Name: identification and dissection of diverse mouse adipose depots
Uploaded: 2019-07-11T12:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots at JoVE.com

O.A.M.은 NIH 교부금 DK062876 및 DK092759에 의해 지원됩니다. D.P.B.는 미시간 대학 의학 과학자 교육 프로그램 (T32GM007863), 조직 발생에 있는 미시간 대학 교육 프로그램 (T32HD007605), 미시간 랙햄 메리트 펠로우십 대학 및 타이레놀 미래 치료 동호회에 의해 지원됩니다.

모든 동물 절차는 미시간 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인으로 수행됩니다.
1. 안락사
참고: 이 비디오 프로토콜의 목적을 위해, 4~ 6개월 된 C57BL/6J 마우스가 사용된다.
<ol><li>마우스를 이소플루란 기화기 챔버에 놓고 이소플루란 유량을 5% 이상으로 조정합니다. 호흡이 멈출 때까지 1 분까지 이소플루란 노출을 계속하십시?...

<ol>
	<li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adipose+organ+at+a+glance.">The adipose organ at a glance.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 5 (5), 588-594 (2012).</li><li>Rosen, E. D., Spiegelman, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+we+talk+about+when+we+talk+about+fat.">What we talk about when we talk about fat.</a> Cell. 156 (1-2), 20-44 (2014).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+lineages:+tracing+back+the+origins+of+fat.">Adipocyte lineages: tracing back the origins of fat.</a> Biochimica et Biophysica Acta. 1842 (3), 340-351 (2014).</li><li>Bagchi, D. P., Forss, I., Mandrup, S., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SnapShot:+Niche+Determines+Adipocyte+Character+I.">SnapShot: Niche Determines Adipocyte Character I.</a> Cell Metabolism. 27 (1), 264-264 (2018).</li><li>Tchkonia, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+and+metabolic+implications+of+regional+differences+among+fat+depots.">Mechanisms and metabolic implications of regional differences among fat depots.</a> Cell Metabolism. 17 (5), 644-656 (2013).</li><li>Kajimura, S., Spiegelman, B. M., Seale, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brown+and+Beige+Fat:+Physiological+Roles+beyond+Heat+Generation.">Brown and Beige Fat: Physiological Roles beyond Heat Generation.</a> Cell Metabolism. 22 (4), 546-559 (2015).</li><li>Frontini, A., Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+and+development+of+brown+adipocytes+in+the+murine+and+human+adipose+organ.">Distribution and development of brown adipocytes in the murine and human adipose organ.</a> Cell Metabolism. 11 (4), 253-256 (2010).</li><li>Zhang, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+Adipose+Tissue+Atlas:+An+Image-Guided+Identification+of+Human-like+BAT+and+Beige+Depots+in+Rodents.">An Adipose Tissue Atlas: An Image-Guided Identification of Human-like BAT and Beige Depots in Rodents.</a> Cell Metabolism. 27, 252-262 (2018).</li><li>Sanchez-Gurmaches, J., Guertin, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocytes+arise+from+multiple+lineages+that+are+heterogeneously+and+dynamically+distributed.">Adipocytes arise from multiple lineages that are heterogeneously and dynamically distributed.</a> Nature Communications. 5, 4099 (2014).</li><li>Li, Z., Hardij, J., Bagchi, D. P., Scheller, E. L., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development,+regulation,+metabolism+and+function+of+bone+marrow+adipose+tissues.">Development, regulation, metabolism and function of bone marrow adipose tissues.</a> Bone. 110, 134-140 (2018).</li><li>Scheller, E. L., Cawthorn, W. P., Burr, A. A., Horowitz, M. C., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Marrow+Adipose+Tissue:+Trimming+the+Fat.">Marrow Adipose Tissue: Trimming the Fat.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 27 (6), 392-403 (2016).</li><li>Alexander, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dermal+white+adipose+tissue:+a+new+component+of+the+thermogenic+response.">Dermal white adipose tissue: a new component of the thermogenic response.</a> The Journal of Lipid Research. 56 (11), 2061-2069 (2015).</li><li>Kruglikov, I. L., Scherer, P. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dermal+Adipocytes:+From+Irrelevance+to+Metabolic+Targets?.">Dermal Adipocytes: From Irrelevance to Metabolic Targets?.</a> Trends in Endocrinology &amp; Metabolism. 27 (1), 1-10 (2016).</li><li>Iacobellis, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+and+systemic+effects+of+the+multifaceted+epicardial+adipose+tissue+depot.">Local and systemic effects of the multifaceted epicardial adipose tissue depot.</a> Nature Reviews Endocrinology. 11 (6), 363-371 (2015).</li><li>Addison, O., Marcus, R. L., LaStayo, P. C., Ryan, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermuscular+Fat:+A+Review+of+the+Consequences+and+Causes.">Intermuscular Fat: A Review of the Consequences and Causes.</a> International Journal of Endocrinology. 2014, 1-11 (2014).</li><li>Pond, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipose+tissue+and+the+immune+system.">Adipose tissue and the immune system.</a> Prostaglandins, Leukotrienes, and Essential Fatty Acids. 73 (1), 17-30 (2005).</li><li>Kloppenburg, A. I. -. F. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+emerging+player+in+knee+osteoarthritis:+the+infrapatellar+fat+pad.">An emerging player in knee osteoarthritis: the infrapatellar fat pad.</a> Arthritis Research &amp; Therapy. 15 (225), 1-9 (2013).</li><li>Mann, A., Thompson, A., Robbins, N., Blomkalns, A. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Localization,+Identification,+and+Excision+of+Murine+Adipose+Depots.">Localization, Identification, and Excision of Murine Adipose Depots.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), e52174 (2014).</li><li>Casteilla, L., Cousin, B., Calise, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Choosing+an+adipose+tissue+depot+for+sampling:+factors+in+selection+and+depot+specificity.">Choosing an adipose tissue depot for sampling: factors in selection and depot specificity.</a> Methods in Molecular Biology. 155, 1-22 (2008).</li><li>de Jong, J. M., Larsson, O., Cannon, B., Nedergaard, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+stringent+validation+of+mouse+adipose+tissue+identity+markers.">A stringent validation of mouse adipose tissue identity markers.</a> American Journal of Physiology-Endocrinology and Metabolism. 308 (12), E1085-E1105 (2015).</li><li>Cinti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adipose+organ.">The adipose organ.</a> Prostaglandins, Leukotrienes, and Essential Fatty Acids. 73 (1), 9-15 (2005).</li><li>Parlee, S. D., Lentz, S. I., Mori, H., MacDougald, O. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantifying+size+and+number+of+adipocytes+in+adipose+tissue.">Quantifying size and number of adipocytes in adipose tissue.</a> Methods in Enzymology. 537, 93-122 (2014).</li><li>Scheller, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Region-specific+variation+in+the+properties+of+skeletal+adipocytes+reveals+regulated+and+constitutive+marrow+adipose+tissues.">Region-specific variation in the properties of skeletal adipocytes reveals regulated and constitutive marrow adipose tissues.</a> Nature Communications. 6, 7808 (2015).</li><li>Scheller, E. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Use+of+osmium+tetroxide+staining+with+microcomputerized+tomography+to+visualize+and+quantify+bone+marrow+adipose+tissue+in+vivo.">Use of osmium tetroxide staining with microcomputerized tomography to visualize and quantify bone marrow adipose tissue in vivo.</a> Methods in Enzymology. 537, 123-139 (2014).</li><li>Lukjanenko, L., Brachat, S., Pierrel, E., Lach-Trifilieff, E., Feige, J. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomic+profiling+reveals+that+transient+adipogenic+activation+is+a+hallmark+of+mouse+models+of+skeletal+muscle+regeneration.">Genomic profiling reveals that transient adipogenic activation is a hallmark of mouse models of skeletal muscle regeneration.</a> PLoS One. 8 (8), e71084 (2013).</li><li>Pagano, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+Regeneration+with+Intermuscular+Adipose+Tissue+(IMAT)+Accumulation+Is+Modulated+by+Mechanical+Constraints.">Muscle Regeneration with Intermuscular Adipose Tissue (IMAT) Accumulation Is Modulated by Mechanical Constraints.</a> PLoS One. 10 (12), e0144230 (2015).</li><li>Khan, I. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intermuscular+and+perimuscular+fat+expansion+in+obesity+correlates+with+skeletal+muscle+T+cell+and+macrophage+infiltration+and+insulin+resistance.">Intermuscular and perimuscular fat expansion in obesity correlates with skeletal muscle T cell and macrophage infiltration and insulin resistance.</a> International Journal of Obesity. 39 (11), 1607-1618 (2015).</li><li>Sulston, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+Circulating+Adiponectin+in+Response+to+Thiazolidinediones:+Investigating+the+Role+of+Bone+Marrow+Adipose+Tissue.">Increased Circulating Adiponectin in Response to Thiazolidinediones: Investigating the Role of Bone Marrow Adipose Tissue.</a> Frontiers in Endocrinology. 7, 128 (2016).</li></ol>

이산 지방세포 클러스터의 다양한 분자 및 기능적 특성의 중요성이 점점 더 인식됨에 따라, 현장 내의 조사자가 추가 분석을 위해 지방 창고를 균일하게 식별하고 절제하는 것이 중요합니다. 현재까지 표준화된 지역화 및 광범위한 마우스 지방 창고의 격리를 위한 프로토콜은 거의 없습니다. 이전에 공표된 방법은 주로 하나 또는 두 개의 창고에 초점을 맞추고 있으며, 다른 조사자들에 의한 균일...

지방 조직은 지역 및 글로벌 요구에 부응하여 에너지 저장 및 방출, 체온 조절 및 에너지 균형, 신진 대사 및 면역 반응을 조절하는 아디포핀분비를 포함하여 전신 항상성에 중요한 역할을 합니다1 , 2. 지방 세포는 별도의 창고에서 몸 전체에 분포하고, 어떤 경우에는 자신의 미세환경 내에서 특수 한 역할을 제공 3,4,5. 역사적으로, 지방 조직의 연구는 백색 지방 조직 (WAT)에 중심을 두고 있다, 그리고 에너지 항상성을 유지에 그것의 역할. 대부분의 지방세포는 피하 및 내장 WAT 창고에서 몸 전체에 분포됩니다. 이 창고의 특성은 신진 대사 질환에 대한 차동 감수성에 중요합니다. 피부 아래에 위치한 피하 지방세포는 보호 대사 효과5. 중요한 기관을 둘러싸고 gonadal, 회신, 후회, omental 및 심낭 창고 내에 포함되는 내장 지방세포는 일반적으로 타입-2 당뇨병과 심혈관 질환을 포함한 대사 장애에 연결됩니다2 . 갈색 지방 조직 (BAT) 또한 광범위 하 게 공부 하고있다. 갈색 및 갈색형 지방세포는 결합성 단백질 1(UCP1)을 발현하고 적응형 열발생 및 포도당 항상성6,7에서중요한 역할을 한다. 고전 적 갈색 지방 세포는 중간 BAT 창고8에포함되어 있습니다. 갈색 지방세포의 클러스터는 또한 상부, 적외선/ 자궁 경부, 자궁 경부, 파라척추 및 후부증 창고8,9를포함하여 그밖 위치에서 있습니다.
주요 WAT 및 BAT 창고에 위치하는 것 외에도, 지방세포는 각 마이크로 환경 내에서 특수 기능을 수행할 수 있는 신체4의 개별 틈새에 존재합니다. 예를 들어, 골수 지방 조직(BMAT)은 지질 저장소로서 역할을 하며, 순환 아디포넥틴의 주요 공급원이며, 조골세포, 파골세포 및 조혈세포(10,11)와밀접하게 상호작용한다. 진피 지방세포는 상처 치유, 면역 반응, 체온 조절 및 모낭 성장12,13을포함하는 광범위한 과정에 기여한다. 또한, 상피 지방세포는 관상 동맥 질환의 발달 및 진행에 국소 및 전신 효과를 발휘하는 여러 아디포킨 및 케모카인을 생성할 수 있다(14). 간/근육 내 WAT의 확장은 긍정적으로 증가 된 배분과 상관 관계가있다, 전신 인슐린 저항, 감소 근육 강도 및 이동성15. 또한, 포피라이트 지방세포는 감염 시 림프 확장에 대한 지질 저장소(16)의 역할을 한다. 상이한 관절 창고의 특정 역할은 일반적으로 알려지지 않았지만, 무릎 내의 호파 디포(infrapatellarlar)는 이제 전방 무릎 통증 및 골관절염(17)을 포함하는 병리학에 기여하는 것으로 생각된다.
지방세포 의 특성과 기능의 지역적 차이는 강렬한 연구를 받고 있는 반면, 이 분야는 현재 다양한 마우스 창고의 식별 및 해부를 위한 표준화된 프로토콜의 부재로 인해 제한됩니다. 이전에 공표된 방법은 전형적으로 하나 또는 두 개의 특정 디포의 격리를 설명하고 균일한 절제에 필요한 세부 수준이 결여되어있다(18,19). 이 원고에 설명된 프로토콜은 많은 다른 마우스 지방 창고의 특정 해부학 적 위치 및 격리 단계에 대한 포괄적 인 가이드를 제공합니다. WAT 창고가 이 원고의 주요 초점이지만, 중간 BAT의 절제도 자세히 설명되어 있습니다. 이 프로토콜을 사용하여 절제된 지방 조직은 이식 연구, 조직학 및 유전자 발현 분석을 포함한 다양한 실험 종점에 사용될 수 있다.
이 원고의 목적은 조사관에게 눈에 띄고 연구가 덜 된 마우스 지방 창고를 명확하고 정확하게 식별하고 격리하는상세한 프로토콜을 제공하는 것입니다(그림 1). 이 리소스는 다양한 틈새 시장 내에서 지방세포의 발달, 분자 및 기능적 특성에 대한 보다 완전한 조사를 용이하게 합니다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59499/59499fig1.jpg"> 그림 1: 이 프로토콜에서 해부된 마우스 지방 창고의 회로도 묘사. 이 이미지는 Bagchi 외, 20184. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59499/59499fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a>

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>10% neutral buffered formalin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>22-110-869</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>24-well plates, untreated</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>CLS3738</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>70% ethanol (dilute from 95%)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>04-355-226</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting forceps with curved tips</td>
			<td>VWR</td>
			<td>89259-946</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting pan</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>629004</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dissecting scissors (sharp/blunt tip)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>82027-588</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze sponges</td>
			<td>Vitality Medical</td>
			<td>2634</td>
			<td>Curity 4 x 4 inch gauze sponge, 12 ply</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Handi-Pins for dissection</td>
			<td>Carolina Biological Supply Company</td>
			<td>629132</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iris scissors (straight)</td>
			<td>VWR</td>
			<td>470018-890</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>VetOne</td>
			<td>501017</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel</td>
			<td>VWR</td>
			<td>100499-578</td>
			<td>Feather scalpel handle with blade, disposable</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

identification and dissection of diverse mouse adipose depots

지방 조직은 지역 및 글로벌 요구에 부응하여 에너지저장 및 동원, 열을 발생시키는 신진대사의 분리, 전신 항상성을 조절하는 아디포핀분비 등 다양한 기능을 갖춘 복합기관으로, 면역 반응. 신흥 연구는 몸 전체에 걸쳐 별도의 창고에 위치한 지방세포의 발달, 분자 및 기능적 프로필의 중요한 지역적 차이를 식별하고 있습니다. 신진 대사 질병은 종종 창고 특정 효과를 보여주기 때문에 창고의 다른 특성은 의학적으로 관련이 있습니다. 이 프로토콜은 다양한 마우스 지방 조직의 재현 가능하고 정확한 식별 및 절제에 대한 자세한 해부학 아틀라스 및 해부 가이드를 조사자에게 제공 할 것입니다. 이산 지방 창고의 표준화 된 해부는 다양한 영양 및 환경 조건하에서 분자 및 대사 특성과 지역 및 전신 병리학 상태에 대한 기여도의 상세한 비교를 허용할 것입니다.

전술한 프로토콜을 사용하여 다양한 마우스 지방 창고의 성공적인 식별 및 격리가 달성될 수 있다. 피하(A, E-F), 브라운(B), 내장(C, D, G-J) 및 포플리탈(K) 디포의 총 해부학적 위치는 그림2에 나타내고 있다.
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59499/59499fig2.jpg"> 그림 2: 마우스 지방 창고의 총 ...

Watch this Scientific Journal Video about Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots at JoVE.com

Identification and Dissection of Diverse Mouse Adipose Depots

지방세포는 별도의 창고에 존재하며 고유한 미세 환경 내에서 다양한 역할을 합니다. 지방세포 의 특성과 기능의 지역적 차이가 드러나기 때문에, 표준화된 식별과 창고의 격리는 현장의 발전을 위해 매우 중요합니다. 본 명세서에서, 우리는 다양한 마우스 지방 창고의 절제에 대한 상세한 프로토콜을 제시한다.

다양한 마우스 지방 창고의 식별 및 해부

Adipose tissues are complex organs with a wide array of functions, including storage and mobilization of energy in response to local and global needs, ...

신체 전체에 있는 차분 창고를 식별하고 해부하기 위한 표준화된 방법론은 이산 해부학 적 틈새 시장 내의 형편과 기능의 차이에 대한 조사에 매우 중요합니다. 이 기술의 주요 장점은 일반 및 덜 연구된 설치류 지방 창고를 식별하고 절전하는 신뢰할 수 있고 정확한 방법이라는 것입니다. 중간 BAT의 식별 및 격리를 위해, 창고의 자연 경계 다음 안락사 마우스의 전방 피하 조직의 하단 가장자리를 따라 수평으로 절단 홍채 가위를 사용합니다.조직의 자연 경계에 따라 창고의 측면 가장자리를 따라 두 개의 수직 절개를 합니다. 포셉을 사용하여 조심스럽게 창고를 뒤집어 흰 지방 조직 내에 내장된 나비 모양의 상호 갈색 지방 조직을 드러냅니다. 그런 다음 주변 WAT에서 BAT를 조심스럽게 해부합니다.다운스트림 분석을 위해 적절한 컨테이너에 지방 조직을 저장합니다. 후방 피하 WAT의 식별 및 격리를 위해 마우스를 supine 위치에 배치하고 동물의 팔다리를 고정시하십시오. 집게를 사용하여 흉골 기저에서 피부를 들어 올리고 1 밀리미터 피부 절개를 합니다.아이리스 가위 1개를 컷에 넣고 흉골 기저에서 시작하여 꼬리 밑으로 올라가는 4~5cm 의 중간선 피부 절개를 합니다. 다음으로, 초기 수직 절개 상단에 두 센티미터 수평 절개를 미드라인에서 측면으로 확장합니다. 집게를 사용하여 복막 구멍에서 피부를 조심스럽게 벗겨내고 다리를 사용하여 피부와 관련이 있어야 하는 후방 피하 와트를 찾습니다.뻗은 피부를 고정하고 사타구니를 가로 질러 뒷다리 의 기지에서 삼각형 사타구니 WAT 창고를 완전히 제거합니다. 내장 WAT 창고 식별 및 격리를 위해, 삼골의 기지에서 얇은 복막 구멍 벽을 들어 올리고 텐트 조직에 1 밀리미터 절개를 만들기 위해 집게를 사용합니다. 홍채 가위 1개를 절단에 넣고 복막 구멍 의 상단에서 직장까지 수직 절개를 4~5센티미터 내림차순으로 만듭니다.중간선에서 측면으로 확장수직 절개의 상단과 하단에 두 개의 1센티미터 수평 절개를 하고 복강 함량을 노출하기 위해 복막을 다시 껍질을 벗기도록 집게를 사용합니다. 그런 다음 뻗은 복막을 해부 팬에 고정하여 복막 구멍 내에 포함된 WAT 창고를 수확합니다. 내장 고나달 WAT의 식별 및 격리를 위해, 곤드를 찾아 관련 고나달 WAT를 들어 올리기 위해 집게를 사용, 다음 조심스럽게 곤나드에서 WAT를 소비하는 홍채 가위를 사용합니다.회리 망 창고를 절제하려면 신장을 찾아 서식을 사용하여 신장 조직을 들어 올립니다. 신장을 중간선으로 당겨 복막과 레트로페리톤 창고 사이의 명확한 분열을 확인하고 신장과 직접 연관된 WAT를 소비합니다. 그런 다음 WAT에서 신장 위에 위치한 부신을 제거합니다.레트로복판 WAT 식별 및 격리를 위해 신장을 다시 미드라인으로 들어 올리고 홍채 가위를 사용하여 후방 복막 벽에서 레트로복판 WAT를 조심스럽게 해부합니다. 포클레타와트를 분리하려면 무릎 뒤쪽에 포라이트 포사가 위쪽으로 향하고 있는 해부 팬에 슬개골을 놓습니다. 홍채 가위를 사용하여 뒷다리 기저에서 발까지 피부를 조심스럽게 제거합니다.홍채 가위를 사용하여 위트랑이혈 근육의 내측 및 측면 머리의 열등한 경계에서 절단을 하고, 집게를 사용하여 근육을 들어 올려 삼각형 포라이트 창고를 드러냅니다. 그런 다음 홍채 가위를 사용하여 자연 조직 경계를 따라 창고를 소비합니다. 여기서, 마우스 피하, 갈색, 내장 및 포라이트 창고의 총 해부학적 위치가 표시됩니다.피하, 갈색, 내장, 포라이트, 구성및 조절된 골수 지방, 근육 내 및 인프라 할당 창고의 조직학적 특성은 표준 헤마톡시린 및 에오신 염색 프로토콜에 의해 평가될 수 있다. 이 프로토콜을 사용하여 분리된 분조직은 조직학적 분석, 분자 연구 및 유전자 및 단백질 발현 분석을 포함한 다양한 실험 종점에 사용될 수 있다. 다양한 지방 창고의 식별의 현장 전체 표준화는 의심 할 여지없이 우리가 그들의 분자 및 신진 대사 특성과 지역 및 체계적인 병리학 적 상태에 대한 차등 기여에 대한 이해를 증진시키는 데 도움이 될 것입니다.

Research

JoVE Journal

Biology

Dissection of 6.5 dpc Mouse Embryos

6.5 DPC 마우스 태아의 해부

Analysis of gene expression patterns during early stages of mammalian embryonic development can provide important clues about gene function, cell-cell ...

연구

생물학

Dissection of Hippocampal Dentate Gyrus from Adult Mouse

성인 마우스 Hippocampal 이가있는 이랑의 해부

The hippocampus is one of the most widely studied areas in the brain because of its important functional role in memory processing and learning, its ...

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

In vivo Imaging and Therapeutic Treatments in an Orthotopic Mouse Model of Ovarian Cancer

생체내 이미징 및 난소암의 Orthotopic 마우스 모델에서 치료 트리 트먼트

Human cancer and response to therapy is better represented in orthotopic animal models.  This paper describes the development of an orthotopic mouse model ...

Preparation of Adipose Progenitor Cells from Mouse Epididymal Adipose Tissues

마우스 전형 지방 조직에서 지방 전구의 준비

Obesity and metabolic disorders such as diabetes, heart disease, and cancer, are all associated with dramatic adipose tissue remodeling. Tissue-resident ...

Efficient Dissection and Culture of Primary Mouse Retinal Pigment Epithelial Cells

1차 마우스 망막 색소 상피 세포의 효율적인 해부 및 배양

Eye disorders affect millions of people worldwide, but the limited availability of human tissues hinders their study. Mouse models are powerful tools to ...

Induction and Diverse Assessment Indicators of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis

실험적 자가면역 뇌척수염의 유도 및 다양한 평가 지표

Multiple sclerosis (MS) is a typical autoimmune disease of the central nervous system (CNS) characterized by inflammatory infiltration, demyelination, and ...

Isolation and Identification of Vascular Endothelial Cells from Distinct Adipose Depots for Downstream Applications

다운스트림 적용을 위한 별개의 지방 저장소에서 혈관 내피 세포의 분리 및 식별

Vascular endothelial cells lining the wall of the vascular system play important roles in a variety of physiological processes, including vascular tone ...

Adipose Tissue-Derived Stem Cell Isolation and Characterization

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats

Isolation and Identification of Mesenchymal Stem Cells Derived from Adipose Tissue of Sprague Dawley Rats (Video) | JoVE 

Sprague Dawley 쥐의 지방 조직에서 유래한 중간엽 줄기 세포의 분리 및 식별

Adult mesenchymal cells have revolutionized molecular and cell biology in recent decades. They can differentiate into different specialized cell types, in ...

Culturing Preadipocytes Isolated from Murine Perivascular Adipose Tissue

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Stromal Vascular Fraction-derived Preadipocytes from Mouse Periaortic Adipose Tissue

The Significance of Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of SVF-Derived Preadipocytes from Mouse Perivascular Adipose Tissue (Video) | JoVE

Isolation, Culture, and Adipogenic Induction of Stromal Vascular Fraction-derived Preadipocytes from Mouse Periaortic Adipose Tissue(마우스 대동맥 주위 지방 조직에서 기질 혈관 분획 유래 지방세포의 분리, 배양 및 지방 유도)