Name: identification and dissection of diverse mouse adipose depots
Uploaded: 2019-07-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots at JoVE.com

O.A.M. は、NIH 補助金 DK062876 および DK092759 によってサポートされています。D.P.B.は、ミシガン大学医療科学者養成プログラム(T32GM007863)、ミシガン大学オルガノジェネシス研修プログラム(T32HD007605)、ミシガン大学ラッカムメリットフェローシップ、タイレノールフューチャーケアフェローシップによって支援されています。

すべての動物の手順は、ミシガン大学の機関動物ケアおよび使用委員会(IACUC)の承認を得て行われます。
1. 安楽死
注:このビデオプロトコルの目的のために、4〜6ヶ月前のC57BL/6Jマウスが使用される。
<ol><li>マウスをイソルラン気化器室に入れ、イソルラン流量を5%以上に調整します。呼吸が止まってから1分後までイソファラン暴露を続?...

<ol>
	<li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adipose+organ+at+a+glance.">The adipose organ at a glance.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 5 (5), 588-594 (2012).</li><li>Rosen, E. D., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+we+talk+about+when+we+talk+about+fat.">What we talk about when we talk about fat.</a> Cell. 156 (1-2), 20-44 (2014).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+lineages:+tracing+back+the+origins+of+fat.">Adipocyte lineages: tracing back the origins of fat.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1842 (3), 340-351 (2014).</li><li>Bagchi, D. P., Forss, I., Mandrup, S., MacDougald, O. 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M., Seale, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown+and+Beige+Fat:+Physiological+Roles+beyond+Heat+Generation.">Brown and Beige Fat: Physiological Roles beyond Heat Generation.</a> Cell Metabolism. 22 (4), 546-559 (2015).</li><li>Frontini, A., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+and+development+of+brown+adipocytes+in+the+murine+and+human+adipose+organ.">Distribution and development of brown adipocytes in the murine and human adipose organ.</a> Cell Metabolism. 11 (4), 253-256 (2010).</li><li>Zhang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Adipose+Tissue+Atlas:+An+Image-Guided+Identification+of+Human-like+BAT+and+Beige+Depots+in+Rodents.">An Adipose Tissue Atlas: An Image-Guided Identification of Human-like BAT and Beige Depots in Rodents.</a> Cell Metabolism. 27, 252-262 (2018).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocytes+arise+from+multiple+lineages+that+are+heterogeneously+and+dynamically+distributed.">Adipocytes arise from multiple lineages that are heterogeneously and dynamically distributed.</a> Nature Communications. 5, 4099 (2014).</li><li>Li, Z., Hardij, J., Bagchi, D. P., Scheller, E. L., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development,+regulation,+metabolism+and+function+of+bone+marrow+adipose+tissues.">Development, regulation, metabolism and function of bone marrow adipose tissues.</a> Bone. 110, 134-140 (2018).</li><li>Scheller, E. L., Cawthorn, W. P., Burr, A. A., Horowitz, M. C., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marrow+Adipose+Tissue:+Trimming+the+Fat.">Marrow Adipose Tissue: Trimming the Fat.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 27 (6), 392-403 (2016).</li><li>Alexander, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dermal+white+adipose+tissue:+a+new+component+of+the+thermogenic+response.">Dermal white adipose tissue: a new component of the thermogenic response.</a> The Journal of Lipid Research. 56 (11), 2061-2069 (2015).</li><li>Kruglikov, I. L., Scherer, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dermal+Adipocytes:+From+Irrelevance+to+Metabolic+Targets?.">Dermal Adipocytes: From Irrelevance to Metabolic Targets?.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 27 (1), 1-10 (2016).</li><li>Iacobellis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+and+systemic+effects+of+the+multifaceted+epicardial+adipose+tissue+depot.">Local and systemic effects of the multifaceted epicardial adipose tissue depot.</a> Nature Reviews Endocrinology. 11 (6), 363-371 (2015).</li><li>Addison, O., Marcus, R. L., LaStayo, P. C., Ryan, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermuscular+Fat:+A+Review+of+the+Consequences+and+Causes.">Intermuscular Fat: A Review of the Consequences and Causes.</a> International Journal of Endocrinology. 2014, 1-11 (2014).</li><li>Pond, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+and+the+immune+system.">Adipose tissue and the immune system.</a> Prostaglandins, Leukotrienes, and Essential Fatty Acids. 73 (1), 17-30 (2005).</li><li>Kloppenburg, A. I. -. F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+player+in+knee+osteoarthritis:+the+infrapatellar+fat+pad.">An emerging player in knee osteoarthritis: the infrapatellar fat pad.</a> Arthritis Research &amp; Therapy. 15 (225), 1-9 (2013).</li><li>Mann, A., Thompson, A., Robbins, N., Blomkalns, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization,+Identification,+and+Excision+of+Murine+Adipose+Depots.">Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52174 (2014).</li><li>Casteilla, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods in Molecular Biology. 155, 1-22 (2008).</li><li>de Jong, J. M., Larsson, O., Cannon, B., Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stringent+validation+of+mouse+adipose+tissue+identity+markers.">A stringent validation of mouse adipose tissue identity markers.</a> American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism. 308 (12), E1085-E1105 (2015).</li><li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adipose+organ.">The adipose organ.</a> Prostaglandins, Leukotrienes, and Essential Fatty Acids. 73 (1), 9-15 (2005).</li><li>Parlee, S. D., Lentz, S. I., Mori, H., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+size+and+number+of+adipocytes+in+adipose+tissue.">Quantifying size and number of adipocytes in adipose tissue.</a> Methods in Enzymology. 537, 93-122 (2014).</li><li>Scheller, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Region-specific+variation+in+the+properties+of+skeletal+adipocytes+reveals+regulated+and+constitutive+marrow+adipose+tissues.">Region-specific variation in the properties of skeletal adipocytes reveals regulated and constitutive marrow adipose tissues.</a> Nature Communications. 6, 7808 (2015).</li><li>Scheller, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+osmium+tetroxide+staining+with+microcomputerized+tomography+to+visualize+and+quantify+bone+marrow+adipose+tissue+in+vivo.">Use of osmium tetroxide staining with microcomputerized tomography to visualize and quantify bone marrow adipose tissue in vivo.</a> Methods in Enzymology. 537, 123-139 (2014).</li><li>Lukjanenko, L., Brachat, S., Pierrel, E., Lach-Trifilieff, E., Feige, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+profiling+reveals+that+transient+adipogenic+activation+is+a+hallmark+of+mouse+models+of+skeletal+muscle+regeneration.">Genomic profiling reveals that transient adipogenic activation is a hallmark of mouse models of skeletal muscle regeneration.</a> PLoS One. 8 (8), e71084 (2013).</li><li>Pagano, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+Regeneration+with+Intermuscular+Adipose+Tissue+(IMAT)+Accumulation+Is+Modulated+by+Mechanical+Constraints.">Muscle Regeneration with Intermuscular Adipose Tissue (IMAT) Accumulation Is Modulated by Mechanical Constraints.</a> PLoS One. 10 (12), e0144230 (2015).</li><li>Khan, I. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermuscular+and+perimuscular+fat+expansion+in+obesity+correlates+with+skeletal+muscle+T+cell+and+macrophage+infiltration+and+insulin+resistance.">Intermuscular and perimuscular fat expansion in obesity correlates with skeletal muscle T cell and macrophage infiltration and insulin resistance.</a> International Journal of Obesity. 39 (11), 1607-1618 (2015).</li><li>Sulston, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+Circulating+Adiponectin+in+Response+to+Thiazolidinediones:+Investigating+the+Role+of+Bone+Marrow+Adipose+Tissue.">Increased Circulating Adiponectin in Response to Thiazolidinediones: Investigating the Role of Bone Marrow Adipose Tissue.</a> Frontiers in Endocrinology. 7, 128 (2016).</li></ol>

離散性脂肪細胞クラスターの多様な分子および機能特性の重要性がますます認識されるにつれて、現場の研究者は、さらなる分析のために脂肪デポを均一に識別し、物品分法を用いることが重要です。現在までに、標準化されたローカリゼーションと広範囲のマウス脂肪デポの分離のためのプロトコルはほとんど存在しません。以前に公開された方法は、主に1つまたは2つの拠点に焦点を当?...

脂肪組織は、局所および世界的なニーズに応じてエネルギーの貯蔵と放出、熱調節、およびエネルギーバランス、代謝および免疫応答を調節するアディポカインの分泌を含む全身恒常性において重要な役割を果たす1,2.脂肪細胞は離散的なデポで体全体に分布し、場合によってはマイクロ環境3、4、5内で専門的な役割を果たします。歴史的に、脂肪組織の研究は、白色脂肪組織(WAT)を中心とし、エネルギー恒常化を維持する上での役割を果たしてきました。ほとんどの脂肪細胞は、皮下および内臓WATデポで体全体に分布しています.これらの拠点の特性は、代謝疾患に対する差動感受性にとって重要である。皮下脂肪細胞は、皮膚の下に位置し、保護代謝効果5と関連している。内臓脂肪細胞は、生殖器、周膜、後食器、経皮および心膜デポ内に含まれているが、一般的に2型糖尿病および心血管疾患2を含む代謝障害に関連している。.褐色脂肪組織(BAT)も広範囲に研究されている。褐色および褐色様脂肪細胞は結合解除タンパク質1(UCP1)を発現し、適応熱形成およびグルコース恒常性6、7において重要な役割を果たす。古典的な褐色脂肪細胞は、間質BATデポ8に含まれている。褐色脂肪細胞のクラスターは、上頭蓋、赤外線/皮下、頸部、椎体および前庭デポ8、9を含む他の場所でも見られる。
主要なWATおよびBATデポでの位置に加えて、脂肪細胞は、彼らがそれぞれのマイクロ環境内で特殊な機能を実行することができ、体全体の離散ニッチ4に存在します。例えば、骨髄脂肪組織(BMAT)は脂質貯留部として機能し、循環するアディポネクチンの主要な供給源であり、骨芽細胞、破骨細胞、および血毒細胞10、11と密接に相互作用する。皮膚脂肪細胞は、創傷治癒、免疫応答、体温調節、および毛包成長12、13を含む広範なプロセスに寄与する。また、心外性脂肪細胞は、冠状動脈疾患14の発症および進行に局所的および全身的な影響を及ぼすいくつかのアディポカインおよびケモカインを産生しきらすことができる。筋肉間/内WATの拡大は、脂肪の増加、全身性インスリン抵抗性、および筋力および運動性の低下と正の相関を有している15。さらに、ポプライト脂肪細胞は、感染16の間にリンパ拡張のための脂質貯蔵所として機能する。異なる関節デポの具体的な役割は一般的に不明であるが、膝内のホッファデポ(赤外線)は現在、前膝痛および変形性関節症17を含む病理に寄与すると考えられている。
脂肪細胞の性格と機能の地域的な違いは激しい研究の下にあるが、フィールドは現在、多様なマウスデポの同定と解剖のための標準化されたプロトコルの欠如によって制限されている。以前に公開された方法は、通常、1つまたは2つの特定の拠点の分離を記述しており、均一な切除18、19に必要な詳細レベルを欠いている。この原稿に記載されているプロトコルは、多くの異なるマウス脂肪デポの特定の解剖学的位置および分離ステップのための包括的なガイドを提供する。この原稿の主な焦点はWATデポであるが、間奏BATの切除についても詳しく説明する。このプロトコルを用いて除腹された脂肪組織は、植生研究、組織学、遺伝子発現解析を含む多種多様な実験エンドポイントに使用することができる。
この原稿の目的は、著名なマウス脂肪デポとあまり研究されていないマウス脂肪デポの両方を明確かつ正確に識別し、分離するための詳細なプロトコルを研究者に提供することです(図1)。このリソースは、多様なニッチ内の脂肪細胞の発達、分子、および機能特性のより完全な調査を容易にします。
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59499/59499fig1.jpg"> 図1:このプロトコルで解剖されたマウス脂肪デポの概略図図。この画像はBagchi et al., 20184.<a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59499/59499fig1large.jpg" target="_blank">この図のより大きなバージョンを表示するには、ここをクリックしてください。</a>

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% neutral buffered formalin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-110-869</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well plates, untreated</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS3738</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol (dilute from 95%)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>04-355-226</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting forceps with curved tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89259-946</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting pan</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>629004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors (sharp/blunt tip)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-588</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Vitality Medical</td>
			<td>2634</td>
			<td>Curity 4 x 4 inch gauze sponge, 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handi-Pins for dissection</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>629132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors (straight)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470018-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>501017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>100499-578</td>
			<td>Feather scalpel handle with blade, disposable</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification and dissection of diverse mouse adipose depots

脂肪組織は、局所および世界的なニーズに応じてエネルギーの貯蔵と動員、熱を発生させる代謝の結合、全身恒常症を調節するアディポカインの分泌など、幅広い機能を持つ複雑な器官であり、免疫応答。新しい研究は、体全体の離散的なデポに位置する脂肪細胞の発達、分子、および機能プロファイルの重要な地域的な違いを識別しています。代謝疾患はしばしばデポ特異的効果を示すので、デポの異なる特性は医学的に関連しています。このプロトコルは、多様なマウス脂肪組織の再現性と正確な同定と切除のための詳細な解剖アトラスおよび解剖ガイドを研究者に提供します。離散脂肪デポの標準化された解剖は、様々な栄養および環境条件下での分子および代謝特性および局所および全身病理学的状態への寄与の詳細な比較を可能にする。

様々なマウス脂肪デポの同定および分離の成功は、上記のプロトコルを用いて達成することができる。皮下(A、E-F)、茶色(B)、内臓(C、D、G-J)、およびポプライト(K)デポの総解剖学的位置を図2に示す。
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59499/59499fig2.jpg"> 図2:マウス脂肪デポの総解剖学?...

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Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots

脂肪細胞は離散的な拠点に存在し、独自のマイクロ環境の中で多様な役割を果たしています。脂肪細胞の性格と機能の地域的な違いが明らかになるにつれて、デポの標準化された識別と隔離は、フィールドの進歩のために重要です。本明細書では、様々なマウス脂肪デポの切除に関する詳細なプロトコルを提示する。

多様なマウス脂肪デポの同定と解剖

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, ...

体全体の脂肪の貯蔵所を識別し、解剖するための標準化された方法論は、離散解剖ニッチ内の脂肪細胞の性格および機能の違いを調査するために重要である。この技術の主な利点は、一般的な、あまり研究されていないげっ歯類の脂肪のデポを識別し、切除するための信頼性の高い、正確な方法です。間型BATの同定と分離のために、虹彩は、デポの自然な境界に続く安楽死させたマウスの前皮下組織の下端に沿って水平に切断するために使用する。組織の自然な境界に従って、デポの横端に沿って2つの垂直切開を行います。鉗子を使用して慎重にデポをひっくり返し、白い脂肪組織内に埋め込まれた蝶の形をした茶色の脂肪組織を明らかにします。その後、周囲のWATから離れてBATを慎重に解剖します。ダウンストリーム分析のために適切なコンテナに脂肪組織を保管します。後皮下WATの同定と分離のために、マウスを上皮の位置に置き、動物の手足を固定します。鉗子を使用して胸骨の基部の皮膚を持ち上げ、1ミリメートルの皮膚切開を行います。カットにアイリスハサミの1つのブレードを挿入し、胸骨の基部から始まり、尾の基部に上昇する4〜5センチメートルの中線皮膚切開を行います。次に、最初の垂直切開の上部に2つの1センチメートルの水平切開を行い、正中線から横方向に延びる。鉗子を使用して腹腔から皮膚を慎重に剥がし、脚を使用して皮膚に関連付けられたままにする必要がある後皮下WATを見つける。伸びた皮膚をピン留めし、鼠径部を横切って後肢の腹側の基部から三角形の鼠径部WATデポを完全に切除する。内臓WATデポの同定と分離のために、鉗子を使用して胸骨の基部にある薄い腹膜空洞壁を持ち上げ、テント組織に1ミリメートルの切開を行います。カットにアイリスハサミの1つのブレードを挿入し、腹膜腔の上部から直腸に垂直切開を4〜5センチメートル下降させる。垂直切開の上下に正中から横方向に延びる2センチの水平切開を行い、鉗子を使用して腹腔の内容物を露出させる腹膜を剥がします。次に、伸ばした腹膜を解剖パンに固定し、腹腔内に含まれるWATデポを収穫する。内臓性腺WATの同定と分離のために、生殖腺を見つけ、関連する生殖腺WATを持ち上げるために鉗子を使用し、虹彩はさみを使用して慎重に生殖腺からWATを切除する。腎部外を切除するには、腎臓を見つけ、鉗子を使って腎組織を持ち上げる。腎臓を正中線に引っ張って、ペリネラルと後腹膜の間の明確な分裂を見て、腎臓に直接関連するWATを切除する。次に、WATから腎臓の上にある副腎を除去します.後腹膜の識別と隔離のために、腎臓を再び正中線に持ち上げ、虹彩はさみを使用して後腹壁から後腹膜WATを慎重に解剖する。膝関節のWATを単離するには、膝の後ろの大窩が上向きに見えるのに注意して、解剖パンに対して膝蓋骨を置く。アイリスはさみを使用して、後肢の付け根から足に皮膚を慎重に取り除きます。虹彩はさみを使用して、胃頭筋の内側と内側の下の境界でカットを行い、鉗子を使用して筋肉を持ち上げて三角形のポポを明らかにする。その後、自然な組織の境界に沿ってデポを切除するために虹彩はさみを使用してください。ここでは、マウス皮下、茶色、内臓、およびポジタルデポの総解剖学的位置を示す。皮下、褐色、内臓、ポプタル、構成性、および調節された骨髄脂肪、筋肉内、および眼圧脂肪脱子の組織学的特徴は、標準的なヘマトキシリンおよびエオシン染色プロトコルによって評価することができる。このプロトコルを用いて分離された脂肪組織は、組織学的解析、分子研究、遺伝子およびタンパク質発現解析など、さまざまな実験エンドポイントに使用できます。多様な脂肪の貯蔵所の同定の分野全体の標準化は間違いなく私達の分子および代謝の特徴および地方および系統的病理学的状態へのそれらの相違の貢献についての私達の理解をさらに助ける。

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of 6.5 dpc Mouse Embryos

6.5 DPCのマウス胚の解剖

Analysis of gene expression patterns during early stages of mammalian embryonic development can provide important clues about gene function, cell-cell ...

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

成体マウスから海馬歯状回の解剖

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

生体イメージングおよび卵巣癌の同所性マウスモデルにおける治療的処置の

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

マウス上端体脂肪組織からの脂肪前駆細胞の調製

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Efficient Dissection and Culture of Primary Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells

一次マウス網膜色素上皮細胞の効率的解離と培養

Eye disorders affect millions of people worldwide, but the limited availability of human tissues hinders their study. Mouse models are powerful tools to ...

Induction and Diverse Assessment Indicators of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

実験的自己免疫性脳脊髄炎の誘導と多様な評価指標

Multiple sclerosis (MS) is a typical autoimmune disease of the central nervous system (CNS) characterized by inflammatory infiltration, demyelination, and ...

Isolation and Identification of Vascular Endothelial Cells from Distinct Adipose Depots for Downstream Applications

下流アプリケーションのための異なる脂肪デポからの血管内皮細胞の分離と同定(英語)

Vascular endothelial cells lining the wall of the vascular system play important roles in a variety of physiological processes, including vascular tone ...

Adipose Tissue-Derived Stem Cell Isolation and Characterization

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats (Video) | JoVE 

スプレイグドーリーラットの脂肪組織由来間葉系幹細胞の単離と同定

Adult mesenchymal cells have revolutionized molecular and cell biology in recent decades. They can differentiate into different specialized cell types, in ...