Name: murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery
Uploaded: 2019-08-16T13:00:00
Duration: 8 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery at JoVE.com

Denne model blev udviklet med støtte fra Swiss National Science Foundation (tilskud 310030_162629 til LL) og afdelings midler fra tjenester af thorax kirurgi og intensiv pleje medicin på Lausanne Universitets Hospital. JL er modtager af et stipendium fra Emma Muschamp Foundation. Vi anerkender den afgørende støtte af dyrlæger og dyr facilitet personale på fakultetet for biologi og medicin på Lausanne Universitet. Vi takker Dr. Giuseppina Milano fra service af hjertekirurgi af Lausanne Universitets Hospital og Dr. Alexandre Sarre fra kardiovaskulær vurdering Facilty af Lausanne University for deres tekniske hints.

Dyreforsøg, der er beskrevet i denne protokol, er blevet revideret og godkendt af den animalske etiske komité i kantonen Vaud.
Bemærk: til disse eksperimenter brugte vi mandlige C57Bl/6J mus, der vejede mellem 25 g og 30 g og en alder på 8-12 uger. Mus blev fodret Chow pellets og vand ad libitum og opdrættet under konventionelle betingelser. Kirurgisk udstyr blev tidligere steriliseret. Eksperimententer skal bære sterile kirurgiske handsker og en kirurgisk maske for at begrænse kontaminering og postoperative infektioner.
1. anæstesi og trakeal kanyle.
<ol><li>Vejer musen til at bestemme dosering af bedøvelsesmidler, post-operative analgetiske medicin og tidevands volumen af ventilatoren. Forvarm varmepuden ved 37 °C. Operations opsætningen er afbildet i figur 1.</li>
	<li>Injicer mus intraperitonealt med en blanding af ketamin og xylazin i en dosis på 80 mg/kg og 10 mg/kg hhv.</li>
	<li>Barberer hurtigt musens pels på halsen og den venstre side af ribburet ved hjælp af en elektrisk barbermaskine.</li>
	<li>Check dybden af anæstesi ved at klemme hale og/eller bagfødder og bosætte dyret i en liggende position på varmepuden. Placer en lille gaze komprimere under hovedet af dyret for at undgå overophedning af øjnene. Påfør okulær gel for at undgå tørhed i øjet.</li>
	<li>Fastgør de fire lemmer med klæbe tape på overfladen af varmepuden. Pass en løkke af 5-0 silke sutur under de øvre fortænder og stick ekstremiteten af løkken med tape på varmepuden. Dette vil holde dyrets mund åben og lette kanylering.</li>
	<li>Påfør hårfjerning creme på de forbarberede områder og forsigtigt massere med en vatpind i 1 min. tør overskydende pels og creme med en gaze. Brug dråber af 0,9% saltvandsopløsning og gaze til at rense incisionsområder. Påfør stykker af steril gaze til den barberede hals og thorax og suge dem i iodopovidon. Bemærk: Vi anbefaler anvendelse af et lokalt bedøvelsesmiddel (lidocain eller bupivacain) til indsnit sites.</li>
	<li>Indstil ventilatoren ved et tidevands volumen på 7 mL/kg og ventilations hastigheden på 140 slag/min. Bemærk: fra nu af arbejde under en mikrokirurgi stereomicroscope.</li>
	<li>Hold huden på midten af halsen og udføre et snit på 0,5 cm efter en caudal/cephalic linje ved hjælp af lille saks. Adskille de lapper af spytkirtel, derefter forsigtigt adskille fascia af sternohyoid muskel med buede dissekere Tang indtil strubehovedet og luftrør er synlige. Sikre kanter af åbningen med retraktorer fastgjort til elastiske bånd. Bemærk: gør dette trin uden indsnit af musklerne. En uddannet operatør vil være i stand til at intubate dyret via mundhulen uden visualisering af luftrør gør dette trin valgfrit.</li>
	<li>Hold forsigtigt tungen sidelæns. Med pincet indsættes den blundede indernål på en 16 G kanyle i luftrøret. Visualiser korrekt indsættelse i luftrøret gennem halsen incision.</li>
	<li>Tilslut kanylen til ventilatoren og sørg for korrekt ventilation ved at placere udstødnings slangen i vand. Tilstedeværelsen af bobler indikerer korrekt intubation. Bemærk: for at holde væv våd under driftsted steril gaze gennemblødt med 0,9% saltvandsopløsning og iodopovidon på halsen incision. Kontrollér fugt under proceduren.</li>
</ol>2. ligation af LAD koronararterie
<ol><li>Release venstre forreste pote fra kanalen tape og forsigtigt flytte musen til højre side decubitus position. Fastgør den venstre forreste ekstremitet, når dyret er i den rigtige position.</li>
	<li>Identificer linjen mellem venstre pectoralis mindre og større muskler og lav en skrå hud indsnit på 1 cm med saks efter linjen. Med dissekere Blunt Micro saks, separat fascia af pectoralis muskler uden incision. Vedligeholde pectoralis muskler adskilt med retraktorer fastgjort til elastiske bånd.</li>
	<li>Indstil ventilatoren med et positivt slut-ekspiratorisk tryk (PEEP) på 3 cm H2O.</li>
	<li>Åbn brysthulen ved at bruge Blunt pincet på 3Rd interkostale rummet mellem 3Rd og 4th ribben. Undgå at berøre intern thorax arterien, da der er risiko for blødning. Berør ikke hjerte eller lunge. Påfør to retraktorer i ribburet, en på hver rib (figur 2a).</li>
	<li>Med en buet fine pincet, fjerne forsigtigt perikardiet og trække det fra hinanden uden at skade hjertet og lungerne.</li>
	<li>Find venstre forreste faldende (Lad) koronararterie. Lad arterien vises som en overfladisk lys rød linje, der løber fra kanten af venstre øremuslingen mod spidsen.</li>
	<li>Brug en nål holder til at passere en 7-0 silke sutur under LAD 2 til 3 mm under venstre Atria. Træk silke langsomt for at undgå at rive hjertet væv. Binde ligatur med tre knob. Den nederste venstre del af venstre ventrikel vil straks blive bleg ved ligering (figur 2b-E). Bemærk: det er vigtigt ikke at gå for dybt ind i ventrikel hulen eller at forblive for overfladisk. For Sham-opererede dyr, trække sutur silke under drengen og fjerne det langsomt undgå væv rive.</li>
	<li>Slip rib retraktorerne, hold 3Rd rib med pincet og lav to passerer med en 6-0 silke sutur under 3Rd og 4th ribben. Forsigtig: du må ikke perforere hjertet eller lungerne. Stram ikke knuder endnu.</li>
	<li>Sæt tre dråber 37 °C 0,9% saltvandsopløsning på åbningen og luk udstødningsrøret for 2 eller 3 respiratoriske cyklusser for at oppuere lungerne korrekt. Stram suturen og fastgør den med to kast.</li>
	<li>Frigive retraktorer holde muskler og hjælpe dem med at hente deres korrekte sted.</li>
	<li>Luk thorax hud med to masker på 5-0 sutur silke og fastgør med to kast. Luk halsskind med en søm på 5-0 sutur silke og fastgør med to kast.</li>
</ol>3. post operative procedurer og opfølgning.
<ol><li>Fjern klæbebånd fra lemmer. Sæt en komprimere på varmepuden på højre side af dyret. Bemærk: den samlede procedure fra anæstesi til dette punkt bør ikke tage længere end 40-45 min. eventuelt injicere IP 0,2 ml Atipamezol i en koncentration på 0,1 mg/ml for at fremskynde vågne op proces.</li>
	<li>Intraperitonealt injicerer 0,3 mL 5% glucoseopløsning forvarmet ved 37 °C.</li>
	<li>Drej forsigtigt dyret på ventrale decubitus på den komprimerede pad.</li>
	<li>Stop ventilator; Hvis musen spontant ånder, forsigtigt fjerne kanyle.</li>
	<li>Injicer subkutant (SC) 0,1 mg/kg buprenorphin og sæt mus i et forvarmet bur opvarmet ved 30 °C og ventileret med en 100% O2 i mindst 1 h. Overvåg mus for enhver livstruende tilstand, såsom overdreven dyspnø eller blødning.</li>
	<li>I løbet af de to første dage efter operationen, Monitor mus to gange dagligt. Injicér SC 0,1 mg/kg buprenorphin to gange dagligt. Intraperitonealt injicerer 0,3 mL 0 af 5% glucoseopløsning to gange dagligt. Giv mus med blød diæt og vand ad libitum. Opvarmer dyret, hvis det er nødvendigt. Bemærk: ud over opioider bør dyrene være forsynet med nonsteroide antiinflammatoriske lægemidler, der blandes i kosten eller fortyndes i drikkevand.</li>
	<li>Fra dag tre indsprøjtes SC 0,1 mg/kg buprenorphin to gange dagligt, hvis dyret udviser usædvanlige tegn på generel udseende, respiration eller adfærd. Intraperitonealt injicerer 0,3 mL 5% glucoseopløsning to gange dagligt, hvis dyret stadig taber vægt. Opvarmer dyret, hvis det er nødvendigt. Bemærk: strengt anvende foruddefinerede afbrydelses kriterier, når det er nødvendigt for at undgå overdreven lidelse. Normalt taber mus vægt op til dag 3 og 4 og derefter tage på i vægt. Efter syv dage, mus normalt hente præ-operation vægt.</li>
</ol>

<ol>
	<li>GBD 2016 Causes of Death Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=regional,+and+national+age-sex+specific+mortality+for+264+causes+of+death,+1980-2016:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study.">regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study.</a> Lancet. 390 (10100), 1151-1210 (2017).</li><li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammatory+response+in+myocardial+injury,+repair,+and+remodelling.">The inflammatory response in myocardial injury, repair, and remodelling.</a> Nature Reviews Cardiology. 11 (5), 255-265 (2014).</li><li>Lugrin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+edge:+IL-1alpha+is+a+crucial+danger+signal+triggering+acute+myocardial+inflammation+during+myocardial+infarction.">Cutting edge: IL-1alpha is a crucial danger signal triggering acute myocardial inflammation during myocardial infarction.</a> Journal of Immunology. 194 (2), 499-503 (2015).</li><li>Hashmi, S., Al-Salam, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+and+myocardial+ischemia-reperfusion+injury:+a+comparison.">Acute myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury: a comparison.</a> International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 8 (8), 8786-8796 (2015).</li><li>van Zuylen, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+models+in+NOD/Scid+mice+for+cell+therapy+research:+permanent+ischemia+vs+ischemia-reperfusion.">Myocardial infarction models in NOD/Scid mice for cell therapy research: permanent ischemia vs ischemia-reperfusion.</a> Springerplus. 4, 336 (2015).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction.">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (86), (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+Anterior+Descending+(LAD)+Coronary+Artery+Ligation:+An+Improved+and+Simplified+Model+for+Myocardial+Infarction.">Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), (2017).</li><li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-ligation:+a+murine+model+of+myocardial+infarction.">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), (2009).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57BL/6+mouse+strains:+implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Model+of+Myocardial+Ischemia-Reperfusion+Injury.">A Murine Model of Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Parapanov, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+5+deficiency+exacerbates+cardiac+injury+and+inflammation+induced+by+myocardial+ischaemia-reperfusion+in+the+mouse.">Toll-like receptor 5 deficiency exacerbates cardiac injury and inflammation induced by myocardial ischaemia-reperfusion in the mouse.</a> Clinical Science. 129 (2), 187-198 (2015).</li><li>Curaj, A., Simsekyilmaz, S., Staudt, M., Liehn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+invasive+surgical+procedure+of+inducing+myocardial+infarction+in+mice.">Minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), e52197 (2015).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), H1291-H1300 (2005).</li><li>Duerr, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myocardial+remodeling+between+cryoinfarction+and+reperfused+infarction+in+mice.">Comparison of myocardial remodeling between cryoinfarction and reperfused infarction in mice.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 961298 (2011).</li></ol>

Forfatterne har intet at afsløre.

Det første kritiske trin i denne procedure er helt sikkert intubation. Vi bruger den afrundede indre nål på et 16 G kateter som et trakeal rør. Vi anbefaler ikke at bruge denne opsætning med mus, der vejer mindre end 22 g. Med denne opsætning kan det være svært at intubate mus korrekt med mindre legemsvægt uden at beskadige luftrøret. Et andet kritisk punkt er at begrænse indsnit lavet til musklen, mens udsætte luftrør og ribbur. Reduktion af vævsskader er af stor betydning, især når man studerer inflammatoriske processer efter MI. Det er derfor, vi foretrækker blid spredning af muskler og ribben med pincet og retraktorer8,9. Vi bruger ikke elektrisk svitse til at kontrollere blødning10. Dette kan forårsage iatrogene forbrændinger og favorisere infektioner. Både traumer og infektioner kan bias inflammatoriske udlæsninger. Anvendelse af en extrinsisk PEEP på 3 cm H2O ved at kaste ventilations udstødningen ind i et vandrør begrænser ekspiratorisk alveolær kollaps under thoracotomi. Lokalisering af dreng er et andet kritisk skridt, og man bør huske på, at anatomi af kranspulsårerne kan variere afhængigt af stammen og genotype af musen11. Det kræver en vis erfaring til at visualisere drengen, men placere suturen direkte 2-3 mm under venstre Atria som beskrevet i proceduren skal tillade korrekt positionering af ligationen. Øjeblikkelig misfarvning af store portioner af venstre ventrikel under suturen bekræfter nøjagtigheden. Endelig, kunstigt anvende Auto-PEEP ved at blokere ventilation udstødning til 2-3 respiratoriske cyklusser under brystet lukning tillader en forbigående hyperinflation af lungerne, der vil hjælpe jage luften fra thorax hulrum12. Vi udfører med vilje ikke en thoracentesis som vist i 9,10. På denne måde begrænser vi risikoen for lunge-og hjerte skader og undgår overdreven vævsskade eller perforering.
Myokardieiskæmi-reperfusion (I/R) er en beslægtet kirurgisk model, der efterligner restaurering af koronar blodgennemstrømning, der er gjort for at MI patienter i klinikker. Under i/R-modellen udføres en forbigående okklusion af koronararterie ved at stramme et stykke slange på drengen for en varighed på 20 til 45 min8,13. Derefter frigives okklusionen for at tillade reperfusion af myokardiet i den ønskede varighed. Denne enkle ændring anvendes på vores protokol kan nemt gøre det til en i/R model4,8,14,15. Infarkt kan bekræftes ved en blodprøve for hjertets troponin T8,10 eller ved ekkokardiografi15.
MI afviger fra I/R-modellen, fordi reperfusion i sig selv inducerer en skade. MI inducerer mere vævsnekrose og apoptose er mere udtalt i reperfbrugt myokardiet5. Kinetik af inflammatoriske celler infiltration er også forskellige mellem i MI og IR med en forsinket myokardial infiltration af immunceller i MI7. Størrelsen og positionen af det infarcede område vil også variere mellem permanent ligering og i/R-modeller15. Holde dette i tankerne, skal man være forsigtig med at vælge en relevant model, da I/R og permanente MI modeller ikke er ækvivalente. En anden murine model af myokardieinfarkt er cryoinfarkt model. Anvendelse af en kryogen sonde på LV forreste væg inducerer frysning af ventrikel væv og blodgennemstrømning anholdelse i drengens arterie. Denne teknik adskiller sig dog fra mi og I/R teknikker vedrørende timing og amplitude af remodeling og inflammatoriske svar16,17.
Variabilitet er en begrænsning som for enhver kirurgisk procedure. Denne variation afhænger af biologiske forskelle. Et godt eksempel er variationen i koronararteriel arrangement i mus11. Det er også afhængig af eksperimententer færdigheder. Det er værd at nævne, at det er obligatorisk at uddanne forsøgslederen for at opnå stabile resultater med denne model. En veluddannet eksperimententer kan nemt producere infarkt størrelser, der er reproducerbare (figur 3a-B). Dødeligheden af modellen afhænger af placeringen af drengen, varigheden af forsøgene (dage, uger), musestamme og genotyper. Typerne af bedøvelsesmidler og analgetika kan også påvirke udfaldet af forsøgene med formodede kardioprotektive eller kardiodepressant effekter. I vores hænder, denne model har en global dødelighed på 25-30%. Denne dødelighed omfatter spontane dødsfald og ofre inden eksperimentet er afsluttet, uanset stammer og eksperimentets varighed. De fleste dødsfald eller offer er mellem den anden og fjerde dag efter operationen. Anvendelse af en streng smertebehandling og opfølgning af dyrene kan reducere dødeligheden.
Her præsenterer vi repræsentative resultater af infarkt størrelse analyseret ved hjælp af TTC farvning og ekspression af protein og gener, der er involveret i inflammatoriske eller fibrotiske processer i LV af Western blot og real-time PCR henholdsvis (figur 3c-G). Det er også muligt at måle mange af disse parametre ved enzym relateret immunosorbent assay (ELISA) eller enzymatiske analyser. Selvfølgelig, i overensstemmelse med hypotese, der skal testes, kan denne metode efterfølges af enhver funktionel analyse af ultralyd, MRI eller intraventrikulært kateter måling af tryk og volumen. Det er også muligt at udtrække hjerte og yderligere undersøge hjertets cellebiologi på isolerede celler. Samlet, MI model med permanent ligering af drengen koronararterie er særligt nyttigt at evaluere inflammatoriske og fibrotiske processer, sårheling og ændringer i hjertets funktion efter myokardieinfarkt.

Akut myokardieinfarkt (MI) er det mest alvorlige udtryk for iskæmiske hjertesygdomme (IHD). IHD er den førende årsag til morbiditeter og død på verdensplan, især i de vestlige lande1. Det har derfor en enorm økonomisk indvirkning på sundhedssystemerne2. MI er karakteriseret ved okklusion af en koronararterie ved aterosklerotisk plaque og den efterfølgende arrestation af blodgennemstrømning i store dele af myokardiet. Mangel på ilttilførsel i myokardiet fører til iskæmisk død af kardiomyocytter. Denne patologiske tilstand udløser reaktioner i ventrikel vævet, der i sidste ende fører til mangler i ventrikulære funktioner, remodeling og hjertesvigt3. MI er en kompleks patofysiologisk tilstand, der involverer flere og indviklede biologiske processer omfattende reguleret celledød, reaktion på oxidativt stress, inflammation, sårheling, fibrose og ventrikel remodeling. Nogle af disse biologiske reaktioner er modelleret som individuelle processer in vitro som nekrose-induceret frigivelse af skader-associerede molekylære mønstre og tilhørende inflammatoriske responser4. Disse forenklede modeller er afgørende for at forstå MI. Men kun en in vivo-model kan give et realistisk billede af de biologiske processer kompleksitet, der er involveret i respons på MI.
Selv om modeller af MI i større dyr som svin kan mere nøje relatere til menneskelig Patofysiologi af MI, styrken af murine modeller ligger i de muligheder, der tilbydes af genteknologi, der er mere avancerede end i andre pattedyrarter. Andre ikke ubetydelige aspekter er de relative lave omkostninger og enkelheden i Operations opsætningen.
Det er værd at nævne, at modeller af iskæmi-reperfusion af myokardiet kan udvise forskellige resultater end permanente MI-modeller. Biologiske processer som den type celledød, kvalitet/amplitude eller kinetik af inflammatoriske og sårheling svar i myokardial væv kan variere alt efter modellen5,6,7. Men denne protokol af permanent koronar okklusion kan nemt tilpasses for at opnå en ischemia-reperfusion model.
Denne metode er relevant for undersøgelser relateret til den fysiologiske fysiologi af MI uden reperfusion og tillader overvågning af patologiske processer, der opstår fra koronar okklusion (minutter) til sent stadie hjerteinsufficiens (uger) på det lokale hjerte væv og systemisk Niveauer.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:588px;" width="589">
	<tbody>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">1 CC Syringe, Omnifix-F</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">9161406V</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">30G- Needle</td>
			<td style="width:73px;">BD Microlance 3</td>
			<td style="width:123px;">304000</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:73px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Betadine 60 ml</td>
			<td style="width:73px;">MundiPharma</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Blunt Retractors</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">18200-09</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Castroviejo Needle Holder Straight with Lock</td>
			<td style="width:73px;">Roboz</td>
			<td style="width:123px;">RS-6416</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Cotton Swabs</td>
			<td style="width:73px;">Applimed SA</td>
			<td style="width:123px;">6001109</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Dissecting Scissors, Curved</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap</td>
			<td style="width:123px;">BC603R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Electrical Razor</td>
			<td style="width:73px;">Remington</td>
			<td style="width:123px;">HC720</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Glucose 5% B.Braun</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">531032</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Hair Removal Cream, Veet</td>
			<td style="width:73px;">Silk &#38; Fresh Tech.</td>
			<td style="width:123px;">8218535</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Iris Dissecting Forceps Full Curved</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap</td>
			<td style="width:123px;">&#160;OC022R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Ketasol 100 (100 mg/ml)</td>
			<td style="width:73px;">Dr. E. Graeub AG</td>
			<td>QN01AX03</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Micro Scissors, Curved Blunt/Blunt</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap&#160;</td>
			<td style="width:123px;">FM013R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">NaCl 0.9% B. Braun</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">534534</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Short Fixator</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">18200-01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 5-0, BB</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">K880H</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 6-0, P-1</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">639H</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 7-0,BV-1</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">K804</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Student Dumont #7 Forceps</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91197-00</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Student Fine Forceps-Angled</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91110-10</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Surgical Gloves</td>
			<td style="width:73px;">Weitacare</td>
			<td style="width:123px;">834301</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Surgical heating pad</td>
			<td style="width:73px;">Personalized setting</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Temgesic&#160; sol 0.3 mg/ml&#160; Buprenorphine</td>
			<td style="width:73px;">Indivior Schweiz AG</td>
			<td style="width:123px;">N02AE01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Tracheal tube inner needle of an 16G i.v. cat</td>
			<td style="width:73px;">Abbocath-T</td>
			<td style="width:123px;">G714-A01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Universal S3 Microscope, OMPIMD</td>
			<td style="width:73px;">Zeizz</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Ventilator, MiniVent Model 845</td>
			<td style="width:73px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:123px;">73-0043</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Viscotears</td>
			<td style="width:73px;">Alcon</td>
			<td style="width:123px;">1551535</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Xylasol (1mg/ml)</td>
			<td style="width:73px;">Dr. E. Graeub AG</td>
			<td>QN05CM92</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery

Myokardieinfarkt (MI) og akutte koronarsygdomme er blandt de mest fremtrædende dødsårsager i befolkningen med vestlig livsstil. Murine modeller af mi med permanent ligering af venstre-anterior faldende (dreng) koronararterie tæt efterligner mi hos mennesker. Murine modeller drage fordel af den omfattende genteknologi til rådighed i dag. Her foreslår vi en reproducerbar murine kirurgisk model af myokardieinfarkt ved permanent LAD koronar ligation. Vores teknik omfatter anæstesi med ketamin/xylazine, der hurtigt kan vendes ved administration af en antagonist, intubation uden tracheotomi til mekanisk assisteret ventilation, ventilation med anvendelse af extrinsisk positiv end-ekspiratorisk tryk (PEEP) for at undgå alveolær kollaps, en thoracotomi metode begrænse til de mindste kirurgiske læsioner foretaget til skeletmuskulatur, og lunge inflation uden thoracentesis. Denne metode er sparsomt invasiv, reproducerbar og reducerer dødelighed og komplikationer efter operationen.

Mus blev aflives syv dage efter operationen. Dyrene blev bedøvet med 80 mg/kg ketamin og 10 mg/kg xylazin. Under anæstesi blev blodet trukket fra Vena cava og hjertet blev udtaget. Atria blev fjernet, myokardiet blev vasket i iskold PBS. Ved målinger af iskæmiske områder blev hjerter frosset ved-20 °C i 40 min, derefter skåret og plettet i 20 min ved 37 °C i PBS, der indeholder 2% triphenyltetrazoliumchlorid (TTC). Hjerte skiver blev fikseret natten over i 4% Buffered PARAFORMALDEHYD opløsning ved stuetemperatur. Iskæmiske områder forblev uplettet mens levende væv blev farvet i rødt på grund af tilstedeværelsen af dehydrogenaser. Iskæmiske områder blev beregnet som procentdel af det hvide område af den venstre ventrikel (LV) med et billedbehandlingsprogram (figur 3a, B). For biokemiske og molekylære biologi analyser blev hjerter frosset i flydende nitrogen. Efter slibning hjerter på flydende kvælstof orgel pulver blev brugt til protein og mRNA ekstraktion. Omfanget af fibrose i det myokardievæv af infarkt hjerte blev vurderet af Western blot analyse af alpha glat-muskel actin (αSMA) og SMAD2 fosforylering, som er henholdsvis større udlæsninger af myofibroblaster og af TGFβ signalering aktivering ( Figur 3c). mRNA udtryk for Tgfb, og downstream mål ctgf, postn og Il11 er alle indikatorer for myokardial fibrose. Dette blev påvist ved realtidsanalyse af polymerase-kædereaktion (PCR) (figur 3D).
Pro-inflammatoriske signalerings veje og ekspression af pro-inflammatoriske gener blev typisk fundet aktiveret inden for den første uge efter myokardieinfarkt. Fosforylering af NF-κB P65 transkriptionsfaktor er et kendetegn for inflammation og blev observeret i hele myokardiet ekstrakter af MI-musene (figur 3E). mRNA ekspression af pro-inflammatoriske gener Il1b, Il6 og Cxcl10 (figur 3F) og monocytter/makrofager markører Cd14 og Mertk blev analyseret af real-time PCR (figur 3g). Bemærk, at der var en variabilitet i omfanget af NF-κB P65 og SMAD2 fosforylering (figur 3c,E, Lanes 4-7). Denne variabilitet afhænger i høj grad af størrelsen af infarktet.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig1.jpg"> Figur 1 : Beskrivelse af Operations opsætningen. A) kirurgisk opsætning omfatter en modificeret varmepude, en ventilator og retraktorer, der er fastgjort til elastiske bånd. B) saks, pincet og nåle holder, der anvendes under operationen. C) nærbillede af mini-retraktorerne. Ikke vist: kirurgisk stereomikroskop. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig1large.jpg" target="_blank">Venligst klik her for at se en større version af dette tal.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig2.jpg"> Figur 2 : Repræsentative billeder af operationen og drengenes ligation. (A) åbnet brystet med retraktorer. Den venstre ventrikel var tydelig. Top, venstre og bund retraktorer holdt ribbur og højre retraktor holdt pectoralis musklen. (B) nålen blev PASSERET under drengen. (C) sutur silke blev PASSERET under drengen, ind i venstre ventrikel. (D) enkelt sting på drengen. (E) afslutningen af ligations proceduren, suturen blev sikret med tre knob. F) repræsentation af et forreste syn på hjertet. Placeringen af LAD ligationen var 2-3 mm under venstre Atria og over diagonal gren af drengen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig2large.jpg" target="_blank">Venligst klik her for at se en større version af dette tal.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig3.jpg"> Figur 3 : Fibrose og inflammation i hele myokardiet ekstrakter syv dage efter operationen. (A) repræsentative billeder af TTC farvning af en skåret infarkted hjerte syv dage efter operationen. Bleg iskæmiske områder forblev ufarvet og hvidt, mens levende væv blev farvet rødt. Ligationen var synlig på den tredje skive fra venstre. (B) størrelsen af de iskæmiske områder af fem hjerte hjerter blev målt ved hjælp af TTC farvning teknik. Resultaterne var den procentdel af det hvide område af venstre ventrikel (LV). (C) Western blot analyse af SMAD2 fosforylering og alpha-SMA udtryk i hele myokardiet som indikatorer for fibrose. D) mRNA-ekspression af tgfb, ctgf, postn og Il11 i hele myokardiet ekstrakter. (E) Western blot af NF-κb P65 fosforylering i hele myokardiet ekstrakter. F) mRNA-ekspression af pro-inflammatoriske gener Il1b, Il6 og Cxcl10 i hele myokardiet ekstrakter. G) mRNA-ekspression af Cd14 og mertk som indikator for tilstedeværelsen i myokardiet af henholdsvis monocytter/makrofager og fagocytiske makrofager. N = 3 i Sham og N = 4 i MI-gruppen. For mRNA-udtryks analyse var udtrykket i forhold til det endogene kontrol Rps18, og gruppe sammenligninger var ikke-parrede Student's T-tests, * p ≤ 0,05, * * p ≤ 0,01, * * * p ≤ 0,001. I paneler B, D, F og G fejllinjer repræsenterer standardafvigelser.  <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig3large.jpg" target="_blank">Venligst klik her for at se en større version af dette tal.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery at JoVE.com

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Heri beskriver vi en kirurgisk procedure, der viser, hvordan man opnår permanent ligering af venstre-anterior faldende koronararterie i mus. Denne model er af stor relevans for at undersøge patofysiologien af myokardieinfarkt og de samtidige biologiske processer.

Murine myokardieinfarkt model ved hjælp af permanent ligation af venstre anterior faldende koronararterie

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Denne murine model af myokardieinfrydning tillader overvågning af patologiske processer, der opstår fra koronar okklusion til sene stadier hjertesvigt på det lokale hjertevæv og systemiske niveauer. Denne metode er kompatibel med enhver udlæsning, der i øjeblikket anvendes i hjertebiologi og fysiologi. Desuden nyder det godt af den enorme mangfoldighed af murine genetiske modeller.Erhvervelse af tilstrækkelige kirurgiske færdigheder kan tage tid at mestre. Denne procedure er bedst lært af trin for trin med en erfaren forsker. Visuel demonstration af denne murine model giver mulighed for deling af hints, der kan hjælpe med den kirurgiske procedure og fremskynde læringsprocessen.Brug en elektrisk barbermaskine til hurtigt at barbere en bedøvet, 25-til-30-gram, mand, C57-Black/6 mus på halsen og venstre side af brystkassen. Bekræft manglende reaktion på tåspidsænker. Påfør salve til dyrets øjne.Placer musen i liggende position på en varmepude, og placere en lille gaze komprimere under hovedet for at undgå overophedning øjnene. Fastgør lemmerne med tape. Pass en løkke på 5-0 silkesutur under de øverste fortænder, og fastgør løkkens ende på varmepuden for at holde munden åben under kanylen.Påfør depilatoriske creme til de forbarberedte områder, og masser forsigtigt med en vatpind i et minut. Fjern den overskydende pels og creme med gaze, og rengør den eksponerede hud med dråber på 0,9% saltvandsopløsning og gaze. Påfør stykker af steril gaze til barberet hals og brystkasse, og suge gaze med iodopovidon.Ventilatoren indstilles til et tidevandsvolumen på syv milliliter pr. kg og en ventilationshastighed på 140 slag i minuttet. Flyt musen under et mikrokirurgistereomikroskop. Holde huden på midten af halsen, foretage en 0,5-centimeter snit langs caudal / cephalic linje, og adskille lapper af spytkirtel.Brug buede kraftbepind til forsigtigt at adskille fascia af sternohyoid musklen, indtil strubehovedet og luftrøret er synlige. Derefter fastgøres åbningens kanter med retraktorer fastgjort til elastikker. Træk derefter forsigtigt tungen sidelæns, og brug vicessrene til at indsætte den afstumpede indernål på en 16-gauge kanyle i luftrøret.Visualiser en korrekt indføring i luftrøret gennem halsens snit, og tilslut kanylen til ventilatoren. Placer sterile 0,9% saltvand suppleret med iodopovidon-gennemblødt gaze på snittet for at holde væv vådt under operationen. Derefter placeres udstødningsslangen i vand.Tilstedeværelsen af bobler indikerer en vellykket intubation. For ligation af venstre forreste faldende koronararterie, eller LAD, forsigtigt flytte musen ind i højre side decubitus position, og resecure venstre forreste lemmer i den nye position. Identificer linjen mellem venstre pectoralis mindre og store muskler, og gøre en skrå en centimeter hud snit langs linjen.Brug stump dissekering mikro saks, adskille fascia af pectoralis muskler uden incising væv, og bruge retraktorer fastgjort til elastikker for at opretholde adskillelsen. Indstil ventilatoren med et positivt end-expiratory tryk på tre centimeter vand. Brug stumpe pincet til at åbne brysthulen på det tredje interkostale mellemrum mellem den tredje og fjerde ribben.Placer to retraktorer i brystkassen, en på hvert ribben, og brug en buet fin kraftbehændelse til forsigtigt at fjerne hjertesækken uden at skade hjertet og lungerne. Find LAD som en overfladisk lys rød linje, der løber fra kanten af venstre aurikel mod toppen. Brug en nålholder til at passere en 7-0 silkesutur under LAD to til tre millimeter under venstre atria.Trække silke langsomt for at undgå at rive hjertevæv, binde ligatur med tre knob. Den nederste venstre del af venstre hjertekammer vil straks vende bleg på ligation. Nu frigive ribben retractors, og holde det tredje ribben med scer, gøre to passerer med en 6-0 silke sutur under den tredje og fjerde ribben.Placer tre dråber 37-graders Celsius 0,9% saltvandsopløsning på åbningen, og luk udløbsudstødningsrøret i to eller tre respiratoriske cyklusser for at puste lungerne korrekt op. Stram og fastgør suturen med to kast, og slip retraktorerne, der holder musklerne, hvilket hjælper musklerne med at vende tilbage til deres korrekte anatomiske placering. Luk derefter brystskind med to sting og to kast 5-0 sutur silke.Luk halsen huden med en søm af 5-0 sutur silke og to kast. Ved afslutningen af proceduren skal du fjerne båndbåndene fra lemmerne, forsigtigt dreje dyret til ventral decubitus på trykpuden, og placere en komprimere på varmepuden på højre side af dyret. Intraperitoneally injicere 0,3 milliliter 37-graders-Celsius opvarmet 5% glukoseopløsning.Stop ventilatoren. Hvis musen spontant ånder, forsigtigt fjerne kanylen. Subkutanely injicere 0.1 milligram per kg buprenorphin.Placer musen i en 30-graders Celsius bur ventileret med 100% ilt i mindst en time med overvågning. I løbet af de to første dage efter operationen, give musen med en blød kost og vand ad libitum, opvarmning dyret efter behov. Syv dage efter operationen forbliver de iskæmiske områder uindgroede af triphenyltetrazoliumchlorid, mens de levende vævspletter røde på grund af tilstedeværelsen af dehydrogenaser.De iskæmiske områder kan derefter beregnes som procentdelen af hvide område af venstre hjertekammer i en billedbehandling software program. Western blot analyse for alpha-glat muskel actin og SMAD2 fosforylering, som er henholdsvis større udlæsninger af myofibroblaster og for at omdanne vækstfaktor beta signalering aktivering, kan bruges til at bestemme omfanget af fibrose i myokardievæv af de infarkte hjerter. Real-time polymerase kædereaktion analyse af omdanne vækstfaktor beta og dens downstream mål mRNA udtryk kan også udføres for at vurdere tilstedeværelsen af myokardiefibrose.Pro-inflammatoriske signalering veje og udtryk for pro-inflammatoriske gener er typisk viser sig at være aktiveret inden for den første uge efter myokardieinfarkt. mRNA udtryk for pro-inflammatoriske gener og monocyt / makrofag markører er også observeret. Ligationshøjden vil have en kritisk indflydelse på overlevelsen og bør tilpasses hver stamme eller genotype, da LAD-forgreningen kan variere.Konstanter i ligation er nøglen til at opnå reproducerbare resultater. Denne procedure kan kombineres med enhver analysemetode og kan efterfølges af funktionel analyse, vævsfiksering, cellekultur eller enhver form for teknik af interesse.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Modificeret Teknik for Koronararterie Ligering i mus

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

En murin model af myokardieiskæmi-reperfusionsskade gennem æggelederne for Venstre Anterior Faldende Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanent ligering af venstre forreste nedadgående kranspulsåre i mus: En Model af Post-myokardieinfarkt Ombygning og hjertesvigt

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine ekkokardiografi af Venstre Atrium, Aorta, og lungepulsåren

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Muse Venstre Anterior Faldende (LAD) kranspulsåreombinding: En forbedret og forenklet model for myokardieinfarkt

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direkte Re-implantation af venstre koronararterie i aorta i Voksne med Anomalous Oprindelse af venstre koronararterie fra lungepulsåren (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrisk kontraktilitet måling af musen mesenterica arterie ved hjælp af Wire blodkar

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

Intramyocardial Transplantation af MSC-Loading Injicerbare Hydrogels efter Myocardial Infarkt i en Murine Model

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...