Name: quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester
Uploaded: 2019-06-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

עבודה זו הייתה נתמכת על ידי: הקרן לחקר סוכרת נעורים [JDRF 5-CDA-2014-210-A-N] (ש. מ.). המועצה הלאומית לחקר הבריאות והרפואה (NHMRC GNT123586) (ש. מ.), סוכרת המילניום של אוסטרליה מחקר ביחסי אמון (Y17M1-מאן), תוכנית תמיכה בתשתיות תפעוליות של הממשלה הויקטוריאנית (ש. מ., א. ד., א. ט.), ו-NHMRC מלגת לתארים מתקדמים APP1094337 ו-JDRF PhD מלגה למעלה (M. S.).

כל הנושאים העניקו הסכמה מושכלת לפני איסוף הדם ההיקפי. אישור מוסרי לניסויים באמצעות ה-PBMC ניתן על-ידי וינסנט הקדוש (HREC-A 135/08 ו-HREC-A 161/15).
1. הכנה מגיב
<ol><li>
מדיה סלולרית אנושית
	<ol>
<li>להכין RP-5 מדיה עבור culturing PBMC, אשר מורכב RPMI 1640, 1x חומצות אמינו לא חיוניות, L-alanyl-L-גלוטמין דיפפט...

<ol>
	<li>Duque, A., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+effects+of+BrdU+and+3H-Thymidine+incorporation+into+DNA+on+cell+proliferation,+position+and+fate.">Different effects of BrdU and 3H-Thymidine incorporation into DNA on cell proliferation, position and fate.</a> Journal of Neuroscience. 31, 15205-15217 (2011).</li><li>Mannering, S. I., Zhong, J. I. E., Cheers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+activation,+proliferation+and+apoptosis+in+primary+Listeria+monocytogenes+infection.">T-cell activation, proliferation and apoptosis in primary Listeria monocytogenes infection.</a> Immunology. 106, 87-95 (2002).</li><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry.">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> Journal of Immunological Methods. 171, 131-137 (1994).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+method+for+detecting+proliferation+of+rare+autoantigen-specific+human+T+cells.">A sensitive method for detecting proliferation of rare autoantigen-specific human T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283, 173-183 (2003).</li><li>Quah, B. J. C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Carboxyfluorescein+Diacetate+Succinimidyl+Ester+(CFSE)+to+Monitor+Lymphocyte+Proliferation.">The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation.</a> Journal of Visualized Experiments. , 4-7 (2010).</li><li>Ten Brinke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+T-cell+responses+in+translational+studies:+Optimization+of+dye-based+proliferation+assay+for+evaluation+of+antigen-specific+responses.">Monitoring T-cell responses in translational studies: Optimization of dye-based proliferation assay for evaluation of antigen-specific responses.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1-15 (2017).</li><li>Gillespie, G. M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strong+TCR+Conservation+and+Altered+T+Cell+Cross-Reactivity+Characterize+a+B*57-Restricted+Immune+Response+in+HIV-1+Infection.">Strong TCR Conservation and Altered T Cell Cross-Reactivity Characterize a B*57-Restricted Immune Response in HIV-1 Infection.</a> Journal of Immunolgy. 177, 3893-3902 (2006).</li><li>Tynan, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Resolution+Structures+of+Highly+Bulged+Viral+Epitopes+Bound+to+Major+Histocompatibility+Complex+Class+I:+Implications+for+t-cell+receptor+engagement+and+t-cell+immunodominance.">High Resolution Structures of Highly Bulged Viral Epitopes Bound to Major Histocompatibility Complex Class I: Implications for t-cell receptor engagement and t-cell immunodominance.</a> Journal of Biological Chemistry. 280, 23900-23909 (2005).</li><li>Blanchard, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoplasmic+reticulum+aminopeptidase+associated+with+antigen+processing+defines+the+composition+and+structure+of+MHC+class+I+peptide+repertoire+in+normal+and+virus-infected+cells.">Endoplasmic reticulum aminopeptidase associated with antigen processing defines the composition and structure of MHC class I peptide repertoire in normal and virus-infected cells.</a> Journal of Immunology. 184, 3033-3042 (2010).</li><li>Glanville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+specificity+groups+in+the+T+cell+receptor+repertoire+repertoire.">Identifying specificity groups in the T cell receptor repertoire repertoire.</a> Nature. 547, 94-98 (2017).</li><li>Wooldridge, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricks+with+tetramers:+how+to+get+the+most+from+multimeric+peptide+MHC.">Tricks with tetramers: how to get the most from multimeric peptide MHC.</a> Immunology. 126, 147-164 (2009).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+method+for+cloning+human+autoantigen-specific+T+cells.">An efficient method for cloning human autoantigen-specific T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298, 83-92 (2005).</li><li>So, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proinsulin+C-peptide+is+an+autoantigen+in+people+with+type+1+diabetes.">Proinsulin C-peptide is an autoantigen in people with type 1 diabetes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115, (2018).</li><li>Hui-Yuen, J., Mcallister, S., Koganti, S., Hill, E., Bhaduri-Mcintosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+Epstein-Barr+Virus+Growth-transformed+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. , 2-7 (2011).</li><li>Alexander-Miller, M. A., Leggatt, G. R., Berzofsky, J. A., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expansion+of+high+or+low+avidity+cytotoxic+T+lymphocytes+and+efficacy+for+adoptive+immunotherapy.">Selective expansion of high or low avidity cytotoxic T lymphocytes and efficacy for adoptive immunotherapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93, 4102-4107 (1996).</li></ol>

התפשטות CFSE מבוססת היא שיטה פשוטה ואיתנה לזיהוי ולספירה של תאים אנושיים ספציפיים CD4+ T. זה כבר הוכיחה בעבר כי באמצעות ריכוז אופטימלי של CFSE חיוני עבור תוצאות אופטימליות4. יותר מדי CFSE abrogates התפשטות, בעוד מעט מדי אינו מאפשר לתאים מחולקים ומחולקת להיות מכובד. לעומת זאת, ריכוזים ...

היכולת לזהות וללמוד אנטיגן מסוים תאים T חשוב במחקרים של חסינות התא בתיווך. עם זאת, עושה זאת היא מאתגרת במיוחד עבור התגובות autoantigen ספציפי CD4+ T-cell תשובות, אשר חלשים מאוד קשה לזהות. שיטה נפוצה המשמשת לזיהוי של הפצת לימפוציטים ספציפיים אנטיגן היא [3H]-thymidine, שהוא נוקלאוטיד הקרינה משולבים ל-DNA של תאים מתרבים. למרות העובדה [3h]-thymidine יכול לזהות סינתזה dna, שיטה זו היא מידה עקיפה של החטיבה התא, משום סינתזה dna יכול ליזום עצמאית של מיטוזה (כלומר, במהלך שכפול גנים ו אפופטוזיס1). בעיה זו היא מורכבת על ידי העובדה אנטיגן ספציפי התפשטות של תאים יכול לגרום אפופטוזיס ניכרת2, המוביל להערכת יתר פוטנציאלי של התפשטות אנטיגן ספציפי. יתר על כן, השיטה [3h]-thymidine אינו מספק מידע פנוטימית עבור לימפוציטים מתרבים, כגון CD4+ או CD8+ שושלת היוחסין ב pbmcs מגורה עם פפטידים העברה אנטיגנית.
בשנת 2003, פרסמנו את השיטה הראשונה לדילול הצבע באמצעות cfse, שנקרא שיטת ההפצה המבוססת על cfse3,4. CFSE הוא צבע פלורסנט הנקשר באופן בלתי נשכח חלבונים תאיים על ידי יצירת קשר קוולנטי לשקעי ליזין תאיים. מאז החלבונים CFSE-התווית מחולקים באופן שווה בין תאים ביתי3, תאים אשר מחולקים יכול להיות נבדל מתאים מאוחדת על ידי הזרמת cy, אשר גם מאפשר פנוטיפים כמותיים של אוכלוסיות לימפוציטים. אכן, מספר מחלקות התא עבר מזמן של CFSE-צביעת ניתן למדוד במידה מסוימת5. לאחרונה, צבעים דומים רבים כמו CellTrace צבע ויולט התפשטות (VPD) ו-ציטוtrack צבען פותחו, אשר פועלים באופן דומה6. פרוטוקול זה מתמקד CFSE, אבל העקרונות חלים באופן שווה על צבעים אחרים הקשורים.
פפטיד-MHC מכתים כתמים היא שיטה נפוצה לגילוי ושיבוט של אנטיגן ספציפי CD8+ T תאים. זוהי שיטה מבוססת היטב7,8,9,10; עם זאת, שיבוט מבוסס הטטרמר דורש ידע קיים של ההגבלה האפירופה/MHC וכל אפירופה דורש את הטטרזה11שלו, אשר מגביל את היקף הגילוי והשכפול של תאי T ספציפיים לספרות. התפשטות CFSE מבוססי ניתן להשתמש עם פפטידים, חלבונים, או lysates תא. הפרוטוקול המתואר כאן הוא פשוט ויציב, והתאים המגיבים CD4+ T יכולים להיות ממוינים לשימוש בתוך האפיון התפקודי והביוכימיים במורד הזרם12,13.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-human CD4-AlexaFluor647</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317422</td>
			<td>RRID:AB_2716180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>71-7167-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Influenza A H1N1 (PR8) Matrix protein 1</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>40010-V07E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential amino acids (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/ Streptomycin (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pooled human serum</td>
			<td>Australian Red Cross</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proinsulin C-peptide PI33-63</td>
			<td>Purar Chemicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made synthetic peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetanus Toxoid protein</td>
			<td>Statens Serum Intitut</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester

מתוארים הוא פשוט, באופן מתורבת, לדילול צבען שיטה מבוססת למדידת אנטיגן ספציפי CD4+ T התפשטות התא של דם היקפי בתאי מונפינקה (PBMCs). התפתחות יציבה, שאינם רעילים, צבעי פלורסנט כגון carboxyfluorescmidyl באסטר (CFSE) מאפשר נדיר, אנטיגן ספציפיים תאים T להיות נבדל מעוברי אורח על ידי צמצום בצביעת פלורסנט, כפי שזוהה על ידי הזרמת cy try. שיטה זו כוללת את היתרונות הבאים על פני גישות חלופיות: (i) היא רגישה מאוד לתאי T בתדר נמוך, (ii) לא ניתן לנתח את האנטיגן או האפיפי, (iii) הפנוטיפים של התאים המגיבים ניתנים לניתוח, ו-(iv) קיימא, תגובה ניתן למיין ולהשתמש בתאים לצורך ניתוח נוסף, כגון שכפול תא T.

בגירוי מתורבת של PBMCs האדם עם חלבון טוקאיד טטנוס: PBMCs היו מוכתמים CFSE ו מגורה עבור 7 ימים בנוכחות של טטנוס רעלים. כמעט כל התורמים הראו תגובה תא T חזקה לרעלים טטנוס בגלל שהם חוסנו, מה שהופך את הטטנוס טוקסין שימושי אנטיגן שליטה חיובית. איור 2 מדגים בטרילקאט, כי התפ...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

קוונפיקציה של מתרבים אנטיגן אנושי-ספציפי CD4+ T תאים באמצעות Carboxyפלואורומיתאת הדיקן אסתר

הציגו כאן הוא פרוטוקול למדידת תאים מתרבים CD4+ T בתגובה לחלבונים אנטיגניים או פפטידים באמצעות דילול צבען. שיטת הפעולה רגישה במיוחד לתאי T נדירים הספציפיים לאנטיגן וניתן לשנותם כדי להקל על השכפול של תאים ספציפיים לאנטיגן.

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

פרוטוקול זה מספק פלטפורמה לחקר תגובות לתאי CD4T שלעתים קרובות חלשות וקשות לזיהוי. טכניקה זו מאפשרת זיהוי, ספירת ובידוד של תאי CD4T ללא ידע מוקדם לגבי מצגת אנטיגן. היתרון העיקרי הוא ניתוח של תאי CD4T שהם לעתים קרובות אוכלוסיות נדירות הקשורות לתנאים אוטואימוניים כגון סוכרת מסוג אחד.עם קבלת דגימת הדם ההיקפית מתורם בריא, לדלל את הדם PBS לפחות יחס אחד עד שניים לפני שכבות 35 מיליליטר של דם מעל 15 מיליליטר של מדיום שיפוע צפיפות בצינור 50 מיליליטר. להפריד את התאים על ידי צנטריפוגה הדרגתית צפיפות ולהסיר כ 20 מיליליטר של שכבת הפלזמה העליונה וכתוצאה מכך. ואז לאסוף את שכבת תאי הדם הלבנים דואגים כדי למנוע את גלולת תא הדם האדום ולשטוף את התאים שלוש פעמים PBS טרי.לאחר הספירה, לדלל את התאים לאחת פעמים 10 לתא mononuclear הדם ההיקפי השישי או PBMC למיליליטר של ריכוז PBS. הוסף 300 מיקרוליטרים של תאים עבור כל פקד לתוך צינורות בודדים 10 מיליליטר. לאחר ציפוי כל צינור עם PBS, להכביד על התאים על ידי צנטריפוגה ו resuspend התאים באחת פעמים 10 לתאים השישי למיליליטר של ריכוז בינוני RP5.ואז צלחת 100 microliters של תאים לכל שליטה לכל שלוש בארות של צלחת 96 באר המכיל 100 microliters של מדיום RP5 לגם. מניחים את הצלחת באינקובטור תרבות התא במשך שבעה ימים. לאחר מכן, להעביר את PBMCs הנותרים לתוך צינור חדש 50 מיליליטר ולהוסיף microliter אחד של פתרון מלאי עבודה CFSE לכל מיליליטר אחד של השעיית תא לצד של הצינור.הפוך במהירות את הצינור מספר פעמים כדי לערבב ול למקם את התאים באינקובטור של תרבות התא במשך חמש דקות. בסוף הדגירה, לעצור את התגובה עם חמישה מיליליטר של מדיום RP5 ולאסוף את התאים על ידי צנטריפוגה. תוסיפו את גלולה באחת פעמים 10 כדי PBMCs השישי למיליליטר של טרי RP5 בינוני ולהוסיף מיליליטר אחד של תאים אחד 10 צינור מיליליטר לכל אנטיגן להיבדק.לאחר מכן להוסיף 100 microliters של תאים לכל אנטיגן לכל שלוש בארות של 96 צלחת גם המכיל 100 microliters של מדיום RP5 בתוספת אנטיגן מדולל של עניין לגם. מניחים את הצלחת באינקובטור תרבות התא במשך שבעה ימים. כדי להכתים את אוכלוסיות תאי CD4+T לניתוח ציטומטרי זרימה, בסוף התרבות להעביר את כל נפח התאים מכל באר לתוך פלואורסצנטיות בודדת מופעלת מיון תאים או צינורות FACS.לשטוף כל מדגם עם מיליליטר אחד של PBS בתוספת 0.1% סרום עגל העובר או FCS. תן שימוש חוזר לכדורים בנוגדן CD4 אנטי-אנושי מתאים ב-100 מיקרוליטרים של PBS פלוס FCS לצינור. דגירה התאים בארבע מעלות צלזיוס במשך 20 דקות מוגן מפני אור.בסוף הדגירה, לשטוף את הדגימות במיליליטר אחד של PBS טרי בתוספת FCS לצינור ו resuspend כדורי ב 100 microliters של PBS טרי בתוספת FCS. מיד לפני הניתוח, מוסיפים מיקרוליטר אחד של פרופידיום יודיד לכל צינור כדי לאפשר הדרה של תאים מתים. שער הלימפוציטים לפי אזורי פיזור הקדמיים והצד שלהם.כדי לא לכלול את התאים apoptotic, שער אזור פיזור קדימה לעומת תאים שליליים propidium יודיד ולהשתמש בתאים שאינם נגועים כדי להגדיר בסיס מתח עבור תאים שאינם פלואורסצנטיים. הגדר את המתחים עבור פלואורופור נוגדן CD4 ואת אות CFSE כך אות פלואורסצנטי הוא מתחת 1000 עבור כל אחד. השתמש בדגימות CFSE ו- CD4 של בקרת צבע יחידה כדי לאשר אות פלואורסצנטי חיובי עבור כל צבע באמצעות ערכת המתחים עם התאים שאינם נגועים.כמו CFSE ו propidium יודיד יש חפיפה ספקטרלית מסוימת, להתאים את הפיצוי כדי לחסר את פלואורסצנטיות יודיד פרופיד מן הפלואורסצנטיות CFSE עד מדגם CFSE בלבד אינו מניב אות בערוץ יודיד פרופידיום. כאשר כל הדגימות נותחו, לחשב את מדד חלוקת התאים על ידי חלוקת מספר תאים מחולקים על ידי 5000 תאים מחולקים מן הקבוצה אנטיגן מגורה על ידי המספר הממוצע של תאים מחולקים לכל 5000 תאים מחולקים מהתאים מתורבתים ללא אנטיגן. כמעט כל התורמים להפגין תגובה חזקה T-cell טוקסואיד טטנוס לאחר גירוי במבחנה כי התורמים חוסנו מה שהופך טוקסואיד טטנוס אנטיגן שליטה חיובית שימושית.עם זאת, התפשטותם של תאי CD4+T ממחשבי PBMCs לא מאוכלסים היא מינימלית. לאחר שבעה ימים של גירוי עם C-פפטיד פרו אינסולין אנושי, תומכי אינסולין C-פפטיד ספציפי CD4 + T תאים ניתן לזהות בדם ההיקפי של אדם עם סוכרת מסוג אחד. PBMC מגורה עם שפעת חלבון מטריצת וירוס גם להפגין התפשטות.יחד, נתונים אלה מראים כי ניתן לבצע את ההסטה באמצעות חלבונים באורך מלא, כמו גם פפטידים סינתטיים קצרים. רכיב FACS של שיטה זו יכול להתבצע באמצעות ציטומטר זרימת מיון תאים. באמצעות סדרן תאים, ניתן לבודד את תאי ה- T הספציפיים לאנטיגן ברמת התא הבודד לצורך ניתוח במורד הזרם.שיטה זו אפשרה גילוי של תגובות לתאי CD4T אצל אנשים עם סוכרת מסוג אחד בשלב מוקדם. ניתוח אוכלוסיות נדירות אלה של תאי T תוך שימוש בשיטות אחרות מציב אתגרים טכניים שונים.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

אנטיגן ספציפי In vivo להרוג Assay באמצעות תווית CFSE תאים היעד

Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) can be used to easily and quickly label a cell population of interest for in vivo investigation.  ...

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

השימוש Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl אסתר (CFSE) לפקח הפצת הלימפוציטים

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

הרחבת דם היקפיים האדם γδ T תאים באמצעות Zoledronate

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Adenoviral Transduction of Naive CD4 T Cells to Study Treg Differentiation

התמרה adenoviral של CD4 תמימים תאי T ללמוד בידול Treg

Regulatory T cells (Tregs) are essential to provide immune tolerance to self as well as to certain foreign antigens. Tregs can be generated from naive CD4 ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

בידוד ובידול של Th17 הנאיביים T מסוג CD4 לימפוציטים

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

הערכת חישה המולדת של CD4 הנגוע ב- HIV-1<sup&gt; +</sup&gt; T תאים על ידי תאים דנדריטים Plasmacytoid שימוש<em&gt; Ex vivo</em&gt; עמית תרבות מערכת.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

תאי מציגי הרוצח המלאכותי Antigen (KaAPC) ליעיל<em&gt; במבחנה</em&gt; דלדול של תאי T אנושי אנטיגן ספציפי

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

יצירה<em&gt; דה נובו</em&gt; לקולטנים המצויים בתאי אנטיגן ספציפי האדם T על ידי retroviral התמרה של Centric Hemichain

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

פיתוח תאי גזע שמקורם אנטיגן ספציפי תקינים בתאי T נגד אוטואימוניות

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

במבחנה בידול של האדם CD4 + FOXP3 + מושרה תקינה בתאי T (iTregs) מ נאיבית CD4 + T תאים באמצעות פרוטוקול TGF-β-המכיל