Name: an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause
Uploaded: 2019-08-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

이 작품은 중국 국립 자연 과학 재단 (81202526 에 J.X.), 중국 국립 자연 과학 재단 (81302769 - B.S.), 베이징 시 자연 과학 재단 (47144226 - B.S.), 중국 박사 학위에 의해 지원되었습니다. 과학재단(20110490325 ~ J.X.), 중국교육부 박사과정 재단(2011106120031 ~B.S.)

모든 동물 관리 및 실험 프로토콜은 중국 의학 아카데미 및 북경 연합 의과 대학의 기관 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었습니다 (허가 번호 : SYXK (베이징) 2013-0023). 아포에-/- 마우스의 기원은 C57BL/6J9,10이다.
1. apoE에서 이중 등측 절개를 통한 양측 난소 절제술-/- 마우스
<ol><li>위닝 (나이 28 일), 아베르틴 (?...

<ol>
	<li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), e38-e360 (2016).</li><li>Packard, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+health+and+disease+in+women.">Cardiovascular health and disease in women.</a> The New England Journal of Medicine. 329 (4), 247-256 (1993).</li><li>Samaan, S. A., Crawford, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+and+cardiovascular+function+after+menopause.">Estrogen and cardiovascular function after menopause.</a> Journal of the American College of Cardiology. 26 (6), 1403-1410 (1995).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+atherosclerosis.">Inflammation in atherosclerosis.</a> Nature. 420 (6917), 868-874 (2002).</li><li>Tremollieres, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hormone+replacement+therapy+on+age-related+increase+in+carotid+artery+intima-media+thickness+in+postmenopausal+women.">Effect of hormone replacement therapy on age-related increase in carotid artery intima-media thickness in postmenopausal women.</a> Atherosclerosis. 153 (1), 81-88 (2000).</li><li>Bourassa, P. A., Milos, P. M., Gaynor, B. J., Breslow, J. L., Aiello, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+reduces+atherosclerotic+lesion+development+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Estrogen reduces atherosclerotic lesion development in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (3), 10022-10027 (1996).</li><li>Squadrito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genistein+supplementation+and+estrogen+replacement+therapy+improve+endothelial+dysfunction+induced+by+ovariectomy+in+rats.">Genistein supplementation and estrogen replacement therapy improve endothelial dysfunction induced by ovariectomy in rats.</a> Cardiovascular Research. 45 (2), 454-462 (2000).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+enhanced+contractility+in+microvessels+from+ovariectomized+rats:+roles+of+oxidative+stress+and+perivascular+adipose+tissue.">Endothelial dysfunction and enhanced contractility in microvessels from ovariectomized rats: roles of oxidative stress and perivascular adipose tissue.</a> Hypertension. 63 (5), 1063-1069 (2014).</li><li>Zhang, S. H., Reddick, R. L., Piedrahita, J. A., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+Hypercholesterolemia+and+Arterial+Lesions+in+Mice+Lacking+Apolipoprotein+E.">Spontaneous Hypercholesterolemia and Arterial Lesions in Mice Lacking Apolipoprotein E.</a> Science. 258 (5081), 468-471 (1992).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-Deficient+Mice+Develop+Lesions+of+All+Phases+of+Atherosclerosis+Throughout+the+Arterial+Tree.">ApoE-Deficient Mice Develop Lesions of All Phases of Atherosclerosis Throughout the Arterial Tree.</a> Arteriosclerosis and Thrombosis. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17-estradiol+Replacement+in+Rats+and+Mice:+A+Visual+Demonstration.">Ovariectomy and 17-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. 64 (e4013), 1-4 (2012).</li><li>Rossouw, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+and+benefits+of+estrogen+plus+progestin+in+healthy+postmenopausal+women:+principal+results+From+the+Women's+Health+Initiative+randomized+controlled+trial.">Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women: principal results From the Women's Health Initiative randomized controlled trial.</a> The Journal of the American Medical Association. 288 (3), 321-333 (2002).</li><li>Kumle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declining+breast+cancer+incidence+and+decreased+HRT+use.">Declining breast cancer incidence and decreased HRT use.</a> Lancet. 372 (9639), 608-610 (2008).</li><li>Jager, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized+comparison+of+triptorelin+and+tamoxifen+as+treatment+of+progressive+ovarian+cancer.">A randomized comparison of triptorelin and tamoxifen as treatment of progressive ovarian cancer.</a> Anticancer Research. 15 (6B), 2639-2642 (1995).</li><li>Bhathena, S. J., Velasquez, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+role+of+dietary+phytoestrogens+in+obesity+and+diabetes.">Beneficial role of dietary phytoestrogens in obesity and diabetes.</a> The American Journal of Clinical Nutrition. 76 (6), 1191-1201 (2002).</li><li>Wang, L., Qiu, X. M., Hao, Q., Li, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+a+Chinese+herbal+medicine+in+atherosclerosis+via+estrogen+receptor+beta+mediating+nitric+oxide+production+and+NF-kappaB+suppression+in+endothelial+cells.">Anti-inflammatory effects of a Chinese herbal medicine in atherosclerosis via estrogen receptor beta mediating nitric oxide production and NF-kappaB suppression in endothelial cells.</a> Cell Death and Disease. 4 (e551), 1-13 (2013).</li><li>Xiao, J., Wang, N. L., Sun, B., Cai, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+mediates+the+effects+of+pseudoprotodiocsin+on+adipogenesis+in+3T3-L1+cells.">Estrogen receptor mediates the effects of pseudoprotodiocsin on adipogenesis in 3T3-L1 cells.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 299 (1), C128-C138 (2010).</li><li>Guivarc'h, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+Role+of+Nuclear+Versus+Membrane+Estrogen+Receptor+alpha+in+Arterial+Protection:+Implications+for+Estrogen+Receptor+alpha+Modulation+in+Cardiovascular+Prevention/Safety.">Predominant Role of Nuclear Versus Membrane Estrogen Receptor alpha in Arterial Protection: Implications for Estrogen Receptor alpha Modulation in Cardiovascular Prevention/Safety.</a> Journal of the American Heart Association. 7 (13), 1-17 (2018).</li><li>Osako, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+inhibits+vascular+calcification+via+vascular+RANKL+system:+common+mechanism+of+osteoporosis+and+vascular+calcification.">Estrogen inhibits vascular calcification via vascular RANKL system: common mechanism of osteoporosis and vascular calcification.</a> Circulation Research. 107 (4), 466-475 (2010).</li><li>Ivanova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+of+some+saponins+and+phenolic+components+of+Tribulus+terrestris+and+Smilax+excelsa+as+MDR+modulators.">Screening of some saponins and phenolic components of Tribulus terrestris and Smilax excelsa as MDR modulators.</a> In vivo. 23 (4), 545-550 (2009).</li><li>Xiao, J., Zhu, T., Yin, Y. Z., Sun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1,+a+unique+constituent+of+Panax+notoginseng,+blinds+proinflammatory+monocytes+to+protect+against+cardiac+hypertrophy+in+ApoE(-/-)+mice.">Notoginsenoside R1, a unique constituent of Panax notoginseng, blinds proinflammatory monocytes to protect against cardiac hypertrophy in ApoE(-/-) mice.</a> European Journal of Pharmacology. 833 (15), 441-450 (2018).</li><li>Sun, B., Xiao, J., Sun, X. B., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1+attenuates+cardiac+dysfunction+in+endotoxemic+mice:+an+insight+into+oestrogen+receptor+activation+and+PI3K/Akt+signalling.">Notoginsenoside R1 attenuates cardiac dysfunction in endotoxemic mice: an insight into oestrogen receptor activation and PI3K/Akt signalling.</a> British Journal of Pharmacology. 168 (7), 1758-1770 (2013).</li><li>Adams, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+coronary+artery+atherosclerosis+by+17-beta+estradiol+in+ovariectomized+monkeys.+Lack+of+an+effect+of+added+progesterone.">Inhibition of coronary artery atherosclerosis by 17-beta estradiol in ovariectomized monkeys. Lack of an effect of added progesterone.</a> Arteriosclerosis. 10 (6), 1051-1057 (1990).</li><li>Keaney, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17+beta-estradiol+preserves+endothelial+vasodilator+function+and+limits+low-density+lipoprotein+oxidation+in+hypercholesterolemic+swine.">17 beta-estradiol preserves endothelial vasodilator function and limits low-density lipoprotein oxidation in hypercholesterolemic swine.</a> Circulation. 89 (5), 2251-2259 (1994).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-deficient+mice+develop+lesions+of+all+phases+of+atherosclerosis+throughout+the+arterial+tree.">ApoE-deficient mice develop lesions of all phases of atherosclerosis throughout the arterial tree.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen-induced+recovery+of+autonomic+function+after+middle+cerebral+artery+occlusion+in+male+rats.">Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats.</a> American Journal of Physiology- Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 281 (5), R1531-R1539 (2001).</li><li>Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+effects+of+17beta-oestradiol+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 25 (3), 414-420 (2005).</li><li>Pignoli, P., Tremoli, E., Poli, A., Oreste, P., Paoletti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+plus+medial+thickness+of+the+arterial+wall:+a+direct+measurement+with+ultrasound+imaging.">Intimal plus medial thickness of the arterial wall: a direct measurement with ultrasound imaging.</a> Circulation. 74 (6), 1399-1406 (1986).</li><li>Hodgin, J. B., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+estrogen+and+mouse+models+of+atherosclerosis.">Minireview: estrogen and mouse models of atherosclerosis.</a> Endocrinology. 143 (12), 4495-4501 (2002).</li><li>Bush, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+mortality+and+noncontraceptive+use+of+estrogen+in+women:+results+from+the+Lipid+Research+Clinics+Program+Follow-up+Study.">Cardiovascular mortality and noncontraceptive use of estrogen in women: results from the Lipid Research Clinics Program Follow-up Study.</a> Circulation. 75 (6), 1102-1109 (1987).</li><li>Marsh, M. M., Walker, V. R., Curtiss, L. K., Banka, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+atherosclerosis+by+estrogen+is+independent+of+plasma+cholesterol+levels+in+LDL+receptor-deficient+mice.">Protection against atherosclerosis by estrogen is independent of plasma cholesterol levels in LDL receptor-deficient mice.</a> Journal of Lipid Research. 40 (5), 893-900 (1999).</li></ol>

여기에서 기술된 방법론은 갱년기 여자에서 보인 지질 중단 및 동맥 경화증을 닮은 마우스 모형입니다. 그것은 잘 문서화 된 폐 경 후 여성에서 에스트로겐 결핍 점진적으로 복잡 하 고 광범위 한 동맥 경화 병 변기존의 또는 지속적인콜레스테롤 혈 증의 발생률을 악화 시킬 수 있습니다 1. 클리닉에서 동맥경화증이 발생하기 쉬운 상태를 모방하기 위해, 아포에결핍 마우스, 아테...

역학 및 임상 연구에 따르면 폐경 후 여성은 폐경 전 여성1,2보다심혈관 질환의 위험이 상당히 더 큽에 있는 것으로 나타났습니다. 호르몬 대체 요법 (HRT)는 심혈 관 질환의 상대적 위험을0.37-0.79 3으로 줄일 수 있습니다. 다른 합병증 중, 심혈 관 질환에 의해 발생 하는동맥 경화 는 전세계 사망의 주요 원인 4. 그러나, 에스트로겐 결핍 마우스 를 제시 하는 동맥 경화 경향이 상태를 포함 하는 실험실 모델 부족. 이 프로토콜은 폐경 후 심혈관 기능 장애의 외인성 에스트로겐 치료를 스크리닝하기 위한 생체 내 에스트로겐 결핍 마우스 모델을 제공한다.
이전 연구는 높은 콜레스테롤 식단을 공급 죽상 경화성 설치류에 OVX의 적용이 동맥 경화증으로 고통받는 폐경후 여성을 모방 할 수 있음을 보여 5,6,7,8. 갱년기 여성의 죽상 경화성 상태를 닮은 재현 가능하고 편리한 동물 모델은 외인성 에스트로겐 연구의 기초입니다. 여기서, 양측 난소 절제술의 이중 등쪽-측각절개는 동맥경화-경향이 있는 아포리포프로테인 E 녹아웃(apoE-/-) 마우스9,10에적용하였다. 중간 복부 또는 등측 절개에 비해, 이중 등측 절개는 심한 복강 접착 및 염증을 피할 수있는 쉽고 적은 시간 소모적 인 방법입니다. 헤이즐넛 스프레드를 통한 항포랄 투여(재료 표참조)는 비침습적이고 편리하며, 장기 투여모드(11)로서널리 적용가능하다. 느린 방출 펠릿 이식도인기 6. 그러나, 임플란트는 OVX를 행한 마우스에서 특히 감염의 부각을 악화시킬 수 있습니다. 다른 비침습적 투여 모드, 예: 경구 관장 및 물 관리, 또한 많은 단점이 있다. 경구 관자는 전형적으로 마우스를 강조하고 식도 상해를 일으키는 원인이 될 수 있습니다. 마시는 물을 통해 호르몬을 관리 하는 것은 매우 도움이; 그러나 외인성 에스트로겐이 물에 불용성이기 때문에 유화제로서 DMSO를 첨가하는 것은 불가피합니다. 여기에서, 우리는 장기 적인 관리를 위한 헤이즐넛 퍼짐을 통해 peroral 17β-estradiol 또는 식물성 에스트로겐 호르몬 보충을 선택했습니다.
최근, 폐경 후 여성의 심혈관 시스템에 대한 HRT의 유익한 효과는 여성 건강 이니셔티브(WHI) 시험12에서논란이 되고 있다. 한편으로는 외인성 에스트로겐만으로도 심혈관 시스템에 유익한 효과를 발휘합니다. 다른 한편으로는, 그것은 심혈 관 이벤트의 위험을 증가 하는 metohydroxyproge스테론 아세테이트와 결합 할 수 있습니다. 더 심각하게, HRT는 유방과 자궁 종양 진행으로 이끌어 낼 수 있고, 이 효력은 그것의 사용13,14를현저하게 제한했습니다. 종양 세포 에서 유사 분열 활성이 결여된 외인성 에스트로겐의 심혈관 보호 효과에 더 많은 관심이 집중되고있다 15,16,17. 인간과 동물에 있는 다중 연구 결과는 에스트로겐과 유사한 구조물을 가진 식물성 에스트로겐이 심장 혈관 보호에 있는 유익한 역할을 할 수 있다는 것을 건의합니다15,18.
따라서, 본 작업의 목적은 (i) 양자 간 난소 절제에 의한 생체 내 에스트로겐 결핍 마우스 모델을 apoE-/- 마우스에서 이중 등측 절개를 통해 구축하고 (ii) 심혈관 보호 효과를 perorally비교하는 것이다. 헤이즐넛 스프레드를 통해 17β-estradiol 및 슈도 프로토 디오신 (PPD)을 투여. 17β-estradiol은 여성 성 호르몬6,11,19에속하는 외인성 에스트로겐의 한 종류이다. DIOSCOREA 식물에서 스테로이드 사포닌 및 식물에스트로겐인 PPD는, 이전에 항종양 성질을 발휘하기 위해 보고되었다20.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>17&#946;-estradiol, &#62;98%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8875-250MG</td>
			<td>Estrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringes (with 25G needles)</td>
			<td>Hunan Luzhou Huikang Development Co., Ltd</td>
			<td>0.5*19TWLB</td>
			<td>Cardiac bleeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-cholesterol mouse diet</td>
			<td>Huafukang Bio-Technology</td>
			<td>N/A</td>
			<td>1.25% cholesterol, 0% cholate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Resolution In Vivo Micro-Imaging System</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo&#174;770</td>
			<td>Measurements of intima-media thickness and cardiac dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463-250ML</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Curved 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Straight 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Curved/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Straight/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monofilament suture 4-0 1/2 5*12 19mm</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd</td>
			<td>R413</td>
			<td>Suture and ligation of the tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nut cream (Nutella)</td>
			<td>Ferrero</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Medium for peroral 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiVisor optical glass binocular magnifier</td>
			<td>Dohegan Optical Company Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Assistant of identifying the tissues during ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline at pH 7.4</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Preparing 1 L saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro MultiLabel Microplate Reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite M1000</td>
			<td>Plasma TC and TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudoprotodioscin</td>
			<td>Shanghai Winherb Medical S &#38; T Development</td>
			<td>W-0427</td>
			<td>CAS registry no. 102115-79-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl, 50 mg/mL</td>
			<td>Pfizer Pharma GmbH</td>
			<td>462986</td>
			<td>Postoperative analgesia after ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sesame oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3547-1L</td>
			<td>Dissolving the 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solcoseryl Eye-Gel</td>
			<td>Menarini, Solco Basle Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Eye protection during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>MCALON</td>
			<td>MCL-6STV</td>
			<td>Image of the intimal region of aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table model high speed centrifuge</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>1-14K</td>
			<td>Preparation of plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-5G</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triglycerides (TG) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A110-1</td>
			<td>Plasma TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Total cholesterols (TC) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A111-1</td>
			<td>Plasma TC determination</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause

폐경 후 여성은 폐경 전 여성보다 심혈관 질환이 발생할 위험이 더 큽입니다. 여성 마우스 난소 (OVX) 위닝 디스플레이에서 그대로 난소 기능을 가진 여성 마우스에 비해 대동맥에서 죽상 경화성 병변을 증가시켰다. 그러나, 동맥 경화 경향이 상태 와 에스트로겐 결핍 마우스를 포함 하는 실험실 모델 부족. 이 적자는 갱년기 여성의 임상 에스트로겐 결핍이 기존 또는 지속적인 지질 장애 및 동맥 경화증의 발생률을 악화시킬 수 있기 때문에 매우 중요합니다. 이 연구에서, 우리는 apolipoprotein E (apoE)-/- 마우스에 있는 이중 등쪽 측삭 절개를 통해 양측 난소 절제술에 의하여 생체 내 에스트로겐 결핍 마우스 모형을 설치합니다. 그런 다음 헤이즐넛 스프레드를 통해 perorally 투여된 17β-estradiol 및 슈도프로토디오신(PPD) (식물성 에스트로겐)의 효과를 비교합니다. 우리는 PPD가 OVX apoE-/- 마우스에서 최종 체중 과 혈장 TG를 감소시키는 데 약간의 영향을 미치지만, 17β-estradiol 대응과 비교할 수 있는 항 동맥 경화 및 심장 보호 능력을 가지고 있음을 발견했습니다. PPD는 항 종양 특성을 발휘 하는 보고 된 식물 에스트로겐. 따라서, 제안된 방법은 폐경 후 여성의 전통적인 호르몬 대체 요법을 대체하기 위해 페랄라 투여를 통한 식물성 에스트로겐 스크리닝에 적용되며, 이는 잠재적으로 해로운 종양유전학을 가지고 있는 것으로 보고되었다. 용량. 헤이즐넛 퍼짐을 통한 페랄랄 투여는 비침습적이며, 많은 환자에게 널리 적용가능하다. 이 문서는 apoE-/- 마우스와 페랄 17β-estradiol 또는 헤이즐넛 확산을 통해 식물 에스트로겐 호르몬 교체에 이중 등쪽 측면 절개를 통해 양측 난소 절제술의 단계별 데모를 포함. 심초음파를 이용한 혈장 지질 및 심혈관 기능 분석은 다음과 같습니다.

본 연구에서 사용되는 전형적인 실험 적 치료 방식은 그림1에 예시되어 있습니다. 위닝(나이 28일)에서, 암컷 아포에-/- C57BL/6J 마우스는 아베르틴(tribromoethanol; 200 mg/kg; 복강 내)으로 마취시켰다. 마우스는 양측 OVX 또는 1 cm 등절개를 통해 조작하였다. 양측 OVX 후 1주일, 마우스는 12주 동안 고콜레스테롤 식단(1.25% 콜레스테롤, 0% 콜레이트)을 공?...

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An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause

임상적으로, 갱년기 여성의 에스트로겐 결핍은 지질 장애및 동맥 경화증의 발생률을 악화시킬 수 있습니다. 우리는 apoE-/- 마우스에 있는 이중 등측 절개를 통해 양측 난소 절제술에 의하여 생체 내 에스트로겐 부족 모형을 설치했습니다. 마우스 모델은 폐경 후 심혈관 기능 장애의 외인성 에스트로겐 치료를 스크리닝하는 데 적용가능하다.

폐경 후 심장 혈관 기능 장애의 외인성 에스트로겐 치료를 선별하기위한 생체 내 에스트로겐 결핍 마우스 모델

Postmenopausal women are at greater risk of developing cardiovascular diseases than premenopausal women. Female mice ovariectomized (OVX) at weaning ...

동맥 경화증 폰 데이터를 제시하는 에스트로겐 결핍 마우스를 포함하는 실험실 모형은 부족합니다. 이 절차는 폐경 후 심장 혈관 기능 장애의 외인성 에스트로겐 치료를 선별하는 데 특히 도움이됩니다. 이 기술의 주요 장점은 이중 등쪽 절개없이 오뇌 절제술이 심한 복강 부호 접착 및 염증을 피하는 보다 쉽고 시간이 덜 소요되는 방법입니다.절차를 시연하는 것은 내 실험실에서 대학원생인 유장인(Yue-Zhang Yin)이 될 것입니다. APOE 녹아웃 마우스에서 양측 의 병모 절제술을 수행하기 위해 먼저 페달 반사에 대한 반응부족을 확인하고 동물을 가열 패드에 경향이있는 위치에 놓습니다. 동물의 눈에 연고를 바르고 수술을 받는 커튼으로 동물을 덮습니다.중간라인에 1센티미터 절개 측면, 그리고 1센티미터 측면을 코스트 립에 만들고, 집게를 사용하여 피하 조직을 무뚝뚝하게 해부합니다. 해부 고글을 사용하여 복강내의 흰색 지방 조직을 식별합니다. 마이크로 가위와 마이크로 집게를 사용하여, 복강에 도달할 때까지 근막을 통해 0.5~1센티미터 절개를 하고 마이크로 포셉을 사용하여 백색 지방 조직을 부드럽게 후퇴시킵니다.지방 조직에 싸여 있는 분홍색 뽕나무 모양난소는 복강 내에서 관찰되어야 합니다. 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 0.5~1센티미터의 근위용기와 자궁 경적을 장식하고 마이크로 가위를 사용하여 난소를 수확합니다. 나머지 조직을 복강에 돌려보내고, 개별 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 근육과 피부층을 따로 닫습니다.그런 다음 동물의 모순된 면에 난소를 수확하고, 방금 설명했듯이, 마우스가 전체 재림까지 모니터링이 있는 가열 패드에서 회복할 수 있도록 합니다. 일주일에 한 번, 수술 후 12 주 전에 주부터, 균형에 각 가짜와 실험 동물의 체중을 측정. 플라즈마 총 콜레스테롤 및 트리글리세라이드 측정을 위해 12주차에 70%에탄올로 복부 가슴 부위를 준비하고 25게이지 바늘을 오른쪽 심실에 삽입합니다.천천히 흡인, 혈액의 1 밀리리터가 주사기로 흐르고, 0.5 어금니 EDTA의 10 마이크로 리터를 포함하는 1.5 밀리리터 수집 튜브로 샘플을 분배. 튜브를 여러 번 철저히 반전하여 EDTA를 혈액에 섞어 즉시 튜브를 얼음 위에 놓습니다. 수집 후 30분 이내에 샘플을 400배, 섭씨 4도에서 20분 간 원심분리합니다.섭씨 영하 80도에서 보관을 위해 플라즈마 상체를 신중하게 수집합니다. 대동맥을 격리하려면 12주차에 PBS로 채워진 50 밀리리터 주사기에 25 게이지 바늘을 부착하고 실험 동물의 왼쪽 심실에 바늘을 삽입합니다. 관류로부터 고압을 피하기 위해 오른쪽 아트리움을 자르고, 분당 PBS의 05~08 밀리리터에서 심장 조직을 퍼퓨아.실험실 조직으로 관류 유체를 흡수하고 가위와 집게를 사용하여 갈비뼈와 폐를 제거합니다. 대자의 더 나은 보기를 위해, 내부 장기를 제거하기 위해 복강을 엽니 다. 요약 분면으로 심장을 잡고 대마를 척추에서 비강 분기까지 분리할 수 있도록 합니다.그런 다음 심장과 대어타를 48시간 동안 4%파라포름알데히드로 수정한 후, 실온에서 또는 몇 시간 동안 2~8도의 식염수에 티슈 샘플을 저장합니다. 고콜레스테롤 식단의 12 주 후, ovariectomized 마우스는 혈장 총 콜레스테롤과 트리글리세라이드 농도의 현저한 증가를 보여줍니다. 17베타 oestradiol 또는 헤이즐넛 스프레드를 통해 PPD로 구두로 투여된 Ovariectomized 마우스는 샴 조작 마우스보다 플라즈마 총 콜레스테롤 농도가 현저히 낮습니다.플라즈마 트리글리세라이드 수준은 17베타 oestradiol로 구두로 투여되었지만 PPD로는 투여되지 않는 소혈관 축화 마우스에서 감소합니다. 증가 된 체중으로 경향은 암소 한 마우스에서 관찰 되는 동안, sham-조작 된 쥐에 비해, 체중에 중요 한 변화는 전반적인 관찰, 동물의 4 그룹 사이. 상승 대동맥의 최대 플라크는 이러한 동물에서 관찰 심장 기능의 전반적인 감소와 함께, 다른 모든 그룹에 비해, ovariectomized 마우스에서 증가한다.또한, 대동맥 병변 영역의 평균 백분율은 전체 대동맥 부위에 비해, 난소성 마우스에서 현저히 증가된다. 예상대로, 이러한 병변의 존재는 17 베타 oestradiol, 또는 PPD 치료로 감소된다. 오병 절제술 수술의 주요 위험은 높은 사망률을 초래하는 요관 결찰입니다.또한 대동맥 손상을 피하기 위해 신장 동맥 가지 근처에서 깊이 자르는 것을 기억하십시오.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

효능 판별 분석에서 펩타이드 작용제의 직렬 희석에 대한 분배 자동 음향

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

연구

생화학

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

준비 및<em&gt; 생체</em&gt; 액티비티 기반 프로브의 사용을위한<em&gt; N</em&gt; -acylethanolamine 산 아미 다제

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical ...

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

뇌막 분획 화 :<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Subsynaptic Protein Localization 평가 방법

Assessing the synaptic protein composition and function constitutes an important challenge in neuroscience. However, it is not easy to evaluate ...

Dynamic Proteomic and miRNA Analysis of Polysomes from Isolated Mouse Heart After Langendorff Perfusion

동적 Proteomic 그리고 미르 Langendorff 관류 후 절연 마우스 마음에서에서 Polysomes의 분석

Studies in dynamic changes in protein translation require specialized methods. Here we examined changes in newly-synthesized proteins in response to ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

측정 및 해석의 전체 산소 소비 속도 비행 머리 세그먼트

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

Kinase Inhibitor Screening In Self-assembled Human Protein Microarrays

자체 조립된 인간 단백질 마이크로어레이에서 키나제 억제제 스크리닝

The screening of kinase inhibitors is crucial for better understanding properties of a drug and for the identification of potentially new targets with ...

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

써모토가 마리티마 멤브레인 경계 파이로포스파타제 억제제 스크리닝

Membrane-bound pyrophosphatases (mPPases) are dimeric enzymes that occur in bacteria, archaea, plants, and protist parasites. These proteins cleave ...

Visualization of Estrogen Receptors in Colons of Mice with TNBS-Induced Crohn's Disease using Immunofluorescence

면역 형광을 사용하여 TNBS 유도 크론 병을 가진 마우스의 결장에서 에스트로겐 수용체의 가시화

Crohn&#39;s disease is the most diagnosed type of inflammatory bowel disease. Chronic inflammation developing in the intestine leads to peristalsis ...

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  &#946; Reporter Assay

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  ÃƒÅ½Ã‚Â² Reporter Assay

세포 기반 에스트로겐 수용체를 사용하여 식물에스트로겐에 대한 검사 β 리포터 분석

Plants are a source of food for many animals, and&#160;they can produce thousands of chemicals. Some of these compounds affect physiological processes in ...

Transplantation of Neonatal Mouse Cardiac Macrophages into Adult Mice

신생아 마우스 심장 대식세포를 성인 마우스로 이식

In an injured neonatal myocardium, macrophages facilitate cardiomyocyte proliferation and angiogenesis and promote heart regeneration. The present study ...