Name: an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause
Uploaded: 2019-08-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

وقد دعم هذا العمل من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81202526 إلى J.X.)، والمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81302769 إلى B.S.)، ومؤسسة العلوم الطبيعية لبلدية بكين (47144226 إلى B.S.)، وشهادة الدكتوراه الصينية مؤسسة العلوم (20110490325 إلى J.X.)، ومؤسسة برامج الدكتوراه التابعة لوزارة التعليم في الصين (20121106120031 إلى B.S.).

تمت الموافقة على جميع البروتوكولات المتعلقة برعاية الحيوانات والبروتوكولات التجريبية من قبل اللجنة المؤسسية لرعاية الحيوانات واستخدامها التابعة للأكاديمية الصينية للعلوم الطبية وكلية الطب في اتحاد بكين (إذن رقم: SYXK (بكين) 2013-0023). أصل apoE-/- الفئران هو C57BL/6J9،<sup class="x...

<ol>
	<li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), e38-e360 (2016).</li><li>Packard, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+health+and+disease+in+women.">Cardiovascular health and disease in women.</a> The New England Journal of Medicine. 329 (4), 247-256 (1993).</li><li>Samaan, S. A., Crawford, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+and+cardiovascular+function+after+menopause.">Estrogen and cardiovascular function after menopause.</a> Journal of the American College of Cardiology. 26 (6), 1403-1410 (1995).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+atherosclerosis.">Inflammation in atherosclerosis.</a> Nature. 420 (6917), 868-874 (2002).</li><li>Tremollieres, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hormone+replacement+therapy+on+age-related+increase+in+carotid+artery+intima-media+thickness+in+postmenopausal+women.">Effect of hormone replacement therapy on age-related increase in carotid artery intima-media thickness in postmenopausal women.</a> Atherosclerosis. 153 (1), 81-88 (2000).</li><li>Bourassa, P. A., Milos, P. M., Gaynor, B. J., Breslow, J. L., Aiello, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+reduces+atherosclerotic+lesion+development+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Estrogen reduces atherosclerotic lesion development in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (3), 10022-10027 (1996).</li><li>Squadrito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genistein+supplementation+and+estrogen+replacement+therapy+improve+endothelial+dysfunction+induced+by+ovariectomy+in+rats.">Genistein supplementation and estrogen replacement therapy improve endothelial dysfunction induced by ovariectomy in rats.</a> Cardiovascular Research. 45 (2), 454-462 (2000).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+enhanced+contractility+in+microvessels+from+ovariectomized+rats:+roles+of+oxidative+stress+and+perivascular+adipose+tissue.">Endothelial dysfunction and enhanced contractility in microvessels from ovariectomized rats: roles of oxidative stress and perivascular adipose tissue.</a> Hypertension. 63 (5), 1063-1069 (2014).</li><li>Zhang, S. H., Reddick, R. L., Piedrahita, J. A., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+Hypercholesterolemia+and+Arterial+Lesions+in+Mice+Lacking+Apolipoprotein+E.">Spontaneous Hypercholesterolemia and Arterial Lesions in Mice Lacking Apolipoprotein E.</a> Science. 258 (5081), 468-471 (1992).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-Deficient+Mice+Develop+Lesions+of+All+Phases+of+Atherosclerosis+Throughout+the+Arterial+Tree.">ApoE-Deficient Mice Develop Lesions of All Phases of Atherosclerosis Throughout the Arterial Tree.</a> Arteriosclerosis and Thrombosis. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17-estradiol+Replacement+in+Rats+and+Mice:+A+Visual+Demonstration.">Ovariectomy and 17-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. 64 (e4013), 1-4 (2012).</li><li>Rossouw, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+and+benefits+of+estrogen+plus+progestin+in+healthy+postmenopausal+women:+principal+results+From+the+Women's+Health+Initiative+randomized+controlled+trial.">Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women: principal results From the Women's Health Initiative randomized controlled trial.</a> The Journal of the American Medical Association. 288 (3), 321-333 (2002).</li><li>Kumle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declining+breast+cancer+incidence+and+decreased+HRT+use.">Declining breast cancer incidence and decreased HRT use.</a> Lancet. 372 (9639), 608-610 (2008).</li><li>Jager, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized+comparison+of+triptorelin+and+tamoxifen+as+treatment+of+progressive+ovarian+cancer.">A randomized comparison of triptorelin and tamoxifen as treatment of progressive ovarian cancer.</a> Anticancer Research. 15 (6B), 2639-2642 (1995).</li><li>Bhathena, S. J., Velasquez, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+role+of+dietary+phytoestrogens+in+obesity+and+diabetes.">Beneficial role of dietary phytoestrogens in obesity and diabetes.</a> The American Journal of Clinical Nutrition. 76 (6), 1191-1201 (2002).</li><li>Wang, L., Qiu, X. M., Hao, Q., Li, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+a+Chinese+herbal+medicine+in+atherosclerosis+via+estrogen+receptor+beta+mediating+nitric+oxide+production+and+NF-kappaB+suppression+in+endothelial+cells.">Anti-inflammatory effects of a Chinese herbal medicine in atherosclerosis via estrogen receptor beta mediating nitric oxide production and NF-kappaB suppression in endothelial cells.</a> Cell Death and Disease. 4 (e551), 1-13 (2013).</li><li>Xiao, J., Wang, N. L., Sun, B., Cai, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+mediates+the+effects+of+pseudoprotodiocsin+on+adipogenesis+in+3T3-L1+cells.">Estrogen receptor mediates the effects of pseudoprotodiocsin on adipogenesis in 3T3-L1 cells.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 299 (1), C128-C138 (2010).</li><li>Guivarc'h, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+Role+of+Nuclear+Versus+Membrane+Estrogen+Receptor+alpha+in+Arterial+Protection:+Implications+for+Estrogen+Receptor+alpha+Modulation+in+Cardiovascular+Prevention/Safety.">Predominant Role of Nuclear Versus Membrane Estrogen Receptor alpha in Arterial Protection: Implications for Estrogen Receptor alpha Modulation in Cardiovascular Prevention/Safety.</a> Journal of the American Heart Association. 7 (13), 1-17 (2018).</li><li>Osako, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+inhibits+vascular+calcification+via+vascular+RANKL+system:+common+mechanism+of+osteoporosis+and+vascular+calcification.">Estrogen inhibits vascular calcification via vascular RANKL system: common mechanism of osteoporosis and vascular calcification.</a> Circulation Research. 107 (4), 466-475 (2010).</li><li>Ivanova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+of+some+saponins+and+phenolic+components+of+Tribulus+terrestris+and+Smilax+excelsa+as+MDR+modulators.">Screening of some saponins and phenolic components of Tribulus terrestris and Smilax excelsa as MDR modulators.</a> In vivo. 23 (4), 545-550 (2009).</li><li>Xiao, J., Zhu, T., Yin, Y. Z., Sun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1,+a+unique+constituent+of+Panax+notoginseng,+blinds+proinflammatory+monocytes+to+protect+against+cardiac+hypertrophy+in+ApoE(-/-)+mice.">Notoginsenoside R1, a unique constituent of Panax notoginseng, blinds proinflammatory monocytes to protect against cardiac hypertrophy in ApoE(-/-) mice.</a> European Journal of Pharmacology. 833 (15), 441-450 (2018).</li><li>Sun, B., Xiao, J., Sun, X. B., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1+attenuates+cardiac+dysfunction+in+endotoxemic+mice:+an+insight+into+oestrogen+receptor+activation+and+PI3K/Akt+signalling.">Notoginsenoside R1 attenuates cardiac dysfunction in endotoxemic mice: an insight into oestrogen receptor activation and PI3K/Akt signalling.</a> British Journal of Pharmacology. 168 (7), 1758-1770 (2013).</li><li>Adams, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+coronary+artery+atherosclerosis+by+17-beta+estradiol+in+ovariectomized+monkeys.+Lack+of+an+effect+of+added+progesterone.">Inhibition of coronary artery atherosclerosis by 17-beta estradiol in ovariectomized monkeys. Lack of an effect of added progesterone.</a> Arteriosclerosis. 10 (6), 1051-1057 (1990).</li><li>Keaney, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17+beta-estradiol+preserves+endothelial+vasodilator+function+and+limits+low-density+lipoprotein+oxidation+in+hypercholesterolemic+swine.">17 beta-estradiol preserves endothelial vasodilator function and limits low-density lipoprotein oxidation in hypercholesterolemic swine.</a> Circulation. 89 (5), 2251-2259 (1994).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-deficient+mice+develop+lesions+of+all+phases+of+atherosclerosis+throughout+the+arterial+tree.">ApoE-deficient mice develop lesions of all phases of atherosclerosis throughout the arterial tree.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen-induced+recovery+of+autonomic+function+after+middle+cerebral+artery+occlusion+in+male+rats.">Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats.</a> American Journal of Physiology- Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 281 (5), R1531-R1539 (2001).</li><li>Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+effects+of+17beta-oestradiol+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 25 (3), 414-420 (2005).</li><li>Pignoli, P., Tremoli, E., Poli, A., Oreste, P., Paoletti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+plus+medial+thickness+of+the+arterial+wall:+a+direct+measurement+with+ultrasound+imaging.">Intimal plus medial thickness of the arterial wall: a direct measurement with ultrasound imaging.</a> Circulation. 74 (6), 1399-1406 (1986).</li><li>Hodgin, J. B., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+estrogen+and+mouse+models+of+atherosclerosis.">Minireview: estrogen and mouse models of atherosclerosis.</a> Endocrinology. 143 (12), 4495-4501 (2002).</li><li>Bush, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+mortality+and+noncontraceptive+use+of+estrogen+in+women:+results+from+the+Lipid+Research+Clinics+Program+Follow-up+Study.">Cardiovascular mortality and noncontraceptive use of estrogen in women: results from the Lipid Research Clinics Program Follow-up Study.</a> Circulation. 75 (6), 1102-1109 (1987).</li><li>Marsh, M. M., Walker, V. R., Curtiss, L. K., Banka, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+atherosclerosis+by+estrogen+is+independent+of+plasma+cholesterol+levels+in+LDL+receptor-deficient+mice.">Protection against atherosclerosis by estrogen is independent of plasma cholesterol levels in LDL receptor-deficient mice.</a> Journal of Lipid Research. 40 (5), 893-900 (1999).</li></ol>

المنهجية الموصوفة هنا هو نموذج الماوس تشبه اضطراب الدهون وتصلب الشرايين ينظر في النساء في سن اليأس. ومن الموثق جيدا أن نقص الإستروجين في النساء بعد سن اليأس يمكن أن تفاقم حدوث ارتفاع الكوليسترول في الدم الموجودة من قبل أو الجارية مع الآفات التصلبية المعقدة تدريجيا وعلى نطاق واسع<sup class="xref"...

وقد أظهرت الدراسات الوبائية والسريرية أن النساء بعد سن اليأس هي في خطر أكبر بكثير من أمراض القلب والأوعية الدموية من النساء قبل سن اليأس1،2. العلاج بالهرمونات البديلة (HRT) قد يقلل من المخاطر النسبية لأمراض القلب والأوعية الدموية إلى 0.37-0.793. من بين المضاعفات الأخرى، تصلب الشرايين الناجمعن أمراض القلب والأوعية الدموية هو السبب الرئيسي للوفاة في جميع أنحاء العالم4. ومع ذلك، تفتقر النماذج المختبرية التي تنطوي على الفئران التي تعاني من نقص الإستروجين التي تعرض حالة عرضة لتصلب الشرايين. يوفر هذا البروتوكول في الجسم الحي نقص الإستروجين نموذج الماوس لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من خلل القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث.
الدراسات السابقة تبين أن تطبيق OVX في القوارض تصلب الشرايين تغذية نظام غذائي عالي الكولسترول يمكن أن يحاكي النساء بعد سن اليأس الذين يعانون من تصلب الشرايين5،6،7،8. نموذج حيواني قابل للاستنساخ ومريحة تشبه حالة تصلب الشرايين في النساء في سن اليأس هو أساس أبحاث الإستروجين الخارجية. هنا، تم تطبيق شق مزدوج الظهرالجانبي من استئصال المبيض الثنائي في تصلب الشرايين المعرضة للتصلب apolipoprotein E بالضربة القاضية (apoE-/-) الفئران9،10. بالمقارنة مع شق في البطن الأوسط أو الظهري، شق الظهرية الجانبية المزدوجة هو أسهل، وسيلة أقل استهلاكا للوقت التي يمكن تجنب التصاق تجويف البطن الشديد والتهاب. إدارة بيروال عن طريق انتشار البندق (انظر جدولالمواد) غير الغازية ومريحة، مما يجعلها قابلة للتطبيق على نطاق واسع كأسلوب إدارة على المدى الطويل11. بطيئة الإفراج عن زرعبيليه هو أيضا شعبية 6. ومع ذلك، قد تؤدي الغرسات إلى تفاقم حدوث العدوى خاصة في الفئران التي تتعرض لـ OVX. وسائط الإدارة غير الغازية الأخرى، مثل اللقاحات عن طريق الفم وإدارة المياه، لديها أيضا العديد من العيوب. عادة ما الإجهاد اللقاحات عن طريق الفم الفئران ويمكن أن يسبب إصابة المريء. إدارة الهرمون عن طريق مياه الشرب مفيد للغاية; ومع ذلك، فإن إضافة DMSO كمستحلب أمر لا مفر منه كما الإستروجين الخارجية غير قابلة للذوبان في الماء. هنا, اخترنا peroral 17β-استراديول أو استبدال هرمون الإستروجين النباتي عن طريق انتشار البندق للإدارة على المدى الطويل.
في الآونة الأخيرة، تم الطعن في التأثير المفيد لHRT على نظام القلب والأوعية الدموية للنساء بعد سن اليأس في التجارب مبادرة صحة المرأة (WHI)12. من ناحية, الإستروجين الخارجية وحدها تمارس تأثير مفيد على نظام القلب والأوعية الدموية; من ناحية أخرى, فإنه يمكن الجمع بين مع خلات metohydroxyprogesterone لزيادة خطر أحداث القلب والأوعية الدموية. وبشكل أكثر خطورة، HRT قد يؤدي إلى تطور ورم الثدي والرحم، وهذا التأثير قد حد بشكل ملحوظ استخدامه13،14. وقد تركز المزيد من الاهتمام على الآثار الواقية للقلب والأوعية الدموية من هرمون الاستروجين الخارجي تفتقر إلى النشاط الميتوتيك في الخلايا السرطانية15,16,17. دراسات متعددة في البشر والحيوانات تشير إلى أن phytoestrogens مع هياكل مماثلة لتلك التي من هرمون الاستروجين يمكن أن تلعب دورا مفيدا في حماية القلب والأوعية الدموية15,18.
وهكذا، فإن أهداف العمل الحالي هي '1' بناء نموذج الماوس نقص الإستروجين في الجسم الحي عن طريق استئصال المبيض الثنائي عن طريق شق مزدوج الردور الجانبي في apoE-/- الفئران و '2' لمقارنة الآثار الواقية القلب والأوعية الدموية من قبل الجميع تدار 17β-استراديول والزائفة (PPD)، عن طريق انتشار البندق. 17β-استراديول هو نوع واحد من الإستروجين الخارجي الذي ينتمي إلى الهرمونات الجنسية الأنثوية6,11,19. PPD, الصابونين الستيرويد وphytoestrogen من النباتات Dioscorea, وقد أفيد سابقا لممارسة خصائص مضادة للورم20.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>17&#946;-estradiol, &#62;98%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8875-250MG</td>
			<td>Estrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringes (with 25G needles)</td>
			<td>Hunan Luzhou Huikang Development Co., Ltd</td>
			<td>0.5*19TWLB</td>
			<td>Cardiac bleeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-cholesterol mouse diet</td>
			<td>Huafukang Bio-Technology</td>
			<td>N/A</td>
			<td>1.25% cholesterol, 0% cholate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Resolution In Vivo Micro-Imaging System</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo&#174;770</td>
			<td>Measurements of intima-media thickness and cardiac dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463-250ML</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Curved 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Straight 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Curved/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Straight/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monofilament suture 4-0 1/2 5*12 19mm</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd</td>
			<td>R413</td>
			<td>Suture and ligation of the tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nut cream (Nutella)</td>
			<td>Ferrero</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Medium for peroral 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiVisor optical glass binocular magnifier</td>
			<td>Dohegan Optical Company Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Assistant of identifying the tissues during ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline at pH 7.4</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Preparing 1 L saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro MultiLabel Microplate Reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite M1000</td>
			<td>Plasma TC and TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudoprotodioscin</td>
			<td>Shanghai Winherb Medical S &#38; T Development</td>
			<td>W-0427</td>
			<td>CAS registry no. 102115-79-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl, 50 mg/mL</td>
			<td>Pfizer Pharma GmbH</td>
			<td>462986</td>
			<td>Postoperative analgesia after ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sesame oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3547-1L</td>
			<td>Dissolving the 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solcoseryl Eye-Gel</td>
			<td>Menarini, Solco Basle Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Eye protection during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>MCALON</td>
			<td>MCL-6STV</td>
			<td>Image of the intimal region of aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table model high speed centrifuge</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>1-14K</td>
			<td>Preparation of plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-5G</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triglycerides (TG) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A110-1</td>
			<td>Plasma TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Total cholesterols (TC) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A111-1</td>
			<td>Plasma TC determination</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause

النساء بعد سن اليأس أكثر عرضة للإصابة بأمراض القلب والأوعية الدموية من النساء قبل سن اليأس. الفئران الإناث المبيضين (OVX) في عرض الوهن زيادة الآفات تصلب الشرايين في الأبهر مقارنة مع الفئران الإناث مع وظيفة المبيض سليمة. ومع ذلك، تفتقر النماذج المختبرية التي تنطوي على الفئران التي تعاني من نقص الإستروجين مع حالة عرضة لتصلب الشرايين. هذا العجز أمر بالغ الأهمية لأن نقص الإستروجين السريري في النساء في سن اليأس قد تفاقم حدوث اضطراب الدهون الموجودة من قبل أو الجارية وتصلب الشرايين. في هذه الدراسة، نقوم بإنشاء نموذج ماوس في الجسم الحي ناقص الإستروجين عن طريق استئصال المبيض الثنائي عن طريق شق مزدوج الظهر الجانبي في apolipoprotein E (apoE)-/- الفئران. ثم نقارن آثار 17β-استراديول والزائفة (PPD) (فيتوستروجين) تدار بشكل حول المحيط بالعين البورعنا عن طريق انتشار البندق. نجد أنه على الرغم من أن PPD يمارس بعض التأثير على الحد من وزن الجسم النهائي والبلازما TG في OVX apoE-/- الفئران، لديها قدرات مضادة للتصلب الشرايين والقلب واقية مقارنة مع نظيره 17β-استراديول. PPD هو فيتوستروجين التي تم الإبلاغ عنها لممارسة خصائص مضادة للورم. وهكذا، فإن الطريقة المقترحة تنطبق على فحص phytoestrogens عن طريق الإدارة البرفيلة لتحل محل العلاج بالهرمونات البديلة التقليدية في النساء بعد سن اليأس، والتي أفيد أن لديها يحتمل أن تكون ضارة الورم القدرات. إدارة البيروال عن طريق انتشار البندق غير الغازية، مما يجعلها قابلة للتطبيق على نطاق واسع لكثير من المرضى. تحتوي هذه المقالة على المظاهرات خطوة بخطوة من استئصال المبيض الثنائي عن طريق شق مزدوج الظهرالجانبي في أبو-/- الفئران وperoral 17β-استراديول أو استبدال هرمون الإستروجين النباتي عن طريق انتشار البندق. تتبع تحليلات وظيفة الدهون في البلازما والقلب والأوعية الدموية باستخدام تخطيط صدى القلب.

ويتضح في الشكل 1مخطط علاجي تجريبي نموذجي، كما هو مستخدم في هذه الدراسة. في الوض (العمر 28 يوماً)، تم التخدير الإناث apoE-/- C57BL/6J الفئران معavertin (ثلاثي بروموثانول؛ 200 ملغ /كغ؛ داخل اقبية). كانت الفئران ثنائيا OVX أو الشام تعمل من خلال شق الظهر 1 سم. بعد أسبوع وا?...

Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause

سريريا, نقص الإستروجين في النساء في سن اليأس قد تفاقم حدوث اضطراب الدهون وتصلب الشرايين. أنشأنا نموذج نقص الإستروجين في الجسم الحي عن طريق استئصال المبيض الثنائي عن طريق شق مزدوج الظهر الجانبي في apoE-/- الفئران. نموذج الماوس ينطبق على فحص علاجات الإستروجين الخارجية من خلل القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث.

A في فيفيفو نقص الإستروجين نموذج الماوس لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من خلل القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث

Postmenopausal women are at greater risk of developing cardiovascular diseases than premenopausal women. Female mice ovariectomized (OVX) at weaning ...

تفتقر إلى نماذج المختبرات التي تنطوي على الفئران نقص هرمون الاستروجين تقديم بيانات الطنين الطنين pons. هذا الإجراء مفيد بشكل خاص لفحص علاجات الإستروجين الخارجية من الخلل الوظيفي القلب والأوعية الدموية بعد انقطاع الطمث. الميزة الرئيسية لهذه التقنية هي أن استئصال الأوفاريت دون شق dorsolateral مزدوج هو طريقة أسهل وأقل استهلاكا للوقت التي تتجنب التصاق تجويف البطن الشديد والتهاب.إثبات الإجراء سيكون يو تشانغ يين، طالب دراسات عليا من مختبري. لإجراء عملية استئصال ثنائية في الفئران خروج المغلوب APOE، أولاً تأكيد عدم الاستجابة لدواسة منعكس ووضع الحيوان في موقف عرضة على وسادة التدفئة. ضع مرهم على عيون الحيوان واغطي الحيوان بستار جراحي.جعل شق شق واحد سنتيمتر الجانبي إلى خط الوسط، واحد سنتيمتر الجانبي إلى الأضلاع الساحلية، واستخدام ملقط لتشريح بصراحة الأنسجة تحت الجلد. باستخدام نظارات تشريح، وتحديد الأنسجة الدهنية البيضاء في تجويف البطن. باستخدام مقص صغير وملقط الصغرى، وجعل شق 0.5 إلى واحد سنتيمتر واحد من خلال اللفافة، حتى يتم التوصل إلى تجويف البطن، واستخدام ملقط صغيرة لسحب بلطف الأنسجة الدهنية البيضاء.وينبغي ملاحظة مبيض وردي على شكل توت، ملفوف في الأنسجة الدهنية، داخل تجويف البطن. استخدام خياطة أحادية ل ligate 0.5 إلى واحد سنتيمتر في الأوعية القريبة وقرن الرحم، واستخدام مقص صغير لحصاد المبيض. إعادة الأنسجة المتبقية إلى تجويف البطن، واستخدام خياطة أحادية الفردية لإغلاق بشكل منفصل العضلات والجلد طبقات.ثم حصاد المبيض على الجانب contralateral من الحيوان، كما أظهرت للتو، والسماح للماوس لاسترداد على وسادة التدفئة مع الرصد، حتى إعادة شغل كامل. مرة واحدة في الأسبوع، من الأسبوع السابق إلى 12 أسابيع بعد الجراحة، وقياس وزن الجسم من كل وهمية وتجريبية على التوازن. بالنسبة للكوليسترول الكلي والبلازميا وقياس الدهون الثلاثية، في الأسبوع 12، قم بإعداد منطقة الصدر البطني بنسبة 70٪الإيثانول، وأدخل إبرة قياس 25 في البطين الأيمن.التعرق ببطء، حتى ملليلتر واحد من الدم يتدفق في الحقنة، وصرف العينة في أنبوب جمع 1.5 ملليلتر تحتوي على عشرة ميكرولترات من 0.5 EDTA الضرس. عكس الأنبوب عدة مرات جيدا لخلط EDTA في الدم، ووضع الأنبوب على الجليد على الفور. في غضون 30 دقيقة من جمع، الطرد المركزي العينة لمدة 20 دقيقة في 400 مرة G وأربع درجات مئوية.جمع بعناية البلازما فائقة لتخزين في ناقص 80 درجة مئوية. لعزل الشريان الأورطي، في الأسبوع 12، إرفاق إبرة 25 قياس إلى حقنة 50 ملليلتر مليئة PBS، وإدراج الإبرة في البطين الأيسر من الحيوان التجريبي. قطع الأذين الأيمن لتجنب ارتفاع الضغط من الضخ، و perfuse أنسجة القلب في 05 إلى 08 ملليلتر من برنامج تلفزيوني في الدقيقة معدل التدفق.امتصاص السائل في التسريب مع أنسجة المختبر واستخدام مقص ملقط لإزالة الأضلاع والرئتين. افتح تجويف البطن لإزالة الأعضاء الداخلية، للحصول على رؤية أفضل للدهر. فهم القلب مع ملقط الصغيرة للسماح بفصل من الشريان الأبهر dorsally، من العمود الفقري، حتى التشعب الحرقفي.ثم إصلاح القلب والأبهرة لمدة 48 ساعة في 4٪ شبهformaldehyde, قبل تخزين عينة الأنسجة في المالحة في درجة حرارة الغرفة أو في درجتين إلى ثماني درجات مئوية لبضع ساعات. بعد اثني عشر أسبوعا من اتباع نظام غذائي عالي الكوليسترول، تظهر الفئران ذات القدرة على الاستئصال زيادة ملحوظة في تركيزات البلازما الكلية للكوليسترول والدهون الثلاثية. الفئران Ovariectomized، لكل تدار شفويا مع oestradiol بيتا 17، أو PPD عن طريق انتشار البندق، يحمل انخفاض كبير تركيزات الكوليسترول في الدم في البلازما الكلي من الفئران التي تعمل بالصفح.مستويات ثلاثية الدهون البلازما انخفاض في الفئران المُجَاَدَّة، لكلّ مُدار شفوياً مع 17 بيتا أويستراديول، لكن ليس مع PPD. في حين لوحظ وجود ميل نحو زيادة وزن الجسم في الفئران ذات الوفيات، مقارنة بالفئران التي تعمل بالرسوم، لا تلاحظ أي تغييرات كبيرة في وزن الجسم بشكل عام، بين المجموعات الأربع من الحيوانات. يتم زيادة البلاك الأقصى من الشريان الأورطي التصاعدي في الفئران ذات المعدلات المُجَرَّحة، مقارنةً بجميع المجموعات الأخرى، بالتزامن مع انخفاض عام في وظيفة القلب، التي لوحظت في هذه الحيوانات.علاوة على ذلك ، فإن متوسط النسبة المئوية لمنطقة الآفة الأبهرية ، نسبة إلى المنطقة الأبهرية بأكملها ، يزداد بشكل كبير في الفئران المُجَرَّة. كما هو متوقع ، يتم تقليل وجود هذه الآفات مع oestradiol 17 بيتا ، أو علاج PPD. الخطر الرئيسي لعملية استئصال الأوفاري هو الربط الحالب، الذي يؤدي إلى ارتفاع معدل الوفيات.تذكر أيضا لقطع عميق بالقرب من فروع الشريان الكلوي، لتجنب الضرر الأبهري.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

الآلي الصوتية الاستغناء عن التخفيف المسلسل من الببتيد ناهضات في الفعالية تحديد فحوصات

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

إعداد و<em&gt; في فيفو</em&gt; استخدام من التحقيق على أساس آخر ل<em&gt; N</em&gt; -acylethanolamine حمض أميداز

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical ...

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

غشاء الدماغ تجزئة: أ<em&gt; إكس فيفو</em&gt; نهج لتقييم توطين البروتين سوبسينابتيك

Assessing the synaptic protein composition and function constitutes an important challenge in neuroscience. However, it is not easy to evaluate ...

Dynamic Proteomic and miRNA Analysis of Polysomes from Isolated Mouse Heart After Langendorff Perfusion

دينامية البروتين وميرنا "تحليل بوليسوميس" من "قلب الفأرة متفرقة بعد نضح لانجيندورف"

Studies in dynamic changes in protein translation require specialized methods. Here we examined changes in newly-synthesized proteins in response to ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

قياس وتفسير معدلات استهلاك الأوكسجين كلياً يطير رئيس قطاعات

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

Kinase Inhibitor Screening In Self-assembled Human Protein Microarrays

فحص مثبطات كيناز في ميكروصفائف البروتين البشري المجمعة ذاتيا

The screening of kinase inhibitors is crucial for better understanding properties of a drug and for the identification of potentially new targets with ...

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

الفحص الخاص بمثبطات بيروفوسفاتاسي الغشائية المربوطة بغشاء الثموغا

Membrane-bound pyrophosphatases (mPPases) are dimeric enzymes that occur in bacteria, archaea, plants, and protist parasites. These proteins cleave ...

Visualization of Estrogen Receptors in Colons of Mice with TNBS-Induced Crohn's Disease using Immunofluorescence

تصور مستقبلات هرمون الاستروجين في كولونات الفئران مع مرض كرون TNBS الناجم ة باستخدام الفلورسينالمناعي

Crohn&#39;s disease is the most diagnosed type of inflammatory bowel disease. Chronic inflammation developing in the intestine leads to peristalsis ...

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  &#946; Reporter Assay

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  ÃƒÅ½Ã‚Â² Reporter Assay

فحص Phytoestrogens باستخدام مستقبلات الاستروجين القائم على الخلية β مراسل Assay

Plants are a source of food for many animals, and&#160;they can produce thousands of chemicals. Some of these compounds affect physiological processes in ...

Transplantation of Neonatal Mouse Cardiac Macrophages into Adult Mice

زرع الضامة القلبية للفأر الوليدي في الفئران البالغة

In an injured neonatal myocardium, macrophages facilitate cardiomyocyte proliferation and angiogenesis and promote heart regeneration. The present study ...