Name: controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells
Uploaded: 2019-07-10T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

Bu çalışma, nörobilim ve rejeneratif tıp merkezi 'nden bir hibe tarafından destekleniyordu (CNRM, Grant numarası G170244014). Yapışkan kaldırma pilot çalışmalarında Mahima Dewan ve Clara Selbrede 'nin yardımını takdir ediyoruz. Kryslaine Radomski ön beyin hasarı ve hücre transplantasyonu ameliyatı gerçekleştirdi. Amanda Fu ve Laura Tucker USU CNRM preklinik çalışmalar çekirdek laboratuar sırasıyla hayvan ameliyatları ve davranış testi, değerli tavsiyeler sağladı.

Bu protokolde açıklanan tüm deneyler Uniformed Services Üniversitesi hayvan bakımı ve kullanım Komitesi tarafından incelendi ve onaylanmıştır.
1. Kraniyektomi ve kontrollü kortikal etki
<ol><li>Kontrollü kortikal darbe cihazının ve cerrahi malzemelerin hazırlanması.<ol>
<li>Yara sulama için 0,5 mL steril tuz ile 1 mL kayma ucu şırınga yükleyin. Sulama kontrol etmek için şırıngaya 25 G iğne takın.</li>
		<li>DMSO 'da 1 mg/mL son konsantrasyonuna kadar bir CsA seyre...

<ol>
	<li>Maas, A. I. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury:+integrated+approaches+to+improve+prevention,+clinical+care,+and+research.">Traumatic brain injury: integrated approaches to improve prevention, clinical care, and research.</a> The Lancet Neurology. 16, 987-1048 (2017).</li><li>Murray, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disability-adjusted+life+years+(DALYs)+for+291+diseases+and+injuries+in+21+regions,+1990-2010:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study+2010.">Disability-adjusted life years (DALYs) for 291 diseases and injuries in 21 regions, 1990-2010: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2010.</a> The Lancet. 380, 2197-2223 (2012).</li><li>Taylor, C. A., Bell, J. M., Breiding, M. J., Xu, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury-Related+Emergency+Department+Visits,+Hospitalizations,+and+Deaths+-+United+States,+2007+and+2013.">Traumatic Brain Injury-Related Emergency Department Visits, Hospitalizations, and Deaths - United States, 2007 and 2013.</a> Morbidity and mortality weekly report: Surveillance summaries. 66, 1-16 (2017).</li><li>Fehily, B., Fitzgerald, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repeated+Mild+Traumatic+Brain+Injury:+Potential+Mechanisms+of+Damage.">Repeated Mild Traumatic Brain Injury: Potential Mechanisms of Damage.</a> Cell Transplantation. 26, 1131-1155 (2017).</li><li>Kulbe, J. R., Hall, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+traumatic+encephalopathy-integration+of+canonical+traumatic+brain+injury+secondary+injury+mechanisms+with+tau+pathology.">Chronic traumatic encephalopathy-integration of canonical traumatic brain injury secondary injury mechanisms with tau pathology.</a> Progress in Neurobiology. 158, 15-44 (2017).</li><li>Romine, J., Gao, X., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+cortical+impact+model+for+traumatic+brain+injury.">Controlled cortical impact model for traumatic brain injury.</a> Journal of Visualized Experiments. , e51781 (2014).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Mishra, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+resting+functional+connectivity+after+traumatic+brain+injury+in+the+rat.">Decreased resting functional connectivity after traumatic brain injury in the rat.</a> PloS ONE. 9, 95280 (2014).</li><li>Sours, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Default+mode+network+interference+in+mild+traumatic+brain+injury+-+a+pilot+resting+state+study.">Default mode network interference in mild traumatic brain injury - a pilot resting state study.</a> Brain Research. 1537, 201-215 (2013).</li><li>Radomski, K. L., Zhou, Q., Yi, K. J., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortical+contusion+injury+disrupts+olfactory+bulb+neurogenesis+in+adult+mice.">Cortical contusion injury disrupts olfactory bulb neurogenesis in adult mice.</a> BMC Neuroscience. 14, 142 (2013).</li><li>Wang, X., Gao, X., Michalski, S., Zhao, S., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+Brain+Injury+Severity+Affects+Neurogenesis+in+Adult+Mouse+Hippocampus.">Traumatic Brain Injury Severity Affects Neurogenesis in Adult Mouse Hippocampus.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 721-733 (2016).</li><li>Aertker, B. M., Bedi, S., Cox, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategies+for+CNS+repair+following+TBI.">Strategies for CNS repair following TBI.</a> Experimental Neurology. 275 (3), 411-426 (2016).</li><li>Kikuchi, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+iPS+cell-derived+dopaminergic+neurons+function+in+a+primate+Parkinson's+disease+model.">Human iPS cell-derived dopaminergic neurons function in a primate Parkinson's disease model.</a> Nature. 548, 592-596 (2017).</li><li>Kondo, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Focal+transplantation+of+human+iPSC-derived+glial-rich+neural+progenitors+improves+lifespan+of+ALS+mice.">Focal transplantation of human iPSC-derived glial-rich neural progenitors improves lifespan of ALS mice.</a> Stem Cell Reports. 3, 242-249 (2014).</li><li>Tong, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitory+interneuron+progenitor+transplantation+restores+normal+learning+and+memory+in+ApoE4+knock-in+mice+without+or+with+Abeta+accumulation.">Inhibitory interneuron progenitor transplantation restores normal learning and memory in ApoE4 knock-in mice without or with Abeta accumulation.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 34, 9506-9515 (2014).</li><li>Takahashi, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+pluripotent+stem+cells+from+adult+human+fibroblasts+by+defined+factors.">Induction of pluripotent stem cells from adult human fibroblasts by defined factors.</a> Cell. 131, 861-872 (2007).</li><li>Lischka, F. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neonatal+mouse+cortical+but+not+isogenic+human+astrocyte+feeder+layers+enhance+the+functional+maturation+of+induced+pluripotent+stem+cell-derived+neurons+in+culture.">Neonatal mouse cortical but not isogenic human astrocyte feeder layers enhance the functional maturation of induced pluripotent stem cell-derived neurons in culture.</a> Glia. 66, 725-748 (2018).</li><li>Bouet, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+adhesive+removal+test:+a+sensitive+method+to+assess+sensorimotor+deficits+in+mice.">The adhesive removal test: a sensitive method to assess sensorimotor deficits in mice.</a> Nature Protocols. 4, 1560-1564 (2009).</li><li>Fleming, S. M., Ekhator, O. R., Ghisays, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+sensorimotor+function+in+mouse+models+of+Parkinson's+disease.">Assessment of sensorimotor function in mouse models of Parkinson's disease.</a> Journal of Visualized Experiments. , e50303 (2013).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in stereotaxic coordinates. Compact 2nd edn. , (2004).</li><li>Jacobs, G. H., Williams, G. A., Cahill, H., Nathans, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Emergence+of+novel+color+vision+in+mice+engineered+to+express+a+human+cone+photopigment.">Emergence of novel color vision in mice engineered to express a human cone photopigment.</a> Science. 315, 1723-1725 (2007).</li><li>Lundell, T. G., Zhou, Q., Doughty, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neurogenin1+expression+in+cell+lineages+of+the+cerebellar+cortex+in+embryonic+and+postnatal+mice.">Neurogenin1 expression in cell lineages of the cerebellar cortex in embryonic and postnatal mice.</a> Developmental Dynamics: An Official Publication of the American Association of Anatomists. 238, 3310-3325 (2009).</li><li>Kempermann, G., Kuhn, H. G., Gage, F. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=More+hippocampal+neurons+in+adult+mice+living+in+an+enriched+environment.">More hippocampal neurons in adult mice living in an enriched environment.</a> Nature. 386, 493-495 (1997).</li><li>Piltti, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplantation+dose+alters+the+dynamics+of+human+neural+stem+cell+engraftment,+proliferation+and+migration+after+spinal+cord+injury.">Transplantation dose alters the dynamics of human neural stem cell engraftment, proliferation and migration after spinal cord injury.</a> Stem Cell Research. 15, 341-353 (2015).</li><li>Yu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Severity+of+controlled+cortical+impact+traumatic+brain+injury+in+rats+and+mice+dictates+degree+of+behavioral+deficits.">Severity of controlled cortical impact traumatic brain injury in rats and mice dictates degree of behavioral deficits.</a> Brain Research. 1287, 157-163 (2009).</li><li>Kabadi, S. V., Hilton, G. D., Stoica, B. A., Zapple, D. N., Faden, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fluid-percussion-induced+traumatic+brain+injury+model+in+rats.">Fluid-percussion-induced traumatic brain injury model in rats.</a> Nature Protocols. 5, 1552-1563 (2010).</li><li>Namjoshi, D. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Defining+the+biomechanical+and+biological+threshold+of+murine+mild+traumatic+brain+injury+using+CHIMERA+(Closed+Head+Impact+Model+of+Engineered+Rotational+Acceleration).">Defining the biomechanical and biological threshold of murine mild traumatic brain injury using CHIMERA (Closed Head Impact Model of Engineered Rotational Acceleration).</a> Experimental Neurology. 292, 80-91 (2017).</li><li>Shetty, A. K., Mishra, V., Kodali, M., Hattiangady, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Blood+brain+barrier+dysfunction+and+delayed+neurological+deficits+in+mild+traumatic+brain+injury+induced+by+blast+shock+waves.">Blood brain barrier dysfunction and delayed neurological deficits in mild traumatic brain injury induced by blast shock waves.</a> Frontiers in Cellular Neuroscience. 8, 232 (2014).</li><li>Petraglia, A. L., Dashnaw, M. L., Turner, R. C., Bailes, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+of+mild+traumatic+brain+injury:+translation+of+physiological+and+anatomic+injury.">Models of mild traumatic brain injury: translation of physiological and anatomic injury.</a> Neurosurgery. 75, 34-49 (2014).</li><li>Siebold, L., Obenaus, A., Goyal, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Criteria+to+define+mild,+moderate,+and+severe+traumatic+brain+injury+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model.">Criteria to define mild, moderate, and severe traumatic brain injury in the mouse controlled cortical impact model.</a> Experimental Neurology. 310, 48-57 (2018).</li><li>Tucker, L. B., Fu, A. H., McCabe, J. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Performance+of+Male+and+Female+C57BL/6J+Mice+on+Motor+and+Cognitive+Tasks+Commonly+Used+in+Pre-Clinical+Traumatic+Brain+Injury+Research.">Performance of Male and Female C57BL/6J Mice on Motor and Cognitive Tasks Commonly Used in Pre-Clinical Traumatic Brain Injury Research.</a> Journal of Neurotrauma. 33, 880-894 (2016).</li><li>Rose, S. C., Fischer, A. N., Heyer, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+long+is+too+long?+The+lack+of+consensus+regarding+the+post-concussion+syndrome+diagnosis.">How long is too long? The lack of consensus regarding the post-concussion syndrome diagnosis.</a> Brain Injury. 29, 798-803 (2015).</li><li>Hurst, J. L., West, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taming+anxiety+in+laboratory+mice.">Taming anxiety in laboratory mice.</a> Nature Methods. 7, 825-826 (2010).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chronic+behavioral+testing+after+focal+ischemia+in+the+mouse:+functional+recovery+and+the+effects+of+gender.">Chronic behavioral testing after focal ischemia in the mouse: functional recovery and the effects of gender.</a> Experimental Neurology. 187, 94-104 (2004).</li><li>Andersen, A. B., Finger, S., Andersen, C. S., Hoagland, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sensorimotor+cortical+lesion+effects+and+treatment+with+nimodipine.">Sensorimotor cortical lesion effects and treatment with nimodipine.</a> Physiology &amp; Behavior. 47, 1045-1052 (1990).</li><li>Al-Ali, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+mTOR+Substrate+S6+Kinase+1+(S6K1)+Is+a+Negative+Regulator+of+Axon+Regeneration+and+a+Potential+Drug+Target+for+Central+Nervous+System+Injury.">The mTOR Substrate S6 Kinase 1 (S6K1) Is a Negative Regulator of Axon Regeneration and a Potential Drug Target for Central Nervous System Injury.</a> The Journal of Neuroscience: The Official Journal of the Society for Neuroscience. 37, 7079-7095 (2017).</li><li>Pleasant, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rate+of+neurodegeneration+in+the+mouse+controlled+cortical+impact+model+is+influenced+by+impactor+tip+shape:+implications+for+mechanistic+and+therapeutic+studies.">Rate of neurodegeneration in the mouse controlled cortical impact model is influenced by impactor tip shape: implications for mechanistic and therapeutic studies.</a> Journal of Neurotrauma. 28, 2245-2262 (2011).</li></ol>

Deneysel rejeneratif tedaviyi test etmek için bir model sistemi olarak hafif CCı CCı modeli korteks mekanik yaralanmadan sonra doku disfonksiyon mekanizmaları araştırmak için değerli bir araçtır. Yaralanma parametrelerin ayarlanabilirlik bu modelin çekici bir özelliktir. Etkisi Z derinliği değiştirme, hız, ya da bekleme süresi artırabilir veya araştırmacı tarafından istenen yaralanma şiddeti azaltabilir10,25. Düzgün ge...

Travmatik beyin hasarı (TBı) ya dolaylı mekanik kuvvetler (rotasyonel hızlanma/yavaşlama veya Contra-darbe) kafasına darbeler veya nesnelerin veya patlama dalgaları doğrudan hasar nedeniyle beyin elde edilen yaralanma için genel bir terimdir. TBI 'ın dünya çapında ölümlerin yaklaşık% 9 ' unda olduğu tahmin edilmiştir ve yılda1,2' de tahmini 50.000.000 olguda görülür. Hastalık kontrol ve önleme merkezlerinden bir 2017 Raporu 2013 yılında, ABD3yılında tbı nedeniyle 2.800.000 hastane ziyaretleri ve ölümlerin toplam olduğunu tahmin etti. Pek çok hafif TBIs her yıl bildirilmemiş olarak gider. Ciddi TBı, yaşam boyu biliş bozukluğu, motor fonksiyonu ve genel hayat kalitesine yol açabilir. Hafif TBI sonuçları, özellikle tekrarlanan spor ile ilgili tbi, sadece son zamanlarda onların sinsi sağlık etkileri için takdir edilmiştir4,5.
Preklinik modelleme, TBı için yeni mekanik Öngörüler ve potansiyel restoratif terapi geliştirmenin hayati bir bileşenidir. TBı kontrollü kortikal etkisi (CCı) modeli korteks mekanik çürüme yaralanması açık kafalı bir modeldir. Darbe parametreleri, hafif ve şiddetli6arasında bulunan CCI yaralanmaları üretmek için değiştirilebilir. CCı yaralanmaları, TBı 'ın diğer kapalı baş modelleri ile görüldüğü gibi, diffün yerine odak noktasıdır. CCI tek taraflı yaralanmaya neden olabilir, böyle kontralateral korteks bir iç karşılaştırıcı olarak hizmet verebilir. Bu protokol, primer somatoduyusal ve motor bölgelerini kapsayan korteks bir kısmına hafif bir CCı 'nın özelliklerini gösterir. Bu kortikal alan, çeşitli davranış testlerinin yaralanma kaynaklı açıkları7' sini algılayabilen sensorimotor davranışlarına katılımı için seçilmiştir. TBı için terapötik girişimler nedeniyle davranışsal iyileştirmeler de tespit edilebilir.
TBı bir damgasını yaralı bölgede yaygın nöral disfonksiyon olduğunu. Yaralı nöronlar hücre ölümü geçmesi ve nöronal ağ bağlantısı8,9kesintiye uğratıldı. TBı endojen kök hücrelerinin alımı bozar, bu da daha fazla aşağı davranış açıkları10,11yol açar.  Sinir kök hücrelerinin transplantasyonu ve kök hücre türevi hücreler, yaralı beynin fonksiyonunu geri almak için bir olasılık olarak incelenmiştir. Hasarlı nöral devrelerin geri yüklenmesi potansiyeline ek olarak, nakledilen hücreler TBı12' den nöronal hayatta kalma ve fonksiyonel iyileşmeyi teşvik eden paracrin efektlerini ekirler. Nöroloji bozuklukları modellerinde restoratif potansiyelini değerlendirmek için klinik olarak çeşitli hücre çeşitleri13,14,15. İndüklenen pluripotent kök hücre teknolojisinin son popülarizasyonu16 deneysel kullanım için çok sayıda insan kök hücresi hatları gelişimini kolaylaştırdı. HiPSC türevi hücrelerle preklinik testler, belirli bir hücre hattının insan hastalıklarına karşı potansiyel terapötik etkinliğini karakterize etmek için önemli bir ilk adımdır. Bu laboratuar, travmatik beyin yaralanmalarından kurtarmaya yardımcı olmak için nakledilen hücrelerin peşinde17 ' lik nöro fenotipleri için hippleleri ayırt etmek için protokoller geliştirmiştir.
Bu protokoldeki deneyler, TBı 'yi yetişkin farelerin sol somatoduyusal ve motor kortörüne teşvik etmek için tek taraflı bir CCı kullanır. Hafif bir CCı hasarı, hiPSC türevi nöral hücre engraftinin fonksiyonel iyileşme üzerindeki etkilerini izlemek için kullanılan sağ forepaw 'da sürekli işlevsel bir açığın sonucu olarak görülmektedir. Bu protokolde forepaw sensorimotor testi Bouet ve meslektaşları18 tarafından kurulan metodolojisi uyarlanmıştır ve Fleming ve meslektaşları tarafından daha önce göstermiştir19.  Bu protokol deneysel beyin yaralanması, kalça hücrelerinin terapötik nakli ve deneysel sonuç önlemlerinin davranış ve histolojik analizini gerçekleştirmek için tam bir iş akışını özetliyor.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:774px;" width="773">
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1 ml syringes</td>
			<td style="width:201px;">Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;309659</td>
			<td style="width:212px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">1.7 ml flip top test tubes</td>
			<td>Denville</td>
			<td style="width:123px;">C2170</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">10 microliter syringe</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">7635-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">25G Precision Glide syringe needles</td>
			<td>Becton Dickinson (BD)</td>
			<td style="width:123px;">&#160;305122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">70% ethanol</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">acetaminophen oral suspension</td>
			<td>Tylenol (Children&#39;s)</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Dilute to 1 mg/ml in water</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">anesthetic vaporizer</td>
			<td>Vetland</td>
			<td style="width:123px;">521-11-22</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">animal handling cloth</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Betadine</td>
			<td>Purdue Products</td>
			<td style="width:123px;">NDC-67618-151-32</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">compressed oxygen</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Product of choice; varies by region</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">cyclosporine A</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">30024-100mg</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DAB staining kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">SK-4100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">dimethyl sulfoxide (DMSO)</td>
			<td>Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:123px;">D8418-500ml</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">DMEM</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A14430-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">donkey anti-mouse IgG antibody, HRP conjugated</td>
			<td>Jackson ImmunoResearch</td>
			<td style="width:123px;">715-035-151</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">electrical tape</td>
			<td>3M Corporation</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">fine tweezers</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">11254-20</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91106-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">glass capillary pipettes, 1 mm OD, 0.58 mm ID</td>
			<td>World Precision Instruments</td>
			<td style="width:123px;">1B100F-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">High Speed Rotary Micromotor Kit</td>
			<td>Foredom Electric Co.&#160;</td>
			<td style="width:123px;">K.1070 - K.107018</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Ideal Micro Drill Burr Set Of 5</td>
			<td>Cell Point Scientific&#160;</td>
			<td style="width:123px;">60-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Impact One Stereotaxic Impactor for CCI&#160;</td>
			<td>Leica Biosystems</td>
			<td style="width:123px;">39463920</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">isoflurane</td>
			<td>Baxter</td>
			<td style="width:123px;">NDC-10019-360-60</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">lab bench timers</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">14-649-17</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Micropipette puller</td>
			<td>MicroData Instruments, Inc.</td>
			<td style="width:123px;">PMP-102</td>
			<td>Any puller will suffice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope cover slips</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">12-545-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Microscope slide mounting medium</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:212px;">Product of choice</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">mirror</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">mouse anti-human nuclear antigen antibody</td>
			<td>Millipore</td>
			<td style="width:123px;">MAB1281</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Mouse on Mouse blocking kit</td>
			<td>Vector Laboratories</td>
			<td style="width:123px;">BMK-2202</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">needle holder hemostat</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic ointment</td>
			<td>Falcon Pharmaceuticals</td>
			<td style="width:123px;">NDC-61314-631-36</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">ophthalmic spring scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">15018-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic box</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">plastic cylinder</td>
			<td></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td>Purchase from department store</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">QSI motorized syringe pump</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Removable needle compression fitting</td>
			<td>Hamilton</td>
			<td style="width:123px;">55750-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small rodent stereotaxic frame</td>
			<td>Stoelting</td>
			<td style="width:123px;">51925</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">small scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">14060-09</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">StemPro Accutase</td>
			<td>Invitrogen (ThermoFisher)</td>
			<td style="width:123px;">A1110501</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile alcohol prep pads</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">06-669-62</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sterile cotton swabs/Kendall Q-tips</td>
			<td>Tyco Healthcare</td>
			<td style="width:123px;">540500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Sterile saline</td>
			<td>Hospira</td>
			<td style="width:123px;">NDC-0409-1966-07</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Stopwatches (2)</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td style="width:123px;">06-662-56</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">Superfrost Plus Gold microscope slides</td>
			<td>Fisherbrand</td>
			<td style="width:123px;">15-188-48</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:238px;">sutures - 5.0 silk with curved needle</td>
			<td>Oasis</td>
			<td style="width:123px;">MV-682</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

controlled cortical impact model of mouse brain injury with therapeutic transplantation of human induced pluripotent stem cell-derived neural cells

Travmatik beyin hasarı (TBı) dünya çapında morbidite ve mortalitenin önde gelen nedenidir. TBı 'dan kaynaklanan hastalık patolojileri, birincil mekanik hakaret ile apoptozis ve inflamasyon da dahil olmak üzere ikincil yaralanma süreçlerine ilerler. Hayvan modelleme yaralanma mekanizmaları çözmek ve potansiyel nörokoruyucu tedaviler değerlendirmek için arama değerli olmuştur. Bu protokol, odak, açık kafa TBı kontrollü kortikal etkisi (CCı) modeli açıklanmaktadır. Özellikle, hafif tek taraflı kortikal yaralanma üreten parametreler açıklanmıştır. CCı 'nın davranışsal sonuçları, bilateral sensorimotor entegrasyonunun yapışkan bant kaldırma testi kullanılarak analiz edilir. TBı patolojisinde deneysel tedavi ile ilgili olarak bu protokol aynı zamanda kültürlü hücrelerin beyne nakli için bir süreç göstermektedir. İnsan İndüksiyonlu pluripotent kök hücrelerinden (hiPSCs) elde edilen nöral hücre kültürlerinin insan TBı hastalarında üstün fonksiyonel restorasyon gösterilmesi potansiyeli seçilmiştir. Ev sahibi fare beyin dokusunda Hiponinin kronik hayatta kalması, değiştirilmiş DAB immünhistokimyasal süreç kullanılarak algılanır.

Kraniyektomi cerrahisi deneysel beyin yaralanması ve terapötik hücre nakli kolaylaştırır: beyin yaralanması ve sonraki hücre transplantasyonu tedavisi kontrollü kortikal darbe modeli üst kafatası dikkatli kaldırılması gerekir. Kraniyektomi, kafatasının herhangi bir dorsal yüzeyinde, manipülasyonlara ilginin beyin bölgesine izin vermek için gerçekleştirilebilir. Şekil 1 ' deki diyagram, primer somatoduyusal ve motor korozları ortaya çıkarmak için 5 ...

Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells at JoVE.co

Controlled Cortical Impact Model of Mouse Brain Injury with Therapeutic Transplantation of Human Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Neural Cells

Bu protokol, Açık kafatası travmatik beyin hasarı ve kültür insan kaynaklı pluripotent kök hücre türeyen hücrelerin transplantasyonu için bir fare modeli için metodolojileri yaralanma sitesine gösterir. Bu prosedürlerden gelen sonuçların davranışsal ve histolojik testleri de kısaca açıklanmıştır.

Insan kaynaklı pluripotent kök hücre türetilen nöral hücrelerin terapötik transplantasyonu ile fare beyin yaralanması kontrollü Kortiik darbe modeli

Traumatic brain injury (TBI) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Disease pathology due to TBI progresses from the primary mechanical ...

Protokolümüz, beyin hasarı sonrası insan kaynaklı pluripotent kök hücrelerin terapötik etkinliğini test etmek için kapsamlı bir klinik öncesi iş akışı göstermektedir. Travmatik beyin hasarı Bu model sıkı mekanik kuvvet parametrelerini kontrol ederek ve bu nedenle iyi tanımlanmış bir yaralanma sağlayarak çok yönlülük ve tekrarlanabilirlik yüksek derecede sağlar. Bu işlemler diğer beyin bölgelerindeki yaralanma ve iyileşme süreçlerinin incelenmesinde kullanılabilir ve transplantasyon yöntemi birçok hücre tipinde kullanılabilir.Kranial delme tekniği uygun basınç, hız, derinlik ve düzgün hareketler ana el becerisi gerektirir gibi zordur. Tüm olayları belgele ve kapsamlı bir şekilde pratik yapın. Tek taraflı kraniektomi yapmak için, anestezili faredeki parmak kıskacına yanıt eksikliğini onaylayın ve fareyi stereotaksik bir çerçevede sabitlayın.Steril pamuk lu bez ve iyot bazlı solüsyon ile gözlere antibiyotik oftalmik merhem uygulayın. % 70 etanol ile iyot çıkarın ve bir fenestrated cerrahi perde ile hayvan kapağı. Kafa derisi üzerinde 1,5-2 santimetre lik bir orta hat kesisi yapın ve yarayı temizlemek ve bregma'da orta hattan sol fasyayı temizlemek için steril pamuklu bezler kullanın.Kraniektomi bölgesini tanımlamak için bir darbeci probu kullanın ve x'i sıfıra, y'yi bregma'ya sıfır stereotaksik referans noktasına eşit olarak ayarlayın. Sondayı orta hattan iki milimetre sola göre yanal olarak ayarlayın. Varsayımsal darbe alanının etrafında beş milimetre çapında bir daire dönüm noktası için ince uçlu cerrahi olarak güvenli bir belirteç kullanın.Darbeciyi kaldırın ve döndürün ve beş milimetrelik daireyi tamamlayın. Beş milimetrelik dairenin doğruluğunu doğrulamak için darbeciyi kısa bir süre pozisyona döndürün. Daha sonra darbeciyi kaldırın ve pozisyon dışına döndürün ve yüksek hızlı döner mikro motor kiti el aleti kullanın yuvarlak ucu 0.6 veya 0.8 milimetre çapak matkap ucu ile donatılmış bir yüksek hızlı döner mikro motor kiti el aleti kullanmak kafatasıaçık bir delik yapmak için 70-80%maksimum hızda.Bu sınır içinde beş milimetrelik çevresel anahat boyunca sondaj yaparken kafatasına hafif basınç uygulayın ve ortaya çıkan kemik flebi kaldırmak için forseps kullanın. Dikiş hatları ile delme kemik kesilir ve ek basınç gerektirir gibi ek zorluk ortaya çıkabilir. Kan damarları yakın ilişki içinde olabilir ve bu nedenle kanama olayları muhtemeldir.Hafif kontrollü kortikal darbe yaralanmasına neden olmak için, darbeci sondayı steril bir alkol hazırlık yastığıyla temizleyin ve darbeci sondayı maruz kalan korteksin üzerinde tekrar konuma getirin. Sondayı dura mater yüzeyine dokunana kadar indirin ve bu konumu z sıfıra eşit olarak işaretleyin. Pistonu geri çekin ve z'ye hareket edin eksi bir milimetreye eşit ve korteksi etkilemek için pistonu boşaltın.Hemen piston yükseltmek ve pozisyon kol hareket ve tuzlu cömert bir hacim ile korteks sulamak ve kafa derisi kesi kapatmak için basit kesme dikiş ve 5-0 ipek sütür kullanın. Sonra scruff içine deri altı enjeksiyon ile Siklosporin A kilogram başına 10 miligram teslim ve tam iyileşme kadar izleme ile temiz bir önceden ısıtılmış post-operatif kafesiçinde fare yerleştirin. Kraniektomiden yaklaşık 24 saat sonra fareyi stereotaksik çerçeveye geri yerleştirin.Fareyi feneste cerrahi perde ile kapatın. Bölgeyi temizlemek ve dikişleri gevşetmek için kesi bölgesini steril salin ile lavaj. Kesi bölgesini nazikçe sterilize etmek için %70 etanollü pamuk lu bez kullanın ve dikişleri çıkarmak için ince cımbız ve oftalmik makas kullanın.Sonra bol steril salin ile cerrahi ve kraniektomi sitesi sulama. Bir hücre kültürü biyogüvenlik başlık olarak, yavaşça girdap veya homojen bir hücre süspansiyon sağlamak için hücrelerin tüp dokunun. Bir hamilton şırınga içine hücrelerin yaklaşık 7,5 mikrolitre piston ucundan yüklemek için bir mikropipet kullanın.Şırıngayı 120 derecelik bir açıyla tutarak, piston ucunu aşağı bakacak şekilde takın, süspansiyon ve piston ucu arasında bir hava kabarcığı sokmamaya dikkat eden pistonu takın. Conta tertibatını pipet iğnesine takın ve iğneyi şırıngaya takın. Hücre süspansiyonuna pipet iğnesi takmak için pistonu itin ve şırıngayı stereotaksik şırınga pompasına takın.Şırınga pompası tertibatının düzgün çalıştığından emin olmak için pistonu ilerletin ve iğneyi enjeksiyon için koordinatlara taşıyın. İğne ucunu bregma'ya hizala ve x ve y-koordinatlarını sıfıra ayarlayın. İki milimetre lateral ve eksi bir milimetre posterior bregma ve dura mater yüzeyine iğne ucu dokunmak için kraniektomi üzerinde iğne ucu taşıyın.İğneyi hafifçe kaldırın ve iğnenin temas ettiği yerde dura mater'de küçük bir kesi yapın. Stereotaksik koordinatı sıfıra eşit olarak ayarlayın ve iğneyi beyne sokmadan önce hücre süspansiyonunun yeterli şekilde aktığını doğrulamak için pistonu itin. İğneyi beyne z derinliğine tanıtım eksi 1,4 milimetreye eşit olarak derin korteksin gri madde/beyaz madde sınırına greft yerleştirin.15 dakikalık bir süre içinde hücre süspansiyon aşılamak için şırınga pompası başlatın. Doku hidrasyon korumak için enjeksiyon sırasında steril salin ile cerrahi site sulama hücre süspansiyon çıkışı izlemek için uzun bir çalışma mesafesi mikroskop kullanın. Tüm hücreler teslim edildiğinde, yavaş yavaş transplantasyon iğnesini geri çekin ve yeni dikişlerle kesi kapatmadan önce ameliyat bölgesini ek tuzlu suyla sulandırın.O zaman gösterildiği gibi ameliyat sonrası bakım ver. Yapışkan bant kaldırma testi için, önce küçük bir jilet kullanarak sarı ve kırmızı elektrik bandı parçalarını pürüzsüz bir cam yüzeyüzerinde beş milimetrelik şeritler halinde üçer dilime kesin. Fareleri testten önce en az 30 dakika boyunca davranış test odasına getirin ve fareyi boynundan ve sırtından dizginlemek için fareyi vücudunun ve başının ön pençelerini uzak tutması için bir işleme bezi kullanın.Her forepaw plantar yüzeyine bir yapışkan şerit yerleştirmek için cımbız kullanın ve pençeleri şeritler güvenli hassas ve tutarlı parmak basıncı kullanın. Farenin dört pençesi de plastik test kutusuna sahipken fareyi hızlıbir şekilde plastik bir silindire yerleştirin ve iki kronometre başlatın. Sonra sol pençe bildirimi, sol pençe kaldırma, sağ pençe bildirimi ve sağ pençe kaldırma için gecikmeler kaydetmek için iki kronometre kullanın.Bu pilot deneyde, forelimb fonksiyonu sadece kraniektomi, kontrollü kortikal darbe yaralanması ve naif farelerde karşılaştırıldı. Ameliyat yapılan fareler, ameliyattan hemen sonra bir ila üç gün boyunca yapışkan uyaranları fark etmek için geçici olarak artmış gecikme ler ve ipsilateral ön pençeden yapışkan çıkarmada geçici postoperatif açıklar sergilediler. Ancak kontrollü kortikal darbe yesahip olan fareler, ameliyat sonrası 28.İnsan nükleer antijeni için fare beyin bölümlerinin immünboyboyama insan hücre greftleri açıkça SHAM yaralanma ve kontrollü kortikal darbe beyinlerde konak dokulardan ayırt edilebilir ortaya koymaktadır. Kültürlü insan hücrelerini kullanırken ve kemirgenlerle veya immünsupresif ilaçlarla temas eden şırınga iğnelerini kullanırken standart laboratuvar güvenlik prosedürlerine uymanız gerekir. Beyin dokusu bölümleri nöroinflamatuar belirteçlerin ekspresyonu için analiz edilebilir, çünkü greftin konak dokusu nun yaralanma yanıtını nasıl etkilediğini ve tam tersi olduğunu bilmek değerlidir.Biz yaralanma sonrası davranış sonuçlarında ince cinsiyet farklılıkları bulmak için şaşırdık. Şimdi seks beyin hasarına nöroimmün yanıt bir rol oynar olup olmadığını araştırıyoruz. Sabit eller, sabır ve uygulama iyi bir kraniektomi tekniği geliştirmek için çok önemlidir.Uygun olmayan bir kraniektominin verdiği ikincil hasar, hücre nakli için hedeflemek istediğiniz bölgeyi tehlikeye atabilir.

Research

JoVE Journal

Developmental Biology

Culturing Human Pluripotent and Neural Stem Cells in an Enclosed Cell Culture System for Basic and Preclinical Research

Temel ve Klinik öncesi Araştırma bir Kapalı Hücre Kültürü Sistemi İnsan Pluripotent ve Sinir Kök Hücre Kültürleme

This paper describes how to use a custom manufactured, commercially available enclosed cell culture system for basic and preclinical research. Biosafety ...

Rapid Neuronal Differentiation of Induced Pluripotent Stem Cells for Measuring Network Activity on Micro-electrode Arrays

Mikro-elektrot dizileri Ağ Aktivite Ölçüm uyarılmış pluripotent kök hücrelerin Rapid Nöronal Farklılaşma

Neurons derived from human induced Pluripotent Stem Cells (hiPSCs) provide a promising new tool for studying neurological disorders. In the past decade, ...

Pluripotent Stem Cell Derived Cardiac Cells for Myocardial Repair

Pluripotent Kök Hücre Miyokard Onarım Kardiyak Hücreleri Türetilmiş

Human induced pluripotent stem cells (hiPSCs) must be fully differentiated into specific cell types before administration, but conventional protocols for ...

Differentiating Chondrocytes from Peripheral Blood-derived Human Induced Pluripotent Stem Cells

Periferal Kan Türevi İnsan Kaynaklı Pluripotent Kök Hücrelerden Kondrositlerin Farklılaşması

In this study, we used peripheral blood cells (PBCs) as seed cells to produce chondrocytes via induced pluripotent stem cells (iPSCs) in an ...

Generation of Standardized and Reproducible Forebrain-type Cerebral Organoids from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Standart ve tekrarlanabilir ön türü beyin Organoids insan nesil Pluripotent kök hücreler indüklenen

The human cortex is highly expanded and exhibits a complex structure with specific functional areas, providing higher brain function, such as cognition. ...

Using Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocyte-like Cells for Drug Discovery

İnsan kullanarak Pluripotent kök hücre kaynaklı hepatosit benzeri hücreler indüklenen ilaç bulma için

The ability to differentiate human induced pluripotent stem cells (iPSCs) into hepatocyte-like cells (HLCs) provides new opportunities to study inborn ...

A Familial Hypercholesterolemia Human Liver Chimeric Mouse Model Using Induced Pluripotent Stem Cell-derived Hepatocytes

İndüklenmiş Pluripotent kök hücre kaynaklı tetkikine kullanarak ailesel hiperkolesterolemi insan karaciğer Chimeric fare modeli

Familial hypercholesterolemia (FH) is mostly caused by low-density lipoprotein receptor (LDLR) mutations and results in an increased risk of early-onset ...

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells (hiPSC-ECs)

Microfluidic Assay for the Assessment of Leukocyte Adhesion to Human Induced Pluripotent Stem Cell-derived Endothelial Cells hiPSC-ECs

Mikrosıvısal tahlil endotel hücrelere (hiPSC-ECs) insan indüklenen Pluripotent kök hücre kaynaklı lökosit yapışma değerlendirme için

Endothelial cells (ECs) are essential for the regulation of inflammatory responses by either limiting or facilitating leukocyte recruitment into affected ...

Generation of 3D Skin Organoid from Cord Blood-derived Induced Pluripotent Stem Cells

3B cilt Organoid kablosu kan kaynaklı nesil Pluripotent kök hücreler indüklenen

The skin is the body&#8217;s largest organ and has many functions. The skin acts as a physical barrier and protector of the body and regulates bodily ...

In Vitro Generation of Somite Derivatives from Human Induced Pluripotent Stem Cells

Somite türevleri indüklenen insan nesil Vitro Pluripotent kök hücreler

In response to signals such as WNTs, bone morphogenetic proteins (BMPs), and sonic hedgehog (SHH) secreted from surrounding tissues, somites (SMs) give ...