Name: patient-derived heterogeneous xenograft model of pancreatic cancer using zebrafish larvae as hosts for comparative drug assessment
Uploaded: 2019-04-30T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Patient-derived Heterogeneous Xenograft Model of Pancreatic Cancer Using Zebrafish Larvae as Hosts for Comparative Drug Assessment at JoVE.com

Este trabalho foi apoiado pela Fundação Nacional de ciências naturais da China 81402582, Fundação de ciência natural de Xangai 12DZ2295100, 14YF1400600 e 18ZR1404500

Todos os procedimentos animais foram aprovados e seguiram as diretrizes do Comitê de ética animal da Universidade de Fudan e todos os espécimes de câncer pancreático foram obtidos do centro de câncer de Xangai da Universidade de Fudan. A aprovação ética foi obtida do Comitê de ética da FUSCC, e o termo de consentimento livre e esclarecido foi obtido por cada paciente.
1. preparando o equipamento para a microinjeção
<ol><li>
Preparando a placa de injeção.
	<ol>...

<ol>
	<li>Collins, D. C., Sundar, R., Lim, J. S. J., Yap, T. 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J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patient-derived+tumour+xenografts+as+models+for+oncology+drug+development.">Patient-derived tumour xenografts as models for oncology drug development.</a> Nature Reviews: Clinical Oncology. 9 (6), 338-350 (2012).</li><li>Charo, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bcl-2+overexpression+enhances+tumor-specific+T-cell+survival.">Bcl-2 overexpression enhances tumor-specific T-cell survival.</a> Cancer Research. 65 (5), 2001-2008 (2005).</li><li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+embryonic+stem+cells+contribute+to+embryonic+and+extraembryonic+lineages+in+mouse+embryos+upon+inhibition+of+apoptosis.">Human embryonic stem cells contribute to embryonic and extraembryonic lineages in mouse embryos upon inhibition of apoptosis.</a> Cell Research. 28 (1), 126-129 (2018).</li><li>Boise, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=bcl-x,+a+bcl-2-related+gene+that+functions+as+a+dominant+regulator+of+apoptotic+cell+death.">bcl-x, a bcl-2-related gene that functions as a dominant regulator of apoptotic cell death.</a> Cell. 74 (4), 597-608 (1993).</li><li>Moore, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single-cell+imaging+of+normal+and+malignant+cell+engraftment+into+optically+clear+prkdc-null+SCID+zebrafish.">Single-cell imaging of normal and malignant cell engraftment into optically clear prkdc-null SCID zebrafish.</a> Journal of Experimental Medicine. 213 (12), 2575-2589 (2016).</li></ol>

Ambos os modelos PDX e CDX são plataformas vitais no campo da biologia tumoral22, e o passo crítico de um transplante de sucesso entre espécies é melhorar a sobrevida do Xenoenxerto.  Recentemente, alguns estudos mostraram que a expressão transitória de BCL2L1 (BCL-XL) ou BCL2 pode melhorar significativamente a viabilidade de células-tronco embrionárias humanas em hospedeiros de camundongos sem afetar as identidades celulares e destinos23...

A Oncologia de precisão tem como objetivo encontrar as estratégias terapêuticas mais benéficas para o paciente individual1. Atualmente, inúmeros modelos pré-clínicos como a cultura primária in vitro, a cultura organoide in vitro2e os xenoenxertos derivados do paciente (PDX) em camundongos antes ou depois da cultura organoide são propostos para o diagnóstico e para a tela/avaliação do potencial escolhas terapêuticas3. O modelo PDX gerado pela injeção de células cancerosas primárias humanas em camundongos imunocomprometidos é uma das ferramentas mais promissoras para a triagem personalizada de fármacos em oncologia clínica3,4. Diferentemente da linhagem celular cultivada in vitro, os modelos PDX geralmente preservam a integridade e a heterogeneidade do ambiente tumoral in vivo, imitando melhor a diversidade e as características idiossincráticas de diferentes pacientes tumorais e, portanto, podem prever a resultados médicos potenciais dos doentes4. No entanto, a geração de modelos PDX em camundongos requer amostras de pacientes de alta qualidade e meses de tempo para reunir células e modelos suficientes para experimentos em vários grupos, e as composições celulares/genéticas do Xenoenxerto podem derivar das do original biópsiado paciente. A taxa de sucesso para o estabelecimento de camundongos PDX modelo também é baixa, tornando difícil de ser amplamente implementado na prática clínica. Para os pacientes que transportam cânceres rapidamente progredidos como câncer pancreático, eles podem não ser capazes de obter informações valiosas dos experimentos PDX no tempo.
Nos últimos anos, zebrafish foi relatado para ser anfitriões potenciais para não somente CDX (pilha-derivado xenograft do tumor) modela, mas também PDX modela5,6,7,8,9, 10. como um animal modelo vertebrado, o zebrafish abriga semelhanças suficientes com mamíferos em genética e fisiologia, com duas vantagens significativas: transparência e pequeno tamanho11. O zebrafish também é altamente fecundidade, e centenas de larvas inpuras podem ser obtidas dentro de poucos dias a partir de um único par de adultos12. Vários estudos têm empregado zebrafish para gerar modelos transgênicos e xenoenxertos de doenças cancerosas13,14. Comparado aos xenoenxertos de camundongos, os xenoenxertos de zebrafish permitem o rastreamento em uma resolução de célula única. Uma certa quantidade de tecidos humanos é capaz de gerar centenas de modelos de zebrafish PDX (zpdxs), enquanto só pode ser suficiente para gerar um par de ratos PDX modelos15,16. Além disso, as larvas de zebrafish em 2-5 DPF já desenvolvem sistemas circulatórios completos e órgãos metabólicos, como fígado e rim, mas não o sistema imunológico17, enquanto o saco de gema remanescente é um meio natural 3D, ideal para triagem de drogas, drogas testes de resistência e observações de migração tumoral6,18,19,20,21.
Com uma tentativa final de usar zPDX como uma plataforma de triagem/teste para uso clínico, aqui, descrevemos uma proposta otimizada para o modelo zPDX de câncer pancreático, que permite a avaliação in vivo do candidato a drogas dentro de um curto espaço de tempo usando menos células a custos mais baixos. Comparado com as referências anteriores sobre zpdx6,9,10, introduzimos várias otimizações para tornar o sistema mais viável e confiável para o diagnóstico clínico personalizado: 1) pré-classificação de células diferentes grupos nos tecidos primários do tumor e estabilizando as células primárias por uma semana antes de novas experiências; 2) rotular as células humanas e melhorar a viabilidade celular em Xenoenxerto via modificação genética baseada em Lentivirus; 3) otimizando a condição de cultura zebrafish em ambos os suplementos de nutrição (glicose e glutamina) e temperatura; 4) quantificando as respostas medicamentosas de diferentes tipos de células de forma comparativa. Também fizemos alterações na solução de injeção adicionando vários materiais complementares. Ao todo, essas melhorias proporcionam a possibilidade de gerar rapidamente um Xenoenxerto mais paciente-like em hospedeiros zebrafish que podem ser usados como uma ferramenta confiável para avaliar a resposta dos medicamentos candidatos.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>DMEM</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>C11995500BT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FBS</td>
			<td>Hyclone</td>
			<td>sv30087.03</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Y-27632</td>
			<td>Cliniscience</td>
			<td>Y0503</td>
			<td>Rho kinase inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Primocin</td>
			<td>invivogen</td>
			<td>ant-pm-1</td>
			<td>an antibiotic for primary cell cultures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Putrescine dihydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>P5780</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nicotinamide&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>N3376</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>penicillin streptomycin</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>15140122.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>phosphate buffer (PBS)</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>C10010500CP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HBSS&#160;</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>14170112.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>collagenase type IV</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>17104019.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hyaluronidase</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H3884</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Dnase&#8544;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D5025</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>insulin</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>I9278</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>b-FGF</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>PHG0264</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EGF</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>PHG0314</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pancreatic cancer fibroblasts inhibitor</td>
			<td>CHI Scientific</td>
			<td>FibrOUT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>0.45 &#956;m sterile filter</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>SLHV033RB</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>concentration column</td>
			<td>Millipore</td>
			<td>Millipore UFC910008</td>
			<td>Concentrate the virus</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>polybrene&#160;</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H9268</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hyaluronic Acid Sodium Salt</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>H7630</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>L-glutamine</td>
			<td>GIBCO</td>
			<td>21051024.00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>gemcitabine</td>
			<td>Gemzan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>methylcellulose</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>M0262</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Navitoclax(ABT-263)</td>
			<td>Selleck</td>
			<td>S1001</td>
			<td>Bcl-xL inhibitor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Equipment</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microinjector</td>
			<td>NARISHIGE</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stereomicroscope</td>
			<td>OLYMPUS</td>
			<td>MVX10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Confocal Microscope</td>
			<td>LEICA</td>
			<td>SP8</td>
			<td>0.00</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

patient-derived heterogeneous xenograft model of pancreatic cancer using zebrafish larvae as hosts for comparative drug assessment

O xenograft paciente-derivado do tumor (PDX) e o xenograft pilha-derivado do tumor (CDX) são técnicas importantes para a avaliação pré-clínica, a orientação da medicamentação e as pesquisas básicas do cancro. Gerações de modelos PDX em camundongos hospedeiros tradicionais são demoradas e só trabalham para uma pequena proporção de amostras. Recentemente, zebrafish PDX (zPDX) surgiu como um sistema de acolhimento único, com as características de pequena escala e de alta eficiência. Aqui, nós descrevemos uma metodologia aperfeiçoada para gerar um modelo fluorescência-etiquetado duplo do xenograft do tumor para a avaliação comparativa da quimioterapia em modelos de zPDX. As pilhas e os fibroblasto do tumor foram enriquecidos do tecido pancreatic recentemente-colhido ou congelado do cancro em condições diferentes da cultura. Ambos os grupos celulares foram rotulados por Lentivirus expressando proteínas fluorescentes verde ou vermelha, bem como um gene BCL2L1. As células transfectadas foram pré-misturadas e coinjetadas no zebrafish larval 2 DPF que foram então criados em meio E3 modificado a 32 ° c. Os modelos do xenograft foram tratados por drogas da quimioterapia e/ou pelo inibidor de BCL2L1, e as viabilidades de pilhas e de fibroblastos do tumor foram investigadas simultaneamente. Em resumo, este protocolo permite que os investigadores gerem rapidamente uma grande quantidade de modelos de zPDX com um microambiente heterogêneo do tumor e forneça uma janela mais longa da observação e uma quantitação mais precisa em avaliar a eficiência de candidatos da droga.

Um esboço esquematizado do procedimento é representado na Figura 1. No short, as pilhas preliminares do tecido do cancro foram semeadas no meio completo após a digestão com ou sem a adição de inibidores pancreatic do fibroblasto do cancro. As células cancerosas e os fibroblastos foram enriquecidos como duas populações distintas que os fibroblastos dominaram sem inibidores, e o crescimento das células cancerosas prevaleceu após a adição de inibido...

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Patient-derived Heterogeneous Xenograft Model of Pancreatic Cancer Using Zebrafish Larvae as Hosts for Comparative Drug Assessment

Modelo de Xenoenxerto heterogêneo derivado do paciente do câncer pancreático usando larvas de zebrafish como hospedeiros para avaliação comparativa de fármacos

Este protocolo descreve procedimentos da optimização em um modelo fluorescência-etiquetado duplo baseado em vírus do xenograft do tumor usando o zebrafish larval como anfitriões. Este modelo heterogêneo do xenograft imita a composição do tecido do microambiente pancreatic do cancro in vivo e sere como uma ferramenta mais precisa para avaliar respostas da droga em modelos personalizados de zPDX (xenograft paciente-derivado de zebrafish).

Patient-derived tumor xenograft (PDX) and cell-derived tumor xenograft (CDX) are important techniques for preclinical assessment, medication guidance and ...

Hoje vamos introduzir um modelo PDX de zebrafish larvas. Este modelo é significativo porque eles podem imitar melhor uma composição celular semelhante no xenoenxerto para avaliar as respostas medicamentosas e também melhora ainda mais a consistência dos resultados com nossa análise comparativa. Há duas principais vantagens dessa técnica.Em primeiro lugar, usamos vários corantes químicos padrão para rotular as células em diferentes fluorescências, permitindo o rastreamento em tempo real das composições celulares e a capacidade da fase anagrafo. Em segundo lugar, também melhora o tempo geral de sobrevivência das células humanas em zebrafish, sua modificação genética, que fornece uma janela de observação mais longa para testes de drogas. Esta técnica fornece um modelo potencial para a medicina personalizada para pacientes com câncer de pâncreas e também para a pré-avaliação de medicamentos tumorais pré-clínicos.Este método também pode ser usado para rastrear outras células tumorais ou nenhuma célula tumoral xenergrafada em zebrafish in vivo e para melhorar a sobrevivência celular por mais tempo de observação. Para preparar a placa de injeção, prepare uma solução de 50 mililitros de 1%agarose na solução E3. Ferva a solução até que a ágarose se dissolva.Despeje toda a solução em uma placa de Petri de 10 centímetros e, em seguida, coloque o molde de fixação de embrião zebrafish sobre a superfície. Quando a solução agarose se solidificar completamente, remova o molde. Para preparar agulhas de injeção, use um puxador de agulhas para puxar um capilar de vidro de 10 centímetros com uma dimensão interna de 0,9 milímetros em duas agulhas.Usando um microscópio e fórceps, corte a ponta da agulha para criar uma abertura. Primeiro, coloque de um a dois pares de zebrafish adultos em um tanque de acasalamento por volta das 19:00. Às oito da manhã seguinte, recolhe os óvulos fertilizados. Transfira os ovos fertilizados para uma placa de Petri contendo 40 mililitros de solução E3 fresca.Incubar a 28,5 graus Celsius. Primeiro, transfira a amostra de câncer de pâncreas coletada em uma placa de Petri. Enxágüe o tecido cinco a seis vezes com PBS e use um bisturi para cortar o tecido em pedaços cubos de um milímetro.Em seguida, transfira o tecido desfiado para um tubo de 50 mililitros contendo cinco mililitros de HBSS. Adicione colagenase tipo quatro, hialurodinase e DNAse um nas concentrações finais mostradas aqui. Pipeta a mistura para cima e para baixo para misturar bem.Incubar a mistura a 37 graus Celsius em uma incubadora de dióxido de carbono de 5% por 15 a 20 minutos. Pipeta a mistura para cima e para baixo algumas vezes a cada cinco minutos. Adicione sete mililitros de DMEM ao tubo.Centrifugar a 110 vezes G e a 4 graus Celsius por cinco minutos. Em seguida, decante o supernasal e suspenda novamente a mistura tumoral no DMEM. Emplaque a mistura em duas placas de Petri de seis centímetros contendo três mililitros de mídia de crescimento total chamada grupo um e grupo dois.Incubar ambos os grupos a 37 graus Celsius em uma incubadora de dióxido de carbono de 5%. Após 48 horas, adicione 100x inibidor de fibroblastos de câncer de pâncreas no meio do grupo um para remover os fibroblastos crescidos, deixando as células cancerosas como os principais tipos celulares. Continue incubando usando as condições anteriores.Após a produção do lentivírus, semeou as células para serem infectadas em uma placa de 12 poços com densidade de 30 a 40%. Cultura as células durante a noite a 37 graus Celsius em uma incubadora de dióxido de carbono de 5%. No dia seguinte, substitua o meio por 500 microliters de meio livre de soro contendo polibreno a uma concentração de oito microgramas por mililitro.Incubar a 37 graus Celsius com 5% de dióxido de carbono por quatro horas. Em seguida, adicione mais 100 microliters do lentivírus ao meio e incuba novamente por 12 horas. Após 12 horas, substitua o meio por dois mililitros de meio completo e incubar por mais 36 horas.Depois de 36 horas, verifique os marcadores de fluorescência. Colher as células infectadas e misturá-las em uma proporção de um para um com uma concentração final de um milhão de células por mililitro. Centrifugar as células a 110 vezes G durante cinco minutos e suspender a mistura celular em 50 microliters de solução de injeção.Depois de anestesiar as larvas de zebrafish, transfira-as para a placa de injeção, que é preenchida com E3 modificado. Pegue 25 microliters da suspensão celular mista na agulha microcapilar e insira a agulha no manipulador de microinjeção. Defina a pressão e o tempo de injeção e injete de 50 a 80 células no saco de gema de 48 horas após a fertilização zebrafish. Primeiro, transfira as larvas de zebrafish pós-zenografadas em 40 mililitros de solução de mistura a 32 graus Celsius.Coloque 10 larvas zenografadas em cada poço de uma placa de 12 poços. Em seguida, divida as larvas em quatro grupos. Trate o grupo controle com E3 contendo 0,1% DMSO e trate os outros grupos com Gemcitabina e/ou Navitoclax.Incubar todas as larvas a 32 graus Celsius por dois dias. Depois de anestesiar as larvas zenografadas após o tratamento, coloque-as em celulose de 3%de metila. Use um microscópio de fluorescência ou confocal para visualizar as larvas a partir da visão lateral.Em seguida, use o software de imagem J e gráfico pad para quantificar a intensidade dos sinais de fluorescência vermelha e verde. Neste estudo, as células do tecido do câncer primário são semeadas em meio completo após a digestão com ou sem a adição de inibidores de fibroblastos de câncer de pâncreas. Células cancerígenas e fibroblastos são enriquecidos como duas populações distintas.A população sem inibidores é dominada por fibroblastos, enquanto o crescimento das células cancerosas prevalece após a adição de inibidores. São construídos dois vetores de embalagem lentiviral que expressam proteínas fluorescentes verdes ou vermelhas no BCL2L1. A rotulagem de fluorescência baseada em vírus representa o status de sobrevivência das células.As células cancerígenas mistas e os fibroblastos são injetados no saco de gema zebrafish em 48 horas após a fertilização e são então tratados com Gemcitabina e/ou Navitoclax por dois dias. As viabilidades celulares em diferentes populações e a composição celular do zenoento são alteradas como respostas ao tratamento medicamentoso. Ao processar diferentes tipos de tumores, existem várias etapas que podem precisar ser contestadas, incluindo tempo de digestão celular, dosagem do tratamento medicamentoso, e assim por diante.Essa técnica ajuda os pesquisadores a empregar zebrafish a partir de um ensaio padrão CGX ou PDS. Permite a mistura e injeção de diferentes células em proporções fixas para quantificar as bandas de progresso, comparando-as com o crescimento celular. A proteção pessoal é de grande importância, especialmente quando embala lentivírus.Use máscaras e luvas quando apropriado e tente não misturar na pele.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Development and Maintenance of a Preclinical Patient Derived Tumor Xenograft Model for the Investigation of Novel Anti-Cancer Therapies

Desenvolvimento e manutenção de um tumor do paciente pré-clínica Derivado Xenoenxerto Modelo de Investigação de Novel Anti-Cancer Therapies

Patient derived tumor xenograft (PDTX) models provide a necessary platform in facilitating anti-cancer drug development prior to human trials. Human tumor ...

Pesquisa do câncer

A Melanoma Patient-Derived Xenograft Model

Um modelo de Xenoenxerto derivado do paciente com melanoma

Accumulating evidence suggests that molecular and biological properties differ in melanoma cells grown in traditional two-dimensional tissue culture ...

Physiologic Patient Derived 3D Spheroids for Anti-neoplastic Drug Screening to Target Cancer Stem Cells

Spheroids 3D derivados do paciente fisiológico para a seleção antineoplástica da droga para alvejar pilhas de haste do cancro

In this protocol, we outline the procedure for generation of tumor spheroids within 384-well hanging droplets to allow for high-throughput screening of ...

Establishment of Gastric Cancer Patient-derived Xenograft Models and Primary Cell Lines

Estabelecimento de modelos de xenoenxertos derivados de câncer gástrico e linhas celulares primárias

The use of preclinical models to advance our understanding of tumor biology and investigate the efficacy of therapeutic agents is key to cancer research. ...

Isolation and Characterization of Patient-derived Pancreatic Ductal Adenocarcinoma Organoid Models

Isolamento e caracterização de modelos organóides de adenocarcinoma ductatopansa pâncreas derivados do paciente

Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is amongst the most lethal malignancies. Recently, next-generation organoid culture methods enabling the ...

Drug Screening of Primary Patient Derived Tumor Xenografts in Zebrafish

Triagem de drogas de xenoenxertos tumorais derivados do paciente primário em zebrafish

Patient derived xenograft models are critical in defining how different cancers respond to drug treatment in an in vivo system. Mouse models are the ...

A Murine Ommaya Xenograft Model to Study Direct-Targeted Therapy of Leptomeningeal Disease

Um modelo de xenoenxerto Murine Ommaya para estudar terapia direta da doença leptomeningeal

Leptomeningeal disease (LMD) is an uncommon type of central nervous system (CNS) metastasis to the cerebral spinal fluid (CSF). The most common cancers ...

Patient-Derived Tumor Explants As a "Live" Preclinical Platform for Predicting Drug Resistance in Patients

Explantas tumorais derivadas do paciente como uma plataforma pré-clínico "viva" para prever a resistência a medicamentos em pacientes

An understanding of drug resistance and the development of novel strategies to sensitize highly resistant cancers rely on the availability of suitable ...

The Establishment and Utilization of Patient Derived Xenograft Models of Central Nervous System Metastasis

Estabelecimento e Utilização de Modelos de Xenoenxerto de Metástases do Sistema Nervoso Central Derivados de Pacientes

The development of novel therapies for central nervous system (CNS) metastasis has been hindered by the lack of preclinical models that accurately ...

Zebrafish Larvae as a Model to Evaluate Potential Radiosensitizers or Protectors

Larvas de zebrafish como modelo para avaliar potenciais radiossensibilizadores ou protetores

Zebrafish are extensively used in several kinds of research because they are one of the easily maintained vertebrate models and exhibit several features ...