Name: assessing the cellular immune response of the fruit fly, drosophila melanogaster, using an in vivo phagocytosis assay
Uploaded: 2019-04-10T15:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay at JoVE.com

लेखकों ने वीवो फैगोसाइटोसिस प्रयोगों में ले जाने में सहायता के लिए डॉ बेथ गोंजालेज और डॉ अपरजिता गर्ग का धन्यवाद । एक NSF UMD अग्रिम बीज अनुदान और UMD NIH T32 प्रशिक्षण अनुदान, सेल और आणविक जीव विज्ञान (CMB) और मेजबान-रोगज़नक़ बातचीत (HPI), इस काम के वित्त पोषित ।

1. इंजेक्शन के लिए फ्लोरेसेइन कणों को तैयार करें
<ol><li>10 मिलीग्राम वाणिज्यिक रूप से उपलब्ध की, गर्मी में मारे गए बैक्टीरिया फ्लोरेसइन के साथ लेबल कणों ( सामग्री की तालिकादेखें) ९९० μl बाँझ 1X pbs और 10 μl ५० mM...

<ol>
	<li>Akira, S., Uematsu, S., Takeuchi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pathogen+recognition+and+innate+immunity.">Pathogen recognition and innate immunity.</a> Cell. 124 (4), 783-801 (2006).</li><li>Kim, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Studying+host-pathogen+interactions+and+innate+immunity+in+Caenorhabditis+elegans.">Studying host-pathogen interactions and innate immunity in Caenorhabditis elegans.</a> Disease Models &amp; Mechanisms. 1 (4-5), 205-208 (2008).</li><li>Lemaitre, B., Hoffmann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+host+defense+of+Drosophila+melanogaster.">The host defense of Drosophila melanogaster.</a> Annual Review Immunology. 25, 697-743 (2007).</li><li>Wu, L. P., Choe, K. M., Lu, Y., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Immunity:+Genes+on+the+Third+Chromosome+Required+for+the+Response+to+Bacterial+Infection.">Drosophila Immunity: Genes on the Third Chromosome Required for the Response to Bacterial Infection.</a> Genetics. 159 (1), 189-199 (2001).</li><li>De Gregorio, E., Spellman, P. T., Tzou, P., Rubin, G. M., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Toll+and+Imd+pathways+are+the+major+regulators+of+the+immune+response+in+Drosophila.">The Toll and Imd pathways are the major regulators of the immune response in Drosophila.</a> EMBO Journal. 21 (11), 2568-2579 (2002).</li><li>Michel, T., Reichhart, J. M., Hoffmann, J. A., Royet, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Toll+is+activated+by+Gram-positive+bacteria+through+a+circulating+peptidoglycan+recognition+protein.">Drosophila Toll is activated by Gram-positive bacteria through a circulating peptidoglycan recognition protein.</a> Nature. 414 (6865), 756-759 (2001).</li><li>Choe, K. M., Werner, T., Stoven, S., Hultmark, D., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Requirement+for+a+peptidoglycan+recognition+protein+(PGRP)+in+Relish+activation+and+antibacterial+immune+responses+in+Drosophila.">Requirement for a peptidoglycan recognition protein (PGRP) in Relish activation and antibacterial immune responses in Drosophila.</a> Science. 296 (5566), 359-362 (2002).</li><li>Wu, J., Randle, K. E., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ird1+is+a+Vps15+homologue+important+for+antibacterial+immune+responses+in+Drosophila.">ird1 is a Vps15 homologue important for antibacterial immune responses in Drosophila.</a> Cellular Microbiology. 9 (4), 1073-1085 (2007).</li><li>Lemaitre, B., Nicolas, E., Michaut, L., Reichhart, J. M., Hoffmann, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+dorsoventral+regulatory+gene+cassette+spatzle/Toll/cactus+controls+the+potent+antifungal+response+in+Drosophila+adults.">The dorsoventral regulatory gene cassette spatzle/Toll/cactus controls the potent antifungal response in Drosophila adults.</a> Cell. 86 (6), 973-983 (1996).</li><li>Zambon, R. A., Nandakumar, M., Vakharia, V. N., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Toll+pathway+is+important+for+an+antiviral+response+in+Drosophila.">The Toll pathway is important for an antiviral response in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America. 102 (20), 7257-7262 (2005).</li><li>Lemaitre, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+recessive+mutation,+immune+deficiency+(imd),+defines+two+distinct+control+pathways+in+the+Drosophila+host+defense.">A recessive mutation, immune deficiency (imd), defines two distinct control pathways in the Drosophila host defense.</a> Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America. 92 (21), 9465-9469 (1995).</li><li>Leulier, F., Rodriguez, A., Khush, R. S., Abrams, J. M., Lemaitre, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Drosophila+caspase+Dredd+is+required+to+resist+gram-negative+bacterial+infection.">The Drosophila caspase Dredd is required to resist gram-negative bacterial infection.</a> EMBO Reports. 1 (4), 353-358 (2000).</li><li>Meister, M., Lagueux, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophilablood+cells.">Drosophilablood cells.</a> Cellular Microbiology. 5 (9), 573-580 (2003).</li><li>Flannagan, R. S., Jaumouille, V., Grinstein, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+cell+biology+of+phagocytosis.">The cell biology of phagocytosis.</a> Annual Review Pathology. 7, 61-98 (2012).</li><li>Anderson, R. A., Sando, G. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+and+expression+of+cDNA+encoding+human+lysosomal+acid+lipase/cholesteryl+ester+hydrolase.+Similarities+to+gastric+and+lingual+lipases.">Cloning and expression of cDNA encoding human lysosomal acid lipase/cholesteryl ester hydrolase. Similarities to gastric and lingual lipases.</a> Journal of Biological Chemistry. 266 (33), 22479-22484 (1991).</li><li>Ross, G. D., Reed, W., Dalzell, J. G., Becker, S. E., Hogg, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Macrophage+cytoskeleton+association+with+CR3+and+CR4+regulates+receptor+mobility+and+phagocytosis+of+iC3b-opsonized+erythrocytes.">Macrophage cytoskeleton association with CR3 and CR4 regulates receptor mobility and phagocytosis of iC3b-opsonized erythrocytes.</a> Journal of Leukocyte Biology. 51 (2), 109-117 (1992).</li><li>Elrod-Erickson, M., Mishra, S., Schneider, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Interactions+between+the+cellular+and+humoral+immune+responses+in+Drosophila.">Interactions between the cellular and humoral immune responses in Drosophila.</a> Current Biology. 10, 781-784 (2000).</li><li>Ramet, M., Pearson, A. M., Manfruelli, P., Li, X., Koziel, H., Gobel, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Scavenger+Receptor+CI+Is+a+Pattern+Recognition+Receptor+for+Bacteria.">Drosophila Scavenger Receptor CI Is a Pattern Recognition Receptor for Bacteria.</a> Immunity. 15 (6), 1027-1038 (2001).</li><li>Ramet, M., Manfruelli, P., Pearson, A. M., Mathey-Prevot, B., Ezekowitz, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+genomic+analysis+of+phagocytosis+and+identification+of+a+Drosophila+receptor+for+E.+coli.">Functional genomic analysis of phagocytosis and identification of a Drosophila receptor for E. coli.</a> Nature. 416 (6881), 644-648 (2002).</li><li>Philips, J. A., Rubin, E. J., Perrimon, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+RNAi+screen+reveals+CD36+family+member+required+for+mycobacterial+infection.">Drosophila RNAi screen reveals CD36 family member required for mycobacterial infection.</a> Science. 309, 1251-1253 (2005).</li><li>Agaisse, H., Burrack, L. S., Philips, J. A., Rubin, E. J., Perrimon, N., Higgins, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genome-wide+RNAi+screen+for+host+factors+required+for+intracellular+bacterial+infection.">Genome-wide RNAi screen for host factors required for intracellular bacterial infection.</a> Science. 309 (5738), 1248-1251 (2005).</li><li>Stuart, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Response+to+Staphylococcus+aureus+requires+CD36-mediated+phagocytosis+triggered+by+the+COOH-terminal+cytoplasmic+domain.">Response to Staphylococcus aureus requires CD36-mediated phagocytosis triggered by the COOH-terminal cytoplasmic domain.</a> Journal of Cell Biology. 170 (3), 477-485 (2005).</li><li>Stroschein-Stevenson, S. L., Foley, E., O&#8217;Farrell, P. H., Johnson, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identification+of+Drosophila+gene+products+required+for+phagocytosis+of+Candida+albicans.">Identification of Drosophila gene products required for phagocytosis of Candida albicans.</a> PLoS Biology. 4 (1), e4 (2006).</li><li>Kocks, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eater,+a+transmembrane+protein+mediating+phagocytosis+of+bacterial+pathogens+in+Drosophila.">Eater, a transmembrane protein mediating phagocytosis of bacterial pathogens in Drosophila.</a> Cell. 123 (2), 335-346 (2005).</li><li>Nehme, N. T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relative+roles+of+the+cellular+and+humoral+responses+in+the+Drosophila+host+defense+against+three+gram-positive+bacterial+infections.">Relative roles of the cellular and humoral responses in the Drosophila host defense against three gram-positive bacterial infections.</a> PLoS One. 6 (3), e14743 (2011).</li><li>Garver, L. S., Wu, J., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+peptidoglycan+recognition+protein+PGRP-SC1a+is+essential+for+Toll+signaling+and+phagocytosis+of+Staphylococcus+aureus+in+Drosophila.">The peptidoglycan recognition protein PGRP-SC1a is essential for Toll signaling and phagocytosis of Staphylococcus aureus in Drosophila.</a> Proceedings of the National Academy of Science of the United States of America. 103 (3), 660-665 (2006).</li><li>Garg, A., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+Rab14+mediates+phagocytosis+in+the+immune+response+to+Staphylococcus+aureus.">Drosophila Rab14 mediates phagocytosis in the immune response to Staphylococcus aureus.</a> Cellular Microbiology. 16 (2), 296-310 (2014).</li><li>Gonzalez, E. A., Garg, A., Tang, J., Nazario-Toole, A. E., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+glutamate-dependent+redox+system+in+blood+cells+is+integral+for+phagocytosis+in+Drosophila+melanogaster.">A glutamate-dependent redox system in blood cells is integral for phagocytosis in Drosophila melanogaster.</a> Current Biology. 23 (22), 2319-2324 (2013).</li><li>Nazario-Toole, A. E., Robalino, J., Okrah, K., Corrada-Bravo, H., Mount, S. M., Wu, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Splicing+Factor+RNA-Binding+Fox+Protein+1+Mediates+the+Cellular+Immune+Response+in+Drosophila+melanogaster.">The Splicing Factor RNA-Binding Fox Protein 1 Mediates the Cellular Immune Response in Drosophila melanogaster.</a> Journal of Immunology (Baltimore, Md: 1950). 201 (4), 1154-1164 (2018).</li><li>Guille, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Methods in Developmental Biology: Xenopus and Zebrafish. , (1999).</li><li>Koundakjian, E. J., Cowan, D. M., Hardy, R. W., Becker, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Zuker+collection:+a+resource+for+the+analysis+of+autosomal+gene+function+in+Drosophila+melanogaster.">The Zuker collection: a resource for the analysis of autosomal gene function in Drosophila melanogaster.</a> Genetics. 167 (1), 203-206 (2004).</li><li>Horn, L., Leips, J., Starz-Gaiano, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phagocytic+ability+declines+with+age+in+adult+Drosophila+hemocytes.">Phagocytic ability declines with age in adult Drosophila hemocytes.</a> Aging Cell. 13 (4), 719-728 (2014).</li><li>Brennan, C. A., Delaney, J. R., Schneider, D. S., Anderson, K. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psidin+is+required+in+Drosophila+blood+cells+for+both+phagocytic+degradation+and+immune+activation+of+the+fat+body.">Psidin is required in Drosophila blood cells for both phagocytic degradation and immune activation of the fat body.</a> Current Biology. 17 (1), 67-72 (2007).</li><li>Akbar, M. A., Tracy, C., Kahr, W. H., Kramer, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+full-of-bacteria+gene+is+required+for+phagosome+maturation+during+immune+defense+in+Drosophila.">The full-of-bacteria gene is required for phagosome maturation during immune defense in Drosophila.</a> Journal of Cell Biology. 192 (3), 383-390 (2011).</li></ol>

वाणिज्यिक रूप से उपलब्ध है, प्रतिदीप् त लेबल कणों सामान्य (०.२ μm कार्बोक्सिलेट-संशोधित microspheres) या रोगाणुओं की phagocytosis (प्रतिदीप् ति-लेबल गर्मी-या रासायनिक रूप से मारे गए बैक्टीरिया या खमीर) में भगोसाइटो...

जन्मजात प्रतिरक्षा सुरक्षा रोगजनक रोगाणुओं के खिलाफ रक्षा की पहली पंक्ति के रूप में । इन प्रतिक्रियाओं कार्यात्मक humoral और सेलुलर सहज प्रतिरक्षा में विभाजित किया जा सकता है, दोनों जिनमें से germline द्वारा मध्यस्थता कर रहे हैं-इनकोडिंग पैटर्न मान्यता रिसेप्टर्स (PRRs) कि नब्ज रोगज़नक़-जुड़े आणविक पैटर्न (PAMPs)1. सिग्नलिंग के कई मार्ग और प्रभावकारिता तंत्र जन्मजात प्रतिरक्षा के स्तनधारियों में संरक्षित कर रहे हैं और इस तरह के सूत्रकृमि, Caenorहैबडाइटिस एलिगेंस , और फल मक्खी, Drosophila melanogaster2के रूप में अकशेरों । फल मक्खी3संक्रामक सूक्ष्मजीवों के खिलाफ मेजबान रक्षा अध्ययन करने के लिए एक शक्तिशाली प्रणाली के रूप में उभरा है । Drosophila आनुवंशिक रूप से tractable है, आसानी से और सस्ते प्रयोगशालाओं में मागणी, और एक छोटी पीढ़ी के समय है । इसके अलावा, फल मक्खी रोगाणुओं की एक सरणी के खिलाफ अत्यधिक कुशल सुरक्षा दर्शाती है, वायरल, बैक्टीरियल, कवक, या परजीवी रोगज़नक़े के खिलाफ मेजबान प्रतिरक्षा की परीक्षा को सक्षम करने ।
Drosophila इम्युनिलॉजिस्ट ऐतिहासिक रूप से आगे आनुवंशिक स्क्रीन, जीनोम चौड़ा आरएनए मध्यस्थता हस्तक्षेप (rna) कीट कोशिका लाइनों की स्क्रीनिंग का उपयोग किया है, और पूर्व मौजूदा उत्परिवर्ती मक्खी उपभेदों सहज प्रतिरक्षा की जांच करने के लिए अग्रणी- पहचान और कई विकासवाद के लक्षण वर्णन humoral प्रतिरक्षा रास्ते4,5,6,7,8। Humoral सहज प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया, यकीनन, सबसे अच्छा फल मक्खियों में प्रतिरक्षा रक्षा की विशेषता है । संक्रमण के बाद, humoral प्रतिक्रिया hemolymph में रोगाणुरोधी पेप्टाइड (AMP) अणुओं के उत्पादन और प्रणालीगत रिहाई की ओर जाता है, कीड़े में रक्त के बराबर. AMPs अत्यधिक संरक्षित टोल और आईएमडी सिग्नलिंग मार्ग द्वारा उत्पादित कर रहे हैं । टोल मार्ग स्तनधारी TLR/IL-1R रिसेप्टर सिग्नलिंग के लिए समजात है, और आईएमडी मार्ग एक स्तनधारी ट्यूमर परिगलन फैक्टर-अल्फा सिग्नलिंग के लिए समजातीय है । ड्रोसोफिला में, टोल सिग्नलिंग ग्राम पॉजिटिव बैक्टीरिया, कवक, और ड्रोसोफिला एक्स वीरुएस6,9,10 और आईएमडी सिग्नलिंग द्वारा प्रेरित किया जाता है ग्राम नकारात्मक बैक्टीरिया11 ,12.
सेलुलर प्रतिरक्षा, encapsulation के शामिल, मेलानीकरण, और आक्रामक रोगजनकों के phagocytosis, विशेष रक्त कोशिकाओं द्वारा किए गए hemocytes13बुलाया । फल मक्खी में hemocytes के तीन वर्गों रहे हैं: क्रिस्टल कोशिकाओं, पटलीय, और plasmatocytes13. क्रिस्टल कोशिकाओं, जो लार्वा में परिसंचारी hemocytes के 5% बनाने के लिए, जारी proPhenoloxidase (proPO) एंजाइम रोगजनकों और मेजबान ऊतकों के मेलानीकरण के लिए अग्रणी घाव साइटों पर. लैम्लोसाइट्स, जो सामान्य रूप से स्वस्थ भ्रूण या लार्वा में नहीं पाए जाते हैं, वे आसंन कोशिकाएं होती हैं जो विदेशी वस्तुओं को संपुटित करती हैं । इन कोशिकाओं को प्यूप्रिएशन पर प्रेरित किया जाता है या जब लार्वा में परजीवी तसला अंडे जमा होते हैं । फेगोसाइटिक plasmatocytes, जो लार्वा में परिसंचारी hemocytes के ९५% बनाने के लिए और वयस्कों में सभी शेष hemocytes, विकास के दौरान ऊतक remodeling में एक भूमिका निभाते है और विशेष रूप से, Drosophila सेलुलर प्रतिरक्षा के मुख्य effector सेल के रूप में सेवा करते हैं ।
फैगोसाइटोसिस जन्मजात प्रतिरक्षा रक्षा की एक तत्काल और महत्वपूर्ण लाइन; रोगाणुओं है कि उल्लंघन मेजबान उपकला बाधा जल्दी से घिरा हुआ है और भॉगोसाइटिक रक्त कोशिकाओं द्वारा सफाया (भगोशितोसिस के सेल जीव विज्ञान की एक व्यापक समीक्षा के लिए संदर्भ देखें 14) । यह प्रक्रिया शुरू की जाती है जब जर्मलाइन-एनकोडेड पैटर्न मान्यता रिसेप्टर्स (PRRs) hemocytes पर रोगाणु संबंधित आणविक पैटर्न (PAMPs) माइक्रोब्स की पहचान. एक बार अपने लक्ष्य के लिए बाध्य, prrs cascades संकेत है कि ऐक्टिन cytoskeleton remodeling के माध्यम से स्यूडोपॉड्स के गठन के लिए नेतृत्व शुरू । स्यूडोपॉड सूक्ष्मजीव को घेर लेते हैं, जिसे बाद में झंकृत किया जाता है और एक नवजात अंगक में भली भांति किया जाता है । रोगाणु नष्ट हो जाते हैं क्योंकि फेगोसोम फेगोसोम की प्रक्रिया से गुजरता है, जब फेगोसोम रक्तकोशिका के आंतरिक भाग की ओर तस्करी करता है और लाइसोसोम के साथ बातचीत की एक श्रृंखला के माध्यम से acidifies । विट्रो और सेल में जीव विज्ञान के अध्ययन में स्तनधारी प्राथमिक कोशिकाओं की पहचान करने और कारक है कि इस तरह के स्तनधारी एफसी-गामा रिसेप्टर और C3b रिसेप्टर्स15,16के रूप में phagocytosis, को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाई है । फिर भी, बड़े पैमाने पर स्क्रीन या vivo अध्ययन में निष्पादित करने की क्षमता स्तनधारी सिस्टम में सीमित हैं ।
यहां हम एक वयस्क फल मक्खियों, जो पहली २०००17में डेविड Schneider की प्रयोगशाला द्वारा शुरू की प्रक्रिया पर आधारित है में phagocytosis के लिए vivo परख में मौजूद है । Schneider प्रयोगशाला से पता चला कि seसीले hemocytes पेट पृष्ठीय पोत के साथ संकुल आसानी से phagocytose polystyrene मोती और बैक्टीरिया । फगोसाइटोसिस कल्पना करने के लिए, मक्खियों प्रतिदीप्ति लेबल कणों के साथ इंजेक्शन कर रहे हैं (जैसे ई. कोलाई के साथ लेबल फ्लोरेसेइन आइसोथायोसायनेट (ई.कोलाई-fitc)), 30 मिनट के लिए इनक्बल्ड करने के लिए hemocytes समय कणों निगल करने के लिए अनुमति देते हैं, और फिर ट्राइपैन ब्लू के साथ इंजेक्ट किया जाता है, जो इनक्यूबेशन अवधि के दौरान कणों की प्रतिदीप्ति को नहीं फैलाए । मक्खी पृष्ठीय जहाजों तो एक औंधा फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप का उपयोग कर imaged हैं । यह लाभदायक कागज, एक अपेक्षाकृत सरल प्रयोग का उपयोग करते हुए, प्रदर्शन किया है कि hemocytes फैगोसाइटोज बैक्टीरिया और लेटेक्स मोती, कि जीवाणु भक्षककोशिका पूर्व से हिचकी जा सकता है लेटेक्स मोती के साथ मक्खियों इंजेक्शन, और है कि दोनों सेलुलर और humoral बिना मक्खियों प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं को भी ई.कोलाई के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं । इस रिपोर्ट में प्रस्तुत परख Schneider लैब के काम पर बनाता है विवो phagocytosis में पृष्ठीय पोत से घिरा हुआ कणों की प्रतिदीप्ति तीव्रता को मापने के द्वारा निर्धारित hemocytes ।
स्तनधारी प्रणालियों में लिया दृष्टिकोण के समान, drosophila आनुवंशिकी शुरू में जीनोम चौड़ा इस्तेमाल किया विट्रो rnai स्क्रीन में सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए आवश्यक जीन की पहचान करने के लिए18,19,20 ,21,22,23. हालांकि, vivo phagocytosis परख में वयस्क के विकास के अनुवर्ती प्रयोगों को आसानी से पूरे जानवरों में किया जा सक्षम है, इस प्रकार शोधकर्ताओं जैविक विट्रो अध्ययन में पहचान कारकों की भूमिका को सत्यापित करने की अनुमति । इस तरह के साथ मामला था ट्रांस्मेल् ड रिसेप्टर आदमखोर, जो पहली बार एक RNAi स्क्रीन में एक जीवाणु ग्राही के रूप में पहचान की गई S2 की कोशिकाओं का उपयोग कर24 और फिर बाद में मध्यस्थता करने के लिए दिखाया गया escherichia कोलाई (ई.कोलाई), enterococcus फेकैलिस, और स्टैफिलोकोकस ऑरियस (एस. ऑरियस) वयस्कों में फगोसाइटोसिस25.
हमारे प्रयोगशाला आगे आनुवंशिक स्क्रीन और जीनोम व्यापक एसोसिएशन के अध्ययन में vivo phagocytosis परख में कार्यरत ( Drosophila आनुवंशिक संदर्भ पैनल (dgrp) का उपयोग कर) उपंयास जीन है कि वयस्क hemocytes में phagocytosis को विनियमित की पहचान । इन अध्ययनों के लक्षण वर्णन रिसेप्टर्स PGRP-SC1A और PGRP-एसए26, intracellular आशय के अवैध व्यापार Rab1427, ग्लूटेमेट ट्रांसपोर्टर polyphemus28, और आरएनए-बाध्यकारी प्रोटीन फॉक्स-129के लिए नेतृत्व किया ।
हमें आशा है कि भविष्य vivo भगोसाइटोसिस में शामिल स्क्रीन अतिरिक्त जीन है कि Drosophilaमें सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के लिए महत्वपूर्ण है की पहचान करने के लिए नेतृत्व कर सकता है । इस तरह के dgrp या drosophila सिंथेटिक जनसंख्या संसाधन (dspr) के रूप में पूरी तरह से sequenced अंत: प्रजात लाइनों, का उपयोग कर स्क्रीन, phagocytosis या hemocyte विकास को प्रभावित करने वाले प्राकृतिक वेरिएंट की पहचान कर सकते हैं । इसके अलावा, तकनीक drosophila की अन्य प्रजातियों में अपनाया जा सकता है या इस तरह के २५० drosophila प्रजातियों के संग्रह के रूप में नए समुदाय संसाधनों, स्क्रीन करने के लिए इस्तेमाल किया राष्ट्रीय Drosophila प्रजाति स्टॉक सेंटर द्वारा बनाए रखा (ndssc ) कॉर्नेल में । इन प्रयोगों से बाहर किया जा सकता है प्रतिदीप्ति-लेबल जीवाणु या कवक दीवार bioparticles कि व्यावसायिक रूप से उपलब्ध है या जीवाणु या कवक प्रजातियों में से किसी भी संख्या का उपयोग किया जा सकता है-बशर्ते कि सूक्ष्म जीव फ्लोरोसेंट मार्कर व्यक्त .

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.2&#956;m Red Fluorescent Carboxylate Modified FluoSpheres</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>F8810</td>
			<td>Fluorescently-labeled latex beads to test general phagocytic capacity of phagocytes. (~580/~605 nm) Inject a 1:20 dilution in PBS with 5% dye.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5430-10 PicoNozzle Kit</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>5430-10</td>
			<td>Holder for 1.0mm pipette</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E13231</td>
			<td>Killed E. coli labeled with Alexa Fluor 488. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~495/~519 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E23370</td>
			<td>Killed E. coli labeled with Alexa Fluor 594. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~590/~617 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Fluorescein conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E2861</td>
			<td>Killed E. coli labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~494/~518 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Texas Red conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E2863</td>
			<td>Killed E. coli labeled with Texas Red. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~595/~615 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>E. coli (K-12 Strain) BioParticles, Texas Red conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E2863</td>
			<td>Killed E. coli labeled with Texas Red. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-negative bacteria. (~595/~615 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Needle Pipette Puller</td>
			<td>David Kopf Instruments</td>
			<td>Model 725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pHrodo Red E. coli BioParticles Conjugate for Phagocytosis</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>P35361</td>
			<td>Killed E. coli labeled with pHrodo Red. Use to test phagocyte reconition, uptake, and phagosome maturation of gram-negative bacteria. (~560/~585 nm). No need to quench with Trypan Blue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pHrodo Red S. aureus BioParticles Conjugate for Phagocytosis</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A10010</td>
			<td>Killed S. aureus labeled with pHrodo Red. Use to test phagocyte reconition, uptake, and phagosome maturation of gram-positve bacteria. (~560/~585 nm). No need to quench with Trypan Blue.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pneumatic PicoPump PV820</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>SYS-PV820</td>
			<td>The World Precision Instruments Pneumatic PicoPump PV820 uses differential pressures to hold liquid in the glass needle between injections. The user manually controls short bursts of gas pressure to expel the liquid &#8211; allowing delivery of sub-nanoliter volumes. The amount of liquid delivered depends on two main variables &#8211; the size of the glass needle opening and the amount of time injection pressure is applied. set the instrument to 100 ms &#8220;TIMED&#8221; mode.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. aureus (Wood Strain without protein A) BioParticles, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S23371</td>
			<td>Killed S. aureus labeled with Alexa Fluor 488. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-positive bacteria. (~495/~519 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. aureus (Wood Strain without protein A) BioParticles, Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>S23372</td>
			<td>Killed S. aureus labeled with Alexa Fluor 594. Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-positive bacteria. (~590/~617 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>S. aureus (Wood Strain without protein A) BioParticles, Fluorescein conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>E2851</td>
			<td>Killed S. aureus labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of gram-positive bacteria. (~494/~518 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thin Wall Glass Capillaries</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td>TW100F-3</td>
			<td>Needles for injection. OD = 1.0 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Trypan Blue Solution (0.4%)</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>T8154</td>
			<td>Used to quench extracellular fluorescence of Fluorescein, Alexa Fluor, or Texas Red labeled particles.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ZEISS SteREO Microscope (Discovery.V8)</td>
			<td>Zeiss</td>
			<td>SteREO Discovery.V8</td>
			<td>Inverted fluorescence microscope for imaging flies. Use a digital camera (example: AxioCam HC camera) and the accompanying software (example: AxioVision 4.7 software) to take pictures.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) BioParticles, Alexa Fluor 488 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z23373</td>
			<td>Killed labeled with Alexa Fluor 488. Use to test phagocyte recogntion and uptake of yeast. (~495/~519 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) BioParticles, Alexa Fluor 594 conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z23374</td>
			<td>Killed labeled with Alexa Fluor 594. Use to test phagocyte recogntion and uptake of yeast. (~590/~617 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) BioParticles, Fluorescein conjugate</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z2841</td>
			<td>Killed labeled with FITC (Fluorescein). Use to test phagocyte recogntion and uptake of yeast. (~494/~518 nm)</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae) BioParticles, Texas Red</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>Z2843</td>
			<td>Killed labeled with Texas Red. Use to test phagocyte recogntion and uptake of yeast. (~595/~615 nm)</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing the cellular immune response of the fruit fly, drosophila melanogaster, using an in vivo phagocytosis assay

सभी जानवरों में, सहज प्रतिरक्षा रोगजनकों की एक व्यापक स्पेक्ट्रम के खिलाफ एक तत्काल और मजबूत रक्षा प्रदान करता है । Humoral और सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाओं सहज प्रतिरक्षा की मुख्य शाखाओं रहे हैं, और इन प्रतिक्रियाओं को विनियमित कारकों के कई विकासवादी और स्तनधारियों के बीच का संरक्षण कर रहे हैं । फेगोसाइटोसिस, सेलुलर सहज प्रतिरक्षा के केंद्रीय घटक, प्रतिरक्षा प्रणाली के विशेष रक्त कोशिकाओं द्वारा किया जाता है । फल मक्खी, Drosophila मेलानोगैस्टर, एक शक्तिशाली आनुवंशिक मॉडल के रूप में उभरा है आणविक तंत्र और पूरे जानवरों में भगोसाइटोसिस के शारीरिक प्रभावों की जांच । यहां हम एक इंजेक्शन का प्रदर्शन-vivo phagocytosis परख में आधारित कण और Drosophila रक्त कोशिकाओं, hemocytes द्वारा विनाश को बढ़ाता है । प्रक्रिया शोधकर्ताओं ठीक कण एकाग्रता और खुराक को नियंत्रित करने के लिए अनुमति देता है, यह समय की एक छोटी राशि में अत्यधिक reproducible परिणाम प्राप्त करने के लिए संभव बनाने. प्रयोग मात्रात्मक, प्रदर्शन करने में आसान है, और मेजबान कारकों है कि रोगज़नक़ मांयता को प्रभावित करने के लिए स्क्रीन पर लागू किया जा सकता है, और मंजूरी ।

एक योजनाबद्ध में विवो भगोसाइटोसिस परख का उपयोग कर fluorescein-लेबल कणों चित्रा 1aमें दिखाया गया है । मक्खियों को विद्युत टेप के एक टुकड़े पर और नीचे की ओर घुड़सवार कर रहे है और पेट के पहल?...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay at JoVE.com

Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

यह प्रोटोकॉल वयस्क Drosophila मेलानोगैस्टर में vivo phagocytosis परख में एक का वर्णन phagocyte मांयता और माइक्रोबियल संक्रमण की मंजूरी मात्रा ।

फल मक्खी, Drosophila melanogasterके सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया का आकलन, Vivo Phagocytosis परख में एक का उपयोग

In all animals, innate immunity provides an immediate and robust defense against a broad spectrum of pathogens. Humoral and cellular immune responses are ...

वीवो फागोसिटोसिस परख में यह शोधकर्ताओं को वयस्क रक्त कोशिकाओं में फैगोसाइटोसिस को विनियमित करने वाले उपन्यास जीन की पहचान करने के लिए आनुवंशिक स्क्रीन और जीनोम-वाइड एसोसिएशन अध्ययन करने की अनुमति देता है। यह प्रयोग मात्रात्मक, प्रदर्शन करने में आसान है, और रोगजनक मान्यता, तेज और निकासी को प्रभावित करने वाले मेजबान कारकों के लिए जीवित जानवरों की स्क्रीनिंग पर लागू किया जा सकता है। सुई खींचने के साथ पतली दीवार ग्लास केशिकाओं को खींचने के बाद, एक माइक्रोस्कोप के नीचे सुई को पकड़ने के लिए एक माइक्रोमीटर का उपयोग करें, और 100-माइक्रोमीटर टिप व्यास के लिए टिप को तोड़ने के लिए नंबर पांच, ठीक-पॉइंट, स्टेनलेस-स्टील चिमटी का उपयोग करें।प्रत्येक फ्लाई में इंजेक्ट किए जाने वाले तरल की मात्रा को मापने के लिए, पीबीएस में बाँझ 5% खाद्य रंग के साथ एक केशिका सुई लोड करें, और तरल को 0.01 मिलीमीटर चरण माइक्रोमीटर पर खनिज तेल की एक बूंद पर निष्कासित करें। पैराफिल्म के एक छोटे वर्ग पर मिलीलीटर कणों के प्रति 1.6 मिलीग्राम के 10 माइक्रोलीटर वितरित करें, और तरल को सुई में खींचें। इंजेक्टर नोजल में सुई माउंट, और लाइन एनेस्थेटाइज्ड फ्लाई पैड पर अपने निर्धारित क्षेत्र के साथ मक्खियों, वेंट्रल साइड अप, पैड के सामने की ओर उन्मुख सिर के साथ।बेंच पर इसी क्षेत्रों में शीशियों प्लेस, और तरल के पांच, १०० मिलीसेकंड पंपों के साथ पेट के ऊपरी कोने में मक्खियों सुई कुल कणों के बारे में 10 नैनोलीटर देने के लिए । प्रत्येक फ्लाई को उपयुक्त शीशी में स्थानांतरित करें क्योंकि यह इंजेक्शन है, शीशी पर समय को ध्यान में रखते हुए। इसके बाद, 0.4% ट्राइपैन ब्लू समाधान के साथ एक नई सुई लोड करें, और वायवीय इंजेक्टर को गेटेड करें, ताकि हवा के निरंतर प्रवाह को सुई से तरल को बाहर निकालने की अनुमति दी जा सके।प्रारंभिक इंजेक्शन के 30 मिनट बाद, प्रत्येक फ्लाई पेट को ट्राइपैन ब्लू के साथ इंजेक्ट करें जब तक कि पेट पूर्ण और डिटेन्ड न हो जाएं। विद्युत टेप के साथ माइक्रोस्कोप स्लाइड पर मक्खियों माउंट, वेंट्रल साइड नीचे, उन्हें टेप करने के लिए उन्हें सुरक्षित करने के लिए मक्खी के पक्ष में पंख धक्का। फिर, धीरे-धीरे सिर को टेप में धकेल दें ताकि यह सुनिश्चित किया जा सके कि फ्लाई आगे नहीं बढ़ेगी।सभी मक्खियों को सुरक्षित करने के तुरंत बाद, कीड़ों को चित्रित करें, एक समय में एक, डिजिटल कैमरे और कंप्यूटर से जुड़े उल्टे फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोप पर 25 या 32 बार आवर्धन पर, डिजिटल कैमरे के लिए कंप्यूटर सॉफ्टवेयर का उपयोग करके प्रत्येक फ्लाई के पृष्ठीय पोत पर ध्यान केंद्रित करते हुए। फिर, प्रयोगों के बीच एक्सपोजर समय और आवर्धन रिकॉर्ड करें। फ्लोरेसेंस की मात्रा निर्धारित करने के लिए, एक उपयुक्त इमेजिंग विश्लेषण कार्यक्रम खोलें, और एक छवि खोलें।पृष्ठीय पोत की फ्लोरेसेंस तीव्रता को मापने के लिए, पृष्ठीय पोत के चारों ओर एक बहुभुज आकर्षित करें, और बहुभुज के अंदर फ्लोरेसेंस तीव्रता को रिकॉर्ड करने के लिए उपाय का चयन करें। पृष्ठभूमि फ्लोरेसेंस तीव्रता निर्धारित करने के लिए, पहले बहुभुज की नकल करें, और इसे प्रत्येक फ्लाई के पृष्ठीय पोत से सटे क्षेत्र में ले जाएं। फिर, उपाय का चयन करें, और पृष्ठभूमि क्षेत्र की फ्लोरेसेंस तीव्रता रिकॉर्ड करें।पृष्ठभूमि फ्लोरेसेंस द्वारा पृष्ठीय पोत फ्लोरेसेंस को सामान्य बनाने के लिए, बाकी मक्खियों की फ्लोरेसेंस तीव्रता को मापने के बाद, पृष्ठभूमि फ्लोरेसेंस द्वारा पृष्ठीय पोत फ्लोरेसेंस को विभाजित करें, और एक तनाव में सभी मक्खियों की औसत सामान्यीकृत पृष्ठीय पोत फ्लोरेसेंस तीव्रता की गणना करें। विद्युत टेप के एक टुकड़े पर वेंट्रल साइड पर चढ़कर होने के बाद, पेट के पहले दो खंड, जहां पृष्ठीय पोत स्थित है, स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। प्रयोगात्मक त्रुटि के प्रमुख स्रोत इंजेक्शन और प्रक्रिया के इमेजिंग चरणों पर उत्पन्न होते हैं।एक ही सुई का उपयोग करने के लिए कई मक्खियों सुई यह मक्खी ऊतक या कणों के साथ भरा हो सकता है । मक्खियों जो अपने पूरे पेट में पर्याप्त ट्राइपान ब्लू फ्लोरेसेंस प्राप्त नहीं करते हैं, जो पृष्ठभूमि फ्लोरेसेंस में पृष्ठीय पोत के अनुपात को कम कर सकते हैं, इस प्रकार जानवर के वास्तविक फ्लोरेसेंस तीव्रता अनुपात को कम कर सकते हैं। मक्खियों को कार्बन डाइऑक्साइड द्वारा स्थिर करते समय फोटो खिंचवाना चाहिए, क्योंकि सक्रिय रूप से चलने वाली मक्खियां धुंधली छवियों का उत्पादन करते हैं जिन्हें मात्रा निर्धारित नहीं किया जा सकता है।एथिल मीथेन्सल्फोनेट-उपचारित मक्खियों के ज़ुकर संग्रह से एक उत्परिवर्ती रेखा ग्राम-नकारात्मक और ग्राम-सकारात्मक बैक्टीरिया को फगोसाइटोज करने में असमर्थ है और वीवो फागोसिटोसिस परख में लगभग कोई पृष्ठीय पोत फ्लोरेसेंस प्रदर्शित नहीं करती है, जो आइसोजेनिक पृष्ठभूमि ज़ुकर तनाव और एक अन्य सामान्य प्रयोगशाला नियंत्रण तनाव के साथ बनती है। समय और उस क्रम का ट्रैक रखें जिसमें मक्खियों को यह सुनिश्चित करने के लिए इंजेक्ट किया जाता है कि मक्खियां रोगजनक मान्यता के तुलनीय चरणों में हैं और इमेजकिए जाने पर तेज होती हैं। फैगोसाइटिक दोषों में अंतर्निहित आणविक तंत्र कॉन्फोसल माइक्रोस्कोपी के साथ एकल हीमोसाइट्स का अध्ययन करके या फ्लोरेसेंस-सक्रिय सेल छंटाई के बाद या वयस्क हीमोसाइट्स के चुंबकीय मनका अलगाव द्वारा निर्धारित किया जा सकता है।

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Assessing the Cellular Immune Response of the Fruit Fly, Drosophila melanogaster, Using an In Vivo Phagocytosis Assay

Multicolor Flow Cytometry Analyses of Cellular Immune Response in Rhesus Macaques

रीसस मकाक में सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के बहुरंगा प्रवाह cytometry विश्लेषण

The rhesus macaque model is currently the best available model for HIV-AIDS with respect to understanding the pathogenesis as well as for the development ...

Seven Steps to Stellate Cells

सात कदम कक्ष तारामय

Hepatic stellate cells are liver-resident  cells of star-like morphology and are located in the space of Disse between  liver sinusoidal endothelial cells ...

An Introduction to Parasitic Wasps of Drosophila and the Antiparasite Immune Response

An Introduction to Parasitic Wasps of Drosophila and the Antiparasite Immune Response

के परजीवी wasps के लिए एक परिचय<em&gt; ड्रोसोफिला</em&gt; और Antiparasite इम्यून रिस्पांस

Most known parasitoid wasp species attack the larval or pupal stages of Drosophila. While Trichopria drosophilae infect the pupal stages of the host (Fig. ...

Intravital Imaging of the Mouse Thymus using 2-Photon Microscopy

माउस 2-photon माइक्रोस्कोपी का उपयोग thymus के intravital इमेजिंग

Two-photon Microscopy (TPM) provides image acquisition in deep areas inside tissues and organs. In combination with the development of new stereotactic ...

Quantitative Measurement of the Immune Response and Sleep in Drosophila

Quantitative Measurement of the Immune Response and Sleep in Drosophila

प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया और नींद में मात्रात्मक मापन<em&gt; ड्रोसोफिला</em

A complex interaction between the immune response and  host behavior has been described in a wide range of species. Excess sleep, in  particular, is known ...

Quantification of the Respiratory Burst Response as an Indicator of Innate Immune Health in Zebrafish

Zebrafish में सहज प्रतिरक्षा स्वास्थ्य का एक संकेतक के रूप में श्वसन फट रिस्पांस की मात्रा

The phagocyte respiratory burst is part of the innate immune response to  pathogen infection and involves the production of reactive oxygen species (ROS). ...

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

Investigating the Effects of Probiotics on Pneumococcal Colonization Using an In Vitro Adherence Assay

एक का प्रयोग न्यूमोकोकल औपनिवेशीकरण पर प्रोबायोटिक्स के प्रभाव की जांच<em&gt; इन विट्रो</em&gt; पालन परख

Adherence of Streptococcus pneumoniae (the pneumococcus) to the epithelial lining of the nasopharynx can result in colonization and is considered a ...

Using RNA-interference to Investigate the Innate Immune Response in Mouse Macrophages

माउस मैक्रोफेज में सहज प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की जांच करने के लिए आरएनए हस्तक्षेप का प्रयोग

Macrophages are key phagocytic innate immune cells.  When macrophages encounter a pathogen, they produce antimicrobial proteins and compounds to kill the ...

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

In Vitro Analysis of Myd88-mediated Cellular Immune Response to West Nile Virus Mutant Strain Infection

वेस्ट नील वायरस उत्परिवर्ती तनाव संक्रमण को Myd88 की मध्यस्थता सेलुलर प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के इन विट्रो विश्लेषण में

An attenuated West Nile virus (WNV), a nonstructural (NS) 4B-P38G mutant, induced higher innate cytokine and T cell responses than the wild-type WNV in ...

Systemic Bacterial Infection and Immune Defense Phenotypes in Drosophila Melanogaster

Systemic Bacterial Infection and Immune Defense Phenotypes in Drosophila Melanogaster

प्रणालीगत जीवाणु संक्रमण और प्रतिरक्षा रक्षा phenotypes में<em&gt; ड्रोसोफिला मेलानोगास्टर</em

The fruit fly Drosophila melanogaster is one of the premier model organisms for studying the function and evolution of immune defense. Many aspects of ...