Name: quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester
Uploaded: 2019-06-04T13:00:00
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Ce travail a été soutenu par : La Fondation de recherche sur le diabète juvénile [JDRF 5-CDA-2014-210-A-N] (S. M.). Le National Health and Medical Research Council (NHMRC GNT123586) (S. M.), Diabetes Australia Research Trust Millennium Award (Y17M1-MANS) (S. M.), Operational Infrastructure Support Program of the Victorian Government (S. M., A. D., E. T., M. S.), et NHMRC Bourse d'études supérieures APP1094337 et Bourse de doctorat de la FRDJ (M. S.).

Tous les sujets ont donné le consentement informé avant la collecte du sang périphérique. L'approbation éthique des expériences utilisant PBMC a été donnée par St. Vincent's Hosptial (HREC-A 135/08, et HREC-A 161/15).
1. Préparation de réactif
<ol><li>
Médias de cellule T humains
	<ol>
<li>Préparer rp-5 médias pour la culture PBMC, qui se compose de RPMI 1640, 1x acides aminés non essentiels, L-alanyl-L-glutamine dipeptide (2 mM), pénicilline (100 U/mL)/strep...

<ol>
	<li>Duque, A., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+effects+of+BrdU+and+3H-Thymidine+incorporation+into+DNA+on+cell+proliferation,+position+and+fate.">Different effects of BrdU and 3H-Thymidine incorporation into DNA on cell proliferation, position and fate.</a> Journal of Neuroscience. 31, 15205-15217 (2011).</li><li>Mannering, S. I., Zhong, J. I. E., Cheers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+activation,+proliferation+and+apoptosis+in+primary+Listeria+monocytogenes+infection.">T-cell activation, proliferation and apoptosis in primary Listeria monocytogenes infection.</a> Immunology. 106, 87-95 (2002).</li><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry.">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> Journal of Immunological Methods. 171, 131-137 (1994).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+method+for+detecting+proliferation+of+rare+autoantigen-specific+human+T+cells.">A sensitive method for detecting proliferation of rare autoantigen-specific human T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283, 173-183 (2003).</li><li>Quah, B. J. C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Carboxyfluorescein+Diacetate+Succinimidyl+Ester+(CFSE)+to+Monitor+Lymphocyte+Proliferation.">The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation.</a> Journal of Visualized Experiments. , 4-7 (2010).</li><li>Ten Brinke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+T-cell+responses+in+translational+studies:+Optimization+of+dye-based+proliferation+assay+for+evaluation+of+antigen-specific+responses.">Monitoring T-cell responses in translational studies: Optimization of dye-based proliferation assay for evaluation of antigen-specific responses.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1-15 (2017).</li><li>Gillespie, G. M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strong+TCR+Conservation+and+Altered+T+Cell+Cross-Reactivity+Characterize+a+B*57-Restricted+Immune+Response+in+HIV-1+Infection.">Strong TCR Conservation and Altered T Cell Cross-Reactivity Characterize a B*57-Restricted Immune Response in HIV-1 Infection.</a> Journal of Immunolgy. 177, 3893-3902 (2006).</li><li>Tynan, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Resolution+Structures+of+Highly+Bulged+Viral+Epitopes+Bound+to+Major+Histocompatibility+Complex+Class+I:+Implications+for+t-cell+receptor+engagement+and+t-cell+immunodominance.">High Resolution Structures of Highly Bulged Viral Epitopes Bound to Major Histocompatibility Complex Class I: Implications for t-cell receptor engagement and t-cell immunodominance.</a> Journal of Biological Chemistry. 280, 23900-23909 (2005).</li><li>Blanchard, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoplasmic+reticulum+aminopeptidase+associated+with+antigen+processing+defines+the+composition+and+structure+of+MHC+class+I+peptide+repertoire+in+normal+and+virus-infected+cells.">Endoplasmic reticulum aminopeptidase associated with antigen processing defines the composition and structure of MHC class I peptide repertoire in normal and virus-infected cells.</a> Journal of Immunology. 184, 3033-3042 (2010).</li><li>Glanville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+specificity+groups+in+the+T+cell+receptor+repertoire+repertoire.">Identifying specificity groups in the T cell receptor repertoire repertoire.</a> Nature. 547, 94-98 (2017).</li><li>Wooldridge, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricks+with+tetramers:+how+to+get+the+most+from+multimeric+peptide+MHC.">Tricks with tetramers: how to get the most from multimeric peptide MHC.</a> Immunology. 126, 147-164 (2009).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+method+for+cloning+human+autoantigen-specific+T+cells.">An efficient method for cloning human autoantigen-specific T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298, 83-92 (2005).</li><li>So, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proinsulin+C-peptide+is+an+autoantigen+in+people+with+type+1+diabetes.">Proinsulin C-peptide is an autoantigen in people with type 1 diabetes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115, (2018).</li><li>Hui-Yuen, J., Mcallister, S., Koganti, S., Hill, E., Bhaduri-Mcintosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+Epstein-Barr+Virus+Growth-transformed+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. , 2-7 (2011).</li><li>Alexander-Miller, M. A., Leggatt, G. R., Berzofsky, J. A., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expansion+of+high+or+low+avidity+cytotoxic+T+lymphocytes+and+efficacy+for+adoptive+immunotherapy.">Selective expansion of high or low avidity cytotoxic T lymphocytes and efficacy for adoptive immunotherapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93, 4102-4107 (1996).</li></ol>

La prolifération à base de CFSE est une méthode simple et robuste pour détecter et énumérer les cellules CD4et T humaines spécifiques à l'antigène. Il a déjà été démontré que l'utilisation de la concentration optimale de CFSE est essentielle pour des résultats optimaux4. Trop de CFSE abroge la prolifération, alors que trop peu ne permet pas de distinguer les cellules divisées et indivises. En revanche, des concentrations relativement élevées (5,0 M) de CFSE sont util...

La capacité de détecter et d'étudier les lymphocytes T spécifiques à l'antigène est importante dans les études de l'immunité à médiation cellulaire. Cependant, cela est particulièrement difficile pour les réponses CD4et Lymphocellulaires spécifiques à l'autoantigène, qui sont très faibles et difficiles à détecter. Une méthode courante utilisée pour la détection de la prolifération des lymphocytes spécifiques à l'antigène est [3H]-thymidine, qui est un nucléotide radio-étiqueté incorporé dans l'ADN des cellules proliférantes. Bien que l'analyse [3H]-thymidine puisse détecter la synthèse de l'ADN, cette méthode est une mesure indirecte de la division cellulaire, car la synthèse de l'ADN peut initier indépendamment de la mitose (c.-à-d. pendant la duplication génétique et l'apoptose1). Cette question est aggravée par le fait que la prolifération des cellules spécifique à l'antigène peut entraîner une apoptose considérable2, conduisant à une surestimation potentielle de la prolifération spécifique à l'antigène. En outre, la méthode [3H]-thymidine ne fournit pas d'informations phénotypiques pour les lymphocytes proliférants, tels que la prolifération des lignées CD4 ou CD8 dans les PBMC stimulées par des peptides antigéniques.
En 2003, nous avons publié le premier essais de dilution de colorant utilisant CFSE, appelé l'assay de prolifération basé sur CFSE3,4. CFSE est un colorant fluorescent qui se lie de façon stable aux protéines intracellulaires en formant un lien covalent avec les résidus intracellulaires de lysine. Puisque les protéines labellées CFSE sont divisées également entre les cellules filles3, les cellules qui se sont divisées peuvent être distinguées des cellules indivises par cytométrie de flux, qui permet également le phénotypage quantitatif des populations de lymphocytes. En effet, le nombre de divisions qu'une cellule a subies depuis le moment de la coloration DE la SCEPeut peut être mesuré à un certain degré5. Plus récemment, de nombreux colorants similaires tels que CellTrace Violet proliferation dye (VPD) et CytoTrack colorant ont été développés, qui fonctionnent d'une manière similaire6. Ce protocole met l'accent sur l'ESFC, mais les principes s'appliquent également à d'autres colorants connexes.
La coloration des tétramères Peptide-MHC est une méthode largement utilisée pour détecter et clonage des cellules CD8et T spécifiques à l'antigène. Il s'agit d'une méthode bien établie7,8,9,10; cependant, le clonage à base de tétramères exige une connaissance existante de la restriction de l'épitope/MHC et chaque épitome nécessite son propre tétramer11, ce qui limite la portée de la découverte et du clonage de nouvelles cellules T spécifiques à l'épitopène. La prolifération à base de CFSE peut être utilisée avec des peptides, des protéines ou des lysates cellulaires. Le protocole décrit ci-dessus est à la fois simple et robuste, et les cellules CD4et T qui répondent peuvent être triées pour être utilisées dans les tests de caractérisation fonctionnelle et biochimique en aval12,13.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-human CD4-AlexaFluor647</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317422</td>
			<td>RRID:AB_2716180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>71-7167-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Influenza A H1N1 (PR8) Matrix protein 1</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>40010-V07E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential amino acids (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/ Streptomycin (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pooled human serum</td>
			<td>Australian Red Cross</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proinsulin C-peptide PI33-63</td>
			<td>Purar Chemicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made synthetic peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetanus Toxoid protein</td>
			<td>Statens Serum Intitut</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester

Décrit est une méthode simple, in vitro, colorant basée sur la dilution pour mesurer la prolifération des cellules CD4et T spécifiques à l'antigène dans les cellules mononucléaires périphériques humaines (PBMC). Le développement de colorants fluorescents stables, non toxiques, tels que carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) permet de distinguer les lymphocytes T rares et spécifiques à l'antigène des passants par diminution de la coloration fluorescente, telle qu'elle est détectée par la cytométrie du débit. Cette méthode présente les avantages suivants par rapport aux approches alternatives : (i) elle est très sensible aux lymphocytes T à basse fréquence, (ii) aucune connaissance de l'antigène ou de l'épitopie n'est requise, (iii) le phénotype des cellules répondantes peut être analysé, et (iv) viable, répondant les cellules peuvent être triées et utilisées pour une analyse plus approfondie, comme le clonage des lymphocytes T.

Stimulation in vitro des PBMC humains avec la protéine toxicoïde de tétanos : LES PBMC ont été souillés avec CFSE et stimulés pendant 7 jours en présence du toxioïde de tétanos. Presque tous les donneurs ont montré une forte réponse des lymphocytes T au tétanos toxioïde parce qu'ils avaient été vaccinés, ce qui rend le tétanos toxicoïde un antigène de contrôle positif utile. La figure 2 démontre dans le triplicate que la prolifération d...

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Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Quantification de la prolifération des cellules CD4et T spécifiques à l'antigène humain à l'aide de Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Présenté ici est un protocole pour mesurer la prolifération des cellules CD4T en réponse à des protéines antigéniques ou des peptides en utilisant la dilution des colorants. Cet analyse est particulièrement sensible aux rares lymphocytes T spécifiques à l'antigène et peut être modifié pour faciliter le clonage des cellules spécifiques à l'antigène.

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

Ce protocole fournit une plate-forme pour étudier les réponses des cellules CD4T qui sont souvent faibles et difficiles à détecter. Cette technique permet la détection, l’énumération et l’isolement des cellules CD4T sans connaissance préalable concernant la présentation d’antigène. Le principal avantage est l’analyse des cellules CD4T qui sont très souvent des populations rares associées à des maladies auto-immunes telles que le diabète de type 1.En obtenant l’échantillon de sang périphérique d’un donneur sain, diluer le sang dans PBS dans au moins un à deux rapport avant de superposer 35 millilitres de sang plus de 15 millilitres de milieu de gradient de densité dans un tube de 50 millilitres. Séparez les cellules par centrifugation de gradient de densité et retirez environ 20 millilitres de la couche plasmatique supérieure qui en résulte. Puis recueillir la couche de globules blancs en prenant soin d’éviter la pastille de globule rouge et laver les cellules trois fois dans PBS frais.Après compter, diluer les cellules à une fois 10 à la sixième cellule mononucléaire périphérique de sang ou PBMC par millilitre de concentration de PBS. Ajouter 300 microlitres de cellules pour chaque contrôle dans des tubes individuels de 10 millilitres. Après avoir recoupé chaque tube avec PBS, sédimenter les cellules par centrifugation et résuspendre les cellules à une fois 10 à la sixième cellule par millilitre de concentration moyenne RP5.Puis plaque 100 microlitres de cellules par contrôle à chacun des trois puits d’une plaque de puits 96 contenant 100 microlitres de RP5 moyen par puits. Placez la plaque dans l’incubateur de culture cellulaire pendant sept jours. Ensuite, transférez les PBMCs restants dans un nouveau tube de 50 millilitres et ajoutez un microlitre de solution de stock de travail CFSE par millilitre de suspension cellulaire sur le côté du tube.Inversez rapidement le tube plusieurs fois pour mélanger et placer les cellules dans un incubateur de culture cellulaire pendant cinq minutes. À la fin de l’incubation, arrêter la réaction avec cinq millilitres de RP5 moyen et de recueillir les cellules par centrifugation. Resuspendez la pastille à une fois 10 à la sixième PBMCs par millilitre de milieu RP5 frais et ajoutez un millilitre de cellules à un tube de 10 millilitres par antigène à tester.Ajoutez ensuite 100 microlitres de cellules par antigène à chacun des trois puits d’un puits de 96 plaques contenant 100 microlitres de RP5 moyen complété par l’antigène dilué d’intérêt par puits. Placez la plaque dans l’incubateur de culture cellulaire pendant sept jours. Pour tacher les populations de cellules CD4+T pour l’analyse cytométrique d’écoulement, à la fin de la culture transférer tout le volume des cellules de chaque puits dans le tri cellulaire activé par fluorescence individuelle ou tubes FACS.Lavez chaque échantillon avec un millilitre de PBS complété par 0,1% sérum fœtal de veau ou FCS. Resuspendez les granulés dans un anticorps CD4 anti-humain approprié dans 100 microlitres de PBS plus FCS par tube. Incuber les cellules à quatre degrés Celsius pendant 20 minutes à l’abri de la lumière.À la fin de l’incubation, lavez les échantillons en un millilitre de PBS frais plus FCS par tube et réutilisez les granulés dans 100 microlitres de PBS frais plus FCS. Immédiatement avant l’analyse, ajouter un microlitre d’iodure de propidium à chaque tube pour permettre l’exclusion des cellules mortes. Portez les lymphocytes en fonction de leurs zones de dispersion avant et latérale.Pour exclure les cellules apoptotiques, portez la zone de dispersion vers l’avant par rapport aux cellules négatives iodées propidium et utilisez les cellules non tachées pour définir une ligne de base de tension pour les cellules non fluorescentes. Réglez les tensions du fluorophore d’anticorps CD4 et du signal CFSE de sorte que le signal fluorescent soit inférieur à 1000 pour chacun. Utilisez les échantillons cfse et CD4 à commande de couleur unique pour confirmer un signal fluorescent positif pour chaque couleur à l’aide des tensions réglées avec les cellules non tachées.Comme l’Iodure de l’ESFC et du propidium ont un certain chevauchement spectral, ajustez la compensation pour soustraire la fluorescence de l’iodure de propidium de la fluorescence cfse jusqu’à ce que l’échantillon CFSE seulement ne donne pas de signal dans le canal iodure propidium. Lorsque tous les échantillons ont été analysés, calculer l’indice de division cellulaire en divisant le nombre de cellules divisées par 5000 cellules indivises de l’antigène stimulé groupe par le nombre moyen de cellules divisées pour 5000 cellules indivises à partir des cellules cultures sans antigène. Presque tous les donneurs démontrent une réponse forte de T-cellule au toxoïde de tétanos après stimulation in vitro parce que les donateurs ont été vaccinés faisant du tétanos toxoïde un antigène positif utile de contrôle.La prolifération des cellules CD4+T des PBMCs non formulés est toutefois minime. Après sept jours de stimulation avec pro-insuline humaine C-peptide, pro-insuline C-peptide spécifiques CD4 + T cellules peuvent être détectés dans le sang périphérique d’un individu avec le diabète de type un. Le PBMC stimulé par la protéine matricielle du virus de la grippe A démontre également la prolifération.Prises dans leur ensemble, ces données démontrent que l’analyse peut être effectuée à l’aide de protéines pleine longueur ainsi que de peptides synthétiques courts. Le composant FACS de cette méthode peut être effectué à l’aide d’un cytomètre d’écoulement de tri cellulaire. À l’aide d’un trieur cellulaire, les cellules T spécifiques aux antigènes peuvent être isolées au niveau d’une seule cellule pour une analyse en aval.Cette méthode a permis la découverte de réponses cellulaires CD4T chez les personnes atteintes de diabète de type 1 précoce. L’analyse de ces rares populations de cellules T utilisant d’autres méthodes présente divers défis techniques.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Specific Antigen In Vivo</emTuer Assay> en utilisant des cellules CFSE cible marquée

Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) can be used to easily and quickly label a cell population of interest for in vivo investigation.  ...

Recherche

Immunologie et infection

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

L&#39;utilisation de carboxyfluorescéine diacétate succinimidyl ester (CFSE) pour surveiller la prolifération des lymphocytes

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

Expansion du sang périphérique humain cellules T γδ utilisant zolédronate

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Adenoviral Transduction of Naive CD4 T Cells to Study Treg Differentiation

Transduction Adenoviral de CD4 naïfs cellules T pour étudier la différenciation Treg

Regulatory T cells (Tregs) are essential to provide immune tolerance to self as well as to certain foreign antigens. Tregs can be generated from naive CD4 ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

L&#39;isolement et la différenciation Th17 de Naïve CD4 des lymphocytes T

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

L&#39;évaluation de l&#39;Innate détection du VIH-1 CD4 infectés<sup&gt; +</sup&gt; Cellules T par les cellules dendritiques plasmacytoïdes Utilisation d&#39;un<em&gt; Ex vivo</em&gt; Système de co-culture.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Tueur antigène artificielle cellules présentatrices (KaAPC) d&#39;utilisation efficace<em&gt; In Vitro</em&gt; L&#39;épuisement des lymphocytes T humains spécifiques de l&#39;antigène

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Générateur<em&gt; De Novo</em&gt; Spécifiques de l&#39;antigène T Human cellulaires Receptors par rétrovirale transduction de Centric Hemichain

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

Développement de cellules souches dérivées de cellules T régulatrices spécifiques de l&#39;antigène contre Autoimmunité

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4 + FOXP3 cellules + Induced T régulatrices (de iTregs) de Naïf cellules T CD4 + en utilisant un protocole TGF-β contenant

Regulatory T cells (Tregs) are an integral part of peripheral tolerance, suppressing immune reactions against self-structures and thus preventing ...