Name: quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester
Uploaded: 2019-06-04T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

Dette arbeidet ble støttet av: den juvenile diabetes Research Foundation [JDRF 5-CDA-2014-210-A-N] (S. M.). The National Health and Medical Research Council (NHMRC GNT123586) (S. M.), diabetes Australia Research Trust Millennium Award (Y17M1-MANS) (S. M.), operasjonell infrastruktur støtte program av den viktorianske regjeringen (S. M., A. D., E. T., M. S.), og NHMRC Postgraduate Scholarship APP1094337 og JDRF PhD Top-Up stipend (M. S.).

Alle ga informert samtykke før innsamling av perifert blod. Etisk godkjenning for eksperimenter med PBMC ble gitt av St. Vincent ' s Hosptial (HREC-A 135/08, og HREC-A 161/15).
1. forberedelse av reagens
<ol><li>
Human T celle Media
	<ol>
<li>Forbered RP-5-medier for dyrking PBMC, som består av RPMI 1640, 1x ikke-essensielle aminosyrer, L-alanyl-L-glutamin dipeptidet (2 mM), penicillin (100 U/mL)/Streptomycin (0,1 mg/mL), og 5% samlet humant serum (PHS).</li>
	</ol>
</li>
...

<ol>
	<li>Duque, A., Rakic, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Different+effects+of+BrdU+and+3H-Thymidine+incorporation+into+DNA+on+cell+proliferation,+position+and+fate.">Different effects of BrdU and 3H-Thymidine incorporation into DNA on cell proliferation, position and fate.</a> Journal of Neuroscience. 31, 15205-15217 (2011).</li><li>Mannering, S. I., Zhong, J. I. E., Cheers, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=T-cell+activation,+proliferation+and+apoptosis+in+primary+Listeria+monocytogenes+infection.">T-cell activation, proliferation and apoptosis in primary Listeria monocytogenes infection.</a> Immunology. 106, 87-95 (2002).</li><li>Lyons, A. B., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determination+of+lymphocyte+division+by+flow+cytometry.">Determination of lymphocyte division by flow cytometry.</a> Journal of Immunological Methods. 171, 131-137 (1994).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+sensitive+method+for+detecting+proliferation+of+rare+autoantigen-specific+human+T+cells.">A sensitive method for detecting proliferation of rare autoantigen-specific human T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 283, 173-183 (2003).</li><li>Quah, B. J. C., Parish, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Use+of+Carboxyfluorescein+Diacetate+Succinimidyl+Ester+(CFSE)+to+Monitor+Lymphocyte+Proliferation.">The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation.</a> Journal of Visualized Experiments. , 4-7 (2010).</li><li>Ten Brinke, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monitoring+T-cell+responses+in+translational+studies:+Optimization+of+dye-based+proliferation+assay+for+evaluation+of+antigen-specific+responses.">Monitoring T-cell responses in translational studies: Optimization of dye-based proliferation assay for evaluation of antigen-specific responses.</a> Frontiers in Immunology. 8, 1-15 (2017).</li><li>Gillespie, G. M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strong+TCR+Conservation+and+Altered+T+Cell+Cross-Reactivity+Characterize+a+B*57-Restricted+Immune+Response+in+HIV-1+Infection.">Strong TCR Conservation and Altered T Cell Cross-Reactivity Characterize a B*57-Restricted Immune Response in HIV-1 Infection.</a> Journal of Immunolgy. 177, 3893-3902 (2006).</li><li>Tynan, F. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+Resolution+Structures+of+Highly+Bulged+Viral+Epitopes+Bound+to+Major+Histocompatibility+Complex+Class+I:+Implications+for+t-cell+receptor+engagement+and+t-cell+immunodominance.">High Resolution Structures of Highly Bulged Viral Epitopes Bound to Major Histocompatibility Complex Class I: Implications for t-cell receptor engagement and t-cell immunodominance.</a> Journal of Biological Chemistry. 280, 23900-23909 (2005).</li><li>Blanchard, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endoplasmic+reticulum+aminopeptidase+associated+with+antigen+processing+defines+the+composition+and+structure+of+MHC+class+I+peptide+repertoire+in+normal+and+virus-infected+cells.">Endoplasmic reticulum aminopeptidase associated with antigen processing defines the composition and structure of MHC class I peptide repertoire in normal and virus-infected cells.</a> Journal of Immunology. 184, 3033-3042 (2010).</li><li>Glanville, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Identifying+specificity+groups+in+the+T+cell+receptor+repertoire+repertoire.">Identifying specificity groups in the T cell receptor repertoire repertoire.</a> Nature. 547, 94-98 (2017).</li><li>Wooldridge, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tricks+with+tetramers:+how+to+get+the+most+from+multimeric+peptide+MHC.">Tricks with tetramers: how to get the most from multimeric peptide MHC.</a> Immunology. 126, 147-164 (2009).</li><li>Mannering, S. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+efficient+method+for+cloning+human+autoantigen-specific+T+cells.">An efficient method for cloning human autoantigen-specific T cells.</a> Journal of Immunological Methods. 298, 83-92 (2005).</li><li>So, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proinsulin+C-peptide+is+an+autoantigen+in+people+with+type+1+diabetes.">Proinsulin C-peptide is an autoantigen in people with type 1 diabetes.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 115, (2018).</li><li>Hui-Yuen, J., Mcallister, S., Koganti, S., Hill, E., Bhaduri-Mcintosh, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+Epstein-Barr+Virus+Growth-transformed+Lymphoblastoid+Cell+Lines.">Establishment of Epstein-Barr Virus Growth-transformed Lymphoblastoid Cell Lines.</a> Journal of Visualized Experiments. , 2-7 (2011).</li><li>Alexander-Miller, M. A., Leggatt, G. R., Berzofsky, J. A., Moss, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Selective+expansion+of+high+or+low+avidity+cytotoxic+T+lymphocytes+and+efficacy+for+adoptive+immunotherapy.">Selective expansion of high or low avidity cytotoxic T lymphocytes and efficacy for adoptive immunotherapy.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 93, 4102-4107 (1996).</li></ol>

CFSE-basert spredning er en enkel og robust metode for å oppdage og opplisting antigen-spesifikke menneskelige CD4+ T celler. Det har tidligere blitt demonstrert at bruk av optimal konsentrasjon av CFSE er avgjørende for optimale resultater4. For mye CFSE opphever spredning, mens for lite tillater ikke for delt og udelt celler skal skilles. Relativt høye konsentrasjoner (5,0 μM) av CFSE brukes derimot til å merke renset murine T-celler3. På grunn av variasj...

Evnen til å oppdage og studere antigen-spesifikke T-celler er viktig i studier av celle-mediert immunitet. Dette er imidlertid spesielt utfordrende for autoantigen-spesifikke CD4+ T-Cell-svar, som er veldig svake og vanskelige å oppdage. En vanlig metode som brukes for påvisning av antigen-spesifikk spredning av lymfocytter er [3H]-tymidin, som er en radiolabeled nukleotid innlemmet i DNA av voksende celler. Selv om [3H]-tymidin analysen kan oppdage DNA-syntese, er denne metoden et indirekte mål på celledeling, fordi DNA-syntese kan initiere uavhengig av mitose (dvs. under gen duplisering og apoptose1). Dette problemet er forsterket av det faktum at antigen-spesifikk spredning av celler kan resultere i betydelig apoptose2, fører til potensielle overvurdering av antigen-spesifikk spredning. Videre, [3H]-tymidin metoden gir ikke fenotypiske informasjon for voksende lymfocytter, som CD4+ eller CD8+ Lineage spredning i pbmc stimulert med antigen peptider.
I 2003 publiserte vi den første fargestoff fortynning analysen bruker CFSE, kalt CFSE-baserte spredning analysen3,4. CFSE er et fluorescerende fargestoff som binder stabilt til intracellulære proteiner ved å danne en kovalente obligasjon til intracellulære lysin rester. Siden CFSE-merket proteiner er delt likt mellom datter celler3, celler som har delt kan skilles fra udelt celler ved flyt flowcytometri, som også gjør det mulig for den kvantitative bestemmelse av fenotype av lymfocytter populasjoner. Faktisk har antall divisjoner en celle gjennomgått fra tidspunktet for CFSE-farging kan måles til en viss grad5. Flere nylig, mange lignende fargestoffer som CellTrace Violet spredning Dye (VPD) og CytoTrack fargestoff har blitt utviklet, som fungerer på en lignende måte6. Denne protokollen fokuserer på CFSE, men prinsippene gjelder like til andre relaterte fargestoffer.
Peptid-MHC tetramer farging er en mye brukt metode for å oppdage og kloning antigen-spesifikke CD8+ T celler. Dette er en veletablert metode7,8,9,10; Imidlertid, tetramer-basert Klon behøver eksisterende kunnskap av det epitope/MHC begrensning og hver epitope behøver dens egen tetramer11, hvilke rammer omfanget av oppdagelsen og klon av romersk epitope-spesifikk T celler. Den CFSE-baserte spredningen kan brukes med peptider, proteiner eller celle lysater. Protokollen beskrevet her er både enkel og robust, og reagerer CD4+ T celler kan sorteres for bruk i nedstrøms funksjonelle og biokjemiske karakterisering analyser12,13.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Anti-human CD4-AlexaFluor647</td>
			<td>Biolegend</td>
			<td>317422</td>
			<td>RRID:AB_2716180</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>C1157</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ficoll-Paque Plus</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>71-7167-00</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glutamax (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>35050</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Influenza A H1N1 (PR8) Matrix protein 1</td>
			<td>Sino Biological</td>
			<td>40010-V07E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Non-Essential amino acids (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11140</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Penicillin/ Streptomycin (1x)</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>15070063</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Phosphate buffered saline (PBS)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>D8537</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pooled human serum</td>
			<td>Australian Red Cross</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proinsulin C-peptide PI33-63</td>
			<td>Purar Chemicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Custom made synthetic peptide</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>RPMI 1640</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td>R8758</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tetanus Toxoid protein</td>
			<td>Statens Serum Intitut</td>
			<td>N/A</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

quantification of proliferating human antigen-specific cd4+ t cells using carboxyfluorescein succinimidyl ester

Beskrevet er en enkel, in vitro, fargestoff fortynning-basert metode for å måle antigen-spesifikke CD4+ T celle spredning i humant perifert blod mononukleære celler (pbmc). Utviklingen av stabile, ikke-giftig, fluorescerende fargestoffer som carboxyfluorescein succinimidyl Ester (CFSE) gjør det mulig for sjeldne, antigen-spesifikke T-celler som skal skilles fra tilskuere av reduksjon i fluorescerende flekker, som oppdages av flyt flowcytometri. Denne metoden har følgende fordeler fremfor alternative tilnærminger: (i) det er svært følsom for lavfrekvente T-celler, (II) ingen kunnskap om Antigen eller epitope er nødvendig, (III) fenotype av de reagerer cellene kan analyseres, og (IV) levedyktig, svare -celler kan sorteres og brukes til videre analyse, for eksempel T-celle kloning.

In vitro stimulering av humant Pbmc med stivkrampe difteritoksoid protein: Pbmc ble farget med CFSE og stimulert i 7 dager i nærvær av stivkrampe difteritoksoid. Nesten alle givere viste en sterk T-celle respons på stivkrampe difteritoksoid fordi de hadde blitt vaksinert, noe som gjør stivkrampe difteritoksoid en nyttig positiv kontroll antigen. Figur 2 demonstrerer i tre eksemplarer, at CFSE SPREDNING av CD4+ T celler fra unstimulated pbmc var...

Watch this Scientific Journal Video about Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester at JoVE.com

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Kvantifisering av voksende Human antigen-spesifikke CD4+ T celler bruke Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Presentert her er en protokoll for å måle voksende CD4+ T-celler som svar på antigen proteiner eller peptider ved hjelp av fargestoff fortynning. Denne analysen er spesielt følsom for sjeldne antigen-spesifikke T-celler og kan endres for å lette kloning av antigen-spesifikke celler.

Described is a simple, in vitro, dye dilution-based method for measuring antigen-specific CD4+ T cell proliferation in human peripheral blood mononuclear ...

Denne protokollen gir en plattform for å studere CD4T celleresponser som ofte er svake og vanskelige å oppdage. Denne teknikken gjør det mulig for deteksjon, opplisting og isolering av CD4T-celler uten forkunnskaper om antigenpresentasjon. Den største fordelen er analysen av CD4T-celler som er ganske ofte sjeldne populasjoner forbundet med autoimmune forhold som type en diabetes.Ved å få den perifere blodprøven fra en sunn donor, fortynne blodet i PBS i minst ett til to forhold før lagdeling 35 milliliter blod over 15 milliliter tetthet gradient medium i en 50 milliliter tube. Skill cellene etter tetthet gradient sentrifugering og fjern ca 20 milliliter av det resulterende toppplasmalaget. Deretter samler du hvite blodlegemer laget tar vare for å unngå røde blodlegemer pellet og vaske cellene tre ganger i frisk PBS.Etter telling, fortynne cellene til en gang 10 til sjette perifere blod mononukleære celle eller PBMC per milliliter PBS konsentrasjon. Tilsett 300 mikroliter celler for hver kontroll i individuelle 10 milliliter rør. Etter topping hvert rør med PBS, sediment cellene ved sentrifugering og resuspend cellene på en gang 10 til de sjette cellene per milliliter av RP5 middels konsentrasjon.Deretter plate 100 mikroliter celler per kontroll til hver av tre brønner av en 96 brønnplate som inneholder 100 mikroliter RP5 medium per brønn. Plasser platen i cellekulturinkubatoren i syv dager. Deretter overfører du de gjenværende PBMCene til et nytt 50 ml ml og legger til en mikroliter cfse arbeidslagerløsning per en milliliter cellefjæring til siden av røret.Inverter raskt røret flere ganger for å blande og plassere cellene i en cellekulturinkubator i fem minutter. På slutten av inkubasjonen, arrester reaksjonen med fem milliliter RP5 medium og samle cellene ved sentrifugering. Resuspend pellet på en gang 10 til sjette PBMCs per milliliter frisk RP5 medium og legge til en milliliter celler til en 10 milliliter rør per antigen som skal testes.Tilsett deretter 100 mikroliter celler per antigen til hver av tre brønner av en 96 brønnplatebrønn som inneholder 100 mikroliter RP5-medium supplert med fortynnet interesseantigen per brønn. Plasser platen i cellekulturinkubatoren i syv dager. For å farge CD4 + T cellepopulasjoner for strømning cytometrisk analyse, på slutten av kulturen overføre hele volumet av celler fra hver brønn til individuell fluorescens aktivert celle sortering eller FACS rør.Vask hver prøve med en milliliter PBS supplert med 0,1% føtal kalv serum eller FCS. Resuspend pellets i en passende anti-menneskelig CD4 antistoff i 100 mikroliter pbs pluss FCS per rør. Inkuber cellene ved fire grader Celsius i 20 minutter beskyttet mot lys.På slutten av inkubasjonen, vask prøvene i en milliliter frisk PBS pluss FCS per rør og resuspend pellets i 100 mikroliter av friske PBS pluss FCS. Umiddelbart før analysen, legg til en mikroliter propidiumjodid til hvert rør for å tillate utelukkelse av døde celler. Gate lymfocytter i henhold til deres fremover og side scatter områder.For å utelukke apoptotiske celler, gate fremover scatter området versus propidium iodide negative celler og bruke de uopphetede cellene til å angi en spenning baseline for de ikke-fluorescerende celler. Still inn spenningene for CD4-antistofffluoren og CFSE-signalet slik at fluorescerende signal er under 1000 for hver. Bruk cfse- og CD4-prøvene med én fargekontroll til å bekrefte et positivt fluorescerende signal for hver farge ved hjelp av spenningene som er angitt med de uopphetede cellene.Siden CFSE og propidiumjodid har en viss spektral overlapping, justerer du kompensasjonen for å trekke propidiumjodidfluorescensen fra CFSE-fluorescensen til CFSE bare-prøven ikke gir et signal i propidiumjodidkanalen. Når alle prøvene er analysert, beregne celledelingsindeksen ved å dele antall delte celler med 5000 udelte celler fra antigen stimulert gruppe med gjennomsnittlig antall delte celler per 5000 udelte celler fra cellene dyrket uten antigen. Nesten alle donorer viser en sterk T-celle respons på Stivkrampe toxoid etter in vitro stimulering fordi donorene har blitt vaksinert gjør Stivkrampe toxoid en nyttig positiv kontroll antigen.Spredningen av CD4 + T-celler fra ustimulerte PBMCer er imidlertid minimal. Etter syv dager med stimulering med humant pro-insulin C-peptid, kan pro-insulin C-peptid spesifikke CD4 + T-celler oppdages i perifert blod hos en person med type en diabetes. PBMC stimulert med influensa A virusmatriseprotein viser også spredning.Samlet viser disse dataene at analysen kan utføres ved hjelp av proteiner i full lengde samt korte syntetiske peptider. FACS-komponenten i denne metoden kan utføres ved hjelp av en cellesorteringsstrømsytometer. Ved hjelp av en cellesortering kan de antigenspesifikke T-cellene isoleres på enkeltcellenivå for nedstrøms analyse.Denne metoden har tillatt for oppdagelsen av CD4T celleresponser hos personer med tidlig utbruddet type en diabetes. Analyse av disse sjeldne T-cellepopulasjonene ved hjelp av andre metoder presenterer ulike tekniske utfordringer.

Research

JoVE Journal

Immunology and Infection

Quantification of Proliferating Human Antigen-specific CD4+ T Cells using Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Antigen Specific In Vivo Killing Assay using CFSE Labeled Target Cells

Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester (CFSE) can be used to easily and quickly label a cell population of interest for in vivo investigation.  ...

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester (CFSE) to Monitor Lymphocyte Proliferation

The Use of Carboxyfluorescein Diacetate Succinimidyl Ester CFSE to Monitor Lymphocyte Proliferation

Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) is an effective and popular means to monitor lymphocyte division1-3.  CFSE covalently labels long-lived ...

Expansion of Human Peripheral Blood  &gamma;&delta; T Cells using Zoledronate

Expansion of Human Peripheral Blood  ÃƒÅ½Ã‚Â³ÃƒÅ½Ã‚Â´ T Cells using Zoledronate

Human &gamma;&delta; T cells can recognize and respond to a wide variety of stress-induced antigens, thereby developing innate broad anti-tumor and ...

Adenoviral Transduction of Naive CD4 T Cells to Study Treg Differentiation

Adenoviral Transduksjon av Naive CD4 T-celler for å studere Treg Differensiering

Regulatory T cells (Tregs) are essential to provide immune tolerance to self as well as to certain foreign antigens. Tregs can be generated from naive CD4 ...

Isolation and Th17 Differentiation of Na&iuml;ve CD4 T Lymphocytes

Isolation and Th17 Differentiation of NaÃƒÆ’Ã‚Â¯ve CD4 T Lymphocytes

Isolasjon og Th17 Differensiering av naive CD4 T-lymfocytter

Th17 cells are a distinct subset of T cells that have been found to produce interleukin 17 (IL-17), and differ in function from the other T cell subsets ...

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Assessing the Innate Sensing of HIV-1 Infected CD4+ T Cells by Plasmacytoid Dendritic Cells Using an Ex vivo Co-culture System.

Vurdere Medfødt Sensing av HIV-1 infiserte CD4<sup&gt; +</sup&gt; T-celler ved Plasmacytoid dendrittiske celler ved hjelp av en<em&gt; Ex vivo</em&gt; Co-kultursystem.

HIV-1 innate sensing requires direct contact of infected CD4+ T cells with plasmacytoid dendritic cells (pDCs). In order to study this process, the ...

Killer Artificial Antigen Presenting Cells (KaAPC) for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Artificial Antigen Presenting Cells KaAPC for Efficient In Vitro Depletion of Human Antigen-specific T Cells

Killer Kunstig antigenpresenterende celler (KaAPC) for effektiv<em&gt; In Vitro</em&gt; Nedbryting av humant antigen-spesifikke T-celler

Current treatment of T cell mediated autoimmune diseases relies mostly on strategies of global immunosuppression, which, in the long term, is accompanied ...

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generating De Novo Antigen-specific Human T Cell Receptors by Retroviral Transduction of Centric Hemichain

Generering<em&gt; De Novo</em&gt; Antigen-spesifikke humane T-cellereseptorer etter retroviral transduksjon av Centric Hemichain

T cell receptors (TCRs) are used clinically to direct the specificity of T cells to target tumors as a promising modality of immunotherapy. Therefore, ...

Development of Stem Cell-derived Antigen-specific Regulatory T Cells Against Autoimmunity

Utvikling av stamcelle-avledet Antigen-spesifikke Regulatoriske T-cellene mot autoimmunitet

Autoimmune diseases arise due to the loss of immunological self-tolerance. Regulatory T cells (Tregs) are important mediators of immunologic ...

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells (iTregs) from Na&#239;ve CD4+ T Cells Using a TGF-&#946;-containing Protocol

In Vitro Differentiation of Human CD4+FOXP3+ Induced Regulatory T Cells iTregs from NaÃƒÆ’Ã†'Ãƒâ€šÃ‚Â¯ve CD4+ T Cells Using a TGF-ÃƒÆ’Ã…Â½Ãƒâ€šÃ‚Â²-containing Protocol

In vitro Differensiering av Menneskelig CD4 + foxp3 + Induced regulatoriske T-celler (iTregs) fra naive CD4 + T-celler under anvendelse av et TGF-β holdige Protocol