Name: modeling breast cancer via an intraductal injection of cre-expressing adenovirus into the mouse mammary gland
Uploaded: 2019-06-07T13:30:00
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Este trabalho foi apoiado pelos institutos nacionais de saúde (NIH) conceder R01 CA222560 e pelo departamento de defesa Breakthrough Award W81XWH-18-1-0037.

Todos os métodos aqui descritos foram aprovados pelo Comitê institucional de cuidado e uso de animais (IACUC) do Brigham and Women ' s hospital.
1. geração e manutenção de camundongos floxed
<ol><li>Obtenha nocaute condicional com o câncer de mama relevante (por exemplo, Trp53tm1Brn [referido como Trp53l/l], Brca1tm1Aash [Brca1l/l]) ou linhas de mouse condicionais de Knock-in (por exemplo, Gt (rosa) ...

<ol>
	<li>Wagner, K. U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cre-mediated+gene+deletion+in+the+mammary+gland.">Cre-mediated gene deletion in the mammary gland.</a> Nucleic Acids Research. 25 (21), 4323-4330 (1997).</li><li>Selbert, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+BLG-Cre+mediated+gene+deletion+in+the+mammary+gland.">Efficient BLG-Cre mediated gene deletion in the mammary gland.</a> Transgenic Research. 7 (5), 387-396 (1998).</li><li>Jonkers, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergistic+tumor+suppressor+activity+of+BRCA2+and+p53+in+a+conditional+mouse+model+for+breast+cancer.">Synergistic tumor suppressor activity of BRCA2 and p53 in a conditional mouse model for breast cancer.</a> Nature Genetics. 29 (4), 418-425 (2001).</li><li>van Bragt, M. P., Hu, X., Xie, Y., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=RUNX1,+a+transcription+factor+mutated+in+breast+cancer,+controls+the+fate+of+ER-positive+mammary+luminal+cells.">RUNX1, a transcription factor mutated in breast cancer, controls the fate of ER-positive mammary luminal cells.</a> eLife. 3, e03881 (2014).</li><li>Tao, L., van Bragt, M. P., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Long-Lived+Luminal+Subpopulation+Enriched+with+Alveolar+Progenitors+Serves+as+Cellular+Origin+of+Heterogeneous+Mammary+Tumors.">A Long-Lived Luminal Subpopulation Enriched with Alveolar Progenitors Serves as Cellular Origin of Heterogeneous Mammary Tumors.</a> Stem Cell Reports. 5 (1), 60-74 (2015).</li><li>Xu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conditional+mutation+of+Brca1+in+mammary+epithelial+cells+results+in+blunted+ductal+morphogenesis+and+tumour+formation.">Conditional mutation of Brca1 in mammary epithelial cells results in blunted ductal morphogenesis and tumour formation.</a> Nature Genetics. 22 (1), 37-43 (1999).</li><li>Li, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ETV6-NTRK3+fusion+oncogene+initiates+breast+cancer+from+committed+mammary+progenitors+via+activation+of+AP1+complex.">ETV6-NTRK3 fusion oncogene initiates breast cancer from committed mammary progenitors via activation of AP1 complex.</a> Cancer Cell. 12 (6), 542-558 (2007).</li><li>Liu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Somatic+loss+of+BRCA1+and+p53+in+mice+induces+mammary+tumors+with+features+of+human+BRCA1-mutated+basal-like+breast+cancer.">Somatic loss of BRCA1 and p53 in mice induces mammary tumors with features of human BRCA1-mutated basal-like breast cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 104 (29), 12111-12116 (2007).</li><li>Molyneux, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=BRCA1+basal-like+breast+cancers+originate+from+luminal+epithelial+progenitors+and+not+from+basal+stem+cells.">BRCA1 basal-like breast cancers originate from luminal epithelial progenitors and not from basal stem cells.</a> Cell Stem Cell. 7 (3), 403-417 (2010).</li><li>Koren, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PIK3CA+induces+multipotency+and+multi-lineage+mammary+tumours.">PIK3CA induces multipotency and multi-lineage mammary tumours.</a> Nature. 525 (7567), 114-118 (2015).</li><li>Van Keymeulen, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reactivation+of+multipotency+by+oncogenic+PIK3CA+induces+breast+tumour+heterogeneity.">Reactivation of multipotency by oncogenic PIK3CA induces breast tumour heterogeneity.</a> Nature. 525 (7567), 119-123 (2015).</li><li>Tao, L., Xiang, D., Xie, Y., Bronson, R. T., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induced+p53+loss+in+mouse+luminal+cells+causes+clonal+expansion+and+development+of+mammary+tumours.">Induced p53 loss in mouse luminal cells causes clonal expansion and development of mammary tumours.</a> Nature Communications. 8, 14431 (2017).</li><li>Tao, L., van Bragt, M. P. A., Laudadio, E., Li, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lineage+Tracing+of+Mammary+Epithelial+Cells+Using+Cell-Type-Specific+Cre-Expressing+Adenoviruses.">Lineage Tracing of Mammary Epithelial Cells Using Cell-Type-Specific Cre-Expressing Adenoviruses.</a> Stem Cell Reports. 2 (6), 770-779 (2014).</li><li>Sutherland, K. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+of+origin+of+small+cell+lung+cancer:+inactivation+of+Trp53+and+Rb1+in+distinct+cell+types+of+adult+mouse+lung.">Cell of origin of small cell lung cancer: inactivation of Trp53 and Rb1 in distinct cell types of adult mouse lung.</a> Cancer Cell. 19 (6), 754-764 (2011).</li><li>Shackleton, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Generation+of+a+functional+mammary+gland+from+a+single+stem+cell.">Generation of a functional mammary gland from a single stem cell.</a> Nature. 439 (7072), 84-88 (2006).</li><li>The Cancer Genome Atlas Network. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+molecular+portraits+of+human+breast+tumours.">Comprehensive molecular portraits of human breast tumours.</a> Nature. 490 (7418), 61-70 (2012).</li><li>Nik-Zainal, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+life+history+of+21+breast+cancers.">The life history of 21 breast cancers.</a> Cell. 149 (5), 994-1007 (2012).</li><li>Abba, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Molecular+Portrait+of+High-Grade+Ductal+Carcinoma+In+Situ.">A Molecular Portrait of High-Grade Ductal Carcinoma In Situ.</a> Cancer Research. 75 (18), 3980-3990 (2015).</li></ol>

O sucesso desta aproximação para induzir tumores mamária das subpopulações diferentes dos MECS confia não somente em escolher o Cell-Type-específico apropriado promotores (para conduzir a expressão de CRE) mas igualmente no procedimento intraductal da injeção próprio. A idéia por trás dessa abordagem é que os vírus ad-CRE injetados são retidos na árvore ductal, que é uma estrutura oculta com lúmen, e, portanto, apenas os MECs estão expostos aos vírus e estão infectados pelo AD-CRE. Devido ao espaço...

O objetivo geral deste método é desenvolver uma nova abordagem de modelagem de câncer de mama com base em uma injeção intraductal de AD-CRE no rato MG. A abordagem genética baseada em recombinação CRE/loxP tem sido amplamente utilizada para modelar o câncer de mama humano em camundongos. A primeira geração de modelos de ratos de câncer de mama baseados em CRE/loxP é gerada usando camundongos transgênicos que expressam CRE o controle de promotores específicos do MEC (por exemplo, MMTV-CRE para MECS luminais e uma porção de MECS basal, WAP-CRE e Blg-CRE para progenitores Luminal e MECs Luminal alveolares, K14-CRE para a parte basal e uma parcela de MECS Luminal1,2,3,4,5)6, 7 anos de , 8 . º , 9. Entretanto, quando estas linhas do CRE transgênicas permitirem o controle espacial da expressão de CRE (isto é, em subconjuntos diferentes dos MECS), não permitem o controle temporal da expressão de CRE e da manipulação genética de CRE/loxp-negociada. A segunda geração de modelos de mouse de câncer de mama baseados em CRE/loxp utilizam abordagens induzível de atividade/expressão CRE (por exemplo, uso de fusão do receptor de CRE-estrogênio [creer], que só pode induzir recombinação CRE/loxp após a administração de tamoxifeno), e Como resultado, essas ferramentas genéticas permitem o controle espacial e temporal da ativação de eventos oncogênicos em MECS (por exemplo, modelosbaseados em K8-creer-e K5-creer)10,11,12 . Em ambas as gerações de modelos de rato de cancro da mama, como promotores utilizados para conduzir CRE ou CreER expressão (por exemplo, Krt8, Krt5) também pode ser ativo em células epiteliais de outros órgãos (ou seja, eles são específicos do tipo de célula, mas não órgão específico) ou têm uma expressão gotejante em tipos de células que não as epiteliais (por exemplo, MMTV, que tem atividade de vazamento em células hematopoiéticas da medula óssea), essas abordagens podem levar ao desenvolvimento de câncer indesejado (s) em outros órgãos (s). Se esses cânceres inesperados causarem letalidade nos camundongos afetados, a finalidade original de modelar o câncer de mama nesses camundongos pode ser proibida (por exemplo, eventos oncogênicos conduzidos por MMTV-CREpodem levar a malignidades hematopoiéticas e morte precoce dos camundongos , devido à fuga do promotor MMTV em células hematopoiéticas)4.
Aqui nós relatamos uma aproximação de modelagem do cancro da mama nos ratos que permite a manipulação Cell-Type-e órgão-específica de eventos oncogênico em uma maneira temporally controlada. Esta aproximação é baseada em uma injeção intraductal de AD-CRE em MGs do rato (e é, assim, órgão-específico). A expressão CRE pode ser controlada usando diferentes promotores específicos da subpopulação do MEC incorporados no vetor adenoviral (por exemplo, Krt8 para MECS LUMINAIS, Krt5 para MECS basais, conseguindo assim a especificidade do tipo celular). A indução do cancro em MGs pode ser controlada temporally por uma injeção de AD-CRE em ratos em idades diferentes, partindo de 3-4 semanas da idade (pubertal) ao estágio adulto.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>33-gauge needle</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7803-05</td>
			<td>point style 3 blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>7mm Reflex Clip</td>
			<td>Braintree Scientific</td>
			<td>RF7 CS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenovirus, Ad-K5-Cre</td>
			<td>University of Iowa Viral Vector Core</td>
			<td>Ad5-bk5-Cre (VVC-Berns-1547)</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adenovirus, Ad-K8-Cre</td>
			<td>University of Iowa Viral Vector Core</td>
			<td>Ad5mK8-nlsCre</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Alcohol</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>HC800-1GAL</td>
			<td>Prepare to 70% in use</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated CD31</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-0311-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated CD45</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-0451-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>biotinylated TER119</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>13-5921-85</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bromophenol Blue</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>B0126-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD24-AF-700</td>
			<td>BD Pharmingen</td>
			<td>564237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD24-PE</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>12-0242-83</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD29-APC</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>17-0291-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CD29-PE</td>
			<td>eBiosciences</td>
			<td>12-0291-82</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair Remover Lotion</td>
			<td>Nair</td>
			<td></td>
			<td>9 Oz</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hamilton syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td>7636-01</td>
			<td>0.025 mL</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Iodophors</td>
			<td>Betadine</td>
			<td></td>
			<td>10% Povidone-iodine</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>NDC 10019-360-40</td>
			<td>1-2.5%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Loxicam</td>
			<td>Norbrook</td>
			<td>NDC 55529-040-10</td>
			<td>5 mg/ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lubricant Eye Ointment</td>
			<td>Akorn</td>
			<td colspan="2">NDC 17478-062-35</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting scissors</td>
			<td>Pentair</td>
			<td>9M</td>
			<td>Watchmaker&#39;s Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro-dissecting tweezers</td>
			<td>Dumont</td>
			<td>M5</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Taq 5X Master Mix</td>
			<td>New England Biolabs</td>
			<td>M0285L</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

modeling breast cancer via an intraductal injection of cre-expressing adenovirus into the mouse mammary gland

O câncer de mama é uma doença heterogênea, possivelmente devido a interações complexas entre diferentes células de origem e eventos oncogênicos. Os modelos de mouse são fundamentais para obter insights sobre esses processos complexos. Embora muitos modelos do rato sejam desenvolvidos para estudar contribuições de vários eventos e pilhas oncogênico da origem à tumorigenese do peito, estes modelos são frequentemente não Cell-Type ou órgão específico ou não podem induzir o início do tumorigênese mamária em um forma temporalmente controlada. Aqui nós descrevemos um protocolo para gerar um novo tipo de modelos do rato do cancro da mama baseados na injeção intraductal do adenovírus CRE-expressando (AD-CRE) em glândulas mamária do rato (MGS). Devido à injeção direta de AD-CRE em dutos mamários, esta abordagem é específica de MG, sem qualquer indução de câncer indesejada em outros órgãos. O procedimento intraductal da injeção pode ser executado nos ratos em estágios diferentes de seu desenvolvimento do magnésio (assim, permite o controle temporal da indução do cancro, partindo de ~ 3-4 semanas da idade). A especificidade do tipo celular pode ser alcançada usando diferentes promotores específicos do tipo célula para impulsionar a expressão de CRE no vetor adenoviral. Nós mostramos que as pilhas epithelial mamária Luminal e basais (MECS) podem fortemente ser alvejadas para a manipulação genética CRE/loxp-baseada através de uma injeção intraductal de AD-CRE o controle do promotor da queratina 8 ou da queratina 5, respectivamente. Incorporando um repórter condicional de CRE (por exemplo, repórter de CRE/loxP-inducible Rosa26-YFP ), nós mostramos que os MECS alvejados por AD-CRE, e as pilhas do tumor derivou deles, podem ser traçados seguindo as pilhas repórter-positivas após a injeção intraductal.

Os resultados de genotipagem do PCR representativo para os alelos R26Y e Trp53L são mostrados na Figura 1.
Embora, em princípio, todos os 10 MGs podem ser submetidos ao procedimento de injeção intraductal, praticamente, os dois quarto MGs inguinal são tipicamente selecionados para injeção, devido à sua acessibilidade mais fácil e maiores tamanhos de MG (<strong...

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O objetivo deste protocolo é descrever uma nova abordagem de modelagem de câncer de mama baseada na injeção intraductal de adenovírus expressando CRE em glândulas mamárias de camundongo. Esta aproximação permite a manipulação Cell-Type-e órgão-específica de eventos oncogênico em uma maneira temporally controlada.

Modelagem de câncer de mama através de uma injeção intraductal de CRE-expressando Adenovirus na glândula mamária do mouse

Breast cancer is a heterogeneous disease, possibly due to complex interactions between different cells of origins and oncogenic events. Mouse models are ...

Este protocolo ajudará os pesquisadores a gerar um novo tipo de modelo de camundongo para recapitular o desenvolvimento do câncer de mama humano a partir de diferentes subconjuntos de células epiteliais mamárias. Essa técnica permite que os pesquisadores gerem modelos de camundongos com câncer de mama em tecido de estágio de desenvolvimento de forma específica do tipo celular e sem a necessidade de criação extensiva de camundongos. Para iniciar esse procedimento, gerar, manter e anestesiar camundongos floxed como descrito no protocolo de texto.Leve o rato para uma área separada de onde a cirurgia deve ser realizada. Após confirmar a anestesia realizando uma pitada de dedo do pé, injete Meloxicam como analgesia subcutânea a uma dose de cinco miligramas por quilograma para se preparar para o procedimento cirúrgico. Exponha o local cirúrgico do mamilo aplicando várias gotas de creme para depilação.Remova o creme excessivo e os cabelos soltos usando toalhas de papel macios. A barba não é recomendada para evitar danos aos mamilos. Desinfetar o local cirúrgico com iodophors primeiro seguido por 70% de álcool e terminar com uma aplicação final de iodophors de esfoliação.Faça isso em um movimento circular do centro da área de trabalho em direção à periferia usando uma esponja de gaze ou um aplicador de ponta de algodão. Repita o ciclo três a quatro vezes. Use técnicas assépticas durante todo o procedimento cirúrgico.Faça um local de incisão na pele em um comprimento de aproximadamente um centímetro entre as duas quatro glândulas mamárias inguinais. Separe cuidadosamente a aba da pele do peritônio parietal para visualizar a árvore ductal mamária. Segure cuidadosamente o mamilo com fórceps relojoeiros para remover o mamilo exterior sem cortar nenhuma pele próxima usando uma tesoura de microdisseção.Carregue aproximadamente três a cinco microliters da mistura de injeção de Cre-adenovirus em uma seringa Hamilton de 25 microliter com uma agulha de hub metálico de calibre 33 afixada. Estime o volume da mistura de injeção na seringa à base do corante azul incluído na mistura. Segure suavemente a borda da aba da pele com uma pinça curva fina e injete a mistura de injeção de Cre-adenovírus lentamente no mamilo enquanto monitora a propagação de corante azul na árvore ductal mamária.Mantenha a taxa de injeção o mais lenta possível para evitar danos ao lúmen ductal. Uma injeção intradutora bem sucedida é indicada por fluidos injetados espalhados por toda a árvore ductal sem vazar para o compartimento estroma. Retire suavemente a agulha do mamilo para evitar qualquer vazamento do fluido injetado.Examine o lado distal da glândula mamária ou a área circundante do mamilo injetado. Dilatação de corante no estroma próximo, como mostrado aqui indica uma injeção de almofada de gordura mamária em vez de uma injeção intradutal bem sucedida. Feche as feridas cirúrgicas na pele com clipes de ferida.Retire o rato da anestesia e coloque-o em uma almofada de aquecimento dentro de uma gaiola limpa para recuperação. Monitore o desenvolvimento do tumor mamário conforme descrito no protocolo de texto. Os camundongos fêmeas mais jovens para os quais a injeção intradutal pode ser realizada com sucesso são aqueles com aproximadamente três semanas de idade.Embora para a maioria dos experimentos de indução de tumores mamários, camundongos adultos jovens são usados. A injeção intraducional com um volume maior da mistura de injeção pode ser realizada em camundongos fêmeas durante a gestação precoce e média para atingir células alveolares. Para atingir diferentes subpopulações de células epiteliais mamárias para indução de tumores mamários, foram utilizados promotores de células epiteliais sob o controle de diferentes subconjuntos de células epiteliais mamárias para injeção.Por exemplo, cre-adenovírus sob o controle da queratina 8 promotor foi usado para atingir células epiteliais luminais mamárias. Cre-adenovírus sob o controle da queratina 5 promotor teve como alvo a linhagem basal que leva à marcação genética de apenas células epiteliais mamárias basais. Para uma fêmea P53 floxed homozygous camundongos com um repórter ROSA26-YFP, a injeção intradutal de queratina 8 Cre-adenovírus levou ao desenvolvimento de tumores mamários vários meses após a injeção.Devido à inclusão do repórter condicionado R26-Y, as células epiteliais tumorais eram tipicamente marcadas por YFP e podiam ser detectadas por citometria de fluxo. As células podem ser enriquecidas pela triagem de fluxo de células positivas YFP para análise posterior. As coisas mais importantes a serem lembrada ao tentar este procedimento são usar um pequeno volume de injeção, injetar lentamente e também retirar a agulha lentamente.Após este procedimento, pode-se monitorar a progressão das células epiteliais mamárias positivas YFP direcionadas para estágios pré-malignos e cancerígenos por citometria de fluxo ou coloração de co-imunofluorescência da glândula injetada. Essa técnica abrirá caminho para os pesquisadores estudarem células de origem do câncer de mama, como elas respondem a diferentes eventos autogênicos e como elas progridem para as células cancerosas. Tanto o adenovírus quanto a agulha para injeção são potencialmente perigosos.Portanto, deve-se sempre usar luvas e usar agulhas de segurança e seringas ao realizar injeção intraducional.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Modeling Breast Cancer via an Intraductal Injection of Cre-expressing Adenovirus into the Mouse Mammary Gland

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis Video (Video) | JoVE

Injeção Artéria Intra-ilíaca para eficiente e seletiva Modelagem de microscópico metástase óssea

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely ...

Pesquisa do câncer

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures

Utilizing Functional Genomics Screening to Identify Potentially Novel Drug Targets in Cancer Cell Spheroid Cultures Video (Video) | JoVE

Utilizando Genómica Funcional de triagem para identificar alvos de drogas potencialmente romance em Spheroid culturas de células de câncer

The identification of functional driver events in cancer is central to furthering our understanding of cancer biology and indispensable for the discovery ...

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis Video (Video) | JoVE

Intracarotídeo injeção de células de cancer para produzir mouse modelos de metástases cerebrais

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification

Sectioning Mammary Gland Whole Mounts for Lesion Identification Video (Video) | JoVE

Seção de mamíferos mamários completos para identificação de lesões

Normal mammary gland development may be altered by exposure to environmental toxicants and pharmaceutical products, excessive exposure to hormones, and ...

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Modeling Osteosarcoma Using Li-Fraumeni Syndrome Patient-derived Induced Pluripotent Stem Cells Video (Video) | JoVE

Modelagem de osteossarcoma usando síndrome de Li-Fraumeni paciente-derivado induzido Pluripotent Stem Cells

Li-Fraumeni syndrome (LFS) is an autosomal dominant hereditary cancer disorder. Patients with LFS are predisposed to a various type of tumors, including ...

Orthotopic Injection of Breast Cancer Cells into the Mice Mammary Fat Pad

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Ortotópico injeção de células de câncer de mama para a almofada de gordura mamária de ratos

A proper animal model is crucial for a better understanding of diseases. Animal models established by different methods (subcutaneous injections, ...

Rat Mammary Epithelial Cell Transplantation into the Interscapular White Fat Pad

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Transplante de células epiteliais mamárias no Bloco de Gordura Branca Interscapular

As early as the 1970s, researchers have successfully transplanted mammary epithelial cells into the interscapular white fat pad of rats. Grafting mammary ...

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

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Modelando metástases cerebrais através de injeção intracraniana e ressonância magnética

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Modeling Breast Cancer in Human Breast Tissue using a Microphysiological System

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Modelando o câncer de mama no tecido mamário humano usando um sistema microfisiológico

Breast cancer (BC) remains a leading cause of death for women. Despite more than $700 million invested in BC research annually, 97% of candidate BC drugs ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

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Modelando Metástase Cerebral Via Injeção Venosa Caudal de Células Inflamatórias de Câncer de Mama

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...