Name: rabies necropsy techniques in large and small animals
Uploaded: 2019-07-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Vi er taknemmelige for New York State Department of Health Wadsworth Center for at støtte dette projekt. Vi vil også gerne anerkende støtten fra Amy Willsey og Frank Blaisdell fra Department of Health Wadsworth Center, og LL Ranch, Altamont, NY.

Alle beskrevne metoder blev godkendt af Wadsworth Centers institutionelle dyrepleje-og Brugsudvalg (IACUC).
1. forberedelse
<ol><li>Don PPE, på minimum øjenbeskyttelse (briller eller ansigt skjold), kirurgisk eller N-95 maske, og ikke-latex handsker.</li>
	<li>Forbered arbejdsområde, ideelt et bio-Safety kabinet (BSC), med en disponibel arbejdsoverflade, der dækker (f. eks. kraftpapir eller absorberende puder) og rene nekropsy instrumenter (figur 1).</li>
	<...

<ol>
	<li>Centers for Disease Control and Prevention (CDC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=West+Nile+virus+activity+-+United+States,+2009.">West Nile virus activity - United States, 2009.</a> MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).</li><li>McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B., Gray, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humans+and+cattle:+A+review+of+bovine+zoonoses.">Humans and cattle: A review of bovine zoonoses.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).</li><li>Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual Available from: <a target="_blank" href="https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases">https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases</a> (2019)</li><li>Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerosol+generation+during+bone-sawing+procedures+in+veterinary+autopsies.">Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies.</a> Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).</li><li>Green, F. H. Y., Yoshida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+aerosols+generated+during+autopsy+procedures+and+their+potential+role+as+carriers+of+infectious+agents.">Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents.</a> Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).</li><li>Barrat, J., Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+technique+for+the+collection+and+shipment+of+brain+specimens+for+rabies+diagnosis.">Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis.</a> Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. , 425-427 (1996).</li><li>Ness, S. L., Bain, F. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+perform+an+equine+field+necropsy.">How to perform an equine field necropsy.</a> American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).</li><li>. Sample requirements for TSE testing and confirmation &#8211; EURL guidance Available from: <a target="_blank" href="https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf">https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf</a> (2019)</li><li>. Rabies reports Available from: <a target="_blank" href="https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports">https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports</a> (2019)</li><li>. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf">https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf</a> (2019)</li><li>Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveillance+for+lesions+of+bovine+spongiform+encephalopathy+in+U.S.+cattle.">Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle.</a> Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).</li><li>Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eastern+equine+encephalitis+in+puppies+in+Michigan+and+New+York+states.">Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states.</a> Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).</li><li>Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clarifying+indeterminate+results+on+the+rabies+direct+fluorescent+antibody+test+using+real-time+reverse+transcriptase+polymerase+chain+reaction.">Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction.</a> Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).</li><li>Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7.+Brain+removal.">Chapter 7. Brain removal.</a> Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. , 67-72 (2018).</li></ol>

Prøver indsendt til rabies nekropsy har ofte en anamnese med kliniske tegn, der er kompatible med en neurologisk sygdom. Tilstedeværelsen af klinisk sygdom kan være forbundet med en række forskellige lidelser, herunder zoonotiske sygdomme, øge risikoen for personale i et laboratorium erhvervet infektion. For at reducere disse risici, teknikker er blevet implementeret, at mindske håndteringen og manipulation af prøver.
De viste metoder repræsenterer en nekropsy begivenhed for at fjerne ...

Arbejder på nekropsy gulvet i en rabies laboratorium er i sagens natur farlig. Til tider ankommer prøver med indlejrede Porcupine quills, fremmedlegemer, herunder pile/kugler/pellets eller udsatte knogle skår, der kan trænge ind i den beskyttende shipping wrap. Ukorrekt emballering kan medføre lækage og bringe individer, der udpakning af prøver, i fare. Ud over fysisk skade risikerer nekropsy teknikere at blive udsat for ukendte zoonotiske infektiøse agenser fra CNS-og kropsvæsker i enhederne. Desuden kan ektoparasitter, der bæres af præparatet, overføre andre zoonotiske sygdomme, da lopme og flåter almindeligvis ses på indgivne dyr. Afhængigt af geografisk placering og arter involveret de udsatte sygdomme varierer. Arbovira såsom Eastern Equine encephalitis virus (EEEV) eller West Nile virus (WNV), flåtbårne sygdomme, herunder Lyme sygdom eller tularæmi, bakterier, der forårsager Q-feber eller tuberkulose, og infektiøse prioner navngive et lille antal af de mulige farer1 , 2 , 3.
Formålet med disse metoder er at demonstrere sikre og effektive nekropsy teknikker ved hjælp af instrumenter, der minimerer potentialet for aerosolisering i modsætning til el-værktøj eller Save4,5. Almindeligt, nekropsy af små dyr i rabies laboratorium kræver skære væk de kranielle muskler og ved hjælp af en hammer og mejsel til at åbne den caudale dorsale del af calvarium6. Fjernelse af dette område af calvarium udsætter baghjernen, herunder hele cerebellum og kraniel hjernestammen. Modificerede nekropsy teknikker kan udføres på den ventrale del af kraniet, undgå de store kranielle muskler og tykkere regioner af kraniet. Men, disse modificerede nekropsy teknikker er kun muligt, når præparatet er uden cervikal ryghvirvler.
Tilsvarende kan hjernevæv i store dyr fjernes ved at adskille de kranielle muskler og åbne den caudale rygdel af kraniet7. Der kræves en betydelig indsats for at udsætte cerebellum og hjernestammen, da kranier af større dyr generelt er tykkere. For at undgå at trænge ind i kraniet, er lederen af et stort dyr placeret, så den ventro-hale del af kraniet står over for teknikeren. Ved hjælp af modificerede instrumenter fjernes cerebellum og hjernestammen gennem foramen magnum. Dette svarer til den prøve anskaffelsesmetode, der anbefales af TSE-undersøgelserne under EU-reference laboratoriet for transmissible spongiforme encephalopati (TSE)8. Cranial hvirvler bør fjernes på forhånd for at give adgang til foramen magnum.
Anvendelse af disse teknikker er til gavn for passende uddannede teknikere i rabies laboratorier. Som rabies laboratorium modtager prøver af forskellige størrelser, fra unge flagermus til voksne trækheste9, teknikeren har flere metoder til at vælge fra baseret på den individuelle omstændighed. Den metode, der er påvist for et stort dyr, er også hensigtsmæssig for dyrlæger, som udfører nekropsiser i marken, da det er besværligt og dyrt at sende et helt stort dyre hoved til rabies testning. Gennemførelsen af en af disse teknikker vil forbedre sikkerheden ved at mindske potentialet i aerosol produktion, reducere håndteringen af prøven og spare behandlingstid. Da området imidlertid ikke har de samme fordele som et laboratorium, der er oprettet specifikt for rabies testning, er det vigtigt, at alle ændringer af disse procedurer fokuserer på sikkerhed, især brug af personlige værnemidler.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemistry spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved, sharp-blunt mayo scissors</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>14-2055</td>
			<td>Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large sharp restaurant-quality carving knife</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Locking tumor-tenacula</td>
			<td>Diamond Scientific and Surgicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Czerny Tenaculum Forcep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide)</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>Modified 8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthopedic mallet-hammer</td>
			<td>Mortech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Postmortem hammer with hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharp councilman orthopedic bone chisel</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>60-5</td>
			<td>Councilman&#39;s Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharpened tablespoon or other long handled spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>63-03</td>
			<td>Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powder-free non-latex gloves</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety glasses, goggles, or faceshield</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgery or N-95 mask</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rabies necropsy techniques in large and small animals

New York State Department of Health (NYSDOH) rabies laboratorium modtager mellem 6.000 til 9.000 prøver årligt og udfører rabies test for hele staten, med undtagelse af New York City. Rabies laboratoriet nekropsier en række dyr spænder i størrelse fra flagermus til bovids. De fleste af disse prøver er dyr, der udviser neurologiske tegn, men mindre end 10% faktisk test positiv for rabies; indebærer traumer, læsioner eller andre smitsomme agenser som årsag til disse symptomer. På grund af risikoen for aerosolizing udiagnosticeret infektiøse agenser, rabies laboratoriet ikke bruger el-værktøj eller Save. Tre nekropsy teknikker vil blive præsenteret for dyr, hvis kranier er uigennemtrængelige med saks. Laboratoriet har implementeret disse teknikker for at mindske potentiel udsættelse for smitsomme agenser, eliminere unødvendig manipulation af præparatet og reducere behandlingstiden. Fordelene ved en foretrukken teknik i modsætning til en anden er underlagt den uddannede individuelle behandling af prøven.

Alle terrestriske prøver indsendt med kranier mellem januar 31, 2019 og februar 28, 2019 havde oplysninger om tilstedeværelsen af en hals og metoden til nekropsy indsamlet. I denne periode blev 170 hoveder nekropsied med 18 arter repræsenteret. 52% (89/170) blev korrekt Decapitated. De resterende havde mindst én hvirvlen vedlagt herunder tre hele kroppen prøver. Ventrale metoden blev brugt 75% (128/170) af tiden, af dem, hals var til stede på 49. Prøver indsendt med en hals vil hav...

Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals

Formålet med denne protokol er at påvise sikre nekropsy teknikker i små og store dyr for at opnå tilfredsstillende vævsprøver til rabies testning.

Rabies Nekropsy teknikker i store og små dyr

The New York State Department of Health (NYSDOH) Rabies Laboratory receives between 6,000 to 9,000 specimens annually and performs rabies testing for the ...

Vævsindsamling til rabiestest har både åbenlyse og utilførende farer. Teknikeren skal anvende de sikreste metoder, der er til rådighed, og bære korrekt personlige værnemidler. Disse protokoller giver sikker obduktion teknikker uden brug af el-værktøj eller save, minimere produktionen af aerosoler.Den store dyreprotokol kan også udføres i marken. Ved hjælp af den store metode til udtagning af dyreprøver i marken elimineres udfordringen med at transportere et dyrehoved, der vejer op til 45 kg, til laboratoriet. Den store dyremetode svarer til den europæiske protokol for transmissible spongiforme encephalopati prøveudtagning og kan anvendes til enhver undersøgelse ved hjælp af hjernestammen og lillehjernen.For at hente lillehjernen og hjernestammen ved ventrale metode, placere prøven ventrale side op med næsen rettet distally mod bagsiden af biosikkerhed kabinet. Holde en ortopædisk hammer i den dominerende hånd og en rådmand mejsel i den anden side, placere mejsel i en 45 graders vinkel med hjørnet punkt til mejsel i V formet åbning mellem højre side af den tidsmæssige og occipital knogler. Slå toppen af mejsel med hammeren, indtil de to knogler adskilt.Og lav et snit ved siden af basisphenoid knoglen. Adskære de tidsmæssige og occipitale knogler på venstre side af prøven som netop påvist. Og brug mejsel til at bøje V-regionen af kraniet nedad for at afsløre hele rhombencephalon område af hjernen.Brug derefter saks og kraftang til at øse ud hjernestammen og lillehjernen, fjerne eventuelle resterende væv stykker fra kraniet efter behov. Hvis prøven ikke tillader ventral udtagning, skal prøven dorsalt, hvor næsen er rettet distally mod bagsiden af biosikkerhedsskabet. Og bruge en tumor tenacula at forstå venstre tidsmæssige muskulatur med tænderne på tenacula.Klem håndtaget for at låse tænderne rundt om vævet og bruge en skarp udskæring kniv til at skære den tidsmæssige muskel ned til knoglen. Drej prøven 180 grader med tenacula og kniven og gentag snittet på den modsatte tidsmæssige muskel for at afsløre kraniet. Returner hovedet til sin oprindelige orientering og placere mejsel i en 45 graders vinkel med hjørnepunkt til mejsel på midten af kraniet på tidspunktet for parietal og intraparietal knogler.Og slå toppen af mejsel med hammeren, indtil en vandret åbning er lavet på den øverste halvdel af kraniet på parietal knoglen. Drej prøven 180 grader og lav en åbning på den modsatte side af kraniet som netop påvist. Placer hovedet efter behov for at indsætte mejselpunktet i slutningen af det første snit i en 90 graders vinkel til den vandrette åbning og slå mejslen, indtil åbningen når occipital knoglen.Rul prøven for at lave en åbning på den modsatte occipital knogle på samme måde. Åbningerne i kraniet skal ligne en på hovedet U.Indsæt tænderne på tenacula i kraniet i bunden af dig og trække knoglen baglæns for at afsløre den hale ende af cerebrum og lillehjernen. Brug derefter saks som et scoop til at lirke hele lillehjernen ud inde fra hulrummet.Og brug vævskraft til at drille hjernestammen fra foramen. For store dyr cerebellum og hjernestammen hentning, placere prøven, således at den dorsale del af kraniet er i kontakt med obduktion overflade. Med den halelige del af kraniet og foramen magnum vender forsiden af biosikkerhed kabinet.Tag fat i hjernestammen med ståb. Indsæt en modificeret stiletkniv i foramen magnum mellem rygmarven og rygmarven meninges så vidt muligt og gennemsøge omkring rygmarven til at adskille lillehjernen og hjernestammen fra spinal meninges. Træk derefter stilken ud af foramen med stænde.Når kniven er blevet indsat gennem foramen magnum, forsigtigt vinkel bladet til at følge langs kraniet så meget som muligt og indsætte en metal spatel eller kniv med en lang nok håndtag til at nå under hjernen i rummet mellem neurale væv og mening spinales. Sonde omkring lillehjernen for at sikre, at forbindelserne til spinal meninges er blevet afbrudt. Når meninges er blevet helt afskåret forhånd spatel rostrally og dorsally at øse op lillehjernen.Så øse ud lillehjernen med spatel. Alle jordbaserede prøver indsendt med kranier mellem 31. januar 2019 og 28. februar 2019 havde oplysninger om tilstedeværelsen af en hals og metoden til obduktion indsamlet. I løbet af denne tid, 170 hoveder blev obduceret med 18 arter repræsenteret.52 % blev korrekt halshugget. De resterende havde mindst én ryghvirvler påsat, herunder tre hele kroppen prøver. Ventralmetoden blev brugt 75% af tiden.Af dem var halse til stede på 49. Der blev indsendt tre store dyr, og i to tilfælde blev den store dyreprotokol anvendt. Et egern blev indsendt med en knust kranium og blot skære væk huden eksponeret hjernevæv, så ingen af de demonstrerede metoder blev brugt.De væv, der anvendes til at lave mikroskopidias og eller udvundet fra molekylære metoder, når behandling af flere dyr undgår krydskontaminering ved hjælp af nye handsker instrumenter og et rent arbejdsområde. Vær forsigtig, når du udfører disse protokoller, da prøverne kan være inficeret med rabiesvirus eller andre zoonotiske sygdomme. Bemærk, at der også kan være skarpe genstande i prøverne.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Recording from key nerves and muscles of Aplysia during feeding behavior allows us to study the patterns of neural control in an intact animal.  ...

Efficient Derivation of Human Neuronal Progenitors and Neurons from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Effektiv derivering af humane Neuronal progenitorer og neuroner fra Pluripotente humane embryonale stamceller med småmolekyle Induktion

There is a large unfulfilled need for a clinically-suitable human neuronal cell source for repair or regeneration of the damaged central nervous system ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

Storstilet Registrering af neuroner ved Flytbare Silicon Probes at opføre sig Gnavere

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

Vurdering Rumlig læring og hukommelse i små Squamate Krybdyr

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

High-Resolution 3D Imaging of Rabies Virus Infection in Solvent-Cleared Brain Tissue

3D-billeddannelse i høj opløsning af rabies virus infektion i et solvent renset hjernevæv

The visualization of infection processes in tissues and organs by immunolabeling is a key method in modern infection biology. The ability to observe and ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

Multi fiber fotometri til registrering af neurale aktiviteter i frit bevægende dyr

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

Generation af Oligodendrocytes og Oligodendrocyte-Conditioned Medium for co-kultur eksperimenter

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...

Real-Time fMRI Brain Mapping in Animals

Real-Time fMRI hjernekortlægning hos dyr

Dynamic fMRI responses vary largely according to the physiological conditions of animals either under anesthesia or in awake states. We developed a ...

Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model

Subretinal transplantation af humant embryonalt stamcelleafledt nethindevæv i en kattemodel med store dyr

Retinal degenerative (RD) conditions associated with photoreceptor loss such as age-related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa (RP) and ...