Name: modeling breast cancer via an intraductal injection of cre-expressing adenovirus into the mouse mammary gland
Uploaded: 2019-06-07T13:30:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland Video at JoVE.com

Dette arbejde blev støttet af National Institutes of Health (NIH) Grant R01 CA222560 og af Department of Defense gennembrud Award W81XWH-18-1-0037.

Alle de metoder, der er beskrevet her, er blevet godkendt af det institutionelle udvalg for dyrepasning og-anvendelse (IACUC) på Brigham and Women's Hospital.
1. generering og vedligeholdelse af floxed mus
<ol><li>Få brystcancer-relevant floxed betinget udskæring (f. eks .Trp53 tm1Brn [omtalt som Trp53l/l], Brca1tm1Aash [Brca1l/l]) eller betingede Knock-in-muse linjer (f. eks. Gt (Rosa) 26SorTm1 (PI...

<ol>
	<li>Wagner, K. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cre-mediated+gene+deletion+in+the+mammary+gland.">Cre-mediated gene deletion in the mammary gland.</a> Nucleic Acids Research. 25 (21), 4323-4330 (1997).</li><li>Selbert, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+BLG-Cre+mediated+gene+deletion+in+the+mammary+gland.">Efficient BLG-Cre mediated gene deletion in the mammary gland.</a> Transgenic Research. 7 (5), 387-396 (1998).</li><li>Jonkers, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+tumor+suppressor+activity+of+BRCA2+and+p53+in+a+conditional+mouse+model+for+breast+cancer.">Synergistic tumor suppressor activity of BRCA2 and p53 in a conditional mouse model for breast cancer.</a> Nature Genetics. 29 (4), 418-425 (2001).</li><li>van Bragt, M. P., Hu, X., Xie, Y., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RUNX1,+a+transcription+factor+mutated+in+breast+cancer,+controls+the+fate+of+ER-positive+mammary+luminal+cells.">RUNX1, a transcription factor mutated in breast cancer, controls the fate of ER-positive mammary luminal cells.</a> eLife. 3, e03881 (2014).</li><li>Tao, L., van Bragt, M. P., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Long-Lived+Luminal+Subpopulation+Enriched+with+Alveolar+Progenitors+Serves+as+Cellular+Origin+of+Heterogeneous+Mammary+Tumors.">A Long-Lived Luminal Subpopulation Enriched with Alveolar Progenitors Serves as Cellular Origin of Heterogeneous Mammary Tumors.</a> Stem Cell Reports. 5 (1), 60-74 (2015).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+mutation+of+Brca1+in+mammary+epithelial+cells+results+in+blunted+ductal+morphogenesis+and+tumour+formation.">Conditional mutation of Brca1 in mammary epithelial cells results in blunted ductal morphogenesis and tumour formation.</a> Nature Genetics. 22 (1), 37-43 (1999).</li><li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ETV6-NTRK3+fusion+oncogene+initiates+breast+cancer+from+committed+mammary+progenitors+via+activation+of+AP1+complex.">ETV6-NTRK3 fusion oncogene initiates breast cancer from committed mammary progenitors via activation of AP1 complex.</a> Cancer Cell. 12 (6), 542-558 (2007).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+loss+of+BRCA1+and+p53+in+mice+induces+mammary+tumors+with+features+of+human+BRCA1-mutated+basal-like+breast+cancer.">Somatic loss of BRCA1 and p53 in mice induces mammary tumors with features of human BRCA1-mutated basal-like breast cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (29), 12111-12116 (2007).</li><li>Molyneux, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BRCA1+basal-like+breast+cancers+originate+from+luminal+epithelial+progenitors+and+not+from+basal+stem+cells.">BRCA1 basal-like breast cancers originate from luminal epithelial progenitors and not from basal stem cells.</a> Cell Stem Cell. 7 (3), 403-417 (2010).</li><li>Koren, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PIK3CA+induces+multipotency+and+multi-lineage+mammary+tumours.">PIK3CA induces multipotency and multi-lineage mammary tumours.</a> Nature. 525 (7567), 114-118 (2015).</li><li>Van Keymeulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+multipotency+by+oncogenic+PIK3CA+induces+breast+tumour+heterogeneity.">Reactivation of multipotency by oncogenic PIK3CA induces breast tumour heterogeneity.</a> Nature. 525 (7567), 119-123 (2015).</li><li>Tao, L., Xiang, D., Xie, Y., Bronson, R. T., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+p53+loss+in+mouse+luminal+cells+causes+clonal+expansion+and+development+of+mammary+tumours.">Induced p53 loss in mouse luminal cells causes clonal expansion and development of mammary tumours.</a> Nature Communications. 8, 14431 (2017).</li><li>Tao, L., van Bragt, M. P. A., Laudadio, E., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+Tracing+of+Mammary+Epithelial+Cells+Using+Cell-Type-Specific+Cre-Expressing+Adenoviruses.">Lineage Tracing of Mammary Epithelial Cells Using Cell-Type-Specific Cre-Expressing Adenoviruses.</a> Stem Cell Reports. 2 (6), 770-779 (2014).</li><li>Sutherland, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+of+origin+of+small+cell+lung+cancer:+inactivation+of+Trp53+and+Rb1+in+distinct+cell+types+of+adult+mouse+lung.">Cell of origin of small cell lung cancer: inactivation of Trp53 and Rb1 in distinct cell types of adult mouse lung.</a> Cancer Cell. 19 (6), 754-764 (2011).</li><li>Shackleton, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+functional+mammary+gland+from+a+single+stem+cell.">Generation of a functional mammary gland from a single stem cell.</a> Nature. 439 (7072), 84-88 (2006).</li><li>The Cancer Genome Atlas Network. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+molecular+portraits+of+human+breast+tumours.">Comprehensive molecular portraits of human breast tumours.</a> Nature. 490 (7418), 61-70 (2012).</li><li>Nik-Zainal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+life+history+of+21+breast+cancers.">The life history of 21 breast cancers.</a> Cell. 149 (5), 994-1007 (2012).</li><li>Abba, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Molecular+Portrait+of+High-Grade+Ductal+Carcinoma+In+Situ.">A Molecular Portrait of High-Grade Ductal Carcinoma In Situ.</a> Cancer Research. 75 (18), 3980-3990 (2015).</li></ol>

Succesen med denne tilgang til at inducere brysttumorer fra forskellige delpopulationer af mecs afhænger ikke kun af at vælge passende celle-type-specifikke promotorer (for at drive CRE-ekspression), men også af den med injektionsprocedure selv. Ideen bag denne fremgangsmåde er, at de injicerede ad-CRE vira bevares i duktalt træet, som er en skjult struktur med lumen, og derfor er kun mecs udsat for virus og er inficeret af ad-CRE. På grund af den begrænsede lumen plads i mælkekanalerne, er det vigtigt kun at inj...

Det overordnede mål for denne metode er at udvikle en ny brystkræft modellering tilgang baseret på en med injektion af ad-CRE i mus mg. Den CRE/loxP rekombinationbaserede genetiske tilgang har været meget anvendt til at modellere human brystkræft i mus. Den første generation af CRE/loxP-baserede brystkræft musemodeller genereres ved hjælp af CRE-ekspression af Transgene mus under kontrol af MEC-specifikke promotorer (f. eks., MMTV-CRE for luminale mecs og en del af basal mecs, WAP-CRE og Blg-CRE til luminale progenitorer og alveolære luminalmecs, K14-CRE til basal og en del af luminale mecs1,2,3,4,5)6, 7 , 8 , 9. selv om disse CRE-transgene linjer muliggør rumlig kontrol af CRE-ekspression (dvs. i forskellige undergrupper af mecs), tillader de dog ikke tidsmæssig kontrol af CRE-ekspression og CRE/loxp-medieret genetisk manipulation. Anden generation af CRE/loxP-baserede brystkræft musemodeller udnytter inducerbare CRE aktivitet/ekspression tilgange (f. eks brug af CRE-østrogen receptor fusion [CreER], som kun kan inducere CRE/loxP rekombination efter administration af Tamoxifen), og som følge heraf tillader disse genetiske værktøjer både rumlig og tidsmæssig kontrol af aktiveringen af onkogene hændelser i mecs (f. eks. K8-creer-og K5-creer-baserede modeller)10,11,12 . I begge generationer af brystkræft musemodeller, som initiativtagere, der anvendes til at drive CRE eller CreER udtryk (f. eks, Krt8, Krt5) kan også være aktive i epitelceller i andre organer (dvs., de er celle-type-specifikke, men ikke organ-specifikke) eller har et utætte udtryk i andre celletyper end epitelceller (f. eks. MMTV, som har utætte aktiviteter i knoglemarvs hæmatopoietiske celler), kan disse tilgange føre til udvikling af uønskede kræft (er) i andre organer. Hvis disse uventede kræftformer forårsage dødelighed i de berørte mus, det oprindelige formål med modellering brystkræft i disse mus kan være forbudt (f. eks., MMTV-CRE-drevet onkogene hændelser kan føre til hæmatopoietiske maligniteter og tidlig død af musene , på grund af udæthed af MMTV -promotoren i hæmatopoietiske celler)4.
Her rapporterer vi en brystkræft modellering tilgang i mus, der tillader både celle-type-og organ-specifikke manipulation af onkogene begivenheder i en timeligt kontrolleret måde. Denne fremgangsmåde er baseret på en intraductalinjektion af ad-CRE i muse MGs (og er således organspecifik). CRE udtryk kan styres ved hjælp af forskellige MEC subpopulation-specifikke initiativtagere indlejret i adenovirale vektor (f. eks, Krt8 for luminale mecs, Krt5 for basal mecs, således at opnå celle-type specificitet). Kræft induktion i MGs kan tidsmæssigt kontrolleres ved en injektion af ad-CRE til mus i forskellige aldre, startende fra 3-4 uger af alder (puberteten) til voksenstadiet.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>33-gauge needle</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7803-05</td>
			<td>point style 3 blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7mm Reflex Clip</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RF7 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenovirus, Ad-K5-Cre</td>
			<td>University of Iowa Viral Vector Core</td>
			<td>Ad5-bk5-Cre (VVC-Berns-1547)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenovirus, Ad-K8-Cre</td>
			<td>University of Iowa Viral Vector Core</td>
			<td>Ad5mK8-nlsCre</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>HC800-1GAL</td>
			<td>Prepare to 70% in use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated CD31</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-0311-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated CD45</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-0451-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated TER119</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-5921-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bromophenol Blue</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B0126-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD24-AF-700</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>564237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD24-PE</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>12-0242-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD29-APC</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>17-0291-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD29-PE</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>12-0291-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Remover Lotion</td>
			<td>Nair</td>
			<td></td>
			<td>9 Oz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7636-01</td>
			<td>0.025 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophors</td>
			<td>Betadine</td>
			<td></td>
			<td>10% Povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>NDC 10019-360-40</td>
			<td>1-2.5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loxicam</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>NDC 55529-040-10</td>
			<td>5 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lubricant Eye Ointment</td>
			<td>Akorn</td>
			<td colspan="2">NDC 17478-062-35</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting scissors</td>
			<td>Pentair</td>
			<td>9M</td>
			<td>Watchmaker&#39;s Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting tweezers</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>M5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taq 5X Master Mix</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0285L</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling breast cancer via an intraductal injection of cre-expressing adenovirus into the mouse mammary gland

Brystkræft er en heterogen sygdom, muligvis på grund af komplekse interaktioner mellem forskellige celler af oprindelse og onkogene begivenheder. Musemodeller er medvirkende til at få indsigt i disse komplekse processer. Selv om mange musemodeller er blevet udviklet til at studere bidrag af forskellige onkogene hændelser og celler af oprindelse til brysttumor, disse modeller er ofte ikke celle-type eller Organspecifikke eller kan ikke inducere initiering af brysttumor i en på en tidsmæssigt kontrolleret måde. Her beskriver vi en protokol til at generere en ny type brystkræft musemodeller baseret på med injektion af CRE-udtrykker adenovirus (ad-CRE) i mus brystkirtler (MGS). På grund af den direkte injektion af ad-CRE i mælkekanaler, denne fremgangsmåde er MG specifik, uden nogen uønsket kræft induktion i andre organer. Den med injektion procedure kan udføres i mus på forskellige stadier af deres mg udvikling (således, det tillader tidsmæssig kontrol af kræft induktion, startende fra ~ 3-4 uger af alder). Den celle-type specificitet kan opnås ved hjælp af forskellige celle-type-specifikke initiativtagere til at drive CRE udtryk i adenovirale vektor. Vi viser, at luminale og basal bryst epitelceller (mecs) kan være stramt målrettet til CRE/loxp-baseret genetisk manipulation via en med injektion af ad-CRE under kontrol af keratin 8 eller Keratin 5 Promoter, hhv. Ved at indarbejde en betinget CRE reporter (f. eks CRE/loxp-inducible Rosa26-yfp reporter), viser vi, at mecs målrettet af ad-CRE, og tumorceller afledt af dem, kan spores ved at følge de reporter-positive celler efter med injektion.

Repræsentative PCR-genotype resultater for R26Y og Trp53L alleler er vist i figur 1.
Selv om alle 10 Mg'er principielt kan underkastes den intraductale injektionsprocedure, udvælges de to fjerde inginal MGs typisk til injektion på grund af deres lettere tilgængelighed og større MG-størrelser (figur 2). Under operationen er det vigtigt...

Watch this Scientific Journal Video about Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland Video at JoVE.com

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland Video (Video) | JoVE

Målet med denne protokol er at beskrive en ny brystkræft modellering tilgang baseret på med injektion af CRE-udtrykker adenovirus i mus brystkirtler. Denne fremgangsmåde muliggør både celletype-og organspecifik manipulation af onkogene hændelser på en timeligt kontrolleret måde.

Modellering brystkræft via en intraductal injektion af CRE-udtrykker adenovirus i mus Brystkirtlen

Breast cancer is a heterogeneous disease, possibly due to complex interactions between different cells of origins and oncogenic events. Mouse models are ...

Denne protokol vil hjælpe forskere generere en ny type mus model til at opsummere menneskelige brystkræft udvikling fra forskellige delmængder af bryst epitelceller. Denne teknik giver forskerne mulighed for at generere brystkræft mus modeller i udviklingsstadiet væv på en celle type specifik måde og uden behov for omfattende mus avl. For at starte denne procedure skal du generere, vedligeholde og bedøve floxedmus som beskrevet i tekstprotokollen.Bring musen til et område adskilt fra, hvor operationen skal udføres. Efter bekræftelse af anæstesi ved at udføre en tå knivspids, injicere Meloxicam som analgesi subkutanely ved en dosis på fem milligram pr kg at forberede den kirurgiske procedure. Expose brystvorten kirurgisk sted ved at anvende flere dråber hårfjerning creme.Fjern overdreven creme og løst hår med bløde papirservietter. Barbering anbefales ikke for at undgå beskadigelse af brystvorterne. Desinficere operationsstedet med iodophors først efterfulgt af 70% alkohol og ende med en endelig anvendelse af krat iodoffer.Gør dette i en cirkulær bevægelse fra midten af arbejdsområdet mod periferien ved hjælp af en gaze svamp eller en bomuld-tippet applikator. Gentag cyklussen tre til fire gange. Brug aseptiske teknikker i hele den kirurgiske procedure.Lav et snit site på huden i en længde på cirka en centimeter mellem de to fjerde lyskeagtige mælkekirtler. Forsigtigt adskille huden flap fra parietal bughinden for at visualisere mammary ductal træ. Hold forsigtigt brystvorten med urmagere'snaft til at fjerne den udvendige brystvorte uden at skære nogen nærliggende hud ved hjælp af en microdissection saks.Læg ca. tre til fem mikroliter Cre-adenovirus injektionsblanding i en 25 mikroliter Hamilton sprøjte med en 33 gauge metal nav nål anbragt. Estimer mængden af injektionsblandingen i sprøjten på grundlag af det blå farvestof, der er inkluderet i blandingen. Hold forsigtigt kanten af hudflappen med en fin buet pincet og injicer Cre-adenovirus injektion blandingen langsomt ind i brystvorten, mens overvågning af spredningen af blå farvestof i mammary ductal træet.Hold injektionshastigheden ved langsom som muligt for at undgå skader på duuklelummen. En vellykket intraductal injektion indikeres ved injicerede væsker breder sig over hele ductal træet uden at sive ind i stroma rummet. Træk forsigtigt nålen ud af brystvorten for at undgå lækage af den injicerede væske.Undersøg den distale side af mælkekirtlen eller det omkringliggende område af den injicerede brystvorte. Dye spreder sig ind i den nærliggende stroma som vist her indikerer en mammary fedt pad injektion snarere end en vellykket intraductal injektion. Luk de kirurgiske sår i huden med sårklip.Fjern musen fra anæstesi og læg den på en varmepude inde i et rent bur til nyttiggørelse. Overvåg udviklingen af mælkesvulst som beskrevet i tekstprotokollen. De yngste hunmus, for hvilke intradukal injektion med succes kan udføres, er dem, der er ca. tre uger gamle.Selv for de fleste mammary tumor induktion eksperimenter, unge voksne kvindelige mus anvendes. Intradukal injektion med en større mængde af injektionsblandingen kan udføres hos hunmus i begyndelsen til midten af drægtighedsperioden for at målrette alveolær celler. At målrette forskellige mamma epitelcelle subpopulationer for mammary tumor induktion, Cre-adenovirus under kontrol af forskellige mamma epitelcelle delmængde specifikke initiativtagere blev brugt til injektion.For eksempel cre-adenovirus under kontrol af keratin 8 promotor blev brugt til at målrette luminal mamma epitelceller. Cre-adenovirus under kontrol af keratin 5 promotor målrettet basal afstamning fører til genetisk mærkning af kun basale mamma epitelceller. For en kvindelig P53 floxed homozygot mus med en ROSA26-YFP reporter, den intraductal injektion af keratin 8 Cre-adenovirus førte til udvikling af mælketumorer flere måneder efter injektionen.På grund af inddragelsen af den betingede R26-Y reporter, tumor epitelceller var typisk præget af YFP og kunne påvises ved flow cytometri. Cellerne kan beriges ved flowsortering af YFP-positive celler til yderligere analyse. De vigtigste ting at huske, når du forsøger denne procedure er at bruge en lille injektion volumen, injicere langsomt, og også trække nålen langsomt.Efter denne procedure, man kan overvåge progression af den målrettede YFP positive bryst epitelceller til præ-maligne og kræft stadier af flow cytometri eller co-immunofluorescens farvning af den injicerede kirtel. Denne teknik vil bane vejen for forskere at studere celler oprindelsen af brystkræft, hvordan de reagerer på forskellige autogene begivenheder, og hvordan de udvikler sig til kræftceller. Både adenovirus og nålen til injektion er potentielt farlige.Derfor bør man altid bære handsker og bruge sikkerhedsnåle og sprøjter, når der udføres intraduktionel injektion.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis Video (Video) | JoVE

Intra-iliaca Artery Injection til effektiv og selektiv Modellering af mikroskopiske knoglemetastaser

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely ...

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures Video (Video) | JoVE

Ved hjælp af Functional Genomics Screening at identificere potentielt nyt lægemiddel mod cancer Cell sfæroide Cultures

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis Video (Video) | JoVE

Intracarotid Cancer Cell injektion til Produce musemodeller for hjernemetastaser

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification

Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification Video (Video) | JoVE

Sektion Mammary Gland Hele Montage til Lesion Identifikation

Normal mammary gland development may be altered by exposure to environmental toxicants and pharmaceutical products, excessive exposure to hormones, and ...

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells Video (Video) | JoVE

Modeling osteosarkom ved hjælp af Li-Fraumeni syndrom Patient-afledte inducerede pluripotente stamceller-celler

Li-Fraumeni syndrome (LFS) is an autosomal dominant hereditary cancer disorder. Patients with LFS are predisposed to a various type of tumors, including ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad Video (Video) | JoVE

Orthotopic injektion af brystkræftceller ind i musene brystkirtler fedt Pad

A proper animal model is crucial for a better understanding of diseases. Animal models established by different methods (subcutaneous injections, ...

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad Video (Video) | JoVE

Rotte Mammary Epithelial Celletransplantation i Interscapular White Fat Pad

As early as the 1970s, researchers have successfully transplanted mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of rats. Grafting mammary ...

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging Video (Video) | JoVE

Modellering Brain Metastaser gennem intrakraniel injektion og magnetisk resonans Imaging

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are ...

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System Video (Video) | JoVE

Modellering af brystkræft i humant brystvæv ved hjælp af et mikrofysiologisk system

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells Video (Video) | JoVE

Modellering af hjernemetastase via haleveneinjektion af inflammatoriske brystkræftceller

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...