Name: an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause
Uploaded: 2019-08-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

Эта работа была поддержана Национальным фондом естественных наук Китая (81202526 до J.X.), Национальным фондом естественных наук Китая (81302769 до B.S.), Пекинским муниципальным фондом естественных наук (47144226 до B.S.), Китайским постдокторским Научный фонд (20110490325 до J.X.), и Ph.D. Программы Фонда Министерства образования Китая (20121106120031 до B.S.).

Все протоколы по уходу за животными и экспериментальные протоколы были одобрены Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Китайской академии медицинских наук и Пекинским союзом медицинского колледжа (разрешение No.: SYXK (Пекин) 2013-0023). Происхождение apoE-/- мышей C...

<ol>
	<li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), e38-e360 (2016).</li><li>Packard, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+health+and+disease+in+women.">Cardiovascular health and disease in women.</a> The New England Journal of Medicine. 329 (4), 247-256 (1993).</li><li>Samaan, S. A., Crawford, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+and+cardiovascular+function+after+menopause.">Estrogen and cardiovascular function after menopause.</a> Journal of the American College of Cardiology. 26 (6), 1403-1410 (1995).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+atherosclerosis.">Inflammation in atherosclerosis.</a> Nature. 420 (6917), 868-874 (2002).</li><li>Tremollieres, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hormone+replacement+therapy+on+age-related+increase+in+carotid+artery+intima-media+thickness+in+postmenopausal+women.">Effect of hormone replacement therapy on age-related increase in carotid artery intima-media thickness in postmenopausal women.</a> Atherosclerosis. 153 (1), 81-88 (2000).</li><li>Bourassa, P. A., Milos, P. M., Gaynor, B. J., Breslow, J. L., Aiello, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+reduces+atherosclerotic+lesion+development+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Estrogen reduces atherosclerotic lesion development in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (3), 10022-10027 (1996).</li><li>Squadrito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genistein+supplementation+and+estrogen+replacement+therapy+improve+endothelial+dysfunction+induced+by+ovariectomy+in+rats.">Genistein supplementation and estrogen replacement therapy improve endothelial dysfunction induced by ovariectomy in rats.</a> Cardiovascular Research. 45 (2), 454-462 (2000).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+enhanced+contractility+in+microvessels+from+ovariectomized+rats:+roles+of+oxidative+stress+and+perivascular+adipose+tissue.">Endothelial dysfunction and enhanced contractility in microvessels from ovariectomized rats: roles of oxidative stress and perivascular adipose tissue.</a> Hypertension. 63 (5), 1063-1069 (2014).</li><li>Zhang, S. H., Reddick, R. L., Piedrahita, J. A., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+Hypercholesterolemia+and+Arterial+Lesions+in+Mice+Lacking+Apolipoprotein+E.">Spontaneous Hypercholesterolemia and Arterial Lesions in Mice Lacking Apolipoprotein E.</a> Science. 258 (5081), 468-471 (1992).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-Deficient+Mice+Develop+Lesions+of+All+Phases+of+Atherosclerosis+Throughout+the+Arterial+Tree.">ApoE-Deficient Mice Develop Lesions of All Phases of Atherosclerosis Throughout the Arterial Tree.</a> Arteriosclerosis and Thrombosis. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17-estradiol+Replacement+in+Rats+and+Mice:+A+Visual+Demonstration.">Ovariectomy and 17-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. 64 (e4013), 1-4 (2012).</li><li>Rossouw, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+and+benefits+of+estrogen+plus+progestin+in+healthy+postmenopausal+women:+principal+results+From+the+Women's+Health+Initiative+randomized+controlled+trial.">Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women: principal results From the Women's Health Initiative randomized controlled trial.</a> The Journal of the American Medical Association. 288 (3), 321-333 (2002).</li><li>Kumle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declining+breast+cancer+incidence+and+decreased+HRT+use.">Declining breast cancer incidence and decreased HRT use.</a> Lancet. 372 (9639), 608-610 (2008).</li><li>Jager, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized+comparison+of+triptorelin+and+tamoxifen+as+treatment+of+progressive+ovarian+cancer.">A randomized comparison of triptorelin and tamoxifen as treatment of progressive ovarian cancer.</a> Anticancer Research. 15 (6B), 2639-2642 (1995).</li><li>Bhathena, S. J., Velasquez, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+role+of+dietary+phytoestrogens+in+obesity+and+diabetes.">Beneficial role of dietary phytoestrogens in obesity and diabetes.</a> The American Journal of Clinical Nutrition. 76 (6), 1191-1201 (2002).</li><li>Wang, L., Qiu, X. M., Hao, Q., Li, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+a+Chinese+herbal+medicine+in+atherosclerosis+via+estrogen+receptor+beta+mediating+nitric+oxide+production+and+NF-kappaB+suppression+in+endothelial+cells.">Anti-inflammatory effects of a Chinese herbal medicine in atherosclerosis via estrogen receptor beta mediating nitric oxide production and NF-kappaB suppression in endothelial cells.</a> Cell Death and Disease. 4 (e551), 1-13 (2013).</li><li>Xiao, J., Wang, N. L., Sun, B., Cai, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+mediates+the+effects+of+pseudoprotodiocsin+on+adipogenesis+in+3T3-L1+cells.">Estrogen receptor mediates the effects of pseudoprotodiocsin on adipogenesis in 3T3-L1 cells.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 299 (1), C128-C138 (2010).</li><li>Guivarc'h, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+Role+of+Nuclear+Versus+Membrane+Estrogen+Receptor+alpha+in+Arterial+Protection:+Implications+for+Estrogen+Receptor+alpha+Modulation+in+Cardiovascular+Prevention/Safety.">Predominant Role of Nuclear Versus Membrane Estrogen Receptor alpha in Arterial Protection: Implications for Estrogen Receptor alpha Modulation in Cardiovascular Prevention/Safety.</a> Journal of the American Heart Association. 7 (13), 1-17 (2018).</li><li>Osako, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+inhibits+vascular+calcification+via+vascular+RANKL+system:+common+mechanism+of+osteoporosis+and+vascular+calcification.">Estrogen inhibits vascular calcification via vascular RANKL system: common mechanism of osteoporosis and vascular calcification.</a> Circulation Research. 107 (4), 466-475 (2010).</li><li>Ivanova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+of+some+saponins+and+phenolic+components+of+Tribulus+terrestris+and+Smilax+excelsa+as+MDR+modulators.">Screening of some saponins and phenolic components of Tribulus terrestris and Smilax excelsa as MDR modulators.</a> In vivo. 23 (4), 545-550 (2009).</li><li>Xiao, J., Zhu, T., Yin, Y. Z., Sun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1,+a+unique+constituent+of+Panax+notoginseng,+blinds+proinflammatory+monocytes+to+protect+against+cardiac+hypertrophy+in+ApoE(-/-)+mice.">Notoginsenoside R1, a unique constituent of Panax notoginseng, blinds proinflammatory monocytes to protect against cardiac hypertrophy in ApoE(-/-) mice.</a> European Journal of Pharmacology. 833 (15), 441-450 (2018).</li><li>Sun, B., Xiao, J., Sun, X. B., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1+attenuates+cardiac+dysfunction+in+endotoxemic+mice:+an+insight+into+oestrogen+receptor+activation+and+PI3K/Akt+signalling.">Notoginsenoside R1 attenuates cardiac dysfunction in endotoxemic mice: an insight into oestrogen receptor activation and PI3K/Akt signalling.</a> British Journal of Pharmacology. 168 (7), 1758-1770 (2013).</li><li>Adams, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+coronary+artery+atherosclerosis+by+17-beta+estradiol+in+ovariectomized+monkeys.+Lack+of+an+effect+of+added+progesterone.">Inhibition of coronary artery atherosclerosis by 17-beta estradiol in ovariectomized monkeys. Lack of an effect of added progesterone.</a> Arteriosclerosis. 10 (6), 1051-1057 (1990).</li><li>Keaney, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17+beta-estradiol+preserves+endothelial+vasodilator+function+and+limits+low-density+lipoprotein+oxidation+in+hypercholesterolemic+swine.">17 beta-estradiol preserves endothelial vasodilator function and limits low-density lipoprotein oxidation in hypercholesterolemic swine.</a> Circulation. 89 (5), 2251-2259 (1994).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-deficient+mice+develop+lesions+of+all+phases+of+atherosclerosis+throughout+the+arterial+tree.">ApoE-deficient mice develop lesions of all phases of atherosclerosis throughout the arterial tree.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen-induced+recovery+of+autonomic+function+after+middle+cerebral+artery+occlusion+in+male+rats.">Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats.</a> American Journal of Physiology- Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 281 (5), R1531-R1539 (2001).</li><li>Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+effects+of+17beta-oestradiol+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 25 (3), 414-420 (2005).</li><li>Pignoli, P., Tremoli, E., Poli, A., Oreste, P., Paoletti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+plus+medial+thickness+of+the+arterial+wall:+a+direct+measurement+with+ultrasound+imaging.">Intimal plus medial thickness of the arterial wall: a direct measurement with ultrasound imaging.</a> Circulation. 74 (6), 1399-1406 (1986).</li><li>Hodgin, J. B., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+estrogen+and+mouse+models+of+atherosclerosis.">Minireview: estrogen and mouse models of atherosclerosis.</a> Endocrinology. 143 (12), 4495-4501 (2002).</li><li>Bush, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+mortality+and+noncontraceptive+use+of+estrogen+in+women:+results+from+the+Lipid+Research+Clinics+Program+Follow-up+Study.">Cardiovascular mortality and noncontraceptive use of estrogen in women: results from the Lipid Research Clinics Program Follow-up Study.</a> Circulation. 75 (6), 1102-1109 (1987).</li><li>Marsh, M. M., Walker, V. R., Curtiss, L. K., Banka, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+atherosclerosis+by+estrogen+is+independent+of+plasma+cholesterol+levels+in+LDL+receptor-deficient+mice.">Protection against atherosclerosis by estrogen is independent of plasma cholesterol levels in LDL receptor-deficient mice.</a> Journal of Lipid Research. 40 (5), 893-900 (1999).</li></ol>

Методология, описанная здесь, представляет собой модель мыши, напоминающую нарушение липидов и атеросклероз, наблюдаемый у женщин в период менопаузы. Хорошо документировано, что дефицит эстрогена у женщин в постменопаузе может усугубить заболеваемость уже существующих или текущих ги...

Эпидемиологические и клинические исследования показали, что женщины в постменопаузе подвергаются значительно большему риску сердечно-сосудистых заболеваний, чем женщины в пременопаузе1,2. Заместительная гормональная терапия (ГрЗ) может снизить относительный риск сердечно-сосудистых заболеваний до 0,37-0,793. Среди других осложнений, атеросклероз, вызванный сердечно-сосудистыми заболеваниями является ведущей причиной смерти во всем мире4. Тем не менее, лабораторные модели с участием эстроген-дефицитных мышей, представляющих атеросклероз подверженных статусне отсутствуют. Этот протокол обеспечивает in vivo эстроген дефицит мыши модель для скрининга экзрогена эстроген лечения сердечно-сосудистой дисфункции после менопаузы.
Предыдущие исследования показывают, что применение OVX у атеросклеротических грызунов кормили высоким содержанием холестерина диета может имитировать женщин в постменопаузе женщин, страдающих атеросклерозом5,6,7,8. Воспроизводимая и удобная модель животных, напоминающая атеросклеротическое состояние у женщин в период менопаузы, является основой исследований экзогенного эстрогена. Здесь двойной торсал-боковой разрез двусторонней овариэктомии был применен в подверженных атеросклерозу аполипопротеина E нокаутом (apoE-/-) мышей9,10. По сравнению со средним разрезом брюшной полости или стрижкой, двойной терзательный разрез является более легким, менее трудоемким методом, который может избежать тяжелой адгностии и воспаления. Пероральный администрации через фундук распространения (см. Таблица материалов) является неинвазивным и удобным, что делает его широко применимы множеству в качестве долгосрочного режима администрирования11. Медленно-релиз гранулы имплантации также популярен6. Тем не менее, имплантаты могутуго усугублять заболеваемость инфекцией, особенно у мышей, подвергаемых OVX. Другие неинвазивные режимы администрирования, такие как устные gavage и управление водой, также имеют много недостатков. Устные gavage обычно стресс мышей и может привести к травмам пищевода. Администрирование гормона через питьевую воду является весьма полезным; однако, добавление DMSO как эмульгатор неизбежно по мере того как экзогенные эстрогены нерастворены в воде. Здесь мы выбрали пероральный 17-эстрадиол или фитоэстрогена заместительной гормональной книжки через распространение фундука для длительного введения.
В последнее время благотворное влияние ЗГТ на сердечно-сосудистую систему женщин в постменопаузе было оспорено в инициативе по охране здоровья женщин (WHI) испытаний12. С одной стороны, экзогенный эстроген сам по себе оказывает благотворное влияние на сердечно-сосудистую систему; с другой стороны, он может сочетаться с ацетатом метогидрогестерона для повышения риска сердечно-сосудистых событий. Более серьезно, ЗГТ может привести к прогрессии опухоли молочной железы и матки, и этот эффект заметно ограничил его использование13,14. Больше интереса было сосредоточено на сердечно-сосудисто-защитных эффектов экзогенных эстрогенов, не хватает митотической активности в опухолевых клетках15,16,17. Многочисленные исследования на людях и животных показывают, что фитоэстрогены со структурами, похожими на эстрогены могут играть полезную роль в сердечно-сосудистой защиты15,18.
Таким образом, целью настоящей работы является (i) построить in vivo эстроген дефицит мыши модели двусторонней ovariectomy с помощью двойного розн-бокового разреза в apoE-/- мышей и (ii) для сравнения сердечно-сосудистых защитных эффектов перорально вводят 17-эстрадиол и псевдопротодиосин (PPD), с помощью фундука распространения. 17 "эстрадиол является одним из видов экзогенного эстрогена, который принадлежит к женским половым гормонам6,11,19. PPD, стероидный сапонин и фитоэстрогены из растений Dioscorea, ранее сообщалось, оказывают противоопухолевые свойства20.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>17&#946;-estradiol, &#62;98%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8875-250MG</td>
			<td>Estrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringes (with 25G needles)</td>
			<td>Hunan Luzhou Huikang Development Co., Ltd</td>
			<td>0.5*19TWLB</td>
			<td>Cardiac bleeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-cholesterol mouse diet</td>
			<td>Huafukang Bio-Technology</td>
			<td>N/A</td>
			<td>1.25% cholesterol, 0% cholate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Resolution In Vivo Micro-Imaging System</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo&#174;770</td>
			<td>Measurements of intima-media thickness and cardiac dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463-250ML</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Curved 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Straight 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Curved/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Straight/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monofilament suture 4-0 1/2 5*12 19mm</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd</td>
			<td>R413</td>
			<td>Suture and ligation of the tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nut cream (Nutella)</td>
			<td>Ferrero</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Medium for peroral 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiVisor optical glass binocular magnifier</td>
			<td>Dohegan Optical Company Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Assistant of identifying the tissues during ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline at pH 7.4</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Preparing 1 L saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro MultiLabel Microplate Reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite M1000</td>
			<td>Plasma TC and TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudoprotodioscin</td>
			<td>Shanghai Winherb Medical S &#38; T Development</td>
			<td>W-0427</td>
			<td>CAS registry no. 102115-79-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl, 50 mg/mL</td>
			<td>Pfizer Pharma GmbH</td>
			<td>462986</td>
			<td>Postoperative analgesia after ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sesame oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3547-1L</td>
			<td>Dissolving the 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solcoseryl Eye-Gel</td>
			<td>Menarini, Solco Basle Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Eye protection during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>MCALON</td>
			<td>MCL-6STV</td>
			<td>Image of the intimal region of aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table model high speed centrifuge</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>1-14K</td>
			<td>Preparation of plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-5G</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triglycerides (TG) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A110-1</td>
			<td>Plasma TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Total cholesterols (TC) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A111-1</td>
			<td>Plasma TC determination</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause

Постменопаузальные женщины подвергаются большему риску развития сердечно-сосудистых заболеваний, чем женщины в пременопаузе. Самки мышей ovariectomized (OVX) при отлятке дисплей увеличение атеросклеротических поражений в аорте по сравнению с самками мышей с нетронутой функции яичников. Тем не менее, лабораторные модели с участием эстроген-дефицитных мышей с атеросклерозом подверженных статусу отсутствуют. Этот дефицит имеет решающее значение, поскольку клинический дефицит эстрогена у женщин в период менопаузы может усугубить заболеваемость уже существующими или продолжающимися нарушениями липидов и атеросклерозом. В этом исследовании мы устанавливаем in vivo эстроген-дефицитной мыши модели двусторонней овразиэктомии через двойной престоченно-боковой разрез в аполипопротеин E (apoE)-/- мышей. Затем мы сравниваем эффекты 17-эстрадиола и псевдопротодиоскина (PPD) (фитоэстрогена) перорально вводят через фундук распространения. Мы находим, что, хотя PPD оказывает определенное влияние на снижение конечной массы тела и плазмы TG в OVX apoE-/- мышей, он имеет анти-атеросклеротические и сердечно-защитные возможности сопоставимы с его 17 "эстрадиол коллега. PPD является фитоэстрогена, который, как сообщается, оказывают противоопухолевые свойства. Таким образом, предлагаемый метод применим для скрининга фитоэстрогенов через пероральный администрации, чтобы заменить традиционную заместительную гормональную терапию у женщин в постменопаузе, которая, как сообщается, потенциально вредных tumorigenetic Емкость. Пероральная администрация с помощью распространения фундука является неинвазивным, что делает его широко применимым для многих пациентов. Эта статья содержит пошаговые демонстрации двусторонней овариэктомии через двойной торсал-боковой разрез в апоЕ-/- мышей и пероральных 17-эстрадиол или фитоэстроген гормона замены через фундук распространения. Плазменные липидные и сердечно-сосудистые функции анализируют сяокардиографию.

Типичная экспериментальная схема лечения, используемая в данном исследовании, иллюстрируется на рисунке 1. При отъеме (возраст 28 дней) самки апоэ-/- C57BL/6J мышей обезболилили савертином (трибромоэтанол; 200 мг/кг; интраперитонена). Мыши были двусторон?...

Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause

Клинически, дефицит эстрогена у женщин менопаузы может усугубить частоту нарушения липидов и атеросклероза. Мы создали модель дефицита эстрогена in vivo путем двусторонней овариэктомии с помощью двойного торсалово-бокового разреза у апоЭ-/- мышей. Мышь модель применима для скрининга экзрогена эстроген лечения сердечно-сосудистой дисфункции после менопаузы.

In Vivo Эстроген Дефицит мыши Модель для скрининга экзрогена Эстроген Лечение сердечно-сосудистой дисфункции после менопаузы

Postmenopausal women are at greater risk of developing cardiovascular diseases than premenopausal women. Female mice ovariectomized (OVX) at weaning ...

Лабораторные модели с участием эстрогена недостаточно мышей, представляя атеросклероз понс данных не хватает. Эта процедура особенно полезна для скрининга экзогенного эстрогена лечения сердечно-сосудистой дисфункции после менопаузы. Основным преимуществом этой методики является то, что яичникэктомия без двойного дорсолатерального разреза является более легким, менее трудоемким методом, который позволяет избежать тяжелой адгезии брюшной полости и воспаления.Демонстрацией процедуры будет Yue-Чжан Инь, аспирант из моей лаборатории. Для выполнения двусторонней овязи в APOE нокаут мышей, сначала подтвердить отсутствие реакции на педаль рефлекс и поместить животное в положении склонны на грелку. Нанесите мазь на глаза животного и накройте животное хирургической драпировкой.Сделайте один сантиметр разреза боковой к средней линии, и один сантиметр боковой к костальным ребрам, и использовать миппы, чтобы тупо вскрыть подкожной ткани. Используя рассечение очков, определите белую жировую ткань в брюшной полости. Используя микро-ножницы и микро-тибры, сделайте разрез на 0,5-1 сантиметр через фасцию до тех пор, пока не будет достигнута брюшная полость, и используйте микропостижки, чтобы аккуратно втянуть белую жировую ткань.Розовый, шелковично-образный яичник, завернутый в жировую ткань, следует наблюдать в брюшной полости. Используйте монофиламентный шов, чтобы ligate 0,5 до одного сантиметра проксимального сосуда и рога матки, и использовать микро ножницы для сбора яичников. Верните оставшуюся ткань в брюшную полость и используйте отдельные монофильтрные швы, чтобы отдельно закрыть мышечные и кожные слои.Затем урожай яичников на контралатеральной стороне животного, как только что продемонстрировано, и позволить мыши восстановиться на грелке с мониторингом, до полной лежачих. Раз в неделю, от недели до 12 недель после операции, измерять вес тела каждого фиктивного и экспериментального животного на балансе. Для измерения общего холестерина и триглицеридов плазмы, на 12 неделе, подготовить брюшной грудной клетки области с 70%этанола, и вставить 25-го калибра иглы в правый желудочек.Аспират медленно, до тех пор, пока один миллилитр крови не впадает в шприц, и раздает образец в 1,5 миллилитровую трубку сбора, содержащую десять микролитров 0,5 моларной ЭДТА. Переверните трубку несколько раз тщательно, чтобы смешать ЭДТА в кровь, и сразу же поместить трубку на лед. В течение 30 минут после сбора, центрифуга образца в течение 20 минут при 400 раз G и четыре градуса по Цельсию.Тщательно соберите плазменный супернатант для хранения при температуре минус 80 градусов по Цельсию. Чтобы изолировать аорту, на 12-й неделе прикрепите 25-калибровочный иглу к 50-миллилитровому шприцу, наполненному PBS, и вставьте иглу в левый желудочек экспериментального животного. Вырезать правое атриум, чтобы избежать высокого давления от перфузии, и perfuse сердечной ткани на 05 до 08 миллилитров PBS в минуту скорость потока.Усваивать перфузиольной жидкости с лабораторными тканями и использовать ножницы и миппы для удаления ребер и легких. Откройте брюшную полость, чтобы удалить внутренние органы, для лучшего просмотра аорты. Возьмите сердце с микро типсов, чтобы разделение аорты dorsally, от позвоночника, до подвих бифуркации.Затем исправить сердце и аорту в течение 48 часов в 4%paraformaldehyde, прежде чем хранить образец ткани в солевой при комнатной температуре или при температуре от двух до восьми градусов по Цельсию в течение нескольких часов. После двенадцати недель диеты с высоким содержанием холестерина, овязочные мыши демонстрируют значительное увеличение общего холестерина плазмы и концентрации триглицеридов. Овидэктомизированные мыши, на пераально вводят с 17-бета-эстрадиола, или PPD через фундук распространения, экспонат значительно ниже плазмы общей концентрации холестерина, чем фиктивные управляемых мышей.Уровни триглицеридов в плазме снижаются у мышей, облеаированных в устной форме, вводимых с помощью 17-бета-эстрадиола, но не при PPD. В то время как тенденция к увеличению массы тела наблюдается у овязочные мыши, по сравнению с фиктивных мышей, никаких значительных изменений в массе тела не наблюдается в целом, между четырьмя группами животных. Максимальный налет восходящей аорты увеличивается у овязных мышей, по сравнению со всеми другими группами, в сочетании с общим снижением сердечной функции, наблюдается у этих животных.Кроме того, средний процент области поражения аорты, по сравнению со всей областью аорты, значительно увеличивается у мышей- Как и ожидалось, наличие этих поражений снижается с 17-бета эстрадиола, или PPD лечения. Основным риском для операции по овязи является мочечная перевязка, что приводит к высокой смертности.Также не забудьте разрезать глубоко вблизи почечной артерии ветвей, чтобы избежать повреждения аорты.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

Автоматизированная Акустическая дозирования для серийного разведения пептидные агонисты в Potency Определение Assays

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

подготовки и<em&gt; В Vivo</em&gt; Использование тестовое активность на основе для<em&gt; N</em&gt; -acylethanolamine Кислота амидазные

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical ...

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Фракционирование мозговых мембран:<em&gt; Ex Vivo</em&gt; Подход к оценке локализации сусинаптических белков

Assessing the synaptic protein composition and function constitutes an important challenge in neuroscience. However, it is not easy to evaluate ...

Dynamic Proteomic and miRNA Analysis of Polysomes from Isolated Mouse Heart After Langendorff Perfusion

Динамический протеомных и Мирна анализ Polysomes от изолированных мыши сердца после Langendorff перфузии

Studies in dynamic changes in protein translation require specialized methods. Here we examined changes in newly-synthesized proteins in response to ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

Измерение и интерпретации показателей потребления кислорода в целом летать головы сегментов

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

Kinase Inhibitor Screening In Self-assembled Human Protein Microarrays

Скрининг ингибиктора Киназы в самособранных микроарах человеческого белка

The screening of kinase inhibitors is crucial for better understanding properties of a drug and for the identification of potentially new targets with ...

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Скрининг для Термотога маритима Мембрана-Связанные пирофосфаза ингибиторы

Membrane-bound pyrophosphatases (mPPases) are dimeric enzymes that occur in bacteria, archaea, plants, and protist parasites. These proteins cleave ...

Visualization of Estrogen Receptors in Colons of Mice with TNBS-Induced Crohn's Disease using Immunofluorescence

Визуализация рецепторов эстрогена в колонах мышей с TNBS-индуцированной болезнью Крона с использованием иммунофлюоресценции

Crohn&#39;s disease is the most diagnosed type of inflammatory bowel disease. Chronic inflammation developing in the intestine leads to peristalsis ...

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  &#946; Reporter Assay

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  ÃƒÅ½Ã‚Â² Reporter Assay

Скрининг на фитоэстрогены с помощью клеточного рецептора эстрогена β Reporter Assay

Plants are a source of food for many animals, and&#160;they can produce thousands of chemicals. Some of these compounds affect physiological processes in ...

Transplantation of Neonatal Mouse Cardiac Macrophages into Adult Mice

Трансплантация неонатальных мышиных сердечных макрофагов взрослым мышам

In an injured neonatal myocardium, macrophages facilitate cardiomyocyte proliferation and angiogenesis and promote heart regeneration. The present study ...