Name: an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause
Uploaded: 2019-08-13T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81202526 J.X.), Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (81302769 - B.S.), Pekin Belediye Doğa Bilimleri Vakfı (47144226- B.S.), Çin Doktora Sonrası Bilim Vakfı (20110490325 j.x.), ve Doktora Programları Vakfı Çin Eğitim Bakanlığı (2012110612031 için B.S.).

Tüm hayvan bakımı ve deneysel protokoller Çin Tıp Bilimleri Akademisi ve Pekin Birliği Tıp Koleji Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır (İzin No.: SYXK (Pekin) 2013-0023). ApoE-/- farelerin kökeni C57BL/6J9,10'dur.
1. ApoE-/- Farelerde Çift Dorsal-lateral Kesi ile Bilateral Ovariektomi
<ol><li>Evlendirmede (28 gün), avertin (tribromoetanol; 200 mg/kg; intraperitonea...

<ol>
	<li>Mozaffarian, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+Disease+and+Stroke+Statistics-2016+Update:+A+Report+From+the+American+Heart+Association.">Heart Disease and Stroke Statistics-2016 Update: A Report From the American Heart Association.</a> Circulation. 133 (4), e38-e360 (2016).</li><li>Packard, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+health+and+disease+in+women.">Cardiovascular health and disease in women.</a> The New England Journal of Medicine. 329 (4), 247-256 (1993).</li><li>Samaan, S. A., Crawford, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+and+cardiovascular+function+after+menopause.">Estrogen and cardiovascular function after menopause.</a> Journal of the American College of Cardiology. 26 (6), 1403-1410 (1995).</li><li>Libby, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+in+atherosclerosis.">Inflammation in atherosclerosis.</a> Nature. 420 (6917), 868-874 (2002).</li><li>Tremollieres, F. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+hormone+replacement+therapy+on+age-related+increase+in+carotid+artery+intima-media+thickness+in+postmenopausal+women.">Effect of hormone replacement therapy on age-related increase in carotid artery intima-media thickness in postmenopausal women.</a> Atherosclerosis. 153 (1), 81-88 (2000).</li><li>Bourassa, P. A., Milos, P. M., Gaynor, B. J., Breslow, J. L., Aiello, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+reduces+atherosclerotic+lesion+development+in+apolipoprotein+E-deficient+mice.">Estrogen reduces atherosclerotic lesion development in apolipoprotein E-deficient mice.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93 (3), 10022-10027 (1996).</li><li>Squadrito, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genistein+supplementation+and+estrogen+replacement+therapy+improve+endothelial+dysfunction+induced+by+ovariectomy+in+rats.">Genistein supplementation and estrogen replacement therapy improve endothelial dysfunction induced by ovariectomy in rats.</a> Cardiovascular Research. 45 (2), 454-462 (2000).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endothelial+dysfunction+and+enhanced+contractility+in+microvessels+from+ovariectomized+rats:+roles+of+oxidative+stress+and+perivascular+adipose+tissue.">Endothelial dysfunction and enhanced contractility in microvessels from ovariectomized rats: roles of oxidative stress and perivascular adipose tissue.</a> Hypertension. 63 (5), 1063-1069 (2014).</li><li>Zhang, S. H., Reddick, R. L., Piedrahita, J. A., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spontaneous+Hypercholesterolemia+and+Arterial+Lesions+in+Mice+Lacking+Apolipoprotein+E.">Spontaneous Hypercholesterolemia and Arterial Lesions in Mice Lacking Apolipoprotein E.</a> Science. 258 (5081), 468-471 (1992).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-Deficient+Mice+Develop+Lesions+of+All+Phases+of+Atherosclerosis+Throughout+the+Arterial+Tree.">ApoE-Deficient Mice Develop Lesions of All Phases of Atherosclerosis Throughout the Arterial Tree.</a> Arteriosclerosis and Thrombosis. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Str&#246;m, J. O., Theodorsson, A., Ingberg, E., Isaksson, I. M., Theodorsson, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovariectomy+and+17-estradiol+Replacement+in+Rats+and+Mice:+A+Visual+Demonstration.">Ovariectomy and 17-estradiol Replacement in Rats and Mice: A Visual Demonstration.</a> Journal of Visualized Experiments. 64 (e4013), 1-4 (2012).</li><li>Rossouw, J. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risks+and+benefits+of+estrogen+plus+progestin+in+healthy+postmenopausal+women:+principal+results+From+the+Women's+Health+Initiative+randomized+controlled+trial.">Risks and benefits of estrogen plus progestin in healthy postmenopausal women: principal results From the Women's Health Initiative randomized controlled trial.</a> The Journal of the American Medical Association. 288 (3), 321-333 (2002).</li><li>Kumle, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declining+breast+cancer+incidence+and+decreased+HRT+use.">Declining breast cancer incidence and decreased HRT use.</a> Lancet. 372 (9639), 608-610 (2008).</li><li>Jager, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+randomized+comparison+of+triptorelin+and+tamoxifen+as+treatment+of+progressive+ovarian+cancer.">A randomized comparison of triptorelin and tamoxifen as treatment of progressive ovarian cancer.</a> Anticancer Research. 15 (6B), 2639-2642 (1995).</li><li>Bhathena, S. J., Velasquez, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Beneficial+role+of+dietary+phytoestrogens+in+obesity+and+diabetes.">Beneficial role of dietary phytoestrogens in obesity and diabetes.</a> The American Journal of Clinical Nutrition. 76 (6), 1191-1201 (2002).</li><li>Wang, L., Qiu, X. M., Hao, Q., Li, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+effects+of+a+Chinese+herbal+medicine+in+atherosclerosis+via+estrogen+receptor+beta+mediating+nitric+oxide+production+and+NF-kappaB+suppression+in+endothelial+cells.">Anti-inflammatory effects of a Chinese herbal medicine in atherosclerosis via estrogen receptor beta mediating nitric oxide production and NF-kappaB suppression in endothelial cells.</a> Cell Death and Disease. 4 (e551), 1-13 (2013).</li><li>Xiao, J., Wang, N. L., Sun, B., Cai, G. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+receptor+mediates+the+effects+of+pseudoprotodiocsin+on+adipogenesis+in+3T3-L1+cells.">Estrogen receptor mediates the effects of pseudoprotodiocsin on adipogenesis in 3T3-L1 cells.</a> American Journal of Physiology-Cell Physiology. 299 (1), C128-C138 (2010).</li><li>Guivarc'h, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Predominant+Role+of+Nuclear+Versus+Membrane+Estrogen+Receptor+alpha+in+Arterial+Protection:+Implications+for+Estrogen+Receptor+alpha+Modulation+in+Cardiovascular+Prevention/Safety.">Predominant Role of Nuclear Versus Membrane Estrogen Receptor alpha in Arterial Protection: Implications for Estrogen Receptor alpha Modulation in Cardiovascular Prevention/Safety.</a> Journal of the American Heart Association. 7 (13), 1-17 (2018).</li><li>Osako, M. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen+inhibits+vascular+calcification+via+vascular+RANKL+system:+common+mechanism+of+osteoporosis+and+vascular+calcification.">Estrogen inhibits vascular calcification via vascular RANKL system: common mechanism of osteoporosis and vascular calcification.</a> Circulation Research. 107 (4), 466-475 (2010).</li><li>Ivanova, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Screening+of+some+saponins+and+phenolic+components+of+Tribulus+terrestris+and+Smilax+excelsa+as+MDR+modulators.">Screening of some saponins and phenolic components of Tribulus terrestris and Smilax excelsa as MDR modulators.</a> In vivo. 23 (4), 545-550 (2009).</li><li>Xiao, J., Zhu, T., Yin, Y. Z., Sun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1,+a+unique+constituent+of+Panax+notoginseng,+blinds+proinflammatory+monocytes+to+protect+against+cardiac+hypertrophy+in+ApoE(-/-)+mice.">Notoginsenoside R1, a unique constituent of Panax notoginseng, blinds proinflammatory monocytes to protect against cardiac hypertrophy in ApoE(-/-) mice.</a> European Journal of Pharmacology. 833 (15), 441-450 (2018).</li><li>Sun, B., Xiao, J., Sun, X. B., Wu, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notoginsenoside+R1+attenuates+cardiac+dysfunction+in+endotoxemic+mice:+an+insight+into+oestrogen+receptor+activation+and+PI3K/Akt+signalling.">Notoginsenoside R1 attenuates cardiac dysfunction in endotoxemic mice: an insight into oestrogen receptor activation and PI3K/Akt signalling.</a> British Journal of Pharmacology. 168 (7), 1758-1770 (2013).</li><li>Adams, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+coronary+artery+atherosclerosis+by+17-beta+estradiol+in+ovariectomized+monkeys.+Lack+of+an+effect+of+added+progesterone.">Inhibition of coronary artery atherosclerosis by 17-beta estradiol in ovariectomized monkeys. Lack of an effect of added progesterone.</a> Arteriosclerosis. 10 (6), 1051-1057 (1990).</li><li>Keaney, J. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=17+beta-estradiol+preserves+endothelial+vasodilator+function+and+limits+low-density+lipoprotein+oxidation+in+hypercholesterolemic+swine.">17 beta-estradiol preserves endothelial vasodilator function and limits low-density lipoprotein oxidation in hypercholesterolemic swine.</a> Circulation. 89 (5), 2251-2259 (1994).</li><li>Nakashima, Y., Plump, A. S., Raines, E. W., Breslow, J. L., Ross, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ApoE-deficient+mice+develop+lesions+of+all+phases+of+atherosclerosis+throughout+the+arterial+tree.">ApoE-deficient mice develop lesions of all phases of atherosclerosis throughout the arterial tree.</a> Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 14 (1), 133-140 (1994).</li><li>Saleh, T. M., Cribb, A. E., Connell, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Estrogen-induced+recovery+of+autonomic+function+after+middle+cerebral+artery+occlusion+in+male+rats.">Estrogen-induced recovery of autonomic function after middle cerebral artery occlusion in male rats.</a> American Journal of Physiology- Regulatory, Integrative and Comparative Physiology. 281 (5), R1531-R1539 (2001).</li><li>Bingham, D., Macrae, I. M., Carswell, H. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Detrimental+effects+of+17beta-oestradiol+after+permanent+middle+cerebral+artery+occlusion.">Detrimental effects of 17beta-oestradiol after permanent middle cerebral artery occlusion.</a> Journal of Cerebral Blood Flow &amp; Metabolism. 25 (3), 414-420 (2005).</li><li>Pignoli, P., Tremoli, E., Poli, A., Oreste, P., Paoletti, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intimal+plus+medial+thickness+of+the+arterial+wall:+a+direct+measurement+with+ultrasound+imaging.">Intimal plus medial thickness of the arterial wall: a direct measurement with ultrasound imaging.</a> Circulation. 74 (6), 1399-1406 (1986).</li><li>Hodgin, J. B., Maeda, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minireview:+estrogen+and+mouse+models+of+atherosclerosis.">Minireview: estrogen and mouse models of atherosclerosis.</a> Endocrinology. 143 (12), 4495-4501 (2002).</li><li>Bush, T. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiovascular+mortality+and+noncontraceptive+use+of+estrogen+in+women:+results+from+the+Lipid+Research+Clinics+Program+Follow-up+Study.">Cardiovascular mortality and noncontraceptive use of estrogen in women: results from the Lipid Research Clinics Program Follow-up Study.</a> Circulation. 75 (6), 1102-1109 (1987).</li><li>Marsh, M. M., Walker, V. R., Curtiss, L. K., Banka, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protection+against+atherosclerosis+by+estrogen+is+independent+of+plasma+cholesterol+levels+in+LDL+receptor-deficient+mice.">Protection against atherosclerosis by estrogen is independent of plasma cholesterol levels in LDL receptor-deficient mice.</a> Journal of Lipid Research. 40 (5), 893-900 (1999).</li></ol>

Burada açıklanan metodoloji, menopozlu kadınlarda görülen lipid bozulması ve ateroskleroza benzeyen bir fare modelidir. Postmenopozal kadınlarda östrojen eksikliğinin, giderek karmaşık ve yaygın aterosklertik lezyonlarla önceden var olan veya devam eden hiperkolesterolemi insidansını kötüleştirebileceği iyi belgelenmiştir1. Klinikte ateroskleroza yatkın lık durumunu taklit etmek için, apoE eksikliği olan fareler, atherogenez 23,<sup class=...

Epidemiyolojik ve klinik çalışmalar postmenopozal kadınların premenopozal kadınlara göre kardiyovasküler hastalık riski çok daha fazla olduğunu göstermiştir1,2. Hormon replasman tedavisi (HRT) kardiyovasküler hastalık göreceli riskini azaltabilir 0.37-0.793. Diğer komplikasyonlar ın yanı sıra, kardiyovasküler hastalıkların neden olduğu ateroskleroz dünya çapında önde gelen ölüm nedenidir4. Ancak, ateroskleroz eğilimli durum sunan östrojen eksikliği fareler içeren laboratuvar modelleri eksiktir. Bu protokol menopoz sonrası kardiyovasküler disfonksiyon eksojen östrojen tedavileri tarama için bir in vivo östrojen eksikliği fare modeli sağlar.
Önceki çalışmalar da yüksek kolesterol diyet beslenen aterosklerotik kemirgenler OVX uygulaması aterosklerozmuzdarippostmenopozal kadınlar taklit edebilirsiniz göstermektedir5 ,6,7,8. Menopozal kadınlarda aterosklerotik durumu andıran tekrarlanabilir ve uygun bir hayvan modeli eksojen östrojen araştırmalarının temelidir. Burada ateroskleroz-prone apolipoprotein E nakavt (apoE-/-)farelerdebilateral ovariektominin çift dorsal-lateral kesisi uygulanmıştır. Orta karın veya dorsal insizyon ile karşılaştırıldığında, çift dorsal-lateral insizyon şiddetli karın boşluğu adezyon ve inflamasyon önleyebilirsiniz daha kolay, daha az zaman alıcı bir yöntemdir. Fındık yayılımı yoluyla peroral uygulama (Bkz. MalzemeTablosu) noninvaziv ve kullanışlıdır, uzun vadeli bir yönetim modu 11 olarak yaygın olarak uygulanabilir hale. Yavaş salınımlı pelet implantasyonu da popüler6. Ancak implantlar özellikle OVX'e maruz kalan farelerde enfeksiyon insidansını ağırlaştırabilir. Oral gavaj ve su idaresi gibi diğer noninvaziv yönetim modları da birçok dezavantajları vardır. Oral gavage genellikle fareleri strese sosif ve özofagus yaralanmasına neden olabilir. İçme suyu ile hormon verilmesi son derece yararlıdır; ancak, ekseksen östrojenler suda çözünmez olduğu gibi bir emülgatör olarak DMSO eklenmesi kaçınılmazdır. Burada, uzun süreli uygulama için fındık yayılmış yoluyla peroral 17β-estradiol veya fitoöstrojen hormon replasmanı seçti.
Son zamanlarda, postmenopozal kadınların kardiyovasküler sistem üzerinde HRT yararlı etkisi kadın sağlığı girişimi (WHI) çalışmalarda itiraz edilmiştir12. Bir yandan, eksojen östrojen tek başına kardiyovasküler sistem üzerinde yararlı bir etki uygular; Öte yandan, bu kardiyovasküler olayların riskini artırmak için metohidroksiprogesteron asetat ile birleştirebilir. Daha ciddi, HRT meme ve rahim tümörü ilerlemesine yol açabilir, ve bu etki belirgin kullanımı sınırlı olmuştur13,14. Daha fazla ilgi tümör hücrelerinde mitotik aktivite olmayan eksojen östrojenlerin kardiyovasküler-koruyucu etkileri üzerinde duruldu15,16,17. Insanlar ve hayvanlarda birden fazla çalışma, östrojenbenzer yapıları ile fitoöstrojenler kardiyovasküler koruma yararlı bir rol oynayabilir düşündürmektedir15,18.
Bu nedenle, bu çalışmanın amacı (i) apoE-/- farelerde çift dorsal-lateral kesi ile bilateral ovariektomi ile in vivo östrojen eksikliği fare modeli oluşturmak ve (ii) peroral kardiyovasküler koruyucu etkilerini karşılaştırmak için fındık yayılımı yoluyla 17β-estradiol ve psödoprotodiosin (PPD) uygulanır. 17β-estradiol kadın cinsel hormonlar6,11,19ait eksojen östrojen bir türüdür. PPD, Dioscorea bitkilerden bir steroid saponin ve fitoöstrojen, daha önce anti-tümör özellikleri uygulamak bildirilmiştir20.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>17&#946;-estradiol, &#62;98%</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>E8875-250MG</td>
			<td>Estrogen</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Disposable syringes (with 25G needles)</td>
			<td>Hunan Luzhou Huikang Development Co., Ltd</td>
			<td>0.5*19TWLB</td>
			<td>Cardiac bleeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-cholesterol mouse diet</td>
			<td>Huafukang Bio-Technology</td>
			<td>N/A</td>
			<td>1.25% cholesterol, 0% cholate</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>High-Resolution In Vivo Micro-Imaging System</td>
			<td>VisualSonics</td>
			<td>Vevo&#174;770</td>
			<td>Measurements of intima-media thickness and cardiac dysfunction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-Methyl-2-butanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>152463-250ML</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Curved 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting forceps, Straight 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Curved/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Scissors, Straight/Sharp 8mm</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Monofilament suture 4-0 1/2 5*12 19mm</td>
			<td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co., Ltd</td>
			<td>R413</td>
			<td>Suture and ligation of the tissues</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nut cream (Nutella)</td>
			<td>Ferrero</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Medium for peroral 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>OptiVisor optical glass binocular magnifier</td>
			<td>Dohegan Optical Company Inc.</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Assistant of identifying the tissues during ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate-buffered saline at pH 7.4</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>P3813</td>
			<td>Preparing 1 L saline</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pro MultiLabel Microplate Reader</td>
			<td>Tecan</td>
			<td>Infinite M1000</td>
			<td>Plasma TC and TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pseudoprotodioscin</td>
			<td>Shanghai Winherb Medical S &#38; T Development</td>
			<td>W-0427</td>
			<td>CAS registry no. 102115-79-7</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rimadyl, 50 mg/mL</td>
			<td>Pfizer Pharma GmbH</td>
			<td>462986</td>
			<td>Postoperative analgesia after ovariectomy</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sesame oil</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>S3547-1L</td>
			<td>Dissolving the 17&#946;-estradiol or PPD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solcoseryl Eye-Gel</td>
			<td>Menarini, Solco Basle Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>Eye protection during anesthesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stereo microscope</td>
			<td>MCALON</td>
			<td>MCL-6STV</td>
			<td>Image of the intimal region of aorta</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Table model high speed centrifuge</td>
			<td>SIGMA</td>
			<td>1-14K</td>
			<td>Preparation of plasma</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scissors, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, slight Curve (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue forceps, serrated, straight Flat (14cm)</td>
			<td>Kanghua Medical Equipment Co., Ltd</td>
			<td></td>
			<td>Surgical tools</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tribromoethanol</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>T48402-5G</td>
			<td>Preparation of avertin</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Triglycerides (TG) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A110-1</td>
			<td>Plasma TG determination</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Total cholesterols (TC) assay kit</td>
			<td>Institute of Nanjing Jiancheng Biology Engineering</td>
			<td>A111-1</td>
			<td>Plasma TC determination</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an in vivo estrogen deficiency mouse model for screening exogenous estrogen treatments of cardiovascular dysfunction after menopause

Postmenopozal kadınlar premenopozal kadınlara göre kardiyovasküler hastalıklara yakalanma riski daha fazladır. Kadın fareler ovariectomized (OVX) weaning ekranda bozulmamış yumurtalık fonksiyonu ile kadın fareler ile karşılaştırıldığında aort aterosklerotik lezyonlar arttı. Ancak, ateroskleroz eğilimli durumu ile östrojen eksikliği fareler içeren laboratuvar modelleri eksiktir. Menopozal kadınlarda klinik östrojen eksikliği önceden var olan veya devam eden lipid bozulması ve ateroskleroz insidansını ağırlaştırabilir, çünkü bu açık çok önemlidir. Bu çalışmada apolipoprotein E (apoE)-/- farelerde çift dorsal-lateral kesi ile bilateral ovariektomi ile in vivo östrojen eksikliği olan bir fare modeli oluşturuldu. Daha sonra 17β-estradiol ve psödoprotodiosin (PPD) (bir fitoöstrojen) peroral fındık yayılması yoluyla uygulanan etkilerini karşılaştırın. PPD'nin OVX apoE-/- farelerde nihai vücut ağırlığını ve plazma TG'yi azaltmada bir miktar etki yemesine rağmen, 17β-estradiol muadili ile karşılaştırılabilir anti-aterosklerotik ve kardiyak koruyucu kapasitelere sahip olduğunu görüyoruz. PPD anti-tümör özellikleri uygulamak için bildirilmiştir bir fitoöstrojen olduğunu. Bu nedenle, önerilen yöntem postmenopozal kadınlarda geleneksel hormon replasman tedavisi yerine peroral uygulama yoluyla fitoöstrojentarama için geçerlidir, potansiyel olarak zararlı tümörigenetik olduğu bildirilmiştir Kapasite. Fındık yayılımı yoluyla peroral uygulama noninvaziv, yaygın birçok hasta için geçerli hale. Bu makalede, apoE-/- farelerde çift dorsal-lateral kesi ve fındık yayılımı yoluyla peroral 17β-estradiol veya fitoöstrojen hormon replasmanı yoluyla ikili ovariektominin adım adım gösterilişi yer almaktadır. Ekokardiyografi ile plazma lipid ve kardiyovasküler fonksiyon analizleri takip eder.

Bu çalışmada kullanıldığı gibi tipik bir deneysel tedavi şeması Şekil1'de gösterilmiştir. Evlendirme de (28 gün), dişi apoE-/- C57BL/6J fareler ile anestezi edildi (tribromoetanol; 200 mg/kg; intraperitoneally). Fareler 1 cm'lik dorsal kesi ile iki taraflı OVX veya sham ile işletildi. Bir hafta bilateral OVX sonra, fareler 12 hafta boyunca yüksek kolesterol diyet (%1.25 kolesterol, 0% cholate) beslendi. 17β-Estradiol (0.1 mg·kg<s...

Watch this Scientific Journal Video about An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause at JoVE.com

An In Vivo Estrogen Deficiency Mouse Model for Screening Exogenous Estrogen Treatments of Cardiovascular Dysfunction After Menopause

Klinik olarak, menopozal kadınlarda östrojen eksikliği lipid bozulması ve ateroskleroz insidansını ağırlaştırabilir. ApoE-/- farelerde çift dorsal-lateral kesi ile bilateral ovariektomi ile in vivo östrojen eksikliği modeli oluşturduk. Fare modeli menopoz sonrası kardiyovasküler disfonksiyon eksojen östrojen tedavileri tarama için geçerlidir.

Menopoz Sonrası Kardiyovasküler Disfonksiyon Exogenous Östrojen Tedaviler Tarama için Bir In Vivo Östrojen Eksikliği Fare Modeli

Postmenopausal women are at greater risk of developing cardiovascular diseases than premenopausal women. Female mice ovariectomized (OVX) at weaning ...

Arterioskleroz pons verilerini sunan östrojen eksikliği fareler içeren laboratuvar modelleri eksiktir. Bu işlem özellikle menopoz sonrası kardiyovasküler disfonksiyon eksojen östrojen tedavileri tarama için yararlıdır. Bu tekniğin en büyük avantajı, çift dorsolateral insizyon olmadan ovariektomi nin şiddetli abdominal kavite yapışmasını ve iltihabı önleyen daha kolay ve daha az zaman alan bir yöntem olmasıdır.Prosedürü gösteren Yue-Zhang Yin, benim laboratuvarımdan bir yüksek lisans öğrencisi olacak. APOE nakavt farelerde ikili bir ovariektomi gerçekleştirmek için, ilk pedal refleks yanıt eksikliği onaylamak ve bir ısıtma yastığı üzerinde eğilimli pozisyonda hayvan yerleştirin. Merhemi hayvanın gözlerine uygulayın ve hayvanın üzerini cerrahi bir örtüile kapatın.Orta hatta bir santimetre lik bir kesi yapın, ve kostal kaburgalara bir santimetre lateral, ve deri altı dokuyu künt bir şekilde incelemek için forceps kullanın. Diseksiyon gözlük kullanarak, karın boşluğunda beyaz yağ dokusu belirlemek. Mikro makas ve mikro forceps kullanarak, fasya ile 0.5-bir santimetre lik bir kesi yapmak, karın boşluğu na kadar, ve yavaşça beyaz yağ dokusu geri çekmek için mikro forceps kullanın.Pembe, dut şeklinde bir yumurtalık, yağ dokusuna sarılmış, karın boşluğu içinde gözlenmelidir. 0,5 ila bir santimetre proksimal damar ve rahim boynuzu ligate için bir monofilament sütür kullanın ve yumurtalık hasat için mikro makas kullanın. Karın boşluğuna kalan doku dönün ve ayrı kas ve cilt katmanları kapatmak için bireysel monofilament dikişkullanın.Sonra hayvanın kontralateral tarafında yumurtalık hasat, sadece gösterildiği gibi, ve fare izleme ile bir ısıtma yastığı üzerinde kurtarmak için izin, tam recumbency kadar. Haftada bir kez, ameliyattan önceki haftadan 12 haftaya kadar, her sahte ve deneysel hayvanın vücut ağırlığını bir denge üzerinde ölçün. Plazma total kolesterol ve trigliserid ölçümü için, 12.Aspire yavaş yavaş, kan bir mililitre şırınga içine akar kadar, ve 0.5 molar EDTA on mikrolitre içeren 1.5 mililitre toplama tüpü içine örnek dağıtmak. EDTA'yı kana karıştırmak için tüpü birkaç kez iyice tersine çevirin ve tüpü hemen buza yerleştirin. Toplama 30 dakika içinde, 400 kez G ve dört derece santigrat 20 dakika için örnek santrifüj.Eksi 80 santigrat derecede depolamak için plazma süpernatantını dikkatlice toplayın. Aortu izole etmek için, 12. Perfüzyondan kaynaklanan yüksek basıncı önlemek için sağ atriyumu kesin ve kardiyak dokuyu dakikada 05-08 mililitre PBS hızında perfüzyonleyin.Laboratuvar dokuları ile perfüzyon sıvısı absorbe ve kaburga ve akciğerlerkaldırmak için makas ve forceps kullanın. Aort daha iyi bir görünüm için, iç organları kaldırmak için karın boşluğu açın. Aort dorsally ayrılmasını sağlamak için mikro forceps ile kalp kavramak, omurgadan, iliak bifurkasyon kadar.Daha sonra 4% paraformaldehit 48 saat boyunca kalp ve aort düzeltmek, oda sıcaklığında tuzlu doku örneği depolamadan önce veya birkaç saat için 2-8 santigrat derece. Yüksek kolesterol diyet on iki hafta sonra, ovariectomized fareler plazma toplam kolesterol ve trigliserid konsantrasyonlarında dikkate değer bir artış göstermektedir. 17-beta oestradiol veya ppd ile fındık yayılımı yoluyla oral olarak uygulanan ovariectomized fareler, sham-operated farelere göre önemli ölçüde daha düşük plazma toplam kolesterol konsantrasyonları sergiler.Plazma trigliserid düzeyleri ovariektomized farelerde azalır, oral olarak uygulanan 17-beta oestradiol, ama PPD ile değil. Ovariektomized farelerde vücut ağırlığının artma eğilimi gözlenirken, şam'ın işletilen farelerine kıyasla, dört grup hayvan arasında genel olarak vücut ağırlığında önemli bir değişiklik gözlenmemektedir. Yükselen aortmitin maksimal plağı ovariektomized farelerde, diğer tüm gruplara göre, kardiyak fonksiyonda genel bir azalma ile birlikte, bu hayvanlarda gözlenen artar.Ayrıca, aort lezyon alanının ortalama yüzdesi, tüm aort bölgesine göre, ovariektomized farelerde önemli ölçüde artmıştır. Beklendiği gibi 17-beta oestradiol veya PPD tedavisi ile bu lezyonların varlığı azalır. Ovariektomi ameliyatıiçin en önemli risk üreteral ligasyondur ve bu da yüksek mortalite ile sonuçlanır.Ayrıca derinböbrek arter dalları yakınında kesmek için hatırlıyorum, aort hasarı önlemek için.

Research

JoVE Journal

Biochemistry

Automated Acoustic Dispensing for the Serial Dilution of Peptide Agonists in Potency Determination Assays

Etkili belirlenmesi tahlillerinde Peptit Agonistlerinin seri Seyreltme için Dağıtım Otomatik Akustik

As with small molecule drug discovery, screening for peptide agonists requires the serial dilution of peptides to produce concentration-response curves. ...

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Preparation and In Vivo Use of an Activity-based Probe for N-acylethanolamine Acid Amidase

Hazırlama ve<em&gt; İn Vivo</em&gt; Bir Faaliyet tabanlı Sondası kullanılması için<em&gt; K</em&gt; -acylethanolamine Asit aminidaz

Activity-based protein profiling (ABPP) is a method for the identification of an enzyme of interest in a complex proteome through the use of a chemical ...

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Brain Membrane Fractionation: An Ex Vivo Approach to Assess Subsynaptic Protein Localization

Beyin Membranı Fraksiyonu: Bir<emEx Vivo</em&gt; Subsınaptik Protein Lokalizasyonunu Değerlendirmede Yaklaşım

Assessing the synaptic protein composition and function constitutes an important challenge in neuroscience. However, it is not easy to evaluate ...

Dynamic Proteomic and miRNA Analysis of Polysomes from Isolated Mouse Heart After Langendorff Perfusion

Dinamik proteomik ve miRNA analiz polizomlar izole fare kalp sonra Langendorff perfüzyon üzerinden

Studies in dynamic changes in protein translation require specialized methods. Here we examined changes in newly-synthesized proteins in response to ...

Measuring and Interpreting Oxygen Consumption Rates in Whole Fly Head Segments

Ölçme ve oksijen Tüketim oranları tamamen yorumlama kafa kesimleri sinek

Regulated metabolic activity is essential for the normal functioning of living cells. Indeed, altered metabolic activity is causally linked with the ...

Kinase Inhibitor Screening In Self-assembled Human Protein Microarrays

Kendi kendine monte Edilen İnsan Protein Mikrodizilerinde Kiaz Inhibitörü Taraması

The screening of kinase inhibitors is crucial for better understanding properties of a drug and for the identification of potentially new targets with ...

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Screening for Thermotoga maritima Membrane-Bound Pyrophosphatase Inhibitors

Thermotoga maritima Membran Bağlı Pirofosfataz Inhibitörleri için tarama

Membrane-bound pyrophosphatases (mPPases) are dimeric enzymes that occur in bacteria, archaea, plants, and protist parasites. These proteins cleave ...

Visualization of Estrogen Receptors in Colons of Mice with TNBS-Induced Crohn's Disease using Immunofluorescence

İmmünofluoresans kullanarak TNBS'ye Bağlı Crohn Hastalığı olan Farelerin Kolonlarında Östrojen Reseptörlerinin Görüntülenmesi

Crohn&#39;s disease is the most diagnosed type of inflammatory bowel disease. Chronic inflammation developing in the intestine leads to peristalsis ...

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  &#946; Reporter Assay

Screening for Phytoestrogens using a Cell-based Estrogen Receptor  ÃƒÅ½Ã‚Â² Reporter Assay

Hücre Tabanlı Östrojen Reseptörü Kullanarak Fitoöstrojen taraması β Reporter Assay

Plants are a source of food for many animals, and&#160;they can produce thousands of chemicals. Some of these compounds affect physiological processes in ...

Transplantation of Neonatal Mouse Cardiac Macrophages into Adult Mice

Yenidoğan Fare Kardiyak Makrofajların Yetişkin Farelere Nakli

In an injured neonatal myocardium, macrophages facilitate cardiomyocyte proliferation and angiogenesis and promote heart regeneration. The present study ...