Name: a rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin a injection into the lacrimal glands: application to drug efficacy studies
Uploaded: 2020-01-24T15:00:00
Duration: 8 min 4 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies at JoVE

Alla djurstudier slutfördes i enlighet med och efterlevnaden av alla relevanta rättsliga och institutionella riktlinjer. Alla studier godkändes av Institutional Review Board of Stony Brook University och utfördes i enlighet med ARVO uttalande för användning av djur i oftalmisk och vision forskning.
Dessa studier stöddes delvis av en riktad forskningsmöjligheter bidrag från Stony Brook University School of Medicine (Grant Number 1149271-1-82502) och ett forskningsanslag från Medicon Pharmaceuticals, Inc., Setauket, NY. Författarna tackar Michele McTernan för redaktionellt stöd.

Alla djurstudier godkändes av Institutional Review Board of Stony Brook University och utfördes i enlighet med ARVO uttalande för användning av djur i oftalmisk och vision forskning.
1. Djur och bostäder
<ol><li>Förvärva Nya Zeeland White (NZW) kaniner som väger 2-3 kg.</li>
	<li>Hus kaninerna singly i burar med strikt temperatur (65 ± 5 °F) och luftfuktighet (45 ± 5%) Kontroll. Belysningen ska ha en 12 h på/av-cykel.</li>
	<li>Ge obegränsad tillgång till vatten och standard kanin chow. Eliminera kosten anrikningar eftersom de kan innehålla vitamin A som påverkar ögat.</li>
	<li>Acklimatisera djuren i minst 2 veckor före baslinjen eller induktion av torra ögon.</li>
</ol>2. Metoder för anestesi och dödshjälp
OBS: Alla förfaranden kräver mild sedering utom Con A injektion som kräver måttlig sedering.
<ol><li>För mild sedering, injicera aceprorazin (1 mg/kg) subkutant över axlarna med en 26-gauge nål. Endpoint för mild sedering: djur upprätthåller ett avslappnat huvudläge med öronallor inte längre helt upprätt. Obs! Om rätt effekt uppnås kan ytterligare en injektion av acepromazin ges. Djur bör alltid vara vaken, lyhörd för beröring av sina morrhår, och aldrig visa avtog andning.</li>
	<li>För måttlig sedering, först ge djuren acepromazin som ovan. När effektmåttet har uppnåtts (se anmärkningen ovan) ger du isofluran med en gasmask med O2-flöde satt till 1 L/min och isofluraneleverans inställd på 5% (figur 2).</li>
	<li>Administrera isofluran tills kaninens kroppston är helt avslappnad och öronen är helt diskett. OBS: Inga kompensatoriska muskelrörelser bör uppstå när djuret slås på sin sida; andning är alltid spontan.</li>
	<li>Spontan återhämtning sker inom 2-5 min: tecken inkluderar spontana huvudrörelser och ökad eller normal muskelton. Efter den experimentella proceduren är klar med måttlig sedering, observera kaninerna i ca 30 min eller tills deras beteende återgår till det normala. OBS: Oftalmisk salva krävs inte under någon form av sedering. 1) I mild sedering är djuren fortfarande alerta och håller en blinkreflex. Vid måttlig sedering är hämningen av blinkreflexen så kort att okulärytan inte är i riskzonen. 2) Placering av oftalmisk salva på okulär yta utesluter visualisering av strukturer som bedömts under provningen.</li>
	<li>Dödshjälp: Använd en överdos av intravenöspentobarbital (100 mg/kg).</li>
</ol>3. Avlägsnande av nictitating membran
<ol><li>Utför avlägsnandet under acklimatiseringsperioden (vanligtvis den första veckan) för att möjliggöra fullständig och korrekt utvärdering av hornhinnan.</li>
	<li>
Injektion till rätt nictitating membran OBS: Om nictitating membranet i båda ögonen ska tas bort, är det enklaste att göra detta i en session. Börja med ett öga och fortsätt enligt beskrivningen. För tydlighetens beskrivning börjar denna metod med rätt öga.<ol>
<li>Placera kaninen i en lämplig storlek fasthållningspåse.</li>
		<li>Inducera mild sedering enligt beskrivningen i steg 2.1.</li>
		<li>Applicera 25 μL konserveringsfri lidokain i det högra ögat med hjälp av en mikropipett.</li>
		<li>Placera ett flexibelt trådlockspekulum mellan ögonlocken.</li>
		<li>Använd 0,3 pincett (eller motsvarande), ta tag i det nictitaterande membranet i spetsen och förläna det över hornhinnan.</li>
		<li>Injicera lidokain 1% med 1:100.000 adrenalin subkonjunktivally i basen av nictitating membranet med en 26-gauge vass nål(figur 3A). En måttlig bom bör bildas över det nictitating membranet.</li>
		<li>Ta bort spekulumet.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Utför en identisk injektion till det vänstra nictitating membranet.</li>
	<li>
Kapning av det nictitating membranet
	<ol>
<li>Efter ca 5 min, placera locket spekulum tillbaka i det högra ögat. Ta tag i och dra tillbaka det nictitating membranet i spetsen med 0,3 pincett (eller liknande).</li>
		<li>Skär av det nictitating membranet vid basen med westkottasax eller motsvarande (figur 3B). OBS: Blödningär minimal och kräver vanligtvis inte kautery. Ändå är en hög temperatur batteri kautery alltid hålls i närheten om ytterligare hemostas behövs.</li>
		<li>Ta bort spekulumet.</li>
		<li>Placera topikal antibiotikasalva på ögat (t.ex. neomycin, polymyxin, bacitracin och hydrokortison).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Lämna den hårdare körteln intakt. Den harderian körtel ses ibland när nictitating membranet dras tillbaka. OBS: Om en stor vit massa eller vävnad höjd ses i nasal eller överlägsen subkonjunktival regionen efter nictitating membranet avlägsnas, var membranet resected för nära sin bas så att Harderian körtel nã¤r spontant framfall. För att förhindra detta i efterföljande förfaranden, lämna mer av nictitating membranet vid basen.</li>
	<li>Låt den okulära ytan läka i minst 1 vecka innan ytterligare manipulering görs eller okulär yta analyser utförs.</li>
</ol>4. Mätning av torra ögonparametrar och insamling av tårprover
OBS: Mät DED-parametrar baserade på behov av studieprotokoll (t.ex. vid baslinjen och specificerade tidpunkter därefter). Mätningar för DED bör göras i följande ordning, med rigorösa ansträngningar för att troget replikera dem varje gång. Testa alla djur vid ungefär samma tid på dagen (± 1 h) för att minimera dygnsvariationer. Dessa mätningar kräver vanligtvis ett team av två utredare.
<ol><li>Placera kaninen i en fasthållningspåse. Inducera mild sedering.</li>
	<li>Tår Osmolarity22<ol>
<li>Blinka manuellt ögonlocken 5-10 gånger för att jämnt fördela tårskiktet på okulär ytan.</li>
		<li>Dra försiktigt tillbaka det nedre locket.</li>
		<li>Prova tårar med TearLab Osmometer vid korsningen av palpebral och bulbar bindhinnan längs den nedre fornix, bara posterior till basen av den trunkerade nictitating membranet.</li>
		<li>Mät osmolaritet med TearLab Osmolarity Test enligt tillverkarens anvisningar.</li>
	</ol></li>
	<li>Rivupplösningstid (TBUT)<ol>
<li>Mörkare rummet för denna analys.</li>
		<li>Placera ett trådlockspekulum mellan ögonlocken.</li>
		<li>Applicera en 50 μL-droppe på 0,2% fluorescein över hornhinnans yta med hjälp av en mikropipett. Om en spåsdistribution av fluorein över hornhinnan inte erhålls med den första droppen, placera en andra droppe.</li>
		<li>Starta omedelbart en timer.</li>
		<li>Observera prekorneal tår film under ett blått ljus. TBUT definieras som den tid det tar att utveckla svarta prickar, linjer eller uppenbara störningar i fluorescein filmen(figur 4). Om det behövs, använd kirurgiska luppar som ger 1,50 förstoring för att bättre visualisera tidiga tecken på uppbrott. Bildskärm i upp till 1 min; Om uppbrott enligt definitionen här inträffar efter 1 min, spela in TBUT för endast 60 s.</li>
	</ol></li>
	<li>Schirmer's Tear Test (STT)<ol>
<li>Applicera en 25 μL droppe konserveringsfri lidokain på den okulära ytan.</li>
		<li>Placera en Weck cell kirurgiska spjut i sämre fornix att absorbera resterande lidokain och någon tårvätska. Använd vid behov det nedre ögonlocket för att täcka svampens proximala ände för att hålla den på plats(figur 5A).</li>
		<li>Efter ca 30 s, ta bort Weck svampen.</li>
		<li>Omedelbart sätta en Schirmer s tår testremsa i utrymmet mellan hornhinnan och palpebral bindhinna vid mittpunkten på det nedre locket.</li>
		<li>Starta omedelbart en timer (figur 5B).</li>
		<li>Efter 5 min, mät längden på den fuktade delen av remsan; detta är STT-värdet.</li>
		<li>Utför mått i treexemplar och rapportera genomsnittet av de 3 avläsningarna som STT-värde.</li>
	</ol></li>
	<li>Insamling av tårprover
	<ol>
<li>För att samla in tårprover för assaying nivåer av olika analyter i dem såsom laktoferrin, efter ATT STT-värdet registreras vid 5 min, lämna remsan på plats tills vätning på minst 20 mm erhålls. Obs! Om adekvat vätning inte inträffar efter att DED har inducerats, förremsan djupare in i den nedre fornix för att nå denna slutpunkt inom rimlig tid.</li>
		<li>Skär den fuktade remsan och placera omedelbart i 490 μl kyld tear collection buffert (4% BSA, 1M NaCl, 0,1% Tween-20 i PBS med proteinashämmare cocktail).</li>
		<li>Förvara proverna på istills de kan förvaras vid -80 °C, där de ska förbli tills de analyseras.</li>
	</ol></li>
	<li>Rose Bengal Färgning (RBS)<ol>
<li>Applicera 50 μL 1% konserveringsfri lidokain på hornhinnan med hjälp av en mikro-pipett.</li>
		<li>Efter 30 s, placera 25 μL 1% rosenbengal på okulär yta och blinka manuellt ögonlocket för att fördela den jämnt.</li>
		<li>Starta omedelbart en timer.</li>
		<li>På 3,5 min, placera ett trådlock spekulum mellan locken.</li>
		<li>På 4,0 min fotograferar du den överlägsna konjunktivit och hornhinnans yta(figur 6). Justera till den typ av kamera som används. Typiska inställningar: digital reflexkamera med en enda lins, bländares prioritetsläge (bländare 13 eller större), ISO 6000, 100 mm makroobjektiv fäst med två förlängningsrör på 12,5 mm, manuellt fokusläge, objektiv vid maximal förstoring och belysning från makro-/ringblixt inställd på automatisk med genom-linsläget. Ringblixtens fokuslampa är påslagen för att hjälpa till att fokusera på hornhinnan.</li>
		<li>Fyll i alla bilder för båda ögonen inom 1 min.</li>
	</ol></li>
	<li>Poängokulär ytfärgning med HJÄLP AV NEI-metoden23 modifierad enligt följande. Inte grad 6 separata konjunktival zoner. Betyg överlägsen bindhinna i varje öga. Detta är den del av konjunktival ytan lätt fotograferade utan att manipulera världen. Manipulation kan artefactually ändra färgning av okulär yta.</li>
	<li>Tår laktoferrin nivåer är ett surrogat mått på tår produktion från lacrimal körtlar. Assay tår laktoferrin i tårar samlas in som ovan med hjälp av en enzym-linked immunosorbent assay24 kit enligt tillverkarens instruktioner.</li>
</ol>5. Induktion och behandling av torra ögon
OBS: Tre delar av orbital lacrimal körtel systemet injiceras.
<ol><li>Sövd kaninerna med aceprorazin 0,2 mg/kg subkutant.</li>
	<li>Klipp av pälsen i periorbital och hårbotten området och helt ta bort eventuella restpäls med Nair. Lämna huden helt slät för bättre visualisering av anatomiska kännetecken och USA-guidad injektion av concanavalin A(figur 7).</li>
	<li>Inducera måttlig sedering enligt beskrivningen ovan.</li>
	<li>Injektion av palpebral delen av den överlägsna lacrimal körtel (PSLG) OBS: Utför injektion av PSLG först.<ol>
<li>Applicera på lämpligt öga 25 μL konserveringsfri lidokain 1% med en mikropipett.</li>
		<li>Evert det övre ögonlocket och applicera mild mediala tryck på den bakre omloppsbanan fälgen tills protuberance märkning palpebral delen av körteln ses. PSLG visas som en liten bulbous höjd i den bakre (tidsmässiga) delen av övre locket. OBS: För att visa körtelvävnaden under inlärningsprocessen, applicera 5% fluorescein i området(figur 8A). Tårar kan ses strömmande från den bulbous PSLG. Tillämpning av fluorescein behövs inte för administrering av Con A; det görs endast för illustrationändamål för att visa körtelvävnaden.</li>
		<li>Använda fintandade pincett och en 27-gauge nål på en tuberkulinspruta, direkt penetrera körteln med hjälp av en transkonjunktival strategi. För in nålen 2 mm i vävnaden och injicera 500 μg Con A i en volym av 0,1 ml (figur 8B). OBS: Denna injektion kan ibland vara smärtsam. Om det behövs, förvara djuren under isofluran tills injektionen är klar.</li>
	</ol></li>
	<li>Injektion av orbital överlägsen lacrimal körtel (OSLG) OSLG följer i snabb följd.<ol>
<li>Applicera medial tryck på jorden orsakar OSLG att sticka ut från den bakre incisure (se ref25 för anatomi, om det behövs). Applicera medialtryck på jorden (figur 9, röd pil) med oslg:s protuberans från den bakre inkvig. Protuberance fungerar som grov lokalisering för att hitta den bakre incisure.</li>
		<li>Använd böjda pincett med spetsar stängda för att dra in området tills beniga öppningen i skallen känns. Detta kommer att vara slit-liknande med en främre / bakre riktning under protuberance.</li>
		<li>Applicera blygsamt tryck med pincett för att lämna en indrag i huden, som kommer att fungera som landmärke för nålplacering(figur 10A).</li>
		<li>Sätt i en nål (tuberkulinspruta med en 27-gauge, 5/8-tums nål) vinkelrätt mot huden över indragsmärket (figur 10B) ~ 1/4 tum i incisurenen och omdirigera sedan nålen i bakre och utåt mot den laterala canthus som siktar på mittpunkten mellan injektionsstället och beniga omloppsfälgen. OBS: Om incisure inte är exakt riktad med nålen, blockerar skallen dess avancemang.</li>
		<li>När nålens nav har uppnåtts injiceras långsamt 1000 μg Con A i en volym på 0,2 ml (figur 10C).</li>
	</ol></li>
	<li>Fyll i injektionen av både PSLG och OSLG inom 2-3 min.</li>
	<li>Ta bort djuret från isofluranseation (om det ännu inte är gjort). Injektion av den sämre lacrimal körtel (ILG) kan vanligtvis slutföras utan ytterligare sedering.</li>
	<li>Injektion av den sämre lacrimal körteln
	<ol>
<li>Se djuret från sidan. ILG:s framträdande plats kan ses längs den nedre främre delen av omloppsbanan (figur 11A).</li>
		<li>Rita en vertikal linje med hjälp av en kirurgisk märkning penna eller lämplig permanent markör på huden där den ytliga delen av ILG körtel övergångar från dess ytliga (mer yttre) viloplats på zygomatic ben till sin mer mediala plats i omloppsbana. Detta är vanligtvis sämre än den främre limbus(Figur 11A).</li>
		<li>Identifiera slutet av zygomatiska ben genom att svepa vertikalt hållna amerikanska sonden över denna linje på huden. ILG-övergången sker där bilden av körteln ändras från tydligt avgränsade (hyperechoic linje zygomatic ben ses längs den nedre kanten av körteln i bilden) till en utan en igenkännlig medial gräns (zygomatic ben eko är inte längre närvarande, figur 1).</li>
		<li>Observera handstyckets relativa position på den linje som ritats på huden när den amerikanska skärmen visar denna förändring. Detta är "injektionsstället" där Con A ska ges.</li>
		<li>Kontrollera djupet av injektion för att placera Con A i körteln vid en punkt bara mediala till zygomatic arch ben.</li>
		<li>Bestäm injektionsdjupet enligt följande: Ställ in önskat injektionsdjup som djupet av det zygomatiska benet (hyperechoic signal) plus 1 mm. Subtrahera detta värde från nålens kända längd (15 mm i detta exempel).</li>
		<li>För in nålen i körteln vid "injektionsstället" ~12 mm och dra sedan långsamt ut den tills den exponerade nålens längd utanför kroppen (mätt med kirurgiska ok) är lika med den skillnad som beräknats i 5.8.6(figur 12). Injicera 1000 μg Con A i 0,2 ml. OBS: För att säkerställa att kapseln i körteln är genomborrad och inte bara skjuts av nålen, nålen bör införas ~12 mm eller nästan till navet innan dess tillbakadragande börjar.</li>
		<li>Upprepa USA för att bekräfta framgången för injektionen. ILG bör visa ett karakteristiskt hypoechoiskt utrymme (figur 1). OBS: ILG injektionen är den som bäst tolereras av djuren26 och görs därför sist.</li>
	</ol></li>
	<li>Slutföra hela proceduren för att injicera alla körtlar av båda ögonen inom 10 min. Detta kommer att kräva att kompetensen uppnås i förfarandet. OBS: En enda uppsättning injektioner i 2 orbital lacrimal körtlar kommer att inducera akut DED varar 1-2 veckor.</li>
	<li>För ded av längre varaktighet, injicera Con A exakt som ovan var 7 dagar. Upp till 6 sådana injektioner har utförts framgångsrikt.</li>
</ol>6. Vård efter förfarandet
<ol><li>Efter injektion av Con A, övervaka djuren i sina fasthållningspåsar i minst 10-20 min, eller tills bedövningseffekten har avtagit.</li>
	<li>Lämna inte djuren utan uppsikt förrän de har återfått tillräckligt medvetande för att upprätthålla stränghet. Återför dem inte till sina enskilda burar förrän de är helt återställda.</li>
	<li>Post-förfarande smärta är oftast mild och varar mindre än 48 h. Bedöma smärta med kanin grimas skala. Vid behov, ge en engångsdos av subkutan ketorolac (5 mg/kg). För svårare smärta, ge subkutan buprenorfin 0,1 mg/kg var 8:e timme.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Paulsen, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+in+the+Beaver+Dam+Offspring+Study:+prevalence,+risk+factors,+and+health-related+quality+of+life.">Dry eye in the Beaver Dam Offspring Study: prevalence, risk factors, and health-related quality of life.</a> American Journal of Ophthalmology. 157 (4), 799-806 (2014).</li><li>Vehof, J., Kozareva, D., Hysi, P. G., Hammond, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+and+risk+factors+of+dry+eye+disease+in+a+British+female+cohort.">Prevalence and risk factors of dry eye disease in a British female cohort.</a> British Journal of Ophthalmology. 98 (12), 1712-1717 (2014).</li><li>Tan, L. L., Morgan, P., Cai, Z. Q., Straughan, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Prevalence+of+and+risk+factors+for+symptomatic+dry+eye+disease+in+Singapore.">Prevalence of and risk factors for symptomatic dry eye disease in Singapore.</a> Clinical and Experimental Optometry. 98 (1), 45-53 (2015).</li><li>Craig, J. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=TFOS+DEWS+II+Report+Executive+Summary.">TFOS DEWS II Report Executive Summary.</a> The Ocular Surface. 15 (4), 802-812 (2017).</li><li>Baudouin, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+impact+of+inflammation+in+dry+eye+disease:+proceedings+of+the+ODISSEY+group+meeting.">Clinical impact of inflammation in dry eye disease: proceedings of the ODISSEY group meeting.</a> Acta Ophthalmologica (Copenhagen). 96 (2), 111-119 (2018).</li><li>Calonge, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+eye+disease+as+an+inflammatory+disorder.">Dry eye disease as an inflammatory disorder.</a> Ocular Immunology and Inflammation. 18 (4), 244-253 (2010).</li><li>Pflugfelder, S. C., de Paiva, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Pathophysiology+of+Dry+Eye+Disease:+What+We+Know+and+Future+Directions+for+Research.">The Pathophysiology of Dry Eye Disease: What We Know and Future Directions for Research.</a> Ophthalmology. 124 (11S), S4-S13 (2017).</li><li>Buckley, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+and+management+of+dry+eye+disease.">Assessment and management of dry eye disease.</a> Eye (London, England). 32 (2), 200-203 (2018).</li><li>Clayton, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dry+Eye.">Dry Eye.</a> New England Journal of Medicine. 378 (23), 2212-2223 (2018).</li><li>Barabino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+dry+eye.">Animal models of dry eye.</a> Archivos de la Sociedad Espa&#241;ola de Oftalmolog&#237;a. 80 (12), 695-696 (2005).</li><li>Stern, M. E., Pflugfelder, S. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=What+We+Have+Learned+From+Animal+Models+of+Dry+Eye.">What We Have Learned From Animal Models of Dry Eye.</a> International Ophthalmology Clinics. 57 (2), 109-118 (2017).</li><li>Chen, Z. Y., Liang, Q. F., Yu, G. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishment+of+a+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">Establishment of a rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Cornea. 30 (9), 1024-1029 (2011).</li><li>Gilbard, J. P., Rossi, S. R., Gray, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+rabbit+model+for+keratoconjunctivitis+sicca.">A new rabbit model for keratoconjunctivitis sicca.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 28 (2), 225-228 (1987).</li><li>Guo, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Autologous+lacrimal-lymphoid+mixed-cell+reactions+induce+dacryoadenitis+in+rabbits.">Autologous lacrimal-lymphoid mixed-cell reactions induce dacryoadenitis in rabbits.</a> Experimenal Eye Research. 71 (1), 23-31 (2000).</li><li>Burgalassi, S., Panichi, L., Chetoni, P., Saettone, M. F., Boldrini, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+a+simple+dry+eye+model+in+the+albino+rabbit+and+evaluation+of+some+tear+substitutes.">Development of a simple dry eye model in the albino rabbit and evaluation of some tear substitutes.</a> Ophthalmic Research. 31 (3), 229-235 (1999).</li><li>Xiong, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+rabbit+dry+eye+model+induced+by+topical+medication+of+a+preservative+benzalkonium+chloride.">A rabbit dry eye model induced by topical medication of a preservative benzalkonium chloride.</a> Investigative Ophthalmology &amp; Visual Science. 49 (5), 1850-1856 (2008).</li><li>Heymann, F., Hamesch, K., Weiskirchen, R., Tacke, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+concanavalin+A+model+of+acute+hepatitis+in+mice.">The concanavalin A model of acute hepatitis in mice.</a> Lab Animal. 49 (1 Suppl), 12-20 (2015).</li><li>Nagelhout, T. J., Gamache, D. A., Roberts, L., Brady, M. T., Yanni, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Preservation+of+tear+film+integrity+and+inhibition+of+corneal+injury+by+dexamethasone+in+a+rabbit+model+of+lacrimal+gland+inflammation-induced+dry+eye.">Preservation of tear film integrity and inhibition of corneal injury by dexamethasone in a rabbit model of lacrimal gland inflammation-induced dry eye.</a> Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics. 21 (2), 139-148 (2005).</li><li>Honkanen, R. A., Huang, L., Xie, G., Rigas, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Phosphosulindac+is+efficacious+in+an+improved+concanavalin+A-based+rabbit+model+of+chronic+dry+eye+disease.">Phosphosulindac is efficacious in an improved concanavalin A-based rabbit model of chronic dry eye disease.</a> Translational Research. 198, 58-72 (2018).</li><li>Huang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+novel+phospho-non-steroidal+anti-inflammatory+drugs,+OXT-328,+MDC-22+and+MDC-917,+inhibit+adjuvant-induced+arthritis+in+rats.">The novel phospho-non-steroidal anti-inflammatory drugs, OXT-328, MDC-22 and MDC-917, inhibit adjuvant-induced arthritis in rats.</a> British Journal of Pharmacology. 162 (7), 1521-1533 (2011).</li><li>Mattheolabakis, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topically+applied+phospho-sulindac+hydrogel+is+efficacious+and+safe+in+the+treatment+of+experimental+arthritis+in+rats.">Topically applied phospho-sulindac hydrogel is efficacious and safe in the treatment of experimental arthritis in rats.</a> Pharmaceutical Research. 30 (6), 1471-1482 (2013).</li><li>Osmalek, T., Froelich, A., Tasarek, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+of+gellan+gum+in+pharmacy+and+medicine.">Application of gellan gum in pharmacy and medicine.</a> International Journal of Pharmaceutics. 466 (1-2), 328-340 (2014).</li><li>Lemp, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Report+of+the+National+Eye+Institute/Industry+workshop+on+Clinical+Trials+in+Dry+Eyes.">Report of the National Eye Institute/Industry workshop on Clinical Trials in Dry Eyes.</a> Contact Lens Association of Ophthalmologists Journal. 21 (4), 221-232 (1995).</li><li>Dal Piaz, F., Braca, A., Belisario, M. A., De Tommasi, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thioredoxin+system+modulation+by+plant+and+fungal+secondary+metabolites.">Thioredoxin system modulation by plant and fungal secondary metabolites.</a> Current Medicinal Chemistry. 17 (5), 479-494 (2010).</li><li>Davis, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Anatomy+and+Histology+of+the+Eye+and+Orbit+of+the+Rabbit.">The Anatomy and Histology of the Eye and Orbit of the Rabbit.</a> Transactions of the American Ophthalmological Society. 27, 402-441 (1929).</li><li>Lima, L., Lange, R. R., Turner-Giannico, A., Montiani-Ferreira, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evaluation+of+standardized+endodontic+paper+point+tear+test+in+New+Zealand+white+rabbits+and+comparison+between+corneal+sensitivity+followed+tear+tests.">Evaluation of standardized endodontic paper point tear test in New Zealand white rabbits and comparison between corneal sensitivity followed tear tests.</a> Veterinary Ophthalmology. 18 (Suppl 1), 119-124 (2015).</li><li>Zheng, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+efficacy+of+fibroblast+growth+factor+10+in+a+rabbit+model+of+dry+eye.">Therapeutic efficacy of fibroblast growth factor 10 in a rabbit model of dry eye.</a> Mol Med Report. 12 (5), 7344-7350 (2015).</li><li>Wiechmann, A. F., Summers, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Circadian+rhythms+in+the+eye:+the+physiological+significance+of+melatonin+receptors+in+ocular+tissues.">Circadian rhythms in the eye: the physiological significance of melatonin receptors in ocular tissues.</a> Progress in Retinal and Eye Research. 27 (2), 137-160 (2008).</li></ol>

Författarna förklarar inga konkurrerande intressen utom br som har en aktieställning i Medicon Pharmaceuticals, Inc. och Apis Therapeutics, LLC; och LH, anställd hos Medicon Pharmaceuticals, Inc. med en aktieposition i Apis Therapeutics, LLC.

Kaniner är mycket attraktiva för studier av DED. Deras hornhinna och bindhinna har en yta närmare människor jämfört med möss och råttor; deras komplement av läkemedelsmetaboliserande enzymer såsom esterass, och histologi av deras lacrimal körtlar liknar dem hos människor, och deras ögon är tillräckligt stora för informativa farmakokinetiska studier. Jämfört med grisar och apor, som de delar liknande funktioner, de kostar mindre och deras experimentella manipulation är lättare. Om mekanistiska studier övervägs, en relativ nackdel med kaninen, jämfört med möss, är att färre reagenser (t.ex. monoklonala antikroppar) finns tillgängliga. Å andra sidan är kaninen vida överlägsen möss för farmakokinetiska studier och biodistributionstudier eftersom enskilda vävnader lätt dissekeras och av tillräcklig storlek för analytiskt arbete, undvika "provpoolning."Å andra sidan är kaninen vida överlägsen möss för farmakokinetiska studier och biodistributionstudier eftersom enskilda vävnader lätt dissekeras och av tillräcklig storlek för analytiskt arbete, undvika "provpoolning".
En kritisk allmän parameter är kaninernas acklimatiseringsperiod. Djuren transporteras från säljaren under förhållanden som ofta inte garanterar en transportmiljö av lämplig temperatur eller luftfuktighet. Vissa djur kan redan ha utvecklat torra ögon vid ankomsten. En tvåveckorsperiod av acklimatisering rekommenderas. Lika viktigt är noggrann uppmärksamhet på luftfuktigheten och temperaturen i det utrymme där studien kaniner är inrymt i vivarium. Avvikelser i båda villkoren kan framkalla stora variationer i deras ögonstatus. Ha back-up luftfuktare och avfuktare till hands. Om det centrala systemet misslyckas, agera snabbt för att återställa omgivningsluftfuktigheten med hjälp av back-up-utrustningen. Tänk på att en sådan olycklig utveckling är vanligare under sommarmånaderna. De tre mest kritiska stegen, dock för att framgångsrikt förmå DED hos kaniner är: 1) den skickliga användningen av amerikansk bildbehandling för att identifiera ILG och att direkt och bekräfta injektion av Con A; 2) säkerställa injektion av både ILG och de två delarna av SLG; och 3) tillförlitligt och reproducerbart som säger parametrarna för DED.
Att utveckla den experimentella skicklighet som krävs är inte trivialt, men bör inte avskräcka någon seriös utredare. Förvänta dig att inlärningskurvan ska slutföras inom fem iterationer. Ett amerikanskt bildsystem av rimlig kvalitet är viktigt. Erkännande av anatomiska kännetecken av USA är viktigt, därför bör utredaren granska kaninanatomin. Den utmärktbeskrivning av kanin anatomi av Davis25, en klassiker, kan vara oerhört hjälpsam. Tänk också på variationen i storleken på ILG. Följden av detta är att framgången för Con A alltid måste bekräftas med uppföljning imaging. Variationer i svaret på Con A i en grupp kaniner beror oftast på injektionstekniken (misslyckad eller delvis lyckad injektion) eller att ignorera kapaciteten hos kvarvarande lacrimalkörtelvävnader för att kompensera med överproduktion av tårar. För dem som vill behärska injektionstekniken kan injektionsmetylenblått följt av snabb anatomisk dissekering vara till hjälp; visualisering uppnås om den når lacrimal körtel eller spill på angränsande vävnader. Hittills har denna injektionsmetod utförts över 270 gånger av författarna utan en enda komplikation.
Assaying de fem parametrarna för DED presenteras ovan kan vara så knepigt som är deras bestämning i klinisk praxis. Även om dygnsrytmvariationer ännu inte formellt har dokumenterats i någon av dem, finns det tillräckligt med bakgrundsbevis för sådana fenomen i ögat28 att de bör analyseras samtidigt på dagen (± 1 h), särskilt när upprepade analyser ska utföras och jämföras med varandra. Konsekvens i att utföra dessa analyser är viktigt. Ett team på två krävs. Fyra eller fler utredare i samma rum som deltar i uppsatserna kan vara störande, med tanke på att vissa steg kräver strikt timing. Lämplig och högkvalitativ fotografisk dokumentation, om så anges, är viktig.
Denna modell är idealisk för läkemedelsutveckling studier. Behärskning av djurmodell och analystekniker säkerställde utmärkt reproducerbarhet19 av effekt- och säkerhetsstudier.
Detta är en kraftfull experimentell strategi eftersom det eliminerar förvirrande variationer av tidigare modeller, har effektiviserat djurmodellen och i huvudsak standardiserad assaying de fem parametrarna för DED. Den framgångsrika tillämpningen av denna modell till studiet av en kandidat terapeutiskagent har bekräftat sin praktiska nytta som en informativ djurmodell för en sjukdom i desperat behov av nya agenter och en djupare förståelse av dess patogenes.

Torra ögonsjukdom (DED) är ett kroniskt tillstånd med hög prevalens och sjuklighet1,2,3,4. Inflammation spelar en nyckelroll i dess patogenes5,6. Pathophysiology av DED är conceptualized som härledas från endera under-produktion eller över-avdunstning av revor; den förstnämnda är också känd som vattenhaltig-bristfällig ad7. Sjögrens syndrom, en omfattande studerad prototypisk orsak till DED, påverkar främst lacrimal körtlar (LGs) och är ett slående exempel på deras betydelse för patogenesen vid DED. DED behandlas ofta med konstgjorda tårar som ger tillfällig lindring, eller med ciklosporin eller lifitegrast, som båda undertrycker okulär inflammation. Ingen av de tillgängliga behandlingarna för DED är optimala, vilket kräver utveckling av nya medel8,9.
Sökandet efter nya terapeutiska medel för DED hämmas av tre stora utmaningar: avsaknaden av ett erkänt druggable molekylärt mål, som kan vara svårfångade med tanke på den patofysiologiska komplexitetEN i DED; sparsiteten hos lovande medel. och bristen på djurmodeller som sammanfattar viktiga funktioner i DED.
Som med de flesta drogutvecklingsinsatser, informativa djurmodeller av DED är ett avgörande utredningsverktyg, trots det axiomatiska uttalandet att ingen djurmodell helt sammanfattar en mänsklig sjukdom. Mus, råtta och kanin modellerna av DED de/vi/du/ni är mest vanligen använd fördriva tiden hund och primater de/vi/du/ni är använd sällan10,11. De flesta av de mer än 12 kanin-DED-modeller som hittills rapporterats försöka minska tårproduktionen genom att antingen ta bort LGs eller genom att hindra deras funktion12,13,14,15,16. Sådana metoder inkluderar kirurgiska samband av ILG; stängning av dess utsöndringskanal. och försämraLG-funktionen genom bestrålning eller injektion av något av följande: aktiverade lymfocyter, mitogens, botulinumtoxin, atropin eller bensalklonium. Viktiga begränsningar av dessa metoder är deras inkonsekvens och frekventpartiell undertryckande av tårproduktion.
Concanavalin A (Con A), en lektin av vegetabiliskt ursprung, är en potent stimulator T-cells undergrupper och har använts i experimentella modeller av hepatit17 och DED18. Den ursprungliga Con A-baserade modellen rapporterades erbjuda betydande fördelar, inklusive dess relativa enkelhet; inflammatorisk celltillströmning i LGs, härma sjukdomar som Sjögrens; stimulering av de proinflammatoriska cytokinerna IL-1β, IL-8 och TGF-β1; nedsatt tårfunktion som övervakas genom mätning av tårfluoresceinclearance och rivupplösningstid (TBUT); och läkemedelslyhördhet som visas för en antiinflammatorisk kortikosteroid.
När denna lovande metod tillämpades identifierades, utöver dess fördelar, begränsningar som krävde dess övergripande revidering och drastiska förbättringar. Tre kritiska brister i metoden dokumenteras. För det första var modellen akut; den inducerade ded avtog efter ca 1 vecka. För det andra var djurens reaktion inkonsekvent. Som visat, i "blinda" transkutana injektioner till Inferior LG (ILG), Con A levererades endast slumpmässigt till den riktade körteln. Detaljerad studie av anatomi ILG visade att dess storlek kan variera så mycket som 4-faldigt19 gör sådana injektioner "hit-or-miss" insatser. Slutligen, även när ILG injicerades, kompenserade den överlägsna LG (SLG) ofta för det minskade tårflödet, vilket gör modellen problematisk.
Dessa viktiga begränsningar övervanns genom att införa tre ändringar av metoden, vilket genererar en överlägsen djurmodell av DED. Först utfördes injektionen av Con A i ILG under ultraljud (US) vägledning, se till att Con A in i körteln. Framgången för injektionen bekräftades genom att få en post-injektion amerikansk bild, som visas i figur 1. För det andra, för att ta bort kompensatoriska tår bidrag SLG, både palpebral och orbital delar av denna körtel injicerades med Con A. Slutligen konverterades denna akuta modell av DED till en kronisk genom upprepade injektioner av Con A var 7-10 dagar. DED av 2 månaders varaktighet uppnås lätt i dessa kaniner. Framgången för detta tillvägagångssätt har dokumenterats i hög tid19.
Som redan nämnts är en viktig tillämpning av djurmodeller av DED att bestämma effekten och säkerheten hos terapeutiska läkemedelsmedel från kandidaten. Nyttan av denna modell visades genom studiet av fosforsulindac (OXT-328), en ny antiinflammatorisk liten molekyl20,21 administreras som ögondroppar. Dess effekt visades baserat på en panel av parametrar för DED19. Den relativa enkelhet och informativ karaktär av denna modell tillät också sida vid sida jämförelse av fosforsulindac till de två FDA godkända läkemedel för DED, cyclosporine och lifitegrast, visar sin starka prekliniska överlägsenhet.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>100 mm macro lens</td>
			<td>Canon EF 100mm f/2.8L IS USM</td>
			<td>3554B002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>26 gauge needles (5/8)</td>
			<td>Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305115</td>
			<td>Needles for injecting ConA into the lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27 gauge needles (5/8)</td>
			<td>Becton Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ</td>
			<td>305921</td>
			<td>Needles for injecting ConA into the lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aceproinj (acepromazine)</td>
			<td>Henry Schein Animal Health, Dublin, OH</td>
			<td>NDC11695-0079-8</td>
			<td>0.1ml/kg subcutaneously injection for rabbit sedation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Anesthesia vaporizer</td>
			<td>VetEquip, Pleasanton, CA</td>
			<td>Item #911103</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bishop Harmon Forceps</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>E1500-C</td>
			<td>Tissue forceps</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caliper</td>
			<td>Bausch and Lomb (Storz), Bridgewater, NJ</td>
			<td>E-2404</td>
			<td>Caliper used to measure length of needle during ConA injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Concanavalin A</td>
			<td>Sigma, St. Louis, MO</td>
			<td>C2010</td>
			<td>Make 5mg/ml in PBS for injection into rabbit lacrimal glands</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>DSLR camera</td>
			<td>Canon EOS 7D DSLR</td>
			<td>3814B004</td>
			<td>Digital single lens reflex camera</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>fluorescein</td>
			<td>AKRON, Lake Forest, IL</td>
			<td>NDC17478-253</td>
			<td>Dilute to 0.2% with PBS to measure TBUT</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Henry Schein, Melville, NY</td>
			<td>29405</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lactoferrin ELISA kit</td>
			<td>MyBiosource, San Diego, CA</td>
			<td>MBS032049</td>
			<td>Measure tear lactoferrin level</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>lidocaine</td>
			<td>Sigma, St. Louis, MO</td>
			<td>L5647</td>
			<td>1% in PBS for anesthesia agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>macro/ring flash</td>
			<td>Canon Macro Ring Lite MR-14EXII</td>
			<td>9389B002AA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmolarity tips</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>#100003 REV R</td>
			<td>Measure tear osmolarity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PBS (phosphate buffered saline)</td>
			<td>Mediatech, Inc. Manassas, VA</td>
			<td>21-031-CV</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rabbit, New Zealand White or Dutch Belted (as described in text)</td>
			<td>Charles River Labs, Waltham, MA</td>
			<td>2-3 kg</td>
			<td>Research animals</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rose Bengal</td>
			<td>Amcon Laboratories Inc., St. Louis, MO</td>
			<td>NDC51801-004-40</td>
			<td>1% in PBS, stain the ocular surface</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Schirmer strips</td>
			<td>Eaglevision, Katena products. Denville, NJ</td>
			<td>AX13613</td>
			<td>Measure tear production</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Loupes +1.50</td>
			<td>Designs for Vision, Bohemia, NY</td>
			<td>Specialty item</td>
			<td>Provide magnificantion of ocular surface while observing tear break up and performing Concanavalin A injections.</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>TearLab Osmometer</td>
			<td>TearLab Corp., San Diego, CA</td>
			<td>Model #200000W REV A</td>
			<td>Measure tear osmolarity</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ultrasound probe</td>
			<td>VisualSonics Toronto, Ont</td>
			<td>MX 550 S</td>
			<td>Untrasonography-guide Con A injection for inferior lacrimal gland</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a rabbit model of aqueous-deficient dry eye disease induced by concanavalin a injection into the lacrimal glands: application to drug efficacy studies

Torrögonsjukdom (DED), en multifaktoriell inflammatorisk sjukdom i okulär yta, drabbar 1 av 6 människor över hela världen med häpnadsväckande konsekvenser för livskvalitet och sjukvårdskostnader. Bristen på informativa djurmodeller som sammanfattar dess viktigaste funktioner hindrar sökandet efter nya terapeutiska medel för DED. Tillgängliga DED djurmodeller har begränsad reproducerbarhet och effekt. En modell presenteras här där DED induceras genom att injicera mitogen concanavalin A (Con A) i orbital lacrimal körtlar av kaniner. Innovativa aspekter av denna modell är användningen av ultraljud (US) vägledning för att säkerställa optimal och reproducerbar injektion av Con A i sämre lacrimal körtel; injektion av Con A i alla orbital lacrimal körtlar som begränsar kompensatorisk produktion av tårar; användning av periodiska upprepade injektioner av Con A som förlänger tillståndet för DED efter behag. DED och dess svar på testagenter övervakas med en panel av parametrar som bedömer tårproduktion, stabiliteten i tår filmen, och status hornhinnanoch konjunktival mukosa. De inkluderar tår osmolarity, riva break-up tid, Schirmer's tear test, ros bengal färgning, och riva laktoferrin nivåer. Induktionen av DED och övervakningen av dess parametrar beskrivs i detalj. Denna modell är enkel, robust, reproducerbar och informativ. Denna djurmodell är lämplig för studier av tårfysiologi och patofysiologi av DED samt för bedömning av effekt och säkerhet för kandidatmedel för behandling av DED.

Con A injektioner framkallade en stark inflammatorisk reaktion i lacrimal körtlar kännetecknas av en tät lymfatisk infiltrate (Figur 13), tillsammans med minskad tår produktion. Alla tårparametrar ändrades markant(tabell 1 och tabell 2). Dessutom undertrycktes tårlaktoferrinnivåerna (kontroll = 3,1±0,45 jämfört med Con A injicerad = 2,7±0,02 ng/mg protein (medelvärde ± SEM); p<0,03). Slutresultatet blev en komprometterad hornhinnans och konjunktivalepitel, vilket framgår av ökad rosbengalfärgning (figur 6).
Injektion av de tre orbital LG vävnader na producerade en konsekvent och enhetlig DED tillstånd till skillnad från de stater som uppnåtts genom tidigare metoder18,27. Viktiga bidragsgivare till detta resultat var den USA-guidade injektionen av ILG och injektionen av OSLG. Tabell 1 sammanfattar de framträdande resultaten av denna metod. Alla förändringar är förenliga med svår DED.
En enda uppsättning Con A injektioner ger DED varar ca 1 vecka; alla kliniska parametrar normaliseras per dag 10 (tabell 2). Sekventiella Con A injektioner ca 1 vecka ifrån varandra förlänga varaktigheten av DED i enlighet med detta. Till exempel upprätthåller den andra uppsättningen Con A injektioner på dag 7 DED i 2 veckor och så vidare. Efter ungefärligt 5 uppsättningar av injektioner, DED-tillstånd blir ofta permanent utan behovet av mer ytterligare injektioner.
När kaninerna med Con A-inducerad DED behandlades med det nya medlet fosforsulindac, undertryckte det markant sjukdomen. Till exempel Efter en veckas behandling med detta agens ökade TBUT markant jämfört med fordonsbehandlade djur (43,6±4,0 jämfört med 12,2±2,8 s; p<0,001; medelvärde ± SEM respektive för dessa respektive följande värden) medan tårosmolaritet normaliserades (294±4,6 jämfört med 311±2,0 mOsm/L, p<0,002). Mekanistiskt, fosforsulindac minskade nivåerna av två avgörande interleukiner, IL-1β (8,4 ± 1,2 vs 21.2±6.6 pg/mg protein; p<0.03) och IL-8 (4.9±1.7 vs. 13.5±5.0 pg/mg protein; p<0.05)19.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig1a.jpg"> Figur 1: Ultraljudsbild av den sämre lacrimalkörteln. Övre panelen: ILG som den rör sig djupare i omloppsbana för att ligga under zygomatic båge. Den streckade linjen representerar den linje på huden över vilken den amerikanska sonden sopas. Mellersta paneler: När handstycket sveps över denna linje söker examinator förlust av zygomatic beneko som finns i vänster bild(pil)och försvinner i höger. Nedre paneler: Bilder av ILG tas före(vänster)och efter(höger)injektion av Con A. Utveckling av ett stort cystiskt utrymme i körteln bekräftar korrekt leverans. Omtryckt med tillstånd19. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig1alarge.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig02.jpg"> Figur 2: Gasmasksedering. Detta fotografi visar gasmasken ger kort måttlig sedering med isoflurane. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig02large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig3a.jpg"> Figur 3: Avlägsnande av det nictitaterande membranet. (A) Injektion av lidokain/adrenalin. (B) Trunkering av det nictitaterande membranet vid basen med Westcott-sax. (C) Den okulära ytan visualiseras lättare efter avlägsnande av det nictitating membranet. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig03.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig4a.jpg"> Figur 4: Mätning av rivupplösningstid. (A) Enhetliggrön tårfilm utseende av hornhinnans yta under blått ljus omedelbart efter applicering av fluorescein droppar. (B) Hornhinnans yta som redan har genomgått märkt uppbrott som framgår av flera mörka ringar och linjära ränder i fluorescein. Break-up tid registreras så snart den första mörka fläcken eller linjen utvecklas. De två ljusblå cirklarna är reflektioner av ljuskällan bort av hornhinnan. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig04large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 5" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig5a.jpg"> Figur 5: Schirmers tårtest. (A) Korrekt placering av Weck-Cel svamp en lägre fornix att ta bort eventuella återstående aktuelllidokain lösning och baslinje tårar. Genom att placera den bakre kanten av den triangulära svampen under det nedre lockets marginal, kan man upprätthålla en mycket enhetlig teknik för att torka okulär yta innan placeringen av tårremsorna. (B) En tårremsa som placeras på lämpligt sätt i mitten av det nedre locketmellan jordklotet och nedre locket (palpebral bindhinnan). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig05large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig06.jpg"> Figur 6: Rosenbengalfärgning. Övre: Fotografier av hornhinnans yta. Vänster: Ingen ros bengalfärgning är närvarande före behandling med Con A. Höger: Diffus hornhinnans och konjunktivalfärgning ses i den övre nasal kvadranten efter injektion (övre högra). Lägre: Konjunktivala intryck cytologi från överlägsen bulbar konjunktiva. Vänster: Många bläsceller är närvarande före behandling. Höger: Epitelceller är närvarande men bloppceller är frånvarande efter behandling. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig06large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig7a.jpg"> Figur 7: Beredning av kanin för concanavalin A injektioner. (A) Små saxar används för att avlägsna päls, vilket möjliggör enklare visualisering av landmärken för att identifiera den omloppsbanor överlägsen lacrimal körtel. (B) Nair används för att ta bort hår som återstår efter klippning. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig07.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig8a.jpg"> Figur 8: Injektion av palpebral lacrimal körtel. (A) Den palpebral lacrimal körtel, som förekommer som en bulbous höjd i den bakre temporala delen av det övre locket. Tårar ses strömma från ytan av denna körtel efter att ha tillämpat en minskning med 2% fluorescein. (B) Den palpebralacrimalkörteln injiceras medan kaninen får måttlig sedering. En utredare drar tillbaka ögonlocket, optimerar exponeringen av körteln, och säkrar masken medan den andra utredaren injicerar körteln. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig08large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig09.jpg"> Figur 9: Lokalisering av omloppsbanan överlägsen lacrimal körtel. Förändringar i huden konturer indikerar platsen för OSLG som sticker ut genom den bakre incisure. Alternerande medialtryck på jorden (stor pil) orsakar den överlägsna omloppskörteln att framfall, vilket ses som en liten höjd i huden. Denna höjd kommer att öka i storlek varje gång trycket appliceras (små pilar). Placeringen av denna körtel är oftast i linje med den bakre omloppsbanan. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig09large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig10a.jpg"> Figur 10: Injektion av orbital överlägsen lacrimal körtel. A) Tillämpning av skonsam tryck på skallen med fintandade pincett i det område som framfallats som i figur 9. En tunn slitsliknande öppning i skallen kan palpated. Lämnar ett litet indragsmärke med pincetten hjälper kraftigt placering en nål under injektionen. (B) Nålen sätts in vinkelrätt genom inktal. Om den placeras felaktigt stoppas dess passage av benskallen. (C) Nålen är i slutläge vinklat mot den laterala konserveringsburken. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig10.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 11" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig11a.jpg"> Figur 11: Lokalisering av den sämre lacrimal körteln. (A) Framträdandet av den ytliga delen av ILG sett genom det nedre locket. Det kurviraripennmärket betecknar körtelns nedre position. Den vertikala linjen, under näslimbus, betecknar den ungefärliga positionen där ILG övergår till en djupare position i omloppsbana och fungerar som en visuell referens för USA. B) Us-handstycke som sveper över den vertikala linjens yta. den amerikanska monitorn visar var det zygomatiska benet slutar, där ILG-övergångarna och där Con A-injektionen ska ges ("injektionsstället"). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig11large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 12" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig12.jpg"> Figur 12: Injektion av den sämre lacrimalkörteln. Injektion av ILG görs på den plats som identifierats av USA. Injektionsdjupet beräknas enligt beskrivningen i texten (steg 5.8.6). Ok (sett bakom nålen) se till att nålen placeras på rätt djup före injektion. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig12large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<img alt="Figure 13" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/59631/59631fig13.jpg"> Figur 13: Histologi av lacrimal körtlar. Vävnaddelar av en normal sämre lacrimal körtel med typiska tubulo-alveolar struktur (A) och efter injektion av Con A (B), visar markerade lymfatisk infiltrate med effacement av struktur. Liknande inflammatoriska infiltrates ses i de överlägsna lacrimal körtlar. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/59631/59631fig13large.jpg" target="_blank">Klicka här för att se en större version av denna siffra.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="3">Injektionsmetod</td>
			<td colspan="2">TBUT, sek</td>
			<td colspan="2">Tår Osmolalitet, Osm/L</td>
			<td colspan="2">STT, mm</td>
		</tr>
<tr>
<td>Originalplan</td>
			<td>Efter injektion</td>
			<td>Originalplan</td>
			<td>Efter injektion</td>
			<td>Originalplan</td>
			<td>Efter injektion</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="6">medelvärde ± SEM, % förändring</td>
		</tr>
<tr>
<td>ILG utan amerikansk vägledning</td>
			<td rowspan="3">58,5 ± 1,5</td>
			<td>44,5 ± 7,7</td>
			<td rowspan="3">297 ± 4,9</td>
			<td>300 ± 3,8</td>
			<td rowspan="3">15.2 ± 0,9</td>
			<td>12.9 ± 2,2</td>
		</tr>
<tr>
<td>%förändring</td>
			<td>-23%</td>
			<td>1%</td>
			<td>-15%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p=0,05</td>
			<td>p=0,36</td>
			<td>p=0,21</td>
		</tr>
<tr>
<td>USA-guidad ILG + PSLG</td>
			<td rowspan="3">59,4 ± 0,6</td>
			<td>11.4 ± 4,2</td>
			<td rowspan="3">296 ± 4,7</td>
			<td>326 ± 3,7</td>
			<td rowspan="3">15.1 ± 1,3</td>
			<td>10,7 ± 1,8</td>
		</tr>
<tr>
<td>Förändring i %</td>
			<td>-81%</td>
			<td>10%</td>
			<td>-29%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p<0.0001</td>
			<td>p<0.0001</td>
			<td>p<0.03</td>
		</tr>
<tr>
<td>USA-guidad ILG + PSLG + OSLG</td>
			<td rowspan="3">60 ± 0,0</td>
			<td>6.2 ± 1,3</td>
			<td rowspan="3">299 ± 2,9</td>
			<td>309 ± 2,8</td>
			<td rowspan="3">14.6 ± 0,9</td>
			<td>9.9 ± 1,3</td>
		</tr>
<tr>
<td>Förändring i %</td>
			<td>-90%</td>
			<td>3%</td>
			<td>-32%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p<0.0001</td>
			<td>p<0.008</td>
			<td>p<0.002</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="7">Alla värden mättes dag 6 efter en enda injektion av Con A i de listade körtlarna. Alla jämförelser gjordes med baslinjen. * ILG, sämre lacrimal körtel; PSLG, palpebral portion överlägsen lacrimal körtel; OSLG, orbital portion överlägsen lacrimal körtel; USA, ultraljud.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabell 1: Injektionsteknikens effekt och antalet injektionsställen på svårighetsgraden av torra ögon.
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody>
<tr>
<td rowspan="2"></td>
			<td rowspan="2">Originalplan</td>
			<td>Dag 6</td>
			<td>Dag 13</td>
			<td>Dag 21</td>
		</tr>
<tr>
<td>1 injektion</td>
			<td>2 injektioner</td>
			<td>3 injektioner</td>
		</tr>
<tr>
<td>TBUT, sek</td>
			<td rowspan="3">58,5 ± 1,5</td>
			<td>44,5 ± 7,7</td>
			<td>29.2 ± 7,8</td>
			<td>12.8 ± 3,9</td>
		</tr>
<tr>
<td>Förändring i %</td>
			<td>-24%</td>
			<td>-50%</td>
			<td>-78%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p=0,17</td>
			<td>p=0,001 p=0,001 p=0,001 p=</td>
			<td>p<0.0001</td>
		</tr>
<tr>
<td>TOsm, Osm/L</td>
			<td rowspan="3">297 ± 4,9</td>
			<td>300 ± 3,9</td>
			<td>308 ± 4,9</td>
			<td>313 ± 2,7</td>
		</tr>
<tr>
<td>Förändring i %</td>
			<td>1%</td>
			<td>4%</td>
			<td>5%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p=0,36</td>
			<td>p=0,04</td>
			<td>p=0,003</td>
		</tr>
<tr>
<td>STT, mm</td>
			<td rowspan="3">15.2 ± 0,9</td>
			<td>9.3 ± 1,6</td>
			<td>12.9 ± 1,6</td>
			<td>7.4 ± 1,1</td>
		</tr>
<tr>
<td>Förändring i %</td>
			<td>-39%</td>
			<td>-15%</td>
			<td>-51%</td>
		</tr>
<tr>
<td></td>
			<td>p=0,17</td>
			<td>p=0,13</td>
			<td>p=0,008</td>
		</tr>
<tr>
<td colspan="5">Jämförelser gjordes med baslinjen.</td>
		</tr>
</tbody></table>Tabell 2: Effekten av upprepade Con A-injektioner i ILG på ded-effekten.

Watch this Scientific Journal Video about A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies at JoVE

A Rabbit Model of Aqueous-Deficient Dry Eye Disease Induced by Concanavalin A Injection into the Lacrimal Glands: Application to Drug Efficacy Studies

Denna artikel beskriver utvecklingen av en metod för att inducera akut eller kronisk torra ögon sjukdom hos kaniner genom att injicera concanavalin A till alla delar av orbital lacrimal körtel system. Denna metod, överlägsen dem som redan rapporterats, genererar en reproducerbar, stabil modell av torra ögon som lämpar sig för studier av farmakologiska medel.

En kanin modell av vattenhaltiga-deficient Dry Eye Sjukdom framkallas av Concanavalin A Injektion i Lacrimal körtlar: Tillämpning på läkemedelseffekt studier

Dry eye disease (DED), a multifactorial inflammatory disease of the ocular surface, affects 1 in 6 humans worldwide with staggering implications for ...

Vår metod ger den saknade pålitliga djurmodell av torra ögon sjukdom som kan vara akut eller kronisk tack vare vår metod för att injicera alla lacrimal körtlar och upprepa injektioner. Denna teknik levererar tillförlitligt Concanavalin A till sämre lacrimal körtel med hjälp av ultraljud vägledning till körtlar av allmänt variabla storlekar och upp till överlägsen lacrimal körtel gör denna metod en komplett strategi. Denna modell ger en enkel, optimerad, nonsurgical medel för att inducera vattenbrist torr ögon sjukdom.Det är väl lämpad att studera läkemedelseffekt och sjukdom patofysiologi. Identifiera bakre incisure och utnyttja ultraljud lokalisering kan vara utmanande i början. Ta bort alla päls är avgörande för att stöd i ultraljud lokalisering för båda dessa steg.Demonstrera förfarandet kommer att Wei Huang, en doktorand från mitt laboratorium. Efter att ha bekräftat mild sedering genom att observera en avslappnad huvudposition med öringsloberna inte längre helt upprätt, använd en micropipette att tillämpa 25 mikroliter av konserveringsmedel-fri lidokain till första ögat och placera en flexibel tråd lock spekulum mellan ögonlocken. Med hjälp av 0,3-forceps, ta tag i nictating membranet vid dess spets och förlänga den över hornhinnan.Med hjälp av en 26 gauge vass nål, injicera lidokain 1%med 1:100, 000: e epinefrin subkonctivally i basen av nictating membranet. En måttlig bleb bör bildas över membranet. Ta sedan bort speculum och gör en identisk injektion i den vänstra nictating membran.Efter cirka fem minuter, placera locket speculum tillbaka i medögat och använda 0,3 forceps att dra tillbaka nictating membranet vid dess spets. Med hjälp av Westcott sax, skär nictating membranet av vid basen och ta bort spekulum. Placera sedan aktuell antibiotisk salva på ögat.För palpebral portionering av den överlägsna lacrimal körtel injektion, efter att ha bekräftat sedering, skjuvning av pälsen i pre-orbital och hårbotten området och använda depilatory grädde för att helt ta bort eventuella kvarvarande päls. Efter två minuter ta bort krämen och applicera 25 mikroliter av 1%konserveringsmedel-fri lidokain till lämpligt öga. Evert det övre ögonlocket och tillämpa milda mediala trycket på den bakre orbital fälgen tills protuberance märkning den palpebral delen av körteln ses.Använda fintandade tlys och en tuberkulinspruta utrustad med en 27 gauge nål, direkt penetrera körtel via en transconjunctival tillvägagångssätt föra nålen två millimeter i vävnaden och injicera 100 mikroliter av en 500 mikrogram lösning av Concanavalin A eller Con A.Omedelbart efter injektionen, tillämpa mediala trycket på globen för att orsaka omloppsbanor överlägsen lacrimal körtel att sticka ut från den bakre incisure. Med hjälp av slutna böjda tutentar, indrag området tills beniga öppningen i skallen känns och tillämpa ytterligare blygsamt tryck med tuttvingar att lämna en indrag i huden för att fungera som landmärke för nålen placering. Sätt in en tuberkulinspruta utrustad med en 27 gauge nål vinkelrätt mot huden över indrag varumärket ungefär en fjärdedel tum i snittet och omdirigera nålen posteriort och externt mot laterala canthus siktar för mittpunkten mellan injektionsstället och beniga orbital fälg.När nålens nav har uppnåtts injicerar du långsamt 0,2 milliliter av en 1 000 mikrogram lösning av Con A.For ILG-injektion, visa djuret från sidan för att lokalisera framträdandet av ILG längs den nedre främre delen av omloppsbanan. Använd en kirurgisk märkning penna för att dra en vertikal linje på huden där den ytliga delen av ILG körtel övergångar från sin ytliga viloplats på zygomatic ben till dess mer mediala plats i omloppsbana. Sopa en vertikalt höll ultraljud sond över linjen på huden för att identifiera slutet av zygomatic ben.Den ILG övergången sker där bilden av körteln ändras från en avgränsad hyperechoic linje till en utan en igenkännlig mediala gränsen. Handstyckets relativa position till den linje som dras på huden när denna förändring observeras kommer att vara injektionsstället. Att placera Con A i en körtel vid en punkt bara mediala till zygomatic arch ben, ställa in önskad injektionsdjup som djupet av zygomatic ben hyperechoic signal plus en millimeter minus den kända längden på nålen.Stick in nålen ca 12 millimeter i körteln vid injektionsstället innan den långsamt drar sig tillbaka tills längden på den exponerade nålen utanför kroppen är lika med den beräknade skillnaden. Injicera sedan 0,2 milliliter av en 1, 000 mikrogram Con A-lösning och bekräfta framgången med injektionen med ultraljud. ILG bör uppvisa ett karakteristiskt hyperechoic utrymme.Con A injektioner framkalla en stark inflammatoriska svar i lacrimal körtel kännetecknas av en tät lymfatisk infiltrate som åtföljs av en minskad tårproduktion. Tear lactoferrin nivåer undertrycks vilket resulterar i en komprometterad hornhinnans och konjunktiva epitel och en ökad ros bengal färgning. Injektionen av de tre orbital LG vävnader producerar en konsekvent och enhetlig torra ögon sjukdom tillstånd.En enda uppsättning Con A injektioner producerar torra ögon sjukdom som varar ungefär en vecka med alla de kliniska parametrarna normalisera av dag 10. Sekventiella Con A injektioner ungefär en veckas mellanrum förlänga varaktigheten av torr ögonsjukdom därefter. Efter ungefär fem uppsättningar injektioner blir torrögats sjukdomstillståndet ofta permanent utan behov av ytterligare injektioner.Optimalt lokalisera de lacrimal körtel strukturer är viktigast. Förtrogenhet med kranial anatomi och uppmärksamhet på fina detaljer inklusive avlägsnande av päls tillsammans med skicklighet med hjälp av ultraljud alla förbättra resultaten. Eftersom denna enkla teknik kräver användning av vassa föremål, bör undersökningen vidta lämpliga försiktighetsåtgärder för att förhindra nålsticksskador.

Research

JoVE Journal

Medicine

Experimental Glaucoma Induced by Ocular Injection of Magnetic Microspheres

Experimentell Glaukom inducerad genom okulär Injektion av magnetiska mikrosfärer

Progress in understanding the pathophysiology, and providing novel treatments for glaucoma is dependent on good animal models of the disease. We present ...

Scleral Cross-linking Using Riboflavin and Ultraviolet-A Radiation for Prevention of Axial Myopia in a Rabbit Model

Skleral Tvärbindning Använda Riboflavin och ultraviolett-strålning för förebyggande av Axial närsynthet i en kaninmodell

Myopic individuals, especially those with severe myopia, are at higher-than-normal risk of cataract, glaucoma, retinal detachment and chorioretinal ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

Punktering-inducerad Iris kärlnybildning som en musmodell av Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Establishment of a Severe Dry Eye Model Using Complete Dacryoadenectomy in Rabbits

Fastställande av en svår torr ögon modell med fullständig Dacryoadenektomi hos kaniner

Dry eye disease (DED) is a complex disease with multiple etiologies and variable symptoms, having ocular surface inflammation as its key pathophysiologic ...

A Murine Model of Ischemic Retinal Injury Induced by Transient Bilateral Common Carotid Artery Occlusion

En murin modell av skandinaviska retinal skada framkallas av transient bilaterala gemensamma halsartären ocklusion

Diverse vascular diseases such as diabetic retinopathy, occlusion of retinal veins or arteries and ocular ischemic syndrome can lead to retinal ischemia. ...

Establishment of a Mouse Severe Acute Pancreatitis Model using Retrograde Injection of Sodium Taurocholate into the Biliopancreatic Duct

Etablering av en mus svår akut pankreatit modell med retrograd injektion av natrium taurocholate i biliopancreatic duct

The prevalence of acute pancreatitis (AP), especially severe acute pancreatitis (SAP), is increasing in younger age groups annually. However, there is a ...

Application of Optical Coherence Tomography to a Mouse Model of Retinopathy

Tillämpning av optisk koherenstomografi på en musmodell av retinopati

Optical coherence tomography (OCT) offers a noninvasive method for the diagnosis of retinopathy. The OCT machine can capture retinal crosssectional images ...

Comparing Objective Conjunctival Hyperemia Grading and the Ocular Surface Disease Index Score in Dry Eye Syndrome During COVID-19

Jämförelse av objektiv konjunktivalhyperemigradering och okulär ytsjukdomsindexpoäng vid torra ögonsyndrom under COVID-19

The incidence of dry eye syndrome (DES) has increased due to wearing masks, utilizing digital devices, and working remotely during the pandemic. A survey ...

A Rabbit Aortic Valve Stenosis Model Induced by Direct Balloon Injury

En modell för kaninaortastelaffstenos inducerad av direkt ballongskada

Animal models are emerging as an important tool to understand the pathologic mechanisms underlying aortic valve stenosis (AVS) because of the lack of ...

Treating Knee Osteoarthritis with Tuina in a Rabbit Model

Tuina Intervention in Rabbit Model of Knee Osteoarthritis

Using a Rabbit Model to Explore the Efficacy of Tuina in Treating Knee Osteoarthritis (Video) | JoVE

Tuina intervention i kaninmodell av knäartros

Knee osteoarthritis (KOA) is mainly characterized by degenerative changes in the knee joint's cartilage and surrounding soft tissues. The efficacy of ...