Name: electroretinogram recording in larval zebrafish using a novel cone-shaped sponge-tip electrode
Uploaded: 2019-03-27T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Electroretinogram Recording in Larval Zebrafish using A Novel Cone-Shaped Sponge-tip Electrode at JoVE.com

Финансирование этого проекта была оказана грант от Мельбурнский Институт неврологии (PTG, PRJ и BVB).

Все сравнительно (ЭРГ) процедуры выполнялись согласно положениям австралийского национального здравоохранения и медицинских исследований Совета кодекса практики для ухода и использования животных и были утверждены Комитетом по институциональной этики животных на Университет Мель?...

<ol>
	<li>Roper, C., Tanguay, R. L., Slikker, W., Paule, M. G., Wang, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Handbook of Developmental Neurotoxicology (Second Edition). , 143-151 (2018).</li><li>Nguyen, C. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+Recording+of+Electroretinography+and+Visual+Evoked+Potentials+in+Anesthetized+Rats.">Simultaneous Recording of Electroretinography and Visual Evoked Potentials in Anesthetized Rats.</a> Journal of visualized experiments: JoVE. , e54158 (2016).</li><li>Chrispell, J. D., Rebrik, T. I., Weiss, E. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroretinogram+analysis+of+the+visual+response+in+zebrafish+larvae.">Electroretinogram analysis of the visual response in zebrafish larvae.</a> Journal of visualized expriment: JoVE. (97), (2015).</li><li>Seeliger, M. W., Rilk, A., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganzfeld+ERG+in+zebrafish+larvae.">Ganzfeld ERG in zebrafish larvae.</a> Documenta Ophthalmologica. 104 (1), 57-68 (2002).</li><li>Fleisch, V. C., Jametti, T., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electroretinogram+(ERG)+Measurements+in+Larval+Zebrafish.">Electroretinogram (ERG) Measurements in Larval Zebrafish.</a> Cold Spring Harbor Protocols. 2008, (2008).</li><li>Biehlmaier, O., Neuhauss, S. C., Kohler, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+plasticity+and+functionality+at+the+cone+terminal+of+the+developing+zebrafish+retina.">Synaptic plasticity and functionality at the cone terminal of the developing zebrafish retina.</a> Developmental Neurobiololgy. 56 (3), 222-236 (2003).</li><li>Gestri, G., Link, B. A., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+visual+system+of+zebrafish+and+its+use+to+model+human+ocular+diseases.">The visual system of zebrafish and its use to model human ocular diseases.</a> Developmental Neurobiololgy. 72 (3), 302-327 (2012).</li><li>Saszik, S., Bilotta, J., Givin, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ERG+assessment+of+zebrafish+retinal+development.">ERG assessment of zebrafish retinal development.</a> Visual Neuroscience. 16 (5), 881-888 (1999).</li><li>Niklaus, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cocaine+accumulation+in+zebrafish+eyes+leads+to+augmented+amplitudes+in+the+electroretinogram.">Cocaine accumulation in zebrafish eyes leads to augmented amplitudes in the electroretinogram.</a> Matters. 3 (6), e201703000003 (2017).</li><li>Tanvir, Z., Nelson, R. F., DeCicco-Skinner, K., Connaughton, V. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=One+month+of+hyperglycemia+alters+spectral+responses+of+the+zebrafish+photopic+ERG.">One month of hyperglycemia alters spectral responses of the zebrafish photopic ERG.</a> Disease models &#38; mechanisms. , (2018).</li><li>Kakiuchi, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oscillatory+potentials+in+electroretinogram+as+an+early+marker+of+visual+abnormalities+in+vitamin+A+deficiency.">Oscillatory potentials in electroretinogram as an early marker of visual abnormalities in vitamin A deficiency.</a> Molecular medicine reports. 11 (2), 995-1003 (2015).</li><li>Emran, F., Rihel, J., Adolph, A. R., Dowling, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Zebrafish+larvae+lose+vision+at+night.">Zebrafish larvae lose vision at night.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. , (2010).</li><li>Makhankov, Y. V., Rinner, O., Neuhauss, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+inexpensive+device+for+non-invasive+electroretinography+in+small+aquatic+vertebrates.">An inexpensive device for non-invasive electroretinography in small aquatic vertebrates.</a> Journal of Neuroscience Methods. 135 (1-2), 205-210 (2004).</li><li>Bilotta, J., Saszik, S., Sutherland, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rod+contributions+to+the+electroretinogram+of+the+dark-adapted+developing+zebrafish.">Rod contributions to the electroretinogram of the dark-adapted developing zebrafish.</a> Developmental Dynamics. 222 (4), 564-570 (2001).</li><li>Cameron, M. A., Barnard, A. R., Lucas, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electroretinogram+as+a+method+for+studying+circadian+rhythms+in+the+mammalian+retina.">The electroretinogram as a method for studying circadian rhythms in the mammalian retina.</a> Journal of genetics. 87 (5), 459-466 (2008).</li><li>Bui, B. V., Armitage, J. A., Vingrys, A. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Extraction+and+modelling+of+oscillatory+potentials.">Extraction and modelling of oscillatory potentials.</a> Documenta Ophthalmologica. 104 (1), 17-36 (2002).</li><li>Bui, B. V., Fortune, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ganglion+cell+contributions+to+the+rat+full-field+electroretinogram.">Ganglion cell contributions to the rat full-field electroretinogram.</a> The Journal of Physiology. 555 (1), 153-173 (2004).</li></ol>

Функциональные устройства индикации как Эрг стали все более важное значение в набор инструментов, используемых для изучения личиночной данио рерио8,9,12,14. Из-за небольшого размера глаза личиночной данио рерио стекло ...

Данио рерио (Danio рерио) стала широко используемых генетических позвоночных модели, включая исследования визуального нейронауки. Растущая популярность этого вида можно объяснить преимущества, включая легкость генетической манипуляции, высоко сохранены позвоночных зрительной системы (нейрон типы, анатомические морфологии и организации и базовой генетики), высокая плодовитость и более низкая стоимость животноводства, по сравнению с млекопитающих модели1. Неинвазивная сравнительно (ЭРГ) уже давно клинически используется для оценки человеческой зрительной функции и в лабораторных условиях для количественного определения видения в ряде крупных и мелких видов, в том числе грызуны и личинок данио рерио2,3 , 4 , 5. наиболее часто анализируемого Эрг компоненты в волны и волны b, происходящих из светочувствительных фоторецепторы и биполярный интернейронов, соответственно. В личиночной данио рерио 3 дня после оплодотворения (dpf) устанавливаются различные слои в сетчатке и Морфология конуса фоторецепторных терминала синапсов Зрелые до 4 dpf6,7. Таким образом внешней сетчатки функции личиночной данио рерио устанавливается до 4 dpf, означает, что Эрг измеримые от этого раннего возраста начиная. Из-за короткий цикл экспериментальных и высок объём свойства модели Эрг был применен к личиночной данио рерио для функциональной оценки болезни моделей, анализ развития цвет видение и сетчатки, изучение визуального циркадные ритмы и тестирования препаратов8,9,10,,1112.
Однако нынешние подходы для личинок данио рерио Эрг имеет некоторые сложности, которые могут сделать это труднее принять. Опубликованные личиночной данио рерио Эрг протоколы обычно используют стекло микропипеткой, наполненный проводящие жидкости как запись электрод3,4,5,13, которое требует высокого качества микропипеткой подсказка3. Специализированное оборудование, например микропипеткой съемник и в некоторых случаях microforge, необходимых для их производства. Это может быть проблемой для лабораторий с ограниченными ресурсами и приводит к дополнительную плату даже при адаптации имеющихся небольших животных Эрг систем для измерения личиночной данио рерио зрительной функции. Даже когда сглаживаются, кончик острый микропипеткой может повредить поверхность личиночной глаза. Кроме того коммерческие микропипеткой Держатели для электрофизиологии построены с фиксированной серебряной проволокой. Эти несъемные провода стали пассивируется после повторного использования, требующих покупки новых держателей, ведущих к увеличению эксплуатационных расходов.
Здесь мы описываем метод Эрг, используя конусообразные Губка Совет запись электрода, что особенно полезно для адаптации установленных малых животных Эрг установок для личинок данио рерио Эрг измерений. Электрод легко производится с использованием общей Губка поливинилацетатные (ПВА) и тонкой серебряной проволоки без каких-либо другое специализированное оборудование. Наши данные показывают, что этот роман электрод является чувствительным и достаточно надежным, чтобы продемонстрировать функционального развития сетчатки нейронных цепей в личиночной данио рерио между 4 и 7 dpf. Это экономичный и практичный Губка наконечник электрода может быть полезным для исследователей, создания новых систем Эрг или модификации существующих систем малых животных, данио рерио исследований.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.22 &#181;m filter</td>
			<td>Millex GP</td>
			<td>SLGP033RS</td>
			<td>Filters the 10&#215; goldfish ringer&#39;s buffer for sterilizatio</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1-mL syringe</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>DVR-5175</td>
			<td>With a 30G &#215; &#189;&#34; needle to add drops of saline to the electrode sponge tip to prevent drying and increased noisein the ERG signals.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G &#215; &#189;&#34; needle</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>NN*3013R</td>
			<td>For adding saline toteh sopnge tip electrode.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bioamplifier</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML135</td>
			<td>For amplifying ERG signals.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bleach solution&#160;</td>
			<td>King White</td>
			<td>9333441000973</td>
			<td>For an alternative method of sliver electrode chlorination. Active ingredient: 42 g/L sodium hypochlorite.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Circulation water bath</td>
			<td>Lauda-Ko&#776;nigshoffen</td>
			<td>MGW Lauda</td>
			<td>Used to make the water-heated platfrom.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrode lead</td>
			<td>Grass Telefactor</td>
			<td>F-E2-30</td>
			<td>Platinum cables for connecting silver wire electrodes to the amplifier.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Faraday Cage</td>
			<td>Photometric Solution International&#160;</td>
			<td></td>
			<td>For maintianing dark adaptation and enclosing the Ganzfeld setup to improve signal-to-noise ratio.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ganzfeld Bowl</td>
			<td>Photometric Solution International&#160;</td>
			<td></td>
			<td>Custom designed light stimulator: 36 mm diameter, 13 cm aperture size.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luxeon LEDs</td>
			<td>Phillips Light Co.</td>
			<td></td>
			<td>For light stimulation twenty 5W and one 1W LEDs.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micromanipulator</td>
			<td>Harvard Apparatus</td>
			<td>BS4 50-2625</td>
			<td>Holds the recording electrode during experiments.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microsoft Office Excel</td>
			<td>Microsoft</td>
			<td>version 2010</td>
			<td>Spreadsheet software for data analysis.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Moisturizing eye gel</td>
			<td>GenTeal Gel</td>
			<td>9319099315560</td>
			<td>Used to cover zebrafish larvae during recordings to avoiding dehydration. Active ingredient: 0.3 % Hypromellose and 0.22 % carbomer 980.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pasteur pipette</td>
			<td>Copan</td>
			<td>200C</td>
			<td>Used to caredully transfer larval zebrafish.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerlab data acquisition system</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>ML785</td>
			<td>Controls the LEDs to generate stimuli.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PVA sponge</td>
			<td>MeiCheLe</td>
			<td>R-1675</td>
			<td>For the placement of larval zebrafish and making the cone-shaped electrode ti</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Saline solution</td>
			<td>Aaxis Pacific</td>
			<td>13317002</td>
			<td>For electroplating silver wire electrode.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scope Software</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>version 3.7.6</td>
			<td>Simultaneously triggers the stimulus through the Powerlab system and collects data</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silver (fine round wire)</td>
			<td>A&#38;E metal</td>
			<td>0.3 mm</td>
			<td>Used to make recording and reference ERG electrodes.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope&#160;</td>
			<td>Leica</td>
			<td>M80</td>
			<td>Used to shape and measure the cone-shaped sponge apex (with scale bar on eyepiece). Positioned in the Faraday cage for electrode placement.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine&#160;</td>
			<td>Sigma-aldrich</td>
			<td>E10521-50G</td>
			<td>For anaethetizing larval zebrafish.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Water-heated platform</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
			<td>For maintianing the temperature of the sponge platform and the larval body during ERG recordings</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

electroretinogram recording in larval zebrafish using a novel cone-shaped sponge-tip electrode

Данио рерио (Danio рерио) обычно используется как позвоночных модель развития исследований и особенно подходит для визуального нейронауки. Для функциональных измерений визуального исполнения Эрг (ЭРГ) является идеальным неинвазивный метод, который был хорошо установленных в высших позвоночных видов. Этот подход все чаще используется для изучения зрительной функции в данио рерио, в том числе на ранних стадиях развития личинок. Однако наиболее часто используемые записи электрод для личинок данио рерио Эрг на сегодняшний день является Стеклянный электрод микропипеткой, которая требует специализированного оборудования для его производства, бросая вызов для лабораторий с ограниченными ресурсами. Здесь мы представляем протокол Эрг личиночной данио рерио, используя конусообразные Губка наконечник электрода. Роман электрод легче производства и ручкой, более экономично и меньше шансов повредить личиночной глаз, чем микропипеткой стекла. Как ранее опубликованные Эрг методы текущий протокол может оценить внешней функции сетчатки через фоторецептор и биполярных клеток ответов, a - и b волны, соответственно. Протокол можно четко иллюстрируют уточнение зрительной функции на протяжении раннего развития личинок данио рерио, поддерживая Утилита, чувствительность и надежность Роман электрода. Упрощенная электрод особенно полезна при создании новой системы Эрг или модификации существующих малых животного ERG аппарат для измерения данио рерио, помогая исследователям в визуального нейронауки использовать данио рерио модели организма.

Этот раздел предоставляет представителя результаты для Эрг измерений ежедневно от 4 до 7 dpf. От 4 dpf Эрг ответы свидетельствуют надежные компоненты a - и b волны, которые возникают от фоторецепторных клеток и биполярных клеток, соответственно. В каждом возрасте протестиро...

Watch this Scientific Journal Video about Electroretinogram Recording in Larval Zebrafish using A Novel Cone-Shaped Sponge-tip Electrode at JoVE.com

Electroretinogram Recording in Larval Zebrafish using A Novel Cone-Shaped Sponge-tip Electrode

Сравнительно запись в личиночной данио рерио, с помощью Роман конусообразной Губка наконечник электрода

Здесь мы представляем протокол, который упрощает измерения света вызвали сравнительно ответов от личинок данио рерио. Роман конусообразной Губка наконечник электрода может помочь сделать изучение визуальной разработки в личиночной данио рерио, используя сравнительно Эрг проще для достижения надежных результатов и низкой стоимости.

The zebrafish (Danio rerio) is commonly used as a vertebrate model in developmental studies and is particularly suitable for visual neuroscience. For ...

Этот протокол помогает упростить измерения электроретинограмм или ERGs в личинки зебры, которая обеспечивает важную функциональную считывание визуального развития и генетических моделей заболеваний. Мягкие кончики губки записи электродов, используемых в этом протоколе, просты в изготовлении с использованием экономичных и легкодоступных материалов и позволяет избежать потенциального повреждения личиночных глаз. Мягкий электрод с наконечником губки может облегчить повторные измерения ERG одного и того же глаза.Лица, новые для этой процедуры может быть трудно работать под тусклое красное освещение, которое используется на протяжении всей процедуры. Но важно, чтобы темная адаптация сохранялась. Чтобы подготовить конусообразную губку, записывающую электрод, вырежьте конец из платинового электродного свинцового расширения и используйте скальпель, чтобы удалить 10 миллиметров внешнего полиэтиленоэтиленового изоляционного покрытия с нового конца расширения.Вырежьте 40-миллиметровый кусок серебряной проволоки диаметром 0,3 миллиметра и переплетай серебряную проволоку с открытым внутренним проводом, чтобы надежно прикрепить провод к электроду свинца. Обвяжай сустав изоляционной лентой, оставляя под воздействием примерно 15-миллиметровую длину серебряной проволоки. Подключите другой провод к отрицательному терминалу батареи и погрузите другой конец провода в солевой раствор.Погрузите открытый серебряный провод в нормальный солевой раствор и соедините другой конец с положительным терминалом источника прямого тока в девять вольт. Через 60 секунд поместите проволоку на абсорбянтную ткань, чтобы высохнуть. В то же время, вырезать 20 на 20 миллиметров квадрат поливинил ацетат губки в конус форму и насытить губку в один раз Ringer буфера.Под световым микроскопом с штангой масштаба на окуляре используйте лезвие скальпеля, чтобы сформировать вершину конуса диаметром около 40 микрометров. Воздух-сухой конусообразной губкой на абсорбентной бумаге ткани, пока она не будет твердой. Перед вставкой серебряной проволоки в высушенный твердый конусообразный поливинил ацетат губки через основание конуса, используя маску ленты, чтобы изолировать любой избыток подвергаются металла для уменьшения фотоэлектрических артефактов.В день эксперимента погрузите электрод с наконечником губки в буфер Ringer в течение 15 минут, чтобы полностью насытить губку. По крайней мере, за восемь часов до записи, поместите не более 20 личинок зебры в одну 15 миллилитровую трубку без крышки и завернутые в алюминиевую фольгу в темном инкубаторе. В конце инкубации вылейте темно-адаптированную зебру в чашку Петри под тускло-красным освещением от светоизлучающего диода.Чтобы подготовить губку платформы, вырезать кусок поливинил ацетат губки примерно равна по толщине до глубины 35 миллиметров Петри блюдо так, что губка будет плотно вписываться в блюдо. Сделайте небольшой разрез вертикально через один конец губки для размещения серебряной проволоки эталонного электрода и замочите губку в буфере золотой рыбки Ringer до тех пор, пока губка не насытится. Затем поместите губку в чистую 35-миллиметровую чашку Петри и используйте бумажное полотенце, чтобы поглотить дополнительную жидкость, пока ни один раствор не источает губку в ответ на легкий пресс пальца.Чтобы распоставить животное для эксперимента, используйте трехмиллиметровый пипетки Pasteur для переноса обезболивающего личинки на трех на три сантиметра площади бумажного полотенца и используйте типсы, чтобы поместить квадрат на увлажненной губкой. Используя тонкую кисть, пропитанную буфером Ringer, отрегулируйте положение личинки одним глазом вверх и подальше от любой жидкости на полотенце под личинкой. Глазурь личинки тела с увлажняющим гель для глаз, чтобы держать животное гидратированных всей записи электроретинограммы.И поместите блюдо на небольшой, нагретой водой платформе перед чашей Ganzfeld свет стимул, расположенный внутри клетки Фарадея. Вставьте эталонный электрод в разрез, сделанный в платформе губкой. И соедините коммерчески полученный наземный электрод с клеткой Фарадея.Прикрепите записывающий электрод к держатель электрода и закрепите держатель к стереотаксисной руке микроманипулятора. Используя трехмиллиметровую пипетку Pasteur, перенасыщайте кончик губки электрода одной каплей раствора Ringer и располагайте микроскоп в клетке Фарадея над платформой электроретинограммы. Используйте кончик абсорбентной ткани, чтобы удалить излишки жидкости из кончика губки электрода и под микроскопом, располагайте активный электрод так, чтобы кончик губки мягко касался центральной поверхности роговицы личинородного глаза зебры.Затем переместите чашу Ganzfeld к платформе губки, заботясь о том, чтобы личинка была покрыта чашей, и закройте клетку, чтобы уменьшить посторонний электромагнитный шум. Чувствительность личинки сетчатки зебры к тусклым вспышкам увеличивается с возрастом. Поскольку а-и b-волны не узнаваемы при интенсивности ниже минус 1,61 бревенчатой канделы на метр в квадрате на четыре дня после оплодотворения, в то время как четкие сигналы обнаруживаются при этих интенсивностях у старых личинок.Амплитуда b-волны заметно увеличивается между четырьмя и пятью пост-оплодотворениями. В семь дней, сигнал на 2,48 бревенчатой канделы второй метр в квадрате больше по сравнению с днями пять и шесть после оплодотворения. A-и b-wave неявное время становятся значительно быстрее после пяти дней после оплодотворения.В целом, эти результаты демонстрируют созревание функции сетчатки зебры между четырьмя-семью днями после оплодотворения. Для успешного выполнения этого протокола крайне важно, чтобы губки были полностью насыщены жидкостью, которая помогает поддерживать проводимость записывающего электрода и снижает уровень шума. Если а-волна представляет особый интерес, фармакологические методы лечения могут быть применены, чтобы блокировать b-волновой компонент, таким образом подвергая полной а-волны.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Live Imaging of Innate Immune and Preneoplastic Cell Interactions Using an Inducible Gal4/UAS Expression System in Larval Zebrafish Skin

Живая съемка врожденной иммунной и предраковых межклеточного взаимодействия, используя / UAS Expression System Индуцибельная Gal4 на личиночной данио рерио кожи

Here we describe a method to conditionally induce epithelial cell transformation by the use of the 4-Hydroxytamoxifen (4-OHT) inducible KalTA4-ERT2/UAS ...

Microbead Implantation in the Zebrafish Embryo

Microbead Имплантация в данио рерио эмбрионов

The zebrafish has emerged as a valuable genetic model system for the study of developmental biology and disease. Zebrafish share a high degree of genomic ...

Tracking Cells in GFP-transgenic Zebrafish Using the Photoconvertible PSmOrange System

Отслеживание клеток в GFP-трансгенной данио рерио Использование системы Photoconvertible PSmOrange

The rapid development of transparent zebrafish embryos (Danio rerio) in combination with fluorescent labelings of cells and tissues allows visualizing ...

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Analyzing In Vivo Cell Migration using Cell Transplantations and Time-lapse Imaging in Zebrafish Embryos

Анализ<em&gt; В Vivo</em&gt; Миграция клеток с использованием мобильных трансплантаций и время покадровой визуализации у эмбрионов данио рерио

Cell migration is key to many physiological and pathological conditions, including cancer metastasis. The cellular and molecular bases of cell migration ...

Using Touch-evoked Response and Locomotion Assays to Assess Muscle Performance and Function in Zebrafish

Использование сенсорного вызванной реакции и локомоции Анализы для оценки производительности мышц и функции в данио рерио

Zebrafish muscle development is highly conserved with mammalian systems making them an excellent model to study muscle function and disease. Many ...

Dissection of Larval Zebrafish Gonadal Tissue

Вскрытие Личинки данио гонадная ткани

Although wild zebrafish possess a ZZ/ZW sex-determination system, domesticated zebrafish have lost the sex chromosome. They utilize a polygenic sex ...

Induction of Hypoxia in Living Frog and Zebrafish Embryos

Индукция гипоксии у живых лягушек и эмбрионов рыбок данио

Here, we introduce a novel system for hypoxia induction, which we developed to study the effects of hypoxia in aquatic organisms such as frog and ...

A Novel Mammary Fat Pad Transplantation Technique to Visualize the Vessel Generation of Vascular Endothelial Stem Cells

Новая методика трансплантации молочной жировой ткани для визуализации образования сосудов сосудистых эндотелиальных стволовых клеток

Endothelial cells (ECs) are the fundamental building blocks of the vascular architecture and mediate vascular growth and remodeling to ensure proper ...

Establishment of Larval Zebrafish as an Animal Model to Investigate Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

Establishment of Larval Zebrafish as an Animal Model to Investigate Trypanosoma cruzi Motility In Vivo

Создание личиночной данио рерио как модель животного к расследованию Trypanosoma cruzi подвижности In Vivo

Chagas disease is a parasitic infection caused by Trypanosoma cruzi, whose motility is not only important for localization, but also for cellular binding ...

Visualizing the Developing Brain in Living Zebrafish using Brainbow and Time-lapse Confocal Imaging

Визуализация развивающегося мозга в жизни зебрафиш с помощью Brainbow и замедленного Confocal imaging

Development of the vertebrate nervous system requires a precise coordination of complex cellular behaviors and interactions. The use of high resolution in ...