Name: a rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin a injection into the lacrimal glands: application to drug efficacy studies
Uploaded: 2020-01-24T15:00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies at JoVE

وقد أُنجزت جميع الدراسات المتعلقة بالحيوانات وفقاً لجميع المبادئ التوجيهية التنظيمية والمؤسسية ذات الصلة والامتثال لها. تمت الموافقة على جميع الدراسات من قبل مجلس المراجعة المؤسسية لجامعة ستوني بروك وأجريت وفقًا لبيان ARVO لاستخدام الحيوانات في أبحاث العيون والرؤية.
تم دعم هذه الدراسات جزئيا من خلال منحة فرص البحث المستهدفة من كلية الطب في جامعة ستوني بروك (المنحة رقم 1149271-1-82502) ومنحة بحثية من Medicon Pharmaceuticals, Inc. , Setauket , NY. يشكر المؤلفون ميشيل ماكتيرنان على دعمها التحريري.

<ol>
	<li>Paulsen, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+in+the+Beaver+Dam+Offspring+Study:+prevalence,+risk+factors,+and+health-related+quality+of+life.">Dry eye in the Beaver Dam Offspring Study: prevalence, risk factors, and health-related quality of life.</a> American Journal of Ophthalmology. 157 (4), 799-806 (2014).</li><li>Vehof, J., Kozareva, D., Hysi, P. G., Hammond, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+risk+factors+of+dry+eye+disease+in+a+British+female+cohort.">Prevalence and risk factors of dry eye disease in a British female cohort.</a> British Journal of Ophthalmology. 98 (12), 1712-1717 (2014).</li><li>Tan, L. L., Morgan, P., Cai, Z. Q., Straughan, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+and+risk+factors+for+symptomatic+dry+eye+disease+in+Singapore.">Prevalence of and risk factors for symptomatic dry eye disease in Singapore.</a> Clinical and Experimental Optometry. 98 (1), 45-53 (2015).</li><li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+Report+Executive+Summary.">TFOS DEWS II Report Executive Summary.</a> The Ocular Surface. 15 (4), 802-812 (2017).</li><li>Baudouin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+impact+of+inflammation+in+dry+eye+disease:+proceedings+of+the+ODISSEY+group+meeting.">Clinical impact of inflammation in dry eye disease: proceedings of the ODISSEY group meeting.</a> Acta Ophthalmologica (Copenhagen). 96 (2), 111-119 (2018).</li><li>Calonge, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+disease+as+an+inflammatory+disorder.">Dry eye disease as an inflammatory disorder.</a> Ocular Immunology and Inflammation. 18 (4), 244-253 (2010).</li><li>Pflugfelder, S. C., de Paiva, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Pathophysiology+of+Dry+Eye+Disease:+What+We+Know+and+Future+Directions+for+Research.">The Pathophysiology of Dry Eye Disease: What We Know and Future Directions for Research.</a> Ophthalmology. 124 (11S), S4-S13 (2017).</li><li>Buckley, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+and+management+of+dry+eye+disease.">Assessment and management of dry eye disease.</a> Eye (London, England). 32 (2), 200-203 (2018).</li><li>Clayton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+Eye.">Dry Eye.</a> New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).</li><li>Barabino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+dry+eye.">Animal models of dry eye.</a> Archivos de la Sociedad Espa&#241;ola de Oftalmolog&#237;a. 80 (12), 695-696 (2005).</li><li>Stern, M. E., Pflugfelder, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+We+Have+Learned+From+Animal+Models+of+Dry+Eye.">What We Have Learned From Animal Models of Dry Eye.</a> International Ophthalmology Clinics. 57 (2), 109-118 (2017).</li><li>Chen, Z. Y., Liang, Q. F., Yu, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Cornea. 30 (9), 1024-1029 (2011).</li><li>Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Gray, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">A new rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 28 (2), 225-228 (1987).</li><li>Guo, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+lacrimal-lymphoid+mixed-cell+reactions+induce+dacryoadenitis+in+rabbits.">Autologous lacrimal-lymphoid mixed-cell reactions induce dacryoadenitis in rabbits.</a> Experimenal Eye Research. 71 (1), 23-31 (2000).</li><li>Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+simple+dry+eye+model+in+the+albino+rabbit+and+evaluation+of+some+tear+substitutes.">Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes.</a> Ophthalmic Research. 31 (3), 229-235 (1999).</li><li>Xiong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+dry+eye+model+induced+by+topical+medication+of+a+preservative+benzalkonium+chloride.">A rabbit dry eye model induced by topical medication of a preservative benzalkonium chloride.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 49 (5), 1850-1856 (2008).</li><li>Heymann, F., Hamesch, K., Weiskirchen, R., Tacke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+concanavalin+A+model+of+acute+hepatitis+in+mice.">The concanavalin A model of acute hepatitis in mice.</a> Lab Animal. 49 (1 Suppl), 12-20 (2015).</li><li>Nagelhout, T. J., Gamache, D. A., Roberts, L., Brady, M. T., Yanni, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+tear+film+integrity+and+inhibition+of+corneal+injury+by+dexamethasone+in+a+rabbit+model+of+lacrimal+gland+inflammation-induced+dry+eye.">Preservation of tear film integrity and inhibition of corneal injury by dexamethasone in a rabbit model of lacrimal gland inflammation-induced dry eye.</a> Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics. 21 (2), 139-148 (2005).</li><li>Honkanen, R. A., Huang, L., Xie, G., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphosulindac+is+efficacious+in+an+improved+concanavalin+A-based+rabbit+model+of+chronic+dry+eye+disease.">Phosphosulindac is efficacious in an improved concanavalin A-based rabbit model of chronic dry eye disease.</a> Translational Research. 198, 58-72 (2018).</li><li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+novel+phospho-non-steroidal+anti-inflammatory+drugs,+OXT-328,+MDC-22+and+MDC-917,+inhibit+adjuvant-induced+arthritis+in+rats.">The novel phospho-non-steroidal anti-inflammatory drugs, OXT-328, MDC-22 and MDC-917, inhibit adjuvant-induced arthritis in rats.</a> British Journal of Pharmacology. 162 (7), 1521-1533 (2011).</li><li>Mattheolabakis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topically+applied+phospho-sulindac+hydrogel+is+efficacious+and+safe+in+the+treatment+of+experimental+arthritis+in+rats.">Topically applied phospho-sulindac hydrogel is efficacious and safe in the treatment of experimental arthritis in rats.</a> Pharmaceutical Research. 30 (6), 1471-1482 (2013).</li><li>Osmalek, T., Froelich, A., Tasarek, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+gellan+gum+in+pharmacy+and+medicine.">Application of gellan gum in pharmacy and medicine.</a> International Journal of Pharmaceutics. 466 (1-2), 328-340 (2014).</li><li>Lemp, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+of+the+National+Eye+Institute/Industry+workshop+on+Clinical+Trials+in+Dry+Eyes.">Report of the National Eye Institute/Industry workshop on Clinical Trials in Dry Eyes.</a> Contact Lens Association of Ophthalmologists Journal. 21 (4), 221-232 (1995).</li><li>Dal Piaz, F., Braca, A., Belisario, M. A., De Tommasi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioredoxin+system+modulation+by+plant+and+fungal+secondary+metabolites.">Thioredoxin system modulation by plant and fungal secondary metabolites.</a> Current Medicinal Chemistry. 17 (5), 479-494 (2010).</li><li>Davis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Anatomy+and+Histology+of+the+Eye+and+Orbit+of+the+Rabbit.">The Anatomy and Histology of the Eye and Orbit of the Rabbit.</a> Transactions of the American Ophthalmological Society. 27, 402-441 (1929).</li><li>Lima, L., Lange, R. R., Turner-Giannico, A., Montiani-Ferreira, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+standardized+endodontic+paper+point+tear+test+in+New+Zealand+white+rabbits+and+comparison+between+corneal+sensitivity+followed+tear+tests.">Evaluation of standardized endodontic paper point tear test in New Zealand white rabbits and comparison between corneal sensitivity followed tear tests.</a> Veterinary Ophthalmology. 18 (Suppl 1), 119-124 (2015).</li><li>Zheng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+efficacy+of+fibroblast+growth+factor+10+in+a+rabbit+model+of+dry+eye.">Therapeutic efficacy of fibroblast growth factor 10 in a rabbit model of dry eye.</a> Mol Med Report. 12 (5), 7344-7350 (2015).</li><li>Wiechmann, A. F., Summers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+in+the+eye:+the+physiological+significance+of+melatonin+receptors+in+ocular+tissues.">Circadian rhythms in the eye: the physiological significance of melatonin receptors in ocular tissues.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 27 (2), 137-160 (2008).</li></ol>

يعلن المؤلفون أي مصالح متنافسة باستثناء BR الذي لديه مركز الأسهم في شركة Medicon Pharmaceuticals, Inc. و Apis Therapeutics, LLC; وLH، وهو موظف في شركة Medicon Pharmaceuticals, Inc. مع مركز الأسهم في أبيس العلاجية، ذ م م.

الأرانب جذابة للغاية لدراسة DED. القرنية والملتحمة لديهم مساحة سطح أقرب إلى أن البشر بالمقارنة مع الفئران والجرذان. تكملة من الإنزيمات استقلاب المخدرات مثل esterases، والأنسجة من الغدد الدمعية مماثلة لتلك التي من البشر، وعيونهم كبيرة بما يكفي لدراسات الدوائية بالمعلومات. بالمقارنة مع الخنازير والقرود ، والتي تشترك في ميزات مماثلة ، فإنها تكلف أقل والتلاعب التجريبي أسهل. إذا تم التفكير في دراسات ميكانيكية ، فإن العيب النسبي للأرنب ، مقارنة بالفئران ، هو أن عددًا أقل من الكواشف (على سبيل المثال ، الأجسام المضادة أحادية النسيلة) متاح. من ناحية أخرى ، الأرنب هو أعلى بكثير من الفئران لدراسات الصيدلة والتوزيع الحيوي لأن الأنسجة الفردية يتم تشريحها بسهولة وحجم كاف للعمل التحليلي ، وتجنب "تجميع العينات".
المعلمة العامة الحرجة هي فترة تأقلم الأرانب. يتم شحن الحيوانات من البائع في ظل ظروف لا تضمن في كثير من الأحيان بيئة نقل من درجة الحرارة المناسبة أو الرطوبة. قد تكون بعض الحيوانات قد وضعت بالفعل العين الجافة عند الوصول. يوصى بفترة أسبوعين من التأقلم. بنفس القدر من الأهمية هو الاهتمام الدقيق بالرطوبة ودرجة الحرارة في الفضاء حيث توجد الأرانب الدراسة في vivarium. الانحرافات في أي شرط يمكن أن تحفز اختلافات كبيرة في حالة العين. لديك مرطبات احتياطية ومزيلات الرطوبة في متناول اليد. إذا فشل النظام المركزي، فتصرف بسرعة لاستعادة الرطوبة المحيطة باستخدام المعدات الاحتياطية. نضع في اعتبارنا أن مثل هذه التطورات المؤسفة هي أكثر شيوعا في أشهر الصيف. الخطوات الثلاث الأكثر أهمية، ومع ذلك، لتحفيز بنجاح DED في الأرانب هي: 1) الاستخدام الماهر للتصوير الولايات المتحدة لتحديد ILG وتوجيه وتأكيد حقن كون A; 2) ضمان حقن كل من ILG وجزأين من SLG؛ و 3) بشكل موثوق واستنساخي المعلمات من DED.
تطوير المهارة التجريبية المطلوبة ليست تافهة ولكن لا ينبغي أن تردع أي محقق جاد. توقع أن يتم إكمال منحنى التعلم في غضون خمسة تكرارات. نظام التصوير في الولايات المتحدة ذات جودة معقولة أمر ضروري. الاعتراف بالسمات التشريحية من قبل الولايات المتحدة مهم ، لذلك ، يجب على المحقق مراجعة تشريح الأرانب. وصف ممتاز لتشريح الأرانب من قبل ديفيس25، وهو كلاسيكي ، يمكن أن يكون مفيدا للغاية. نضع في اعتبارنا أيضا الاختلاف في حجم ILG. والنتيجة الطبيعية لذلك هي أن نجاح كون A يجب أن تتأكد دائما مع متابعة التصوير. الاختلافات في الاستجابة لCon A في مجموعة من الأرانب غالبا ما يرجع إلى تقنية الحقن (حقن غير ناجحة أو ناجحة جزئيا) أو إلى تجاهل قدرة أنسجة الغدة الدمعية المتبقية للتعويض مع الإفراط في إنتاج الدموع. بالنسبة لأولئك الذين يرغبون في السيطرة على تقنية الحقن ، يمكن أن يكون حقن أزرق الميثيلين متبوعًا بتشريح تشريح يُحدّد سريعًا مفيدًا ؛ يتم تحقيق التصور إذا وصل إلى الغدة الدمعية أو انسكب على الأنسجة المجاورة. حتى الآن ، تم تنفيذ طريقة الحقن هذه أكثر من 270 مرة من قبل المؤلفين دون مضاعفات واحدة.
يمكن أن يكون فحص المعلمات الخمسة لـ DED المعروضة أعلاه صعبًا كما هو تصميمهم في الممارسة السريرية. على الرغم من أن الاختلافات الإيقاعية لم يتم توثيقها رسميًا في أي منها ، إلا أن هناك أدلة خلفية كافية على مثل هذه الظواهر في العين28 التي يجب أن يتم فحصها في نفس الوقت من اليوم (± 1 h) ، خاصة عندما يتم إجراء المقالات المتكررة ومقارنتها ببعضها البعض. الاتساق في تنفيذ هذه المقالات أمر ضروري. مطلوب فريق من اثنين. أربعة أو أكثر من المحققين في نفس الغرفة المشاركة في المقالات يمكن أن تكون مدمرة، نظرا لأن بعض الخطوات تتطلب توقيت صارم. ومن المهم تقديم وثائق فوتوغرافية مناسبة وعالية الجودة، حيثما أشير إليها.
هذا النموذج مناسب بشكل مثالي لدراسات تطوير الأدوية. إتقان النموذج الحيواني وتقنيات الاسبهي يضمن استنساخ ممتازة19 من دراسات الفعالية والسلامة.
هذا هو نهج تجريبي قوي لأنه يقضي على التباين الملتبس للنماذج السابقة ، وقد تبسيط النموذج الحيواني ومعيار أساسا المعلمات الخمسة من DED. وقد أكد التطبيق الناجح لهذا النموذج على دراسة وكيل العلاجية مرشح فائدته العملية كنموذج الحيوان بالمعلومات لمرض في حاجة ماسة إلى عوامل جديدة وفهم أعمق من الإمراض.

مرض جفاف العين (DED) هو حالة مزمنة مع ارتفاع معدل الانتشار والمراضة1،2،3،4. التهاب يلعب دورا رئيسيا في الإمراض5،6. وتصور الفيزيولوجيا المرضية للإدارة على أنها مستمدة إما من نقص الإنتاج أو الإفراط في تبخر الدموع؛ ومن المعروف أيضا السابق كما مائي ناقص DED7. متلازمة Sjögren، وهو سبب نموذجي درس على نطاق واسع من DED، ويؤثر في المقام الأول على الغدد الدمعية (LGs) وهو مثال صارخ على أهميتها في مسببات الأمراض من DED. غالباً ما يتم التعامل مع DED بالدموع الاصطناعية التي توفر الإغاثة المؤقتة، أو مع السيكلوسبورين أو lifitegrast، وكلاهما قمع التهاب العين. لا شيء من العلاجات المتاحة لDED هي الأمثل، مما يتطلب تطوير وكلاء جديدة8،9.
ويعوق البحث عن عوامل علاجية جديدة لوزارة التنمية الدولية ثلاثة تحديات رئيسية هي: عدم وجود هدف جزيئي معترف به للعقاقير، وهو ما قد يكون بعيد المنال بالنظر إلى التعقيد الفيزيولوجي للإدارة؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد الطبيعية؛ والافتقار إلى الموارد. الرّازة بين العوامل الواعدة؛ وعدم وجود نماذج الحيوانات التي تلخيص السمات الرئيسية للDED.
وكما هو الحال مع معظم جهود تطوير الأدوية، فإن النماذج الحيوانية الإعلامية لـ DED هي أداة تحقيق حاسمة، على الرغم من البيان البديهي بأنه لا يوجد نموذج للحيوانات يُلخص مرضًا بشريًا تمامًا. الماوس والجرذ والأرنب نماذج من DED هي الأكثر استخداما في حين تستخدم الكلاب والرئيسيات نادرا10،11. معظم أكثر من 12 أرنب DED نماذج ذكرت حتى الآن محاولة للحد من إنتاج المسيل للدموع إما عن طريق إزالة LGs أو عن طريق عرقلة وظيفتها12،13،14،15،16. وتشمل هذه النُهج الاستئصال الجراحي للوحدة الدولية للأطباء؛ واستئصال الاستئصال الجراحي للوحدة؛ واستئصال الـ ILG؛ واستئصال الـ ILG؛ و إغلاق القناة الإفرازية؛ وإضعاف وظيفة إل جي عن طريق التشعيع أو حقن أحد الخلايا الليمفاوية المنشطة ، mitogens ، توكسين البوتولينوم ، الأتروبين ، أو البنزالكلونيوم. القيود الرئيسية لهذه الأساليب هي عدم اتساقها والقمع الجزئي المتكرر للإنتاج المسيل للدموع.
Concanavalin A (Con A) ، وهو ليكتين من أصل نباتي ، هو مجموعة فرعية محفزة قوية للخلايا التتي وتم استخدامه في النماذج التجريبية لالتهاب الكبد17 وDED18. وذُكر أن النموذج الأصلي القائم على كون ألف يوفر مزايا هامة، بما في ذلك بساطته النسبية؛ تدفق الخلايا الالتهابية في LGs ، يحاكي أمراضًا مثل Sjogren ؛ تحفيز السيتوكينات البرواتية IL-1α, IL-8, و TGF-α1; انخفاض وظيفة المسيل للدموع رصدها عن طريق قياس إزالة الفلورسين المسيل للدموع وتمزق وقت التفكك (TBUT)؛ واستجابة الدواء هو مبين لكورتيكوستيرويد مضاد للالتهابات.
وعندما طُبقت هذه الطريقة الواعدة، بالإضافة إلى مزاياها، تم تحديد أوجه القصور التي استلزمت تنقيحها العام وإدخال تحسينات جذرية عليها. تم توثيق ثلاثة أوجه قصور حرجة في الطريقة. أولاً، كان النموذج حاداً؛ فأولاً، كان النموذج نموذجياً. وDED المستحثة هدأت بعد حوالي 1 أسبوع. ثانياً، كانت استجابة الحيوانات غير متسقة. كما هو موضح، في الحقن عبر الجلد "العمياء" إلى LG السفلي (ILG)، تم تسليم Con A بشكل عشوائي فقط إلى الغدة المستهدفة. كشفت دراسة مفصلة لتشريح ILG أن حجمه يمكن أن يختلف بقدر 4 أضعاف19 مما يجعل مثل هذه الحقن "ضرب أو تفوت" الجهود. وأخيراً، حتى عندما تم حقن ILG، فإن LG المتفوقة (SLG) كثيراً ما تعوض عن انخفاض تدفق التمزق، مما يجعل النموذج إشكالياً.
تم التغلب على هذه القيود الرئيسية من خلال إدخال ثلاثة تعديلات على الطريقة ، وتوليد نموذج الحيوان متفوقة من DED. أولاً، تم إجراء حقن Con A في ILG تحت توجيه الموجات فوق الصوتية (الولايات المتحدة) ، مما يضمن دخول Con A إلى الغدة. تم تأكيد نجاح الحقن من خلال الحصول على صورة أمريكية بعد الحقن ، كما هو موضح في الشكل 1. ثانياً، لإزالة مساهمة تمزق تعويضي من SLG، تم حقن كل من الأجزاء الباليبرال والمدارية من هذه الغدة مع Con A. وأخيرا، تم تحويل هذا النموذج الحاد من DED إلى واحد مزمن عن طريق الحقن المتكررة من كون A كل 7-10 أيام. وتتحقق بسهولة في هذه الأرانب DED من 2 أشهر مدة. وقد تم توثيق نجاح هذا النهج بشكل واف19.
كما سبق ذكره ، وتطبيق مهم من النماذج الحيوانية من إدارة الشؤون الديمقراطية هو تحديد فعالية وسلامة العوامل العلاجية المرشحة. وقد تجلت فائدة هذا النموذج من خلال دراسة فوسفوسولنداك (OXT-328)، وهو جزيء صغير مضاد للالتهابات رواية20،21 تدار كقطرات العين. وقد تم إثبات فعاليته ابناء على لوحة من المعلمات من DED19. البساطة النسبية والطبيعة الإعلامية لهذا النموذج سمحت أيضا مقارنة جنبا إلى جنب من فوسفوسولنداك إلى اثنين من الأدوية المعتمدة لادارة الاغذية والعقاقير DED, السيكلوسبورين وlifitegrast, مما يدل على تفوقها قوية قبل السريرية.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm macro lens</td>
			<td>Canon EF 100mm f/2.8L IS USM</td>
			<td>3554B002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 gauge needles (5/8)</td>
			<td>Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305115</td>
			<td>Needles for injecting ConA into the lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27 gauge needles (5/8)</td>
			<td>Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305921</td>
			<td>Needles for injecting ConA into the lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aceproinj (acepromazine)</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>NDC11695-0079-8</td>
			<td>0.1ml/kg subcutaneously injection for rabbit sedation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia vaporizer</td>
			<td>VetEquip, Pleasanton, CA</td>
			<td>Item #911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bishop Harmon Forceps</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>E1500-C</td>
			<td>Tissue forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caliper</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>E-2404</td>
			<td>Caliper used to measure length of needle during ConA injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concanavalin A</td>
			<td>Sigma, St. Louis, MO</td>
			<td>C2010</td>
			<td>Make 5mg/ml in PBS for injection into rabbit lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DSLR camera</td>
			<td>Canon EOS 7D DSLR</td>
			<td>3814B004</td>
			<td>Digital single lens reflex camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescein</td>
			<td>AKRON, Lake Forest, IL</td>
			<td>NDC17478-253</td>
			<td>Dilute to 0.2% with PBS to measure TBUT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein, Melville, NY</td>
			<td>29405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactoferrin ELISA kit</td>
			<td>MyBiosource, San Diego, CA</td>
			<td>MBS032049</td>
			<td>Measure tear lactoferrin level</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lidocaine</td>
			<td>Sigma, St. Louis, MO</td>
			<td>L5647</td>
			<td>1% in PBS for anesthesia agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macro/ring flash</td>
			<td>Canon Macro Ring Lite MR-14EXII</td>
			<td>9389B002AA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmolarity tips</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>#100003 REV R</td>
			<td>Measure tear osmolarity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (phosphate buffered saline)</td>
			<td>Mediatech, Inc. Manassas, VA</td>
			<td>21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit, New Zealand White or Dutch Belted (as described in text)</td>
			<td>Charles River Labs, Waltham, MA</td>
			<td>2-3 kg</td>
			<td>Research animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Amcon Laboratories Inc., St. Louis, MO</td>
			<td>NDC51801-004-40</td>
			<td>1% in PBS, stain the ocular surface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schirmer strips</td>
			<td>Eaglevision, Katena products. Denville, NJ</td>
			<td>AX13613</td>
			<td>Measure tear production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Loupes +1.50</td>
			<td>Designs for Vision, Bohemia, NY</td>
			<td>Specialty item</td>
			<td>Provide magnificantion of ocular surface while observing tear break up and performing Concanavalin A injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TearLab Osmometer</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>Model #200000W REV A</td>
			<td>Measure tear osmolarity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound probe</td>
			<td>VisualSonics Toronto, Ont</td>
			<td>MX 550 S</td>
			<td>Untrasonography-guide Con A injection for inferior lacrimal gland</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin a injection into the lacrimal glands: application to drug efficacy studies

مرض العين الجاف (DED)، وهو مرض التهابي متعدد العوامل من سطح العين، يصيب 1 من كل 6 بشر في جميع أنحاء العالم مع آثار مذهلة على نوعية الحياة وتكاليف الرعاية الصحية. إن عدم وجود نماذج للحيوانات الإعلامية التي تُلخص ملامحها الرئيسية يعوق البحث عن عوامل علاجية جديدة لوزارة الصحة والديمقراطية. نماذج الحيوانات DED المتاحة محدودة الاستنساخ والفعالية. يتم تقديم نموذج هنا يتم فيه حث DED عن طريق حقن الكونكونافالين ميتوجين A (Con A) في الغدد المحيطية المدارية للأرانب. الجوانب المبتكرة لهذا النموذج هي استخدام الموجات فوق الصوتية (الولايات المتحدة) التوجيه لضمان الحقن الأمثل واستنساخها من كون A في الغدة الدمعية السفلي; حقن Con A في جميع الغدد الدمعية المدارية التي تحد من الإنتاج التعويضي للدموع؛ واستخدام تكرار الحقن الدوري من كون أ التي تطيل حالة DED في الإرادة. يتم رصد DED واستجابتها لعوامل الاختبار مع لوحة من المعلمات التي تقيّم إنتاج المسيل للدموع ، واستقرار الفيلم المسيل للدموع ، وحالة الغشاء المخاطي للقرنية والملتحمة. وهي تشمل الأوسولاريتي المسيل للدموع، المسيل للدموع تفكك الوقت، اختبار المسيل للدموع شيرمر، ارتفع تلطيخ البنغال، ومستويات الكتوفيرين المسيل للدموع. ويرد وصف تفصيلي لتحريض دائرة المؤشرات على المؤشرات ورصد بارامتراتها. هذا النموذج بسيط وقوي وقابل للاستنساخ وغني بالمعلومات. هذا النموذج الحيواني مناسب لدراسة فسيولوجيا التمزق والفيزيولوجيا المرضية لـ DED وكذلك لتقييم فعالية وسلامة العوامل المرشحة لعلاج DED.

Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies at JoVE

A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies

تصف هذه المقالة تطوير طريقة للحث على مرض العين الجاف الحاد أو المزمن في الأرانب عن طريق حقن concanavalin A إلى جميع أجزاء نظام الغدة الدمعية المدارية. هذه الطريقة، متفوقة على تلك التي ذكرت بالفعل، يولد نموذج استنساخها، مستقرة من العين الجافة مناسبة لدراسة العوامل الدوائية.

نموذج أرنب من مرض العين الجاف المُقوّل المُسبّب بواسطة Concanavalin حقنة في الغدد اللارِسية: تطبيق على دراسات فعالية الدواء

Dry eye disease (DED), a multifactorial inflammatory disease of the ocular surface, affects 1 in 6 humans worldwide with staggering implications for ...

طريقتنا توفر نموذج حيواني موثوق به في عداد المفقودين من مرض جفاف العين التي يمكن أن تكون حادة أو مزمنة بفضل طريقتنا في حقن جميع الغدد الدمعية وتكرار الحقن. هذه التقنية يسلم موثوق Concanavalin ألف إلى الغدة اللادمية السفلي باستخدام التوجيه الموجات فوق الصوتية إلى الغدد ذات الأحجام المتغيرة على نطاق واسع وما يصل إلى الغدة اللادمية متفوقة مما يجعل هذه الطريقة نهجا كاملا. يوفر هذا النموذج وسيلة بسيطة، محسنة، غير الجراحية للحث على مرض العين الجافة مائي نقص.وهو مناسب تماما لدراسة فعالية المخدرات والأمراض الفيزيولوجيا. تحديد incisure الخلفي واستخدام التعريب الموجات فوق الصوتية يمكن أن يكون تحديا في البداية. إزالة جميع الفراء أمر بالغ الأهمية للمساعدة في توطين الموجات فوق الصوتية لكل من هذه الخطوات.إثبات الإجراء سيكون (وي هوانغ) طالب دراسات عليا من مختبري بعد تأكيد التخصير الخفيف من خلال مراقبة وضعية الرأس المريحة مع فصوص الأذن التي لم تعد تستقيم بشكل كامل ، استخدم ميكروبيبت لتطبيق 25 ميكرولترات من الليدوكائين الخالية من المواد الحافظة على العين الأولى ووضع منظار مرنة لغطاء الأسلاك بين الجفون. باستخدام 0.3 ملقط، فهم غشاء nictating في ذروتها وتمديدها على القرنية.باستخدام إبرة حادة قياس 26، حقن ليدوكاين 1٪ مع 1:100، 000 الابينفرين subconjuctivally في قاعدة الغشاء nictating. وينبغي أن تشكل bleb معتدلة على الغشاء. ثم إزالة المنظار وجعل حقنة مماثلة في الغشاء الأيسر.بعد ما يقرب من خمس دقائق، وضع منظار الغطاء مرة أخرى في العين زميل واستخدام 0.3 ملقط لسحب غشاء nictating في ذروتها. باستخدام مقص Westcott ، قطع الغشاء nictating قبالة في قاعدتها وإزالة المنظار. ثم ضع مرهم مضاد حيوي موضعي على العين.للجزء بالكبرال من حقن الغدة اللادمية متفوقة، بعد التأكد من التغفير، القص قبالة الفراء في منطقة ما قبل المداري وفروة الرأس واستخدام كريم إزالة الشعر لإزالة تماما أي الفراء المتبقية. بعد دقيقتين إزالة كريم وتطبيق 25 ميكرولترات من 1٪ ليدوكاين خالية من المواد الحافظة للعين المناسبة. Evert الجفن العلوي وتطبيق ضغط متوسط لطيف على الحافة المدارية الخلفية حتى ينظر protuberance بمناسبة الجزء palpebral من الغدة.باستخدام ملقط ذات أسنان دقيقة ومحاقن درنة درنة مجهزة بإبرة قياس 27، اختراق الغدة مباشرة عبر نهج عبر الconjunctival تقدم الإبرة اثنين ملليمتر في الأنسجة وحقن 100 ميكرولترات من 500 ميكروغرام حل من Concanavalin A أو A.على الفور بعد الحقن، وتطبيق الضغط الوسيط على الكرة الأرضية للتسبب في الغدة القشرية متفوقة المدارية لبرز من incisure الخلفي. باستخدام ملقط منحني مغلقة، المسافة البادئة في المنطقة حتى يتم الشعور فتحة عظمية في الجمجمة وتطبيق المزيد من الضغط المتواضع مع ملقط لترك المسافة البادئة في الجلد لتكون بمثابة معلم لوضع إبرة. إدراج حقنة درنة درنة مجهزة بإبرة قياس 27 عمودي على الجلد على علامة المسافة البادئة حوالي ربع بوصة في شق وإعادة توجيه الإبرة بشكل خلفي وخارجي نحو canthus الجانبي تهدف إلى نقطة الوسط بين موقع الحقن والحافة المدارية العظمية.بمجرد الوصول إلى محور الإبرة ، وحقن ببطء 0.2 ملليلتر من محلول 1000 ميكروغرام من حقن Con A.For ILG ، اعرض الحيوان من الجانب لتحديد مكان بروز ILG على طول الجزء الأمامي السفلي من المدار. استخدم قلمًا جراحيًا لوضع علامة على الجلد لرسم خط عمودي حيث ينتقل الجزء السطحي من غدة ILG من مكان الراحة السطحي على العظم الزيج إلى موقعه الأكثر توسطًا في المدار. اكتساح مسبار الموجات فوق الصوتية عقد عموديا عبر الخط على الجلد لتحديد نهاية العظام الزيج.يحدث انتقال ILG حيث تتغير صورة الغدة من خط hyperechoic محيط إلى واحد بدون حد الوسيط يمكن التعرف عليها. وسيكون الموقع النسبي لليد إلى الخط المرسوم على الجلد عند ملاحظة هذا التغيير هو موقع الحقن. لوضع كون A في غدة عند نقطة مجرد وسيلة وسيطة إلى عظم القوس الزيمي، تعيين العمق المطلوب للحقن كعمق للإشارة فرط ية العظام الزيج بالإضافة إلى ملليمتر واحد ناقص طول معروف من الإبرة.أدخل الإبرة حوالي 12 ملليمترًا في الغدة في موقع الحقن قبل الانسحاب ببطء حتى يساوي طول الإبرة المكشوفة خارج الجسم الفرق المحسوب. ثم حقن 0.2 ملليلتر من 1000 ميكروغرام من الحل كون ألف وتأكيد نجاح الحقن عن طريق الموجات فوق الصوتية. وينبغي أن يحمل ILG مساحة فائقة التشويك مميزة.حقن Con A تحفز استجابة التهابية قوية في الغدة اللادمية تتميز بتسلل لمفاوي كثيف يصاحبه انخفاض إنتاج المسيل للدموع. يتم قمع مستويات اللاكتوفرين المسيل للدموع مما أدى إلى ظهارة القرنية والملتحمة للخطر وزيادة تلطيخ البنغال الورد. حقن أنسجة إل جي المدارية الثلاثة تنتج حالة مرض العين الجافة متسقة وموحدة.مجموعة واحدة من حقن Con A تنتج مرض العين الجافة التي تستمر حوالي أسبوع واحد مع جميع المعايير السريرية تطبيع بحلول اليوم 10. متسلسلة Con A الحقن حوالي أسبوع واحد وبصرف النظر تمديد مدة مرض جفاف العين وفقا لذلك. بعد ما يقرب من خمس مجموعات من الحقن، وغالبا ما تصبح حالة مرض جفاف العين دائمة دون الحاجة إلى مزيد من الحقن.مثالي توطين هياكل الغدة الدمعية هو الأكثر أهمية. الإلمام التشريح القحفي والاهتمام بالتفاصيل الدقيقة بما في ذلك إزالة الفراء جنبا إلى جنب مع المهارة باستخدام الموجات فوق الصوتية جميع تحسين النتائج. وبما أن هذه التقنية المباشرة تتطلب استخدام الحادة، يجب أن يتخذ التحقيق الاحتياطات المناسبة لمنع إصابات عصا الإبرة.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

التجريبية الزرق المستحث بواسطة حقن العيني من المجهرية المغناطيسي

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model

الصلبة عبر ربط طريق ريبوفلافين والأشعة فوق البنفسجية-A الإشعاع للوقاية من قصر النظر المحورية في نموذج الأرنب

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

نيوفاسكولاريزيشن آيريس المستحثة بثقب كنموذج الفأر من إيريديس روبيوسيس

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

إنشاء نموذج العين الجافة الشديدة باستخدام استئصال الددريوادادينال الكامل في الأرانب

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

نموذج مورين من إصابة الشبكية الإقفارية الناجمة عن الشريان السباتي المشترك الثنائي العابر

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Establishment of a Mouse Severe Acute Pancreatitis Model using Retrograde Injection of Sodium Taurocholate into the Biliopancreatic Duct

إنشاء نموذج التهاب البنكرياس الحاد الوخيم للفأر باستخدام الحقن الرجعي لتاوروكولات الصوديوم في القناة الصفراوية البنكرياسية

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a ...

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

تطبيق التصوير المقطعي للتماسك البصري على نموذج فأر لاعتلال الشبكية

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

مقارنة درجة احتقان الملتحمة الموضوعية ودرجة مؤشر مرض سطح العين في متلازمة جفاف العين أثناء COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...

A Rabbit Aortic Valve Stenosis Model Induced by Direct Balloon Injury

نموذج تضيق الصمام الأبهري للأرنب الناجم عن إصابة البالون المباشر

Animal models are emerging as an important tool to understand the pathologic mechanisms underlying aortic valve stenosis (AVS) because of the lack of ...

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina in a Rabbit Model

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

Using a Rabbit Model to Explore the Efficacy of Tuina in Treating Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE

تدخل Tuina في نموذج أرنب لالتهاب المفاصل في الركبة

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...