Name: assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis
Uploaded: 2019-06-26T14:00:00
Description: Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Vi vil gjerne takke Analytical Imaging Facility (AIF) i Albert Einstein College of Medicine for Imaging støtte. Dette arbeidet ble støttet av tilskudd fra NCI (P30CA013330, CA150344, CA 100324 og CA216248), den SIG 1S10OD019961-01, den Gruss-Lipper Biofotonikk Center og integrert Imaging program, og Montefiore ' s Ruth L. Kirschstein T32 Training Grant av kirurger for studiet av tumor Mikromiljøet (CA200561).

GSK co-skrev manuskriptet, utført Imaging for figur 1C og 3b, utviklet fast vev analyse protokoll, og analysert og tolket alle data; Jmp co-skrev manuskriptet, og utførte kirurgi og intravital Imaging for figur 1B, 2C og 3a; LB &AMP; AC utførte kirurgi og intravital Imaging for figur 2b; RJ utførte operasjonen og intravital avbildning for figur 2a; JSC co-skrev manuskriptet og analysert og tolket alle data; MHO co-skrev manuskriptet og analysert og tolket alle data; og de utførte kirurgi og intravital Imaging for figur 2D, co-skrev manuskriptet, utviklet fast vev analyse og intravital Imaging protokoller, og analysert og tolket alle data.

Alle eksperimenter med levende dyr må gjennomføres i samsvar med dyre bruk og omsorg retningslinjer og forskrifter. Prosedyrene beskrevet i denne studien ble utført i samsvar med National Institutes of Health forskrifter om omsorg og bruk av forsøksdyr og med godkjennelse av Albert Einstein College of Medicine Animal Care og bruk Komiteen (IACUC).
1. evaluering av "sprengning permeabilitet" ved hjelp av levende dyr Imaging
<ol><li>Transplantasjon av syngeneic brystkreft svulster ...

Her skisserer vi to protokoller som kan brukes til å visualisere og kvantifisere en bestemt type vaskulær permeabilitet som er til stede ved TMEM døråpninger og er forbundet med avbrudd av vaskulær stramt og adherens veikryss. Denne type vaskulær permeabilitet er forbigående og kontrollert av tre parts TMEM celle kompleks, som forklart over5. Evnen til å identifisere og kvantifisere TMEM-assosiert vaskulær permeabilitet er avgjørende for vurderingen av en Pro-metastatisk kreftcelle mikro...

Nylige fremskritt i vår forståelse av kreft metastasering har avdekket at epitel-til-mesenchymal overgang (EMT) og induksjon av en trekk/invasiv kreftcelle pasientpopulasjonen er ikke, av seg selv, tilstrekkelig for hematogenous formidling 1. faktisk, det var tidligere antatt at metastasizing kreftceller intravasate gjennom helheten av kreft-assosiert endotelet som tumor neovasculature er ofte karakterisert ved lav pericyte dekning, og som sådan, er svært gjennomtrengelig og ustabil2,3,4. Selv om det er svært tankevekkende for defekte funksjoner i svulsten, gir ikke vaskulær modifikasjoner under kreft bevis per se at tumorceller kan trenge gjennom blodkar lett og i en ukontrollert måte. Innsikter fra intravital Imaging (IVI) studier, der tumorceller er fluorescensmerkete og blodkar er merket via intravenøs injeksjon av fluorescerende sonder (for eksempel dextran eller Quantum prikker), viser at, mens tumor fartøy er jevnt gjennomtrengelig for lav molekylvekt dextrans (f. eks 70 kD), høy molekylvekt dextrans (155 kD) og tumorceller kan krysse endotelet bare på spesialiserte områder av intravasation som er fortrinnsvis plassert på vaskulær gren punkt5, 6 andre priser , 7. IMMUNHISTOKJEMISKE (IHC) analyser ved hjelp av dyremodeller og menneskelig pasient-avledet materiale har vist at disse nettstedene er "døråpninger" som spesialiserer seg på å regulere vaskulær permeabilitet, lokalt og midlertidig, og gir et kort vindu av mulighet for trekk/invasive kreftceller å gå inn i sirkulasjon. Disse døråpninger kalles "tumor mikromiljøet av metastasering" eller "TMEM", og ganske ventet, deres tetthet samsvarer med en økt risiko for å utvikle metastatisk sykdom hos brystkreftpasienter8,9, 10i.
Hver TMEM døråpning består av tre forskjellige typer celler: en inflammasjon macrophage, en svulst celle over-uttrykker utgangen-regulerende protein pattedyr aktivert (Mena), og en endothelial celle, alt i direkte fysisk kontakt med hverandre1, 5,9,10,11,12,13. Nøkkelen begivenhet for funksjonen av TMEM idet en intravasation døren er det lokalisere løslate av vaskulær endothelial oppblomstringen faktoren (VEGF) onto det underliggende fartøy av det inflammasjon macrophage14. VEGF kan forstyrre homotypic veikryss mellom endothelial celler15,16,17,18,19, et fenomen som resulterer i forbigående vaskulær lekkasje, også kjent som "sprengning" permeabilitet som beskrevet i IVI studier 5. TMEM makrofager har vist å uttrykke tyrosin kinase reseptor TIE2, som er nødvendig for VEGF-mediert TMEM funksjon og homing av disse makrofager til inflammasjon nisje5,20,21 , 22. i tillegg til å regulere kreftcelle formidling og metastasering, TIE2+ makrofager har vist å være sentrale regulatorer av tumor angiogenese21,22,23, 24,25,26,27,28,29,30,31. Som sådan, TIE2+ makrofager representerer en kritisk bestanddel av tumor mikromiljøet og den viktigste regulator av metastatisk Cascade.
For å bedre conceptualize TMEM-mediert vaskulær permeabilitet (dvs. "sprengning"), er det svært viktig å skille det fra andre moduser av vaskulær permeabilitet som ikke er forbundet med oppløsning av endothelial celle-celle veikryss. I en intakt endotelet (en hvis stramt og adherens veikryss ikke forstyrres), er det tre hovedtyper av vaskulær permeabilitet: (a) pinocytosis, som kan, eller ikke kan, være koplet til transcytosis av svelget materiale; (b) transport av materiale gjennom endothelial fenestrae; og (c) transport av materiale gjennom paracellular veien, som er regulert av endothelial tette veikryss15,16,17,18,19,32 , 33 for alle , 34. selv om deregulerte i mange svulster, de nevnte moduser vaskulær permeabilitet har blitt beskrevet hovedsakelig i sammenheng med normal vev fysiologi og homeostase, det ekstreme som er vev med enten begrenset permeabilitet ( f. eks, blod-hjerne barriere, blod-testikkel barriere), eller rikelig permeabilitet (f. eks, fenestrated blodkar av nyre glomerulær apparat)34,35,36,37.
Ved hjelp av multiphoton intravital Imaging og multiplekset immunofluorescence mikroskopi, er vi i stand til å skille mellom TMEM-mediert vaskulær permeabilitet ("sprengning") og andre moduser av vaskulær permeabilitet i brystkreft svulster. For å oppnå dette, utfører vi en enkel intravenøs injeksjon av en høy molekylvekt, fluorescensmerkete sonde i mus. Spontane sprengning hendelser kan deretter fanges ved hjelp av intravital Imaging i levende mus; eller alternativt kan Ekstravasasjon av sonden bli kvantifisert av co-lokalisering studier med blod blodkar (f. eks CD31+ eller Endomucin+) og TMEM døråpninger ved hjelp av immunofluorescence mikroskopi. Protokollene som presenteres her beskriver begge disse teknikkene, som kan brukes enten uavhengig eller sammen med hverandre.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:681px;" width="682">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:239px;">Anti-rabbit IgG (Alexa 488)</td>
			<td style="width:224px;">Life Technologies Corporation</td>
			<td style="width:155px;">A-11034</td>
			<td style="width:64px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Anti-rat IgG (Alexa 647)</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>A-21247</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>BP1600-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Citrate</td>
			<td>Eng Scientific Inc</td>
			<td>9770</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cover Glass Slips</td>
			<td>Electron Microscopy Sciences</td>
			<td>72296-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Cyanoacrylate Adhesive</td>
			<td>Henkel Adhesive</td>
			<td>1647358</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DAPI</td>
			<td>Perkin Elmer</td>
			<td>FP1490</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Dextran-Tetramethyl-Rhodamine</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>T1287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">DMEM/F12</td>
			<td>Gibco</td>
			<td>11320-033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Endomucin (primary antibody)</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>sc-65495</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Enrofloxacin</td>
			<td>Bayer</td>
			<td>84753076 v-06/2015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td>Sigma Aldrich</td>
			<td>F2442</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Fish Skin Gelatin</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>G7765</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Insulin Syringe</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>309659</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Isofluorane</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>NDC 11695-6776-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Matrigel</td>
			<td>Corning</td>
			<td>CB40234</td>
			<td>Artificial extracellular matrix</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Needle (30 G)</td>
			<td>Becton Dickinson</td>
			<td>305128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Phosphate Buffered Saline</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>PBS</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Polyethylene Tubing</td>
			<td>Scientific Commodities Inc</td>
			<td>BB31695-PE/1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Pulse Oximeter</td>
			<td>Kent Scientific</td>
			<td>MouseOx</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Puralube Vet Ointment</td>
			<td>Dechra</td>
			<td>NDC 17033-211-38</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Quantum Dots</td>
			<td>Life Technologies Corporation</td>
			<td>Q21561MP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Rubber</td>
			<td>McMaster Carr</td>
			<td>1310N14</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">TMR (primary antibody)</td>
			<td>Invitrogen</td>
			<td>A6397</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Tween-20</td>
			<td>MP Biologicals</td>
			<td>TWEEN201</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Xylene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>184835</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

assessing tumor microenvironment of metastasis doorway-mediated vascular permeability associated with cancer cell dissemination using intravital imaging and fixed tissue analysis

Den vanligste årsaken til kreft relaterte dødelighet er metastasering, en prosess som krever formidling av kreftceller fra den primære svulst til sekundære områder. Nylig etablerte vi at kreftcelle formidling i primær brystkreft og metastatisk steder i lungene oppstår bare på døråpninger kalt tumor Mikromiljøet av metastasering (TMEM). TMEM dør åpningsnummer er Prognostisk for Fjern gjentakelse av metastatisk sykdom hos brystkreftpasienter. TMEM døråpninger er sammensatt av en kreftcelle som over-uttrykker utgangen regulatoriske proteinet Mena i direkte kontakt med en inflammasjon, proangiogenic macrophage som uttrykker høye nivåer av TIE2 og VEGF, hvor begge disse cellene er tett bundet til et blod fartøy endothelial celle. Kreftceller kan intravasate gjennom TMEM døråpninger på grunn av forbigående vaskulær permeabilitet orkestrert av felles aktivitet av TMEM-assosiert macrophage og TMEM-Associated Mena-uttrykker kreftcelle. I dette manuskriptet beskriver vi to metoder for vurdering av TMEM-mediert transient vaskulær permeabilitet: intravital Imaging og fast vev immunofluorescence. Selv om begge metodene har sine fordeler og ulemper, kombinere de to kan gi den mest komplette analyser av TMEM-mediert vaskulær permeabilitet og microenvironmental forutsetninger for TMEM funksjon. Siden metastatisk prosess i brystkreft, og muligens andre typer kreft, innebærer kreftcelle formidling via TMEM døråpninger, er det viktig å ansette godt etablerte metoder for analyse av TMEM døråpning aktivitet. De to metodene som er beskrevet her gir en helhetlig tilnærming til analyse av TMEM døråpning aktivitet, enten i naive eller farmakologisk behandlede dyr, som er av største betydning for pre-kliniske studier av agenter som hindrer kreftcelle formidling via TMEM.

Den eksperimentelle prosedyrer som er beskrevet i denne protokollen artikkelen er kort oppsummert og illustrert i figur 1A-C.
For å måle TMEM-mediert vaskulær permeabilitet ("sprengning aktivitet") og for å redusere eksperimentell støy fra andre moduser av vaskulær permeabilitet (dvs. transcellular og paracellular, som forklart i innledningen), vi utførte intravenøs (IV) injeksjon av høy molekylvekt sonder, slik som 155 kDa Dextran, som b...

Watch this Scientific Journal Video about Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and F

Assessing Tumor Microenvironment of Metastasis Doorway-Mediated Vascular Permeability Associated with Cancer Cell Dissemination using Intravital Imaging and Fixed Tissue Analysis

Vurdere tumor Mikromiljøet av metastasering døråpning-mediert vaskulær permeabilitet forbundet med kreft Cell formidling bruker Intravital Imaging og fast vev analyse

Vi beskriver to metoder for å vurdere forbigående vaskulær permeabilitet assosiert med tumor mikromiljøet av metastasering (TMEM) dør åpningsfunksjon og kreftcelle intravasation ved hjelp av intravenøs injeksjon av høy molekylvekt (155 kDa) dextran i mus. Metodene omfatter intravital avbildning i levende dyr og fast vevs analyse ved hjelp av immunofluorescence.

The most common cause of cancer related mortality is metastasis, a process that requires dissemination of cancer cells from the primary tumor to secondary ...

Disse komplementære teknikkene evaluerer og måler permeabiliteten av tumorvaskulatur ved hjelp av høymolekylær vekt Dextran. Fastvevsprotokollen gir større tumordekning, er høy gjennomstrømning, og krever ikke multiphoton bildeutstyr. På den annen side tilbyr den intravitale bildeprotokollen sanntidsinformasjon om kinetikk, funksjon og dynamisk samspill mellom cellene i tumormikromiljøet av metastase eller TMEM.Så protokollene som presenteres her muliggjør direkte måling av TMEM-avhengig vaskulær permeabilitet som sterkt korrelerer med kreftcelleformidling, derfor kan disse protokollene brukes til å vurdere det metastatiske potensialet til svulstene. For å generere biter av tumorvev egnet for transplantasjon, begynn med eutanasi av tumorbærende mus som beskrevet i tekstprotokollen. Legg en petriskål med DMEM/F12 cellekulturmedium på is i røykhetten.Ta musen til røykhetten og saner musens mage med 70% etylalkohol. Bruk sterile hansker og kirurgiske verktøy, fjern svulstene og legg dem i petriskålen. Skjær opp svulsten i små biter, kast noen nekrotiske deler mens de er i petriskålen.For å transplantere tumorbitene til mottakerverter, bedøve mus som har blitt oppdratt med genmodifiserte, fluorescerende merkede makrofager som beskrevet i tekstprotokollen. Reduser anestesi til ca 3% isofluorane og bruk oftalmisk salve på musens øyne for å forhindre tørking. Fjern hår fra over den fjerde brystkjertelen av musen.Etter rengjøring av huden med antiseptisk, bruk steriliserte instrumenter for å gjøre et lite snitt omtrent to til tre millimeter bare dårligere enn den fjerde brystvorten. Dissekere til brystfettputen er utsatt. Ta et svulststykke fra petriskålen og frakken i kunstig ekstracellulær matrise.Transplanter svulster under den fjerde brystfettputen. Lukk snittet ved hjelp av cyanoacrylate lim. Til slutt, tilsett en milliliter enrofloxacin antibiotika til dyrenes drikkevann.Bedøve musen og sett inn et halevenekateter som beskrevet i tekstprotokollen. Gjør et langsgående midtlinje snitt starter umiddelbart bedre enn kjønnsorganene og bære snittet opp til nivået av det overlegne aspektet av fjerde brystkjertel. Bær snittet tverrgående til det overlegne aspektet av den fjerde brystkjertelen.Det er viktig å unngå å gå på akkord med blodtilførselen på dette tidspunktet. Stabiliser hudklaffen ved å feste et lite stykke stiv gummi som måler to med to centimeter til hudsiden av klaffen. Svulstene skal være i midten av området som stabiliseres av gummien.Påfør en liten film av cyanoacrylate til den ytre kanten av den skreddersydde bildevindusrammen. Påfør nå en liten dråpe PBS til midten av dekkglasset. Unngå kontakt mellom cyanoacrylaten på vindusrammen og PBS på glasset for å unngå for tidlig polymerisering av cyanoacrylaten.Tørk det omkringliggende klaffvevet med en laboratorieserviett. Fest det lille bildevinduet til vevklaffen med svulsten i midten av den klare blenderåpningen. Overfør bedøvet mus og hale venekateter til mikroskopstadiet.Vær svært forsiktig for å sikre at halevenekateteret ikke faller ut. På dette punktet, utføre langsiktig intravital bildebehandling som beskrevet i tekstprotokollen og i vår tidligere JoVE-publikasjon. For høyere gjennomstrømningsanalyse og større tumordekning, bruk immunofluorescence i fast vev for å vurdere TMEM-mediert vaskulær permeabilitet.For å utføre immunofluorescence farging, først forberede prøvene som beskrevet i tekstprotokollen, og deretter utføre antigen gjenfinning ved å varme seksjonene nedsenket i citrate nær kokepunktet i 20 minutter. Etter å ha latt prøvene avkjøles til romtemperatur i 15 til 20 minutter, vask prøvene i PBS tre ganger i to minutter hver vask. Blokker i 60 til 90 minutter i blokkeringsbuffer, og inkuber deretter prøver med en blanding av primære rotte og raske antistoffer som retter seg mot henholdsvis endomucin og tetrametylrhodamin.Etter inkubasjon vask prøvene tre ganger i PBST i to minutter hver. Inkuber prøver med en blanding av sekundære esel antistoffer mot Rotte IgG og rask IgG, vask deretter prøvene tre ganger i PBST i to minutter hver. Utfør en rutinemessig DAPI-farging og monter lysbildene ved hjelp av et glyserolfritt hardt monteringsmedium.Oppbevar prøvene på et mørkt sted til du skanner. For optimale resultater, skann lysbildene på en digital hellysskanner. For å utføre bildeanalyse, ta 10 høyeffektsfelt per sak ved hjelp av programvare som er egnet for digital patologi.Lagre endomucin- og TMR-kanalene separat som TIFF. Bruk ImageJ til å laste opp TIFF-filene og konvertere dem til 8-biters bilder. Terskel 8-biters bildene til nivået på den negative kontrollen og generere to binariserte bilder som viser endomucin- og TMR-maskene.Velg Fyll hull på endomucinmasken fra Binærverktøy. Generer det terskelede Dextran-bildet og lagre det som Dextran ROI. Generer også det terskelede endomucinbildet og lagre det som vaskulær avkastning og generer det inverterte endomucin-bildet og lagre det som ekstravaskulær avkastning.Deretter genererer du den kryssede ekstravaskulære avkastningen og Dextran ROI-bildet og lagrer det som ekstravaskulær Dextran ROI. Endelig lagre hele bildet som Tumor ROI. Del det ekstravaskulære Dextran ROI-området ved Tumor ROI-området og multipliser med 100 for å generere prosentområdet som extravascular Dextran dekker i hele svulsten.Gjenta prosessen for 10 til 20 høyeffektsfelt per sak og generer en gjennomsnittlig ekstravaskulær Dextran for hvert tilfelle. Vist her er et bilde av en sunn, utviklende brystkjertel i et transgent dyr. Vaskulaturen er merket med TMR Dextran i rødt, mammary duktil epitel er merket av fluorescerende protein dendra2 i grønt, og makrofager er merket med en cyan fluorescerende protein.I motsetning er et transplantert dendra2-merket invasivt duktilt karsinom vist hos et dyr med merkede makrofager og kar. Sunt lungevev ble visualisert gjennom et lungebildevindu i en mus med merket vaskulatur. Lungemetastaser er tydelige etter injeksjon av tumorceller i et transgent dyr med merkede makrofager og vaskulatur.Vist her er stillbilder fra en tidsforløpt intravital bildefilm av høymolekylær vekt Dextran-merket neo-angiogene kar i en transplantert dendra2-merket invasiv karsinom i brystet. Den stiplede gule linjen betegner omrisset av det forbigående vaskulære lekkasjeområdet før, under og etter lekkasjehendelsen. En TMEM døråpning er fanget i live imaging.Flerkanals immunofluorescence viser endomucin, høymolekylær vekt Dextran, deres sammenslåtte bilde sammen med DAPI, samt tilsvarende tersklert blodkar og ekstravaskulære Dextran masker. Den tilsvarende sekvensielle delen av TMEM immunohistochemistry er også vist. Den vaskulære profilen bort fra TMEM vises som en ikke-lekk vaskulær profil, mens TMEM-assosiert vaskulær profil vises som en lekk vaskulær profil.Det er svært viktig å unngå å kutte blodårene som forsyner svulsten under kirurgisk eksponering av svulsten. Metodikken som er beskrevet her kan kombineres med medikamentbehandling, det samme som å hemme TMEM-funksjonen, forhindre vaskulær permeabilitet, eller til og med normalisere tumorvaskulatur for å måle deres innvirkning og effekt. Med disse protokollene har vi tidligere vist at kjemoterapi forbedrer vaskulær permeabilitet og kreftcelleformidling og faktisk at disse prometastatiske endringene kan omgås ved samtidig administrering av hemmere av TMEM-funksjon.

Research

JoVE Journal

Cancer Research

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

The Drosophila Imaginal Disc Tumor Model: Visualization and Quantification of Gene Expression and Tumor Invasiveness Using Genetic Mosaics

De<em&gt; Drosophila</em&gt; Imaginal Disc Tumor Model: Visualisering og Kvantifisering av genekspresjon og Tumor Invasivitet Bruke Genetic Mosaikk

Drosophila melanogaster has emerged as a powerful experimental system for functional and mechanistic studies of tumor development and progression in the ...

Longitudinal Intravital Imaging of Brain Tumor Cell Behavior in Response to an Invasive Surgical Biopsy

Langsgående Intravital Imaging av Brain tumor Cell atferd som svar på en invasiv kirurgisk biopsi

Biopsies are standard of care for cancer treatment and are clinically beneficial as they allow solid tumor diagnosis, prognosis, and personalized ...

Micromanipulation of Circulating Tumor Cells for Downstream Molecular Analysis and Metastatic Potential Assessment

Mikromanipulering av sirkulerende tumor celler for nedstrøms molekylær analyse og metastatisk potensiell vurdering

Blood-borne metastasis accounts for&#160;most cancer-related deaths and involves circulating tumor cells (CTCs) that are successful in establishing new ...

Analysis of Side Population in Solid Tumor Cell Lines

Analyse av sidepopulasjon i faste tumorcellelinjer

Cancer stem cells (CSCs) are an important cause of tumor growth, metastasis, and recurrence. Isolation and identification of CSCs are of great ...

Pathological Analysis of Lung Metastasis Following Lateral Tail-Vein Injection of Tumor Cells

Patologisk analyse av lungemetastase etter lateral hale-vene injeksjon av tumorceller

Metastasis, the primary cause of morbidity and mortality for most cancer patients, can be challenging to model preclinically in mice. Few spontaneous ...

A Label-Free Segmentation Approach for Intravital Imaging of Mammary Tumor Microenvironment

En etikettfri segmenteringstilnærming for intravital avbildning av mammary tumormikromiljø

The ability to visualize complex and dynamic physiological interactions between numerous cell types and the extracellular matrix (ECM) within a live tumor ...

Expanding the Comprehension of the Tumor Microenvironment using Mass Spectrometry Imaging of Formalin-Fixed and Paraffin-Embedded Tissue Samples

Utvide forståelsen av tumormikromiljøet ved hjelp av massespektrometriavbildning av formalinfikserte og parafin-innebygde vevsprøver

Advances in immune-based therapies have revolutionized cancer treatment and research. This has triggered growing demand for the characterization of the ...

Zebrafish Larvae as a Model to Evaluate Potential Radiosensitizers or Protectors

Sebrafisk larver som en modell for å evaluere potensielle radiosensibilisatorer eller beskyttere

Zebrafish are extensively used in several kinds of research because they are one of the easily maintained vertebrate models and exhibit several features ...

Multiparametric Tumor Organoid Drug Screening Using Widefield Live-Cell Imaging for Bulk and Single-Organoid Analysis

Multiparametrisk tumor organoid narkotika screening ved hjelp av Widefield Live-Cell Imaging for bulk og single-organoid analyse

Patient-derived tumor organoids (PDTOs) hold great promise for preclinical and translational research and predicting the patient therapy response from ex ...

Multiplex Immunofluorescence and Spatial Image Analysis of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment

Multiplex Immunofluorescence Combined with Spatial Image Analysis for the Clinical and Biological Assessment of the Tumor Microenvironment (Video) | JoVE 

Multiplex immunfluorescens kombinert med romlig bildeanalyse for klinisk og biologisk vurdering av tumormikromiljøet

The tumor microenvironment (TME) is composed of a plethora of different cell types, such as cytotoxic immune cells and immunomodulatory cells. Depending ...