Name: controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells
Uploaded: 2019-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

עבודה זו נתמכת על ידי מענק מהמרכז לרפואת מוח ומשובי (CNRM, גרנט מספר G170244014). אנו מעריכים את הסיוע של מאהלו Dewan ו קלרה Selbrede בלימודי פיילוט הסרת דבק. . וניתוחי השתלת תאים אמנדה פו ולורה טאקר של המעבדה הקדם-רפואית של CNRM מחקר הליבה סיפק ייעוץ יקר על ניתוחי בעלי חיים ובדיקות התנהגות, בהתאמה.

כל הניסויים המתוארים בפרוטוקול זה נבדקו ואושרו על-ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים באוניברסיטה של השירותים במדים.
1. השפעה בקליפת הגולגולת וההשפעה הקורטיקלית
<ol><li>הכנת המכשיר הנשלט ההשפעה בקליפת המין וציוד כירורגי.<ol>
<li>טען 1 מ"ל להחליק-טיפ מזרק עם 0.5 mL של תמיסת מלח סטרילי עבור ה...

<ol>
	<li>Maas, A. I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury:+integrated+approaches+to+improve+prevention,+clinical+care,+and+research.">Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research.</a> The Lancet Neurology. 16, 987-1048 (2017).</li><li>Murray, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disability-adjusted+life+years+(DALYs)+for+291+diseases+and+injuries+in+21+regions,+1990-2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010.">Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010.</a> The Lancet. 380, 2197-2223 (2012).</li><li>Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury-Related+Emergency+Department+Visits,+Hospitalizations,+and+Deaths+-+United+States,+2007+and+2013.">Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013.</a> Morbidity and mortality weekly report: Surveillance summaries. 66, 1-16 (2017).</li><li>Fehily, B., Fitzgerald, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Mild+Traumatic+Brain+Injury:+Potential+Mechanisms+of+Damage.">Repeated Mild Traumatic Brain Injury: Potential Mechanisms of Damage.</a> Cell Transplantation. 26, 1131-1155 (2017).</li><li>Kulbe, J. R., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+traumatic+encephalopathy-integration+of+canonical+traumatic+brain+injury+secondary+injury+mechanisms+with+tau+pathology.">Chronic traumatic encephalopathy-integration of canonical traumatic brain injury secondary injury mechanisms with tau pathology.</a> Progress in Neurobiology. 158, 15-44 (2017).</li><li>Romine, J., Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+cortical+impact+model+for+traumatic+brain+injury.">Controlled cortical impact model for traumatic brain injury.</a> Journal of Visualized Experiments. , e51781 (2014).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Mishra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+resting+functional+connectivity+after+traumatic+brain+injury+in+the+rat.">Decreased resting functional connectivity after traumatic brain injury in the rat.</a> PloS ONE. 9, 95280 (2014).</li><li>Sours, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Default+mode+network+interference+in+mild+traumatic+brain+injury+-+a+pilot+resting+state+study.">Default mode network interference in mild traumatic brain injury - a pilot resting state study.</a> Brain Research. 1537, 201-215 (2013).</li><li>Radomski, K. L., Zhou, Q., Yi, K. J., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+contusion+injury+disrupts+olfactory+bulb+neurogenesis+in+adult+mice.">Cortical contusion injury disrupts olfactory bulb neurogenesis in adult mice.</a> BMC Neuroscience. 14, 142 (2013).</li><li>Wang, X., Gao, X., Michalski, S., Zhao, S., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury+Severity+Affects+Neurogenesis+in+Adult+Mouse+Hippocampus.">Traumatic Brain Injury Severity Affects Neurogenesis in Adult Mouse Hippocampus.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 721-733 (2016).</li><li>Aertker, B. M., Bedi, S., Cox, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+CNS+repair+following+TBI.">Strategies for CNS repair following TBI.</a> Experimental Neurology. 275 (3), 411-426 (2016).</li><li>Kikuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-derived+dopaminergic+neurons+function+in+a+primate+Parkinson's+disease+model.">Human iPS cell-derived dopaminergic neurons function in a primate Parkinson's disease model.</a> Nature. 548, 592-596 (2017).</li><li>Kondo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+transplantation+of+human+iPSC-derived+glial-rich+neural+progenitors+improves+lifespan+of+ALS+mice.">Focal transplantation of human iPSC-derived glial-rich neural progenitors improves lifespan of ALS mice.</a> Stem Cell Reports. 3, 242-249 (2014).</li><li>Tong, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+interneuron+progenitor+transplantation+restores+normal+learning+and+memory+in+ApoE4+knock-in+mice+without+or+with+Abeta+accumulation.">Inhibitory interneuron progenitor transplantation restores normal learning and memory in ApoE4 knock-in mice without or with Abeta accumulation.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 34, 9506-9515 (2014).</li><li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131, 861-872 (2007).</li><li>Lischka, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+mouse+cortical+but+not+isogenic+human+astrocyte+feeder+layers+enhance+the+functional+maturation+of+induced+pluripotent+stem+cell-derived+neurons+in+culture.">Neonatal mouse cortical but not isogenic human astrocyte feeder layers enhance the functional maturation of induced pluripotent stem cell-derived neurons in culture.</a> Glia. 66, 725-748 (2018).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4, 1560-1564 (2009).</li><li>Fleming, S. M., Ekhator, O. R., Ghisays, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+sensorimotor+function+in+mouse+models+of+Parkinson's+disease.">Assessment of sensorimotor function in mouse models of Parkinson's disease.</a> Journal of Visualized Experiments. , e50303 (2013).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. Compact 2nd edn. , (2004).</li><li>Jacobs, G. H., Williams, G. A., Cahill, H., Nathans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+novel+color+vision+in+mice+engineered+to+express+a+human+cone+photopigment.">Emergence of novel color vision in mice engineered to express a human cone photopigment.</a> Science. 315, 1723-1725 (2007).</li><li>Lundell, T. G., Zhou, Q., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenin1+expression+in+cell+lineages+of+the+cerebellar+cortex+in+embryonic+and+postnatal+mice.">Neurogenin1 expression in cell lineages of the cerebellar cortex in embryonic and postnatal mice.</a> Developmental Dynamics: An Official Publication of the American Association of Anatomists. 238, 3310-3325 (2009).</li><li>Kempermann, G., Kuhn, H. G., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+hippocampal+neurons+in+adult+mice+living+in+an+enriched+environment.">More hippocampal neurons in adult mice living in an enriched environment.</a> Nature. 386, 493-495 (1997).</li><li>Piltti, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+dose+alters+the+dynamics+of+human+neural+stem+cell+engraftment,+proliferation+and+migration+after+spinal+cord+injury.">Transplantation dose alters the dynamics of human neural stem cell engraftment, proliferation and migration after spinal cord injury.</a> Stem Cell Research. 15, 341-353 (2015).</li><li>Yu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+of+controlled+cortical+impact+traumatic+brain+injury+in+rats+and+mice+dictates+degree+of+behavioral+deficits.">Severity of controlled cortical impact traumatic brain injury in rats and mice dictates degree of behavioral deficits.</a> Brain Research. 1287, 157-163 (2009).</li><li>Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats.">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5, 1552-1563 (2010).</li><li>Namjoshi, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+biomechanical+and+biological+threshold+of+murine+mild+traumatic+brain+injury+using+CHIMERA+(Closed+Head+Impact+Model+of+Engineered+Rotational+Acceleration).">Defining the biomechanical and biological threshold of murine mild traumatic brain injury using CHIMERA (Closed Head Impact Model of Engineered Rotational Acceleration).</a> Experimental Neurology. 292, 80-91 (2017).</li><li>Shetty, A. K., Mishra, V., Kodali, M., Hattiangady, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+dysfunction+and+delayed+neurological+deficits+in+mild+traumatic+brain+injury+induced+by+blast+shock+waves.">Blood brain barrier dysfunction and delayed neurological deficits in mild traumatic brain injury induced by blast shock waves.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 232 (2014).</li><li>Petraglia, A. L., Dashnaw, M. L., Turner, R. C., Bailes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+mild+traumatic+brain+injury:+translation+of+physiological+and+anatomic+injury.">Models of mild traumatic brain injury: translation of physiological and anatomic injury.</a> Neurosurgery. 75, 34-49 (2014).</li><li>Siebold, L., Obenaus, A., Goyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+to+define+mild,+moderate,+and+severe+traumatic+brain+injury+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model.">Criteria to define mild, moderate, and severe traumatic brain injury in the mouse controlled cortical impact model.</a> Experimental Neurology. 310, 48-57 (2018).</li><li>Tucker, L. B., Fu, A. H., McCabe, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+Male+and+Female+C57BL/6J+Mice+on+Motor+and+Cognitive+Tasks+Commonly+Used+in+Pre-Clinical+Traumatic+Brain+Injury+Research.">Performance of Male and Female C57BL/6J Mice on Motor and Cognitive Tasks Commonly Used in Pre-Clinical Traumatic Brain Injury Research.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 880-894 (2016).</li><li>Rose, S. C., Fischer, A. N., Heyer, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+long+is+too+long?+The+lack+of+consensus+regarding+the+post-concussion+syndrome+diagnosis.">How long is too long? The lack of consensus regarding the post-concussion syndrome diagnosis.</a> Brain Injury. 29, 798-803 (2015).</li><li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taming+anxiety+in+laboratory+mice.">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7, 825-826 (2010).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+behavioral+testing+after+focal+ischemia+in+the+mouse:+functional+recovery+and+the+effects+of+gender.">Chronic behavioral testing after focal ischemia in the mouse: functional recovery and the effects of gender.</a> Experimental Neurology. 187, 94-104 (2004).</li><li>Andersen, A. B., Finger, S., Andersen, C. S., Hoagland, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorimotor+cortical+lesion+effects+and+treatment+with+nimodipine.">Sensorimotor cortical lesion effects and treatment with nimodipine.</a> Physiology &amp; Behavior. 47, 1045-1052 (1990).</li><li>Al-Ali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mTOR+Substrate+S6+Kinase+1+(S6K1)+Is+a+Negative+Regulator+of+Axon+Regeneration+and+a+Potential+Drug+Target+for+Central+Nervous+System+Injury.">The mTOR Substrate S6 Kinase 1 (S6K1) Is a Negative Regulator of Axon Regeneration and a Potential Drug Target for Central Nervous System Injury.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 37, 7079-7095 (2017).</li><li>Pleasant, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rate+of+neurodegeneration+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model+is+influenced+by+impactor+tip+shape:+implications+for+mechanistic+and+therapeutic+studies.">Rate of neurodegeneration in the mouse controlled cortical impact model is influenced by impactor tip shape: implications for mechanistic and therapeutic studies.</a> Journal of Neurotrauma. 28, 2245-2262 (2011).</li></ol>

מתון CCI כמערכת מודל לבדיקת טיפול התחדשות ניסיוני מודל CCI הוא כלי רב ערך לחקירת מנגנונים של חוסר תפקוד רקמות לאחר פגיעה מכנית בקליפת המוח. היכולת של פרמטרי הפציעה היא תכונה אטרקטיבית של דגם זה. לשנות את עומק Z של ההשפעה, את המהירות, או להתעכב זמן יכול להגדיל או להקטין את חומרת הפציע?...

פגיעה מוחית טראומטית (TBI) היא מונח כללי עבור הפגיעה הנרכשת במוח עקב כוחות מכניים עקיפים (האצה בסיבוב/האטה או קונטרה-הפיכה) ממכות לראש או נזק ישיר מחפצים או גלי הדף. Tbi הוערך להיות הגורם בערך 9% ממקרי המוות ברחבי העולם ונצפתה ב 50,000,000 במקרים מוערכים לשנה1,2. 2017 דיווח מהמרכזים לבקרת מחלות ומניעתן שנאמד ב-2013, היו סך של 2,800,000 ביקורים בבתי חולים ומקרי מוות עקב TBI בארצות הברית3. הרבה מאוד מתון. TBI רציני יכול להוביל לפגיעה לכל החיים של הכרה, תפקוד מוטורי, ואיכות העולם הכוללת. ההשלכות של tbi מתון, במיוחד הקשורות לספורט חוזרים tbi, היו רק לאחרונה העריכו את ההשפעות הבריאותיות חתרני שלהם4,5.
מידול קדם-קליני הוא מרכיב חיוני בפיתוח תובנות מכניסטיות חדשות וטיפול משחזרת פוטנציאלי עבור TBI. השפעת הקליפה הנשלטת (CCI) של TBI היא דגם של ראש פתוח של פציעה מכנית של חבלה בקליפת המוח. את פרמטרי ההשפעה ניתן לשנות כדי לייצר פציעות CCI כי נע בין קל עד חמור6. פציעות CCI הן מיקוד ולא מפוזר, כפי שנראה עם דגמי ראש סגורים אחרים של TBI. CCI ניתן לבצע כדי לגרום לפציעה חד צדדית, כך קליפת המוח יכול לשמש המשווה הפנימי. פרוטוקול זה ממחיש את המאפיינים של CCI מתון לחלק של קליפת המוח המקיף את האזורים הראשוניים והמנועים העיקריים. אזור קליפת הגוף הזה נבחר למעורבותו בהתנהגויות sensorimotor שבהן בדיקות התנהגות רבות יכולות לזהותאת החסרונות המושרה בפציעה. שיפורים התנהגותיים בשל התערבויות טיפוליות עבור TBI ניתן לזהות גם.
סימן ההיכר של TBI הוא התפקוד העצבי הנרחב באזור הנפגע. הנוירונים נפצעו עוברים מוות תאים, וקישוריות הרשת העצבית מופרת8,9. TBI משבש את הגיוס של תאי גזע אנדוגני, אשר מוביל התנהגות נוספת במורד הזרם של כדורי10,11.  השתלת תאים גזע עצבי תאים גזע נגזר כבר נחקרו כאפשרות לשחזר את הפונקציה במוח הפצוע. בנוסף לפוטנציאל לשחזר המעגלים העצביים פגום, תאים מושתלים להפעיל אפקטים הפרצינית המעודדים הישרדות עצבית התאוששות פונקציונלית מ TBI12. מגוון סוגי תאים כבר מושתלים מראש כדי להעריך את הפוטנציאל המשחזרת שלהם במודלים של הפרעות נוירולוגיים13,14,15. הפופולריזציה האחרונות של טכנולוגיה תא גזע מושרה pluripotent16 יש הקלה על פיתוח של קווי גזע אנושי רבים לשימוש ניסיוני. בדיקות קדם-קליניות עם תאים שמקורם בהיסק היא צעד ראשון חשוב לאפיון יעילות טיפולית פוטנציאלית של קו התאים נגד מחלות אנושיות. מעבדה זו פיתחה פרוטוקולים להבדיל hiPSCs פנוטיפים עצביים17 במרדף אחר התאים שתילת שולחנות כדי לסייע התאוששות מפציעה טראומטית המוח.
ניסויים בפרוטוקול זה להשתמש CCI חד צדדית כדי לגרום TBI אל הסוחושי השמאלית ואת קליפת המנוע של עכברים מבוגרים. פציעה מתונה של CCI גורמת לגרעון תפקודי מתמשך, אשר משמש למעקב אחר ההשפעות של התא העצבי הנגזר של היפנוסק על התאוששות פונקציונלית. בדיקה מsensorimotor בפרוטוקול זה הותאמה ממתודולוגיה שהוקמה על ידי Bouet ועמיתיו18 והפגינו בעבר על ידי פלמינג ועמיתיו19.  פרוטוקול זה מתאר זרימת עבודה מלאה לביצוע פציעה מוחית ניסיונית, השתלת תרפיה של תאי ירכיים, ניתוח התנהגותי והיסטולוגית של צעדי התוצאה הניסיונית.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:774px;" width="773">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1 ml syringes</td>
			<td style="width:201px;">Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;309659</td>
			<td style="width:212px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1.7 ml flip top test tubes</td>
			<td>Denville</td>
			<td style="width:123px;">C2170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">10 microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">7635-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">25G Precision Glide syringe needles</td>
			<td>Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">70% ethanol</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">acetaminophen oral suspension</td>
			<td>Tylenol (Children&#39;s)</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Dilute to 1 mg/ml in water</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">anesthetic vaporizer</td>
			<td>Vetland</td>
			<td style="width:123px;">521-11-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">animal handling cloth</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Betadine</td>
			<td>Purdue Products</td>
			<td style="width:123px;">NDC-67618-151-32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">compressed oxygen</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">cyclosporine A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">30024-100mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DAB staining kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">D8418-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DMEM</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A14430-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">donkey anti-mouse IgG antibody, HRP conjugated</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:123px;">715-035-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">electrical tape</td>
			<td>3M Corporation</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">fine tweezers</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">glass capillary pipettes, 1 mm OD, 0.58 mm ID</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td style="width:123px;">1B100F-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">High Speed Rotary Micromotor Kit</td>
			<td>Foredom Electric Co.&#160;</td>
			<td style="width:123px;">K.1070 - K.107018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Ideal Micro Drill Burr Set Of 5</td>
			<td>Cell Point Scientific&#160;</td>
			<td style="width:123px;">60-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Impact One Stereotaxic Impactor for CCI&#160;</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td style="width:123px;">39463920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td style="width:123px;">NDC-10019-360-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">lab bench timers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">14-649-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micropipette puller</td>
			<td>MicroData Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:123px;">PMP-102</td>
			<td>Any puller will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope cover slips</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">12-545-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope slide mounting medium</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:212px;">Product of choice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">mirror</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">mouse anti-human nuclear antigen antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td style="width:123px;">MAB1281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Mouse on Mouse blocking kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">BMK-2202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">needle holder hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic ointment</td>
			<td>Falcon Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:123px;">NDC-61314-631-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic box</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic cylinder</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">QSI motorized syringe pump</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Removable needle compression fitting</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">55750-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small rodent stereotaxic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">51925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">StemPro Accutase</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A1110501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">06-669-62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sterile cotton swabs/Kendall Q-tips</td>
			<td>Tyco Healthcare</td>
			<td style="width:123px;">540500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile saline</td>
			<td>Hospira</td>
			<td style="width:123px;">NDC-0409-1966-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Stopwatches (2)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">06-662-56</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Superfrost Plus Gold microscope slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">15-188-48</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sutures - 5.0 silk with curved needle</td>
			<td>Oasis</td>
			<td style="width:123px;">MV-682</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells

פגיעה מוחית טראומטית (TBI) היא גורם מוביל לתחלואה ותמותה ברחבי העולם. פתולוגיה של מחלות בשל TBI מתקדמת העלבון המכני העיקרי לתהליכי פציעה משניים, כולל אפופטוזיס ודלקת. מידול בעלי חיים היה בעל ערך בחיפוש כדי לפענח את מנגנוני הפציעה ולהעריך טיפולים נוירוהגנה פוטנציאליים. פרוטוקול זה מתאר את מודל ההשפעה הקורטיקלית הנשלטת (CCI) של מוקד, TBI בראש פתוח. במיוחד, הפרמטרים להפקת פציעה בקליפת הגוף קל מתונה מתוארים. השלכות התנהגותיות של CCI מנותח באמצעות מבחן ההסרה של סרט דביק של אינטגרציה דו sensorimotor. בנוגע לטיפול ניסיוני לפתולוגיה TBI, פרוטוקול זה ממחיש גם תהליך לזריעה של תאים מתורבתים במוח. תרביות תאים עצביים נגזר מתאי גזע המושרה על ידי האדם (hiPSCs) נבחרו עבור הפוטנציאל שלהם כדי להראות שיקום פונקציונלי מעולה בחולים TBI האדם. הישרדות כרונית של hiPSCs ברקמת המוח של העכבר המארח מזוהה באמצעות תהליך שונה של הליך אימונוהיסטוכימיה.

ניתוח קרטומיה מקלה על פגיעה במוח הנסיוני והשתלת התא התרפויטי: מודל ההשפעה הקורטיקלית הנשלטת של פגיעה במוח וטיפול השתלת התא הבאים דורשים הסרה זהירה של הגולגולת המועלת. ניתן לבצע את כריתת הגולגולת על פני כל משטח של הגולגולת כדי לאפשר מניפולציות לאזור המוח של העניין. התרשים <strong class=...

Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells

פרוטוקול זה מדגים מתודולוגיות עבור מודל העכבר של פגיעה במוח הגולגולת טראומה טראומטית השתלת הגוף האנושי המושרה pluripotent שפעה התאים הנגזר לתוך האתר פציעה. מבחנים התנהגותיים והיסטולוגיים של תוצאות מהליכים אלה מתוארים גם בקצרה.

מבוקרת מודל השפעה בקליפת המוח של פגיעה במוחו של העכבר עם השתלת הטיפולית של האדם המושרה Pluripotent תא גזע תאים הנגזרים

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Disease pathology due to TBI progresses from the primary mechanical ...

הפרוטוקול שלנו מדגים זרימת עבודה פרה-קלינית מקיפה לבדיקת היעילות הטיפולית של תאי גזע פלוריפוטנטיים הנגרמים על ידי בני אדם לאחר פגיעה מוחית. מודל זה של פגיעה מוחית טראומטית מספק רמה גבוהה של רב-תכליתיות ושחזור על ידי שליטה הדוקה בפרמטרים של הכוח המכאני ולכן מתן פגיעה מוגדרת היטב. הליכים אלה יכולים לשמש לחקר תהליכי פציעה והתאוששות באזורי מוח אחרים ושיטת ההשתלה נוחה לשימוש עם סוגי תאים רבים.קידוח גולגולתי הוא מאתגר כמו הטכניקה דורשת זרז ידני כדי לשלוט בלחץ המתאים, מהירות, עומק, ותנועות חלקות. לתעד את כל האירועים ולתרגל בהרחבה. כדי לבצע craniectomy חד צדדי, לאשר חוסר תגובה קמצוץ בוהן בעכבר הרדמה ולאבטח את העכבר במסגרת סטריאוטוקסית.החל משחה אופתלמית אנטיביוטית על העיניים עם צמר גפן סטרילית ופתרון מבוסס יוד לאזור הקרקפת המגולח. מוציאים את היוד עם 70% אתנול ומכסים את החיה בווילון כירורגי. בצע חתך של 1.5 עד 2 ס"מ על הקרקפת ולהשתמש במטליות כותנה סטריליות כדי לנקות את הפצע ולנקות את הפאשיה משמאל לקו האמצע בברגמה.השתמש בבדיקה משפיעה כדי לזהות את האתר craniectomy ולהגדיר את x שווה אפס, y שווה אפס נקודת התייחסות סטריאוטוקסית bregma. כוונן את הגשוש באופן משני מילימטרים משמאל לקווי האמצע. השתמשו בסמן עדין ובטוח בניתוח כדי לסמן עיגול בקוטר חמישה מילימטרים סביב אזור הפגיעה המשוער.הרם וסובב את המשפיע מחוץ למיקום והשלם את עיגול חמשת המילימטרים. החזר בקצרה את המשפיע למקומו כדי לאמת את הדיוק של מעגל חמשת המילימטרים. לאחר מכן הרימו וסובבו את המשפיען מחוץ לעמדה ולהשתמש בכלי יד של ערכת מיקרו-מנוע סיבובית במהירות גבוהה המצויד בקצה עגול 0.6 או 0.8 מילימטר בר כדי ליצור חור פתוח בגולגולת במהירות מקסימלית של 70 עד 80%.יש להפעיל לחץ אור על הגולגולת תוך כדי קידוח לאורך קווי המתאר ההיקפיים של חמשת המילימטרים בתוך גבול זה ולהשתמש במדפים כדי להרים את דש העצם שנוצר. קידוח דרך קווי תפר עשוי להציג קושי נוסף כמו העצם מופרעת ודורש לחץ נוסף. כלי הדם עשויים להיות בשיתוף הדוק ולכן אירועי דימום צפויים.כדי לגרום לפגיעה קלה בקליפת המוח מבוקרת, נקה את הגשושית המשפיעה עם כרית הכנה לאלכוהול סטרילי והזז את גשוש המשפיע בחזרה למקומו מעל קליפת המוח החשופה. מנמיך את החללית עד שהיא נוגעת במשטח דורה מאטר ומסמן מיקום זה כ- z שווה לאפס. למשוך את הבוכנה ולעבור z שווה מינוס מילימטר אחד ולפריק את הבוכנה כדי להשפיע על קליפת המוח.מיד להרים את הבוכנה ולהזיז את הזרוע מחוץ לעמדה להשקות את קליפת המוח עם נפח נדיב של מלוחים ולהשתמש תפרים קטע פשוט תפר משי 5-0 כדי לסגור את חתך הקרקפת. לאחר מכן לספק 10 מיליגרם לקילוגרם של Cyclosporine A על ידי הזרקה תת עורית לתוך scruff ולנחות את העכבר בכלוב נקי מראש מחומם לאחר הניתוח עם ניטור עד החלמה מלאה. בערך 24 שעות לאחר כריתת הקרניקטו, מניחים את העכבר בחזרה למסגרת הסטריאוטוקסית.כסו את העכבר בווילון הכירורגי הפנסדור. Lavage אתר החתך עם מלוחים סטריליים כדי לנקות את האתר ולשחרר את התפרים. השתמשו במטלית כותנה ספוגה ב-70% אתנול כדי לעקר בעדינות את אתר החתך ולהשתמש בפינצטה עדינה וב מספריים עיניים כדי להסיר את התפרים.ואז להשקות את האתר ניתוח craniectomy עם מלוחים סטריליים בשפע. במכסה המנוע biosafety של תאים, בעדינות מערבולת או הקש על הצינור של תאים כדי להבטיח השעיית תא הומוגני. השתמש micropipette לטעון כ 7.5 microliters של תאים לתוך מזרק המילטון דרך קצה הבוכנה.מחזיק את המזרק בזווית של 120 מעלות עם קצה הבוכנה פונה כלפי מטה, להכניס את הבוכנה דואג לא להציג בועת אוויר בין ההשעיה ואת קצה הבוכנה. חבר את מכלול אטם למחט פיפטה ולחבר את המחט למזרק. לדחוף את הבוכנה כדי להזיז את ההשעיה התא לתוך מחט פיפטה ולחבר את המזרק למשאבת המזרק סטריאוטוקסי.לקדם את הבוכנה כדי לוודא הרכבה משאבת מזרק עובד כראוי להעביר את המחט לתוך הקואורדינטות להזרקה. יישר את קצה המחט ל bregma ולהגדיר את x ו y-קואורדינטות לאפס. הזז את קצה המחט מעל כריתת הקרניקטו לשני מילימטרים צדדיים ומינוס אחורי מילימטר אחד כדי bregma ולגעת בקצה המחט אל פני השטח של דורה מאטר.הרם את המחט מעט ואז בצע חתך קטן בדורה מאטר במקום שבו המחט יצרה קשר. הגדר את הקואורדינטות הסטריאוטוקסיות ל- z שווה לאפס ודחוף את הבוכנה כדי לאשר כי ההשעיה התא זורם כראוי לפני החדרת המחט לתוך המוח. הצג את המחט לתוך המוח לעומק של z שווה מינוס 1.4 מילימטרים כדי למקם את השתל בגבול החומר האפור / החומר הלבן של קליפת המוח העמוקה.התחל את משאבת המזרק כדי להחדיר את ההשעיה התא על פני תקופה של 15 דקות. השתמש במיקרוסקופ למרחקי עבודה ארוכים כדי לפקח על זרימת ההשעיה של התאים להשקות את אתר הניתוח עם מלוחים סטריליים במהלך ההזרקה כדי לשמור על הידרציה של רקמות. כאשר כל התאים נמסרו, לאט למשוך את מחט ההשתלה ולהשקות את אתר הניתוח עם מלוחים נוספים לפני סגירת החתך עם תפרים חדשים.לאחר מכן ספק טיפול לאחר הניתוח כפי שהוכח. לבדיקת הסרת סרט דבק, השתמש תחילה בסכין גילוח קטנה כדי לחתוך חתיכות צהובות ואדומים של סרט חשמלי לשלוש על חמש רצועות מילימטר על משטח זכוכית חלק. הכניסו את העכברים לחדר בדיקות ההתנהגות לפחות 30 דקות לפני הבדיקה ולהשתמש במטלית טיפול כדי לרסן את העכבר על ידי עורף הצוואר והגב כך שהעכבר יחזיק את הפותים הרחק מהגוף והראש שלו.השתמש פינצטה כדי למקם רצועת דבק על פני השטח plantar של כל ציפורן ולהשתמש בלחץ אצבע עדין ועקבי כדי לאבטח את הרצועות לכפות הרגליים. מניחים במהירות את העכבר לתוך גליל פלסטיק ולהתחיל שני סטופרים כאשר העכבר יש את כל ארבע כפות על תיבת הבדיקה פלסטיק. לאחר מכן השתמשו בשני סטופרים כדי לתעד את האיחורים בהתראת כפות רגליים שמאליות, הסרת כפות רגליים שמאליות, התראת כף יד ימין והסרת כפות רגליים ימניות.בניסוי פיילוט זה הושוותה תפקוד האנדלימב בכריתת המוח לבדה, פגיעה מבוקרת בפגיעה בקליפת המוח ועכברים נאיביים. עכברים שעברו ניתוח הראו איחורים מוגברים ארעיים כדי להבחין בגירויים דבקים במשך יום עד שלושה ימים מיד לאחר הניתוח וגירעונות ארעיים לאחר הניתוח בהסרה דבקית מהמצג ההפניה של ipsilateral. עכברים שעברו השפעה קליפתית מבוקרת, לעומת זאת, הציגו ליקויים משמעותיים בביצועים המוטוריים במצחיה לעומת הפציעה בהשוואה לעכברים נאיביים מהיום שלאחר הניתוח 28.כשל חיסוני של מקטעי מוח עכבר עבור אנטיגן גרעיני אנושי מגלה כי שתלי תאים אנושיים ניתן להבדיל בבירור מרקמות מארחות בפציעה SHAM ומוחות השפעה קליפתית מבוקרת. עליך לבחון נהלי בטיחות מעבדה סטנדרטיים בעת טיפול בתאים אנושיים מתורבתים וכאשר מטפלים במחטי מזרק שבאים במגע עם מכרסמים או תרופות לדיכוי המערכת החיסון. ניתן לנתח מקטעי רקמת מוח לביטוי סמנים נוירו-אינפלציוניים מכיוון שיש ערך לדעת כיצד השתל משפיע על תגובת הפגיעה ברקמה המארחת ולהיפך.הופתענו לגלות הבדלי מין עדינים בתוצאות ההתנהגות שלאחר הפציעה. כעת אנו חוקרים אם לסקס יש תפקיד בתגובה הנוירואימונית לפגיעה מוחית. ידיים יציבות, סבלנות ותרגול חיוניים לפיתוח טכניקת כריתת סרטן טובה.נזק משני מכריתת קרניים לא נכונה יכול לסכן את האזור שאתה רוצה למקד להשתלת תאים.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culturing Human Pluripotent and Neural Stem Cells in an Enclosed Cell Culture System for Basic and Preclinical Research

Culturing האדם pluripotent ואת עצבי תאי גזע מערכת תרבית תאים סגורות למחקר בסיסי פרה

This paper describes how to use a custom manufactured, commercially available enclosed cell culture system for basic and preclinical research. Biosafety ...

Rapid Neuronal Differentiation of Induced Pluripotent Stem Cells for Measuring Network Activity on Micro-electrode Arrays

בידול העצבי המהיר של גזע תאים המושרה pluripotent למדידת פעילות רשת על מערכי מייקרו-אלקטרודה

Neurons derived from human induced Pluripotent Stem Cells (hiPSCs) provide a promising new tool for studying neurological disorders. In the past decade, ...

Pluripotent Stem Cell Derived Cardiac Cells for Myocardial Repair

תאי גזע פלוריפוטנטיים נגזרים תאי לב לתיקון שריר לב

Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) must be fully differentiated into specific cell types before administration, but conventional protocols for ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

הבדל Chondrocytes מ היקפי דם הנגזרות האדם תאים Pluripotent Pluripotent Induced

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

Generation of Standardized and Reproducible Forebrain-type Cerebral Organoids from Human Induced Pluripotent Stem Cells

דור של Organoids מוחי סטנדרטית ו לשחזור הקדמי-סוג של האדם המושרה בתאי גזע Pluripotent

The human cortex is highly expanded and exhibits a complex structure with specific functional areas, providing higher brain function, such as cognition. ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocyte-like Cells for Drug Discovery

שימוש האדם המושרה תאים דמויי Hepatocyte נגזר תאי גזע Pluripotent לגילוי סמים

The ability to differentiate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) into hepatocyte-like cells (HLCs) provides new opportunities to study inborn ...

A Familial Hypercholesterolemia Human Liver Chimeric Mouse Model Using Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocytes

מודל אנושי העכבר Chimeric הכבד היפרכולסטרולמיה משפחתית באמצעות Hepatocytes נגזר תאי גזע Pluripotent המושרה

Familial hypercholesterolemia (FH) is mostly caused by low-density lipoprotein receptor (LDLR) mutations and results in an increased risk of early-onset ...

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells (hiPSC-ECs)

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells hiPSC-ECs

Microfluidic Assay עבור הערכה של ליקוציט הדבקה על נגזר אנושיים לתאי גזע Pluripotent המושרה בתאי אנדותל (hiPSC-ECs)

Endothelial cells (ECs) are essential for the regulation of inflammatory responses by either limiting or facilitating leukocyte recruitment into affected ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

דור של תא צורב עור תלת-ממד של כבל דם-derived המושרה בתאי גזע Pluripotent

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

בדור חוץ גופית של Somite נגזרים מן האדם המושרה בתאי גזע Pluripotent

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...