Name: assessing therapeutic angiogenesis in a murine model of hindlimb ischemia
Uploaded: 2019-06-08T13:00:00
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Wir danken José Rino und Ténia Carvalho, Leiter der Bioimaging Facility und Histologie und Vergleichendes Pathologielabor des Instituto de Medicina Molecular Joo Lobo Antunes. Wir danken auch Vyacheslav Sushchyk von der Abteilung für Anatomie der Nova Medical School/Faculdade de Ciéncias Médicas, Universidade Nova de Lisboa.
Förderreferenz: Projekt, das von UID/IC/0306/2016 Fundaéo para a Ciéncia e a Tecnologia finanziert wird. Paula de Oliveira wird durch ein Stipendium (SFRH/BD/80483/2011) von Fundaéo para a Ciéncia e Tecnologia unterstützt.

Alle Tierverfahren stehen im Einklang mit der Richtlinie 2010/63/EU und wurden von der Institutionellen Tierschutzstelle genehmigt und von dGAV, der zuständigen portugiesischen Tierschutzbehörde, zugelassen (Lizenznummer 023861/2013).
VORSICHT: Mehrere der in den Protokollen verwendeten Chemikalien sind giftig und schädlich. Bitte verwenden Sie alle geeigneten Sicherheitspraktiken und persönliche Schutzausrüstung (Handschuhe, Labormantel, Hose in voller Länge und schuhe mit geschlossenem...

<ol>
	<li>Becker, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chapter+I:+Definitions,+epidemiology,+clinical+presentation+and+prognosis.">Chapter I: Definitions, epidemiology, clinical presentation and prognosis.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 42 Suppl 2, S4-S12 (2011).</li><li>Fowkes, F. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Peripheral+artery+disease:+epidemiology+and+global+perspectives.">Peripheral artery disease: epidemiology and global perspectives.</a> Nature Reviews Cardiology. 14 (3), 156-170 (2017).</li><li>Abu Dabrh, A. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Variations+in+surgical+procedures+for+hind+limb+ischaemia+mouse+models+result+in+differences+in+collateral+formation.">Variations in surgical procedures for hind limb ischaemia mouse models result in differences in collateral formation.</a> European Journal of Vascular and Endovascular Surgery. 40 (6), 796-803 (2010).</li><li>Brevetti, L. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exercise-induced+hyperemia+unmasks+regional+blood+flow+deficit+in+experimental+hindlimb+ischemia.">Exercise-induced hyperemia unmasks regional blood flow deficit in experimental hindlimb ischemia.</a> Journal of Surgical Research. 98 (1), 21-26 (2001).</li><li>Ministro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-dose+ionizing+radiation+induces+therapeutic+neovascularization+in+a+pre-clinical+model+of+hindlimb+ischemia.">Low-dose ionizing radiation induces therapeutic neovascularization in a pre-clinical model of hindlimb ischemia.</a> Cardiovascular Research. 113 (7), 783-794 (2017).</li><li>Pereira, A. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+angiogenesis+induced+by+human+umbilical+cord+tissue-derived+mesenchymal+stromal+cells+in+a+murine+model+of+hindlimb+ischemia.">Therapeutic angiogenesis induced by human umbilical cord tissue-derived mesenchymal stromal cells in a murine model of hindlimb ischemia.</a> Stem Cell Research Therapy. 7 (1), 145 (2016).</li><li>Azaripour, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+survey+of+clearing+techniques+for+3D+imaging+of+tissues+with+special+reference+to+connective+tissue.">A survey of clearing techniques for 3D imaging of tissues with special reference to connective tissue.</a> Progress in Histochemistry and Cytochemistry. 51 (2), 9-23 (2016).</li></ol>

Murine Modelle der CLI bestanden meist in Ligation der Femoralarterie nur distal zum Ursprung der profunda femoris 4,5,6,7,8,9. Dies hat gezeigt, dass der größte Teil der Kollateralzirkulation intakt bleibt, was den Blutfluss in die Gliedmaßen innerhalb von 7 Tagen wiederherstellt 9. Die Entfernung ...

Periphere arterielle Erkrankungen (PAD) betreffen vorwiegend die unteren Gliedmaßen. PAD wird durch Arteriosklerose verursacht, eine Arterienverstopfung, die schwere Einschränkung des Blutflusses in den unteren Gliedmaßen verursachen kann1. Intermittierende Claudication ist die erste Manifestation von PAD und bezieht sich auf Muskelschmerzen beim Gehen. CLI ist das schwerste Stadium der PAD, diagnostiziert bei Patienten, die ischämische Ruheschmerzen, Geschwüre oder Gangränzeigen 2. Patienten mit CLI haben ein hohes Amputationsrisiko, insbesondere wenn sie unbehandelt sind3. Die Revaskularisation der unteren Gliedmaßen (entweder durch offene Operation oder ein endovaskuläres Verfahren) ist derzeit der einzige Weg, um Gliedmaßenzubergung zu erreichen. Jedoch, etwa 30% der CLI-Patienten sind nicht für diese Verfahren geeignet, aus Gründen, die die Lage der Läsionen, das Muster der arteriellen Okklusion und umfangreiche Komorbidität4,5. Daher sind neue Therapien für diese ansonsten unheilbaren Patienten erforderlich, wobei die Förderung der Angiogenese die Strategie ist, die intensiver untersucht wird.
Vor tests am Menschen müssen die Wirksamkeit und Sicherheit neuer Therapien in vivo in Tiermodellen berücksichtigt werden. Mehrere Modelle wurden für die Untersuchung von CLI entwickelt, vor allem durch induzierende HinterlimbIschämie (HLI) bei Mäusen6,7,8,9,10. Diese Modelle unterscheiden sich jedoch in mehreren Aspekten, einschließlich der Art der Arterien, die ligiert und/oder ausgeschnitten sind und ob die Venen und Nerven umgeben sowie seziert werden6,7,8, 9,10. Zusammengenommen werden diese Aspekte die Schwere der Ischämie-Reperfusionsverletzung bei jedem Tier beeinflussen, was den Vergleich der Ergebnisse erschwert. Daher ist es wichtig, ein wirksames Protokoll zu entwickeln, in dem das Verfahren zur Induzieren von Ischämie und die Bewertung verschiedener Ziele standardisiert werden sollten, um zu beurteilen, ob eine bestimmte angiogene Therapie wirksam sein wird. Ein experimentelles Protokoll, das alle diese Aspekte abdeckt, würde ein umfassendes Verständnis der Mechanismen bieten, mit denen angiogene Therapien ihre Wirkung entfalten, und ein Maß für ihre Wirksamkeit bei jedem ihrer Ergebnisse. Zwei verschiedene Werke, die kürzlich von unserem Team veröffentlicht wurden, sind ein gutes Beispiel11,12, in dem verschiedene Ansätze zur Induzieren therapeutischen Angiogenese mit dem gleichen Protokoll bewertet wurden, das in diesem Abschnitt ausführlicher beschrieben wird. protokoll.
Das übergeordnete Ziel dieses Protokolls ist es, ein reproduzierbares experimentelles Modell zu beschreiben, das die Auswirkungen von CLI imitieren und die experimentelle Grundlage für eine umfassende Bewertung der funktionellen, histologischen und molekularen Wirkungen vermeintlicher angiogener Agents.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:840px;" width="839">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:251px;">7500 Fast Real-Time PCR</td>
			<td style="width:235px;">Applied Biosystems</td>
			<td style="width:132px;"></td>
			<td style="width:223px;">Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Acetone</td>
			<td>Merk</td>
			<td>1000141000</td>
			<td>Reagent; Caution - highly flammable</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Adenosine</td>
			<td>Valdepharm</td>
			<td></td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Atipamezole</td>
			<td>OrionPharma</td>
			<td></td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Barium sulphate (Micropaque)</td>
			<td>Guebert</td>
			<td>8671404 (ref. Infarmed)</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Buprenorphine</td>
			<td>RichterPharma</td>
			<td></td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Carl Zeiss Opmi-1 FC Surgical Microscope</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">cDNA RT2 PreAMP cDNA Synthesis kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td style="width:132px;">7335730</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Cryostat Leica CM</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td>3050S</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">DAB peroxidase substrate kit</td>
			<td>DAKO;Vector Laboratories</td>
			<td>K3468</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">hydrogen peroxidase</td>
			<td>Merk</td>
			<td>1072090250</td>
			<td>Reagent; Caution - nocif</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">hydrophobic pen</td>
			<td>Dako</td>
			<td>411121</td>
			<td>Reagent; Caution - toxic</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Ketamidor</td>
			<td style="width:235px;">Richterpharma</td>
			<td>CN:580393,7 630/01/12 Dfvf</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Laser Doppler perfusion imager moorLDI2-HIR</td>
			<td style="width:235px;">MoorLDI-V6.0, Moor Instruments Ltd, Axminster, UK</td>
			<td>5710</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Leica DM2500 upright brightfield microscope</td>
			<td>Leica Microsystems</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Medetor</td>
			<td>Virbac</td>
			<td>037/01/07RFVPT</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">methanol</td>
			<td>VWR</td>
			<td>UN1230</td>
			<td>Reagent; Caution - toxic and highly flammable</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Papaverine</td>
			<td>Labesfal</td>
			<td></td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Pentano Isso</td>
			<td>Merk</td>
			<td>1060561000</td>
			<td>Reagent; Caution - highly flammable</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Power SYBR&#174; Green</td>
			<td>Applied Biosystems</td>
			<td style="width:132px;">4309155</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Purified rat anti-mouse CD31</td>
			<td>Pharmingen</td>
			<td>550274</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">RNeasy Micro kit</td>
			<td>Qiagen</td>
			<td>74004</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Surgic-Pro 6.0</td>
			<td>Medtronic (Coviden)</td>
			<td>VP733X</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;width:251px;">VECTASTAIN ABC HRP Kit (Peroxidase, Rat IgG)</td>
			<td>Vectastain ABC kit; Vector Laboratories</td>
			<td>PK-4004</td>
			<td>Reagent</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Vicryl5.0/ Vicryl 6.0</td>
			<td>Medtronic (Covidien)</td>
			<td>UL202/ UL101</td>
			<td>Suture</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Zeiss PALM MicroBeam Laser Microdissection System</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy, Germany</td>
			<td>1023290916</td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Stereotaxic microscope</td>
			<td>Carl Zeiss Microscopy, Germany</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
		<tr height="38">
			<td height="38" style="height:39px;">Digital camera</td>
			<td>Linux</td>
			<td></td>
			<td>Instrument</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing therapeutic angiogenesis in a murine model of hindlimb ischemia

Kritische GliedmaßenIschämie (CLI) ist eine ernste Erkrankung, die ein hohes Risiko für eine Amputation der unteren Gliedmaßen mit sich bringt. Obwohl die Revaskularisation die Goldstandardtherapie ist, ist eine beträchtliche Anzahl von CLI-Patienten weder für chirurgische noch für endovaskuläre Revaskularisation geeignet. Angiogene Therapien entwickeln sich als Option für diese Patienten, werden aber derzeit noch untersucht. Vor der Anwendung beim Menschen müssen diese Therapien in Tiermodellen getestet werden, und ihre Mechanismen müssen klar verstanden werden. Ein Tiermodell der Hinterlimbischämie (HLI) wurde durch die Ligation und Exzision der distalen äußeren Ilias und Femoralarterien und Venen bei Mäusen entwickelt. Ein umfassendes Testgremium wurde zusammengestellt, um die Auswirkungen von Ischämie und vermeintlichen angiogenen Therapien auf funktioneller, histologischer und molekularer Ebene zu bewerten. Laser Doppler wurde für die Durchflussmessung und funktionelle Beurteilung der Perfusion verwendet. Die Gewebereaktion wurde durch die Analyse der Kapillardichte nach der Färbung mit dem Anti-CD31-Antikörper an histologischen Abschnitten des Magen-Darm-Muskels und durch Messung der Konlateralgefäßdichte nach der Diaphonisierung bewertet. Die Expression angiogener Gene wurde durch RT-PCR quantifiziert, das auf ausgewählte angiogene Faktoren ausschließlich in Endothelzellen (ECs) nach Lasererfassungsmikrodissektion von Mäusen gastrocnemius Muskeln abzielte. Diese Methoden waren empfindlich bei der Identifizierung von Unterschieden zwischen ischämischen und nicht-ischämischen Gliedmaßen und zwischen behandelten und nicht behandelten Gliedmaßen. Dieses Protokoll bietet ein reproduzierbares CLI-Modell und ein Framework für die Prüfung angiogener Therapien.

Mit dem beschriebenen Protokoll wurden Nabelschnur mesenchymale Stammzellen und niedrig dosierte ionisierende Strahlung (LDIR) als vermeintliche angiogene Therapien 11,12getestet. Laser Doppler Perfusionswerte wurden vor der Ischämie-Induktion und zu vorab festgelegten Zeitpunkten von unmittelbar nach der Ischämie-Induktion bis 45 Tage nach der Ischämie erhalten. Gewebeperfusionsmessungen per Laser Doppler wurden als farbcodierte Bilder aufgezeichnet, ohne Dur...

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Assessing Therapeutic Angiogenesis in a Murine Model of Hindlimb Ischemia

Hier wird ein kritisches Hinterlimb Ischämie-Experimentalmodell vorgestellt, gefolgt von einer Batterie funktioneller, histologischer und molekularer Tests zur Beurteilung der Wirksamkeit angiogener Therapien.

Beurteilung der therapeutischen Angiogenese in einem Murine-Modell von Hindlimb Ischemia

Critical limb ischemia (CLI) is a serious condition that entails a high risk of lower limb amputation. Despite revascularization being the gold-standard ...

Das übergeordnete Ziel dieses Experiments, unser hinterlimbische ischmia Modell ist es, das Experiment eine Grundlage für eine umfassende Bewertung der funktionellen, histologischen und molekularen Wirkung von vermeintlichen angiogenen Wirkstoffen zu beleuchten. Dieses Protokoll stellt einen Standard für die Prüfung möglicher angiogener Therapien in einem Kleintiermodell mit dem Potenzial für zukünftige Anwendungen im klinischen Kontext auf. Da die Revaskularisation bei zwanzig bis dreißig Prozent der kritischen Ischämie-Patienten nicht geeignet ist, hat sich die therapeutische Angiogenese als eine neue Strategie zur Verbesserung der Blutprofusion an der ischämischen Stelle herauskristallisiert.Dieses experimentelle Protokoll könnte ein umfassendes Verständnis der Mechanismen bieten, mit denen angiogene Therapien ihre Wirkung im Maße ihrer Wirksamkeit bei jedem ihrer Ergebnisse ausüben. Nach der Bestätigung einer fehlenden Reaktion auf Zehenkneifen in einer 22 Wochen alten C57 schwarz sechs weibliche Maus, rasieren Sie die Haare von der rechten Hinterbein und sichern Sie das Tier in der dorsalen zu cubitus Position auf einem beheizten Pad. Legen Sie das Tier unter ein Sezierendes Mikroskop.Und verwenden Sie eine Nummer elf chirurgische Skalpellklinge, um einen einen Zentimeter Hautschnitt über den Oberschenkel des rechten Hinterglieds zu machen. Blunt sezieren das subkutane Fett, um das neurovaskuläre Bündel zu belichten. Und verwenden Sie spitze Zangen, Federschere und einen ophthalmologischen Nadelhalter, um die membranöse ileofemorale Hülle zu öffnen, um die distalen äußeren Ilias- und Femoralgefäße freizulegen.Nach der Zerlegung und Trennung der Arterie und Vene vom Nerv, verwenden Sie sieben O nicht resorbierende Polypropylen Nähte, um die distale femorale Arterie und Vene und distale äußere Iliac Arterie und Vene zu ligte. Die Identifizierung der distalen äußeren Iliasarterie und die Ligation und Exzision der distalen äußeren Ilias- und Femoralarterie und Venen sind entscheidend für den Erfolg des Verfahrens. Verwenden Sie die Federschere, um das Segment der iliofemoralen Arterie und Venen zwischen den distalen und proximalen Knoten zu transsektieren.Und schließen Sie den Schnitt mit einer resorbierbaren Naht. Dann, interperitoneally liefern antisedative Lösung in das Tier und bringen Sie die Maus in seinen Hauskäfig mit Überwachung bis zur vollständigen Genesung. Um die Gastrocnemius-Muskeln zu ernten, entfernen Sie die Haut von beiden Hinterbeinen.Und verwenden Sie den Wattestäbchen, um die Haut von den Muskeln zu trennen. Halten Sie die Achillessehne, verwenden Sie die Federschere, um den Muskel von der Tibia und Fibel bis zum Kniegelenk zu trennen. Und trennen Sie den Bizeps femoris vom Magen-Darm-Muskel.Verwenden Sie die Federschere, um die Einfügungen des Magen-Darm-Muskels auf kniegelenksebene zu schneiden. Und verwenden Sie 10%trigasanth, um die geernteten Muskeln in einer queren Ausrichtung auf einer kleinen Korkscheibe zu positionieren. Dann, Snap einfrieren die Proben in flüssigen Stickstoff gekühlt isopentane für minus 80 Grad Celsius Lagerung.Für die Kapillar-Mikrodissektions-Laseraufnahme, nach Erhalt 12 Mikrometer Abschnitte der Muskelproben, fixieren Sie das Gewebe an den Dias in 50 Milliliter gekühlten reinen Aceton für fünf Minuten bei minus zwanzig Grad Celsius. Nach der Lufttrocknung und umkreisen sie jedes Exemplar mit einem hydrophoben Pen. Und rehydrieren Sie die Proben mit zwei mollaren Natriumchlorid in PBS bei vier Grad Celsius.Am Ende der Rehydratation die Proben mit dem entsprechenden primären Antikörper von Interesse bei vier Grad Celsius über Nacht beschriften. Gefolgt von zwei dreiminütigen Wälten in frischem zwei Mol-Natriumchlorid in PBS pro Waschgang. Nach der zweiten Wäsche die Abschnitte mit einem geeigneten Sekundärantikörper für dreißig Minuten bei vier Grad Celsius beschriften, gefolgt von zwei Waschungen in Natriumchlorid in PBS, wie gezeigt.Als nächstes beschriften Sie die Proben mit avidin konjugierten Peroxidase-Komplex für dreißig Minuten bei vier Grad Celsius. Gefolgt von einer Wäsche und fünf Minuten Etikettierung mit DAB Peroxidase Substrat. Am Ende der Inkubation dehydrieren Sie das Gewebe in sequenziellen eiskalten 90%Ethanol- und 100%Ethanol-Emersionen.Verwenden Sie dann ein späteres Mikrodissektionssystem, das mit einem Puls-zu-Festkörper-Laser 355 Nanometer ausgestattet ist, um 10.000 Kapillaren pro Maus zu sezieren und die dissect kapillaren in eine Mikrofugenrohr-Klebstoffkappe zu katapultieren. Wie dargestellt, wird ein vollständiger Verlust der Hinterbleibsperfusion unmittelbar nach der Hinterbder Ischämie-Induktion beobachtet. Quantitative Auswertung des Blutflusses, ausgedrückt als Verhältnis von ISC zu NISC Gliedmaßen, zeigte signifikant verbesserte Gliedmaßenblutperfusion bei Mäusen, die dem pro-angiogenetischen Reiz an den Tagen 15 und 45 nach dem HLI ausgesetzt waren.Die Quantifizierung von CD31-positiven Kapillaren in histologischen Abschnitten von Gastrocnemius-Muskelgewebeabschnitten zeigt, dass die Kapillardichte in der ischämischen als in der nicht-ischämischen Extremität größer ist. Wie erwartet. Dieser Effekt wird jedoch nach der Behandlung mit dem pro-angiogenetischen Mittel weiter verstärkt.Die Kollateralgefäßdichte steigt auch in der ischämischen Gliedmaße kontinuierlich an und dieser Anstieg ist nach exposition mit dem pro-angiogenen Reiz deutlich höher. Die Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktionsanalyse der pro-angiogenen Genexpression in CD31-positiven Endothelzellen zeigt eine deutliche Variation der Genexpression zwischen Mäusen, die dem pro-angiogenen Wirkstoff ausgesetzt sind oder nicht. Es ist wichtig, eine augenheilbe,ältere zu verwenden, um die membranöse iliofemorale Scheide zu öffnen, um ein Reißen der Arterie und Vene während der Gefäßsektion zu vermeiden.Das Gefäß reagiert auf hintere Zischämie in der leicht durch Laserdoppler-basierten Perfusionsmessungen ausgewerteten Und die histologische Quantifizierung der Kapillargefäßdichte ermöglicht es uns, die Angiogenese zu bewerten.

Research

JoVE Journal

Medicine

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A normal cornea is clear of vascular tissues. However, blood vessels can be induced to grow and survive in the cornea when potent angiogenic factors are ...

Forschung

Medizin

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Die Beurteilung Teratogene Änderungen in einem Zebrafisch-Modell der Fetal Alcohol Exposure

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

A Murine Closed-chest Model of Myocardial Ischemia and Reperfusion

Ein Maus-Closed-Brust-Modell von Myokardischämie und Reperfusion

Surgical trauma by thoracotomy in open-chest models of coronary ligation induces an immune response which modifies different mechanisms involved in ...

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Modell Netzhautablösung in Nagetiere durch subretinale Injektion von Natriumhyaluronat

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Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Reproduzierbare Paraplegie von thorakalen Aorta Occlusion in einem Mausmodell der Spinal Cord Ischämie-Reperfusion

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Einem Mausmodell der myokardialen Ischämie-Reperfusion Injury durch Ligation des linken vorderen absteigenden Arterie

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Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Murine Modell der intestinalen Ischämie-Reperfusionsschaden

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

Methods for Acute and Subacute Murine Hindlimb Ischemia

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Ein chronischer kardialer Ischämie-Modell bei Schweinen, die mit einem Ameroid Constrictor

Cardiovascular disease remains the number one cause of mortality in the United States. There are numerous approaches to treating these diseases, but ...