизайн описано здесь представляет недорогую альтернативу коммерческим решениям. Его размеры позволяют его установку на стадии микроскопа и живой визуализации ячейки при высоком пространственном разрешении во время прикладной деформации. Настройка изображений предназначена для облегчения живого изображения клеток с помощью 100X масло погружения объектив с высокой ясностью, через крышку стекла, а не через слой полидиметилсилоксиан пластины, которые в противном случае уменьшает качество изображения и является общим в большинстве установок визуализации под напряжением. Устройство, с установленной пластиной, содержащей ячейки, также может легко храниться в инкубаторе. Этот прибор конструирован для того чтобы приложить uniосевое напряжение к субстратам которые облегчают приверженец культуру клетки и поддерживает стабилизированный и равномерный напряжение над множественными днями. Описанная здесь настройка может быть использована для визуализации различных типов клеток в высоком разрешении под напряжением, что делает ее применимой к механопреобразованым исследованиям во многих отраслях механикобиологии клеток.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Primary cells</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>Primary Oligodendrocyte Progenitor Cells isolated from Neonatal Rats 
			were provided by Dr. S. Y. Chew&#39;s lab at Nanyang Technological University</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Media</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DMEM high&#160; glucose</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11996-065-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pen/Strep</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070-063-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FGF</td>
			<td>Prospec</td>
			<td>CYT-608-50ug</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDGF</td>
			<td>Prospec</td>
			<td>CYT-776-10ug</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Media Stock components</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BSA</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A9418-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Progesterone</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P8783-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5780-5G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Selenite</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>S5261-10G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tri-iodothyronine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T6397-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thyroxine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T1775-100MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Holo-Transferrin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T0665-500MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I9278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mold and PDMS plate</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PDMS - Dow Corning Sylgard 184</td>
			<td>Ellsworth</td>
			<td>184 SIL ELAST KIT 0.5KG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mold - Liquid Plastic</td>
			<td>Smooth-On</td>
			<td>Smooth Cast 310 - Trail Size</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Substrate Coatings</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>poly-D-lysine</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P6407-5MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fibronectin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>F1141-2MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histone staining</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CellLigt H2B-GFP BacMam</td>
			<td>Molecular Probes</td>
			<td>C10594</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surface functionalization</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>APTES</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>A3648-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BS3</td>
			<td>Covachem</td>
			<td>13306-100mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES buffer pH 8.0</td>
			<td>Alfa Aesar</td>
			<td>J63578-AK-250ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cell detachment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Accutase</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A1110501-100ml</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

high-resolution imaging of nuclear dynamics in live cells under uniaxial tensile strain

Внеклеточного механического штамма, как известно, вызывают фенотипические реакции клеток и имеет физиологическую значимость в нескольких системах ткани. Чтобы захватить эффект прикладной внеклеточного растяжения деформации на популяции клеток в пробирке с помощью биохимических анализов, устройство ранее был разработан, который может быть изготовлен просто и достаточно мал, чтобы поместиться внутри ткани инкубаторы культуры, а также на вершине стадии микроскопа. Однако Предыдущая конструкция субслоя полидиметилсилксисана не позволила обеспечить субсотовую визуализацию высокого разрешения с помощью целей нефтяного погружения. Эта работа описывает переработанную геометрию полидиметилсилослоя субстрата и настроенную настройку изображений, которая вместе может облегчить субсотовую визуализацию с высоким разрешением живых клеток в то время как под примененное напряжение. Этот субстратом может быть использован с тем же самым, ранее спроектированный прибор и, следовательно, имеет те же преимущества, что и перечисленные выше, в дополнение к позволяя высокого разрешения оптических изображений. Конструкция субслоя полидиметилсилксиана может быть улучшена путем включения сетки, которая облегчит отслеживание той же ячейки до и после применения штамма. Репрезентативные результаты демонстрируют с высоким разрешением промежуток времени изображения с флуоресцентно маркированные ядра в напряженных клетках, захваченных с помощью метода, описанного здесь. Эти данные ядерной динамики дают представление о механизме, с помощью которого прикладная деформация растяжения способствует дифференциации клеток прародителя олигодендроцитов.

Недавняя работа, направленная на исследование влияния растяжения на Олигодендроциты10 , показала, что 10%-ое напряжение одноосевого натяжения способствует дифференциации клеток-прародителя олигодендроцитов в результате глобальных изменений экспрессии г...

Watch this Scientific Journal Video about High-resolution Imaging of Nuclear Dynamics in Live Cells under Uniaxial Tensile Strain at JoVE.com

High-resolution Imaging of Nuclear Dynamics in Live Cells under Uniaxial Tensile Strain

Сканирование с высоким разрешением ядерной динамики в живых клетках под напряжением Uniаксиального натяжения

Использование ранее разработанных устройств для применения механических деформаций для приверженец клеток, этот документ описывает переработанную геометрию субстрата и индивидуальные аппарата для высокого разрешения одноклеточных изображений напряженных клеток с целью 100 x погружения масла.

Extracellular mechanical strain is known to elicit cell phenotypic responses and has physiological relevance in several tissue systems. To capture the ...

Ранее мы разработали устройство для применения механического напряжения к клеткам-адептам. В текущей работе мы переработали геометрию субстрата и настроили настройку для визуализации этих клеток штамма с высоким разрешением. Основным преимуществом этой клеточной системы является то, что она обеспечивает субклеточную визуализацию с высоким разрешением в 100x клеток деформации.Демонстрацией изготовления субстрата будет Вики, научный сотрудник из моей лаборатории. Начните с разработки одной хорошо полидиметилсилоксана плесень, следуя вместе в сопроводительном текстовом протоколе. Затем смешайте 20 частей полидиметилсилоксана базы с одной частью лечебного средства в одноразовой чашке.После смешивания, место polydimethylsiloxane смесь в вакууме де-газсер на 0,8 бар в течение 30 минут, чтобы удалить пузырьки из смеси. Затем, залить полинемиметилсилоксан смесь в форму и блюдо. Удалите любые дополнительные пузырьки на данном этапе, де-газирования его снова на 0,8 бар вакуума в течение 30 минут.Когда де-газирование завершено, испечь образцы при температуре 80 градусов по Цельсию на выравнивающий стол в течение двух часов. Затем аккуратно удалите образцы из духовки и дайте им остыть до комнатной температуры. Вырезать края с лезвием и аккуратно очистить вылечить полидиметилсилоксан.На 150-миллиметровом диаметре полидиметилсилоксана нарисуйте двухсантиметровую сетку маркером. В пределах каждого квадрата, сделать один сантиметр на один сантиметр квадрата, оставляя маржу 0,5 сантиметра со всех сторон. Используйте лезвие, чтобы тщательно разрезать вдоль линий и получить квадратные отсеки.Затем очистите образцы, инкубируя их в 100%ацетон в течение четырех часов, 100% этанола в течение еще четырех часов, а затем в автоклавной воде в течение четырех часов. Поместите очищенные образцы на парафиновую пленку в пластиковую тарелку диаметром 150 миллиметров и высушите образец в духовке по Цельсию на 80 градусов в течение четырех часов. После завершения, печать блюда с парафиновой пленкой и хранить их в холодной комнате до дальнейшего использования.Подготовь клетки-предшественники и приостановите их в среде распространения. Семя этих клеток при плотности 35000 клеток на квадратный сантиметр на PDL покрытием пластиковых поверхностей. Отрегулируйте объем среды пролиферации до трех миллилитров на десять сантиметров в квадрате площади поверхности.Более низкий объем средств массовой информации может привести к слипанию клеток, возникающих из поверхностных сил напряжения, в то время как больший объем средств массовой информации в блюдах может привести к утечке средств массовой информации. На третий день после посева, урожай клеток и считать их с помощью гемоцитометра. Затем семя 35 000 клеток на полидиметилсилоксановую пластину с 700 микролитров среды пролиферации.Затем добавьте плазминическую конструкцию для маркировки комплексов H2B-гистона клетки зеленым флуоресцентным белком, следуя инструкциям производителя. Через 24 часа, смонтировать образцы полидиметилсилоксана с клетками, которые будут растягиваться на одноосном устройстве деформации. Затем измените среду во всех образцах на среду дифференциации.Измерьте разтянутую длину клеточного отсека и поверните винт микрометра этапа для того чтобы увеличить длину отсека клетки пожеланным количеством напряжения. Оставьте растянутые и ненатянутые образцы поликиметилсилоксана в инкубаторе при 37 градусах по Цельсию до визуализации. Подготовь микроскоп инкубатор для живой визуализации, установив температуру инкубатора до 37 градусов по Цельсию.Далее, довести 100x цель погружения нефти в центральное положение, так как объективный поворот не будет доступен позже. Оказавшись в положении, отвинтить цель и винт его обратно вместе с объективным кольцом, так что цель может быть ближе к клеткам. Затем добавьте каплю масла к цели.Используя отпечатанный на заказ держатель, покрывайте держатель вакуумной смазкой на периферии окна и поместите стеклянную крышку нулевой толщины на верхнюю поверхность держателя. Лента пластиковое окно на сцену микроскопа. Затем завинчивай стадию перевода на сцену микроскопа и перемести ее в топ-самое положение.Удалите 500 микролитров среды из растянутой полидиметилсилоксана пластины, которые будут изображены, и добавить эту среду на стеклянную крышку в белом пластиковом окне. Затем используйте пару стерильных пинцетов, чтобы тщательно отделить квадратный отсек от полидиметилсилоксана пластины. Держите устройство деформации в вертикальном положении, так что клетки сталкиваются вверх, над белым пластиковым окном и тщательно инвертировать устройство деформации, с тем чтобы любой дополнительный средний падение непосредственно в середине стеклянной крышки с клетками лицом вниз.Поместите нижнюю часть устройства деформации на сцену перевода, используя двустороннюю ленту, чтобы удерживать ее на месте. Глядя через окуляр под ярким полем, очень медленно принести напряжение устройства вниз и переместить цель до сосредоточиться на клетках. Выполните этот фокусный шаг медленно, чередуясь между снижением стадии перевода и повышением цели.Если стадия перевода й снижается слишком сильно, клетки могут сжиматься и, следовательно, умирать. Если мы поднимем цель слишком высоко, это может сломать стеклянную крышку и привести к утечке среды. Сканирование полидиметилсилоксана пластины в X и Y направлениях, чтобы найти клетку, которая имеет флуоресцентное ядро, используя эпифлоресценцию на 488 нанометров возбуждения.Также убедитесь, что клетка имеет соответствующую морфологию при взгляде на образец под ярким полем. Запись широкой поля или открытой скважины изображения ядра с 488 нанометров волнового возбуждения и клетки с ярким полем возбуждения на 30-секундных интервалов на кадр в общей продолжительности не менее 30 минут. Переработанная геометрия поликометилсилоксанового субстрата и настройка изображения, показанная на этом видео, минимизируют расстояние между клетками и целью.Это позволяет вовремя изображения флуоресцентно помеченных ядер клеток с использованием 100x цели погружения масла. Чтобы измерить ядерные колебания, сначала замойьте ядерную область по сравнению со временем. Затем обвядйте данные с помощью полиномиального третьего порядка.И, наконец, участок остаточных колебаний и рассчитать стандартное отклонение остаточных колебаний. Ядерные колебания клеток-предшественников олигодендроцитов, после химической индукции дифференциации с и без 10%-ного штамма, показывают, что только при химической индукции амплитуда ядерных колебаний показала значительное снижение на 48 часов, но не в 24 часа. С другой стороны, химическая индукция вместе с 10%-ным напряжением показала значительное снижение в течение 24 часов, которое оставалось неизменным без дальнейшего сокращения на 48 часов.Самое главное помнить, что рабочая дистанция выбранной цели должна быть равна или больше глубины клеточного отсека плюс толщина крышки. Субстрат может быть переработан, чтобы включить сетку, которая облегчила бы визуализацию одной и той же ячейки до и после применения штамма, так как до и после типа набора данных уменьшает шум, поступающий от экспериментальной ошибки. Используя эту установку изображений, многие субклеточные явления в живых клетках приверженцев, такие как локализация белка или динамика клеточных компонентов, могут быть изображены в течение нескольких секунд после применения механического напряжения.

Research

JoVE Journal

Bioengineering

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

High-resolution Fiber-optic Microendoscopy for in situ Cellular Imaging

Высокое разрешение Волоконно-оптические Microendoscopy для На месте Сотовые изображений

Many biological and clinical studies require the longitudinal study and analysis of morphology and function with cellular level resolution.  ...

High Resolution 3D Imaging of Ex-Vivo Biological Samples by Micro CT

High Resolution 3D Imaging of Ex-Vivo Biological Samples by Micro CT

Высокое разрешение изображения в 3D Экс-Vivo Биологические образцы от Micro КТ

Non-destructive volume visualization can be achieved only by tomographic techniques, of which the most efficient is the x-ray micro computerized ...

Live-cell Imaging of Migrating Cells Expressing Fluorescently-tagged Proteins in a Three-dimensional Matrix

Live-ячейки изображения по переносу клеток, экспрессирующих флуоресцентно с метками Белки в трехмерной матрице

Traditionally, cell migration has been studied on two-dimensional, stiff plastic surfaces. However, during important biological processes such as wound ...

Continuous High-resolution Microscopic Observation of Replicative Aging in Budding Yeast

Непрерывная высокого разрешения Микроскопическое исследование репликативного старения у почкующихся дрожжей

We demonstrate the use of a simple microfluidic setup, in which single budding yeast cells can be tracked throughout their entire lifespan. The ...

Magnetically-Assisted Remote Controlled Microcatheter Tip Deflection under Magnetic Resonance Imaging

Магнитно-Assisted дистанционным управлением отклонения Совет микрокатетер при магнитно-резонансной томографии

X-ray fluoroscopy-guided  endovascular procedures have several significant limitations, including  difficult catheter navigation and use of ionizing ...

High-resolution Spatiotemporal Analysis of Receptor Dynamics by Single-molecule Fluorescence Microscopy

Высокое разрешение Пространственно-временная Анализ рецептора Dynamics по одиночных молекул флуоресцентной микроскопии

Single-molecule microscopy is emerging as a powerful approach to analyze the behavior of signaling molecules, in particular concerning those aspect (e.g., ...

From Fast Fluorescence Imaging to Molecular Diffusion Law on Live Cell Membranes in a Commercial Microscope

От быстрого флуоресценции визуализации к молекулярной диффузии Закона о живых клеточных мембран в торговом микроскоп

It has become increasingly evident that the spatial distribution and the motion of membrane components like lipids and proteins are key factors in the ...

Preparation of Mica Supported Lipid Bilayers for High Resolution Optical Microscopy Imaging

Подготовка Mica Поддерживаемые липидного бислоя за большой размер оптической микроскопии изображений

Supported lipid bilayers (SLBs) are widely used as a model for studying membrane properties (phase separation, clustering, dynamics) and its interaction ...

Live Cell Imaging during Mechanical Stretch

Живых изображений сотовый процессе механической Stretch

There is currently a significant interest in understanding how cells and tissues respond to mechanical stimuli, but current approaches are limited in ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Первоначальная оценка антител конъюгаты изменения с пептидами вирусный производные для повышения сотовой накопления и ориентации опухоли

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...