Name: controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells
Uploaded: 2019-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

Dette arbeidet ble støttet av en bevilgning fra senter for nevrovitenskap og regenererende medisin (CNRM, Grant nummer G170244014). Vi setter pris på hjelp av Mahima Dewan og Clara Selbrede i lim fjerning pilotstudier. Kryslaine Radomski utført foreløpige hjerneskade og celle transplantasjon operasjoner. Amanda Fu og Laura Tucker av USU CNRM prekliniske Studies kjerne laboratorium gitt verdifulle råd om dyr operasjoner og atferds testing, henholdsvis.

Alle eksperimenter som er beskrevet i denne protokollen ble gjennomgått og godkjent av uniformerte Services University Animal Care og use Committee.
1. Craniectomy og kontrollert kortikale effekt
<ol><li>Utarbeidelse av kontrollert kortikale innvirkning enhet og kirurgiske forsyninger.<ol>
<li>Legg en 1 mL slip-tip-sprøyte med 0,5 mL sterilt saltvann for sår vanning. Fest en 25 G nål til sprøyten for å kontrollere vanning.</li>
		<li>Forbered en fortynnet løsning av CsA i DMSO til end...

<ol>
	<li>Maas, A. I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury:+integrated+approaches+to+improve+prevention,+clinical+care,+and+research.">Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research.</a> The Lancet Neurology. 16, 987-1048 (2017).</li><li>Murray, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disability-adjusted+life+years+(DALYs)+for+291+diseases+and+injuries+in+21+regions,+1990-2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010.">Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010.</a> The Lancet. 380, 2197-2223 (2012).</li><li>Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury-Related+Emergency+Department+Visits,+Hospitalizations,+and+Deaths+-+United+States,+2007+and+2013.">Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013.</a> Morbidity and mortality weekly report: Surveillance summaries. 66, 1-16 (2017).</li><li>Fehily, B., Fitzgerald, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Mild+Traumatic+Brain+Injury:+Potential+Mechanisms+of+Damage.">Repeated Mild Traumatic Brain Injury: Potential Mechanisms of Damage.</a> Cell Transplantation. 26, 1131-1155 (2017).</li><li>Kulbe, J. R., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+traumatic+encephalopathy-integration+of+canonical+traumatic+brain+injury+secondary+injury+mechanisms+with+tau+pathology.">Chronic traumatic encephalopathy-integration of canonical traumatic brain injury secondary injury mechanisms with tau pathology.</a> Progress in Neurobiology. 158, 15-44 (2017).</li><li>Romine, J., Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+cortical+impact+model+for+traumatic+brain+injury.">Controlled cortical impact model for traumatic brain injury.</a> Journal of Visualized Experiments. , e51781 (2014).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Mishra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+resting+functional+connectivity+after+traumatic+brain+injury+in+the+rat.">Decreased resting functional connectivity after traumatic brain injury in the rat.</a> PloS ONE. 9, 95280 (2014).</li><li>Sours, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Default+mode+network+interference+in+mild+traumatic+brain+injury+-+a+pilot+resting+state+study.">Default mode network interference in mild traumatic brain injury - a pilot resting state study.</a> Brain Research. 1537, 201-215 (2013).</li><li>Radomski, K. L., Zhou, Q., Yi, K. J., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+contusion+injury+disrupts+olfactory+bulb+neurogenesis+in+adult+mice.">Cortical contusion injury disrupts olfactory bulb neurogenesis in adult mice.</a> BMC Neuroscience. 14, 142 (2013).</li><li>Wang, X., Gao, X., Michalski, S., Zhao, S., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury+Severity+Affects+Neurogenesis+in+Adult+Mouse+Hippocampus.">Traumatic Brain Injury Severity Affects Neurogenesis in Adult Mouse Hippocampus.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 721-733 (2016).</li><li>Aertker, B. M., Bedi, S., Cox, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+CNS+repair+following+TBI.">Strategies for CNS repair following TBI.</a> Experimental Neurology. 275 (3), 411-426 (2016).</li><li>Kikuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-derived+dopaminergic+neurons+function+in+a+primate+Parkinson's+disease+model.">Human iPS cell-derived dopaminergic neurons function in a primate Parkinson's disease model.</a> Nature. 548, 592-596 (2017).</li><li>Kondo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+transplantation+of+human+iPSC-derived+glial-rich+neural+progenitors+improves+lifespan+of+ALS+mice.">Focal transplantation of human iPSC-derived glial-rich neural progenitors improves lifespan of ALS mice.</a> Stem Cell Reports. 3, 242-249 (2014).</li><li>Tong, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+interneuron+progenitor+transplantation+restores+normal+learning+and+memory+in+ApoE4+knock-in+mice+without+or+with+Abeta+accumulation.">Inhibitory interneuron progenitor transplantation restores normal learning and memory in ApoE4 knock-in mice without or with Abeta accumulation.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 34, 9506-9515 (2014).</li><li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131, 861-872 (2007).</li><li>Lischka, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+mouse+cortical+but+not+isogenic+human+astrocyte+feeder+layers+enhance+the+functional+maturation+of+induced+pluripotent+stem+cell-derived+neurons+in+culture.">Neonatal mouse cortical but not isogenic human astrocyte feeder layers enhance the functional maturation of induced pluripotent stem cell-derived neurons in culture.</a> Glia. 66, 725-748 (2018).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4, 1560-1564 (2009).</li><li>Fleming, S. M., Ekhator, O. R., Ghisays, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+sensorimotor+function+in+mouse+models+of+Parkinson's+disease.">Assessment of sensorimotor function in mouse models of Parkinson's disease.</a> Journal of Visualized Experiments. , e50303 (2013).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. Compact 2nd edn. , (2004).</li><li>Jacobs, G. H., Williams, G. A., Cahill, H., Nathans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+novel+color+vision+in+mice+engineered+to+express+a+human+cone+photopigment.">Emergence of novel color vision in mice engineered to express a human cone photopigment.</a> Science. 315, 1723-1725 (2007).</li><li>Lundell, T. G., Zhou, Q., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenin1+expression+in+cell+lineages+of+the+cerebellar+cortex+in+embryonic+and+postnatal+mice.">Neurogenin1 expression in cell lineages of the cerebellar cortex in embryonic and postnatal mice.</a> Developmental Dynamics: An Official Publication of the American Association of Anatomists. 238, 3310-3325 (2009).</li><li>Kempermann, G., Kuhn, H. G., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+hippocampal+neurons+in+adult+mice+living+in+an+enriched+environment.">More hippocampal neurons in adult mice living in an enriched environment.</a> Nature. 386, 493-495 (1997).</li><li>Piltti, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+dose+alters+the+dynamics+of+human+neural+stem+cell+engraftment,+proliferation+and+migration+after+spinal+cord+injury.">Transplantation dose alters the dynamics of human neural stem cell engraftment, proliferation and migration after spinal cord injury.</a> Stem Cell Research. 15, 341-353 (2015).</li><li>Yu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+of+controlled+cortical+impact+traumatic+brain+injury+in+rats+and+mice+dictates+degree+of+behavioral+deficits.">Severity of controlled cortical impact traumatic brain injury in rats and mice dictates degree of behavioral deficits.</a> Brain Research. 1287, 157-163 (2009).</li><li>Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats.">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5, 1552-1563 (2010).</li><li>Namjoshi, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+biomechanical+and+biological+threshold+of+murine+mild+traumatic+brain+injury+using+CHIMERA+(Closed+Head+Impact+Model+of+Engineered+Rotational+Acceleration).">Defining the biomechanical and biological threshold of murine mild traumatic brain injury using CHIMERA (Closed Head Impact Model of Engineered Rotational Acceleration).</a> Experimental Neurology. 292, 80-91 (2017).</li><li>Shetty, A. K., Mishra, V., Kodali, M., Hattiangady, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+dysfunction+and+delayed+neurological+deficits+in+mild+traumatic+brain+injury+induced+by+blast+shock+waves.">Blood brain barrier dysfunction and delayed neurological deficits in mild traumatic brain injury induced by blast shock waves.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 232 (2014).</li><li>Petraglia, A. L., Dashnaw, M. L., Turner, R. C., Bailes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+mild+traumatic+brain+injury:+translation+of+physiological+and+anatomic+injury.">Models of mild traumatic brain injury: translation of physiological and anatomic injury.</a> Neurosurgery. 75, 34-49 (2014).</li><li>Siebold, L., Obenaus, A., Goyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+to+define+mild,+moderate,+and+severe+traumatic+brain+injury+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model.">Criteria to define mild, moderate, and severe traumatic brain injury in the mouse controlled cortical impact model.</a> Experimental Neurology. 310, 48-57 (2018).</li><li>Tucker, L. B., Fu, A. H., McCabe, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+Male+and+Female+C57BL/6J+Mice+on+Motor+and+Cognitive+Tasks+Commonly+Used+in+Pre-Clinical+Traumatic+Brain+Injury+Research.">Performance of Male and Female C57BL/6J Mice on Motor and Cognitive Tasks Commonly Used in Pre-Clinical Traumatic Brain Injury Research.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 880-894 (2016).</li><li>Rose, S. C., Fischer, A. N., Heyer, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+long+is+too+long?+The+lack+of+consensus+regarding+the+post-concussion+syndrome+diagnosis.">How long is too long? The lack of consensus regarding the post-concussion syndrome diagnosis.</a> Brain Injury. 29, 798-803 (2015).</li><li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taming+anxiety+in+laboratory+mice.">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7, 825-826 (2010).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+behavioral+testing+after+focal+ischemia+in+the+mouse:+functional+recovery+and+the+effects+of+gender.">Chronic behavioral testing after focal ischemia in the mouse: functional recovery and the effects of gender.</a> Experimental Neurology. 187, 94-104 (2004).</li><li>Andersen, A. B., Finger, S., Andersen, C. S., Hoagland, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorimotor+cortical+lesion+effects+and+treatment+with+nimodipine.">Sensorimotor cortical lesion effects and treatment with nimodipine.</a> Physiology &amp; Behavior. 47, 1045-1052 (1990).</li><li>Al-Ali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mTOR+Substrate+S6+Kinase+1+(S6K1)+Is+a+Negative+Regulator+of+Axon+Regeneration+and+a+Potential+Drug+Target+for+Central+Nervous+System+Injury.">The mTOR Substrate S6 Kinase 1 (S6K1) Is a Negative Regulator of Axon Regeneration and a Potential Drug Target for Central Nervous System Injury.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 37, 7079-7095 (2017).</li><li>Pleasant, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rate+of+neurodegeneration+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model+is+influenced+by+impactor+tip+shape:+implications+for+mechanistic+and+therapeutic+studies.">Rate of neurodegeneration in the mouse controlled cortical impact model is influenced by impactor tip shape: implications for mechanistic and therapeutic studies.</a> Journal of Neurotrauma. 28, 2245-2262 (2011).</li></ol>

Mild CCI som et modell system for testing av eksperimentell regenererende behandling CCI-modellen er et verdifullt verktøy for å undersøke mekanismer for vevs dysfunksjon etter mekanisk skade på cortex. Justeringsevne av skaden parametrene er en attraktiv ansiktstrekk av denne modell. Endring av Z dybden av virkningen, hastigheten, eller holde tid kan øke eller redusere alvorlighetsgraden av skaden som ønsket av etterforsker10,25. Den mi...

Traumatisk hjerneskade (TBI) er en generell betegnelse for ervervet skade på hjernen på grunn av enten indirekte mekaniske krefter (rotasjons akselerasjon/retardasjon eller Contra-kupp) fra slag mot hodet eller direkte skade fra gjenstander eller blast bølger. TBI er anslått å være årsaken til om lag 9% av verdensomspennende dødsfall og observert i anslagsvis 50 000 000 tilfeller per år1,2. En 2017 rapport fra Centers for sykdom kontroll og forebygging anslått at i 2013, var det totalt 2 800 000 sykehus besøk og dødsfall på grunn av TBI i USA3. Mange mildere TBIs gå urapporterte hvert år. Alvorlig TBI kan føre til livslang svekkelse av kognisjon, motorisk funksjon, og generell livskvalitet. Konsekvensene av mild TBI, spesielt repeterende sport-relaterte TBI, har nylig blitt verdsatt for deres lumske helseeffekter4,5.
Prekliniske modellering er en viktig komponent i utviklingen av ny mekanistisk innsikt og potensiell oppkvikkende terapi for TBI. Den kontrollerte kortikale virkningen (CCI) modell av TBI er en åpen-Head modell av mekanisk kontusjon skade på cortex. Virkningen parametrene kan endres for å produsere CCI skader som spenner fra mild til alvorlig6. CCI skader er fokal i stedet for diffuse, som sett med andre lukkede hodet modeller av TBI. CCI kan utføres for å indusere en ensidig skade, slik at kontralateral cortex kan tjene som en intern komparator. Denne protokollen demonstrerer egenskapene til en mild CCI til en del av cortex som omfatter primære somatosensory og motor regioner. Dette kortikale området ble valgt for sitt engasjement i Sensorimotor atferd som mange atferds tester kan oppdage skade-indusert underskudd7. Atferds forbedringer på grunn av terapeutiske intervensjoner for TBI kan oppdages, også.
Et kjennetegn på TBI er utbredt neural dysfunksjon i den skadde regionen. Skadde neurons gjennomgår celle død, og neuronal nettverkstilkobling er forstyrret8,9. TBI forstyrrer rekrutteringen av endogene stamceller, noe som fører til videre nedstrøms atferd underskudd10,11.  Transplantasjon av nevrale stamceller og stilk cellen-avledet celler har blitt utforsket som en mulighet til å gjenopprette funksjon i den skadde hjernen. I tillegg til potensialet for å gjenopprette skadede nevrale kretser, transplanterte celler utøve paracrine effekter som fremmer neuronal overlevelse og funksjonell utvinning fra TBI12. En rekke celletyper har blitt transplantert preklinisk å evaluere deres styrkende potensial i modeller av nevrologiske lidelser13,14,15. Den nylige popularisering av indusert pluripotent stamcelleteknologi16 har muliggjort utviklingen av en rekke menneskelige stilk cellen linjer for eksperimentell bruk. Prekliniske testing med hiPSC-avledede celler er et viktig første skritt for å karakteriserer en gitt cellelinje potensielle terapeutiske effekt mot menneskelige sykdommer. Dette laboratoriet har utviklet protokoller for å skille hiPSCs til neural fenotyper17 i jakten på transplantable celler for å hjelpe utvinning fra traumatisk hjerneskade.
Eksperimenter i denne protokollen bruker en ensidig CCI for å indusere TBI til venstre somatosensory og motor cortex hos voksne mus. En mild CCI skade resulterer i en vedvarende funksjonell underskudd i riktig fire som brukes til å spore virkningene av hiPSC-avledet nevrale celle engraftment på funksjonell utvinning. Fire Sensorimotor testing i denne protokollen ble tilpasset fra metodikken etablert av Bouet og kolleger18 og demonstrerte tidligere av Fleming og kolleger19.  Denne protokollen skisserer en komplett arbeidsflyt for å utføre en eksperimentell hjerneskade, terapeutisk transplantasjon av hiPS celler, og atferds-og histologic analyse av eksperimentelle utfallet tiltak.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:774px;" width="773">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1 ml syringes</td>
			<td style="width:201px;">Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;309659</td>
			<td style="width:212px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1.7 ml flip top test tubes</td>
			<td>Denville</td>
			<td style="width:123px;">C2170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">10 microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">7635-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">25G Precision Glide syringe needles</td>
			<td>Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">70% ethanol</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">acetaminophen oral suspension</td>
			<td>Tylenol (Children&#39;s)</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Dilute to 1 mg/ml in water</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">anesthetic vaporizer</td>
			<td>Vetland</td>
			<td style="width:123px;">521-11-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">animal handling cloth</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Betadine</td>
			<td>Purdue Products</td>
			<td style="width:123px;">NDC-67618-151-32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">compressed oxygen</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">cyclosporine A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">30024-100mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DAB staining kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">D8418-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DMEM</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A14430-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">donkey anti-mouse IgG antibody, HRP conjugated</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:123px;">715-035-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">electrical tape</td>
			<td>3M Corporation</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">fine tweezers</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">glass capillary pipettes, 1 mm OD, 0.58 mm ID</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td style="width:123px;">1B100F-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">High Speed Rotary Micromotor Kit</td>
			<td>Foredom Electric Co.&#160;</td>
			<td style="width:123px;">K.1070 - K.107018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Ideal Micro Drill Burr Set Of 5</td>
			<td>Cell Point Scientific&#160;</td>
			<td style="width:123px;">60-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Impact One Stereotaxic Impactor for CCI&#160;</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td style="width:123px;">39463920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td style="width:123px;">NDC-10019-360-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">lab bench timers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">14-649-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micropipette puller</td>
			<td>MicroData Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:123px;">PMP-102</td>
			<td>Any puller will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope cover slips</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">12-545-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope slide mounting medium</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:212px;">Product of choice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">mirror</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">mouse anti-human nuclear antigen antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td style="width:123px;">MAB1281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Mouse on Mouse blocking kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">BMK-2202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">needle holder hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic ointment</td>
			<td>Falcon Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:123px;">NDC-61314-631-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic box</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic cylinder</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">QSI motorized syringe pump</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Removable needle compression fitting</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">55750-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small rodent stereotaxic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">51925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">StemPro Accutase</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A1110501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">06-669-62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sterile cotton swabs/Kendall Q-tips</td>
			<td>Tyco Healthcare</td>
			<td style="width:123px;">540500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile saline</td>
			<td>Hospira</td>
			<td style="width:123px;">NDC-0409-1966-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Stopwatches (2)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">06-662-56</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Superfrost Plus Gold microscope slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">15-188-48</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sutures - 5.0 silk with curved needle</td>
			<td>Oasis</td>
			<td style="width:123px;">MV-682</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells

Traumatisk hjerneskade (TBI) er en ledende årsak til sykelighet og dødelighet over hele verden. Sykdom patologi på grunn av TBI utvikler seg fra den primære mekaniske fornærmelse til sekundære skader prosesser, inkludert apoptose og betennelser. Animal modellering har vært verdifullt i søket til å løse skade mekanismer og evaluere potensielle nervecellene terapier. Denne protokollen beskriver kontrollerte kortikale Impact (CCI) modell av fokal, åpen hodet TBI. Nærmere bestemt beskrives parametere for å produsere en mild ensidig kortikale skade. Behavioral konsekvensene av CCI er analysert ved hjelp av teip fjerning test av bilaterale Sensorimotor integrering. Når det gjelder eksperimentell terapi for TBI patologi, illustrerer denne protokollen også en prosess for å transplantere kultivert celler inn i hjernen. Neural cellekulturer avledet fra humant indusert Pluripotent stamceller (hiPSCs) ble valgt for sitt potensial til å vise overlegen funksjonell restaurering i menneskelige TBI pasienter. Kronisk overlevelse av hiPSCs i verts musen hjernevevet oppdages ved hjelp av en modifisert DAB immunhistokjemiske prosess.

Craniectomy kirurgi forenkler eksperimentell hjerneskade og terapeutisk celle transplantasjon: den kontrollerte kortikale innvirkning modell av hjerneskade og påfølgende celle transplantasjon terapi krever forsiktig fjerning av overliggende skallen. Craniectomy kan utføres på en rygg flate av skallen for å tillate manipulasjoner til hjernen regionen av interesse. Diagrammet i figur 1 viser en 5 mm diameter craniectomy skjematisk å avdekke primær somatosensory og motor...

Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells

Denne protokollen demonstrerer metoder for en mus modell av åpen-Skull traumatisk hjerneskade og transplantasjon av kultivert menneskelig indusert pluripotent stilk cellen-avledet celler inn i skaden området. Atferds-og histologic tester av resultatene fra disse prosedyrene er også beskrevet i korte trekk.

Kontrollert kortikale Impact modell av mus hjerneskade med terapeutisk transplantasjon av Human indusert pluripotent Stem Cell-avledet nevrale celler

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Disease pathology due to TBI progresses from the primary mechanical ...

Vår protokoll demonstrerer en omfattende preklinisk arbeidsflyt for testing av terapeutisk effekt av menneskeinduserte pluripotente stamceller etter hjerneskade. Denne modellen av traumatisk hjerneskade gir en høy grad av allsidighet og reproduserbarhet ved å kontrollere parametrene til den mekaniske kraften og dermed gi en veldefinert skade. Disse prosedyrene kan brukes til å studere skade- og gjenopprettingsprosesser i andre hjerneregioner, og transplantasjonsmetoden er mottagelig å bruke med mange celletyper.Kranial boring er utfordrende da teknikken krever fingerferdighet for å mestre riktig trykk, hastighet, dybde og glatte bevegelser. Dokumenter alle hendelsene og praksis mye. For å utføre en ensidig kraniektomi, bekreft mangel på respons på tåklemm i den bedøvede musen og fest musen i en stereotoksisk ramme.Påfør antibiotika oftalmisk salve til øynene med en steril bomullspinne og jodbasert løsning på det barberte hodebunnsområdet. Fjern jod med 70% etanol og dekk dyret med en fenestrated kirurgisk drapering. Lag et 1,5 til to centimeter midtlinjet snitt i hodebunnen og bruk sterile bomullspinner for å rengjøre såret og for å fjerne fascia venstre for midtlinjen på bregma.Bruk en impactor probe for å identifisere craniectomy området og sette x er lik null, y tilsvarer null stereotoksisk referansepunkt til bregma. Juster sonden sidealt til to millimeter igjen av midtlinjen. Bruk en finspiss kirurgisk sikker markør for å markere en fem millimeter diameter sirkel rundt det presumptive slagområdet.Hev og roter slagmaskinen ut av posisjon og fullfør fem millimetersirkelen. Returner kort slagmaskinen på plass for å bekrefte nøyaktigheten av fem millimetersirkelen. Hev og roter deretter slagmaskinen ut av posisjon og bruk et høyhastighets roterende mikromotorsetthåndverktøy utstyrt med en rund spiss 0,6 eller 0,8 millimeter burr borkrone for å lage et åpent hull i skallen ved 70 til 80% maksimal hastighet.Påfør lett trykk på skallen mens du borer langs den fem millimeteromkretsomrisset innenfor denne grensen og bruk tang til å løfte den resulterende beinklaffen. Boring gjennom suturledninger kan gi ekstra problemer etter hvert som beinet avbrytes og krever ekstra trykk. Blodårene kan være i nær tilknytning og derfor blødningshendelser er sannsynlig.For å indusere en mild kontrollert kortikal slagskade, rengjør støtsventilatorproben med en steril alkoholpreppute og flytt støtorsonden tilbake på plass over den eksponerte cortexen. Senk sonden til den berører dura materoverflaten og merk denne posisjonen som z er lik null. Trekk stempelet og flytt til z tilsvarer minus en millimeter og slipper ut stempelet for å påvirke cortex.Løft umiddelbart stempelet og flytt armen ut av posisjon og vann cortexen med et sjenerøst volum saltvann og bruk enkle avbrutte masker og 5-0 silkesutur for å lukke hodebunns snittet. Deretter levere 10 milligram per kilo Ciklosporin A ved subkutan injeksjon i scruff og plassere musen i en ren forvarmet postoperativ bur med overvåking til full gjenoppretting. Omtrent 24 timer etter kraniektomien, plasser musen tilbake i stereotoksisk rammen.Dekk musen med fenestrated kirurgisk drap. Lavage snittet området med steril saltvann for å rense området og for å løsne suturer. Bruk en 70% etanol gjennomvåt bomullspinne for å sterilisere snittstedet forsiktig og bruke fine pinsett og oftalmisk saks for å fjerne suturene.Deretter vanne operasjonen og kraniektomi stedet med rikelig steril saltvann. I en cellekultur biosikkerhet hette, forsiktig virvle eller tappe røret av celler for å sikre en homogen celle suspensjon. Bruk en mikropipette til å laste ca. 7,5 mikroliter celler i en Hamilton-sprøyte gjennom stempeletden.Hold sprøyten i en 120 graders vinkel med stempeletden vendt ned, sett stempelet forsiktig så du ikke introduserer en luftboble mellom fjærings- og stempelspissen. Fest pakningsenheten til pipettenålen og fest kanylen til sprøyten. Skyv stempelet for å flytte cellefjæringen inn i pipettenålen og fest sprøyten til den stereotoksiske sprøytepumpen.Før stempelet for å forsikre deg om at sprøytepumpeenheten fungerer som den skal, og flytt kanylen inn i koordinatene for injeksjon. Juster nålespissen til bregma og sett x- og y-koordinatene til null. Flytt nålespissen over kraniektomien til to millimeter lateral og minus en millimeter bakre til bregma og berør nålespissen til dura materoverflaten.Hev nålen litt og lag deretter et lite snitt i duramateren på stedet der nålen kom i kontakt. Sett stereotoksisk koordinat til z er lik null og skyv stempelet for å bekrefte at cellefjæringen flyter tilstrekkelig før du introduserer nålen i hjernen. Introdder nålen inn i hjernen til en dybde av z tilsvarer minus 1,4 millimeter for å plassere transplantatet på den grå materie / hvit materie grensen av den dype cortex.Start sprøytepumpen for å sette inn cellefjæringen over en 15-minutters periode. Bruk et langt mikroskop med lang arbeidsavstand for å overvåke utstrømningen av cellesuspensjon vanning av operasjonsstedet med steril saltvann under injeksjonen for å opprettholde vevshydrering. Når alle cellene er levert, sakte trekke transplantasjon nålen og vanne kirurgi området med ekstra saltvann før du lukker snittet med nye suturer.Lever deretter postoperativ behandling som demonstrert. For en fjerningstest for klebebånd, bruk først en liten barberkniv til å kutte gule og røde biter av elektrisk tape i tre av fem millimeter strimler på en glatt glassoverflate. Ta musene inn i atferdstestrommet i minst 30 minutter før testingen, og bruk en håndteringsklut til å holde musen ved nakken og ryggen slik at musen holder forepaws vekk fra kropp og hode.Bruk pinsett til å plassere en klebende stripe på plantaroverflaten på hver forsag og bruk delikat og konsekvent fingertrykk for å feste stripene til potene. Plasser musen raskt i en plastsylinder og start to stoppeklokker når musen har alle fire potene på plasttestboksen. Bruk deretter de to stoppeklokkene til å registrere latencies for venstre pote varsel, venstre pote fjerning, høyre pote varsel og høyre pote fjerning.I dette piloteksperimentet ble forbensfunksjonen sammenlignet i kraniektomi alene, kontrollert kortikal slagskade og naive mus. Mus som gjennomgikk kirurgi viste forbigående økte latencies for å legge merke til klebende stimuli i en til tre dager umiddelbart etter operasjonen og forbigående postoperative underskudd i klebende fjerning fra ipsilateral forepaw. Mus som gjennomgikk kontrollert kortikal påvirkning, viste imidlertid betydelige underskudd i motorisk ytelse i foreaw kontralaterale til skaden sammenlignet med naive mus ut av postoperativ dag 28.Immunstaining av mus hjerneseksjoner for humant kjernefysisk antigen avslører at menneskelige celle grafts kan tydelig skilles fra vertvev i SHAM skade og kontrollert kortikale innvirkning hjerner. Du må observere standard laboratoriesikkerhetsprosedyrer ved håndtering av kultiverte menneskelige celler og ved håndtering av sprøytenåler som kommer i kontakt med gnagere eller immunsuppressive legemidler. Hjernevevsseksjoner kan analyseres for uttrykk for nevroinflammatoriske markører, da det er verdifullt å vite hvordan transplantatet påvirker vertens vevsskaderespons og omvendt.Vi ble overrasket over å finne subtile kjønnsforskjeller i post-skade atferd resultater. Vi undersøker nå om sex spiller en rolle i nevroimmun respons på hjerneskade. Stødige hender, tålmodighet og trening er avgjørende for å utvikle en god kraniektomiteknikk.Sivile skader fra en feil kraniektomi kan kompromittere området du vil målrette mot for celletransplantasjon.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culturing Human Pluripotent and Neural Stem Cells in an Enclosed Cell Culture System for Basic and Preclinical Research

Dyrking Menneskelig Pluripotent og Neural stamceller i et lukket cellekultur System for Basic og Preklinisk Forskning

This paper describes how to use a custom manufactured, commercially available enclosed cell culture system for basic and preclinical research. Biosafety ...

Rapid Neuronal Differentiation of Induced Pluripotent Stem Cells for Measuring Network Activity on Micro-electrode Arrays

Rapid neuronal Differensiering av Induced Pluripotent stamceller for måling Network Aktivitet på Micro-elektrode Arrays

Neurons derived from human induced Pluripotent Stem Cells (hiPSCs) provide a promising new tool for studying neurological disorders. In the past decade, ...

Pluripotent Stem Cell Derived Cardiac Cells for Myocardial Repair

Pluripotente stamcelle Avledet hjerteceller for Hjerteinfarkt Repair

Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) must be fully differentiated into specific cell types before administration, but conventional protocols for ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

Differensiering av kondrocytter fra perifert blod-avledede humane inducerte pluripotente stamceller

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

Generation of Standardized and Reproducible Forebrain-type Cerebral Organoids from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Generasjon av standardiserte og reproduserbar Forebrain-type Cerebral Organoids fra menneske indusert Pluripotent stamceller

The human cortex is highly expanded and exhibits a complex structure with specific functional areas, providing higher brain function, such as cognition. ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocyte-like Cells for Drug Discovery

Bruker Human indusert Pluripotent Stamcelle-avledet Hepatocyte-lignende celler for medisiner

The ability to differentiate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) into hepatocyte-like cells (HLCs) provides new opportunities to study inborn ...

A Familial Hypercholesterolemia Human Liver Chimeric Mouse Model Using Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocytes

En familiær hyperkolesterolemi menneskelige leveren Chimeric musemodell med indusert Pluripotent Stamcelle-avledet hepatocytter

Familial hypercholesterolemia (FH) is mostly caused by low-density lipoprotein receptor (LDLR) mutations and results in an increased risk of early-onset ...

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells (hiPSC-ECs)

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells hiPSC-ECs

Microfluidic analysen for vurdering av leukocytter vedheft til menneskelig indusert Pluripotent Stamcelle-avledet endotelceller (hiPSC-ECs)

Endothelial cells (ECs) are essential for the regulation of inflammatory responses by either limiting or facilitating leukocyte recruitment into affected ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

Generasjon 3D huden Organoid fra ledningen blod-avledet indusert Pluripotent stamceller

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

I Vitro generasjon av Somite derivater fra menneske indusert stamceller Pluripotent

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...