1. ツールとアクセサリの準備
<ol><li>先端/漏斗ストッパー
	<ol>
<li>2つのスポンジプラグを取得します(プラグの直径は、ハエを転送するために使用されるバイアルの内部直径よりもわずかに大きくなければなりません)。加熱された電気はんだ付け鉄でスポンジプラグの中心に穴を開けます。</li>
		<li>2つの1 mLピペットの先端を取得し、鋭いナイフで横方向に1つを半分にカットし、...

<ol>
	<li>Jennings, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+&#8211;+a+versatile+model+in+biology+&#38;+medicine.">Drosophila &#8211; a versatile model in biology &#38; medicine.</a> Materials Today. 14 (5), 190-195 (2011).</li><li>JoVE Science Education Database. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biology I: yeast, Drosophila and C. elegans. An Introduction to Drosophila melanogaster. , (2018).</li><li>Ashburner, M., Roote, J., Sullivan, W., Ashburner, M., Hawley, R. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Laboratory+Culture+of+Drosophila.">Laboratory Culture of Drosophila.</a> Drosophila Protocols. , (2000).</li><li>Greenspan, R. 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F., Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Two+devices+for+Drosophila+experiments+(in+Chinese).">Two devices for Drosophila experiments (in Chinese).</a> Bulletin of Biology. 45 (11), 49-50 (2010).</li><li>Zhou, T. -. y., Gan, J., Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preparation+of+sponge+plug+and+sponge+plug+based+fly+transferring+device+for+Drosophila+experiments+(in+Chinese).">Preparation of sponge plug and sponge plug based fly transferring device for Drosophila experiments (in Chinese).</a> Bulletin of Biology. 46 (6), 49-50 (2011).</li><li>Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Genetics laboratory investigation. , (2016).</li><li>Yang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Carnivory+in+the+larvae+of+Drosophila+melanogaster+and+other+Drosophila+species.">Carnivory in the larvae of Drosophila melanogaster and other Drosophila species.</a> Scientific Reports. 8, (2018).</li><li>Stocker, H., Gallant, P., Dahmann, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+Started:+An+Overview+on+Raising+and+Handling+Drosophila.">Getting Started: An Overview on Raising and Handling Drosophila.</a> Drosophila: Methods and Protocols. , (2008).</li></ol>

本稿では、ショウジョウバエの飼育や実験に関わる基本的な活動を処理するための自家製ツールをいくつか解説する。これらのツールはシンプルですが、かなり効果的です。事実上、どのラボでもこれらのツールを簡単に作成でき、研究や教育ラボは、おそらくローカルでは利用できない既製の代替手段を見つける必要はありません。
フライトランスファーは、<e...

フルーツフライは、ショウジョウバエメラノガスター、幅広いトピック1、2を研究するために生物研究および生物学教育で広く使用されているモデル生物である。ショウジョウバエを扱う基本的な問題は、すべての大人(一部の変異体3、4を除く)が飛ぶことができるので、彼らが扱いやすいように、バイアルからバイアルへの大人の移動とハエの固定化です。
従来、研究者は、2つのバイアルを口から口に持ち、ハエをタップして別のバイアルに飛ばすことを許可し、その後、両方のバイアル4を分離し、再接続することによって、1つのバイアルから別のバイアルにハエを移動します。明らかに、これは同じ直径を持つ2つのバイアルの開口部を必要とし、転送されるハエの量を制御することは困難です。一方、これは仕事を得るために迅速な手を必要とし、迷子のハエを逃げると、研究室や教室に問題が発生する可能性があります。すでに準備された十字架に余分な処女ハエや雄ハエを追加することは、ショウジョウバエ実験の別のルーチンタスクです。従来、ハエは余分なハエを添加する前に十字バイアルに固定されなければならない。
成人ショウジョウバエは、エーテル、CO2、または冷え5によって日常的に麻酔される。エーテルおよびCO2暴露と比較して、冷却は成人のショウジョウバエを固定するための最も費用対効果の高い薬剤であり、ハエと研究者(特に若い学生)の両方に最も有害でない6、7。しかし、冷たい表面やチャンバーに連続的に凝縮する水はハエを濡らします。濡れたハエの型を特定することは困難であり、操作8、9の間に容易に損傷を受ける可能性があります。これは、より広く受け入れられるから冷やす方法を防いだ。
フライ転写用のツールとフライ冷却のための方法は、前述の10.ここで、修飾された冷たい麻酔技術は、ショウジョウバエ実験に対して安全で信頼性が高く、実現可能であると報告されている。また、本論文で述べるのは、1)成人を数え、選別または廃棄する方法、2)ガラス培養バイアルを洗浄するための省力化装置とプロトコル、および3)卵を採取するための簡単なケージである。ここで説明する簡単に設計され、費用対効果の高いツールは、フライハンドリングの困難な問題に対処するために使用することができ、これらの方法はテストされ、経験豊富で初心者の研究者のための堅牢で信頼性が高く、扱いやすいことが証明されています。

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>a pair of pliers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>cordless drill driver</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>max speed: 500 rpm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>electric soldering iron</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>file</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>funnel</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>diameter of disk&#60;60mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>ice box</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>insect pins</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>infrared thermometer</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HCIYET HT-830</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>long cuff rubber gloves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>mechanical pencils</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>medical gauze</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microcentrifuge tube</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>100 ul</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>microwave oven</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Parafilm</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>peri dish</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>internal diameter 60 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>pipette tips</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>1 ml</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic film</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>plastic peri dish</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>&#934;36 mm used to cover the empty vial</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>point tweezers</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>protective work gloves</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>re-freezable hard icepacks</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>26.5&#215;14.5&#215;2.5 cm or larger</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>rubber air blower</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>snap cutter</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>soft drink bottle</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>500 ml, internal diameter c.a. 65 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>sponge stopper</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>stainless steel sponges</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>tube brush</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>vial</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>&#934;34 mm &#215; 90 mm</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

simple homemade tools to handle fruit flies&#8212;drosophila melanogaster

フルーツフライ、ショウジョウバエメラノガスターは、生物学の研究と生物学教育の両方で広く使用されています。大人のハエを扱うのは一般的ですが、実際には難しいです。ここでは、ショウジョウバエの取り扱いにおける困難な問題に対処するためのシンプルで費用対効果の高いツールを作成する方法を示します。泡のストッパーの穴が作られ、ピペットの先端か漏斗が穴に挿入される。ハエは、ピペット先端/漏斗アセンブリに一方向にのみ移動し、バイアルに出入りする成人のショウジョウバエの移動を効率的に制御することができます。既存のプロトコルは、砕いた氷で冷やし、冷たく硬い氷パック表面に移すことによって、ハエを冷やすために変更されました。アイスパックは、立体顕微鏡下で調べたときに凝縮された水から固定されたハエを保つ医療ガーゼの一部で覆われています。ハエは最終的にカウントとソートのために安楽死させられ、マイクロウェービングによって廃棄されます。卵を採取するためのボトル状のケージや、省力化装置、ガラス培養バイアルの洗浄プロトコルも開発されています。

T-およびFストッパーはあらゆる飛行の転移活動で合わせ、使用することができる簡単な用具のセットとして開発された。古い文化からいくつかの新鮮な文化にハエを移すには、新鮮なバイアルのプラグを取り外し、Fストッパーに交換し、古いバイアルのハエをタップし、すぐにプラグを取り外し、Tストッパーに置き換えます。古い食品がコンパクトである場合は、?...

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Simple Homemade Tools to Handle Fruit FliesÃƒÂ¢Ã¢â€šÂ¬Ã¢â‚¬ÂDrosophila melanogaster

ここでは、大人のショウジョウバエを移動、冷やし、殺すためにいくつかの自家製ツールを使用するだけでなく、ガラス培養バイアルをきれいにし、卵を収集します。これらの用具は作りやすく、ショウジョウバエの取り扱いにかなり効率的である。

フルーツハエを扱うシンプルな自家製ツール -ショウジョウバエメラノガスター

The fruit fly, Drosophila melanogaster, is widely used both in biological research and biology education. Handling adult flies is common but difficult in ...

フルーツハエを移し、固定するのは難しいかもしれません。これらの手法とツールを使用すると、定期的なフライ転送と固定化を簡単に行うことができます。これらのツールを作るために必要な材料は安価で入手しやすいです。アドバイザリーと教育や研究室は、簡単にそれらを作ることができます.この手順を開始する前に、電気ソドラーアイロンを使用して、ハエを移動するために使用されるバイアルの内径よりも大きい2つのスポンジプラグの中心に穴を開けます。次に、鋭利なナイフを使用して1ミリメートルのマイクロピペットチップを横に半分に切断し、2番目の1ミリメートルマイクロピペットチップの先端から1.5センチメートルを切断します。2つのピペットの先端の部分を万能接着剤と一緒に接着します。その後、細長いマイクロピペットチップを1つのスポンジプラグに挿入し、他のスポンジプラグに漏斗を挿入し、ピペットチップを個々の100マイクロ遠心分離チューブでキャップします。マイクロディセクション針を準備するには、人間工学に基調的なメカニカルペンシルの鉛リフィルの直径に一致する昆虫ピンを選択し、ペンチのペアを使用してピンの片目の端を切断します。次に、カットを平らにファイルし、鉛筆のリードを修正されたピンに置き換えます。ショウジョウバエの卵コレクションケースを準備するには、スナップカッターを使用して柔らかいプラスチック製の500ミリリットルのドリンクボトルをボトルの約2/3下に切り、テープを使用して直径60ミリメートルのリンゴジュースプレートの周りにカードペーパーのストリップを固定します。バイアルの間に成体のハエを移すには、漏斗ストッパーの漏斗の茎と先端ストッパーのピペットの先端を注意深く点検する。最初のバイアルでハエをタップダウンし、先端ストッパーでプラグを交換します。2番目のバイアルに漏斗ストッパーを差し込み、チップストッパーのピペット先端端が漏斗ストッパーの漏斗開口部に挿入されるような2番目のバイアルの上に1番目のバイアルを置きます。最初のバイアルの端をノックして、ハエがピペットチップから抜け出し、漏斗の茎を通って2番目のバイアルに入るようにします。最初のバイアルの古い食べ物がコンパクトで、バイアルが反転したときに落ちる場合は、最初のバイアルの上に2番目のバイアルを反転させ、ハエが第2のバイアルに這い上がるようにします。必要な数のハエが転送されたら、チップストッパーを漏斗ストッパーから分離し、チップストッパーを元のプラグに交換します。次に、2番目のバイアルの漏斗ストッパーを適切なプラグに交換します。冷やして成体フルーツフライを固定化するには、少なくとも24時間マイナス80度で室温で冷やされた再解放可能なアイスパックを置き、砕いた氷の中で空のバイアルを冷やします。20分後、無菌ではない医療ガーゼをわずかに湿らせ、冷たいアイスパックよりもわずかに小さく、流水で湿らせた。ガーゼがパックの表面に密接にしがみ合うように、ガーゼをアイスパックの表面に置きます。次に、吸収性紙を使用して、冷蔵、空のバイアルから水を拭き取り、バイアルに固定化する必要がある成体のハエを移します。すべてのハエが移動したら、冷やしたバイアルを覆い、砕いた氷に対してバイアルを2〜3回ノックして、すべてのハエをバイアルの底までタップします。ハエはすぐに固定されます。バイアルを氷の上に1分間戻してから、アイスパックを覆うガーゼにハエを注ぎます。その後、重なり合うハエを広げるためにペイントブラシを使用します。固定化されたハエをステレオ顕微鏡で調べるには、解剖顕微鏡からステージクリップを取り外し、プラスチックフィルムでステージを覆います。アイスパックをステージに置き、可能な限り顕微鏡の冷たい光源をオンにします。次に、ステレオ顕微鏡を焦点を合わせ、冷たいハエがはっきりと見えるまでアイスパックを動かします。ハエを見た後、翼によって、新しい文化バイアルに各フライを転送します。数え、選別、または廃棄のために大人のハエを電子レンジで犠牲にするには、目的の大人のハエを空のバイアルに移し、ペトリ皿でバイアルを覆います。次に、マイクロ波内のバイアルを反転させ、80秒間標準温度でバイアルを加熱します。死んだハエはペトリ皿に落ちるでしょう。保護作業用手袋を着用し、ハエを白紙カードに注ぎ、ステレオ顕微鏡でカードを転送し、以前に準備したマイクロディセクション針で検査やカウントを行います。ハエは試験の終わりに捨てることができます。ボトル状の卵のコレクションケージの転送の場合は、リンゴジュースプレートに変更された卵コレクションケージボトルを挿入します。パラフィンフィルムのストリップを使用して、2つの成分の周りに関節を密封します。次に、漏斗ストッパーでケージを差し込み、培養バイアルをストッパーに反転させます。次に、ハエを漏斗ストッパーを通してケージに加え、ケージを培養バイアルストッパーと差し込みます。食べ物を変更するには、新しいプレートにリンゴジュースプレートを交換する前に、空のバイアルにハエを転送します。その後、バイアルからケージに戻ってハエを転送します。卵のコレクションの最後に、いくつかの新しい培養バイアルにハエを転送する前に空のバイアルにハエを転送します。この修飾された冷たい麻酔法を使用して、ハエはアイスパック上で不動に保たれ、凝縮水を吸収する医療ガーゼはハエを乾燥させ、冷たいハエのフェノタイピングまたは取り扱いを容易にします。室温25度では、冷やされた硬いアイスパックの表面の温度が20分以内にマイナス19度からマイナス2度まで劇的に上昇し、古いハエと新しく孵化したハエの両方に安全な高原に急速に達します。マイクロ波誘電加熱は、過剰にエザリジングまたは深い凍結に比べて、成体ハエを殺すためにより速く、より便利な薬剤です。オーバーエーテル化されたハエと同様に、マイクロ波ハエは体から直角に翼を伸ばします。一般的に、マイクロウェーブによって殺されたフライカーカスは、エーテルまたは凍結によって殺されたものよりも重量が著しく軽いが、熱は体の形を歪めず、死体はカリカリまたはターギッドにならない。湿らせたガーゼをアイスパックに押し込む前にできるだけ多くの水を絞り出し、ガーゼがアイスパックに密接にしがみついていることを確認してください。また、ハエをバイアルに移す前に、冷やした空のバイアルから凝縮水を拭き取ることが重要です。

Research

JoVE Journal

Biology

Simple Homemade Tools to Handle Fruit Flies&#8212;Drosophila melanogaster

Studying Aggression in Drosophila (fruit flies)

Studying Aggression in Drosophila fruit flies

ショウジョウバエの勉強攻撃（ミバエ類）

Aggression is an innate behavior that evolved in the framework of defending or obtaining resources.  This complex social behavior is influenced by ...

Using Micro-Electro-Mechanical Systems (MEMS) to Develop Diagnostic Tools

Using Micro-Electro-Mechanical Systems MEMS to Develop Diagnostic Tools

診断ツールを開発するマイクロエレクト​​ロメカニカルシステム（MEMS）の使用

Homemade Site Directed Mutagenesis of Whole Plasmids

全プラスミドの自家製のサイトが特異的突然変異誘発

Site directed mutagenesis of whole plasmids is a simple way to create slightly different variations of an original plasmid. With this method the cloned ...

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

Dissection of Oenocytes from Adult Drosophila melanogaster

大人からOenocytesの解剖キイロショウジョウバエ</em

In Drosophila melanogaster, as in other insects, a waxy layer on the outer surface of the cuticle, composed primarily of hydrocarbon compounds, provides ...

Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster

Insulin Injection and Hemolymph Extraction to Measure Insulin Sensitivity in Adult Drosophila melanogaster

インスリン注射と成人のインスリン感受性を測定する血リンパの抽出キイロショウジョウバエ</em

Conserved nutrient sensing mechanisms exist between mammal and fruit fly where peptides resembling mammalian insulin and glucagon, respectively function ...

Isolation and Biophysical Study of Fruit Cuticles

果実キューティクルの単離と生物物理学的研究

The cuticle, a hydrophobic protective layer on the aerial parts of terrestrial plants, functions as a versatile defensive barrier to various biotic and ...

Fruit Volatile Analysis Using an Electronic Nose

電子鼻を使用した果実の揮発性の分析

Numerous and diverse physiological changes occur during fruit ripening, including the development of a specific volatile blend that characterizes fruit ...

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

Measurement of Lifespan in Drosophila melanogaster

における寿命の測定<em&gt;キイロショウジョウバエ</em

Aging is a phenomenon that results in steady physiological deterioration in nearly all organisms in which it has been examined, leading to reduced ...

High-throughput Functional Screening using a Homemade Dual-glow Luciferase Assay

自家製デュアルグロールシフェラーゼアッセイを用いて、ハイスループット機能スクリーニング

We present a rapid and inexpensive high-throughput screening protocol to identify transcriptional regulators of alpha-synuclein, a gene associated with ...

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

Simple Method for Fluorescence DNA In Situ Hybridization to Squashed Chromosomes

蛍光DNAための簡単​​な方法<em&gt;その場で</em&gt;ぺしゃんこ染色体へのハイブリダイゼーション

DNA in situ hybridization (DNA ISH) is a commonly used method for mapping sequences to specific chromosome regions. This approach is particularly ...