Name: murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery
Uploaded: 2019-08-16T13:00:00
Duration: 8 min 38 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery at JoVE.com

Dit model werd ontwikkeld met de steun van de Swiss National Science Foundation (subsidies 310030_162629 tot LL) en departementale fondsen van de diensten van thoracale chirurgie en Intensive Care Geneeskunde van het universitair ziekenhuis van Lausanne. JL is ontvanger van een subsidie van de Emma Muschamp Foundation. Wij erkennen de cruciale steun van de dierenartsen en het personeel van de dieren faciliteit van de faculteit biologie en geneeskunde van de Universiteit van Lausanne. We danken Dr. Giuseppina Milano van de dienst van cardiale chirurgie van het universitair ziekenhuis van Lausanne en Dr. Alexandre Sarre van de cardiovasculaire Assessment Facilty van de Universiteit van Lausanne voor hun technische tips.

Dierproeven die in dit protocol worden beschreven, zijn beoordeeld en goedgekeurd door het ethisch comité voor dieren van Vaud.
Opmerking: voor deze experimenten gebruikten we mannelijke C57Bl/6J muizen met een gewicht tussen 25 g en 30 g en een leeftijd van 8-12 weken. Muizen werden gevoed Chow pellets en water ad libitum en gefokt onder conventionele omstandigheden. Chirurgische apparatuur werd eerder gesteriliseerd. De experimenteerder moet steriele chirurgische handschoenen en een chirurgisch masker dragen om besmetting en postoperatieve infecties te beperken.
1. anesthesie en tracheale cannulatie.
<ol><li>Weeg de muis om te bepalen van de dosering van anestheticum drugs, postoperatieve analgetische medicatie en getijden volume van de ventilator. Verwarm het verwarmingspaneel voor op 37 °C. De chirurgische opstelling is afgebeeld in Figuur 1.</li>
	<li>Injecteer de muis intraperitoneaal met een mengsel van ketamine en xylazine in een dosis van respectievelijk 80 mg/kg en 10 mg/kg.</li>
	<li>Scheer de muis vacht snel op de keel en de linker kant van de ribbenkast met behulp van een elektrisch scheerapparaat.</li>
	<li>Controleer de diepte van de anesthesie door staart en/of achtervoeten te knijpen en het dier in een rugligging op de verwarmingskussen te vestigen. Plaats een klein gaas kompres onder het hoofd van het dier om oververhitting van de ogen te voorkomen. Breng oculaire gel om Oogdroogheid te voorkomen.</li>
	<li>Bevestig de vier ledematen met plakband op het oppervlak van het verwarmingskussen. Passeer een lus van 5-0 zijde hechting onder de bovenste snijtanden en plak de extremiteit van de lus met plakband op het verwarmingskussen. Dit houdt de mond van het dier open en vergemakkelijkt de cannulatie.</li>
	<li>Breng Ontharingscrème aan op de voorgeschoren gebieden en masseer gedurende 1 minuut zachtjes met een wattenstaafje. Veeg het teveel aan bont en room met een gaas. Gebruik druppels van 0,9% zoutoplossing en gaas om de incisie gebieden te reinigen. Breng stukjes steriel gaas aan op de geschoren keel en de thorax en week ze in iodopovidon. Opmerking: wij raden de toepassing van een lokale verdoving drug (lidocaïne of bupivacain) naar incisies sites.</li>
	<li>Stel de ventilator in op een getij volume van 7 mL/kg en een ventilatiesnelheid van 140 slagen/min. Opmerking: van nu af aan werk onder een microchirurgie stereomicroscoop.</li>
	<li>Houd de huid in het midden van de keel en voer een incisie van 0,5 cm na een caudal/cephalic lijn met behulp van een kleine schaar. Scheid de lobben van de speekselklier en scheid de fascia van de sternohyoid-spier voorzichtig met gebogen ontleden Tang totdat het strottenhoofd en de luchtpijp zichtbaar zijn. Veilige randen van de opening met oprolmechanismen bevestigd aan elastische banden. Opmerking: doe deze stap zonder Incisie van de spieren. Een getrainde operator zal in staat zijn om het dier via de mondholte te intuberen zonder visualisatie van de luchtpijp die deze stap optioneel maakt.</li>
	<li>Houd de tong zachtjes opzij. Steek met een tang de binnenste naald van een 16 G canule in de luchtpijp. Visualiseer de juiste invoeging in de luchtpijp door de keel incisie.</li>
	<li>Sluit de canule aan op de ventilator en zorg voor een correcte ventilatie door de Uitlaatslang in water te plaatsen. De aanwezigheid van bubbels duidt op een juiste intubatie. Opmerking: om de weefsels nat te houden tijdens bedrijf plaats steriel gaas geweekt met 0,9% zoutoplossing en iodopovidon op de keel incisie. Controle van vocht tijdens de ingreep.</li>
</ol>2. ligatie van LAD coronaire slagader
<ol><li>Laat de voorste poot los van duct tape en beweeg de muis voorzichtig naar de rechterkant decubitus positie. Bevestig de linker anterieure ledemaat zodra het dier in de juiste positie is.</li>
	<li>Identificeer de lijn tussen de linker pectoralis minor en grote spieren en maak een schuine huid incisie op 1 cm met een schaar na de lijn. Met het ontleden van de bot micro schaar, aparte fascia van pectoralis spieren zonder Incisie. Handhaaf pectoralis spieren gescheiden met oprolmechanismen bevestigd aan elastische banden.</li>
	<li>Stel de ventilator in met een positieve eind expiratoire druk (PEEP) van 3 cm H2O.</li>
	<li>Open de borstholte met behulp van stompe Tang op de 3RD intercostale ruimte tussen 3RD en 4th ribben. Vermijd het aanraken van de inwendige thoracische slagader omdat er gevaar is voor bloedingen. Raak geen hart of longen aan. Breng twee OPROLMECHANISMEN in de ribcage aan, één op elke rib (Figuur 2a).</li>
	<li>Met een gebogen fijne Tang, verwijder voorzichtig het hartzakje en trek het uit elkaar zonder het hart en de longen te schaden.</li>
	<li>Zoek linker anterieure aflopende (LAD) coronaire slagader. LAD slagader verschijnt als een oppervlakkige heldere rode lijn die loopt van de rand van de linker oorschelp naar de Apex.</li>
	<li>Gebruik een naald houder om een 7-0 zijde hechting door te geven onder de LAD 2 tot 3 mm onder de linker atria. Trek de zijde langzaam om te voorkomen dat een scheuren van hartweefsel. Bind de ligatuur met drie knopen. Het linker deel van de linkerventrikel zal onmiddellijk verbleken na het ligatie (Figuur 2b-E). Opmerking: het is belangrijk om niet te diep in de ventriculaire holte te gaan of te oppervlakkig te blijven. Voor Sham-bediende dieren, trek de hecht zijde onder de jongen en verwijder het langzaam te vermijden weefsel scheuren.</li>
	<li>Laat de rib-oprol pers los, houd de 3RD -rib met een tang en maak twee pasjes met een 6-0-zijde hechting onder de 3RD en 4th ribben. Let op: laat het hart of de longen niet perforeren. Draai de knopen nog niet aan.</li>
	<li>Zet drie druppels van 37 °C 0,9% zoutoplossing op de opening en sluit de expiratie uitlaatbuis voor 2 of 3 Ademhalings cycli om de longen goed te blazen. Draai de hecht en bevestig met twee worpen.</li>
	<li>Laat Optrek kers de spieren vasthouden en Help ze hun juiste plaats te achterhalen.</li>
	<li>Nauwe thoracische huid met twee steken van 5-0 hecht zijde en veilig met twee worpen. Nauwe keel huid met een steek van 5-0 hecht zijde en veilig met twee worpen.</li>
</ol>3. postoperatieve procedures en follow-up.
<ol><li>Verwijder zelfklevende tape banden van de ledematen. Zet een kompres op de verwarmingskussen aan de rechterkant van het dier. Opmerking: de algehele procedure van anesthesie tot dit punt mag niet langer duren dan 40-45 min. Injecteer eventueel IP 0,2 mL atipamezol in een concentratie van 0,1 mg/mL om het wakker worden te versnellen.</li>
	<li>Intraperitoneaal injecteert 0,3 mL 5% glucoseoplossing voorverwarmd bij 37 °C.</li>
	<li>Zet het dier voorzichtig op ventrale decubitus op het kompres pad.</li>
	<li>Stop ventilator; Als de muis spontaan ademt, voorzichtig verwijderen canule.</li>
	<li>Injecteer subcutane (SC) 0,1 mg/kg buprenorfine en zet muizen in een voorverwarmde kooi verhit op 30 ° en geventileerd met een 100% O2 voor een minimum van 1 h. monitor muizen voor elke levensbedreigende aandoening, zoals overmatige dyspneu of bloeding.</li>
	<li>Tijdens de twee eerste dagen na de operatie, monitor muis tweemaal daags. Injecteer SC 0,1 mg/kg buprenorfine tweemaal daags. Intraperitoneaal injecteert 0,3 mL 0 van 5% glucoseoplossing tweemaal daags. Geef muizen een zacht dieet en water ad libitum. Warm het dier zo nodig op. Opmerking: naast opioïden moeten dieren worden voorzien van niet-steroïdale anti-inflammatoire geneesmiddelen gemengd in dieet of verdund in drinkwater.</li>
	<li>Vanaf dag drie, Injecteer SC 0,1 mg/kg buprenorfine tweemaal daags als het dier ongewone tekens vertoont met betrekking tot het algemene uiterlijk, de ademhaling of het gedrag. Intraperitoneaal injecteert 0,3 mL van 5% glucoseoplossing tweemaal daags als het dier nog steeds gewicht verliest. Warm het dier indien nodig. Opmerking: pas de vooraf gedefinieerde onderbrekings criteria strikt toe wanneer dat nodig is om overmatig lijden te voorkomen. Meestal verliezen muizen gewicht tot dag 3 en 4 en dan gewichtstoename. Na zeven dagen halen muizen meestal het gewicht van de voor bewerking op.</li>
</ol>

<ol>
	<li>GBD 2016 Causes of Death Collaborators. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=regional,+and+national+age-sex+specific+mortality+for+264+causes+of+death,+1980-2016:+a+systematic+analysis+for+the+Global+Burden+of+Disease+Study.">regional, and national age-sex specific mortality for 264 causes of death, 1980-2016: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study.</a> Lancet. 390 (10100), 1151-1210 (2017).</li><li>Reed, G. W., Rossi, J. E., Cannon, C. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction.">Acute myocardial infarction.</a> Lancet. 389 (10065), 197-210 (2017).</li><li>Frangogiannis, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+inflammatory+response+in+myocardial+injury,+repair,+and+remodelling.">The inflammatory response in myocardial injury, repair, and remodelling.</a> Nature Reviews Cardiology. 11 (5), 255-265 (2014).</li><li>Lugrin, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cutting+edge:+IL-1alpha+is+a+crucial+danger+signal+triggering+acute+myocardial+inflammation+during+myocardial+infarction.">Cutting edge: IL-1alpha is a crucial danger signal triggering acute myocardial inflammation during myocardial infarction.</a> Journal of Immunology. 194 (2), 499-503 (2015).</li><li>Hashmi, S., Al-Salam, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+myocardial+infarction+and+myocardial+ischemia-reperfusion+injury:+a+comparison.">Acute myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury: a comparison.</a> International Journal of Clinical and Experimental Pathology. 8 (8), 8786-8796 (2015).</li><li>van Zuylen, V. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+models+in+NOD/Scid+mice+for+cell+therapy+research:+permanent+ischemia+vs+ischemia-reperfusion.">Myocardial infarction models in NOD/Scid mice for cell therapy research: permanent ischemia vs ischemia-reperfusion.</a> Springerplus. 4, 336 (2015).</li><li>Yan, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+dynamics+of+cardiac+immune+cell+accumulation+following+acute+myocardial+infarction.">Temporal dynamics of cardiac immune cell accumulation following acute myocardial infarction.</a> Journal of Molecular and Cellular Cardiology. 62, 24-35 (2013).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+murine+model+of+myocardial+ischemia-reperfusion+injury+through+ligation+of+the+left+anterior+descending+artery.">A murine model of myocardial ischemia-reperfusion injury through ligation of the left anterior descending artery.</a> Journal of Visualized Experiments. (86), (2014).</li><li>Reichert, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Murine+Left+Anterior+Descending+(LAD)+Coronary+Artery+Ligation:+An+Improved+and+Simplified+Model+for+Myocardial+Infarction.">Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (122), (2017).</li><li>Kolk, M. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-ligation:+a+murine+model+of+myocardial+infarction.">LAD-ligation: a murine model of myocardial infarction.</a> Journal of Visualized Experiments. (32), (2009).</li><li>Fernandez, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+coronary+arteries+of+the+C57BL/6+mouse+strains:+implications+for+comparison+with+mutant+models.">The coronary arteries of the C57BL/6 mouse strains: implications for comparison with mutant models.</a> Journal of Anatomy. 212 (1), 12-18 (2008).</li><li>Muthuramu, I., Lox, M., Jacobs, F., De Geest, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Permanent+ligation+of+the+left+anterior+descending+coronary+artery+in+mice:+a+model+of+post-myocardial+infarction+remodelling+and+heart+failure.">Permanent ligation of the left anterior descending coronary artery in mice: a model of post-myocardial infarction remodelling and heart failure.</a> Journal of Visualized Experiments. (94), (2014).</li><li>Xu, Z., McElhanon, K. E., Beck, E. X., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Model+of+Myocardial+Ischemia-Reperfusion+Injury.">A Murine Model of Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury.</a> Methods in Molecular Biology. 1717, 145-153 (2018).</li><li>Parapanov, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Toll-like+receptor+5+deficiency+exacerbates+cardiac+injury+and+inflammation+induced+by+myocardial+ischaemia-reperfusion+in+the+mouse.">Toll-like receptor 5 deficiency exacerbates cardiac injury and inflammation induced by myocardial ischaemia-reperfusion in the mouse.</a> Clinical Science. 129 (2), 187-198 (2015).</li><li>Curaj, A., Simsekyilmaz, S., Staudt, M., Liehn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Minimal+invasive+surgical+procedure+of+inducing+myocardial+infarction+in+mice.">Minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (99), e52197 (2015).</li><li>van den Bos, E. J., Mees, B. M., de Waard, M. C., de Crom, R., Duncker, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+model+of+cryoinjury-induced+myocardial+infarction+in+the+mouse:+a+comparison+with+coronary+artery+ligation.">A novel model of cryoinjury-induced myocardial infarction in the mouse: a comparison with coronary artery ligation.</a> American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 289 (3), H1291-H1300 (2005).</li><li>Duerr, G. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+myocardial+remodeling+between+cryoinfarction+and+reperfused+infarction+in+mice.">Comparison of myocardial remodeling between cryoinfarction and reperfused infarction in mice.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 961298 (2011).</li></ol>

De auteurs hebben niets te onthullen.

De eerste kritieke stap van deze procedure is zeker intubatie. We gebruiken de gebloteerde binnennaald van een 16 G katheter als tracheale buis. We raden u af deze Setup te gebruiken met muizen die minder dan 22 g gewicht hebben. Met deze instelling kan het moeilijk zijn om muizen correct te intuberen met een kleiner lichaamsgewicht zonder de luchtpijp te beschadigen. Een ander belangrijk punt is het beperken van incisies gemaakt aan de spier terwijl blootstelling van de luchtpijp en ribcage. Vermindering van weefselschade is van groot belang, vooral bij het bestuderen van ontstekingsprocessen na MI. Daarom geven we de voorkeur aan een zachte spreiding van spieren en ribben met Tang en oprol kers8,9. We gebruiken geen elektrische verschroeide om bloeden10te controleren. Dit kan leiden tot iatrogene brandwonden en gunst infecties. Zowel trauma als infecties kunnen vooroordelen inflammatoire Read-outs. Toepassing van een extrinsieke PEEP van 3 cm H2O door het plunderen van de ventilatie uitlaat in een waterbuis grenzen einde-expiratory alveolaire instorting tijdens Thoracotomie. Lokalisatie van LAD is een andere kritieke stap en men moet in gedachten houden dat de anatomie van de coronaire slagaders kan variëren afhankelijk van de stam en het genotype van de muis11. Het vereist enige ervaring om de jongen te visualiseren, maar het plaatsen van de hechtdraad direct 2-3 mm onder de linker atria zoals beschreven in de procedure moet de juiste positionering van de ligatie mogelijk maken. Onmiddellijke verkleuring van grote delen van de linker ventrikel onder de hecht bevestigen de nauwkeurigheid. Ten slotte, kunstmatig toepassen van auto-PEEP door het blokkeren van ventilatie uitlaat voor 2-3 respiratoire cycli tijdens borstsluiting maakt een voorbijgaande hyperinflatie van de longen die zal helpen achtervolgen de lucht van thoracale holte12. We hebben opzettelijk geen thoracentese uitgevoerd zoals getoond in 9,10. Op deze manier beperken we het risico op Long-en hart blessures en vermijden we overmatige weefselbeschadiging of perforatie.
Myocardiale ischemie-reperfusie (I/R) is een verwant chirurgisch model dat het herstel van de coronaire bloedstroom nabootst dat wordt gedaan om MI-patiënten in klinieken. Tijdens het I/R-model wordt een voorbijgaande occlusie van de coronaire slagader gedaan door een stukje slang op de jongen te spannen voor een duur van 20 tot 45 min8,13. Vervolgens wordt de occlusie vrijgegeven om reperfusie van het myocardium voor de gewenste duur mogelijk te maken. Deze eenvoudige wijziging toegepast op ons protocol kan gemakkelijk veranderen in een I/R model4,8,14,15. Het infarct kan worden bevestigd door een bloedtest voor cardiale troponine T8,10 of door echocardiografie15.
MI verschilt van I/R-model omdat reperfusie door zelf een blessure induceert. MI induceert meer weefsel necrose en apoptosis is meer uitgesproken in reperfused myocardium5. Kinetiek van inflammatoire cellen infiltratie is ook verschillend tussen in MI en IR met een vertraagde myocardiale infiltratie van immuuncellen in MI7. De grootte en de positie van het hart gebied zullen ook verschillen tussen permanente ligatie en I/R-modellen15. Om dit in gedachten te houden, moet men voorzichtig zijn om een relevant model te kiezen sinds I/R en permanente MI-modellen niet gelijkwaardig zijn. Een ander Murine model van myocardinfarct is het cryoinfarct model. Toepassing van een cryogene sonde op de LV anterieure muur induceert de bevriezing van ventriculaire weefsel en bloedstroom arrestatie in de LAD slagader. Deze techniek verschilt echter van Mi-en I/R-technieken met betrekking tot timing en amplitude van remodellering en ontstekingsreacties16,17.
Variabiliteit is een beperking als voor elke chirurgische ingreep. Deze variabiliteit berust op biologische verschillen. Een goed voorbeeld is de variatie in coronaire arteriële indeling in muizen11. Het vertrouwt ook op experiteerder vaardigheden. Het is de moeite waard te vermelden dat een adequate opleiding van de onderzoekers verplicht is om met dit model tot stabiele resultaten te komen. Een goed opgeleide experimenteerder kan gemakkelijk infarct maten produceren die reproduceerbaar zijn (Figuur 3a-B). De sterfte van het model hangt af van de positie van de jongen, duur van de experimenten (dagen, weken), muis stam en genotypes. De soorten anestheticum en analgetische drugs kunnen ook invloed hebben op de uitkomst van de experimenten met vermoedelijke cardioprotective of cardiodepressivum effecten. In onze handen heeft dit model een wereldwijd sterftecijfer van 25-30%. Dit sterftecijfer bestaat uit spontane sterfgevallen en offers voor het einde van het experiment, ongeacht de stammen en de duur van het experiment. De meeste doden of opofferingen liggen tussen de tweede en vierde dagen na de operatie. Het toepassen van een streng pijnmanagement en follow-up van de dieren kan de sterfte verminderen.
Hier presenteren we representatieve resultaten van infarct grootte geanalyseerd met behulp van TTC-kleuring en expressie van eiwitten en genen die betrokken zijn bij inflammatoire of fibrotische processen in LV door respectievelijk Western Blot en real-time PCR (figuur 3c-G). Het is ook mogelijk om veel van deze parameters te meten door middel van enzym-linked immunosorbent assay (ELISA) of enzymatische assays. Natuurlijk, in overeenstemming met de hypothese die moet worden getest, deze methode kan worden gevolgd door elke functionele analyse door echografie, MRI of intraveneuze triculaire katheter meting van de druk en het volume. Het is ook mogelijk om hart te extraheren en verder te onderzoeken cardiale celbiologie op geïsoleerde cellen. Over het algemeen is het MI-model met permanente ligatie van de LAD-coronaire slagader vooral nuttig om inflammatoire en fibrotische processen te evalueren, wondgenezing en veranderingen in de hartfunctie na een myocardinfarct.

Acuut myocardinfarct (MI) is de ernstigste expressie van ischemische hartziekten (IHD). IHD zijn de belangrijkste oorzaak van de morbiiteiten en de dood wereldwijd, vooral in westerse landen1. Het heeft dus een enorme economische impact op gezondheidszorgstelsels2. MI wordt gekenmerkt door de occlusie van een coronaire slagader door atherosclerotische plaque en de daaropvolgende arrestatie van de bloedstroom in grote delen van het myocardium. Gebrek aan zuurstoftoevoer in het myocardium leidt tot ischemische dood van cardiomyocyten. Deze pathologische aandoening activeert reacties in het ventriculaire weefsel dat uiteindelijk leidt tot tekortkomingen in ventriculaire functies, remodellering en hartfalen3. MI is een complexe pathofysiologische aandoening waarbij meerdere en ingewikkelde biologische processen bestaande uit gereguleerde celdood, reactie op oxidatieve stress, ontsteking, wondgenezing, fibrose en ventriculaire remodellering. Sommige van deze biologische reacties zijn gemodelleerd als individuele processen in vitro zoals necrose-geïnduceerde vrijlating van schade-geassocieerde moleculaire patronen en geassocieerde inflammatoire reacties4. Deze vereenvoudigde modellen zijn essentieel om MI te begrijpen. Maar alleen een in vivo model kan een realistisch beeld geven van de complexiteit van de biologische processen die zijn betrokken bij de respons op MI.
Hoewel modellen van MI bij grotere dieren zoals varkens meer in verband kunnen staan met menselijke pathofysiologie van MI, ligt de kracht van de Murine-modellen in de mogelijkheden die worden geboden door genetische manipulatie die geavanceerder is dan bij andere zoogdieren. Andere niet-verwaarloosbare aspecten zijn de relatief lage kosten en de eenvoud van de chirurgische Setup.
Het is de moeite waard om te vermelden dat modellen van ischemie-reperfusie van het myocardium verschillende uitkomsten kunnen vertonen dan permanente MI-modellen. Biologische processen zoals het type celdood betrokken, kwaliteit/amplitude of kinetiek van inflammatoire en wondgenezing reacties in het myocard weefsel kan variëren afhankelijk van het model5,6,7. Dit Protocol van permanente coronaire occlusie kan echter gemakkelijk worden aangepast om een ischemie-reperfusie model te verkrijgen.
Deze methode is relevant voor studies die verband houden met de fysioathologie van MI zonder reperfusie en maakt het mogelijk om pathologische processen te monitoren die optreden bij coronaire occlusie (minuten) tot laat stadium hartfalen (weken) bij het lokale hartweefsel en systemische Niveaus.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:588px;" width="589">
	<tbody>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">1 CC Syringe, Omnifix-F</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">9161406V</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">30G- Needle</td>
			<td style="width:73px;">BD Microlance 3</td>
			<td style="width:123px;">304000</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">70% Ethanol</td>
			<td style="width:73px;"></td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Betadine 60 ml</td>
			<td style="width:73px;">MundiPharma</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Blunt Retractors</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">18200-09</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Castroviejo Needle Holder Straight with Lock</td>
			<td style="width:73px;">Roboz</td>
			<td style="width:123px;">RS-6416</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Cotton Swabs</td>
			<td style="width:73px;">Applimed SA</td>
			<td style="width:123px;">6001109</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Dissecting Scissors, Curved</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap</td>
			<td style="width:123px;">BC603R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Electrical Razor</td>
			<td style="width:73px;">Remington</td>
			<td style="width:123px;">HC720</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Glucose 5% B.Braun</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">531032</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Hair Removal Cream, Veet</td>
			<td style="width:73px;">Silk &#38; Fresh Tech.</td>
			<td style="width:123px;">8218535</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Iris Dissecting Forceps Full Curved</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap</td>
			<td style="width:123px;">&#160;OC022R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Ketasol 100 (100 mg/ml)</td>
			<td style="width:73px;">Dr. E. Graeub AG</td>
			<td>QN01AX03</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Micro Scissors, Curved Blunt/Blunt</td>
			<td style="width:73px;">Aesculap&#160;</td>
			<td style="width:123px;">FM013R</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">NaCl 0.9% B. Braun</td>
			<td style="width:73px;">B. Braun</td>
			<td style="width:123px;">534534</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Short Fixator</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">18200-01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 5-0, BB</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">K880H</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 6-0, P-1</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">639H</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Silk Suture 7-0,BV-1</td>
			<td style="width:73px;">Ethicon</td>
			<td style="width:123px;">K804</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Student Dumont #7 Forceps</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91197-00</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Student Fine Forceps-Angled</td>
			<td style="width:73px;">Fine Science Tools</td>
			<td style="width:123px;">91110-10</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Surgical Gloves</td>
			<td style="width:73px;">Weitacare</td>
			<td style="width:123px;">834301</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Surgical heating pad</td>
			<td style="width:73px;">Personalized setting</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="53">
			<td height="53" style="height:53px;width:221px;">Temgesic&#160; sol 0.3 mg/ml&#160; Buprenorphine</td>
			<td style="width:73px;">Indivior Schweiz AG</td>
			<td style="width:123px;">N02AE01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Tracheal tube inner needle of an 16G i.v. cat</td>
			<td style="width:73px;">Abbocath-T</td>
			<td style="width:123px;">G714-A01</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Universal S3 Microscope, OMPIMD</td>
			<td style="width:73px;">Zeizz</td>
			<td style="width:123px;"></td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Ventilator, MiniVent Model 845</td>
			<td style="width:73px;">Harvard Apparatus</td>
			<td style="width:123px;">73-0043</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="19">
			<td height="19" style="height:19px;width:221px;">Viscotears</td>
			<td style="width:73px;">Alcon</td>
			<td style="width:123px;">1551535</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
		<tr height="35">
			<td height="35" style="height:35px;width:221px;">Xylasol (1mg/ml)</td>
			<td style="width:73px;">Dr. E. Graeub AG</td>
			<td>QN05CM92</td>
			<td style="width:171px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

murine myocardial infarction model using permanent ligation of left anterior descending coronary artery

Myocardinfarct (MI) en acute coronaire ziekten behoren tot de meest prominente doodsoorzaken in de populatie met westerse levensstijl. De Murine modellen van Mi met permanente ligatie van linker-anterior aflopend (LAD) coronaire hartslag nauw bootst mi bij de mens. Murine modellen profiteren van de uitgebreide genetische techniek die tegenwoordig beschikbaar is. Hier stellen we een reproduceerbare Murine chirurgische model van myocardinfarct door permanente LAD coronaire ligatie. Onze techniek omvat anesthesie met ketamine/xylazine die snel kan worden teruggedraaid door toediening van een antagonist, intubatie zonder tracheotomie voor mechanisch geassisteerde ventilatie, ventilatie met toepassing van Extrinsieke positieve end-expiratory Pressure (PEEP) om te voorkomen dat alveolaire instorting, een Thoracotomie methode die beperkt is tot de minimale chirurgische letsels aan skeletspieren, en Long inflatie zonder thoracentese. Deze methode is dun invasief, reproduceerbaar en vermindert de sterfte en complicaties na de operatie.

Zeven dagen na de operatie werden muizen geëerd. Dieren werden verdoiliseerd met 80 mg/kg ketamine en 10 mg/kg xylazine. Onder anesthesie, werd bloed getrokken uit Vena Cava en hart werd bemonsterd. Atria werden verwijderd, myocardium werd gewassen in ijskoude PBS. Voor metingen van ischemische gebieden waren de harten bevroren bij-20 °C gedurende 40 min, vervolgens gesneden en gekleurd gedurende 20 minuten bij 37 °C in PBS met 2% trifenyltetrazoliumchloride (TTC). Hart plakjes werden 's nachts opgelost in 4% gebufferde Paraformaldehyde-oplossing bij kamertemperatuur. Ischemische gebieden bleven onbevlekt terwijl levend weefsel in rood werd gekleurd als gevolg van de aanwezigheid van dehydrogenasen. Ischemische gebieden werden berekend als percentage van het witte gebied van de linker ventrikel (LV) met een beeldvormings software (Figuur 3a, B). Voor biochemische en moleculaire biologie analyses werden harten bevroren in vloeibare stikstof. Na het slijpen van harten op vloeibare stikstof het orgel poeder werd gebruikt voor eiwitten en mRNA extractie. De omvang van fibrose in het myocard weefsel van de hart Hearts werd beoordeeld door de Western Blot analyse van alpha Smooth-spier actine (αsma) en SMAD2 fosforylering, die respectievelijk belangrijke Read-outs van myofibroblasten en van tgfβ signalering activatie ( Figuur 3c). mRNA expressie van Tgfb, en downstream doelen ctgf, PostN en Il11 zijn alle indicatoren van myocardiale fibrose. Dit werd aangetoond door real-time polymerase chain reaction (PCR) analyse (figuur 3D).
Pro-inflammatoire signalering trajecten en expressie van pro-inflammatoire genen werden meestal geactiveerd binnen de eerste week na myocardinfarct. Fosforylering van NF-κB p65 transcriptiefactor is een kenmerk van ontsteking en werd waargenomen in hele myocardium extracten van de MI muizen (figuur 3e). mRNA-expressie van pro-inflammatoire genen Il1b, Il6 en Cxcl10 (figuur 3F) en monocyten/macrofagen markers Cd14 en mertk werden geanalyseerd door real-time PCR (figuur 3G). Merk op dat er een variabiliteit was in de mate van NF-κB p65 en SMAD2 fosforylering (figuur 3c,E, Lanes 4-7). Deze variabiliteit hangt grotendeels af van de grootte van de infarct.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig1.jpg"> Figuur 1 : Beschrijving van de chirurgische opstelling. A) chirurgischeopstelling bestaat uit een gemodificeerde verwarmingskussen, een ventilator en oprolmechanismen die aan elastische banden zijn bevestigd. B) set van schaar, Tang en naald houder gebruikt tijdens de operatie. C) Close-up van de mini-OPROLMECHANISMEN. Niet getoond: chirurgische stereomicroscoop. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig1large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig2.jpg"> Figuur 2 : Representatieve beelden van de chirurgie en Lad ligatie. A) geopende kist met oprolmechanismen. De linker ventrikel was duidelijk. De bovenste, linker en onderste oprol kers hielden de ribbenkast en rechter oprolmechanisme gehouden de pectoralis spier. B) de naald is doorgegeven onder de jongen. (C) hecht zijde werd doorgegeven onder de jongen, in de linker ventrikel. D) enkele steek op de jongen. (E) einde van de ligatie procedure werd de hechtdraad vastgezet met drie knopen. F) weergave van een voorste weergave van het hart. De positie van LAD ligatie was 2-3 mm onder linker atria en boven diagonale tak van de jongen. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig2large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59591/59591fig3.jpg"> Figuur 3 : Fibrose en ontsteking in heel myocardium extracten zeven dagen na de operatie. A) representatieve beelden van de TTC-kleuring van een in de vorm van een gesegmenteerd hart zeven dagen na de operatie. Bleke ischemische gebieden bleven onbevlekt en wit terwijl levend weefsel rood werd gekleurd. De ligatie was zichtbaar op de derde slice van links. B) de grootte van de ischemische gebieden van vijf infarcten harten werd gemeten met behulp van de TTC-kleuringstechniek. Resultaten waren het percentage van het witte gebied van de linker ventrikel (LV). C) analyse van de Western Blot van SMAD2 fosforylering en Alfa-SMA-expressie in heel myocardium als indicatoren van fibrose. D) mRNA-uitdrukking van tgfb, ctgf, PostN en Il11 in hele myocardium extracten. (E) Western Blot van NF-κb p65 fosforylering in hele myocardium extracten. F) mRNA-expressie van pro-inflammatoire genen Il1b, Il6 en Cxcl10 in hele myocardium extracten. G) mRNA-uitdrukking van Cd14 en mertk als indicatoren van de aanwezigheid in het myocardium van monocyten/macrofagen respectievelijk fagocytische macrofagen. N = 3 in Sham en N = 4 in MI-groep. Voor de analyse van mRNA-expressies was de uitdrukking relatief ten opzichte van de endogene controle Rps18 en waren de groeps vergelijkingen ongepaarde Student T-tests, * p ≤ 0,05, * * p ≤ 0,01, * * * p ≤ 0,001. In de panelen B, D, F en G foutbalken vertegenwoordigen standaarddeviaties.  <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59591/59591fig3large.jpg" target="_blank">Klik hier om een grotere versie van dit cijfer te bekijken.</a>

Watch this Scientific Journal Video about Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery at JoVE.com

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Hierin beschrijven we een chirurgische ingreep die laat zien hoe u permanente ligatie van de linker-anterieure aflopende coronaire slagader bij muizen bereikt. Dit model is van groot belang om de pathofysiologie van myocardiaal infarct en de gelijktijdige biologische processen te onderzoeken.

Murine myocardinfarct model met behulp van permanente Ligatie van linker anterieure aflopende coronaire slagader

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Dit murinemodel van myocardiale overtreding maakt het mogelijk om pathologische processen te monitoren die zich voordoen van coronaire occlusie tot hartfalen in een laat stadium bij het lokale hartweefsel en systemische niveaus. Deze methode is compatibel met elke uitlezing die momenteel wordt gebruikt in de hartbiologie en fysiologie. Bovendien profiteert het van de enorme diversiteit aan murine genetische modellen.Het verwerven van adequate chirurgische vaardigheden kan de tijd nemen om onder de knie te krijgen. Deze procedure wordt het best stap voor stap geleerd met een ervaren onderzoeker. Visuele demonstratie van dit murine model maakt het delen van hints die kunnen helpen met de chirurgische ingreep en versnellen van het leerproces.Gebruik een elektrisch scheermes om snel een verdoofde, 25-tot-30-gram, man, C57-Black/6 muis op de keel en de linkerkant van de ribbenkast te scheren. Bevestig een gebrek aan reactie op teen knijpen. Breng zalf aan op de ogen van het dier.Plaats de muis in de supine positie op een verwarmingskussen, en plaats een klein gaas kompres onder het hoofd om oververhitting van de ogen te voorkomen. Zet de ledematen vast met plakband. Geef een lus van 5-0 zijden hechting onder de bovenste snijtanden, en zet het uiteinde van de lus op het verwarmingskussen om de mond open te houden tijdens de cannulation.Breng ontharingscrème aan op de voorgeschoren gebieden en masseer zachtjes met een wattenstaafje gedurende een minuut. Verwijder de overtollige vacht en room met gaas, en maak de blootgestelde huid schoon met druppels van 0,9% zoutoplossing en gaas. Breng stukjes steriel gaas aan op de geschoren keel en thorax en geniet van het gaas met iodopovidone.Stel de ventilator in op een getijdenvolume van zeven milliliter per kilogram en een ventilatiesnelheid van 140 slagen per minuut. Beweeg de muis onder een microchirurgie stereo microscoop microscoop microscoopmicroscoop Houd de huid op het midden van de keel, maak een incisie van 0,5 centimeter langs de caudal/cephalic lijn en scheid de lobben van de speekselklier.Gebruik gebogen tangen om de fascia van de sternohyoid spier voorzichtig te scheiden totdat het strottenhoofd en de luchtpijp zichtbaar zijn. Beveilig vervolgens de randen van de opening met oprolmechanismen aan elastische banden. Trek vervolgens voorzichtig de tong zijwaarts en gebruik tangen om de afgestompte binnennaald van een 16-meter canule in de luchtpijp te steken.Visualiseer een correcte invoeging in de luchtpijp door de keelincisie en sluit de canule aan op de ventilator. Plaats steriel 0,9%zoutoplossing aangevuld met iodopovidone gedrenkt gaas op de incisie om de weefsels nat te houden tijdens de operatie. Plaats vervolgens de uitlaatbuizen in het water.De aanwezigheid van bellen duidt op een succesvolle intubatie. Voor ligatie van de linker voorste aflopende kransslagader, of LAD, voorzichtig verplaatsen van de muis in de rechterkant decubitus positie, en herbeveiligen de linker voorste ledemaat in de nieuwe positie. Identificeer de lijn tussen de linker pectoralis kleine en grote spieren, en maak een schuine een-centimeter huid incisie langs de lijn.Met behulp van botte ontleden micro schaar, scheiden de fascia van de pectoralis spieren zonder insnijden van de weefsels, en gebruik oprolmechanismen bevestigd aan elastische banden om de scheiding te behouden. Zet de ventilator met een positieve einddruk van drie centimeter water. Gebruik stompe tangen om de borstholte te openen op de derde intercostale ruimte tussen de derde en vierde ribben.Plaats twee oprolmechanismen in de ribbenkast, een op elke rib, en gebruik een gebogen fijne tang om het hartzakje zorgvuldig te verwijderen zonder het hart en de longen te schaden. Zoek de LAD als een oppervlakkige heldere rode lijn die loopt van de rand van de linker oorschelp naar de top. Gebruik een naaldhouder om een 7-0 zijden hechting onder de LAD twee tot drie millimeter onder de linker atria door te geven.Trekken de zijde langzaam om te voorkomen dat scheuren hartweefsel, bind de ligatuur met drie knopen. Het linkeronderdeel van de linkerventrikel zal bij ligatie direct bleek worden. Laat nu de rib oprolaars los en houd de derde rib met tangen twee passen met een 6-0 zijden hechting onder de derde en vierde ribben.Plaats drie druppels van 37-graden Celsius 0,9% zoutoplossing op de opening, en sluit de expiratie uitlaatbuis voor twee of drie ademhalingscycli om goed op te blazen de longen. Draai en zet de hechting vast met twee worpen en laat de oprolmechanismen die de spieren vasthouden los, waardoor de spieren terugkeren naar hun juiste anatomische locatie. Sluit vervolgens de thoracale huid met twee steken en twee worpen van 5-0 hechtingszijde.Sluit de keel huid met een steek van 5-0 hechting zijde en twee gooit. Verwijder aan het einde van de procedure de tapebanden uit de ledematen, draai het dier voorzichtig naar ventrale decubitus op het komperkussen en plaats een kompres op het verwarmingskussen aan de rechterkant van het dier. Intraperitoneally injecteren 0,3 milliliter van 37-graden-Celsius opgewarmd 5%glucose oplossing.Stop de beademing. Als de muis spontaan ademt, verwijder dan voorzichtig de canule. Onderhuids injecteren 0,1 milligram per kilogram buprenorfine.Plaats de muis in een kooi van 30 graden Celsius geventileerd met 100% zuurstof gedurende ten minste een uur met monitoring. Tijdens de twee eerste dagen na de operatie, de muis te voorzien van een zacht dieet en water ad libitum, opwarming van het dier als dat nodig is. Zeven dagen na de operatie blijven de ischemische gebieden onbevlekt door triphenyltetrazoliumchloride, terwijl het levende weefsel rood vlekken als gevolg van de aanwezigheid van dehydrogenasen.De ischemische gebieden kunnen vervolgens worden berekend als het percentage van het witte gebied van de linker ventrikel in een imaging software programma. Westerse blot-analyse voor alfaglad spieractine en SMAD2-fosforylatie, die respectievelijk belangrijke uitlezingen zijn van myofibroblasten en van het transformeren van bètasignaleringsactivering van groeifactoren, kunnen worden gebruikt om de omvang van fibrose in het hart van de infarcten te bepalen. Real-time polymerase kettingreactie analyse van transformerende groeifactor bèta en de downstream doel mRNA expressie kan ook worden uitgevoerd om de aanwezigheid van myocardiale fibrose te beoordelen.Pro-inflammatoire signaleringstrajecten en de expressie van ontstekingsgenertendenten blijken meestal binnen de eerste week na het hartinfarct te worden geactiveerd. mRNA expressie van pro-inflammatoire genen en monocyten / macrofaag markers wordt ook waargenomen. De ligatiehoogte heeft een kritische invloed op de overleving en moet worden aangepast aan elke stam of genotype, omdat LAD-vertakkingen kunnen variëren.Constanten in ligatie is de sleutel tot reproduceerbare resultaten te verkrijgen. Deze procedure kan worden gekoppeld aan elke analytische methode en kan worden gevolgd door functionele analyse, weefselfixatie, celkweek of elke techniek van belang.

Research

JoVE Journal

Medicine

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Kransslagader Ligatie en Intramyocardial Injectie in een muizenmodel van Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

The Application Of Permanent Middle Cerebral Artery Ligation in the Mouse

De toepassing van permanente midden cerebrale slagader Ligatie in de muis

Focal cerebral ischemia is among the most common type of stroke seen in patients. Due to the clinical significance there has been a prolonged effort to ...

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Gewijzigd Techniek voor Coronary Artery Ligatie in Muizen

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Een muizenmodel van myocard ischemie-reperfusie schade door de eileiders van de LAD

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

Permanent Ligation of the Left Anterior Descending Coronary Artery in Mice: A Model of Post-myocardial Infarction Remodelling and Heart Failure

Permanente Ligatie van de linker anterior Aflopend Kransslagader in Muizen: Een model van Post-myocardinfarct Remodelling en hartfalen

Heart failure is a syndrome in which the heart fails to pump blood at a rate commensurate with cellular oxygen requirements at rest or during stress. It ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

Murine echocardiografie van de linkerboezem, Aorta, en longslagader

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Murine Left Anterior Descending (LAD) coronaire Ligatie: een verbeterde en vereenvoudigd model voor myocardinfarct

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Direct Re-implantatie van linker kransslagader in de aorta in Volwassenen met Abnormale Origin of linker kransslagader van de longslagader (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Isometrische Contractility meting van de muis mesenterische slagader met behulp van draad Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

Intramyocardtransplantatie van MSC-Loading Injecteerbare Hydrogels na myocardinfarct in een Murine-model

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...