Name: quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester
Uploaded: 2019-06-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

이 작품에 의해 지원되었다: 청소년 당뇨병 연구 재단 [JDRF 5-CDA-2014-210-A-N] (S. M.). 국립 보건 의료 연구 위원회 (NHMRC GNT123586) (S.M.), 당뇨병 호주 연구 신탁 밀레니엄 상 (Y17M1-MANS) (S.M.), 빅토리아 정부의 운영 인프라 지원 프로그램 (S. M., A.D., E.T., M.S.), 및 NHMRC 대학원 장학금 APP1094337 및 JDRF 박사 학위 업 장학금 (M. S.).

모든 피험자는 말초 혈액을 수집하기 전에 정보에 입각한 동의를 했습니다. PBMC를 사용 하 여 실험에 대 한 윤리적 승인 세인트 빈센트의 hosptial에 의해 주어졌다 (HREC-A 135/08, 그리고 HREC-A 161/15).
1. 시약 준비
<ol><li>
휴먼 T 세포 매체
	<ol>
<li>RPMI 1640, 1x 비필수 아미노산, L-알라닐-L-글루타민 디펩타이드(2 mM), 페니실린(100 U/mL)/스트렙토미신(0.1 mg/mL), 그리고 5% 풀링된...

<ol>
	<li>Duque, A., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+effects+of+BrdU+and+3H-Thymidine+incorporation+into+DNA+on+cell+proliferation,+position+and+fate.">Different effects of BrdU and 3H-Thymidine incorporation into DNA on cell proliferation, position and fate.</a> Journal of Neuroscience. 31, 15205-15217 (2011).</li><li>Mannering, S. I., Zhong, J. I. E., Cheers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+activation,+proliferation+and+apoptosis+in+primary+Listeria+monocytogenes+infection.">T-cell activation, proliferation and apoptosis in primary Listeria monocytogenes infection.</a> Immunology. 106, 87-95 (2002).</li><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry.">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> Journal of Immunological Methods. 171, 131-137 (1994).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+method+for+detecting+proliferation+of+rare+autoantigen-specific+human+T+cells.">A sensitive method for detecting proliferation of rare autoantigen-specific human T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283, 173-183 (2003).</li><li>Quah, B. J. C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Carboxyfluorescein+Diacetate+Succinimidyl+Ester+(CFSE)+to+Monitor+Lymphocyte+Proliferation.">The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation.</a> Journal of Visualized Experiments. , 4-7 (2010).</li><li>Ten Brinke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+T-cell+responses+in+translational+studies:+Optimization+of+dye-based+proliferation+assay+for+evaluation+of+antigen-specific+responses.">Monitoring T-cell responses in translational studies: Optimization of dye-based proliferation assay for evaluation of antigen-specific responses.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1-15 (2017).</li><li>Gillespie, G. M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strong+TCR+Conservation+and+Altered+T+Cell+Cross-Reactivity+Characterize+a+B*57-Restricted+Immune+Response+in+HIV-1+Infection.">Strong TCR Conservation and Altered T Cell Cross-Reactivity Characterize a B*57-Restricted Immune Response in HIV-1 Infection.</a> Journal of Immunolgy. 177, 3893-3902 (2006).</li><li>Tynan, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Resolution+Structures+of+Highly+Bulged+Viral+Epitopes+Bound+to+Major+Histocompatibility+Complex+Class+I:+Implications+for+t-cell+receptor+engagement+and+t-cell+immunodominance.">High Resolution Structures of Highly Bulged Viral Epitopes Bound to Major Histocompatibility Complex Class I: Implications for t-cell receptor engagement and t-cell immunodominance.</a> Journal of Biological Chemistry. 280, 23900-23909 (2005).</li><li>Blanchard, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoplasmic+reticulum+aminopeptidase+associated+with+antigen+processing+defines+the+composition+and+structure+of+MHC+class+I+peptide+repertoire+in+normal+and+virus-infected+cells.">Endoplasmic reticulum aminopeptidase associated with antigen processing defines the composition and structure of MHC class I peptide repertoire in normal and virus-infected cells.</a> Journal of Immunology. 184, 3033-3042 (2010).</li><li>Glanville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+specificity+groups+in+the+T+cell+receptor+repertoire+repertoire.">Identifying specificity groups in the T cell receptor repertoire repertoire.</a> Nature. 547, 94-98 (2017).</li><li>Wooldridge, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricks+with+tetramers:+how+to+get+the+most+from+multimeric+peptide+MHC.">Tricks with tetramers: how to get the most from multimeric peptide MHC.</a> Immunology. 126, 147-164 (2009).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+method+for+cloning+human+autoantigen-specific+T+cells.">An efficient method for cloning human autoantigen-specific T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298, 83-92 (2005).</li><li>So, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proinsulin+C-peptide+is+an+autoantigen+in+people+with+type+1+diabetes.">Proinsulin C-peptide is an autoantigen in people with type 1 diabetes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115, (2018).</li><li>Hui-Yuen, J., Mcallister, S., Koganti, S., Hill, E., Bhaduri-Mcintosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+Epstein-Barr+Virus+Growth-transformed+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. , 2-7 (2011).</li><li>Alexander-Miller, M. A., Leggatt, G. R., Berzofsky, J. A., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expansion+of+high+or+low+avidity+cytotoxic+T+lymphocytes+and+efficacy+for+adoptive+immunotherapy.">Selective expansion of high or low avidity cytotoxic T lymphocytes and efficacy for adoptive immunotherapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93, 4102-4107 (1996).</li></ol>

CFSE-기반 증식은 항원 특이적 인간 CD4+ T 세포를 검출하고 열거하는 간단하고 강력한 방법이다. 이전에는 최적의 결과 4에 대해 CFSE의 최적농도를 사용하는 것이 필수적이라는 것이 입증되었습니다. 너무 많은 CFSE는 증식을 폐지하는 반면, 너무 적게는 분할된 세포와 분할되지 않은 세포가 구별되는 것을 허용하지 않습니다. 대조적으로, CFSE의 상대적으로 높은 농도 (5.0 μM...

항원 특이적 T 세포를 검출하고 연구하는 능력은 세포 매개 면역의 연구에서 중요하다. 그러나, 이렇게 하는 것은 매우 약하고 검출하기 어려운 자기 항원 특정 CD4+ T 세포 반응을 위해 특히 도전적입니다. 항원 특이적 림프구 증식의 검출에 사용되는 일반적인 방법은 [3H]-티미딘이며, 이는 증식 세포의 DNA에 통합된 방사성 표지된 뉴클레오티드이다. [3H]-티미딘 분석법은 DNA 합성을 검출할 수 있지만, 이 방법은 DNA 합성이 유사분열과 독립적으로 개시될 수 있기 때문에 세포 분열을 간접적으로 측정한다(즉, 유전자 복제 및 세포자멸 1). 이 문제는 세포의 항원 특이적 증식이 상당한 세포 자멸 2를초래할 수 있다는 사실에 의해 복합되어 항원 특이적 증식의 잠재적 인 과대 평가로 이어진다. 더욱이, [3H]-티미딘 방법은 항원 펩티드로 자극된 PBMC에서 CD4+ 또는 CD8+ 계보 증식과 같은 림프구증증을 위한 자형질 정보를 제공하지 않는다.
2003년에는 CFSE 기반 증식 분석3,4라고불리는 CFSE를 이용한 최초의 염료 희석 분석법을 발표했다. CFSE는 세포내 리신 잔류물과 공유 결합을 형성하여 세포내 단백질에 안정적으로 결합하는 형광 염료입니다. CFSE 표지된 단백질은 딸 세포3사이에서 동등하게 분할되기 때문에, 분할된 세포는 또한 림프구 집단의 양적 자형질에 허용하는 유세포 측정에 의해 분할되지 않은 세포에서 구별될 수 있습니다. 실제로, CFSE 염색 의 시간에서 세포가 겪은 분열의 수는 어느정도 5까지 측정될 수 있습니다. 최근에는 셀트레이스 바이올렛 증식 염료(VPD) 및 CytoTrack 염료와 같은 유사한 염료가 많이 개발되어 유사한 방식으로 작용하고있습니다6. 이 프로토콜은 CFSE에 중점을 두지만 원칙은 다른 관련 염료에도 동일하게 적용됩니다.
펩타이드-MHC 테트라머 염색은 항원 특이적 CD8+ T 세포를 검출및 복제하는 데 널리 사용되는 방법이다. 이것은 잘 확립 된방법 7,8,9,10; 그러나, tetramer 기지를 둔 복제는 에피토프/MHC 제한의 기존 지식을 요구하고 각 에피토프는 새로운 에피토프 특이적 T 세포의 발견 그리고 복제의 범위를 제한하는 그것의 자신의 tetramer11를요구합니다. CFSE 기반 증식은 펩티드, 단백질 또는 세포 용해와 함께 사용될 수 있다. 본 명세서에 기재된 프로토콜은 간단하고 견고하며, 반응하는 CD4+ T 세포는 다운스트림 기능성 및 생화학적 특성 분석기12,13에사용하기 위해 정렬될 수 있다.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-human CD4-AlexaFluor647</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317422</td>
			<td>RRID:AB_2716180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>71-7167-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Influenza A H1N1 (PR8) Matrix protein 1</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>40010-V07E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential amino acids (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/ Streptomycin (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pooled human serum</td>
			<td>Australian Red Cross</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proinsulin C-peptide PI33-63</td>
			<td>Purar Chemicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made synthetic peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetanus Toxoid protein</td>
			<td>Statens Serum Intitut</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester

기재된 것은 인간 말초 혈액 단핵세포(PBMC)에서 항원 특이적 CD4+ T 세포 증식을 측정하기 위한 간단한, 시험관내, 염료 희석-기반 방법이다. 카르복시플루오레세인 슈치니미딜 에스테르(CFSE)와 같은 안정적이고 무독성형 형광 염료의 발달은 유세포분석으로 검출된 바와 같이 형광 염색의 감소에 의해 방관자로부터 구별되는 희귀한 항원 특이적 T 세포를 허용한다. 이 방법은 대체 접근법에 비해 다음과 같은 장점을 갖는다: (i) 저주파 T 세포에 매우 민감하며, (ii) 항원 또는 에피토프에 대한 지식이 필요하지 않으며, (iii) 반응 하는 세포의 표현형을 분석할 수 있고, (iv) 실행 가능하고 반응한다. 셀을 정렬하고 T 세포 복제와 같은 추가 분석을 위해 사용할 수 있습니다.

파상풍 독소 단백질을 가진 인간 PBMC의 시험관 내 자극: PBMC는 CFSE로 염색하고 파상풍 독소의 존재에서 7일 동안 자극하였다. 거의 모든 기증자는 파상풍 독소가 유용한 긍정적 인 대조군 항원을 만드는 예방 접종을 받았기 때문에 파상풍 독소에 강한 T 세포 반응을 보였다. 도 2는 비자극된 PBMC로부터의 CD4+ T 세포의 CFSE 증식이 미미하였다는 ?...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

카르복시플루아세인 수치니미딜 에스테르를 이용한 증식 인간 항원 특이적 CD4+ T 세포의 정량화

여기에 제시된 것은 염료 희석을 이용한 항원 단백질 또는 펩티드에 반응하여 증식CD4+ T 세포를 측정하기 위한 프로토콜이다. 이러한 분석종은 희귀 항원 특이적 T 세포에 특히 민감하며 항원 특이적 세포의 복제를 용이하게 하기 위해 변형될 수 있다.

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

이 프로토콜은 종종 약하고 감지하기 어려운 CD4T 세포 응답을 연구할 수 있는 플랫폼을 제공합니다. 이 기술은 항원 프리젠 테이션에 관한 사전 지식없이 CD4T 세포의 검출, 열거 및 격리를 허용합니다. 주요 장점은 타입-1 당뇨병과 같은 자기 면역 조건과 관련되었던 아주 수시로 희소한 인구인 CD4T 세포의 분석입니다.건강한 기증자로부터 말초 혈액 샘플을 얻으면, 50 밀리리터 튜브에서 밀도 그라데이션 배지의 15 밀리리터 를 통해 35 밀리리터의 혈액을 겹쳐지기 전에 PBS에서 적어도 1 대 2 비율로 혈액을 희석시하십시오. 밀도 그라데이션 원심분리에 의해 세포를 분리하고 결과 상단 플라즈마 층의 약 20 밀리리터를 제거합니다. 그런 다음 적혈구 펠릿을 피하고 신선한 PBS에서 세포를 세 번 씻기 위해 주의를 기울이는 백혈구 층을 수집합니다.계산 후, PBS 농도의 밀리리터 당 제6 말초 혈액 단핵 세포 또는 PBMC에 10배씩 세포를 희석한다. 개별 10 밀리리터 튜브에 각 제어를 위한 300 마이크로리터의 세포를 추가합니다. PBS로 각 튜브를 토핑 한 후, 원심 분리에 의해 세포를 퇴적시키고 RP5 중간 농도의 밀리리터 당 여섯 번째 세포에 10 번 10에서 세포를 재중단.그런 다음 제어당 100 마이크로리터의 셀을 96개의 웰 각각에 플레이트하여 100마이크로리터의 RP5 배지를 잘 함유하고 있다. 7일 동안 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 놓습니다. 다음으로, 남은 PBMC를 새로운 50 밀리리터 튜브로 옮기고 세포 현탁액 1밀리리터당 CFSE 작업 스톡 솔루션 1개를 튜브 측면에 추가합니다.튜브를 여러 번 신속하게 반전하여 세포를 세포 배양 인큐베이터에 5분 동안 혼합하고 배치합니다. 인큐베이션의 끝에서, RP5 배지의 5 밀리리터로 반응을 체포하고 원심분리에 의해 세포를 수집한다. 펠릿을 신선한 RP5 배지의 밀리리터 당 10번에서 6번째 PBMC로 1회 다시 중단하고 항원당 10밀리리터 튜브에 1밀리리터의 세포를 첨가하여 테스트합니다.그런 다음 96개의 웰 각각에 항원당 100마이크로리터를 첨가하여 100마이크로리터의 RP5 배지를 잘 함유하고 있으며, 이는 잘 희석된 이자항원으로 보충한다. 7일 동안 세포 배양 인큐베이터에 플레이트를 놓습니다. 유동 세포 측정 분석을 위한 CD4+T 세포 집단을 염색하기 위해 배양의 끝에 각 웰에서 세포의 전체 부피를 개별 형광 활성화 세포 선별 또는 FACS 튜브로 전달한다.0.1%의 태아 종아리 혈청 또는 FCS로 보충된 PBS의 1밀리리터로 각 샘플을 세척합니다. 적절한 항인간 CD4 항체에서 페탄을 재중단하여 100마이크로리터의 PBS 플러스 튜브당 FCS를 재차한다. 빛으로부터 보호되는 20분 동안 섭씨 4도에서 세포를 배양합니다.인큐베이션이 끝나면, 신선한 PBS+ 튜브당 FCS 1밀리리터로 샘플을 세척하고 100마이크로리터의 신선한 PBS 플러스 FCS로 펠릿을 재보종한다. 분석 직전에 각 튜브에 프로피듐 요오드 1 마이크로리터를 추가하여 죽은 세포를 배제할 수 있습니다. 전방 및 측면 분산 부위에 따라 림프구를 게이트합니다.세포 세포를 제외하려면, 전방 분산 영역대 요오드 음성 세포를 게이트하고 비형광 세포에 대한 전압 기준선을 설정하기 위해 스테인드 드 된 세포를 사용합니다. CD4 항체 형광및 CFSE 신호에 대한 전압을 설정하여 형광 신호가 각각 1000 미만이되도록 합니다. 단일 색상 제어 CFSE 및 CD4 샘플을 사용하여 스테인드 셀로 설정된 전압을 사용하여 각 색상에 대한 양양성 형광 신호를 확인합니다.CFSE 및 프로피듐 요오드제는 일부 스펙트럼 중복이 있기 때문에 CFSE만 샘플이 프로피듐 요오드 채널에서 신호를 생성하지 않을 때까지 CFSE 형광으로부터 요오드형 형광을 빼도록 보정을 조정한다. 모든 시료를 분석한 경우, 항원으로부터 분할된 세포의 수를 5000개의 분할된 세포로 나누어 항원 없이 배양한 세포로부터 5000개의 분리되지 않은 세포에 의해 분할된 세포 수를 분할하여 세포 분열 지수를 계산한다. 거의 모든 기증자는 기증자가 Tetanus 독소를 유용한 양성 대조군 항원으로 만드는 백신 접종되었기 때문에 시험관 내 자극 후에 Tetanus 독소에 강한 T 세포 반응을 보여줍니다.그러나 자극되지 않은 PBMC에서 CD4+T 세포의 확산은 최소화됩니다. 인간 프로 인슐린 C-펩티드와 7일간의 자극 후, 프로 인슐린 C-펩타이드 특이CD4+T 세포는 타입-1 당뇨병을 가진 개인의 말초 혈액에서 검출될 수 있다. 인플루엔자 A 바이러스 매트릭스 단백질로 자극된 PBMC는 또한 증식을 입증한다.종합, 이러한 데이터는 분석이 짧은 합성 펩타이드뿐만 아니라 전체 길이 단백질을 사용하여 수행 될 수 있음을 보여줍니다. 이 방법의 FACS 구성 요소는 세포 분류 흐름 세포계를 사용하여 수행 될 수있다. 세포 선별기를 사용하여 항원 특이적 T 세포는 다운스트림 분석을 위한 단일 세포 수준에서 격리될 수 있다.이 방법은 초기 개시 타입-1 당뇨병을 가진 개별에 있는 CD4T 세포 반응의 발견을 허용했습니다. 다른 방법을 활용하는 이러한 희귀 한 T 세포 인구를 분석하는 것은 다양한 기술적 인 과제를 제시한다.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

항원 특정 VIVO에서</emCFSE 라벨 대상 세포를 사용하여> 죽이는 분석

Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) can be used to easily and quickly label a cell population of interest for in vivo investigation.  ...

연구

면역학 및 감염병학

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

림프구 확산을 모니터 Carboxyfluorescein 디아 세 테이트 Succinimidyl 에스터 (CFSE)의 사용

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

Zoledronate를 사용하는 사람 말초혈의 확장 γδ T 세포

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Adenoviral Transduction of Naive CD4 T Cells to Study Treg Differentiation

나이브 CD4의 아데노 바이러스 형질은 Treg의 분화를 연구하는 세포를 T

Regulatory T cells (Tregs) are essential to provide immune tolerance to self as well as to certain foreign antigens. Tregs can be generated from naive CD4 ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

분리 및 나이브 CD4 T 림프구의 TH17 분화

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

HIV-1 감염 CD4의 타고난 감지 평가<sup&gt; +</sup&gt;를 사용하여 형질 수지상 세포에 의한 T 세포<em&gt; 예 생체 내</em&gt; 공동 문화 시스템.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

효율적인위한 킬러 인공 항원 제시 세포 (KaAPC)<em&gt; 체외</em&gt; 인간의 항원 특이 T 세포의 고갈

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

생성<em&gt; 드 노보</em&gt; 중심 Hemichain의 레트로 바이러스 형질 도입에 의해 항원 특이 적 인간 T 세포 수용체

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

자가 면역 대해 줄기 세포 유래의 항원 특이 적 조절 T 세포의 발달

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

TGF-β 함유 프로토콜을 사용하여 나이브 CD4 + T 세포에서 인간의 CD4 + Foxp3의 + 유도 규제 T 세포 (iTregs)의 체외 분화

Regulatory T cells (Tregs) are an integral part of peripheral tolerance, suppressing immune reactions against self-structures and thus preventing ...