Name: rabies necropsy techniques in large and small animals
Uploaded: 2019-07-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Vi er takknemlige til New York State Department of Health Wadsworth Center for å støtte dette prosjektet. Vi ønsker også å erkjenne støtte fra Amy Willsey og Frank Blaisdell av Department of Health Wadsworth Center, og LL Ranch, Altamont, NY.

Alle metodene som er beskrevet ble godkjent av Wadsworth Center institusjonelle Animal Care og use Committee (IACUC).
1. forberedelse
<ol><li>Don PPE, minimum øyebeskyttelse (briller eller ansiktsskjerm), kirurgisk eller N-95 maske, og ikke-latex hansker.</li>
	<li>Forbered arbeidsområde, ideelt et bio-Safety kabinett (BSC), med en disponibel arbeidsflate som dekker (f. eks kraft papir eller absorberende pads) og rene obduksjon instrumenter (figur 1).</li>
	<l...

<ol>
	<li>Centers for Disease Control and Prevention (CDC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=West+Nile+virus+activity+-+United+States,+2009.">West Nile virus activity - United States, 2009.</a> MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).</li><li>McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B., Gray, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humans+and+cattle:+A+review+of+bovine+zoonoses.">Humans and cattle: A review of bovine zoonoses.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).</li><li>Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual Available from: <a target="_blank" href="https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases">https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases</a> (2019)</li><li>Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerosol+generation+during+bone-sawing+procedures+in+veterinary+autopsies.">Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies.</a> Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).</li><li>Green, F. H. Y., Yoshida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+aerosols+generated+during+autopsy+procedures+and+their+potential+role+as+carriers+of+infectious+agents.">Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents.</a> Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).</li><li>Barrat, J., Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+technique+for+the+collection+and+shipment+of+brain+specimens+for+rabies+diagnosis.">Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis.</a> Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. , 425-427 (1996).</li><li>Ness, S. L., Bain, F. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+perform+an+equine+field+necropsy.">How to perform an equine field necropsy.</a> American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).</li><li>. Sample requirements for TSE testing and confirmation &#8211; EURL guidance Available from: <a target="_blank" href="https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf">https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf</a> (2019)</li><li>. Rabies reports Available from: <a target="_blank" href="https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports">https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports</a> (2019)</li><li>. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf">https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf</a> (2019)</li><li>Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveillance+for+lesions+of+bovine+spongiform+encephalopathy+in+U.S.+cattle.">Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle.</a> Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).</li><li>Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eastern+equine+encephalitis+in+puppies+in+Michigan+and+New+York+states.">Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states.</a> Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).</li><li>Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clarifying+indeterminate+results+on+the+rabies+direct+fluorescent+antibody+test+using+real-time+reverse+transcriptase+polymerase+chain+reaction.">Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction.</a> Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).</li><li>Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7.+Brain+removal.">Chapter 7. Brain removal.</a> Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. , 67-72 (2018).</li></ol>

Prøvene innleverte for rabiat obduksjon ofte har en historien av klinisk underskriver forenlig med en nevrologisk lidelsen. Tilstedeværelsen av klinisk sykdom kan være forbundet med en rekke lidelser, inkludert zoonotiske sykdommer, øke risikoen for ansatte i et laboratorium ervervet infeksjon. For å redusere disse risikoene, har teknikker blitt gjennomført som reduserer håndtering og manipulering av prøver.
Metodene demonstrert representerer en obduksjon hendelse for å fjerne ønsket...

Arbeider på obduksjon gulvet av en rabiat Laboratorium er iboende farlig. Noen ganger, prøver kommer med innebygd Porcupine pigger, fremmedlegemer inkludert piler/kuler/pellets eller eksponert Ben skår som kan trenge inn i beskyttende shipping wrap. Uriktig emballasje kan føre til lekkasje, og sette enkeltpersoner som pakker ut prøver. I tillegg til fysisk skade, obduksjon teknikere risikoeksponering for ukjente zoonotiske smittsomme stoffer fra CNS og kroppsvæsker av prøvene. I tillegg kan ektoparasitter båret av prøven overføre andre zoonotiske sykdommer, som lopper og flått er ofte sett på innsendte dyr. Avhengig av geografisk plassering og arter involvert sykdommene eksponert variere. Arboviruses som Eastern Equine Encefalitt virus (EEEV) eller West Nile virus (WNV), tick-borne sykdommer inkludert Lyme sykdom eller Tularemia, bakterier forårsaker Q feber eller tuberkulose, og smittsomme prioner navn et lite antall av de mulige farene1 , 2 andre priser , 3i denne.
Hensikten med disse metodene er å demonstrere trygge og effektive obduksjon teknikker ved hjelp av instrumenter som minimerer potensialet for aerosolisering i motsetning til elektroverktøy eller sager4,5. Vanligvis, det obduksjon av liten dyrene inne det rabiat Laboratorium behøver klipping fjerne det hjerne muskelen og benytter en hammer og meisel å åpen det caudal rygg havn av det calvarium6. Fjerne dette området av calvarium eksponerer bak hjernen, inkludert hele lillehjernen og skallen hjernestammen. Modifisert obduksjon teknikker kan utføres på den ventrale delen av skallen, unngå store skallen muskler og tykkere områder av skallen. Disse modifiserte obduksjon teknikkene er imidlertid bare mulig når prøven er uten livmorhals rygg.
Tilsvarende kan hjernevevet i store dyr fjernes ved å skille skallen musklene og åpne caudal rygg delen av skallen7. Betydelig anstrengelse er krevde å utsette det lillehjernen og hjerne stilk idet det hodeskaller av større dyrene er vanligvis tykkere. For å unngå å trenge inn i skallen, er leder av et stort dyr posisjonert slik at ventro-caudal delen av skallen står overfor teknikeren. Ved hjelp av modifiserte instrumenter blir lillehjernen og hjernestammen fjernet gjennom foramen Magnum. Dette ligner på metoden oppkjøpet anbefalt av TSE European Union referanse laboratorium for smittsomme Spongiform encefalopati (TSE) undersøkelser8. Skallen virvler bør fjernes på forhånd for å gi tilgang til foramen Magnum.
Anvendelse av disse teknikkene er gunstig for kvalifiserte teknikere i rabies laboratorier. Som rabies laboratoriet mottar prøver av ulike størrelser, fra juvenile ball til voksen utkast hester9, har teknikeren flere metoder å velge mellom basert på den enkelte omstendighet. Metoden bevist for en stor dyr er likeledes passende for veterinarians hvem utføre necropsies inne feltet, siden skipsfart en hel stor dyr leder for rabiat tester er tungvint og kostbar. Implementering av noen av disse teknikkene vil forbedre sikkerheten ved å redusere potensialet for aerosol produksjon, redusere håndteringen av prøven og spare behandlingstid. Men som feltet ikke har de samme fordelene som et laboratorium satt opp spesifikke for rabies testing, er det viktig at eventuelle endringer gjort i disse prosedyrene fokus på sikkerhet, spesielt bruk av personlig verneutstyr (PPE).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemistry spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved, sharp-blunt mayo scissors</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>14-2055</td>
			<td>Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large sharp restaurant-quality carving knife</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Locking tumor-tenacula</td>
			<td>Diamond Scientific and Surgicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Czerny Tenaculum Forcep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide)</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>Modified 8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthopedic mallet-hammer</td>
			<td>Mortech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Postmortem hammer with hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharp councilman orthopedic bone chisel</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>60-5</td>
			<td>Councilman&#39;s Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharpened tablespoon or other long handled spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>63-03</td>
			<td>Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powder-free non-latex gloves</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety glasses, goggles, or faceshield</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgery or N-95 mask</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rabies necropsy techniques in large and small animals

Det New York Begrunne avdeling av sunnhet (NYSDOH) rabiat Laboratorium mottar imellom 6 000 å 9 000 prøver årlig og utfører rabiat tester for det hel begrunne, med unntak av New York by. Det rabiat Laboratorium necropsies en variasjon av dyrene oppstiller inne størrelse fra ball å bovids. Det meste av disse prøver er dyrene viser nevrologisk underskriver, imidlertid, mindre enn 10% egentlig test positiv for rabiat; antyde traumer, lesjoner eller andre smittsomme stoffer som årsak til disse symptomene. På grunn av risikoen for aerosolizing udiagnostisert smittsomme midler, gjør rabies Laboratory ikke bruke elektroverktøy eller sager. Tre obduksjon teknikker vil bli presentert for dyr som hodeskaller er UGJENNOMTRENGELIG med saks. Laboratoriet har implementert disse teknikkene for å redusere potensiell eksponering for smittsomme midler, eliminere unødvendig manipulering av prøven og redusere behandlingstiden. Fordelene med en foretrukket teknikk i motsetning til en annen er underlagt opplært individuell behandling av prøven.

Alle terrestriske prøver levert med hodeskaller mellom 31 januar 2019 og 28 februar 2019 hadde informasjon om tilstedeværelsen av en hals og metoden for obduksjon samlet. I løpet av den tiden, 170 hoder ble obduksjon med 18 arter representert. 52% (89/170) ble riktig halshugget. De resterende hadde minst en vertebra vedlagt inkludert tre hele kroppen eksemplarer. Den ventrale metoden ble brukt 75% (128/170) av tiden, av dem, halsen var til stede på 49. Prøver som sendes med en hals v...

Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals

Målet av denne protokollen er å demonstrere pengeskap obduksjon teknikker inne liten og stor dyrene å få tilfredsstillende tissue eksemplar for rabiat tester.

Rabiat obduksjon teknikker inne stor og liten dyrene

The New York State Department of Health (NYSDOH) Rabies Laboratory receives between 6,000 to 9,000 specimens annually and performs rabies testing for the ...

Vevsamling for rabiestesting har både åpenbare og uovertrætte farer. Teknikeren må bruke de sikreste metodene som er tilgjengelige og bruke riktig personlig verneutstyr. Disse protokollene gir trygge necropsy teknikker uten å bruke elektroverktøy eller sag, minimere produksjonen av aerosoler.Den store dyreprotokollen kan også utføres i feltet. Ved hjelp av den store dyreprøvehentingsmetoden i feltet eliminerer utfordringen med å transportere et dyrehode som veier oppover på 45 kilo til laboratoriet. Den store dyremetoden ligner på den europeiske protokollen for overførbar spongiform encefalopati prøvehenting og kan brukes til enhver undersøkelse ved hjelp av hjernestammen og lillehjernen.For å hente lillehjernen og hjernestammen ved ventral metode, plasser prøven ventral side opp med nesen rettet distally mot baksiden av biosikkerhetsskapet. Holder en ortopedisk klubbe i den dominerende hånden og en rådmann meisel i den annen side, plassere meisel i en 45 graders vinkel med hjørnet peker til meisel i V formet åpning mellom høyre side av timelig og occipital bein. Slå toppen av meisel med klubbe til de to beinene skiller seg.Og gjør et kutt ved siden av basisfenoidbenet. Skill de timelige og occipital bein på venstre side av prøven som nettopp demonstrert. Og bruk meiselen til å bøye V-regionen av skallen nedover for å avsløre hele rhombencephalon-området av hjernen.Deretter bruker du saks og tang til å øse ut hjernestammen og lillehjernen, og fjern eventuelle gjenværende vevsbiter fra skallen etter behov. Hvis prøven ikke tillater ventral gjenfinningsposisjon, prøven dorsally, med nesen rettet distally mot baksiden av biosikkerhetskapet. Og bruk en svulst tenacula for å forstå venstre temporal muskel med tennene på tenacula.Klem håndtaket for å låse tennene rundt vevet og bruk en skarp carving kniv for å kutte den timelige muskelen ned til beinet. Roter prøven 180 grader med tenacula og kniven og gjenta snittet på motsatt temporal muskel for å avsløre skallen. Returner hodet til sin opprinnelige orientering og plasser meisel i en 45 graders vinkel med hjørnet peker til meisel på midten av skallen på tidspunktet for parietal og intraparietal bein.Og slå toppen av meisel med klubbe til en horisontal åpning er laget på den øverste halvdelen av skallen på parietal bein. Roter prøven 180 grader og gjør en åpning på motsatt side av skallen som nettopp demonstrert. Plasser hodet etter behov for å sette meiselpunktet inn i enden av det første kuttet i en 90 graders vinkel til den horisontale åpningen og slå meisel til åpningen når occipital bein.Rull prøven for å lage en åpning på motsatt occipital bein på samme måte. Åpningene i skallen skal ligne en opp ned U.Sett tennene på tenacula inn i skallen nederst på deg og trekk beinet bakover for å avsløre den kaudale enden av cerebrum og lillehjernen. Bruk deretter saks som en scoop for å lirke ut hele lillehjernen fra innsiden av hulrommet.Og bruk vevs tang for å erte ut hjernestammen fra foramen. For store dyr lillehjernen og hjernestammehenting, plasser prøven slik at den dorsale delen av skallen er i kontakt med den necropsy overflaten. Med den kaudale delen av skallen og foramen magnum vendt mot forsiden av biosikkerhetsskapet.Grip hjernestammen med tang. Sett inn en modifisert stiletto kniv i foramen magnum mellom ryggmargen og spinal meninges så langt som mulig og skure rundt ryggmargen for å skille lillehjernen og hjernestammen fra spinal meninges. Deretter trekker du stammen ut av foramen med tang.Når kniven er satt inn gjennom foramen magnum, forsiktig vinkle bladet til å følge langs skallen så mye som mulig og sette inn en metall slikkepott eller kniv med et langt nok håndtak for å nå under hjernen inn i rommet mellom nevrale vev og spinal meninges. Sonde rundt lillehjernen for å sikre at forbindelsene til spinalmeningene er kuttet. Når meningene er fullstendig kuttet fremme slikkepott rostrally og dorsally å øse opp lillehjernen.Deretter scoop ut lillehjernen med slikkepotten. Alle terrestriske prøver innsendt med hodeskaller mellom 31 januar 2019 og 28 februar 2019 hadde informasjon om tilstedeværelsen av en nakke og metoden for necropsy samlet inn. I løpet av den tiden var 170 hoder necropsied med 18 arter representert.52% ble riktig halshugget. De resterende hadde minst én ryggvirvler festet, inkludert tre hele kroppsprøver. Ventralmetoden ble brukt en 75% av tiden.Av disse var nakkene til stede på 49. Tre store dyr ble sendt inn, og i to tilfeller ble den store dyreprotokollen brukt. Et ekorn ble sendt med en knust hodeskalle og bare kutte bort huden utsatt hjernevevet slik at ingen av de demonstrerte metodene ble brukt.Vevet som brukes til å lage mikroskopi lysbilder og eller ekstrahert fra molekylære metoder når behandling av flere dyr unngå krysskontaminering ved hjelp av nye hansker instrumenter og et rent arbeidsområde. Vær forsiktig når du utfører disse protokollene som prøvene kan være infisert med rabies virus eller andre zoonotiske sykdommer. Vær oppmerksom på at skarpe gjenstander også kan være til stede i prøvene.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Recording from key nerves and muscles of Aplysia during feeding behavior allows us to study the patterns of neural control in an intact animal.  ...

Efficient Derivation of Human Neuronal Progenitors and Neurons from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Effektiv Utledning av Human nevrale stamceller og nevroner fra pluripotent humane embryonale stamceller med lite molekyl Induksjon

There is a large unfulfilled need for a clinically-suitable human neuronal cell source for repair or regeneration of the damaged central nervous system ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

Storskala opptak av nevroner med bevegelige Silicon Sonder i oppfører Gnagere

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

Vurdere Spatial læring og hukommelse i små Squamate Krypdyr

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

High-Resolution 3D Imaging of Rabies Virus Infection in Solvent-Cleared Brain Tissue

Høy-resolution 3D tenkelig av rabiat virus infeksjon inne løsemiddel-klarnet hjerne tissue

The visualization of infection processes in tissues and organs by immunolabeling is a key method in modern infection biology. The ability to observe and ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

Multi-fiber fotometri å Record neural aktivitet i fritt bevegelige dyr

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

Generasjon oligodendrocytes og oligodendrocyte-conditioned medium for co-kultur eksperimenter

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...

Real-Time fMRI Brain Mapping in Animals

Sanntids fMRI-hjernekartlegging hos dyr

Dynamic fMRI responses vary largely according to the physiological conditions of animals either under anesthesia or in awake states. We developed a ...

Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model

Subretinal transplantasjon av humant embryonalt stamcelleavledet retinalvev i en katt stor dyremodell

Retinal degenerative (RD) conditions associated with photoreceptor loss such as age-related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa (RP) and ...