Name: application of consistent massage-like perturbations on mouse calves and monitoring the resulting intramuscular pressure changes
Uploaded: 2019-09-20T13:00:00
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Agradecemos a K. Nakanishi, K. Hamamoto, N. Kume y K. Tsurumi por su apoyo constante durante todo el proyecto. Este trabajo fue apoyado en parte por el Fondo intramuros de investigación del Ministerio de Salud, Trabajo y Bienestar de Los Estados Xacones; Subvenciones en Ayuda para la Investigación Científica de la Sociedad Japonesa para la Promoción de la Ciencia; Programa apoyado por MEXT para la Fundación de Investigación Estratégica en Universidades Privadas, 2015-2019 del Ministerio japonés de Educación, Cultura, Deportes, Ciencia y Tecnología (S1511017).

Todos los experimentos con animales se llevaron a cabo bajo la aprobación del Comité Institucional de Cuidado y Uso de Animales del Centro Nacional de Rehabilitación para Personas con Discapacidad.
1. Inmovilización de las extremidades posteriores bilaterales del ratón
NOTA: Los ratones machoC57BL/6 se utilizaron para experimentos a la edad de 11 - 12 semanas después de la aclimatación durante al menos 7 días.
<ol><li>Anestesiar adecuadamente un ratón con...

<ol>
	<li>Furlan, A. D., Imamura, M., Dryden, T., Irvin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massage+for+low+back+pain:+an+updated+systematic+review+within+the+framework+of+the+Cochrane+Back+Review+Group.">Massage for low back pain: an updated systematic review within the framework of the Cochrane Back Review Group.</a> Spine. 34 (16), 1669-1684 (2009).</li><li>Robertson, A., Watt, J. M., Galloway, S. D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+leg+massage+on+recovery+from+high+intensity+cycling+exercise.">Effects of leg massage on recovery from high intensity cycling exercise.</a> British Journal of Sports Medicine. 38 (2), 173-176 (2004).</li><li>Waters-Banker, C., Butterfield, T. A., Dupont-Versteegden, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunomodulatory+effects+of+massage+on+nonperturbed+skeletal+muscle+in+rats.">Immunomodulatory effects of massage on nonperturbed skeletal muscle in rats.</a> Journal of Applied Physiology. 116 (2), 164-175 (2014).</li><li>Haas, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massage+timing+affects+postexercise+muscle+recovery+and+inflammation+in+a+rabbit+model.">Massage timing affects postexercise muscle recovery and inflammation in a rabbit model.</a> Medicine &amp; Science in Sports &amp; Exercise. 45 (6), 1105-1112 (2013).</li><li>Crane, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Massage+therapy+attenuates+inflammatory+signaling+after+exercise-induced+muscle+damage.">Massage therapy attenuates inflammatory signaling after exercise-induced muscle damage.</a> Science Translational Medicine. 4 (119), 119ra113 (2012).</li><li>Bove, G. M., Harris, M. Y., Zhao, H., Barbe, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Manual+therapy+as+an+effective+treatment+for+fibrosis+in+a+rat+model+of+upper+extremity+overuse+injury.">Manual therapy as an effective treatment for fibrosis in a rat model of upper extremity overuse injury.</a> Journal of the Neurological Sciences. 361, 168-180 (2016).</li><li>Andrzejewski, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+skeletal+muscle+expression+of+VEGF+induced+by+massage+and+exercise.">Increased skeletal muscle expression of VEGF induced by massage and exercise.</a> Folia Histochemica et Cytobiologica. 53 (2), 145-151 (2015).</li><li>Mantovani Junior, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+massage+as+a+recuperative+technique+on+autonomic+modulation+of+heart+rate+and+cardiorespiratory+parameters:+a+study+protocol+for+a+randomized+clinical+trial.">Effects of massage as a recuperative technique on autonomic modulation of heart rate and cardiorespiratory parameters: a study protocol for a randomized clinical trial.</a> Trials. 19 (1), 459 (2018).</li><li>Zeng, H., Butterfield, S., Agarwal, F., Haq, T., Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+engineering+approach+for+quantitative+analysis+of+the+lengthwise+strokes+in+massage+therapies.">An engineering approach for quantitative analysis of the lengthwise strokes in massage therapies.</a> Journal of Medical Devices. 2 (4), (2008).</li><li>Wang, Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mechatronic+system+for+quantitative+application+and+assessment+of+massage-like+actions+in+small+animals.">A mechatronic system for quantitative application and assessment of massage-like actions in small animals.</a> Annals of Biomedical Engineering. 42 (1), 36-49 (2014).</li><li>Saitou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+cyclical+compression+modulates+macrophage+function+in+situ+and+alleviates+immobilization-induced+muscle+atrophy.">Local cyclical compression modulates macrophage function in situ and alleviates immobilization-induced muscle atrophy.</a> Clinical Science. 132 (19), 2147-2161 (2018).</li><li>Onda, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+New+mouse+model+of+skeletal+muscle+atrophy+using+spiral+wire+immobilization.">A New mouse model of skeletal muscle atrophy using spiral wire immobilization.</a> Muscle Nerve. 54 (4), 788-791 (2016).</li><li>Luster, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines--chemotactic+cytokines+that+mediate+inflammation.">Chemokines--chemotactic cytokines that mediate inflammation.</a> The New England Journal of Medicine. 338, 436-445 (1998).</li><li>Reid, M. B., Li, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+necrosis+factor-&#945;+and+muscle+wasting:+a+cellular+perspective.">Tumor necrosis factor-&#945; and muscle wasting: a cellular perspective.</a> Respiratory Research. 2 (5), 269-272 (2001).</li><li>Baumann, J. U., Sutherland, M. D., Hangg, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intramuscular+pressure+during+walking:+An+experimental+study+using+the+wick+catheter+technique.">Intramuscular pressure during walking: An experimental study using the wick catheter technique.</a> Clinical Orthopaedics Related Research. 145, 292-299 (1979).</li><li>Lee, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+physical+inactivity+on+major+non-communicable+diseases+worldwide:+an+analysis+of+burden+of+disease+and+life+expectancy.">Effect of physical inactivity on major non-communicable diseases worldwide: an analysis of burden of disease and life expectancy.</a> Lancet. 380, 219-229 (2012).</li></ol>

Hemos descrito un método para aplicar un estímulo mecánico similar al masaje, que tiene efectos antiinflamatorios. Nuestro sistema tiene ventajas de seguimiento incluso en comparación con las reportadas anteriormente. En primer lugar, estudios anteriores no definieron cuantitativamente las fuerzas mecánicas aplicadas2 o definieron sus magnitudes en función de la medición en la superficie corporal, pero no dentro de los tejidos10. Por el contrario, medimos la presión...

Masaje es generalmente reconocido para ser beneficioso para el alivio del dolor y la mejora del rendimiento físico entre los atletas competitivos y no atletas por igual1,2. De hecho, estudios previos han demostrado que el masaje suprime la inflamación local3 y provoca la recuperación del daño muscular post-ejercicio4,5. Los mecanismos moleculares subyacentes a los efectos beneficiosos del masaje siguen siendo en gran medida desconocidos.
Una de las dificultades con la investigación mecanicista sobre el masaje se refiere a la reproducibilidad de las técnicas experimentales mediante las cuales se prueban intervenciones similares a los masajes. En estudios anteriores, los procedimientos experimentales que imitan el masaje implican principalmente la aplicación de intervenciones físicas utilizando las partes del cuerpo de los practicantes, como palmas y dedos6,7,8. Esto hace que sea difícil reproducir con precisión su magnitud, frecuencia, duración y modo.
Muchos dispositivos han sido desarrollados para aplicar cargas mecánicas definidas a los tejidos objetivo. Por ejemplo, Zeng y otros han desarrollado un sistema neumático para la carga mecánica longitudinal a las patas traseras de las ratas9 y Wang et al. han desarrollado un dispositivo mecatrónico que puede aplicar cargas mecánicas similares a un masaje a las extremidades posteriores de ratas y conejos con control de retroalimentación en tiempo real10. En comparación con ellos, nuestro sistema de compresión cíclica local (LCC) es mucho más simple, exigiendo mucho menos costo para la construcción. Sin embargo, podemos reproducir los cambios de presión intramuscular que se generan durante la contracción muscular leve. Usando este dispositivo, hemos demostrado con éxito que las intervenciones mecánicas similares al masaje modulan la dinámica local del fluido intersticial y alivian la atrofia muscular inducida por la inmovilización11.
Aquí, describimos los detalles de nuestro dispositivo y el protocolo, que pueden ayudar a explorar los mecanismos moleculares detrás de los efectos positivos de los ejercicios y masajes. Los esquemas del protocolo se presentan como Figura Suplementaria 1.

<table>
<tbody>
<tr>
<td>Aluminum wire</td>
<td>DAISO JAPAN</td>
<td>B028</td>
<td>An aluminum wire is used to avoid escaping restriction by the wire</td>
</tr>
<tr>
<td>Blood pressure telemeter</td>
<td>Millar</td>
<td>SPR-671</td>
<td>A blood pressure telemeter is used to mesure intramuscular pressure.</td>
</tr>
<tr>
<td>DAPI</td>
<td>Thermo Fisher Scientific</td>
<td>D1306</td>
<td>DAPI is a fluorescent probe which is commonly used to stain DNA for fluorescent microscopy.</td>
</tr>
<tr>
<td>Goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 (Dilution ratio, 1:500)</td>
<td>Invitrogen </td>
<td>A11034</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>Goat anti-rat Alexa Fluor 568 (Dilution ratio, 1:500))</td>
<td>Invitrogen </td>
<td>A11077</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>ImageJ</td>
<td>NIH</td>
<td>N/A</td>
<td>Analysis software for image</td>
</tr>
<tr>
<td>LabChart8</td>
<td>ADInstrumens</td>
<td>&nbsp;</td>
<td>Analysis software for acquiring biological signals.</td>
</tr>
<tr>
<td>Prolong gold</td>
<td>Thermo Fisher Scientific</td>
<td>P36930</td>
<td>Prolong gold is for mounting stained samples.</td>
</tr>
<tr>
<td>Protein Block Serum-Free</td>
<td>Dako</td>
<td>X090930-2</td>
<td>For blocking non-specific background staining in immunohistochemical procedures.</td>
</tr>
<tr>
<td>Rat monoclonal anti-laminin-2 antibody (Dilution ratio, 1:1000)</td>
<td>Sigma Aldrich</td>
<td>L0663</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>Rat monoclonal anti-F4/80 antibody (Dilution ratio, 1:500)</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab6640</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit polyclonal anti-MCP-1 antibody (Dilution ratio, 1:1000)</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab25124</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>Rabbit polyclonal anti-TNF-&alpha; antibody (Dilution ratio, 1:1000)</td>
<td>Abcam</td>
<td>ab66579</td>
<td>Antibody for immunohistochemical staining.</td>
</tr>
<tr>
<td>Surgical tape</td>
<td>3M Japan</td>
<td>1530EP-0</td>
<td>Surgical tape is used to restrict joint movement.</td>
</tr>
</tbody>
</table>

application of consistent massage-like perturbations on mouse calves and monitoring the resulting intramuscular pressure changes

El masaje es generalmente reconocido para ser beneficioso para aliviar el dolor y la inflamación. Aunque estudios anteriores han reportado efectos antiinflamatorios del masaje en los músculos esqueléticos, los mecanismos moleculares detrás son mal entendidos. Recientemente hemos desarrollado un dispositivo simple para aplicar compresión cíclica local (LCC), que puede generar ondas de presión intramusculares con diferentes amplitudes. Usando este dispositivo, hemos demostrado que LCC modula las respuestas inflamatorias de los macrófagos in situ y alivia la atrofia muscular inducida por inmovilización. Aquí, describimos los protocolos para la optimización y aplicación de LCC como una intervención similar a un masaje contra la inflamación inducida por la inmovilización y la atrofia de los músculos esqueléticos de las extremidades posteriores del ratón. El protocolo que hemos desarrollado puede ser útil para investigar el mecanismo subyacente a los efectos beneficiosos del ejercicio físico y el masaje. Nuestro sistema experimental proporciona un prototipo del enfoque analítico para dilucidar la regulación mecánica de la homeostasis muscular, aunque es necesario seguir desarrollando para estudios más exhaustivos.

En consonancia con nuestras observaciones anteriores12, la CSA de las miofibras gastercnemius se redujo significativamente por la inmovilización de las extremidades posteriores(Figura 2A,B). Además, nuestro análisis de tinción de inmunofluorescencia reveló que las células que expresan MCP-1 y TNF-o, que desempeñan un papel clave en la regulación de los procesos inflamatorios13,14, aume...

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Application of Consistent Massage-Like Perturbations on Mouse Calves and Monitoring the Resulting Intramuscular Pressure Changes

Aquí describimos los protocolos para aplicar cargas mecánicas definidas a los terneros de ratón y para monitorear los cambios de presión intramusculares concomitantes. Los sistemas experimentales que hemos desarrollado pueden ser útiles para investigar el mecanismo detrás de los efectos beneficiosos del ejercicio físico y el masaje.

Aplicación de Perturbaciones Consistentes Similares al Masaje en Los terneros de ratón y Monitoreo de los Cambios de Presión Intramuscular Resultantes

Massage is generally recognized to be beneficial for relieving pain and inflammation. Although previous studies have reported anti-inflammatory effects of ...

Nuestro protocolo puede ser útil en los sistemas y mecanismos. Y la información correcta muestra el efecto del estrés físico y el masaje. Nuestro sistema local de finalización cíclica es mucho más simple.Los métodos convencionales no son necesarios para la inserción local. Aplicar cinta quirúrgica a las extremidades traseras bilaterales en la posición supina con las articulaciones de la rodilla extendidas y las articulaciones del tobillo plantar flexionada. Coloque un alambre de aluminio en el tronco a nivel de la columna vertebral L4-5, y enrolle el alambre en una configuración espiral alrededor de las extremidades posteriores con espacios de cinco milímetros entre cada giro de la espiral.Para minimizar la posibilidad de escapar del cableado, ajuste manualmente la configuración del cable para inmovilizar las articulaciones de la cadera en una posición de 90 grados de abducción. A continuación, devuelva el ratón a su jaula de casa con monitoreo hasta la recuperación completa. Para medir la presión muscular gastrocnemius intramuscular coloque el ratón anestesiado en la posición propensa y afeite, depilar y semi-esterilizar la piel de la pantorrilla posterior.Use un bisturí para hacer una incisión de dos milímetros en la piel desinfectada. E inserte una aguja de indeslado de calibre 20 en el músculo gastrocnemius en un ángulo de 150 a 170 grados con respecto a la superficie de la piel. A continuación, utilizando la vaina de plástico de la aguja como guía, coloque un sensor de telemetro de presión arterial en el vientre medio del músculo gastrocnemius.Encierra la piel con una sutura de nylon 4-O. A continuación, utilice varios pesos unitarios cilíndricos diferentes para aplicar compresión cilíndrica local al músculo de la pantorrilla durante un minuto. Y monitorear la presión intramuscular usando el software apropiado para el análisis de la señal biológica.Para el tratamiento de compresión cíclico local desenganchen el ratón anestesiado del cableado de las extremidades posteriores. Y coloque al animal en la posición propensa. Ajuste las extremidades posteriores de modo que las articulaciones de la rodilla se extiendan y las articulaciones del tobillo se flexionan con las pantorrillas hacia arriba.Y mueva verticalmente una unidad de peso cilíndrico, cubierta con una almohadilla acolchada, sobre el músculo de la pantorrilla a un hercio durante 30 minutos por día durante siete días. Después de cada episodio diario de compresión, vuelva a cablear las extremidades traseras del ratón antes de devolver al animal a su jaula de origen. Al final del experimento depilar la superficie posterior de la pantorrilla y hacer una incisión cutánea para permitir la separación de los músculos gastrocnemius del hueso tibiofibular.Congele rápidamente el tejido muscular cosechado en una solución compuesta de temperatura de corte óptima. Y usa un criostato para obtener secciones de los músculos gastrocnemius en toboganes de vidrio. Para el etiquetado inmunohistoquímico descongelar y deshidratar las secciones por secado al aire a temperatura ambiente antes de usar una pluma hidrofóbica para dibujar un anillo alrededor de las secciones de tejido en cada diapositiva.A continuación, coloque los portaobjetos en la cámara de humedad. Y añadir 100 microlitros de búfer de bloqueo a cada lado. Después de 30 minutos a temperatura ambiente enjuague los portaobjetos con dos lavados de 5 minutos en PBS-T, antes de etiquetar las secciones con 100 microlitros del anticuerpo primario de interés durante la noche a temperatura ambiente.A la mañana siguiente, lave los portaobjetos 3 veces en PBS-T durante 5 minutos por lavado. Y etiquete las muestras con un anticuerpo secundario adecuado durante 1 hora a temperatura ambiente, protegido de la luz. Al final de la incubación, lave los portaobjetos 3 veces en PBS-T fresco como se ha demostrado.Y mancha los núcleos con 100 microlitros de DAPI durante tres minutos a temperatura ambiente en la oscuridad. Luego, lave el portaobjetos tres veces más. Y monte las muestras con un medio de montaje compatible y los resbalones de la cubierta.Para el análisis histomorfométrico, coloque las diapositivas en el escenario de un microscopio de fluorescencia y vea las muestras bajo una subjetiva de 20 X en los filtros apropiados. A continuación, en el software de análisis de imágenes, mida el área de sección transversal de cada miofibra y cuente el número de celdas que expresan los marcadores experimentales de interés. El área transversal de la miofibra gastrocnemius se reduce significativamente por la inmovilización de las extremidades posteriores.Además, el análisis de tinción inmunofluorescente revela que las células que expresan MCP-1 y TNF-alfa aumentan significativamente en los tejidos musculares gastrocnemius de las extremidades traseras inmovilizadas. Juntos, con el aumento de las células teñidas positivamente con F4/80, la inmovilización de las extremidades traseras parece instigar la atrofia muscular de la pantorrilla, que implica respuestas inflamatorias locales, incluida la acumulación de macrófagos. Entre las diferentes magnitudes de compresión cíclica local probadas al cambiar el peso de la unidad cilíndrica, la compresión correspondiente a 50 mililitros de ondas de presión intermusculares de mercurio, parece aliviar de manera más eficiente la disminución inducida por la inmovilización en el área seccional transversal de miofífibra y aumentar la acumulación de macrófagos en los músculos gastrocnemios.Una compresión cíclica local de 66 gramos, aplicada a 1 hercio durante 30 minutos por día durante 7 días, alivia significativamente las disminuciones inducidas por inmovilización observada en el área transversal de miofibra de los músculos gastrocnemius. Más, la compresión cíclica local templa parcialmente la inmovilización inducida disminuye en la fuerza de conrcepción de los músculos del surae del tríceps. Además, la compresión cíclica local templa el aumento de F4/80 positivo, TNF-alfa positivo, y MCP-1 una célula positiva en el tejido muscular gastrocnemius de las extremidades traseras inmovilizadas.Nuestro enfoque proporcionará una base científica para el aumento muscular en el paciente y nuestra estrategia potencial para el procedimiento preventivo. La rata ha encontrado la limitada inactividad física. Usando nuestro sistema, hemos comenzado a evaluar la mayoría de los pacientes que es músculos carecen de mecánica en el paciente.La forma industrial local moderada para hacerlo hace una perfecta atrofia muscular inducida por inmovilización.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

An Orthotopic Model of Serous Ovarian Cancer in Immunocompetent Mice for in vivo Tumor Imaging and Monitoring of Tumor Immune Responses

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Un modelo ortotópico de cáncer de ovario seroso en ratones inmunocompetentes para In vivo Imágenes y seguimiento de tumores de las respuestas inmunitarias del tumor

Background: Ovarian cancer is generally diagnosed at an advanced stage where the case/fatality ratio is high and thus remains the most lethal of all ...

Investigación

Inmunología e Infección

Imaging Leukocyte Adhesion to the Vascular Endothelium at High Intraluminal Pressure

Imágenes de la adhesión de leucocitos al endotelio vascular en la presión intraluminal de alta

Worldwide, hypertension is reported to be in approximately a quarter of the population and is the leading biomedical risk factor for mortality worldwide. ...

Application of a Mouse Ligated Peyer&#x2019;s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

Application of a Mouse Ligated PeyerÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â€žÂ¢s Patch Intestinal Loop Assay to Evaluate Bacterial Uptake by M cells

La aplicación de un ratón ligado Ensayo placas de Peyer asa intestinal para evaluar la absorción por las células bacterianas M

The inside of our gut is inhabited with enormous number of commensal bacteria. The mucosal surface of the gastrointestinal tract is continuously exposed ...

Assessing Hepatic Metabolic Changes During Progressive Colonization of Germ-free Mouse by 1H NMR Spectroscopy

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La evaluación de alteraciones hepáticas metabólicas durante la colonización progresiva de la libre de gérmenes de ratón por 1 H espectroscopía de RMN

It is well known that gut bacteria contribute significantly to the host homeostasis, providing a range of benefits such as immune protection and vitamin ...

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A Protocol to Characterize the Morphological Changes of Clostridium difficile in Response to Antibiotic Treatment

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Assessment of antibiotic action with new drug development directed towards anaerobic bacteria is difficult and technically demanding. To gain insight into ...