Name: rabies necropsy techniques in large and small animals
Uploaded: 2019-07-30T13:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Мы признательны Центру Уодсвортского департамента здравоохранения штата Нью-йорк за поддержку этого проекта. Мы также хотели бы отметить поддержку Эми Уиллси и Фрэнк Айсделл Департамента здравоохранения Уодсворт центр, и LL ранчо, Altamont, NY.

Все описанные методы были одобрены Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Центра Уодсворта (IACUC).
1. Подготовка
<ol><li>Дон СИЗ, при минимальной защите глаз (очки или лицезащитный щит), хирургическая или N-95 маска, и нелатексные перчатки.</li>
	<li>Подготов...

<ol>
	<li>Centers for Disease Control and Prevention (CDC). <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=West+Nile+virus+activity+-+United+States,+2009.">West Nile virus activity - United States, 2009.</a> MMWR Morbidity and Mortality Weekly Report. 59 (25), 769-772 (2010).</li><li>McDaniel, C. J., Cardwell, D. M., Moeller, R. B., Gray, G. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Humans+and+cattle:+A+review+of+bovine+zoonoses.">Humans and cattle: A review of bovine zoonoses.</a> Vector Borne and Zoonotic Diseases. 14 (1), 1-19 (2014).</li><li>Zoonotic diseases. Merck Veterinary Manual Available from: <a target="_blank" href="https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases">https://www.merckvetmanual.com/public-health/zoonoses/zoonotic-diseases</a> (2019)</li><li>Wenner, L., Pauli, U., Summermatter, K., Gantenbein, H., Vidondo, B., Posthaus, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aerosol+generation+during+bone-sawing+procedures+in+veterinary+autopsies.">Aerosol generation during bone-sawing procedures in veterinary autopsies.</a> Veterinary Pathology. 54 (3), 425-436 (2017).</li><li>Green, F. H. Y., Yoshida, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characteristics+of+aerosols+generated+during+autopsy+procedures+and+their+potential+role+as+carriers+of+infectious+agents.">Characteristics of aerosols generated during autopsy procedures and their potential role as carriers of infectious agents.</a> Applied Occupational and Environmental Hygiene. 5 (12), 853-858 (1990).</li><li>Barrat, J., Meslin, F. X., Kaplan, M. M., Koprowski, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simple+technique+for+the+collection+and+shipment+of+brain+specimens+for+rabies+diagnosis.">Simple technique for the collection and shipment of brain specimens for rabies diagnosis.</a> Laboratory techniques in Rabies 4th Edition. , 425-427 (1996).</li><li>Ness, S. L., Bain, F. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+to+perform+an+equine+field+necropsy.">How to perform an equine field necropsy.</a> American Association of Equine Practitioners. 55, 313-316 (2009).</li><li>. Sample requirements for TSE testing and confirmation &#8211; EURL guidance Available from: <a target="_blank" href="https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf">https://science.vla.gov.uk/tse-lab-net/documents/tse-oie-rl-samp.pdf</a> (2019)</li><li>. Rabies reports Available from: <a target="_blank" href="https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports">https://www.wadsworth.org/programs/id/rabies/reports</a> (2019)</li><li>. Protocol for postmortem diagnosis of rabies in animals by direct fluorescent antibody testing: A minimum standard for rabies diagnosis in the United States Available from: <a target="_blank" href="https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf">https://www.cdc.gov/rabies/pdf/rabiesdfaspv2.pdf</a> (2019)</li><li>Miller, L. D., Davis, A. J., Jenny, A. L., Fekadu, M., Whitfield, S. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveillance+for+lesions+of+bovine+spongiform+encephalopathy+in+U.S.+cattle.">Surveillance for lesions of bovine spongiform encephalopathy in U.S. cattle.</a> Developments in Biological Standardizations. 80, 119-121 (1993).</li><li>Andrews, C., Gerdin, J., Patterson, J., Buckles, E. L., Fitzgerald, S. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Eastern+equine+encephalitis+in+puppies+in+Michigan+and+New+York+states.">Eastern equine encephalitis in puppies in Michigan and New York states.</a> Journal of Veterinary Diagnostic Investigation. 30 (4), 633-636 (2018).</li><li>Appler, K., Brunt, S., Jarvis, J. A., Davis, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clarifying+indeterminate+results+on+the+rabies+direct+fluorescent+antibody+test+using+real-time+reverse+transcriptase+polymerase+chain+reaction.">Clarifying indeterminate results on the rabies direct fluorescent antibody test using real-time reverse transcriptase polymerase chain reaction.</a> Public Health Reports. 134 (1), 57-62 (2019).</li><li>Rupprecht, C. E., Fooks, A. R., Abela-Ridder, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+7.+Brain+removal.">Chapter 7. Brain removal.</a> Laboratory techniques in Rabies 5th Edition. , 67-72 (2018).</li></ol>

Specimens, представленные для некропсии бешенства часто имеют историю клинических признаков, совместимых с неврологическим заболеванием. Наличие клинических заболеваний может быть связано с различными нарушениями, в том числе зоонозными заболеваниями, повышая риск для сотрудников лабор...

Работа на полу некропсии в лаборатории бешенства по своей сути опасна. Временами, образцы прибывают со встроенными иголками дикобраза, посторонними предметами, включая стрелы/пули/гранулы или открытые костные осколки, которые могут проникать в защитную обертку для доставки. Неправильная упаковка может привести к утечке, подвергая опасности людей, которые распаковывают образцы. В дополнение к физическим травмам, специалисты по некропсии рискуют подвергаться воздействию неизвестных зоонозных инфекционных агентов из ЦНС и жидкостей организма образцов. Кроме того, эктопаразиты, переносимые образцом, могут передавать другие зоонозные заболевания, так как блохи и клещи обычно встречаются на представленных животных. В зависимости от географического положения и видов, связанных с болезнями подвергаются варьироваться. Арбовирусы, такие как вирус восточного конского энцефалита (EEEV) или вирус Западного Нила (WNV), клещевые заболевания, включая болезнь Лайма или туляремию, бактерии, вызывающие лихорадку или туберкулез, и инфекционные прионы называют небольшое количество возможных опасностей1 , 2 , 3.
Целью этих методов является демонстрация безопасных и эффективных методов некропсии с использованием инструментов, которые сводят к минимуму потенциал для аэрозолизации в отличие от электроинструментов или пил4,5. Как правило, некропсия мелких животных в лаборатории бешенства требует отрезать черепные мышцы и с помощью молотка и стамески, чтобы открыть каудальной царской части кальвария6. Удаление этой области кальвария подвергает задний мозг, в том числе весь мозжечок и черепного ствола мозга. Модифицированные методы некропсии могут быть выполнены на брюшной части черепа, избегая больших мышц черепа и более толстых областей черепа. Однако эти модифицированные методы некропсии возможны только тогда, когда образец без шейных позвонков.
Аналогичным образом, ткани мозга у крупных животных могут быть удалены путем разделения черепных мышц и открытия caudal царской части черепа7. Значительные усилия, необходимые для разоблачения мозжечка и ствола мозга, как черепа крупных животных, как правило, толще. Чтобы не проникать в череп, голова большого животного расположена таким образом, что вентро-каудаальная часть черепа обращена к технику. Используя модифицированные инструменты, мозжечок и ствол мозга удаляются через foramen magnum. Это похоже на метод приобретения образцов, рекомендованный Справочной лабораторией Европейского союза TSE для трансмиссивной спонгиформной энцефалопатии (TSE) исследований8. Черепные позвонки должны быть удалены заранее, чтобы обеспечить доступ к foramen magnum.
Применение этих методов полезно для надлежащим образом обученных техников в лабораториях по борьбе с бешенством. Как бешенство лаборатория получает образцы различных размеров, от несовершеннолетних летучих мышей для взрослых лошадей проекта9, техник имеет несколько методов на выбор на основе индивидуальных обстоятельств. Метод, продемонстрированный для большого животного, также подходит для ветеринаров, которые выполняют некропсии в полевых условиях, так как доставка всей большой головке животного для тестирования на бешенство является громоздким и дорогостоящим. Внедрение любого из этих методов повысит безопасность за счет уменьшения потенциала производства аэрозолей, сокращения обработки образца и экономии времени на обработку. Однако, поскольку поле не имеет тех же преимуществ, что и лабораторное оборудование для тестирования на бешенство, важно, чтобы любые изменения, внесенные в эти процедуры, были направлены на безопасность, особенно на использование средств индивидуальной защиты (СИЗ).

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Chemistry spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Curved, sharp-blunt mayo scissors</td>
			<td>Sklar</td>
			<td>14-2055</td>
			<td>Sklar Operating Scissors 5-1/2 Inch Premium OR Grade Stainless Steel Finger Ring Handle Curved Sharp/Blunt</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Large sharp restaurant-quality carving knife</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Locking tumor-tenacula</td>
			<td>Diamond Scientific and Surgicals</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Czerny Tenaculum Forcep</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Modified stiletto knife (6.5 inch long blade carving knife ground to 0.5 inch wide)</td>
			<td>Dexter</td>
			<td>P94848</td>
			<td>Modified 8&#34; Scalloped Utility Knife, white handle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Orthopedic mallet-hammer</td>
			<td>Mortech</td>
			<td>N/A</td>
			<td>Postmortem hammer with hook</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharp councilman orthopedic bone chisel</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>60-5</td>
			<td>Councilman&#39;s Chisel Blade: 2 in x 2.25 in standard 7 in</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sharpened tablespoon or other long handled spoon</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Smooth-tipped tissue dressing forceps without teeth</td>
			<td>Shandon</td>
			<td>63-03</td>
			<td>Shandon Broad Point Dressing Thumb Forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powder-free non-latex gloves</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safety glasses, goggles, or faceshield</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgery or N-95 mask</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Kraft paper, butcher paper, absorbent pad, etc</td>
			<td>Any</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rabies necropsy techniques in large and small animals

Лаборатория по борьбе с бешенством штата Нью-йорк (NYSDOH) ежегодно получает от 6000 до 9000 образцов и проводит тестирование на бешенство для всего штата, за исключением Нью-йорка. Лаборатория бешенства некропсии различных животных, начиная от летучих мышей до bovids. Большинство из этих образцов животных, демонстрирующих неврологические признаки, однако, менее 10% на самом деле положительный результат теста на бешенство; подразумевая травмы, поражения или других инфекционных агентов в качестве причины этих симптомов. Из-за риска аэрозольных недиагностированных инфекционных агентов, Лаборатория бешенства не использует электроинструменты или пилы. Для животных, чьи черепа непроницаемы ножницами, будут представлены три методы некропсии. Лаборатория внедрила эти методы для уменьшения потенциального воздействия инфекционных агентов, устранения ненужных манипуляций с образцом и сокращения времени обработки. Преимущества предпочтительной техники, противоположной другой, зависят от обученной индивидуальной обработки образца.

Все наземные образцы, представленные с черепами в период с 31 января 2019 года по 28 февраля 2019 года, имели информацию о наличии шеи и методе собираемого некропсии. За это время, 170 голов были некропсии с 18 видов представлены. 52% (89/170) были должным образом обезглавлены. Осталь?...

Watch this Scientific Journal Video about Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals at JoVE.com

Rabies Necropsy Techniques in Large and Small Animals

Целью этого протокола является демонстрация безопасных методов некропсии у мелких и крупных животных для получения удовлетворительных образцов тканей для тестирования на бешенство.

Методы бешенства некропсии у больших и малых животных

The New York State Department of Health (NYSDOH) Rabies Laboratory receives between 6,000 to 9,000 specimens annually and performs rabies testing for the ...

Сбор тканей для тестирования на бешенство имеет как очевидные, так и неаппадентные опасности. Техник должен использовать самые безопасные методы и носить надлежащее личное защитное оборудование. Эти протоколы обеспечивают безопасные методы некропсии без использования силовых инструментов или пил, минимизируя производство аэрозолей.Большой протокол животных также может быть выполнен в полевых условиях. Использование метода извлечения крупных образцов животных в полевых условиях устраняет проблему транспортировки головы животного весом свыше 45 килограммов в лабораторию. Большой метод животного похож на европейский протокол для транспонтиформной энцефалопатии образца поиска и может быть использован для любого исследования с использованием ствола мозга и мозжечка.Для извлечения мозжечка и ствола мозга с помощью брюшного метода, положение образца брюшной стороны вверх с носом направлены distally к задней части биобезопасности кабинета. Держа ортопедический молоток в доминирующей руке и долото советник в другой руке, положение долото на 45 градусов угол с угловой точкой на долото в V форме открытия между правой стороной височной и затылочной костей. Удар верхней части стамески молотком, пока две кости отдельно.И сделать разрез, прилегающий к основе феноидной кости. Разделив височные и затылочные кости на левой стороне образца, как только что продемонстрировано. И используйте стамеску, чтобы согнуть V область черепа вниз, чтобы разоблачить всю область ромбенцефалона мозга.Затем используйте ножницы и типсы, чтобы вычерпыть ствол мозга и мозжечок, удаляя все оставшиеся части ткани из черепа по мере необходимости. Если образец не позволяет вентрал поиска положение образца dorsally, с носом направлены distally к задней части шкафа биобезопасности. И использовать тумор tenacula для того чтобы схватить левую височную мышцу с зубами tenacula.Сожмите ручку, чтобы заблокировать зубы вокруг ткани и использовать острый резной нож, чтобы сократить височной мышцы до кости. Поверните образец на 180 градусов с тенакулой и ножом и повторите разрез на противоположной височной мышце, чтобы разоблачить череп. Верните голову к исходной ориентации и поместите стамеску под углом 45 градусов с угловой точкой к стамести по центру черепа на стыке теменной и внутрипариетальной костей.И удар в верхней части стамески молотком, пока горизонтальное отверстие не сделано на верхней половине черепа в теменной кости. Поверните образец на 180 градусов и сделайте отверстие на противоположной стороне черепа, как только что продемонстрировано. Распорежьте голову по мере необходимости, чтобы вставить точку стамески в конце первого разреза под углом 90 градусов к горизонтальному открытию и ударить долото, пока отверстие не достигнет затылочной кости.Roll образца, чтобы сделать отверстие на противоположной затылочной кости таким же образом. Отверстия в черепе должны напоминать перевернутый U.Insert зубы тенакулы в череп в нижней части вас и тянуть кости назад, чтобы разоблачить хвостовой конец мозжечка и мозжечка. Затем используйте ножницы в качестве совок, чтобы вырвать весь мозжечок из полости.И использовать ткани миппы, чтобы дразнить из ствола мозга от foramen. Для извлечения мозжечка крупного животного и ствола мозга, распоистите образец так, чтобы спинная часть черепа соединялась с поверхностью некропсии. С хвостовой частью черепа и foramen magnum перед передней частью шкафа биобезопасности.Возьмитесь за ствол мозга с помощью типсов. Вставьте модифицированный нож стилета в foramen magnum между спинным мозгом и спинномозговой околиний, насколько это возможно, и рыскать вокруг спинного мозга, чтобы отделить мозжечок и ствол мозга от спинного окония. Затем вытащите стебель из foramen с типсами.Когда нож был вставлен через foramen magnum, осторожно угол лезвие следовать вдоль черепа как можно больше и вставить металлический шпатель или нож с достаточно длинной ручкой, чтобы достичь под мозгом в пространство между нервной ткани и спинномозговой ока. Зонд вокруг мозжечка, чтобы гарантировать, что соединения с спинномозговой одеяния были разорваны. Когда meninges были полностью разорваны заранее шпатель rostrally и dorsally зачерпнуть мозжечок.Затем вычерпыть мозжечок шпателем. Во всех наземных образцах, представленных с черепами в период с 31 января 2019 года по 28 февраля 2019 года, была собрана информация о наличии шеи и методе некропсии. За это время было некропсировано 170 голов с 18 представленными видами.52% были должным образом обезглавлены. Остальные имели по крайней мере один позвонок прилагается в том числе три образца всего тела. В 75% случаев использовался брюшной метод.Из них шеи присутствовали на 49. Три крупных животных были представлены и в двух случаях, большой протокол животных был использован. Одна белка была представлена с измельченным черепом и просто отрезав кожу подвергаются мозговой ткани, чтобы ни один из продемонстрированых методов были использованы.Ткани, используемые для производства микроскопии слайдов и или извлечены из молекулярных методов при обработке нескольких животных избежать перекрестного загрязнения с помощью новых перчаток инструментов и чистой рабочей области. Будьте осторожны при выполнении этих протоколов, так как образцы могут быть инфицированы вирусом бешенства или другими зоонозными заболеваниями. Обратите внимание, что острые предметы также могут присутствовать в образцах.

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Electrode Fabrication and Implantation in Aplysia californica for Multi-channel Neural and Muscular Recordings in Intact, Freely Behaving Animals

Изготовление электрода и имплантации в Aplysia californica Для многоканального нейронных и мышечной Записи в неповрежденными, свободно Поведение животных

Recording from key nerves and muscles of Aplysia during feeding behavior allows us to study the patterns of neural control in an intact animal.  ...

Efficient Derivation of Human Neuronal Progenitors and Neurons from Pluripotent Human Embryonic Stem Cells with Small Molecule Induction

Эффективное Вывод прав нейронов и нейронов прародителей из плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека с малыми Индукционная Молекула

There is a large unfulfilled need for a clinically-suitable human neuronal cell source for repair or regeneration of the damaged central nervous system ...

Large-scale Recording of Neurons by Movable Silicon Probes in Behaving Rodents

Крупномасштабные Запись нейронов Зонды Движимое кремния в Поведение грызунов

A major challenge in neuroscience is linking behavior to the collective activity of neural assemblies. Understanding of input-output relationships of ...

Design and Assembly of an Ultra-light Motorized Microdrive for Chronic Neural Recordings in Small Animals

Проектирование и монтаж Сверхлегкий моторизованная Microdrive при хронических нейронных Recordings у мелких животных

The ability to chronically record from populations of neurons in freely behaving animals has proven an invaluable tool for dissecting the function of ...

Assessing Spatial Learning and Memory in Small Squamate Reptiles

Оценка пространственного обучения и памяти в малых чешуйчатый Рептилий

Clinical research has leveraged a variety of paradigms to assess cognitive decline, commonly targeting spatial learning and memory abilities. However, ...

High-Resolution 3D Imaging of Rabies Virus Infection in Solvent-Cleared Brain Tissue

Высокое разрешение 3D Изображение бешенства вирусной инфекции в Solvent-очищенных мозговой ткани

The visualization of infection processes in tissues and organs by immunolabeling is a key method in modern infection biology. The ability to observe and ...

Multi-Fiber Photometry to Record Neural Activity in Freely-Moving Animals

Мульти-Волокно Фотометрия для записи нейронной активности в свободно движущихся животных

Recording the activity of a group of neurons in a freely-moving animal is a challenging undertaking. Moreover, as the brain is dissected into smaller and ...

Generation of Oligodendrocytes and Oligodendrocyte-Conditioned Medium for Co-Culture Experiments

Поколение олигодендроцитов и олигодендроцитов-кондиционированных средних для совместно-культурных экспериментов

In the central nervous system, oligodendrocytes are well-known for their role in axon myelination, that accelerates the propagation of action potentials ...

Real-Time fMRI Brain Mapping in Animals

Картирование мозга фМРТ в реальном времени у животных

Dynamic fMRI responses vary largely according to the physiological conditions of animals either under anesthesia or in awake states. We developed a ...

Subretinal Transplantation of Human Embryonic Stem Cell-Derived Retinal Tissue in a Feline Large Animal Model

Субретинальная трансплантация ткани сетчатки, полученной из эмбриональных стволовых клеток человека, на модели крупного крупного животного кошки

Retinal degenerative (RD) conditions associated with photoreceptor loss such as age-related macular degeneration (AMD), retinitis pigmentosa (RP) and ...