Name: assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis
Uploaded: 2019-06-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Vi vil gerne takke den analytiske Imaging Facility (AIF) i Albert Einstein College of Medicine for Imaging support. Dette arbejde blev støttet af tilskud fra NIC (P30CA013330, CA150344, CA 100324 og CA216248), SIG 1S10OD019961-01, Gruss-Lipper Biophotonics Center og dets integrerede billedbehandlings program, og Montefiore 's Ruth L. Kirschstein T32 uddannelse tilskud af kirurger til studiet af tumor mikromiljø (CA200561).

GSK co-skrev manuskriptet, udførte Imaging for figur 1c og 3b, udviklet fast vævsanalyse protokol, og analyseret og fortolket alle data; JMP co-skrev manuskriptet, og udførte kirurgi og intravital Imaging for figur 1b, 2C og 3A; LB &AMP; AC udført operationen og intravital Imaging for figur 2b; RJ udførte operationen og intravital billeddannelse for figur 2a; JSC co-skrev manuskriptet og analyserede og fortolkede alle data; MHO co-skrev manuskriptet og analyserede og fortolkede alle data; og de udførte kirurgi og intravital Imaging for figur 2D, co-skrev manuskriptet, udviklede fast vævsanalyse og intravital Imaging protokoller, og analyseret og fortolket alle data.

Alle forsøg med levende dyr skal gennemføres i overensstemmelse med retningslinjer og bestemmelser for dyre brug og-pleje. De procedurer, der er beskrevet i denne undersøgelse, blev udført i overensstemmelse med de nationale institutter for sundhedsbestemmelser om pleje og anvendelse af forsøgsdyr og med godkendelse af Albert Einstein College of Medicine Animal Care og use Udvalg (IACUC).
1. evaluering af "sprængning permeabilitet" ved hjælp af levende dyr billeddannelse
<ol><li><stro...

Her skitserer vi to protokoller, der kan anvendes til at visualisere og kvantificere en bestemt type vaskulær permeabilitet, som er til stede ved TMEM døråbninger og er forbundet med afbrydelse af vaskulære stramme og klæber kryds. Denne type vaskulær permeabilitet er forbigående og styres af treparts TMEM-celle komplekset, som forklaret ovenfor5. Evnen til at identificere og kvantificere TMEM-associeret vaskulær permeabilitet er afgørende for vurderingen af en Pro-metastatisk cancer cell...

Nylige fremskridt i vores forståelse af kræft metastaser har afsløret, at epitelial-til-mesenchymal overgang (EMT) og induktion af en migrerende/invasiv cancer celle delpopulation er ikke i sig selv tilstrækkelig til hæmatogen udbredelse 1. faktisk var det tidligere antaget, at metastadimensionerende kræftceller intravasat gennem hele kræft-associeret endotelet som tumor neovaskulatur er ofte karakteriseret ved lav pericyte dækning, og som sådan, er meget permeabel og ustabil2,3,4. Selv om meget suggestive af defekte funktioner inden for tumoren, vaskulære modifikationer under carcinogenese ikke giver beviser i det hele, at tumorceller kan trænge ind blodkar let og i en ukontrolleret måde. Indsigter fra intravital Imaging (IVI) undersøgelser, hvor tumorceller fluorescently-Tagged og Vaskulaturen er mærket via intravenøs injektion af lysstofrør (såsom dextran eller kvante prikker), viser, at, mens tumor skibe er ensartet gennemtrængelig til lav molekylvægt dextrans (fx 70 KD), høj molekylvægt dextrans (155 KD) og tumorceller kan krydse endotelet kun på specialiserede steder af intravasation, som fortrinsvis er placeret på vaskulære gren punkt5, 6 , 7. immunohistokemiske (IHC) analyser ved hjælp af dyremodeller og humant patient-afledt materiale har vist, at disse steder er "døråbninger", der specialiserer sig i at regulere vaskulær permeabilitet, lokalt og transitivt, hvilket giver et kort vindue af mulighed for migrerende/invasive kræftceller til at komme ind i omløb. Disse døråbninger kaldes "tumor mikromiljø af metastase" eller "tmem", og helt forventeligt, deres tæthed korrelerer med en øget risiko for at udvikle metastatisk sygdom hos brystkræftpatienter8,9, 10.
Hver tmem døråbning består af tre forskellige typer af celler: en perivaskulær makrofag, en tumor celle over-udtrykker actin-regulatoriske protein pattedyr aktiveret (Mena), og en endotel celle, alle i direkte fysisk kontakt med hinanden1, 5,9,10,11,12,13. Den vigtigste begivenhed for funktionen af tmem som en intravasation døråbning er den lokaliserede frigivelse af vaskulær endotel vækstfaktor (VEGF) på det underliggende fartøj af perivaskulære makrofag14. VEGF kan forstyrre Homotypiske vejkryds mellem endotheliale celler15,16,17,18,19, et fænomen, der resulterer i forbigående vaskulær lækage, også kendt som "sprængning" permeabilitet som beskrevet i IVI undersøgelser 5. Det er påvist, at tmem-makrofager udtrykker tyrosinkinasereceptoren TIE2, som er nødvendig for VEGF-medieret tmem-funktion og homing af disse makrofager til den perivaskulære niche5,20,21 , 22. ud over at regulere kræftcellernes udbredelse og metastase har TIE2+ makrofager vist sig at være centrale regulatorer af tumor angiogenese21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31. Som sådan udgør TIE2+ makrofager en kritisk bestanddel af Tumorens mikromiljø og den vigtigste regulator af den metastatiske kaskade.
For bedre at konceptualisere TMEM-medieret vaskulær permeabilitet (dvs. "sprængning"), er det meget vigtigt at skelne det fra andre former for vaskulær permeabilitet, der ikke er forbundet med opløsningen af endotel celle-celle knudepunkter. I en intakt endotelet (en, hvis stramme og klæber kryds ikke forstyrres), er der tre hovedtyper af vaskulær permeabilitet: (a) pinocytose, som kan, eller ikke kan, kobles til transcytose af det indtagne materiale; b) transport af materiale gennem endotel fenestrae og (c) transport af materiale gennem paracellulær pathway, som er reguleret af endotel stramme kryds15,16,17,18,19,32 , 33 , 34. selv om dereguleret i mange tumorer, de førnævnte former for vaskulær permeabilitet er blevet beskrevet for det meste i forbindelse med normal vævs fysiologi og homøostase, hvis ekstremer er væv med enten begrænset permeabilitet ( f. eks. blod-hjerne-barriere, blod-testis-barriere) eller rigelig permeabilitet (f. eks. fenestreret kapillærer i nyre-glomerulære apparater)34,35,36,37.
Ved hjælp af multiphoton intravital Imaging og multiplexed immunofluorescens mikroskopi, vi er i stand til at skelne mellem TMEM-medieret vaskulære permeabilitet ("sprængning") og andre former for vaskulær permeabilitet i brysttumorer. For at opnå dette, udfører vi en enkelt intravenøs injektion af en høj molekylvægt, fluorescently-mærket sonde i mus. Spontane sprængning begivenheder kan derefter fanges ved hjælp af intravital Imaging i levende mus; Alternativt kan ekstravasation af sonden kvantificeres ved samlokaliserings undersøgelser med blodvaskulaturen (f. eks. CD31+ eller Endomucin+) og tmem-døråbninger ved hjælp af immunofluorescens mikroskopi. De protokoller, der præsenteres her, beskriver begge disse teknikker, som kan anvendes enten uafhængigt eller sammen med hinanden.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:681px;" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Anti-rabbit IgG (Alexa 488)</td>
			<td style="width:224px;">Life Technologies Corporation</td>
			<td style="width:155px;">A-11034</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-rat IgG (Alexa 647)</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>A-21247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1600-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Citrate</td>
			<td>Eng Scientific Inc</td>
			<td>9770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cover Glass Slips</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72296-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate Adhesive</td>
			<td>Henkel Adhesive</td>
			<td>1647358</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DAPI</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran-Tetramethyl-Rhodamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endomucin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-65495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Enrofloxacin</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>84753076 v-06/2015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F2442</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fish Skin Gelatin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>G7765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insulin Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isofluorane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CB40234</td>
			<td>Artificial extracellular matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle (30 G)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Tubing</td>
			<td>Scientific Commodities Inc</td>
			<td>BB31695-PE/1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pulse Oximeter</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>MouseOx</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quantum Dots</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>Q21561MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber</td>
			<td>McMaster Carr</td>
			<td>1310N14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TMR (primary antibody)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween-20</td>
			<td>MP Biologicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>184835</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis

Den mest almindeligt årsag til kræft relateret dødelighed er metastase, en proces, der kræver udbredelse af kræftceller fra den primære tumor til sekundære steder. For nylig konstaterede vi, at kræft celle udbredelse i primær brystkræft og på metastatiske steder i lungerne kun sker ved døråbninger kaldet tumor mikromiljø af metastase (TMEM). TMEM dørnummer er prognostisk for fjern recidiv af metastatisk sygdom hos brystkræftpatienter. TMEM døråbninger er sammensat af en cancer celle, som over-udtrykker actin Regulatory protein Mena i direkte kontakt med en perivaskulær, proangiogen makrofag, som udtrykker høje niveauer af TIE2 og VEGF, hvor begge af disse celler er tæt bundet til en blod beholderen endotel celle. Kræftceller kan intravasere gennem tmem døråbninger på grund af forbigående vaskulær permeabilitet orkestrieret af den fælles aktivitet af tmem-associerede makrofag og den tmem-associerede Mena-udtrykker kræft celle. I dette manuskript beskriver vi to metoder til vurdering af TMEM-medieret forbigående vaskulær permeabilitet: intravital billeddannelse og fast vævs immunofluorescens. Selv om begge metoder har deres fordele og ulemper, kan kombinationen af de to give de mest komplette analyser af TMEM-medieret vaskulær permeabilitet samt mikromiljømæssige forudsætninger for TMEM funktion. Da den metastatiske proces i brystkræft, og eventuelt andre former for kræft, involverer kræft celle udbredelse via TMEM døråbninger, er det vigtigt at anvende veletablerede metoder til analyse af TMEM døråbning aktivitet. De to metoder, der beskrives her, giver en omfattende tilgang til analysen af TMEM-dørens aktivitet, enten i naive eller farmakologisk behandlede dyr, hvilket er af afgørende betydning for prækliniske forsøg med agenser, der forebygger kræft celle formidling via TMEM.

De eksperimentelle procedurer, der er beskrevet i denne protokol artikel, opsummeres kort og illustreres i figur 1A-C.
For at måle TMEM-medieret vaskulær permeabilitet ("sprængning aktivitet") og for at reducere eksperimentel støj fra andre former for vaskulær permeabilitet (dvs. transcellulære og paracellulære, som forklaret i indledningen), vi udførte intravenøs (i.v.) injektion af sonder med høj molekylvægt, såsom 155 kDa dextran, k...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and Fixed Tissue Analysis

Vurdering tumor mikromiljø af metastase døråbning-medieret vaskulær permeabilitet forbundet med kræft celle udbredelse ved hjælp af Intravital Imaging og fast vævsanalyse

Vi beskriver to metoder til vurdering af forbigående vaskulær permeabilitet forbundet med tumor mikromiljø af metastase (TMEM) døråbning funktion og cancer celle intravasation ved hjælp af intravenøs injektion af høj molekylvægt (155 kDa) dextran i mus. Metoderne omfatter intravital billeddannelse i levende dyr og fast vævsanalyse ved hjælp af immunofluorescens.

The most common cause of cancer related mortality is metastasis, a process that requires dissemination of cancer cells from the primary tumor to secondary ...

Disse komplementære teknikker evaluere og måle permeabilitet af tumor vaskulatur ved hjælp af høj molekylær vægt Dextran. Den faste væv protokol tilbyder større tumor dækning, er høj gennemløb, og kræver ikke multiphoton billeddannelse udstyr. På den anden side, den intravital imaging protokol tilbyder real-time oplysninger om kinetik, funktion, og dynamisk samspil af cellerne i tumor mikromiljø af metastase eller TMEM.Så de protokoller, der præsenteres her, muliggør direkte måling af TMEM-afhængig vaskulær gennemtrængelighed, som i høj grad korrelerer med kræftcelleformidling, derfor kan disse protokoller bruges til at vurdere tumorens metastatiske potentiale. At generere stykker af tumorvæv egnet til transplantation, begynde med dødshjælp af tumor-bærende mus som beskrevet i tekstprotokollen. Placer en petriskål med DMEM/F12 cellekulturmedium på is i røghætten.Bring musen til røghætten og desinfikere musens mave med 70% ethylalkohol. Brug sterile handsker og kirurgiske værktøjer, fjerne tumorer og placere dem i petriskålen. Skær tumoren i små stykker, kassere eventuelle nekrotiske portioner, mens de er i petriskålen.At transplantere tumor stykker i modtageren værter, bedøve mus, der er blevet rejst med gensplejset, fluorescerende mærket makrofager som beskrevet i tekstprotokollen. Reducer anæstesi til ca. 3% isofluorane og anvende oftalmologiske salve til øjnene af musen for at forhindre tørring. Fjern hår fra over den fjerde mælkekirtlen af musen.Efter rengøring af huden med antiseptisk, bruge steriliserede instrumenter til at gøre et lille snit cirka to til tre millimeter bare ringere end den fjerde brystvorte. Dissekere indtil mammary fedt pad er udsat. Tag en tumor stykke fra petriskålen og pels i kunstig ekstracellulær matrix.Transplant tumorer under den fjerde bryst fedt pad. Luk snittet ved hjælp af cyanoacrylat lim. Endelig tilsættes en milliliter enrofloxacin antibiotikum til dyrenes drikkevand.Bedøve musen og indsætte en hale vene kateter som beskrevet i tekstprotokollen. Lav en langsgående midterlinjen snit starter umiddelbart overlegen i forhold til kønsdelene og bære indsnittet op til niveauet for den overlegne aspekt af den fjerde mælkekirtlen. Bære indsnit tværgående til den overlegne aspekt af den fjerde mælkekirtlen.Det er afgørende at undgå at kompromittere blodforsyningen på dette punkt. Stabilisere huden flap ved at anbringe et lille stykke stiv gummi måle to med to centimeter til huden-side af flappen. Tumorerne bør være i midten af området stabiliseres af gummi.Påfør en lille film af cyanoacrylat på den ydre kant af den specialfremstillede billeddannelse vinduesramme. Nu anvende en lille dråbe PBS til midten af dækglasset. Undgå kontakt mellem cyanoacrylatet på vinduesrammen og PBS på glasset for at undgå for tidlig polymerisering af cyanoacrylatet.Tør det omgivende flapvæv med en laboratorieserviet. Anbringe den lille billeddannelse vindue til væv flap med tumor i midten af den klare blænde. Overfør det bedøvede muse- og haleårekateter til mikroskopstadiet.Vær yderst forsigtig for at sikre, at hale venekatetret ikke falder ud. På dette tidspunkt udføre langsigtede intravital billedbehandling som beskrevet i tekstprotokollen og i vores tidligere JoVE publikation. For højere gennemløb analyse og større tumor dækning, bruge immunfluorescens i fast væv til at vurdere TMEM-medieret vaskulær permeabilitet.For at udføre immunfluorescensfarvning skal du først forberede prøverne som beskrevet i tekstprotokollen og derefter udføre antigenhentning ved at opvarme sektionerne nedsænket i citrat tæt på kogepunktet i 20 minutter. Efter at prøverne er blevet afkølet til stuetemperatur i 15 til 20 minutter, vaskes prøverne i PBS tre gange i to minutter hver vask. Bloker i 60 til 90 minutter i blokerende buffer, derefter inkubere prøver med en blanding af primær rotte og hurtige antistoffer, som er rettet mod henholdsvis endomucin og tetramethylrhodamin.Efter inkubationen vaskes prøverne tre gange i PBST i to minutter hver. Inkuber prøver med en blanding af sekundære æselantistoffer mod Rat IgG og hurtig IgG, og vask derefter prøverne tre gange i PBST i to minutter hver. Udfør en rutinemæssig DAPI farvning og montere dias ved hjælp af en glycerol-fri hård montering medium.Opbevar prøverne på et mørkt sted, indtil de scannes. Du opnår optimale resultater ved at scanne diasene på en digital scanner med hele dias. Hvis du vil udføre billedanalyse, skal du tage 10 højeffektfelter pr. sag ved hjælp af software, der er egnet til digital patologi.Gem endomucin- og TMR-kanalerne separat som TIFF. Ved hjælp af ImageJ skal du uploade TIFF-filerne og konvertere dem til 8-bit billeder. Tærskel 8-bit billeder til niveauet for den negative kontrol og generere to binarized billeder, der viser endomucin og TMR masker.Vælg Fyld huller på endomucinmasken i værktøjerne Binær. Generér det tærskelerede Dextran-billede, og gem det som Dextran ROI. Også generere tærskelerede endomucin billede og gemme det som vaskulære ROI og generere den omvendte endomucin billede og gemme det som ekstravaskulær ROI.Næste generere intersected Extravascular ROI og Dextran ROI billede og gemme det som Extravascular Dextran ROI. Endelig gemme hele billedet som Tumor ROI. Divider ekstravaskulære Dextran ROI område ved Tumor ROI område og formere sig med 100 til at generere den procent område, at den ekstravaskulære Dextran dækker i hele tumoren.Gentag processen for 10 til 20 højeffektfelter pr. sag, og generer en gennemsnitlig ekstravaskulær Dextran for hvert enkelt tilfælde. Vist her er et billede af en sund, udvikle mælkekirtlen i en transgen dyr. Vaskulaturen er mærket af TMR Dextran i rød, mælkedukile epitel er mærket af fluorescerende protein dendra2 i grøn, og makrofager er mærket af en cyan fluorescerende protein.I modsætning hertil vises et transplanteret dendra2-mærket invasivt duktilt karcinom i et dyr med mærkede makrofager og kar. Sundt lungevæv blev visualiseret gennem et lungebilledvindue i en mus med mærket vaskulatur. Lungemetastaser er tydelige efter injektion af tumorceller i et transgent dyr med mærkede makrofager og vaskulatur.Vist her er stillbilleder fra en tid-lapsed intravital imaging film af høj molekylvægt Dextran-mærket neo-angiogene fartøjer inden for en transplanteret dendra2-mærket invasive karcinom af brystet. Den stiplede gule linje angiver omridset af det forbigående vaskulære lækageområde før, under og efter lækagehændelsen. En TMEM døråbning er fanget i levende billeddannelse.Multichannel immunofluorescens viser endomucin, høj molekylvægt Dextran, deres fusionerede billede sammen med DAPI, samt den tilsvarende tærskel blodkar og Extravascular Dextran masker. Den tilsvarende sekventielle del af TMEM immunhisemitri er også vist. Den vaskulære profil væk fra TMEM fremstår som en ikke-utæt vaskulær profil, mens den TMEM-tilknyttede vaskulære profil fremstår som en utæt vaskulær profil.Det er meget vigtigt at undgå at skære blodkarrene leverer tumoren under den kirurgiske eksponering af tumoren. Den metode, der er beskrevet her, kan kombineres med narkotikabehandling, samme som hæmmer TMEM-funktion, forhindrer vaskulær permeabilitet, eller endda normalisere tumor vaskulatur til at måle deres virkning og effektivitet. Med denne protokoller har vi tidligere vist, at kemoterapi øger vaskulær permeabilitet og kræftcelleformidling, og faktisk, at disse pro-metastatiske ændringer kan omgås ved samtidig administration af hæmmere af TMEM-funktion.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

Det<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginære Disc Tumor Model: Visualisering og Kvantificering af genekspression og tumorindtrængen Brug Genetic Mosaics

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Longitudinal Intravital Imaging of Brain Tumor Cell Behavior in Response to an Invasive Surgical Biopsy

Longitudinel Intravital Imaging af hjerne tumor celle adfærd som reaktion på en invasiv kirurgisk biopsi

Biopsies are standard of care for cancer treatment and are clinically beneficial as they allow solid tumor diagnosis, prognosis, and personalized ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Micromanipulation af cirkulerende tumor celler til downstream Molekylær analyse og metastatisk potentiel vurdering

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Analysis of Side Population in Solid Tumor Cell Lines

Analyse af sidepopulation i faste tumorcellelinjer

Cancer stem cells (CSCs) are an important cause of tumor growth, metastasis, and recurrence. Isolation and identification of CSCs are of great ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

Patologisk analyse af lungemetasase Efter Lateral Hale-Vene Injektion af tumorceller

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...

A Label-Free Segmentation Approach for Intravital Imaging of Mammary Tumor Microenvironment

En etiketfri segmenteringsmetode til intravital billeddannelse af brysttumormikromiljø

The ability to visualize complex and dynamic physiological interactions between numerous cell types and the extracellular matrix (ECM) within a live tumor ...

Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

Udvidelse af forståelsen af tumormikromiljøet ved hjælp af massespektrometribilleddannelse af formalinfaste og paraffinindlejrede vævsprøver

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...

Zebrafish Larvae as a Model to Evaluate Potential Radiosensitizers or Protectors

Zebrafisklarver som model til evaluering af potentielle radiosensibilisatorer eller beskyttere

Zebrafish are extensively used in several kinds of research because they are one of the easily maintained vertebrate models and exhibit several features ...

Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Multiparametrisk tumororganoid lægemiddelscreening ved hjælp af widefield levende cellebilleddannelse til bulk- og enkeltorganoidanalyse

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Multiplex Immunofluorescence and Spatial Image Analysis of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment (Video) | JoVE 

Multiplex immunofluorescens kombineret med rumlig billedanalyse til klinisk og biologisk vurdering af tumormikromiljøet

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending ...