Name: murine model of central venous stenosis using aortocaval fistula with an outflow stenosis
Uploaded: 2019-07-11T13:00:00
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이 작품은 미국 국립 보건원에 의해 지원되었다 (NIH) 그랜트 R01-HL128406; 재향 군인 업무 생물 의학 실험실 연구 및 개발 프로그램 공로 검토 상 I01-BX002336의 미국 부서; 뿐만 아니라 자원과 VA 코네티컷 의료 시스템, 웨스트 헤이븐, CT에서 시설의 사용과 함께.

모든 실험은 예일 대학 기관 동물 관리 및 사용위원회 (IACUC)의 승인으로 수행되었다.
1. 마취 및 수술 전 절차
<ol><li>오토클레이브를 통해 모든 수술 기구와 재료를 살균하십시오. 열 지지 장치가 따뜻하다는 것을 확신하도록 켜십시오 (40-42 °C).</li>
	<li>9-11주 된 C57BL/6 마우스를 아크릴 유도 챔버에 넣고 기화된 2.5% 이소플루란과 0.8 L/min 산소로 마취시다. 마취 유도는 약 3 분 ?...

<ol>
	<li>Dember, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+clopidogrel+on+early+failure+of+arteriovenous+fistulas+for+hemodialysis:+a+randomized+controlled+trial.">Effect of clopidogrel on early failure of arteriovenous fistulas for hemodialysis: a randomized controlled trial.</a> JAMA. 299 (18), 2164-2171 (2008).</li><li>Dixon, B. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Patency+rates+of+the+arteriovenous+fistula+for+hemodialysis:+a+systematic+review+and+meta-analysis.">Patency rates of the arteriovenous fistula for hemodialysis: a systematic review and meta-analysis.</a> American Journal of Kidney Diseases. 63 (3), 464-478 (2014).</li><li>Rocco, M. V., Bleyer, A. J., Burkart, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Utilization+of+inpatient+and+outpatient+resources+for+the+management+of+hemodialysis+access+complications.">Utilization of inpatient and outpatient resources for the management of hemodialysis access complications.</a> American Journal of Kidney Diseases. 28 (2), 250-256 (1996).</li><li>Roy-Chaudhury, P., Sukhatme, V. P., Cheung, A. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hemodialysis+vascular+access+dysfunction:+a+cellular+and+molecular+viewpoint.">Hemodialysis vascular access dysfunction: a cellular and molecular viewpoint.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 17 (4), 1112-1127 (2006).</li><li>Quencer, K. B., Arici, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arteriovenous+Fistulas+and+Their+Characteristic+Sites+of+Stenosis.">Arteriovenous Fistulas and Their Characteristic Sites of Stenosis.</a> AJR: American Journal of Roentgenology. 205 (4), 726-734 (2015).</li><li>Kian, K., Asif, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cephalic+arch+stenosis.">Cephalic arch stenosis.</a> Semin Dial. 21 (1), 78-82 (2008).</li><li>Agarwal, A. 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D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eph-B4+regulates+adaptive+venous+remodeling+to+improve+arteriovenous+fistula+patency.">Eph-B4 regulates adaptive venous remodeling to improve arteriovenous fistula patency.</a> Scientific Reports. 7 (1), 15386 (2017).</li><li>Payne, H., Brill, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stenosis+of+the+Inferior+Vena+Cava:+A+Murine+Model+of+Deep+Vein+Thrombosis.">Stenosis of the Inferior Vena Cava: A Murine Model of Deep Vein Thrombosis.</a> J Vis Exp. (130), (2017).</li><li>Nam, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> American Journal of Physiology: Heart and Circulatory Physiology. 297 (4), H1535-H1543 (2009).</li><li>Ene-Iordache, B., Remuzzi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+flow+in+radial-cephalic+arteriovenous+fistulae+for+haemodialysis:+low+and+oscillating+shear+stress+locates+the+sites+of+stenosis.">Disturbed flow in radial-cephalic arteriovenous fistulae for haemodialysis: low and oscillating shear stress locates the sites of stenosis.</a> Nephrology, Dialysis, Transplantation. 27 (1), 358-368 (2012).</li><li>Yamamoto, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+shear+stress+reduces+Klf2+expression+in+arterial-venous+fistulae+in+vivo.">Disturbed shear stress reduces Klf2 expression in arterial-venous fistulae in vivo.</a> Physiological reports. 3, (2015).</li><li>Remuzzi, A., Ene-Iordache, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+paradigms+for+dialysis+vascular+access:+upstream+hemodynamics+and+vascular+remodeling+in+dialysis+access+stenosis.">Novel paradigms for dialysis vascular access: upstream hemodynamics and vascular remodeling in dialysis access stenosis.</a> Clinical Journal of the American Society of Nephrology. 8 (12), 2186-2193 (2013).</li></ol>

뮤린 AVF 모델은 AVF 성숙도13,14로이어지는 기본 메커니즘 및 분자 이벤트를 연구하는 데 사용되어 왔다. 이 연구에서, 우리는 누공의 유출 관에 IVC 협착을 가진 새로운 뮤린 대공 관누공 모형을 만들기 위하여 확립된 뮤린 AVF 모형을 수정했습니다. 우리의 결찰 모델은 혈관 결찰을 사용하는 몇몇 이전에 기술된 뮤린 모형과 유사합니다. 심부정맥 혈전증?...

동맥 누공 (AVF)은 혈액 투석에 대한 가장 일반적인 접근이며, 이식편이나 중앙 정맥 카테터와 같은 다른 접근에 비해 우수한 개통및 감소 된 감염과 함께. 그러나 AVF의 최대 60 %가1,2,3을성숙시키지 못합니다. 최근 체계적인 검토에 따르면 1 년 의 1 차적인 가성비는 단지 60% 4. 정맥 유출을 따라 협착은 주로 AVF 성숙의 실패를 야기5,6. 누공에 협착근 근위 경향이 특정 특성 위치가 있습니다 : 방사성 누공에 대한 병선 astomotic 스윙 세그먼트, brachiocephalic 누공에 대한 두개 아치 영역과 이전에 누공에 대한 중앙 정맥 입측 쇄신 또는 내부 경정맥 카테터7,8.
중앙 정맥 협착증은 AVF가없는 환자에서 종종 자각 증상이 없지만 누공 흐름 9에 의해 도전 할 때 정맥 고혈압뿐만 아니라 누공 성숙의실패에 의한 심자 말단 부종을 일으킬 수 있습니다. 중앙 정맥 협착증의 병리생리학은 장치 배치 후에 염증 및 활성화 된 응고 캐스케이드와 가장 관련이 있습니다. 더욱이, 카테터 팁의 일정한 움직임뿐만 아니라 누공에서 증가된 흐름은 전단 응력의 변화시킬 수 있으며, 이로 인해 혈소판 증착 및 정맥벽이 두꺼워지게한다 10. 중앙 정맥 협착증에 기인한 AVF 실패의 근본적인 기계장치를 이해하기 위하여는, AVF를 가진 중앙 정맥 협착증을 모방하는 동물 모형이 필요합니다.
우리는 인간 AVF의 임상 과정을 수행하고 마스터하고 다시 요약하기 쉬운 뮤린 대공관 누공 모델을 설립했습니다. 11 우리는 정맥 협착증을 가진 새로운 뮤린 AVF 모형을 만들기 위하여 몇몇 이전에 설치한 뮤린 모형의 개념 그리고 기술을 적용했습니다. 우리는 중앙 정맥 협착증의 연구에 사용될 수있는 유출 누공에 IVC 협착이있는 뮤린 대공 관 누공 모델을 소개합니다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>20-60 Mhz scan head</td>
			<td>VisualSonics Inc.</td>
			<td>RMV-704</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>8-0 Sterile Micro Suture, 6mm (140 &#181;), 3/8 Circle, TAP Point Needle</td>
			<td>AROSuture</td>
			<td>T06A08N14-13</td>
			<td>polyamide monofilament sutures</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Induction Chamber, 2 Liter 
			3.75&#34;W x 9.00&#34;D x 3.75&#34;H</td>
			<td>VetEquip</td>
			<td>941444</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflo, Isoflurane liquid</td>
			<td>Zoetis</td>
			<td>26675-46-7</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mice, C57BL/6J</td>
			<td>The Jackson Laboratory</td>
			<td>664</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pet Bed Microwave Heating Pad</td>
			<td>Snuggle Safe</td>
			<td>6250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PrecisionGlide Needle 25G</td>
			<td>BD</td>
			<td>305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surflo I.V. Catheter 22G</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>SR-OX2225CA</td>
			<td>0.85mm outer diameter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular clamp</td>
			<td>Roboz Surgical Instrument</td>
			<td>RS-5424</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vevo770 High Resolution Imaging System</td>
			<td>VisualSonics Inc.</td>
			<td>770</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine model of central venous stenosis using aortocaval fistula with an outflow stenosis

중앙 정맥 협착은 동맥 누공 (AVF) 실패에 기여하는 중요한 실체입니다. 뮤린 AVF 모델은 중앙 정맥 협착을 모방, 누공의 유출에 열등한 정맥 카바 (IVC)의 부분 결찰을 만들기 위해 수정되었다. 이 모델의 기술적 측면이 소개됩니다. 대반과 IVC는 복부 절개 에 따라 노출됩니다. 적외선 대공 대공및 IVC는 근위 클램핑을 위해 해부되고, 원위 대위대음은 펑크에 노출됩니다. 왼쪽 신장 정맥과 대동맥 분기 사이의 중간점에 있는 IVC는 신중하게 해부되어 8-0을 배치합니다. IVC 아래에 있는 봉합사. 대나무와 IVC를 클램핑 한 후 AVF는 25G 바늘로 두 벽을 통해 적외선 대불을 IVC로 뚫고 22G 정맥 내 (IV) 카테터와 IVC를 함께 결찰하여 생성됩니다. 카테터를 제거하여 폐색없이 재현 가능한 정맥 협착을 만듭니다. 대류와 IVC는 1 차 적인 지혈을 확인한 후에 가두지 않습니다. 중앙 정맥 협착증의 이 새로운 모형은 능력을 발휘하기 쉽고, 재현가능하며, AVF 실패에 대한 연구를 용이하게 할 것입니다.

수컷 마우스는 AVF와 IVC 협착증을 모두 만들기 위해 위에서 언급한 수술을 받았습니다. 대조군 마우스는 AVF를 동시 생성하지 않고 IVC를 둘러싼 조직의 개복술 및 해부, 예를 들어, 가짜 절차 또는 IVC 협착증의 생성만을 겪었다.
IVC는 수술 후 7일째에 도플러 초음파로관찰하였다(도 2). IVC의 누공 및 협착 부?...

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Murine Model of Central Venous Stenosis using Aortocaval Fistula with an Outflow Stenosis

대반 카발 누공은 두 벽을 통해 뮤린 적외선 대인 대공을 열등한 정맥으로 뚫고 열등한 정맥 카바의 부분 결찰을 통해 유출에 협착증을 생성하여 만들어졌습니다. 이 재현 가능한 모델은 중앙 정맥 협착증을 연구하는 데 사용할 수 있습니다.

유출 협착증을 가진 Aortocaval 누공을 사용하여 중앙 정맥 협착증의 뮤린 모형

Central venous stenosis is an important entity contributing to arteriovenous fistula (AVF) failure. A murine AVF model was modified to create a partial ...

중앙 정맥 협착증은 대토카브 누공 또는 AVF, 성숙의 주요 실패뿐만 아니라 나중에 작동 누공에서 실패를 일으킬 수 있습니다. 이 기술은 인간 AVF의 임상 과정을 재구성하고 몇 가지 중요한 단계를 통해 쉽게 마스터되는 확립 된 뮤린 AVF 모델의 수정 된 버전을 사용합니다. 시술을 시작하기 전에 9-11 주 된 C57-Black/6 마우스에서 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인하고 수술 부위의 척추 위치에 마우스를 놓습니다.동물의 눈에 연고를 바르고 목의 복부 측면에서 털을 하복부로 제거합니다. 그런 다음 세 가지 순차적 10 %의 포비도 요오드와 70 %의 이소 프로파놀 스크럽으로 수술 부위를 정화하고 소독하고 동물 위에 외과 커튼을 놓습니다. 클램프 및 천자 부위 노출의 경우, 해부 현미경 아래에 마우스를 배치하고, 멸균 기술과 메스를 사용하여, 피부 깊은, 중간선, 복부 절개를 낮은 간 가장자리에서 바로 아래 간 가장자리에서 바로 아래 간 절개를 합니다.복강을 열고 복부에 리트랙터를 삽입하는 가위로 근육을 잘라. 창자를 오른쪽으로 이동시키고 식염수에 흠뻑 젖은 거즈로 감쌉니다. 방광과 정액 소포를 동물의 소들 쪽으로 이동하고, 대동맥과 열등한 베나 카바 또는 IVC의 전체 보기를 확보하기 위해 직장과 레트로 페리토네움 사이의 막자를 해부하기 위해 마이크로 니들 홀더를 사용합니다.그런 다음 마이크로니들 홀더를 사용하여 소각대 및 DORsal 주변 의 회고 조직으로부터 부프레성 대동맥 및 IVC en bloc을 분리하여 조직을 함께 교차 고정시키고 주변 조직을 해부하여 좌측 신부정맥으로부터의 거리의 약 3분의 1에서 대동맥 천자 부위를 노출한다. IVC의 격리를 위해, frarenal IVC와 대동맥 사이에 즉시 왼쪽 신장 정맥에 해부하고 좌측 신장 정맥과 수술 후 frarenal IVC 관찰을위한 대동맥 분면 사이의 중간으로 해부를 확장합니다. 대오르타에서 IVC를 분리하는 창을 만들고 IVC를 주변 조직으로부터 해부합니다.그런 다음 조심스럽게 8-0을 배치합니다. IVC와 대어아래에 있는 폴리아미드 모로필라멘트 봉합사는 창밖으로 봉합사를 당겨 IVC 아래에만 봉합사를 배치합니다. AVF를 만들기 위해 먼저 25 게이지 바늘을 바늘 끝에서 4밀리미터 각도로 구부리고 부관 대자와 IVC를 미세 수술 클립으로 고정시하십시오. 분기를 둘러싼 결합 조직을 잡고 대동맥을 내간적으로 회전시키고 대동맥의 천자 부위를 복부 측으로 약간 뻗어 나간 후 25 게이지 바늘을 사용하여 대동맥을 통해 IVC로 구멍을 뚫는다.조직이 관통되면 대자를 방출하고 대자의 왼쪽에서 당겨 주변 조직으로 펑크 부위를 덮습니다. 그런 다음 바늘을 제거하고, hemostasis에 대한 면기울면으로 천자 부위를 부드럽게 누릅니다. IVC 협착증 생성을 위해 22게이지 정맥 카테터의 끝을 IVC에 세로로 배치하고 카테터를 IVC에 8-0으로 리게이트합니다. 봉합 사.봉합사가 배치되면, 카테터를 제거하고 대자와 IVC를 분리하기 전에 기본 hemostasis를 확인합니다. 충추 부위를 1분 더 덮어 혈종증을 보장하고, 6-0 봉합사로 복부를 닫기 전에 그들의 복강에 장기를 반환한다. 그런 다음 마우스를 완전한 회복까지 모니터링하여 열 지원 장치에 개별 침구가없는 케이지에 넣고 도플러 초음파를 사용하여 누공의 가부장성을 확인하십시오.수술 후 7일째에 IVC의 누공 및 협착 부위는 세로 시야에서 쉽게 감지됩니다. AVF없이 협착증을 베어링 마우스에서, 협착 세그먼트는 샴 작동 마우스보다 더 많은 스펙트럼 확대와 정맥 파형을 전시하지만 많은 맥동없이. AVF뿐만 아니라 협착증을 갖는 마우스에서, 협착 세그먼트는 스펙트럼 확대 이외에 맥동 파형을 나타내며, 협착증을 갖는 마우스의 협착증에서 의 흐름의 시간 평균 최대 속도는 협착증을 가진 마우스에서 단독으로 유의하게 높다.협착증을 가진 마우스에 있는 협착에서 평균 IVC 직경은 AVF와 협착을 가진 마우스에서 관찰된 것과 유사합니다. 또한, 상류 또는 다운스트림 세그먼트를 참고로 사용하여, 협착증 이외에 AVF를 갖는 마우스에서 퍼센트 협착증이 현저히 크다. IV 카테터와 IVC를 함께 리게이트할 때 재현 가능한 협착증을 만들기 위해 단단히 묶는 것이 중요합니다.뮤린 정맥 이식 모델에이 절차의 응용 프로그램은 정맥 이식 협착증의 폐색을 극복하는 방법에 대답 할 수 있습니다.

Research

JoVE Journal

Medicine

Surgical Management of Meatal Stenosis with Meatoplasty

Meatoplasty과 Meatal 협착증의 수술 관리

Meatal stenosis is a common urologic complication after circumcision.  Children present to their primary care physicians with complaints of deviated ...

연구

의학

Using Quantitative Real-time PCR to Determine Donor Cell Engraftment in a Competitive Murine Bone Marrow Transplantation Model

경쟁 손쥐 골수 이식 모델에서 기증자 세포 Engraftment를 확인하려면 수량 실시간 PCR을 사용하여

Murine bone marrow transplantation models provide an important tool in measuring hematopoietic stem cell (HSC) functions and determining genes/molecules ...

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

마우스 Aortocaval 누관의 기술적 측면

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

A Novel Murine Model of Arteriovenous Fistula Failure: The Surgical Procedure in Detail

동정맥루 실패의 소설 쥐 모델 : 세부 수술

The arteriovenous fistula (AVF) still suffers from a high number of failures caused by insufficient remodeling and intimal hyperplasia from which the ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Myography 와이어를 사용 하 여 마우스 Mesenteric 동맥의 isometric 수축 측정

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

왼쪽된 심 방 협 유발 쥐에서 그룹 2 폐 동맥 고혈압과 폐 정 맥 Arterialization

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

A Protocol to Set Up Needle-Free Connector with Positive Displacement on Central Venous Catheter in Intensive Care Unit

Needle-free connectors were initially designed and promoted to avoid blood exposure for healthcare workers. Some recent data suggest that the latest ...

A Modified Two Kidney One Clip Mouse Model of Renin Regulation in Renal Artery Stenosis

신장 동맥 협착증에서 레닌 조절의 수정 된 두 신장 하나의 클립 마우스 모델

Renal artery stenosis is a common condition in patients with coronary or peripheral vascular disease where the renin angiotensin aldosterone system (RAAS) ...

A Rabbit Aortic Valve Stenosis Model Induced by Direct Balloon Injury

직접적인 풍선 손상으로 인한 토끼 대동맥 판막 협착증 모델

Animal models are emerging as an important tool to understand the pathologic mechanisms underlying aortic valve stenosis (AVS) because of the lack of ...

Development of an Effective Mice Model for Studying Oronasal Fistulas

Establishment of an Oronasal Fistula Mice Model

Investigating Wound Healing in Mice Models of Oronasal Fistulas (Video) | JoVE

Oronasal Fistula 마우스 모델 구축

This study presents a method utilizing heated ophthalmologic cautery to develop a viable model for investigating oronasal fistulas. C57BL/6 mice were used ...